Fer-color
AA
C Mtodo colorimtrico directo para la determinacin de
hierro en suero o plasma
SIGNIFICACION CLINICA REACTIVOS NO PROVISTOS
El hierro se distribuye en el organismo de diferentes ma- - Calibrador A plus de Wiener lab.
neras, incluyendo hemoglobina, hierro tisular y mioglobina. - Agua bidestilada.
El transporte de hierro de un rgano a otro se realiza
mediante una protena transportadora llamada apotransfe- INSTRUCCIONES PARA SU USO
rrina. El complejo que forma con el hierro se conoce como Reactivo C: listo para usar.
transferrina. Standard: listo para usar.
La ferritina, localizada en casi todas las clulas del cuerpo, Reactivo de Trabajo: transferir al vial de Reactivo B la
constituye una reserva de hierro disponible para la forma- cantidad de Reactivo A indicada en el rtulo. Colocar fecha
cin de la hemoglobina y otras protenas que contienen el de preparacin.
grupo hemo. La absorcin de hierro ocurre principalmente
en el duodeno. Tanto la ferritina como la transferrina estn PRECAUCIONES
presentes en las clulas de la mucosa intestinal y juntas Los reactivos son para uso diagnstico "in vitro".
regulan la absorcin de hierro. Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
Los mayores desrdenes del metabolismo de hierro se re- de trabajo en el laboratorio de qumica clnica.
lacionan con su deficiencia o exceso, sin embargo, se han Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
observado alteraciones en muchas otras enfermedades, in- acuerdo a la normativa local vigente.
cluyendo anemia, enfermedades cardiovasculares, hepatitis
crnica, enfermedades renales e infecciones. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
La anemia por prdida de hierro representa uno de los tras- ALMACENAMIENTO
tornos orgnicos ms frecuentes, especialmente en nios, Reactivos Provistos: son estables a temperatura ambiente
mujeres jvenes, embarazadas y ancianos. Tambin las (< 25oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
lceras gstricas o duodenales y carcinomas de estmago, Reactivo de Trabajo: es estable durante 3 meses a partir
constituyen causas de anemia ferropnica. de la fecha de su preparacin conservado en refrigerador
Por el contrario, el exceso de hierro se asocia con otros (2-10oC) o 10 das a temperatura ambiente (18-25oC).
desrdenes, como hemosiderosis, hemocromatosis y anemia
sideroblstica. INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
REACTIVOS
FUNDAMENTOS DEL METODO Variaciones en las lecturas de Blancos de Reactivos y/o
El hierro srico se libera de la unin con su protena trans- Standard, indican contaminaciones ocasionales (agua, ma-
portadora especfica, la transferrina, en buffer acetato terial de vidrio, etc.). Un aumento en el valor de los Blancos
pH 4,5 y en presencia de un reductor, el cido ascrbico. indicar una contaminacin con hierro.
Posteriormente reacciona con el reactivo de color, piridil bis-
fenil triazina sulfonato (ferrozina) dando un complejo color MUESTRA
magenta, que se mide a 560nm. Suero o plasma
a) Recoleccin: el paciente debe estar en ayunas y las
REACTIVOS PROVISTOS extracciones deben practicarse siempre a la misma hora
A. Reactivo A: solucin de acetato 150 mmol/l para pH 4,5, (preferentemente de maana) ya que las fluctuaciones
conteniendo guanidina. fisiolgicas son significativas durante el da.
B. Reactivo B: cido ascrbico. b) Aditivos: en caso de utilizar plasma como muestra debe
C. Reactivo C: solucin estabilizada de ferrozina. usarse heparina como anticoagulante.
S. Standard: solucin de iones Fe (III) equivalente a 100ug/dl. c) Sustancias interferentes conocidas: no se observa
interferencia por hemoglobina hasta 90 mg/dl, bilirrubina
Concentraciones finales hasta 15 mg/dl y heparina hasta 50 UI/ml.
Acetato.................................................. 150 mmol/l, pH 4,5 Muestras lipmicas pueden conducir a resultados errneos.
Ferrozina............................................................. 0,2 mmol/l Niveles de triglicridos de 3,72 g/l producen interferen-
Acido ascrbico.................................................... 0,03 mol/l cias.
Guanidina............................................................... 4,0 mol/l Si bien hemlisis ligeras no interfieren con este mtodo, el
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International Committee for Standardization in Hematology (Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas
(ICSH) recomienda el uso de suero libre de hemlisis. de hierro, con cada determinacin.
Referirse a la bibliografa de Young para los efectos de las
drogas en el presente mtodo. VALORES TEORICOS
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: el Hombres: 65 a 175 ug/dl (11,6-31,3 umol/l)
suero o plasma heparinizado pueden conservarse hasta una Mujeres: 50 a 170 ug/dl (9-30,4 umol/l)
semana en refrigerador (2-10oC).
VALORES DE REFERENCIA
MATERIAL REQUERIDO (no provisto) En un grupo de 20 mujeres y 20 varones sanos, con edades
- Espectrofotmetro o fotocolormetro. oscilando entre los 18 y 51 aos, se hall un rango de 55 a
- Micropipetas y pipetas para medir los volmenes indicados. 175 ug/dl* con los siguientes promedios:
- Tubos o cubetas espectrofotomtricas.
Hombres: 114,6 ug/dl (20,5 umol/l)
Mujeres: 103,3 ug/dl (18,5 umol/l)
CONDICIONES DE REACCION
- Longitud de onda: 560 nm en espectrofotmetro o 540-560 nm *Valores de referencia extraidos de archivos de Wiener lab.
en fotocolormetro con filtro verde. Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios
- Temperatura de reaccin: temperatura ambiente valores de referencia.
- Tiempo de reaccin: 5 minutos
- Volumen de muestra: 200 ul CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI
- Volumen total de reaccin: 1,4 ml Hierro (ug/dl) x 0,179 = Hierro (umol/l)
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
PROCEDIMIENTO - Valores de Blanco aceptables: la determinacin de oligo-
En tres tubos marcados B (Blanco de Reactivos), S elementos requiere la prevencin de posibles contamina-
(Standard) y D (Desconocido) colocar: ciones del agua y los reactivos. El Blanco de Reactivos,
ejecutado de acuerdo al Manual de Instrucciones, no debe
B S D
ser superior a 0,150 D.O. debiendo ser adems, despre-
Agua bidestilada 200 ul - - ciable la contribucin del agua en dicho Blanco. Para ello
Standard - 200 ul - se recomienda el uso de agua de calidad comprobada
(conductividad menor a 0,02 uOhms).
Muestra - - 200 ul - Limpieza del material: todo el material de laboratorio em-
Reactivo de Trabajo 1 ml 1 ml 1 ml pleado debe estar libre de hierro, para lo cual debe ser
sumergido durante 6 horas en HCl p.a. 10-15%, eliminando
Mezclar. Leer la absorbancia del tubo D (Blanco de Suero la acidez con numerosos lavados con agua libre de hierro.
BS) en espectrofotmetro a 560/580nm o en fotocolo- Secar el material preferentemente a no ms de 80oC en
rmetro con filtro verde (540/560 nm) llevando a cero el cestillas de acero inoxidable o revestidos con plstico.
aparato con agua. Luego agregar: Todo el material debe ser empleado exclusivamente para
Reactivo C 200 ul 200 ul 200 ul la determinacin de hierro.
Mezclar inmediatamente. Volver a leer cada tubo a los 5
PERFORMANCE
minutos, llevando el aparato a cero con agua.
a) Reproducibilidad: procesando replicados de las mismas
muestras en un mismo da, se obtuvieron los siguientes
ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL datos:
Los tubos deben ser ledos entre 5 y 60 minutos luego de Nivel D.S. C.V.
completados los pasos del procedimiento. 146,5 ug/dl 1,93 ug/dl 1,32 %
324,6 ug/dl 1,76 ug/dl 0,54 %
CALCULO DE LOS RESULTADOS
Corregir las lecturas de S y D, restndoles los Blancos Procesando la misma muestra en das diferentes, se obtu-
correspondientes: vieron los siguientes resultados:
S - B = S corregida Nivel D.S. C.V.
D - (B + BS) = D corregida 142,8 ug/dl 2,50 ug/dl 1,75 %
Fe (ug/dl) = D corregida x f 314,0 ug/dl 3,93 ug/dl 1,25 %
100 ug/dl
donde: f = b) Recuperacin: agregando cantidades conocidas de Fe
S corregida (II) a alcuotas de un mismo suero, se recuper entre 90 y
103%.
METODO DE CONTROL DE CALIDAD c) Linealidad: la reaccin es lineal hasta 1000 ug/dl.
Procesar 2 niveles de un material de control de calidad d) Lmite de deteccin: 6,05 ug/dl.
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PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS SIMBOLOS
Para las instrucciones de programacin debe consultarse el Los siguientes smbolos se utilizan en todos los kits de
Manual del Usuario del Analizador en uso. Para la calibra- reactivos para diagnstico de Wiener lab.
cin debe emplearse Calibrador A plus de Wiener lab., de Este producto cumple con los requerimientos previstos
acuerdo a los requerimientos del analizador.
C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
para el diagnstico "in vitro"
PRESENTACION
- 5 x 20 ml (Cd. 1492003). P Representante autorizado en la Comunidad Europea
BIBLIOGRAFIA
V Uso diagnstico "in vitro"
- Dixon, K. - Ann. Clin. Biochem. 10/5:127 (1973).
X Contenido suficiente para <n> ensayos
- I.C.S.H. - Am. J. Clin. Path. 56/4:543 (1971).
- Zak, B.; Baginski, E.S.; Epstein, E. y Wiener, L.M. - Clin. H Fecha de caducidad
Toxicol. 4/4:621 (1971).
- Rojkn, M.L.; Olgun de Mariani, M.C.; Drappo, G.A. y Alba- l Lmite de temperatura (conservar a)
rracn, A. - III Congreso Argentino de Bioqumica - Buenos
Aires (1975). No congelar
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
AACC Press, 4th ed., 2001. F Riesgo biolgico
Volumen despus de la reconstitucin
Cont. Contenido
g Nmero de lote
M Elaborado por:
Xn
Nocivo
Corrosivo / Castico
Xi
Irritante
i Consultar instrucciones de uso
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo
h Nmero de catlogo
M Wiener Laboratorios S.A.I.C.
Riobamba 2944
Wiener lab.
2000 - Rosario - Argentina
http://www.wiener-lab.com.ar
Dir. Tc.: Viviana E. Ctola
Bioqumica
Producto Autorizado A.N.M.A.T.
Cert. N: 3193/99 2000 Rosario - Argentina
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