PRACTICAS DE MICROBIOLOGIA II UNIDAD
1. AISLAMIENTO Y OBSERVACIN DE STAPHYLOCOCCUS
Material y procedimiento:
Los productos a partir de los cuales es posible aislar este germen puede
ser: pus de diverso origen, secreciones de lesiones superficiales o profundas,
esputo, heces, sangre (por hemocultivo). Tambin se investiga
staphylococcus en alimentos, bebidas, en material hospitalario, ambientes y
secreciones faringes y nasal.
Examen directo colorearon Gram extensiones de la muestra elegida.
Observar que el germen es un coco Gram +, que se presenta aislado, en
diplococos en racimos. Carece de esporas y de capsula.
Figura 1: observacin microscpica de staphylococcus aureus
Aumento: 100 X
Forma: Cocos
Arreglo: Grupos
PRUEBAS DE PATOGENICIDAD IN VITRO
INTERPRETACIN:
El Test de la DNasa se utiliza para determinar la actividad de la desoxirribonucleasa de los
microorganismos, particularmente del staphylococcus aureus.
POSITIVO
NEGATIVO
DISCUSIONES GENERALES
Cocos Gram (+). La mayor parte de los estafilococos tiene un dimetro de 0.5-1 m.
Anaerobios facultativos. Crecen en condiciones con elevada concentracin de NaCl
(10%) y temperatura 18-40 C.
Su medio de cultivo es el agar sangre.
CUESTIONARIO
A. A que es debido el halo claro que se observa alrededor de la colonia de
Staphylococcus en el agar sangre?
El halo claro que se observa se debe a la hemolisis que ocasiona la destruccin de los
glbulos rojos
B. Qu significacin tienen la prueba de la coagulasa como medio de diferenciar
especies?
El microorganismo ms importante por su patogenicidad es Staphylococcus aureus que
se caracteriza por poseer una enzima que coagula el plasma: la coagulasa. Esta prueba
permite distinguir a S. aureus del resto de especies de estafilococos que aparecen
clnicamente, que no poseen dicha enzima. Si es coagulasa positivo, se produce una
turbidez alrededor de la colonia, debida a la coagulacin del plasma.
C. Es posible hacer el diagnostico de S. aureus por la coloracin de Gram?
Si, a las colonias ms aisladas en la placa se le realiza una tincin de Gram, donde se
observa al microscopio cocceas Gram positivo en racimo.
La tincin de Gram es usada para clasificar bacterias sobre la base de sus formas, tamaos,
morfologas celulares y reaccin Gram (color). A nivel del laboratorio es til como test
para un rpido diagnstico presuntivo de agentes infecciosos, tanto en muestras como
en cultivos en crecimiento, y adicionalmente sirve para valorar la calidad de la muestra
clnica, pero para un mejor diagnstico es necesario realizar pruebas bioqumicas.
D. Qu muestras examinara en el caso de surgir una epidemia de Staphylococcus en
una sala de nios?
Secreciones farngeas.
2. AISLAMIENTO Y OBSERVACIN DE ESTREPTOCOCOS
Material y procedimientos:
La muestra y su procedencia: los productos a partir de los cuales se puede aislar el
estreptococos, entre otros, secreciones de lesiones drmicas (imptigo y ectima), esputo,
orina, lesiones amigdalianas y farngeas, procesos pticos y mastoideos.
Se le asla con frecuencia de loquios (en infecciones puerperales) y en muchas otras
muestras.
Examen directo: colorear con Gram y observar que el germen es Gram positivo, dispuesto
en cadenas de diplococos sobre todo cuando pro de medios de fluidos. No capsulado (en
fresco es inmvil)
Aislamiento:
Emplear agar sangre, en placas caldo thioglicolato.
Figura 2: Observacin microscpica de estreptococos
Aumento: 100 X
Coloracin: Gram +
OBSERVACIN DE STREPTOCOCUS PYOGENES
Streptococcus pyogenes es una bacteria Gram-positiva que crece en cadenas largas.
S. pyogenes expresa el Antgeno grupo A de la clasificacin de Lancefield en sus
paredes celulares y hace hemlisis del tipo betahemlisis cuando se cultiva en agar
sangre.
S. pyogenes origina diversas enfermedades supurativas y no supurativas. Aunque
este microorganismo constituye la causa ms frecuente de faringitis bacteriana, la
fama de estos microorganismos se debe a las enfermedades potencialmente
mortales provocadas por estas bacterias comedoras de carne, como evidencian las
publicaciones que han inundado la literatura cientfica como la prensa
sensacionalista.
S. pyogenes tpicamente produce grandes zonas (halo) de beta-hemlisis, con
completa rotura de eritrocitos y la recuperacin de hemoglobina, por todo ello se le
conoce tambin por estreptococo beta-hemoltico del grupo A (o sus siglas en ingls:
GAS). Puede ser encapsulado por lo que es resistente a la fagocitosis, posee
numerosas exotoxinas. Se trata de un microorganismo no esporulado (no produce
esporas).
Figura 3: observacin microscpica de Streptococcus pyogenes
Aumento: 100 X
Coloracin: Gram +
Forma y agrupacin: Cadenas de diplococos, cadenas largas
CUESTIONARIO
a) Qu tipo de agrupacin adopta el Estreptococos?
Cadenas de diplococos, cadenas largas.
b) Qu significacin atribuye usted a la presencia de Streptococcus en faringe de
personas aparentemente normales?
Son portadores sanos y por lo tanto depende del grupo de Streptococcus al que
pertenezca por lo que pertenecen o se encuentra mayormente en la faringe
c) Qu diferencias bsicas podra usted sealar entre las colonias de Streptococcus
y la de Staphylococcus?
CARACTERISTICAS STREPTOCOCCUS STAPHYLOCOCCUS
FORMA discoide redondas
TAMAO pequeas grandes
SUPERFICIE rugosa Lisa
COLOR translucidas Amarillo brillante
CATALASA negativa positiva
AGRUPACIONES cadenas racimos
3. AISLAMIENTO Y OBSERVACIN DE ENTEROBACTERIAS: ESCHERICHIA,
ALMONELLA, SHIGUELLA
BIBLIOGRAFA
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Pelezar, M.J. Reid, R.D y Chan, E.C.S. (2000). Microbiologia. 6 ed. Me Graw H. mexico.
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