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Inserto Ácido Úrico

El documento proporciona información sobre el método enzimático para determinar el ácido úrico en suero, plasma u orina. El ácido úrico es oxidado por la uricasa a alantoína y peróxido de hidrógeno. En presencia de peroxidasa y otros reactivos, se forma un compuesto rosado cuya intensidad es proporcional a la concentración de ácido úrico. El método permite cuantificar el ácido úrico en rangos clínicamente relevantes con buena precisión.

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Inserto Ácido Úrico

El documento proporciona información sobre el método enzimático para determinar el ácido úrico en suero, plasma u orina. El ácido úrico es oxidado por la uricasa a alantoína y peróxido de hidrógeno. En presencia de peroxidasa y otros reactivos, se forma un compuesto rosado cuya intensidad es proporcional a la concentración de ácido úrico. El método permite cuantificar el ácido úrico en rangos clínicamente relevantes con buena precisión.

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URIC ACID

cido rico
Uricasa -POD. Enzimtico colorimtrico
Determinacin cuantitativa de cido rico CLCULOS
IVD Suero o plasma
Conservar a 2-8C ( A ) Muestra - ( A ) Blanco
x 6 (Conc. Patrn) = mg/dL de cido rico en la muestra
PRINCIPIO DEL MTODO ( A ) Patrn - ( A ) Blanco
El cido rico es oxidado por la uricasa a alantona y perxido de Orina 24 h
hidrgeno (2H2O2) que en presencia de peroxidasa (POD), 4- ( A ) Muestra - ( A ) Blanco
x 6 x vol. (dL) orina/24h = mg/24 h de cido rico
aminofenazona (4-AF) y 2-4 Diclorofenol Sulfonato (DCPS) forma un ( A ) Patrn - ( A ) Blanco
compuesto rosceo:
Uricasa Factor de conversin: mg/dL x 59,5= mol/L.
cido rico + 2H2O + O2 Alantona + CO2 + 2H2O2
CONTROL DE CALIDAD
POD
2H2O2 + 4-AF + DCPS Quinonaimina + 4H2O Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados:
La intensidad de quinonaimina roja formada es proporcional a la SPINTROL H Normal y Patolgico (Ref. 1002120 y 1002210).
1,2
concentracin de cido rico presente en la muestra ensayada . Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, revisar
el instrumento, los reactivos y el calibrador.
SIGNIFICADO CLNICO Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer
El cido rico y sus sales son el producto final del metabolismo de las correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las
purinas. En una insuficiencia renal progresiva hay una retencin en tolerancias.
sangre de urea, creatinina y cido rico. 5
Niveles altos de cido rico son indicativos de patologa renal y VALORES DE REFERENCIA
generalmente se asocia con la gota .
1,5,6
Suero o plasma:
El diagnstico clnico debe realizarse teniendo en cuenta todos los Mujeres 2,5 - 6,8 mg/dL 149 405 mol/L
datos clnicos y de laboratorio. Hombres 3,6 - 7,7 mg/dL 214 458 mol/L
Orina: 250 - 750 mg/24 h 1,49 - 4,5 mmol/24 h
REACTIVOS
Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio
R1 Fosfatos pH 7,4 50 mmol/L establezca sus propios valores de referencia.
Tampn 2-4 Diclorofenol Sulfonato (DCPS) 4 mmol/L
CARACTERSTICAS DEL MTODO
Uricasa 60 U/L
Rango de medida: Desde el lmite de deteccin de 0,00 mg/dL hasta el
R2 Peroxidasa (POD) 660 U/L
lmite de linealidad de 40 mg/dL.
Enzimas Ascorbato oxidasa 200 U/L Si la concentracin es superior al lmite de linealidad, diluir la muestra 1/2
4 - Aminofenazona (4-AF) 1 mmol/L con CINa 9 g/L y multiplicar el resultado final por 2.
URIC ACID CAL Patrn primario acuoso de cido rico 6 mg/dL Precisin:
Intraserie (n=20) Interserie (n=20)
PREPARACIN Media (mg/dL) 4,74 10,55 4,73 10,50
Reactivo de trabajo (RT): Disolver ( ) el contenido de un vial de R 2 SD 0,02 0,03 0,13 0,29
Enzimas en un frasco de R 1 Tampn. Tapar y mezclar suavemente CV (%) 0,50 0,30 2,67 2,77
hasta disolver su contenido. Estabilidad: 1 mes en nevera (2-8C) o
10 das a temperatura ambiente. Sensibilidad analtica: 1 mg/dL = 0,02930 A.
Exactitud: Los reactivos SPINREACT (y) no muestran diferencias
CONSERVACIN Y ESTABILIDAD sistemticas significativas cuando se comparan con otros reactivos
Todos los componentes del kit son estables, hasta la fecha de comerciales (x).
caducidad indicada en la etiqueta, cuando se mantienen los frascos Los resultados obtenidos con 50 muestras fueron los siguientes:
bien cerrados a 2-8C, protegidos de la luz y se evita su 2
Coeficiente de correlacin (r) : 0,97137.
contaminacin. No usar reactivos fuera de la fecha indicada. Ecuacin de la recta de regresin: y=1,162x + 0,14156.
Indicadores de deterioro de los reactivos: Las caractersticas del mtodo pueden variar segn el analizador utilizado.
- Presencia de partculas y turbidez.
INTERFERENCIAS
- Absorbancia (A) del blanco a 520 nm 0,16.
No se han observado interferencias con bilirrubina hasta 170 mol/L,
MATERIAL ADICIONAL 2
hemoglobina hasta 130 mg/dL y cido ascrbico hasta 570 mol/L .
- Espectrofotmetro o analizador para lecturas a 520 nm. Se han descrito varias drogas y otras substancias que interfieren en la
- Cubetas de 1,0 cm de paso de luz. 3,4
determinacin del cido rico .
- Equipamiento habitual de laboratorio.
NOTAS
MUESTRAS 1. URIC ACID CAL: Debido a la naturaleza del producto, es aconsejable
1
- Suero o plasma : Estabilidad 3-5 das a 2-8C y 6 meses a 20C. tratarlo con sumo cuidado ya que se puede contaminar con facilidad.
1
- Orina (24 h) : Estabilidad 3 das a temperatura ambiente a pH > 8. 2. La calibracin con el Patrn acuoso puede dar lugar a errores
Diluir la muestra al 1/50 en agua destilada. Mezclar. Multiplicar el sistemticos en mtodos automticos. En este caso, se recomienda
resultado obtenido por 50 (factor de dilucin); Si la muestra es utilizar calibradores sricos.
turbia, calentarla a 60C 10 min para disolver los precipitados de 3. Usar puntas de pipeta desechables limpias para su dispensacin.
urato y cido rico. No refrigerar. 4. SPINREACT dispone de instrucciones detalladas para la aplicacin
PROCEDIMIENTO de este reactivo en distintos analizadores.
1. Condiciones del ensayo: BIBLIOGRAFA
Longitud de onda: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .520 nm (490-550) 1. Schultz A. Uric acid. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St Louis. Toronto.
Cubeta: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 cm paso de luz Princeton 1984; 1261-1266 and 418.
2. Fossati P et al. Clin Chem 1980;26:227-231.
Temperatura: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. 37C
- / 15-25C 3. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
2. Ajustar el espectrofotmetro a cero frente a agua destilada. 4. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
3. Pipetear en una cubeta (Nota 3): 5. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
6. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
Blanco Patrn Muestra
RT (mL) 1,0 1,0 1,0 PRESENTACIN
(Nota1,2,3)
Patrn (L) -- 25 -- Ref: 1001010 R1: 10 x 20 mL, R2:10 20 mL, CAL: 1 x 5 mL
Muestra (L) -- -- 25 Ref: 1001011 R1: 10 x 50 mL, R2:10 50 mL, CAL: 1 x 5 mL
Cont.
4. Mezclar e incubar 5 minutos a 37C 10 min. 15-25C. Ref: 1001012 R1: 4 x 125 mL, R2:4 125mL, CAL: 1 x 5 mL
5. Leer la absorbancia (A) del Patrn y la muestra, frente al Ref: 1001013 R1: 4 x 250 mL, R2:4 250mL, CAL: 1 x 5 mL
blanco de reactivo. El color es estable como mnimo 30 minutos.

BSIS01-E 04/02/16 SPINREACT, S.A./ [Link] Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN
Tel. +34 972 69 08 00 Fax +34 972 69 00 99. e-mail: spinreact@[Link]
URIC ACID

Uric acid
Uricase -POD. Enzymatic colorimetric

Quantitative determination of uric acid CALCULATIONS


IVD Serum or plasma
( A ) Sample - ( A ) Blank
Store at 2-8C x 6 (Standard conc.)= mg/dL uric acid in the sample
( A ) Standard - ( A ) Blank
PRINCIPLE OF THE METHOD
Uric acid is oxidized by uricase to allantoine and hydrogen peroxide Urine 24 h
(2H2O2), which under the influence of POD, 4aminophenazone (4- ( A ) Sample - ( A ) Blank
x 6 x vol. (dL) urine 24 h =mg/24 h uric acid
AP) and 2-4 Dichlorophenol sulfonate (DCPS) forms a red ( A ) Standard - ( A ) Blank
quinoneimine compound:
Uricase Conversion factor: mg/dL x 59,5= mol/L.
Uric acid + 2H2O + O2 Allantoine + CO2 + 2H2O2
QUALITY CONTROL
POD
2H2O2 + 4-AP + DCPS Quinoneimine+ 4H2O Control sera are recommended to monitor the performance of assay procedures:
The intensity of the red color formed is proportional to the uric acid SPINTROL H Normal and Pathologic (Ref. 1002120 and 1002210).
1,2
concentration in the sample . If control values are found outside the defined range, check the instrument,
reagents and calibrator for problems.
CLINICAL SIGNIFICANCE Each laboratory should establish its own Quality Control scheme and corrective
Uric acid and its salts are end products of the purine metabolism. actions if controls do not meet the acceptable tolerances.
With progressive renal insufficiency, there is retention in blood of 5
REFERENCE VALUES
urea, creatinine and uric acid.
Serum or plasma:
Elevate uric acid level may be indicative of renal insufficiency and is
1,5,6 Women 2,5 - 6,8 mg/dL 149 405 mol/L
commonly associated with gout .
Clinical diagnosis should not be made on a single test result; it should Men 3,6 - 7,7 mg/dL 214 458 mol/L
integrate clinical and other laboratory data. Urine: 250 - 750 mg/24 h 1,49 - 4,5 mmol/24 h
These values are for orientation purpose; each laboratory should establish
REAGENTS its own reference range.
R1 Phosphate pH 7,4 50 mmol/L
Buffer 2-4 Dichlorophenol sulfonate (DCPS) 4 mmol/L PERFORMANCE CHARACTERISTICS
Measuring range: From detection limit of 0,00 mg/dL to linearity limit of 40
Uricase 60 U/L
mg/dL.
R2 Peroxidase (POD) 660 U/L
If the results obtained were greater than linearity limit, dilute the sample 1/2
Enzymes Ascorbate oxidase 200 U/L
with NaCI 9 g/L and multiply the result by 2.
4 Aminophenazone (4-AP) 1 mmol/L Precision:
URIC ACID CAL Uric acid aqueous primary standard 6 mg/dL
Intra-assay (n=20) Inter-assay (n=20)
Mean (mg/dL) 4,74 10,55 4,73 10,50
PREPARATION
SD 0,02 0,03 0,13 0,29
Working reagent (WR): Dissolve ( ) the contents of one vial R 2
CV (%) 0,50 0,30 2,67 2,77
Enzymes in one bottle R 1 Buffer. Cap and mix gently to dissolve
contents. (WR) is stable after reconstitution 1 month at 2-8C or 10 Sensitivity: 1 mg/dL = 0,02930 A.
days at room temperature. Accuracy: Results obtained using SPINREACT reagents (y) did not show
systematic differences when compared with other commercial reagents (x).
STORAGE AND STABILITY The results obtained using 50 samples were the following:
2
All the components of the kit are stable until the expiration date on the Correlation coefficient (r) : 0,97137.
label when stored tightly closed at 2-8C, protected from light and Regression equation: y=1,162x + 0,14156.
contaminations prevented during their use. The results of the performance characteristics depend on the analyzer used.
Do not use reagents over the expiration date.
Signs of reagent deterioration: INTERFERENCES
- Presence of particles and turbidity. No interferences were observed to bilirubin up to 170 mol/L, hemoglobin
2
- Blank absorbance (A) at 520 nm 0,16. up to 130 mg/dL and ascorbic acid up to 570 mol/L .
A list of drugs and other interfering substances with uric acid determination
ADDITIONAL EQUIPMENT has been reported by Young et. al .
3,4

- Spectrophotometer or colorimeter measuring at 520 nm.


- Matched cuvettes 1,0 cm light path. NOTES
- General laboratory equipment. 1. URIC ACID CAL: Proceed carefully with this product because due
SAMPLES its nature it can get contamined easily.
1
- Serum or plasma : Stability 3-5 days at 2-8C or 6 months at 20C. 2. Calibration with the aqueous standard may cause a systematic error in
1
- Urine (24 h) : Stability 4 days at 15-25C, pH >8. Dilute sample 1/50 automatic procedures. In these cases, it is recommended to use a
in distilled water. Mix. Multiply results by 50 (dilution factor); serum Calibrator.
If urine is cloudy; warm the specimen to 60C for 10 min to dissolve 3. Use clean disposable pipette tips for its dispensation.
precipitated urates and uric acid. Do not refrigerate. 4. SPINREACT has instruction sheets for several automatic
analyzers. Instructions for many of them are available on request.
PROCEDURE
1. Assay conditions: BIBLIOGRAPHY
Wavelength: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 520 nm (490-550) 1. Schultz A. Uric acid. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St Louis.
Cuvette: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 cm light path Toronto. Princeton 1984; 1261-1266 and 418.
2. Fossati P et al. Clin Chem 1980;26:227-231.
Temperature: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37C / 15-25C 3. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
2. Adjust the instrument to zero with distilled water. 4. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
3. Pipette into a cuvette (Note 3): 5. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
Blank Standard Sample 6. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
WR (mL) 1,0 1,0 1,0
(Note 1,2,3) PACKAGING
Standard (L) -- 25 --
Ref: 1001010 R1: 10 x 20 mL, R2:10 20 mL, CAL: 1 x 5 mL
Sample (L) -- -- 25 Ref: 1001011 R1: 10 x 50 mL, R2:10 50 mL, CAL: 1 x 5 mL
Cont.
4. Mix and incubate for 5 min at 37C or 10 min at 15-25C. Ref: 1001012 R1: 4 x 125 mL, R2:4 125mL, CAL: 1 x 5 mL
5. Read the absorbance (A) of the samples and Standard, against Ref: 1001013 R1: 4 x 250 mL, R2:4 250mL, CAL: 1 x 5 mL
the blank. The colour is stable for at least 30 minutes.

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URIC ACID

Acide Urique
Uricase -POD. Enzymatique colorimtrique
Dtermination quantitative dacide urique CALCULS
IVD Srum ou plasma
Conserver 2-8C (A ) chantillon - (A )Blanc
x 6 (Conc. talon) = mg/dL dacide urique dans lchantillon
PRINCIPE DE LA METHODE (A ) talon - (A )Blanc
Lacide urique est oxyd par luricase lallantone et le peroxyde Urine 24 h
dhydrogne (2H2O2) qui, en prsence de la peroxydase (POD), 4-
(A ) chantillon - (A )Blanc
aminophnazone (4-AF) et du 2-4 Diclorophnol sulphonate (DCPS) forme x 6 x vol. (dL) urine /24h = mg/24 h dacide urique
un compos rosac: (A ) talon - (A )Blanc
Uricasa Facteur de conversion: mg/dL x 59,5= mol/L.
Acide urique + 2H2O + O2 Allantone + CO2 + 2H2O2
POD CONTROLE DE QUALITE
2H2O2 + 4-AF + DCPS Quinonaimine + 4H2O
Il est conseill danalyser conjointement les chantillons de srum dont les
Lintensit de quinonaimine rouge forme est proportionnelle la valeurs ont t contrles: SPINTROL H Normal et pathologique (Rf. 1002120
concentration dacide urique prsente dans lchantillon test1, 2 . et 1002210).
SIGNIFICATION CLINIQUE Si les valeurs se trouvent en dehors des valeurs tolres, analyser linstrument,
Lacide urique et ses sels sont le produit final du mtabolisme des purines. les ractifs et le calibreur.
En cas dinsuffisance rnale progressive, il existe une rtention de sang Chaque laboratoire doit disposer de son propre contrle de qualit et dterminer
dans lure, de cratinine et dacide urique. les mesures correctives mettre en place dans le cas o les vrifications ne
Des niveaux levs dacide urique indiques une pathologie rnale et sont correspondraient pas aux attentes.
souvent accompagns de fuites urinaires 1, 5,6. VALEURS DE REFERENCE5
Le diagnostic clinique doit tre ralis en tenant compte de toutes les Srum ou plasma:
donnes cliniques et des donnes de laboratoire. Femmes 2,5 - 6,8 mg/dL 149 405 mol/L
Hommes 3,6 - 7,7 mg/dL 214 458 mol/L
REACTIFS Urine: 250 - 750 mg/24 h 1,49 - 4,5 mmol/24 h
R1 Phosphates pH 7,4 50 mmol/L Ces valeurs sont donnes titre dinformation. Il est conseill chaque
Tampon 2-4 Diclorophnol sulphonate (DCPS) 4 mmol/L laboratoire de dfinir ses propres valeurs de rfrence.
Uricase 60 U/L CARACTERISTIQUES DE LA METHODE
R2 Peroxidase (POD) 660 U/L Gamme de mesures: Depuis la limite de dtection de 0,00 mg/dL jusqu la
Enzymes Ascorbate oxydase 200 U/L limite de linarit de 40 mg/dL.
4 - Aminophnazone (4-AF) 1 mmol/L Si la concentration de lchantillon est suprieure la limite de linarit, diluer
1/2 avec du CINa 9 g/L et multiplier le rsultat final par 2.
ACIDE URIQUE CAL Patron primaire de dtection dacide urique 6 mg/dL Prcision:
Intra-srie (n=20) Inter-srie (n=20)
PREPARATION Moyenne (mg/dL) 4,74 10,55 4,73 10,50
Ractif de travail (RT): Dissoudre ( ) le contenu dune capsule SD 0,02 0,03 0,13 0,29
denzymes de R 2 dans un peu de tampon R 1. Fermer et mlanger CV (%) 0,50 0,30 2,67 2,77
doucement jusqu dissoudre le contenu. Stabilit: 1 mois au rfrigrateur Sensibilit analytique: 1 mg/dL = 0,02930 (A).
(2-8C) ou 10 jours temprature ambiante. Exactitude: Les ractifs SPINREACT (y) ne montrent pas de diffrences
CONSERVATION ET STABILITE systmatiques significatives lorsquon les compare dautres ractifs
Tous les composants du kit sont stables jusqu la date de premption commerciaux (x).
indique sur le flacon, et sils sont maintenus hermtiquement ferms Les rsultats obtenus avec 50 chantillons ont t les suivants:
2-8C, labri de la lumire et des sources de contamination. Ne pas Coefficient de corrlation (r)2: 0,97137.
utiliser les ractifs en dehors de la date indique. Equation de la Coubre de rgression: y=1,162x +0,14156.
Indices de dtrioration des ractifs: Les caractristiques de la mthode peuvent varier suivant lanalyseur employ.
- Prsence de particules et turbidit. INTERFERENCES
- Absorbation (A) du blanc 520 nm 0,16.
Aucune interfrence na t constat avec la bilirubine jusqu 170 mol/L, avec
MATERIEL SUPPLEMENTAIRE lhmoglobine jusqu 130 mg/dL, ni avec l'acide ascorbique jusqu 570 mol/L2.
- Spectrophotomtre ou analyseur pour les lectures 520 nm. Diffrentes drogues ont t dcrites ainsi que dautres substances qui interfrent
- Cuvettes de 1,0 cm dclairage. dans la dtermination de lacide urique 3,4.
- Equipement classique de laboratoire.
REMARQUES
ECHANTILLONS [Link] ACID CAL: Etant donn la nature du produit, il est conseill de le
- Srum ou plasma1: Stabilit 3-5 jours 2-8C et 6 mois 20C. manipuler avec une grande prcaution. En effet, il peut tre contamin avec
- Urine (24 h)1: Stabilit 3 jours temprature ambiante pH > 8. Diluer facilit.
lchantillon dans 1/50 deau distill. Mlanger. Multiplier le rsultat 2. Le calibrage au moyen du patron de dtection peut donner lieu des erreurs
obtenu par 50 (facteur de dilution); si lchantillon est trouble, faites-le systmatiques lors de mthodes automatiques. Dans de tels cas, il est
rchauffer 60C pendant 10 min pour dissoudre les prcipits durate conseill dutiliser des calibrages sriques
et dacide urique. Ne pas placer au rfrigrateur. 3. Utiliser des embouts de pipettes jetables propres pour diffuser le produit.
4. SPINREACT dispose de consignes dtailles pour lapplication de ce
PROCEDURE ractif dans diffrents analyseurs.
1. Conditions de test:
Longueur dondes: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .520 nm (490-550) BIBLIOGRAPHIE
Cuvette: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 cm dclairage 1. Schultz A. Uric acid. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St Louis.
Temprature: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37C/15-25C Toronto. Princeton 1984; 1261-1266 and 418.
2. Rgler le spectrophotomtre sur zro en fonction de leau distille 2. Fossati P et al. Clin Chem 1980;26:227-231.
3. Pipetter dans une cuvette (Remarque 3) : 3. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
4. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
Blanc talon Echantillon 5. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
RT (mL) 1,0 1,0 1,0 6. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
talon
(Remarque1,2,3)
(L) -- 25 --
PRESENTATION
Echantillon (L) -- -- 25
Ref: 1001010 R1: 10 x 20 mL, R2:10 20 mL, CAL: 1 x 5 mL
4. Mlanger et incuber pendant 5 minutes 37C ou 10 minutes 15-
Ref: 1001011 R1: 10 x 50 mL, R2:10 50 mL, CAL: 1 x 5 mL
25C. Cont.
5. Lire labsorbation (a) du patron et lchantillon, en comparaison Ref: 1001012 R1: 4 x 125 mL, R2:4 125mL, CAL: 1 x 5 mL
avec le blanc du ractif. La couleur reste stable pendant au moins Ref: 1001013 R1: 4 x 250 mL, R2:4 250mL, CAL: 1 x 5 mL
30 minutes.

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URIC ACID

cido rico
Uricasa -POD. Enzimatico colorimtrico
Determinao quantitativa de cido rico
CLCULOS
IVD Soro ou plasma
Conservar a 2-8C (A ) Amostra - (A )Branco
x 6 (Conc. Padro) = mg/dL de cido rico na amostra
(A ) Padro - (A )Branco
PRINCPIO DO MTODO Urina 24 h
O cido rico oxidado pela uricase a alantona e perxido de hidrognio
(2H2O2) que, na presena de peroxidase (POD), 4-aminofenazona (4-AF) (A ) Amostra - (A )Branco
x 6 x vol. (dL) urina/24h = mg/24 h de cido rico
e 2-4 Diclorofenol Sulfonato (DCPS) forma um composto rosceo: (A ) Padro - (A )Branco
Uricase Factor de converso: mg/dL x 59,5= mol/L.
cido rico + 2H2O + O2 Alantona + CO2 + 2H2O2

2H2O2 + 4-AF + DCPS POD Quinonaimina + 4H2O CONTROLO DE QUALIDADE


conveniente analisar juntamente com as amostras, os soros controlo
A intensidade de quinonaimina avermelhada formada proporcional valorizados: SPINTROL H Normal e Patolgico (Ref. 1002120 e 1002210).
concentrao de cido rico presente na amostra testada 1,2. Se os valores determinados estiverem fora do intervalo de tolerncia, verificar o
equipamento, os reagentes e o calibrador.
SIGNIFICADO CLNICO Cada laboratrio deve dispor do seu prprio Controlo de Qualidade e
O cido rico e os seus sais so o produto final do metabolismo das estabelecer correces caso os controles no cumpram com as tolerncias.
purinas. Numa insuficincia renal progressiva, h uma reteno de ureia,
creatinina e cido rico, no sangue. VALORES DE REFERNCIA5
Niveis elevados de cido rico so indicativos de patologia renal que Soro ou plasma:
esto, geralmente associados a gota 1,5,6. Mulheres 2,5 - 6,8 mg/dL 149 405 mol/L
O diagnstico clnico deve realizar-se tendo em conta todos os dados Homens 3,6 - 7,7 mg/dL 214 458 mol/L
clnicos e de laboratorio.
Urina: 250 - 750 mg/24 h 1,49 - 4,5 mmol/24 h
REAGENTES Estes valores so orientativos. recomendvel que cada laboratrio estabelea
os seus prprios valores de referncia.
R1 Fosfatos pH 7,4 50 mmol/L
Tampo 2-4 Diclorofenol Sulfonato (DCPS) 4 mmol/L CARACTERISTICAS DO METODO
Uricase 60 U/L Intervalo de medida: Desde o limite de deteco de 0,00 mg/dL at ao limite de
R2 Peroxidase (POD) 660 U/L linearidade de 40 mg/dL.
Enzimas Ascorbato oxidase 200 U/L Se a concentrao for superior ao limite de linearidade, diluir a amostrar 1/2 com
4 - Aminofenazona (4-AF) 1 mmol/L CLNA 9 g/L e multiplicar o resultado final por 2.
Preciso:
ACID URIC CAL Padro primrio aquoso de cido rico 6 mg/dL
Intrasrie (n=20) Intersrie (n=20)
Mdia (mg/dL) 4,74 10,55 4,73 10,50
PREPARAO SD 0,02 0,03 0,13 0,29
Reagente de trabalho(RT):dissolver( )o contedo de um frasco de R2
CV (%) 0,50 0,30 2,67 2,77
Enzimas num frasco de R1 tampo .Tapar e misturar suavemente at
dissolver o seu [Link] ms no frigorfico (2-8C) ou 10 Sensibilidade Analitica: 1mg/dL= 0,02930 A.
dias a temperatura ambiente. Exactido:Os reagentes SPINREACT (Y) no mostram diferenas sistematicas
significativas quando comparados com outros reagentescomerciais(x).
CONSERVAO E ESTABILIDADE Os resultados obtidos com 50 amostras foram os seguintes:
Todos os componentes do kit so estveis at ao final do prazo de Coeficiente de correlao (r)2: 0,97137.
validade indicado no rtulo, quando os frascos so mantidos bem Equao da recta de regresso: y=1,162x + 0,14156.
fechados, a 2-8C, protegidos da luz e se evita a sua contaminao. No As caracteristicas do metodo podem variar segundo o analisador utilizado.
usar reagentes fora de prazo.
Indicadores de deteriorao dos reagentes: INTERFERNCIAS
- Presena de partculas e turvao. No se observaram interferencias com bilirrubina at 170 mol/L,hemoglobina
- Absorvncia (A) do branco a 520 nm 0,16. at 130mg/dL e acido ascrbico at 570 mol/L2.
Esto descritos vrios frmacos e outras substncias que interferem com a
MATERIAL ADICIONAL determinao do acido rico 3,4.
- Espectrofotmetro ou analisador para leituras a 520 nm.
- Cuvetas de 1,0 cm de passo de luz. NOTAS
- Equipamento habitual de laboratrio. 1. URIC ACID CAL: Devido natureza do produto, aconselhvel trat-lo com
muito cuidado j que se pode contaminar com facilidade.
AMOSTRAS 2. A calibrao com o Padro aquoso pode provocar erros sistemticos em
- Soro ou plasma1:Estabilidade 3-5 dias a 2-8C e 6 meses a 20C. mtodos automticos. Neste caso, recomenda-se a utilizao
- de calibradores
- Urina (24 h)1: Estabilidade 3 dias a temperatura ambiente a pH > 8. sricos.
Diluir a amostra a 1/50 em gua destilada. Misturar. Multiplicar o resultado 3. Usar pontas de pipeta descartveis limpas para sua dispensa.
obtido por 50 (factor de diluio); Se a amostra for turva, aquec-la a 60C 4. SPINREACT dispe de instruces detalhadas para a aplicao deste
por 10 min para dissolver os precipitados de urato e cido rico. No reagente em distintos analizadores.
refrigerar.
BIBLIOGRAFA
PROCEDIMENTO 1. Schultz A. Uric acid. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St
1. Condies do ensaio: Louis. Toronto. Princeton 1984; 1261-1266 and 418.
Longitude de comp. onda: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 520 nm (490-550) 2. Fossati P et al. Clin Chem 1980;26:227-231.
Cuvete:. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 cm passode luz 3. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press,
Temperatura:. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37C / 15-25C 1995.
2. Ajustar o espectrofotmetro a zero frente a agua destilada. 4. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
3. Pipetar para uma cuvete (Nota 3): 5. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
6. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
Branco Padro Amostra
RT (mL) 1,0 1,0 1,0 APRESENTAO
Padro (Nota1,2,3) (L) -- 25 -- Ref: 1001010 R1: 10 x 20 mL, R2:10 20 mL, CAL: 1 x 5 mL
Amostra (L) -- -- 25 Ref: 1001011 R1: 10 x 50 mL, R2:10 50 mL, CAL: 1 x 5 mL
Cont.
Ref: 1001012 R1: 4 x 125 mL, R2:4 125mL, CAL: 1 x 5 mL
4. Misturar e incubar 5 minutos a 37C ou 10 min. 15-25C.
5. Ler a absorvncia (A) do Padro e da amostra, frente ao branco de Ref: 1001013 R1: 4 x 250 mL, R2:4 250mL, CAL: 1 x 5 mL
reagente. A colorao estvel no mnimo 30 minutos.

BSIS01-P 04/02/16 SPINREACT, S.A./ [Link] Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN
Tel. +34 972 69 08 00 Fax +34 972 69 00 99. e-mail: spinreact@[Link]

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