DEMOSTRACIN CUALITATIVA DE CARBOHIDRATOS, INFORME
LPIDOS, AMINOCIDOS Y PROTEINAS N1
UNIVERSIDAD NACIONAL
PEDRO RUIZ GALLO
FACULTAD DE MEDICINA
HUMANA
INFORME DE LABORATORIO N 1
DEMOSTRACIN CUALITATIVA DE
CARBOHIDRATOS, LPIDOS, AMINOCIDOS Y
PROTEINAS
CURSO : Biologa.
ALUMNO : Paul Anderson Nio Huamn
DOCENTE : Dr. Melndez Guerrero Vctor
CICLO ACADEMICO : 2015 1
Lambayeque, de 29 de Mayo de 2015
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DEMOSTRACIN CUALITATIVA DE CARBOHIDRATOS, INFORME
LPIDOS, AMINOCIDOS Y PROTEINAS N1
I.-INTRODUCCION
El estudio de las biomoleculas ha sido de gran importancia en el desarrollo de
la ciencia biolgica, ya que sin bien es cierto las clulas constituyen las
unidades funcionales y estructurales de la materia viva, estas a su vez estn
constituidas por molculas, tales como carbohidratos, lpidos, protenas y
cidos nucleicos que se combinan en un sinnmero de formas, dando lugar a
todas las estructuras que conforman el organismo.
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DEMOSTRACIN CUALITATIVA DE CARBOHIDRATOS, INFORME
LPIDOS, AMINOCIDOS Y PROTEINAS N1
En este laboratorio nos centraremos en el estudio delas biomolculas
organicas como son los carbohidrato conoceremos sus funciones tanto
estructurales como energticas, as como tambin haremos uso de reactivos
para poder determinar su presencia en algunos de los alimentos bsicos en
nuestra dieta como de algunos fluidos corporales.
Experimentaremos, con muestras de orina de una persona diabtica
demostrando la presencia de azucares en ella. Identificaremos y
diferenciaremos carbohidratos con y sin poder reductor, apreciaremos la
presencia de carbohidratos en alimentos de consumo diario y en algunos
fluidos corporales como la orina y la saliva.
En resumen esta practica nos permitir conocer las propiedades de dos
biomoleculas de gran importancia, adems de identificarlas como parte
estructural de nuestros alimentos y por consiguiente de nuestro organismo.
I.1.- Antecedentes Histricos
Para este experimento se uso dos reactivos para detectar la presencia de
carbohidratos: el reactivo fehling y la solucin de Lugol.
El reactivo fehling, tambin llamado como licor de fehling, es una disolucin
descubierta por el quimico alemn Hermann Von Fehling.El licor de Fehling
consiste en dos soluciones acuosas: el Fehling A compuesto por Sulfato de
cobre y el Fehling B compuesto por Sal de Seignette.
El reactivo lugol o solucin de Lugol es una solucin de I2 y KI en agua
destilada. Fue preparada por primera vez en 1829 y nombrada en honor al
mdico francs Jean Guillaume Auguste Lugol. Este producto se emplea
frecuentemente como desinfectante y antisptico, para la desinfeccin de agua
en emergencias y como un reactivo para la prueba del yodo en anlisis
mdicos y de laboratorio.
II.- MARCO TEORICO
Reaccin de fehling:
El reactivo de Fehling, tambin conocido como Licor de Fehling, es una
disolucin descubierta por el qumico alemn Hermann von Fehling y que se
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LPIDOS, AMINOCIDOS Y PROTEINAS N1
utiliza como reactivo para la determinacin de azcares reductores. Sirve para
demostrar la presencia de glusosa, as como para detectar derivados de sta
tales como la sacarosa o la fructosa.
El licor de Fehling consiste en dos soluciones acuosas:
Sulfato cprico cristalizado, 35 g; agua destilada, hasta 1.000 ml.
Sal de Seignette (tartrato mixto de potasio y sodio), 150 g; solucin de
hidrxido de sodio al 40%, 3 g; agua, hasta 1.000 ml.
Ambas se guardan separadas hasta el momento de su uso para evitar la
precipitacin del hidrxido de cobre (II).
El fundamento de esta reaccin radica en que en un medio alcalino, el ion
cprico (otorgado por el sulfato cprico) es capaz de reducirse por efecto del
grupo Aldehdo del azcar (CHO) a su forma de Cu+. Este nuevo ion se
observa como un precipitado rojo ladrillo correspondiente al xido cuproso
(CuO).
El medio alcalino facilita que el azcar est de forma lineal, puesto que el
azcar en solucin forma un anillo de piransico o furansico. Una vez que el
azcar est lineal, su grupo aldehdo puede reaccionar con el ion cprico en
solucin.
En estos ensayos es posible observar que la fructosa (una cetohexosa) es
capaz de dar positivo. Esto ocurre por las condiciones en que se realiza la
prueba: en un medio alcalino caliente esta cetohexosa se tautomeriza (pasando
por un intermediario enlico) a glucosa (que es capaz de reducir al ion cprico).
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Los disacridos como la sacarosa (enlace (1 4)O) y la trehalosa (enlace
(11)O), no dan positivo puesto que sus OH anomricos estn siendo
utilizados en el enlace glucosdico.
Solucin de Lugol:
El reactivo lugol o solucin de Lugol es una solucin de I2 y KI en agua
destilada. Fue preparada por primera vez en 1829 y nombrada en honor al
mdico francs Jean Guillaume Auguste Lugol. Este producto se emplea
frecuentemente como desinfectante y antisptico, para la desinfeccin de agua
en emergencias y como un reactivo para la prueba del yodo en anlisis
mdicos y de laboratorio.
La solucin de Lugol consiste en 5g I 2 y 10g KI, diluido con 85mL de agua
destilada, obtenindose una solucin marrn con una concentracin total de
yodo de 150mg/mL. El yoduro de potasio hace el yodo diatmico soluble en
agua, debido a la formacin de iones triyoduro I 3-. No debe confundirse con la
tintura de yodo, que consiste en yodo diatmico y sales de yodo diluidas en
agua y alcohol. La solucin de Lugol no contiene alcohol.
En microbiologa, es empleado en la tincin de Gram para retener el
colorante cristal violeta. El I2 entra en las clulas y forma un complejo
insoluble en solucin acuosa con el cristal violeta.
Se utiliza esta solucin como indicador en la prueba del yodo, que sirve
para identificar polisacridos como los almidones, glucgeno y ciertas
dextrinas, formando un complejo de inclusin termolbil que se caracteriza
por ser colorido, dando distintos colores segn las ramificaciones que
presente la molcula. El Lugol no reacciona con azcares simples como la
glucosa o la fructosa.
Se puede usar como un colorante para clulas, haciendo el ncleo celular
ms visible en microscopas y para preservar muestras de fitoplancton.
En una colposcopa, la solucin de Lugol se utiliza en la Prueba de Schiller
en busca de tejido vaginal canceroso.
Se puede usar la solucin de Lugol para observar la forma en la que la
membrana celular hace smosis y difusin.
Se usa el Lugol en la preparacin prequirrgica de las intervenciones
tiroideas, debido a que inhibe la secrecin de la hormona tiroidea y reduce
la prdida de sangre en las tiroidectomas de pacientes con la Enfermedad
de Graves Basedow. Sin embargo, resulta inefectiva en pacientes sin
hipertiroidismo o que ya han sido tratados con frmacos antitiroideos y T4.
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III.- IMPORTANCIA
Debido a que el ser humano esta formado por biomolculas y ya
que estas son de gran importancias se ha propuesto identificar a
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una de las principales biomolculas orgnicas como son los
carbohidratos a partir de sus propiedades fsico-quimicas se tendr
en cuenta caractersticas como el color, para determinar que clase
de carbohidrato es.
Adems de poder identicar la presencia de carbohidratos en varias
muestras, la solucin fehling nos permitir clasificarlos segn sea o
no reductor.
IV.-MATERIALES
A. MATERIALES BIOLGICOS:
Leche
Jugo de uvas
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Jugo de manzana
Gaseosa
Orina de persona diabtica
Almidn de papa
B. MATERIALES NO BIOLGICOS:
Tubos de ensayo
Reactivo Fehling A
Reactivo Fehling B
Mechero de alcohol
Gotero
Placa Petri
V.-PROCEDIMIENTOS
V.1.-identificacin de almidn:
Colocar en un tubo de ensayo una muestra de un alimento
que contenga almidn (en este experimento se usara almidn
de papa.
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Agregar a las muestras algunas gotas de lugol.
muestra se tie de azul- violceo con el lugol, ser positivo
para presencia de almidn Si la
V.2.-Identificacin De Carbohidratos Con Poder Reductor
En diferentes tubos de ensayo, colocar las muestras en estudio (jugo de
uva, jugo de manzana, leche, orina de diabtico, almidn, gaseosa)
Agregar 5 gotas de reactivo fehling
Llevar al calor hasta la ebullicin, implementando las normas de
bioseguridad.
Dejar enfriar y observar.
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Observar los cambios de coloracin.
VI.-RESULTADOS
La muestra de almidn se puede apreciar una coloracin azul-violcea
dando as un resultado positivo
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En cuanto a los carbohidratos segn su poder reductor tenemos la
siguiente tabla
MUESTRA PODER COLORACIN
REDUCTOR
JUGO DE SI, por la ROJIZO
MANZANA presencia de
fructuosa
LECHE Si ROJO-NARANJA
JUGO DE UVA Si ROJO OSCURO
ALMIDN DE No SIN
PAPA COLORACIN
ORINA DE Si * SIN
DIABETICO COLORACIN
GASEOSA No ROJIZO
*La orina de diabetico presenta un nivel de glucosa del 140 por lo que no se
observo reaccin alguna ya que el nivel minimo para que suceda es de 150
VII.-CONCLUCIONES
El cambio de color de las muestras nos permiti reconocer la
presencia de almidn en la papa y la presencia de
carbohidratos reductores en dicha sustancia organicas.
un carbohidrato ser reductor o no reductor dependiendo el
color que muestre al reaccionar con el Fehling
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podemos inferir que los carbohidratos en especial los
monosacridos y los disacridos poseen un gran poder
reductor ya que tienen una mayor manifestacin al hacerlos
reaccionar con el reactivo Fehling.
La coloracin que toman las muestras en cada procedimiento
que tiene que ver con los reactivos que se suministran ya que
estos alteran la estructura molecular y qumica de los
compuestos, rompiendo enlaces que liberan energa
(espectros electromagnticos) en forma de luz visible e
invisible, tambin formando nuevos enlaces con igual
presencia de energa. Estos espectros de luz obviamente los
visibles son los cuales observamos en los compuestos
acuosos que hemos trabajado, de acuerdo a la coloracion que
tomen estos compuestos podemos afirmar la presencia o
ausencia de los glcidos en las muestra estudiadas
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I.-INTRODUCCIN
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El estudio de las biomolculas ha sido de gran importancia en el
desarrollo de la ciencia biolgica, ya que sin bien es cierto las
clulas constituyen las unidades funcionales y estructurales de la
materia viva, estas a su vez estn constituidas por molculas, tales
como carbohidratos, lpidos, protenas y cidos nucleicos que se
combinan en un sinnmero de formas, dando lugar a todas las
estructuras que conforman el organismo.
En este laboratorio nos centraremos en el estudio de las
biomolculas orgnicas como son los lpidos, comprobaremos su
gran reserva energtica a si como tambin su presencia en algunos
alimentos.
Experimentaremos con frutas secas comprobando la presencia de
lpidos en ellas. Compararemos la presencia de lpidos entre las
frutas secas.
En resumen esta prctica nos permitir conocer las propiedades de
dos biomolculas de gran importancia, adems de identificarlas
como parte estructural de nuestros alimentos y por consiguiente de
nuestro organismo.
II.-MARCO TEORICO
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Los lpidos son un conjunto de molculas orgnicas, la mayora, son
biomolculas, compuestas principalmente por carbono e hidrgeno
y en menor medida oxgeno, aunque tambin pueden contener
fsforo, azufre y nitrgeno, que tienen como caracterstica principal
el ser hidrofbicas o insolubles en agua y s en solventes orgnicos
como la bencina, el benceno y el cloroformo. En el uso coloquial, a
los lpidos se les llama incorrectamente grasas, ya que las grasas
son slo un tipo de lpidos procedentes de animales. Los lpidos
cumplen funciones diversas en los organismos vivientes, entre ellas
la de reserva energtica (triglicridos), la estructural (fosfolpidos de
las bicapas) y la reguladora (esteroides).Los Lpidos tambin
funcionan para el desarrollo del cerebro, el metabolismo y el
crecimiento.
III.-IMPORTANCIA
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Debido a que el ser humano esta formado por biomolculas y ya
que estas son de gran importancias se ha propuesto identificar a
una de las principales biomolculas orgnicas como son los lpidos
a partir de sus propiedades fsico-qumicas se tendr en cuenta
caractersticas como la capacidad de arder y las marcas oleceas
que dejan algunos alimentos al entra en contacto con el papel filtro.
Con el fin de identificar la presencia de lpidos en alimentos se
tomara varias muestras.
IV.-MATERIALES
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C. MATERIALES BIOLGICOS:
Pecanas
Man
Aceite vegetal
D. MATERIALES NO BIOLGICOS:
Pinzas
Mechero
Papel filtro
V.-PROCEDIMIENTOS
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se utilizaron dos mtodos para reconocer lpidos:
Utilizando el papel filtro para identificar las manchas oleceas
que dejaban las muestras que contenan lpidos(pecana, man
y aceite vegetal).
La observacin de energa contenida en los lpidos a travs de
la combustin de una pecana.
VI.-RESULTADOS
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-En la prueba con el papel de filtro las pecanas, el man y el aceite
demostraron presentar lpidos puesdjaron manchas sobre l.
-En cuanto a la prueba de energa almacenada por los lpidos se
pudo evidenciar al hacer arder la pecana
VII.-CONCLUCIONES
La pudimos demostrar la presencia de lpidos en algunas
frutas secas como tambin en aceite.
Demostramos la energa almacenada en los lpidos al hacer
arder una pecana.
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I.-INTRODUCCIN
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Las protenas son biomolculas formadas bsicamente por carbono, hidrgeno,
oxgeno y nitrgeno. Pueden adems contener azufre y en algunos tipos de
protenas, fsforo, hierro, magnesio y cobre entre otros elementos.
Pueden considerarse polmeros de unas pequeas molculas que reciben el
nombre de aminocidos y seran, por tanto, los monmeros la unidad. Los
aminocidos estn unidos mediante enlaces peptdicos. La unin de un
bajo nmero de aminocidos da lugar a un pptido; si el nmero de
aminocidos que forma la molcula no es mayor de 10, se denomina
oligopptido, si es superior a 10 se llama polipptido y si el nmero es superior
a 50 aminocidos se habla ya de protena.
Por tanto, las protenas son cadenas de aminocidos que se pliegan
adquiriendo una estructura tridimensional que les permite llevar a cabo
miles de funciones. Las protenas estn codificadas en el material gentico de
cada organismo, donde se especifica su secuencia de aminocidos, y luego
son sintetizadas por los ribosomas.
Las protenas desempean un papel fundamental en los seres vivos y son las
biomolculas ms verstiles y ms diversas. Realizan una enorme
cantidad de funciones diferentes, entre ellas funciones estructurales,
enzimticas, transportadora, etc.
I.1.-ANTECEDENTES HISTORICOS
El reactivo Biuret, un mtodo colorimtrico que permite determinar la
concentracin de protenas de una muestra mediante espectroscopa
ultravioleta-visible a una longitud de onda de 540 nm (para detectar el in Cu 2+)
La Ninhidrina de se ha usado en todos los avances en anlisis de aminocidos
desde que en 1949 Stein y Moore, desarrollaron las bases de los mtodos
cromatogrficos. As los procedimientos ms actuales y los instrumentos ms
sensibles necesitan la excelente respuesta de color y blancos limpios que slo
la ninhidrina puede ofrecer.
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LPIDOS, AMINOCIDOS Y PROTEINAS N1
II.-MARCO TERICO
Biuret
El reactivo biuret se utiliza como una fuente de nitrgeno no proteico en
la alimentacin de rumiantes, donde se convierte en protena por
microorganismos intestinales. Es menos favorecida que la urea, debido
a su mayor costo y menor digestibilidad, pero esta caracterstica tambin
se ralentiza su digestin y as disminuye el riesgo de toxicidad del
amonaco.
La prueba biuret es una prueba qumica de protenas y polipptidos. Se
basa en el reactivo de biuret, una solucin de azul que se vuelve violeta
al entrar en contacto con las protenas, o cualquier sustancia con
enlaces peptdicos. La prueba y el reactivo en realidad no contienen
biuret; que se llaman as porque tanto biuret y protenas tienen la misma
respuesta a la prueba.
La Ninhidrina
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Es un poderoso agente reactivo comn para observar (Castro, J. 1990)
las bandas de separacin de aminocidos por cromatografa o
electroforesis, tambin es utilizada con fines cuantitativos para la
determinacin de aminocidos Reacciona con todos los aminocidos
alfa cuyo pH se encuentra entre 4 y 8, dando una coloracin que vara
de azul a violeta intenso. Este producto colorido (llamado prpura de
Ruhemann) se estabiliza por resonancia, la coloracin producida por la
ninhidrina es independiente de la coloracin original del aminocido.
Esta prueba es positiva tanto para protenas como para aminocidos. en
aquellos casos donde no da positiva la prueba de biuret y da positiva la
de ninhidrina, indica que no hay protenas, pero si hay aminocidos
libres.
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III.- IMPORTANCIA
Debido a que el ser humano esta formado por biomolculas y ya
que estas son de gran importancias se ha propuesto identificar a
una de las principales biomolculas orgnicas como son las
protenas y los componentes de esta los aminocidos, a partir de
sus propiedades fsico-quimicas se tendr en cuenta caractersticas
como el color, para determinar la presencia o no de estos en las
muestras a analisar
Adems de poder identificar la presencia de aminocidos y
protenas dentro de algunas muestras tambin discutiremos el
porqu de la presencia o no de estas en las muestras analizadas.
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IV.-MATERIALES
E. MATERIALES BIOLGICOS:
Leche
saliva
clara de huevo
ajinomoto
Orina de persona diabtica
Almidn de papa
F. MATERIALES NO BIOLGICOS:
Tubos de ensayo
Reactivo Biuret
Reactivo Ninhidrina
Mechero de alcohol
Gotero
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V.-PROCEDIMIENTOS
V.1.-AMINOCIDOS:
En diferentes tubos de ensayo, coocar las muestras en
estudio.(clara de huevo, saliva, ajiomoto, orina de diabtico,
almidn)
Agregar 5 gotas de reactico ninhidrina.
Llevar a calor hasta ebullicion, implementando las normas de
bioseguridad
Dejar enfriar y observar
Observar los cambios de coloracin
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V.4.-PROTEINAS
En diferentes tubos de ensayo, coocar las muestras en
estudio.(clara de huevo, saliva, ajiomoto, leche, orina de
diabtico, carne molida)
Agregar 10 gotas del reactivo biuret
Agitar la mezcla
Observar los cambios de coloracin.
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VI.-RESULTADOS
VI.1.-AMINOCIDOS
MUESTRA PRESENCIA DE COLORACIN
AMINOCIDO
SALIVA SI VIOLETA
LECHE Si AZULACEO
CLARA DE Si VIOLETA
HUEVO
ALMIDN DE No SIN
PAPA COLORACIN
ORINA DE SI VIOLETA
DIABETICO
AJINOMOTO SI VIOLETA
VI.2.-PROTEINAS
MUESTRA PRESENCIA DE COLORACIN
AMINOCIDO
SALIVA SI VIOLETA
LECHE Si LILA
CLARA DE Si VIOLETA
HUEVO
CARNE MOLIDA Si Anillo
xantoproteico
ORINA DE SI VIOLETA
DIABETICO
AJINOMOTO SI VIOLETA
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VII.-COCLUCIONES
VII.1AMINOCIDOS
-Concluimos en la presencia de aminocidos no solo en alimentos de
consumo diario sino tambin dentro de fluidos corporales
VII.2.-PROTEINAS
Las protenas son polmeros de aminocidos y se producen en las
clulas del cuerpo. Las protenas de otros animales y de algunas plantas
son un alimento importante, ya que proporcionan los aminocidos que
son esenciales para el cuerpo en la produccin de las protenas
necesarias.
El estudio de los factores que afectan la solubilidad de las protenas, ha
permitido idear gran cantidad de mtodos para precipitar estas
sustancias de sus soluciones. Estos mtodos tienen su principal
aplicacin en la desproteinizacin de los diversos fluidos biolgicos
(sangre, orina, liquido cefaloraqudeo, etc.) en los cuales se hace
necesaria su interferencia en la determinacin de otras sustancias
presentes en estos medios.
El Reactivo de Biuret es aquel que detecta la presencia de protenas,
pptidos cortos y otros compuestos con dos o ms enlaces peptdicos en
sustancias de composicin desconocida.
La reaccin xantoproteica es un mtodo que se puede utilizar para
determinar la cantidad de protena soluble en una solucin, empleando
cido ntrico concentrado. La prueba da resultado positivo en aquellas
protenas con aminocidos portadores de grupos aromticos,
especialmente en presencia de tirosina.
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LPIDOS, AMINOCIDOS Y PROTEINAS N1
BIBLIOGRAFIA
D.P DE ROBERTIS, Biologa Celular y Molecular, 12 edicin.
GERALD KARP, Biologa Celular y Molecular, 4 Edicin.
HARPER, Bioqumica Ilustrada, Robert K. Murria, Darryl K. Granner, 16
edicin traducida de la 26 edicin. Editorial manual moderno.
JOSE LAGUNA, Bioqumica de Laguna, 6 edicin.
LINKOGRAFIA
http://www.wikipedia.org
http://www.monografias.com
http://www.ehu.es/biomoleculas/ENZ/ENZ1.htm
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