Inserto Ácido Úrico
Inserto Ácido Úrico
cido rico
Uricasa -POD. Enzimtico colorimtrico
Determinacin cuantitativa de cido rico CLCULOS
IVD Suero o plasma
Conservar a 2-8C ( A ) Muestra - ( A ) Blanco
x 6 (Conc. Patrn) = mg/dL de cido rico en la muestra
PRINCIPIO DEL MTODO ( A ) Patrn - ( A ) Blanco
El cido rico es oxidado por la uricasa a alantona y perxido de Orina 24 h
hidrgeno (2H2O2) que en presencia de peroxidasa (POD), 4- ( A ) Muestra - ( A ) Blanco
x 6 x vol. (dL) orina/24h = mg/24 h de cido rico
aminofenazona (4-AF) y 2-4 Diclorofenol Sulfonato (DCPS) forma un ( A ) Patrn - ( A ) Blanco
compuesto rosceo:
Uricasa Factor de conversin: mg/dL x 59,5= mol/L.
cido rico + 2H2O + O2 Alantona + CO2 + 2H2O2
CONTROL DE CALIDAD
POD
2H2O2 + 4-AF + DCPS Quinonaimina + 4H2O Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados:
La intensidad de quinonaimina roja formada es proporcional a la SPINTROL H Normal y Patolgico (Ref. 1002120 y 1002210).
1,2
concentracin de cido rico presente en la muestra ensayada . Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, revisar
el instrumento, los reactivos y el calibrador.
SIGNIFICADO CLNICO Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer
El cido rico y sus sales son el producto final del metabolismo de las correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las
purinas. En una insuficiencia renal progresiva hay una retencin en tolerancias.
sangre de urea, creatinina y cido rico. 5
Niveles altos de cido rico son indicativos de patologa renal y VALORES DE REFERENCIA
generalmente se asocia con la gota .
1,5,6
Suero o plasma:
El diagnstico clnico debe realizarse teniendo en cuenta todos los Mujeres 2,5 - 6,8 mg/dL 149 405 mol/L
datos clnicos y de laboratorio. Hombres 3,6 - 7,7 mg/dL 214 458 mol/L
Orina: 250 - 750 mg/24 h 1,49 - 4,5 mmol/24 h
REACTIVOS
Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio
R1 Fosfatos pH 7,4 50 mmol/L establezca sus propios valores de referencia.
Tampn 2-4 Diclorofenol Sulfonato (DCPS) 4 mmol/L
CARACTERSTICAS DEL MTODO
Uricasa 60 U/L
Rango de medida: Desde el lmite de deteccin de 0,00 mg/dL hasta el
R2 Peroxidasa (POD) 660 U/L
lmite de linealidad de 40 mg/dL.
Enzimas Ascorbato oxidasa 200 U/L Si la concentracin es superior al lmite de linealidad, diluir la muestra 1/2
4 - Aminofenazona (4-AF) 1 mmol/L con CINa 9 g/L y multiplicar el resultado final por 2.
URIC ACID CAL Patrn primario acuoso de cido rico 6 mg/dL Precisin:
Intraserie (n=20) Interserie (n=20)
PREPARACIN Media (mg/dL) 4,74 10,55 4,73 10,50
Reactivo de trabajo (RT): Disolver ( ) el contenido de un vial de R 2 SD 0,02 0,03 0,13 0,29
Enzimas en un frasco de R 1 Tampn. Tapar y mezclar suavemente CV (%) 0,50 0,30 2,67 2,77
hasta disolver su contenido. Estabilidad: 1 mes en nevera (2-8C) o
10 das a temperatura ambiente. Sensibilidad analtica: 1 mg/dL = 0,02930 A.
Exactitud: Los reactivos SPINREACT (y) no muestran diferencias
CONSERVACIN Y ESTABILIDAD sistemticas significativas cuando se comparan con otros reactivos
Todos los componentes del kit son estables, hasta la fecha de comerciales (x).
caducidad indicada en la etiqueta, cuando se mantienen los frascos Los resultados obtenidos con 50 muestras fueron los siguientes:
bien cerrados a 2-8C, protegidos de la luz y se evita su 2
Coeficiente de correlacin (r) : 0,97137.
contaminacin. No usar reactivos fuera de la fecha indicada. Ecuacin de la recta de regresin: y=1,162x + 0,14156.
Indicadores de deterioro de los reactivos: Las caractersticas del mtodo pueden variar segn el analizador utilizado.
- Presencia de partculas y turbidez.
INTERFERENCIAS
- Absorbancia (A) del blanco a 520 nm 0,16.
No se han observado interferencias con bilirrubina hasta 170 mol/L,
MATERIAL ADICIONAL 2
hemoglobina hasta 130 mg/dL y cido ascrbico hasta 570 mol/L .
- Espectrofotmetro o analizador para lecturas a 520 nm. Se han descrito varias drogas y otras substancias que interfieren en la
- Cubetas de 1,0 cm de paso de luz. 3,4
determinacin del cido rico .
- Equipamiento habitual de laboratorio.
NOTAS
MUESTRAS 1. URIC ACID CAL: Debido a la naturaleza del producto, es aconsejable
1
- Suero o plasma : Estabilidad 3-5 das a 2-8C y 6 meses a 20C. tratarlo con sumo cuidado ya que se puede contaminar con facilidad.
1
- Orina (24 h) : Estabilidad 3 das a temperatura ambiente a pH > 8. 2. La calibracin con el Patrn acuoso puede dar lugar a errores
Diluir la muestra al 1/50 en agua destilada. Mezclar. Multiplicar el sistemticos en mtodos automticos. En este caso, se recomienda
resultado obtenido por 50 (factor de dilucin); Si la muestra es utilizar calibradores sricos.
turbia, calentarla a 60C 10 min para disolver los precipitados de 3. Usar puntas de pipeta desechables limpias para su dispensacin.
urato y cido rico. No refrigerar. 4. SPINREACT dispone de instrucciones detalladas para la aplicacin
PROCEDIMIENTO de este reactivo en distintos analizadores.
1. Condiciones del ensayo: BIBLIOGRAFA
Longitud de onda: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .520 nm (490-550) 1. Schultz A. Uric acid. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St Louis. Toronto.
Cubeta: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 cm paso de luz Princeton 1984; 1261-1266 and 418.
2. Fossati P et al. Clin Chem 1980;26:227-231.
Temperatura: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. 37C
- / 15-25C 3. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
2. Ajustar el espectrofotmetro a cero frente a agua destilada. 4. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
3. Pipetear en una cubeta (Nota 3): 5. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
6. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
Blanco Patrn Muestra
RT (mL) 1,0 1,0 1,0 PRESENTACIN
(Nota1,2,3)
Patrn (L) -- 25 -- Ref: 1001010 R1: 10 x 20 mL, R2:10 20 mL, CAL: 1 x 5 mL
Muestra (L) -- -- 25 Ref: 1001011 R1: 10 x 50 mL, R2:10 50 mL, CAL: 1 x 5 mL
Cont.
4. Mezclar e incubar 5 minutos a 37C 10 min. 15-25C. Ref: 1001012 R1: 4 x 125 mL, R2:4 125mL, CAL: 1 x 5 mL
5. Leer la absorbancia (A) del Patrn y la muestra, frente al Ref: 1001013 R1: 4 x 250 mL, R2:4 250mL, CAL: 1 x 5 mL
blanco de reactivo. El color es estable como mnimo 30 minutos.
BSIS01-E 04/02/16 SPINREACT, S.A./ [Link] Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN
Tel. +34 972 69 08 00 Fax +34 972 69 00 99. e-mail: spinreact@[Link]
URIC ACID
Uric acid
Uricase -POD. Enzymatic colorimetric
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URIC ACID
Acide Urique
Uricase -POD. Enzymatique colorimtrique
Dtermination quantitative dacide urique CALCULS
IVD Srum ou plasma
Conserver 2-8C (A ) chantillon - (A )Blanc
x 6 (Conc. talon) = mg/dL dacide urique dans lchantillon
PRINCIPE DE LA METHODE (A ) talon - (A )Blanc
Lacide urique est oxyd par luricase lallantone et le peroxyde Urine 24 h
dhydrogne (2H2O2) qui, en prsence de la peroxydase (POD), 4-
(A ) chantillon - (A )Blanc
aminophnazone (4-AF) et du 2-4 Diclorophnol sulphonate (DCPS) forme x 6 x vol. (dL) urine /24h = mg/24 h dacide urique
un compos rosac: (A ) talon - (A )Blanc
Uricasa Facteur de conversion: mg/dL x 59,5= mol/L.
Acide urique + 2H2O + O2 Allantone + CO2 + 2H2O2
POD CONTROLE DE QUALITE
2H2O2 + 4-AF + DCPS Quinonaimine + 4H2O
Il est conseill danalyser conjointement les chantillons de srum dont les
Lintensit de quinonaimine rouge forme est proportionnelle la valeurs ont t contrles: SPINTROL H Normal et pathologique (Rf. 1002120
concentration dacide urique prsente dans lchantillon test1, 2 . et 1002210).
SIGNIFICATION CLINIQUE Si les valeurs se trouvent en dehors des valeurs tolres, analyser linstrument,
Lacide urique et ses sels sont le produit final du mtabolisme des purines. les ractifs et le calibreur.
En cas dinsuffisance rnale progressive, il existe une rtention de sang Chaque laboratoire doit disposer de son propre contrle de qualit et dterminer
dans lure, de cratinine et dacide urique. les mesures correctives mettre en place dans le cas o les vrifications ne
Des niveaux levs dacide urique indiques une pathologie rnale et sont correspondraient pas aux attentes.
souvent accompagns de fuites urinaires 1, 5,6. VALEURS DE REFERENCE5
Le diagnostic clinique doit tre ralis en tenant compte de toutes les Srum ou plasma:
donnes cliniques et des donnes de laboratoire. Femmes 2,5 - 6,8 mg/dL 149 405 mol/L
Hommes 3,6 - 7,7 mg/dL 214 458 mol/L
REACTIFS Urine: 250 - 750 mg/24 h 1,49 - 4,5 mmol/24 h
R1 Phosphates pH 7,4 50 mmol/L Ces valeurs sont donnes titre dinformation. Il est conseill chaque
Tampon 2-4 Diclorophnol sulphonate (DCPS) 4 mmol/L laboratoire de dfinir ses propres valeurs de rfrence.
Uricase 60 U/L CARACTERISTIQUES DE LA METHODE
R2 Peroxidase (POD) 660 U/L Gamme de mesures: Depuis la limite de dtection de 0,00 mg/dL jusqu la
Enzymes Ascorbate oxydase 200 U/L limite de linarit de 40 mg/dL.
4 - Aminophnazone (4-AF) 1 mmol/L Si la concentration de lchantillon est suprieure la limite de linarit, diluer
1/2 avec du CINa 9 g/L et multiplier le rsultat final par 2.
ACIDE URIQUE CAL Patron primaire de dtection dacide urique 6 mg/dL Prcision:
Intra-srie (n=20) Inter-srie (n=20)
PREPARATION Moyenne (mg/dL) 4,74 10,55 4,73 10,50
Ractif de travail (RT): Dissoudre ( ) le contenu dune capsule SD 0,02 0,03 0,13 0,29
denzymes de R 2 dans un peu de tampon R 1. Fermer et mlanger CV (%) 0,50 0,30 2,67 2,77
doucement jusqu dissoudre le contenu. Stabilit: 1 mois au rfrigrateur Sensibilit analytique: 1 mg/dL = 0,02930 (A).
(2-8C) ou 10 jours temprature ambiante. Exactitude: Les ractifs SPINREACT (y) ne montrent pas de diffrences
CONSERVATION ET STABILITE systmatiques significatives lorsquon les compare dautres ractifs
Tous les composants du kit sont stables jusqu la date de premption commerciaux (x).
indique sur le flacon, et sils sont maintenus hermtiquement ferms Les rsultats obtenus avec 50 chantillons ont t les suivants:
2-8C, labri de la lumire et des sources de contamination. Ne pas Coefficient de corrlation (r)2: 0,97137.
utiliser les ractifs en dehors de la date indique. Equation de la Coubre de rgression: y=1,162x +0,14156.
Indices de dtrioration des ractifs: Les caractristiques de la mthode peuvent varier suivant lanalyseur employ.
- Prsence de particules et turbidit. INTERFERENCES
- Absorbation (A) du blanc 520 nm 0,16.
Aucune interfrence na t constat avec la bilirubine jusqu 170 mol/L, avec
MATERIEL SUPPLEMENTAIRE lhmoglobine jusqu 130 mg/dL, ni avec l'acide ascorbique jusqu 570 mol/L2.
- Spectrophotomtre ou analyseur pour les lectures 520 nm. Diffrentes drogues ont t dcrites ainsi que dautres substances qui interfrent
- Cuvettes de 1,0 cm dclairage. dans la dtermination de lacide urique 3,4.
- Equipement classique de laboratoire.
REMARQUES
ECHANTILLONS [Link] ACID CAL: Etant donn la nature du produit, il est conseill de le
- Srum ou plasma1: Stabilit 3-5 jours 2-8C et 6 mois 20C. manipuler avec une grande prcaution. En effet, il peut tre contamin avec
- Urine (24 h)1: Stabilit 3 jours temprature ambiante pH > 8. Diluer facilit.
lchantillon dans 1/50 deau distill. Mlanger. Multiplier le rsultat 2. Le calibrage au moyen du patron de dtection peut donner lieu des erreurs
obtenu par 50 (facteur de dilution); si lchantillon est trouble, faites-le systmatiques lors de mthodes automatiques. Dans de tels cas, il est
rchauffer 60C pendant 10 min pour dissoudre les prcipits durate conseill dutiliser des calibrages sriques
et dacide urique. Ne pas placer au rfrigrateur. 3. Utiliser des embouts de pipettes jetables propres pour diffuser le produit.
4. SPINREACT dispose de consignes dtailles pour lapplication de ce
PROCEDURE ractif dans diffrents analyseurs.
1. Conditions de test:
Longueur dondes: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .520 nm (490-550) BIBLIOGRAPHIE
Cuvette: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 cm dclairage 1. Schultz A. Uric acid. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St Louis.
Temprature: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37C/15-25C Toronto. Princeton 1984; 1261-1266 and 418.
2. Rgler le spectrophotomtre sur zro en fonction de leau distille 2. Fossati P et al. Clin Chem 1980;26:227-231.
3. Pipetter dans une cuvette (Remarque 3) : 3. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
4. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
Blanc talon Echantillon 5. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
RT (mL) 1,0 1,0 1,0 6. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
talon
(Remarque1,2,3)
(L) -- 25 --
PRESENTATION
Echantillon (L) -- -- 25
Ref: 1001010 R1: 10 x 20 mL, R2:10 20 mL, CAL: 1 x 5 mL
4. Mlanger et incuber pendant 5 minutes 37C ou 10 minutes 15-
Ref: 1001011 R1: 10 x 50 mL, R2:10 50 mL, CAL: 1 x 5 mL
25C. Cont.
5. Lire labsorbation (a) du patron et lchantillon, en comparaison Ref: 1001012 R1: 4 x 125 mL, R2:4 125mL, CAL: 1 x 5 mL
avec le blanc du ractif. La couleur reste stable pendant au moins Ref: 1001013 R1: 4 x 250 mL, R2:4 250mL, CAL: 1 x 5 mL
30 minutes.
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URIC ACID
cido rico
Uricasa -POD. Enzimatico colorimtrico
Determinao quantitativa de cido rico
CLCULOS
IVD Soro ou plasma
Conservar a 2-8C (A ) Amostra - (A )Branco
x 6 (Conc. Padro) = mg/dL de cido rico na amostra
(A ) Padro - (A )Branco
PRINCPIO DO MTODO Urina 24 h
O cido rico oxidado pela uricase a alantona e perxido de hidrognio
(2H2O2) que, na presena de peroxidase (POD), 4-aminofenazona (4-AF) (A ) Amostra - (A )Branco
x 6 x vol. (dL) urina/24h = mg/24 h de cido rico
e 2-4 Diclorofenol Sulfonato (DCPS) forma um composto rosceo: (A ) Padro - (A )Branco
Uricase Factor de converso: mg/dL x 59,5= mol/L.
cido rico + 2H2O + O2 Alantona + CO2 + 2H2O2
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