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Actividad Ureásica en Muestras Biológicas

Este documento describe un protocolo para medir la actividad ureásica en muestras biológicas utilizando la enzima ureasa. Se detallan los materiales y reactivos requeridos, incluidos tubos de ensayo, matraces, buretas y soluciones de urea, ácido clorhídrico y fosfato de pH 7.0. El procedimiento incluye la extracción de muestras de suelo, forraje y concentrado, la titulación del amonio producido y la medición del pH. Se espera que la activ

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Santiago Alberto Calle Clavijo
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Actividad Ureásica en Muestras Biológicas

Este documento describe un protocolo para medir la actividad ureásica en muestras biológicas utilizando la enzima ureasa. Se detallan los materiales y reactivos requeridos, incluidos tubos de ensayo, matraces, buretas y soluciones de urea, ácido clorhídrico y fosfato de pH 7.0. El procedimiento incluye la extracción de muestras de suelo, forraje y concentrado, la titulación del amonio producido y la medición del pH. Se espera que la activ

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UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA-UNAD

Escuela de Ciencias Agrcolas, Pecuarias y del Medio Ambiente- ECAPMA


Programa: agronoma

PREINFORME: Laboratorio De Bioqumica Metablica- LBM

Nombre y Apellido: Santiago Alberto Calle Clavijo; Cdigo: 97101213629;

Fecha 13/11 /2015

ACTIVIDAD URESICA EN MUESTRAS DE ORIGEN BIOLGICO

INTRODUCCION

La ureasa es una enzima que existe de forma natural que cataliza la hidrlisis de
la urea en cido carbamico inestable. La descomposicin rpida del acido
carbamico ocurre sin catlisis enzimtica para formar dixido de carbono y
amoniaco. El amoniaco es probable que escape de la atmosfera a menos que
reaccione con agua para formar amonio. .

Mentefacto o diagrama conceptual


MATERIALES Y METODOS
Materiales y equipos requeridos

MATERIALES / EQUIPO CARACTERICAS

Tubos de ensayo con gradilla. Pyrex medianos

Pinzas para bureta. Sostener las buretas.

Erlenmeyer. 12mL.

Pipetas. De 5 y 10mL.

Matraz aforado. De 100mL.

Bao termostatado. Control de temperatura.

Beaker. De 400mL

Bureta. De 25mL.

Soporte universal. Metalico con pinza para bureta.


Reactivos a utilizar

REACTIVO FORMULA CONCENTRACIN

Ureasa En buffer 0,1%

Fosfato de pH H2NCONH2 7,0

Urea CH4N2O 0,25M

cido Clorhdrico HCL 0,1N

Procedimiento.
En campo:
se muestrearn 250 g suelo, 200g de forraje y 100g de concentrado, de acuerdo a
los protocolos establecidos para tal efecto; las muestras se empacarn en bolsas
negras, las cuales se rotularn con los datos de origen.
En laboratorio:
Peso muestras: Wm; Extraccin con NaCl 1%; Centrifugacin; Filtracin; medida
sobrenadante: Vs; Titulacin con HCl; Registro de mL gastados: VHCl; Tabla de
datos

Diagrama de flujo.
Tabla de datos

MUESTRAS PESO (Wm) VOLUMEN pH1 pH2


(mL)
Suelo 1
Suelo 2
Agua destilada +
Solucin Buffer

3. RESULTADOS ESPERADOS.

La actividad uresica ser mayor en la muestra de suelo, de acuerdo a los mL de


HCl gastados en la titulacin del amonio producido

La actividad uresica ser menor en la muestra de harina

La actividad uresica del forraje ser intermedio

GLOSARIO

RBE: Reaccin Bioqumica Enzimtica, sigue cintica Michaelliana

AU: Actividad uresica: velocidad con que la ureasa hidroliza la urea, hasta
convertirla en Amonio y gas carbnico

NNP: Nitrgeno No proteco: Nitrgeno presente en molculas orgnicas como la


urea e inorgnicas como Amonio y el Nitrato(NO3 - ) Urea
Bibliografa

Granados, J.,(2010),Mdulo Bioqumica Metablica, Unidad 2, cap 2; ECAPMA;


UNAD
Granados, J.,(2010),Protocolo prcticas de laboratorio, Pg 3-8; ECAPMA; UNAD

Granados., J; Garca,J.,(2000),Fisicoqumica Aplicada; Cap 11, Ed Antropos,


Bogot, Colombia

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