ISSN 1669-6859

Museo de Farmacobotnica Facultad de Farmacia y Bioqumica

Juan A. Domnguez Universidad de Buenos Aires

Ricinus communis L. (Euphorbiaceae)

Dominguezia Vol. 31(2) - Diciembre de 2015

Ciudad Autnoma de Buenos Aires - Repblica Argentina
 ISSN 1669-6859
Propietario
Facultad de Farmacia y Bioqumica Museo de Farmacobotnica
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Vol. 31(2) - 2015

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Ricinus communis L. (Euphorbiaceae)

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Se termin de editar en diciembre de 2015.

 Vol. 31(2) - 2015

ndice de contenido

Plantas empleadas en medicina popular en la provincia de Jujuy. Departamento Capital

y alrededores ............................................................................................................................................ 5
Raquel A. Romeo

Anlisis microgrfico y fitoqumico de muestras comerciales de canela ......................................11

Roberto Souto da Rosa, Romina Numata, Mara Elena Marovic, Judith Montenegro, Alberto A. Gurni,
Ana Rugna, Graciela Bassols

Alteraciones anatmicas en epidermis de hojas infectadas de Phoradendron bathyoryctum

Eichler (Viscaceae) ..................................................................................................................................17
Alejandro F. Vugin, Graciela B. Bassols, Beatriz G. Varela

Composicin de los aceites esenciales de especies de Verbena nativas de la provincia

de Buenos Aires bajo cultivo . ................................................................................................................25
Martn I. Rodriguez Morcelle, Ana La Rossi, Martha Gattuso, Nancy M. Apstolo

Fraccin aislada de Ricinus communis L. (Euphorbiaceae) en el control del biodeterioro

de documentos patrimoniales ................................................................................................................33
Jos de la Paz Naranjo, Sandra Gmez de Saravia, Patricia Battistoni, Mara Larionova, Patricia Guiamet
 Vol. 31(2) - 2015

Index

Plants Used in Folk Medicine in the Province of Jujuy. Department Capital and Surroundings . ... 5
Raquel A. Romeo

Micrographic and Phytochemical Analysis of Commercial Samples of Cinnamon .......................11

Roberto Souto da Rosa, Romina Numata, Mara Elena Marovic, Judith Montenegro, Alberto A. Gurni,
Ana Rugna, Graciela Bassols

Anatomical Changes in Epidermis of Infected Leaves of Phoradendron bathyoryctum

Eichler (Viscaceae) ..................................................................................................................................17
Alejandro F. Vugin, Graciela B. Bassols, Beatriz G. Varela

Essential Oils Composition of Cultivated Native Verbena Species of Buenos Aires Province .......25
Martn I. Rodrguez Morcelle, Ana La Rossi, Martha Gattuso, Nancy M. Apstolo

Isolated Fraction of Ricinus Communis L. in the Control of Biodeterioration

of Heritage Documents . ..........................................................................................................................33
Jos de la Paz Naranjo, Sandra Gmez de Saravia, Patricia Battistoni, Mara Larionova, Patricia Guiamet
Fecha de recepcin: 12 de agosto de 2015
Fecha de aceptacin: 1 de diciembre de 2015 Dominguezia - Vol. 31(2) - 2015

Plantas empleadas en medicina popular en la provincia de Jujuy.

Departamento Capital y alrededores

Raquel A. Romeo

Facultad de Ciencias Agrarias, Universidad Nacional de Jujuy. Alberdi 47. (4600) San Salvador de Jujuy, Repblica
Argentina.
Autor a quien dirigir la correspondencia: [email protected].

Compendio de tesis
Lugar y fecha de aprobacin de la tesis:
Facultad de Farmacia y Bioqumica, Universidad de Buenos Aires, 18 de diciembre de 2014.

Resumen

Las plantas medicinales constituyen un recurso valioso en los sistemas de salud en los pases en desarrollo.
En la Argentina, las provincias de Jujuy, Salta y Tucumn se destacan por presentar la mayor riqueza en
plantas medicinales. Los objetivos del trabajo son conocer la flora medicinal empleada en la provincia de
Jujuy, con especial referencia al departamento Capital y alrededores, y establecer parmetros para el control
de calidad con el objetivo de asegurar la legitimidad de los productos comercializados al estado de droga
cruda. Los materiales estudiados comprenden los ejemplares herborizados y las muestras comerciales de las
especies relevadas. Para obtener la informacin de las plantas medicinales se emplearon tcnicas cualitativas:
observacin directa, entrevistas abiertas y semiestructuradas. Se realiz la determinacin botnica de las
especies y la descripcin exomorfolgica de la parte usada. Para los estudios anatmicos las tcnicas usadas
fueron: determinacin de almidones y lpidos, disociacin leve para hojas, y para tallo, disociacin fuerte y
transcorte. La clave elaborada con los parmetros que resultaron del anlisis de los caracteres anatmicos
de las 21 especies relevadas, podra ser de utilidad para su identificacin al realizar el control de calidad
botnico. Los parmetros anatmicos relevantes fueron los tricomas y los cristales de oxalato de calcio.

Plants Used in Folk Medicine in the Province of Jujuy.

Department Capital and Surroundings

Summary

Medicinal plants are valuable resources in health systems within developing countries. In Argentina, the
provinces of Jujuy, Salta, and Tucumn stand out for showing the greatest richness in medicinal plants. The
aims of this work are to improve the knowledge of medicinal flora used in the province of Jujuy, mainly

Palabras clave: caracteres exomorfolgicos - caracteres anatmicos - clave.

Key words: exomorphological characters - anatomical characters - key.


Romeo

in the capital area and surroundings, and to establish parameters for botanical quality control to ensure
the legitimacy of the products sold as crude drug. The studied materials include herbarium specimens and
commercial samples of the relieved species. In order to obtain the data, qualitative techniques were used:
direct observation, unstructured and semi-structured interviews. Botanical identification of the species
was performed, as well as the exomorphological description of the used part of the plants. The applied
techniques for anatomical studies were: starch and lipids determination, slight disaggregation for leaves,
and strong disaggregation and cross section for stems. The elaborate key parameters that resulted from
the analysis of the anatomical characters of the 21 relieved species may be used for identification when
performing botanical quality control. The most relevant anatomical features were trichomes and crystals
of calcium oxalate.

Introduccin Materiales

Las plantas medicinales constituyen un recurso va- Los materiales estudiados comprenden los ejemplares
lioso en los sistemas de salud en los pases en desa- herborizados y las muestras comerciales pertenecientes
rrollo. En la bsqueda de estas plantas, la herramien- a: Acacia caven (Molina) Molina var. caven (Fabaceae);
ta ms importante es la informacin etnobotnica Ageratum conyzoides L.(Asteraceae); Chenopodium
obtenida a partir del conocimiento tradicional sobre mandonii (S. Watson) Aellen (Chenopodiaceae);
su uso. La Argentina, debido a su extenso territorio, Cuphea calophylla Cham. & Schltdl. ssp. mesostemon
presenta diversidad de suelos, climas y condiciones (Koehne) Lourteig (Lythraceae); Cyclolepis genistoides
que hacen posible contar con un verdadero arsenal D. Don (Asteraceae); Disphania ambrosioides
fitoteraputico (Njera, 1983), y se destacan las (Chenopodiaceae); Geoffroea decorticans (Gillies
provincias de Jujuy, Salta y Tucumn por presentar ex Hook & Arn.) Burkart (Fabaceae); Heliotropium
la mayor riqueza en plantas medicinales (Barboza curassavicum L. var. argentinum I.M. Johnst.
y col., 2009). (Boraginceae); Jodina rhombifolia (Hook. & Arn.)
Los objetivos del trabajo son conocer la flora Reissek. (Cervantesiaceae); Leonurus japonicus
medicinal empleada en la provincia de Jujuy, con Houtt. (Lamiaceae); Myrcianthes pungens (O.Berg.)
especial referencia al departamento Capital y alre- D. Legrand Myrtaceae; Myrcianthes pseudomato
dedores, y establecer parmetros para el control de (D. Legrand) McVaugh (Myrtaceae); Ocyroe
calidad, y as asegurar la legitimidad de los productos armata (Wedd.) Bonifacino (Asteraceae); Prosopis
comercializados al estado de droga cruda. ruscifolia Griseb. (Fabaceae); Schinus areira L.
(Anacardiaceae); Solanum palitans C. V. Morton
(Solanaceae); Sphaeralcea bonariensis (Cav.) Gr.
Materiales y mtodos (Malvaceae); Tagetes minuta L. (Asteraceae); Tessaria
absinthioides (Hook. & Arn.) DC. (Asteraceae);
rea de estudio Vassobia breviflora (Sendt.) Hunz.(Solanaceae);
Zanthoxylum coco Gillies ex Hook. f. & Arn.
La provincia de Jujuy est situada en el extremo (Rutaceae).
norte de la Argentina; limita al norte con Bolivia; al Los ejemplares coleccionados se encuentran
oeste, por medio de la cordillera de los Andes, con depositados en el Museo de Farmacobotnica
Chile; al sur y este con la provincia de Salta. Tiene Juan A. Domnguez de la Facultad de Farmacia
672.260 habitantes (INDEC, 2010). El departamento y Bioqumica, de la Universidad de Buenos Aires.
Capital (actualmente dividido en dos departamentos: Las muestras comerciales se depositaron en el
Dr. Manuel Belgrano y Palpal) est ubicado al sur Muestrario de Plantas Medicinales de la Ctedra de
de la provincia. La ciudad de San Salvador de Jujuy, Botnica Sistemtica y Fitogeografa de la Facultad
capital de la provincia, tiene 278.336 habitantes de Ciencias Agrarias, Universidad Nacional de Jujuy
(INDEC, 2010). (M-CBSF).


 Dominguezia - Vol. 31(2) - 2015

Mtodos DD. Arenas cristalinas ausentes. Pelos eglandu-

lares con otros caracteres.
Se realiz el relevamiento de las especies y se ad- E. Rosetas presentes, acompaadas por drusas,
quirieron los productos expendidos en los mercados cristales simples romboidales pequeos. Apa-
y ferias regionales. Los ejemplares coleccionados se rato estomtico paractico.
prepararon para el herbario y se realiz la determi- 8. Jodina rhombifolia
nacin botnica de las especies empleando claves y EE. Rosetas ausentes. Drusas y cristales con
bibliografa adecuada, y se efectu la actualizacin otros caracteres. Aparato estomtico nunca
de sus nombres botnicos. paractico.
Para la obtencin de la informacin respecto a las F. Drusas y cristales prismticos presentes.
especies relevadas se emplearon tcnicas cualitativas: G. Pelos glandulares peltados. Presencia de
observacin directa, y entrevistas abiertas y semiestruc- cavidades secretoras.
turadas a vendedores callejeros, de herboristeras, ferias 19. Zanthophylum coco
y mercados, informantes calificados y farmacias. GG- Pelos glandulares y cavidades secreto-
Para los estudios anatmicos se emplearon las ras ausentes.
siguientes tcnicas: determinacin de almidones (con 13. Prosopis ruscifolia
solucin de Lugol) y de lpidos (con solucin saturada FF. Solo drusas presentes.
alcohlica de Sudn III). Para las hojas: disociacin G. Aparato estomtico cicloctico. Epi-
leve (DAmbrogio de Argeso, 1986; Normas IRAM, dermis foliar sin pelos eglandulares ni
1993). Para el tallo: disociacin fuerte segn el M- glandulares.
todo de Boodle (DAmbrogio de Argeso, 1986; 1. Schinus areira
Normas IRAM, 1993) y transcorte de tallo. GG. Aparato estomtico anomoctico. Epi-
dermis foliar con pelos eglandulares.
H. Pelos eglandulares no ramificados bice-
Resultados y discusin lulares y tetracelulares. Pelos glandulares
ausentes.
De la aplicacin de las tcnicas cualitativas se obtu- 15. Cuphea calophylla ssp. mesostemon
vo informacin de 148 plantas que integran la flora HH. Pelos eglandulares ramificados pluri-
medicinal de Jujuy, de las que se seleccionaron 21 celulares y pelos glandulares con pie corto
especies para realizar el anlisis exomorfolgico y y cabeza pluricelular.
anatmico. Para esta seleccin se tuvo en cuenta el 21. Vassobia breviflora
hecho de ser, en algunos casos, especies medicinales CC. Cristales ausentes.
poco conocidas y en otros, por presentar usos an D. Cavidades secretoras esquizolisgenas
no citados. Los parmetros obtenidos del anlisis presentes.
realizado se emplearon para la elaboracin de la E. Pelos eglandulares simples unicelulares.
clave que se expone a continuacin. 17. Myrcianthes pungens
EE. Pelos eglandulares simples unicelulares
ausentes.
Clave segn caracteres anatmicos 18. Myrcianthes pseudomato
DD. Cavidades secretoras esquizolisgenas
A. Hojas, tallos. ausentes.
B. Hojas. E. Epidermis foliar con pelos eglandulares o
C. Cristales presentes. glandulares solamente.
D. Arenas cristalinas presentes. Pelos eglandu- F. Pelos eglandulares.
lares pluricelulares falciformes. G. Pelos eglandulares pluricelulares falcados
E. Pelos glandulares con pie corto pluricelular con clula apical en punta.
y cabeza grande piriforme. 6. Tessaria absinthioides
10. Disphania ambrosioides GG. Pelos eglandulares pluricelulares sim-
EE. Pelos glandulares ausentes. ples nunca falcados.
9. Chenopodium mandonii 2. Ageratum conyzoides


Romeo

FF. Pelos glandulares. glandulares con pie pluricelular y cabeza globosa

G. Pelos glandulares capitados uniseriados grande.
y biseriados. 9. Chenopodium mandonii
5. Tagetes minuta
GG. Pelos glandulares con otros caracteres.
H. Pelos glandulares con pie muy corto Estudio morfoanatmico de las especies
tricelular y amplia cabeza secretora. seleccionadas
7. Heliotropium curassavicum L.
var. argentinum De las 21 especies estudiadas se describen, a modo
HH. Pelos glandulares con pie unicelular de ejemplo, Cyclolepis genistoides D. Don y Jodina
y cabeza pluricelular. rhombifolia (Hook. & Arn.) Reissek. Para su seleccin
20. Solanum palitans se tuvieron en cuenta los caracteres anatmicos que
EE. Epidermis foliar con pelos eglandulares y las representan, como la presencia de esclereidas en
glandulares. sus variadas formas y miembros de vasos helicoidales
F. Pelos eglandulares largos y flexuosos. con colas cortas en sus extremos para la primera, y de
4. Ocyroe armata drusas y rosetas en la segunda especie citada.
FF. Pelos eglandulares con otros caracteres.
G. Pelos eglandulares no ramificados, bice-
lulares y tricelulares, algunos curvados. Cyclolepis genistoides D. Don
14. Leonurus sibiricus
GG. Pelos eglandulares ramificados, Perteneciente a la familia Asteraceae es conocida
estrellados. como palo azul. Sinonimia: Gochnatia genistoides
16. Sphaeralcea bonariensis (D. Don.) Hook. & Arn. Distribucin: Paraguay y Ar-
BB. Tallos. gentina (Salta, Tucumn; Catamarca, La Rioja, San
C. Granos de almidn ausentes. Esclereidas de Juan, Crdoba, Santa Fe, Buenos Aires, La Pampa,
diferentes formas. Miembros de vaso helicoidales San Luis, Mendoza, Neuqun, Ro Negro).
con cola corta. Fibras largas.
3. Cyclolepis genistoides Caracteres exomorfolgicos
CC. Granos de almidn presentes. Corteza. Bra-
quiesclereidas. Miembros de vaso ausentes. Fibras Arbusto hasta de 2,5 m de altura. Ramas rgidas,
cristalferas largas. costadas, tomentosas, algo espinescentes. Hojas
11. Acacia caven var. caven oblongo-lanceoladas, cubiertas de pelos malpigiceos
AA. Flores, flores y frutos incoloros, caedizas. Captulos cortamente pedicela-
B. Flores. dos. Involucro con filarias glabras. Flores amarillas,
C. Piezas florales glabras. isomorfas; en plantas hermafroditas con corola tu-
16. Sphaeralcea bonariensis bulosa, y en plantas femeninas con corola tubuloso-
CC. Piezas florales pubescentes. filiforme. Papus amarillento (Cabrera, 1978).
D. Pelos eglandulares largos ornamentados,
unicelulares, bicelulares y setosos. Usos
15. Cuphea calophylla ssp. mesostemon
D D . S i n p e l o s e g l a n d u l a r e s l a rg o s La parte area se emplea como diurtico, antirreu-
ornamentados. mtico, antitusivo, para el tratamiento de clicos
12. Geoffroea decorticans renales y hepticos (Barboza y col., 2009); la madera
BB. Flores y frutos. se emplea para el tratamiento de afecciones hepticas
C. Pelos glandulares vermiformes; pelos glandu- (Zardini, 1984).
lares con cabeza grande y pie corto.
10. Disphania ambrosioides Caracteres anatmicos
CC. Pelos glandulares con pie corto ensanchado
y cabeza globosa grande. Pelos glandulares con El disociado fuerte de tallo permiti observar
pie pluricelular largo y cabeza chica y pelos esclereidas de diferentes formas. Fibras largas.


 Dominguezia - Vol. 31(2) - 2015

Miembros de vasos helicoidales, colas cortas en y espinas de menor tamao en cada uno de los 2
sus extremos. vrtices restantes (Zapater, 1993). Inflorescencia
en cimas axilares. Flores pequeas, con perigonio
Sber sepaloide de color verdoso-amarillento. Fruto
drupceo de color rojo, con pseudocarpio rugoso,
El transcorte de tallo permiti observar las siguien- dividido en cinco sesiones caedizas a la madurez
tes caractersticas: seccin de contorno circular (Zapater, 1993).
levemente sinuoso debido a la presencia de costillas
poco conspicuas. En las costillas presenta una capa Usos
de clulas epidrmicas. En la subepidermis aparecen
grupos de clulas de tipo parenquimtico incoloras Las hojas se usan como antidiarreico, antidisentri-
muy notorias, que limitan hacia el interior del corte co, antiinflamatorio de vas respiratorias, abortivo,
con grupos de contorno casi circular de fibras muy hipotensivo, dolores articulares y musculares y
numerosas. Por debajo de esas fibras aparecen algu- digestivo (Barboza y col., 2009; Del Vitto y col.,
nas clulas parenquimticas similares a las que se 1997; Lahitte y col., 1998; Carrizo y col., 2002;
observan en la regin subepidrmica. Luego apare- Chiffa y Ricciardi, 2004). En Jujuy se registr el
cen los tejidos conductores: el floema hacia la epi- uso de las hojas nicamente para el tratamiento de
dermis, formado por clulas pequeas y por debajo, afecciones urinarias.
el xilema, constituido en su mayor parte por fibras.
Si se compara con las fibras, se observan escasos Caracteres anatmicos
elementos conductores. La mdula est constituida
por clulas de paredes engrosadas, con punteaduras. Disociado leve de hojas. Clulas epidrmicas poli-
En los espacios intercostales aparece por debajo de dricas con paredes lisas. Aparato estomtico parac-
la epidermis, un parnquima (aparentemente colo- tico. Cristales simples, romboidales, pequeos.
roflico, con gran contenido celular) y por debajo
de este parnquima, los tejidos conductores, como Drusas y rosetas. Fibras
en las costillas. Por encima del floema se pueden
observar pequeos grupos de fibras aislados. No Ruiz y col. (2007) citan la presencia de cristales
presenta almidn segn el resultado de las pruebas romboidales en epidermis y de cristales romboidales
histoqumicas realizadas. y drusas en el mesfilo esponjoso, caracteres coinci-
dentes con los observados en el material estudiado.
Se destaca la presencia de drusas y rosetas.
Jodina rhombifolia (Hook. & Arn.) Reissek

Perteneciente a la familia Cervantesiaceae (antes Conclusiones

Santalaceae) es conocida como sombra de toro,
quiriln, peje, Sinonimia: Jodina ruscifolia La clave elaborada con los parmetros que resulta-
Hook. & Arn. Distribucin: Brasil, Paraguay, Uru- ron del anlisis de los caracteres anatmicos de las
guay y Argentina (Jujuy, Salta, Tucumn, Catamarca, 21 especies seleccionadas, podra ser usada para su
Santiago del Estero, Crdoba, La Pampa, San Juan, identificacin mediante el control de calidad botni-
Mendoza, Ro Negro, San Luis, Santa Fe, Buenos co. Los parmetros anatmicos relevantes fueron los
Aires, Chaco, Corrientes, Entre Ros). tricomas y los cristales de oxalato de calcio.

Caracteres exomorfolgicos
Referencias bibliogrficas
rbol perennifolio de hasta 5 m de altura, ramoso.
Hemiparsito de races de tala (Celtis sp.), end- Barboza, G.E.; Cantero, J.J.; Nez, C.; Pacciaroni,
mico de Amrica del Sur. Hojas simples, verde A.; Ariza Espinar, L. (2009). Medicinal Plants: A
oscuro brillante, lminas rmbicas, coriceas, con general review and a phytochemical and ethnop-
nervio central notorio prolongado en fuerte espina harmacological screening of the native Argentine


Romeo

Flora. Kurtziana 34(1-2). Volumen especial: Repblica Argentina. Censo 2010. En lnea
Plantas Medicinales: 7-365. <http://www.censo2010.indec.gov.ar> [Consulta:
Cabrera, A.L. (ed.) (1978) Flora de la provincia 15/09/2014].
de Jujuy. Colec. Cient. INTA XIII(10):1-726 Instituto Argentino de Normalizacin y Certifica-
(Compositae). cin (1993). Normas IRAM Nmeros 37500 y
Carrizo, E.; Palacio, M.; Roic, L. (2002). Plantas 37501.
de uso medicinal en la flora de los alrededores Lahite, H.B.; Hurrell, J.A.; Jankowski, L.; Haloua,
de la ciudad de Santiago del Estero (Argentina). P.; Mehltreter, K. (1998). Plantas medicinales
Dominguezia 18(1):26-35. rioplatenses. Ed. L.O.L.A., Buenos Aires.
Chiffa, C.A.; Ricciardi, A. (2004). Evaluacin et- Njera, M.T. (1983). La herboristera en la Rep-
nofarmacolgica de plantas usadas popularmente blica Argentina. Acta Farm. Bonaerense (2)1:
por las comunidades del Chaco argentino. Re- 55-9.
sumen expandido VII Simposio Argentino y XI Ruiz, A.I.; Mercado, M.I.; Ponessa, G. (2007). Mor-
latinoamericano de Farmacobotnica. Buenos fologa y anatoma foliar de Jodina rhombifolia
Aires. Argentina. (Hook. & Arn.) Reissek (Santalaceae). Lilloa
DAmbrogio de Argeso, A. (1986). Manual de 44(1-2): 75-83.
tcnicas en histologa vegetal. Hemisferio Sur. Zapater, M.A. (1993). Santalaceae. Flora del Valle
Buenos Aires: 43-57. de Lerma. Aportes Botnicos de Salta. Ser. Flora.
Del Vitto, L.A.; Petenatti, E.M.; Petenatti, M.E. 2(13): 6-8.
(1997). Recursos herbolarios de San Luis (Rep- Zardini. E. M. (1984). Etnobotnica de compues-
blica Argentina). Primera parte: plantas nativas. tas argentinas con especial referencia a su uso
Multequina 6:49-66. farmacolgico (Primera parte). Acta Farm.
Instituto Nacional de Estadstica y Censos (INDEC). Bonaerense 3: 77-99.

10
Fecha de recepcin: 28 de agosto de 2014
Fecha de aceptacin: 22 de diciembre de 2014 Dominguezia - Vol. 31(2) - 2015

Anlisis microgrfico y fitoqumico de muestras comerciales de canela

Roberto Souto da Rosa, Romina Numata, Mara Elena Marovic, Judith Montenegro,
Alberto A. Gurni, Ana Rugna, Graciela Bassols*

Ctedra de Farmacobotnica, Facultad de Farmacia y Bioqumica, Universidad de Buenos Aires, Junn 954, CABA,
(1113), Buenos Aires, Argentina.
*
Autor a quien dirigir la correspondencia: [email protected]

Resumen

Cinnamomun verum J.S. Presl (Lauraceae) (canela) es una especie aromtica empleada con frecuencia
en alimentacin. Se utiliza la corteza desprovista del sber y con una concentracin no menor de 1,3% de
aldehdo cinmico. Tambin se emplea en medicina por sus propiedades carminativa, antiulcerosa, estomacal,
antivomitiva y estimulante. Estas propiedades se deben a la presencia de aceites esenciales. El objetivo de este
trabajo es comprobar la calidad de las muestras comercializadas en la ciudad de Buenos Aires. Se adquirieron
muestras del comercio (en polvo, trozadas y enteras). Se compararon con descripciones bibliogrficas. Se
analizaron mediante reduccin a polvo, disociacin con OHNa al 5%, reacciones histoqumicas y determi-
nacin cualitativa de aceites esenciales. En el anlisis microgrfico se observ la presencia de esclereidas,
radios floemticos, fibras y almidn en todas las muestras. Solo en las muestras enteras y trozadas se hall
sber. En cuanto a la determinacin de aceites esenciales las muestras enteras y trozadas presentaron aldehdo
cinmico, eugenol y limoneno, entre otros, mientras que en las muestras en polvo no se detect aldehdo
cinmico. Las muestras comerciales en polvo cumplen con la monografa de la Farmacopea Argentina 7
edicin, en cuanto al anlisis microgrfico. La ausencia de aldehdo cinmico en estas muestras se podra
deber a las operaciones unitarias en la obtencin del polvo. Las muestras enteras y trozadas presentan sber,
el cual segn la definicin, no debera encontrarse aunque su perfil cromatogrfico se corresponde con los
componentes descriptos en la bibliografa. Sobre la base de los resultados obtenidos se puede concluir que
ninguna de las muestras analizadas cumple estrictamente los requisitos de Farmacopea Argentina exigidos
para la denominacin de canela de Ceiln.

Micrographic and Phytochemical Analysis of Commercial Samples

of Cinnamon

Summary

Cinnamomun verum J.S. Presl (Lauraceae) (cinnamon) is an aromatic species used in feeding. The bark
is used without cork and with a concentration not less than 1.3% of cinnamaldehyde. In medicine it is
used as a carminative, anti-ulcer, stomachic, antiemetic, and stimulant. These properties are due to the
presence of essential oils. The aim of this study is to check the quality of the samples sold in Buenos Aires

Palabras clave: Cinnamomun verum - canela - control de calidad.

Key words: Cinnamomun verum - cinnamon - quality control.

11
Souto da Rosa y col..

city. Commercial samples were acquired (in powder, whole, and in fragment). They were compared with
bibliographic descriptions. They were analyzed by pulverizing, disgrigation with 5% NaOH, histochemical
reactions, and qualitative determination of essential oils. The micrographic analysis showed the presence of
sclereids, radios phloem, fibers, and starch in all samples. Only in whole and fragmented samples cork was
found. Regarding to the determination of essential oils, fragmented and whole samples presented cinnamic
aldehyde, eugenol, and limonene, among others, while in powdered samples cinnamic aldehyde was not
found. Commercial powder samples satisfy the Monograph of FNA VII edition about micrographic analysis.
Lack of cinnamic aldehyde in these samples could be due to the unit operations in the powder production.
Whole and fragmented samples presented cork, which should not be found, according to the pharmacopeia
definition, even though its chromatographic profile corresponds with the described components in the lit-
erature. Based on the results, it can be concluded that none of the tested samples strictly satisfies the FNA
VII edition requirements for Ceylan cinnamon.

Introduccin Foto 1.- Hoja de Cinnamomum verum

Segn la Farmacopea Argentina 7 edicin (2005),

la canela est constituida por la corteza deseca-
da, libre de sber y del parnquima subyacente,
de los tallos de Cinnamomun verum J.S. Presl.
(Lauraceae) (Cinnamomun zeylanicum Ness) (Far-
macopea Argentina, 2005). El Cdigo Alimentario
Argentino (2010) aclara que debe contener no me-
nos de 1,2% de aceite esencial y que la mayora
porcentual de la esencia debe pertenecer a aldehdo
cinmico (65% -75%).
La canela es una especie aromtica empleada
con frecuencia en alimentacin, (pastelera, postres
y bebidas calientes), tanto por su fragancia dulce
como por su sabor almendrado. En medicina se la
emplea por sus propiedades carminativa, antiulce- Khler, 1897.
rosa, estomacal, antivomitiva y estimulante. Estas
propiedades se deben a la presencia de aceites Se utiliza la parte interior de la corteza de las
esenciales, principalmente el aldehdo cinmico y ramas ms jvenes. La calidad de la canela de-
el eugenol. pende principalmente de la edad de las ramas de la
Para fines teraputicos solo se utiliza los extrac- que se ha sacado; cuanto ms jvenes son las ramas,
tos de la corteza porque presentan ms de 4% de mejor es su calidad. La corteza se cosecha de rboles
los aceites esenciales, mientras que de las hojas se jvenes de menos de 6 aos, y en Ceiln (actual Sri
puede obtener menos del 0,5% y prcticamente Lanka), de retoos de rboles talados entre los 18 y
solo contienen eugenol (70% - 95%). As tambin 36 meses de edad (Claus y Tyler, 1968).
ocurre con los extractos de las races que contienen Las partes cortadas de la canela se secan y
casi exclusivamente alcanfor (60%) (Barceloux, poco a poco se elimina la corteza ms externa, y a
2008). medida que se secan adquieren el clsico aspecto
Los rboles silvestres de canela raras veces ex- color castao. La corteza se corta transversal y
ceden una altura de 9 metros, las hojas son verdes, longitudinalmente, luego se arranca y se raspa para
coriceas y lustrosas; las flores se presentan en desprender el sber (Claus y Tyler, 1968).
panculos terminales y el fruto es ovoide y carnoso Una forma de presentacin comercial de la ca-
(Foto 1). nela es en trozos acanalados, hasta de un metro de

12
 Dominguezia - Vol. 31(2) - 2015

longitud y 1 a 2 cm de dimetro formados por lminas pequea porcin del material vegetal se coloc en
de corteza hasta de un milmetro de espesor, despo- una solucin de NaOH al 5% y se llev a ebullicin
jadas de las porciones ms externas, enrolladas una durante 5 minutos. Se filtr. Se lav con agua desti-
sobre la otra; su color es amarillo pardusco, de olor lada y se observ con el microscopio; d) observacin
caracterstico, de sabor agradable, aromtico, algo con luz polarizada; se utiliz un microscopio Carl
picante y dulzn, conocida como canela en rama Zeiss Axioskop 2 Plus sobre los materiales en polvo;
(Foto 2). La superficie externa es lisa, parda y amari- e) determinacin cualitativa de aceites esenciales
llenta con cicatrices redondeadas que corresponden (Wagner, 2001); se realiz una TLC cualitativa con
al punto de insercin de las hojas y brotes axilares, y los siguientes parmetros: fase mvil, tolueno-ace-
con largas y sinuosas estras longitudinales. tato de etilo (93:7); fase fija, silicagel 60F254 en
placa; estndares: aldehdo cinmico, eugenol, citral
Foto 2.- Canela en rama y limoneno; deteccin: UV-254 nm.

Resultados

En el anlisis microgrfico de las muestras troza-

das, en polvo y en rama se observ la presencia de
clulas ptreas (esclereidas) irregulares de lumen
ancho y paredes gruesas (Foto 3), radios floem-
ticos con clulas parenquimticas (Foto 4), fibras
de longitud variables casi siempre sencillas y de
paredes ligeramente lignificadas (Foto 5), grnulos
de almidn redondeados sencillos o compuestos
de hilio excntrico (Foto 6) y pequeos cristales
aciculares de oxalato de calcio (Foto 7), todos ca-
Otra forma de presentacin es en polvo, que racteres microgrficos descriptos en la Farmacopea
presenta color pardo o pardo amarillento, tiene olor Argentina (2008).
caracterstico y aromtico (Farmacopea Argentina,
2008). Foto 3.- Esclereida irregular
El objetivo de este trabajo es comprobar la ca-
lidad de las muestras comercializadas en la Ciudad
Autnoma de Buenos Aires.

Materiales y mtodos

Las muestras que se utilizaron para este estudio se

adquirieron en comercios en distintos puntos de la
Ciudad de Buenos Aires. Estas muestras se presen-
taban en polvo, trozadas y enteras. Se compararon
con descripciones bibliogrficas obtenidas de la
Farmacopea Argentina 7 edicin y el Cdigo Ali-
mentario Argentino.
Se analizaron mediante las siguientes tcnicas de
la Farmacopea Argentina (2008): a) reduccin a pol-
vo: con molinillo de cuchillas rotativas; b) obtencin
de transcortes: se obtuvieron secciones transversales
delgadas del material a mano alzada para analizar la
disposicin de los tejidos; c) disociacin leve: una Disociado leve, (400 X).

13
Souto da Rosa y col..

Foto 4.- Radios floemticos Foto 7.- Cristales aciculares de oxalato de calcio

Disociado leve, (200 X). Polvo, (400 X).

Foto 5.- Fibra

En las muestras enteras y trozadas, adems, se
observ sber (Foto 8), el cual por definicin del
Cdigo Alimentario y de la Farmacopea Argentina
no se debera encontrar en las muestras comer-
ciales usadas, tanto para fines alimentarios como
medicinales.
En cuanto a la determinacin de la presencia de
aceites esenciales las muestras enteras y trozadas
presentaron aldehdo cinmico, eugenol y limoneno,
como componentes ms importantes. En las mues-
tras en polvo no se observ la presencia de aldehdo
cinmico (foto 9).

Disociado leve, (400 X).

Foto 8.- Sber, disociado leve

Foto 6.- Grnulos de almidn

Polvo, a: grnulo compuesto, b: grnulo simple. Luz

polarizada, (200 X). (200X).

14
 Dominguezia - Vol. 31(2) - 2015

Foto 9.- TLC cualitativa a la presencia de aceite esencial y de su principal

constituyente, el aldehdo cinmico, las muestras
trozadas y enteras cumplen con los requisitos de
estas farmacopeas pero no, las muestras en polvo.
Sobre la base de los resultados obtenidos se pue-
de concluir que ninguna de las muestras analizadas
cumplen estrictamente los requisitos de Farmacopea
Argentina (2008) y el Cdigo Alimentario Argentino
para la denominacin de canela de Ceiln, como
tampoco los requisitos de la Farmacopea Britnica,
la Brasilera y de la Organizacin Mundial de la
Salud.

Muestras 1 y 4: canela en polvo; muestras 2 y 3: cane-

Referencias bibliogrficas
las trozadas: muestras 5 y 6: canela en rama.
Barceloux, D.G. (2008). Medical Toxicology of Na-
tural Substances. John Wiley & Sons: 327-335.
British Pharmacopoeia (2009) Volumen 3:
Discusin y conclusiones 6871-6872.
Claus, E. P.; Tyler, V. E. (h). (1968). Farmacognosia.
En todas las muestras trozadas y en rama se encontr 5 edicin. El Ateneo, Buenos Aires: 179-180.
un mismo patrn cromatogrfico. La ausencia de Cdigo Alimentario Argentino [en lnea]. ANMAT,
aldehdo cinmico en las muestras de polvo podra Captulo XVI, Artculo 1300. ltima revisin: 16
deberse a las operaciones unitarias en su obtencin, de marzo de 2010. <http://www.anmat.gov.ar/ali-
lo cual provoca que carezcan de acciones terapu- mentos/codigoa/CAPITULO_XVI.pdf Artculo
ticas medicinales; sin embargo, se encontraron 1300> [Consulta: 10 de mayo de 2010].
todos los caracteres microgrficos descriptos en la Farmacopea Argentina (2008) 8 edicin. Tercer
bibliografa. Tomo: 369-402. ltima revisin: 10 de agosto
Las muestras enteras y trozadas presentaron de 2008. [Consulta: 24 de mayo de 2010].
escaso sber. Si bien se evidencia la presencia del Farmacopeia Brasileira 5 edicin (2010). Agencia
principal componente en los aceites esenciales, ase- Nacional de Vigilancia Sanitaria. Volumen 2:
gurndose las propiedades teraputicas medicinales, 721-723.
no cumplimenta los requerimientos microgrficos de Khler, F. (1987) Public Domain / File:Koeh-
la monografa presentada en la Farmacopea Argen- 182.jpg / Franz Eugen Khler, Khler s
tina (2008). Medizinal-Pflanzen.
Comparadas estas muestras con las monografas Organizacin Mundial de la Salud (1999) Volumen
de la British Pharmacopoeia (2009), la Farmacopeia 1: 95-103.
Brasileira 5 edicin (2010) y la Organizacin Mun- Wagner, H.; Bladt, S. (2001) Plant Drug Analysis,
dial de la Salud (1999), los caracteres microgrficos A Thin Layer Chromatography Atlas 2nd edition,
observados concuerdan con los descriptos. En cuanto Springer: 153 a 171.

15
Fecha de recepcin: 27 de mayo de 2015
Fecha de aceptacin: 26 de agosto de 2015 Dominguezia - Vol. 31(2) - 2015

Alteraciones anatmicas en epidermis de hojas infectadas

de Phoradendron bathyoryctum Eichler (Viscaceae)

Alejandro F. Vugin*, Graciela B. Bassols, Beatriz G. Varela

Ctedra de Farmacobotnica, Facultad de Farmacia y Bioqumica, Universidad de Buenos Aires. Junn 956, 4 Piso
(1113) Ciudad Autnoma de Buenos Aires, Repblica Argentina.
*
Autor a quien dirigir la correspondencia: [email protected].

Resumen

Phoradendron bathyoryctum Eichler (Viscaceae) es una planta hemiparsita que crece en la Repblica Ar-
gentina sobre varias especies arbreas. Se utiliza en medicina popular de la misma manera que el murdago
europeo (Viscum album L. Viscaceae), para disminuir la presin arterial. Los murdagos, a veces, pueden
ser susceptibles de epiparasitismo, o tambin sufrir el ataque de diferentes agentes fitopatgenos. El objetivo
de este estudio es analizar los cambios anatmicos que se producen en las hojas de Ph. bathyoryctum cuando
son afectadas por algn agente infeccioso. Se colectaron ejemplares sanos e infectados, los ltimos, con
lesiones foliares superficiales. Se realizaron tcnicas de raspado, diafanizado y obtencin de epidermis en las
hojas de los ejemplares. Tambin se practicaron reacciones histoqumicas. En las hojas infectadas se observ
una destruccin progresiva de los estomas y cambios en el resto de los tejidos epidrmico y subepidrmico,
que dieron como resultado la formacin de estructuras visibles macroscpicamente, y semejantes a lenticelas
foliares. De acuerdo con las observaciones realizadas y por comparacin con la bibliografa consultada, se
supone que el dao foliar se inicia en el estoma donde se producen cambios estructurales hasta su destruccin,
la modificacin de las clulas adyacentes y la formacin de lesiones superficiales en las hojas infectadas. En
cuanto al agente, si bien no se pudo determinar en esta oportunidad, podra asociarse a algn tipo de virus.
Se sugiere realizar futuros estudios para confirmar si los virus son los causantes de las lesiones.

Anatomical Changes in Epidermis of Infected Leaves

of Phoradendron bathyoryctum Eichler (Viscaceae)

Summary

Phoradendron bathyoryctum Eichler (Viscaceae) is a hemiparasitic plant that grows in Argentina on sev-
eral tree species. It is used in folk medicine in the same way as the European mistletoe (Viscum album L.
Viscaceae) to lower blood pressure. These plants may sometimes be susceptible to epiparasitism, or even
attacked by different plant pathogens. The aim of this study is to analyze the anatomical changes that occur
in the leaves of Ph. bathyoryctum infected by a phytopathogen agent. Healthy and infected specimens were
collected, the latter with superficial foliar injuries. Scraping, clearing, and epidermis obtaining techniques
were performed on the leaves of the plants. Histochemical reactions were also performed. In the infected

Palabras clave: anatoma - epidermis - infeccin - murdago - Phoradendron - Viscaceae.

Key words: Anatomy - epidermis - infection - mistletoe - Phoradendron - Viscaceae.

17
Vugin y col.

leaves a progressive destruction of stomata and changes in the rest of epidermal and sub epidermal tissue
were observed, resulting in the formation of macroscopically visible structures and similar to foliar lenticels.
According to the observations made and compared to the literature, it is believed that the leaf damage starts
at the stoma, where structural changes occur until destruction, modification of adjacent cells, and superficial
lesions in infected leaves. In respect to the agent, although it could not be determined at this time, it might be
associated with a type of virus. Further studies are suggested to detect and confirm that the plant pathogen
is causing the injuries.

Introduccin

Phoradendron bathyoryctum Eichler Viscaceae otros organismos como otras hemiparsitas (epipara-
(Sin. Ph. hieronymi Trel.) es una planta hemiparsita sitismo o hiper-parasitismo) (Wiens y Calvin, 1987;
que crece sobre diversas especies arbreas en el Nor- Calvin y Wilson, 2009), al ataque de insectos diver-
te y Centro de la Repblica Argentina. Se trata de un sos, hongos, bacterias, virus y viroides. Sin embargo,
arbusto con ramas opuestas o pseudo-dicotmicas, hay muy pocos registros que detallen patologas en
cilndricas en su base y comprimidas en la regin el gnero Phoradendron, con excepcin del ataque
superior, con entrenudos de 2-7,5 cm de largo. Las de algunas especies fngicas (Darling, 1940).
hojas son coriceas o subcoriceas, de 3,5-9 cm de Una enfermedad vegetal se puede definir como un
longitud y 1,5-3,5 cm de ancho, glabras, de lmina efecto producido por cualquier agente patgeno que
aovada o elptica, basinervada con 5-7 nervaduras interfiera con su fisiologa normal, y la planta muestra
pronunciadas, pice obtuso o redondeado y con un ese efecto con sntomas visibles (Brown, 1997). Las
pecolo de 5-10 mm de largo (Abbiati, 1946). relaciones entre esos agentes y la planta husped van
Se conoce a Ph. bathyoryctum con los nombres desde transitorias hasta un alto grado de dependencia
vulgares de madroo, liga, murdago, hierba y especificidad. Los virus fitopatgenos, por ejemplo,
hurfana, entre otros. Se utiliza la infusin de sus son parsitos obligados y completamente dependien-
hojas en medicina popular para tratar el asma y los tes de clulas vegetales vivas para completar su ciclo
dolores de cabeza (Martnez Crovetto, 1964; Toursar- de replicacin, lo cual provoca infecciones sistmicas
kissian, 1980), y para problemas cardacos (dolores, de fcil transmisin y de difcil diagnstico (Gepp,
palpitaciones) (Martnez Crovetto, 1981). 1996). Por otro lado, los cambios metablicos que pro-
Adems, por su hbito hemiparsito y por perte- ducen esos patgenos, podran alterar el metabolismo
necer a la misma familia que el murdago europeo secundario del vegetal y originar modificaciones en
(Viscum album L.) se emplea, al igual que este, la accin farmacolgica.
como hipotensora (Franz, 1986). Las hemiparsitas El objetivo de este trabajo es informar el hallazgo
se nutren en parte de su hospedante, y as obtienen de especmenes infectados y determinar las altera-
agua y sales minerales por medio de estructuras ciones anatmicas producidas en la superficie foliar
denominadas haustorios. de la hemiparsita luego de la infeccin.
Segn el criterio actual de clasificacin de las
plantas vasculares, basado en el sistema APG III
(Stevens, 2012), los gneros Viscum y Phoraden- Materiales y mtodos
dron han sido reubicados dentro de Santalaceae. Sin
embargo, en tanto no se afirme de manera definitiva Material vegetal
ese sistema, se ha seguido el criterio taxonmico
del Catlogo de plantas vasculares de la flora del Se recolectaron ramas florferas de plantas de Ph.
Cono Sur, con actualizaciones en lnea (Zuloaga y bathyoryctum con hojas infectadas y tambin sanas
col., 2009). en la provincia de Tucumn, Argentina. Con parte del
Si bien se considera a Ph. bathyoryctum una plan- material se confeccionaron ejemplares de herbario
ta invasora de los hospedantes sobre los que crece, su con los siguientes datos: Localidad: Dique El Ca-
carcter hemiparsito no la hace inmune al ataque de dillal, Tucumn, Argentina; fecha de recoleccin:

18
 Dominguezia - Vol. 31(2) - 2015

11-06-2011; Leg.: G.I. Ponessa, M.L. Wagner; ob- Obtencin de epidermis (Peeling)
servaciones: sobre hospedante sin determinar. Las
muestras de estudio fueron determinadas y deposi- El material en estudio fue colocado en un recipiente
tadas en la Ctedra de Farmacobotnica, Facultad con una solucin de cido ntrico al 60 % y calentado
de Farmacia y Bioqumica (UBA). Los ejemplares en una estufa a 60 C durante 5 minutos; se decant
de herbario confeccionados sern incorporados el cido y se lav con agua destilada. La epidermis
prximamente en el Herbario del Museo de Farma- adaxial fue separada cuidadosamente con una pinza
cobotnica Juan A. Domnguez (BAF). y montada entre portaobjetos y cubreobjetos (Ruzin,
Para la identificacin del material de estudio 1999).
se consultaron los siguientes ejemplares: a. Jujuy,
Ledesma; Leg.: R. Kiesling n 8155 (SI); XI-1992; Diafanizacin
sobre hospedante sin determinar; b. San Juan, Valle
Frtil; Leg.: R. Kiesling n 4504 (SI); 19-II-1984; Sobre hojas enteras se realiz la tcnica con hidrato
sobre Celtis tala Gill. & Planchon (Celtidaceae); c. de cloral, y los diafanizados fueron coloreados con
San Juan, Valle Frtil; Leg.: E.R. Guaglianone & safranina a saturacin en Etanol 80 y montados en
N. Tur n 2450 (SI); 13-IV-1989; hospedante sin Blsamo de Canad (Dizeo de Strittmatter, 1973).
determinar; d. Catamarca, Quebrada del Tala; Leg.:
Lorentz & Hieronymus n 421 (BAF); 21/24-XI- Histoqumica
1872; sobre hospedante sin determinar.
Se consideraron infectadas las hojas que presen- A algunas porciones del material obtenido por
taban lesiones superficiales visibles que se pueden peeling, se les practic las siguientes reacciones
observar a simple vista en ambas superficies del histoqumicas: 1) azul de anilina al 0,1 % en agua
limbo foliar. Las hojas de las ramas colectadas fueron destilada y observacin por microscopa de fluores-
seleccionadas y separadas delos tallos. cencia para la deteccin de calosa (Zarlavsky, 2014);
2) solucin alcohlica al 1 % de floroglucina para
Mtodos detectar lignina (DAmbrogio de A., 1986).

Tanto en las hojas sanas como en las enfermas se Fotomicrografas

realizaron los siguientes procedimientos:
Los preparados se fotografiaron con un microscopio
Observacin macroscpica ptico Zeiss Axioskop 2, con lmpara de fluores-
cencia Zeiss Atto Arc 2 y capturadora de imgenes
Las hojas seleccionadas fueron observadas con un SONY NO SSCDE504.
microscopio estereoscpico Carl Zeiss y fotogra-
fiadas con una cmara digital Kodak Easyshare M
1063. Resultados y discusin

Raspado Macroscopa

Se realiz segn la tcnica de Metcalfe. Las hojas Las hojas sanas no presentaron ninguna lesin
se colocaron sobre un portaobjetos con la epidermis superficial (Figura 1). Se consideraron infectadas
en estudio hacia abajo (se seleccion la epidermis las hojas que, observadas con un microscopio es-
adaxial), se agreg sobre la superficie abaxial una tereoscpico, presentaron lesiones epidrmicas de
solucin de hipoclorito de sodio al 50 %, y se dej contorno circular y bordes levantados de color pardo
actuar durante 10 minutos. La superficie abaxial y amarillento, rodeando un tejido irregular con peque-
el mesfilo se rasparon cuidadosamente con una as elevaciones de color ms claro que el resto del
hoja de bistur. Luego se lav con agua destilada, y limbo (Figura 2). Esas lesiones se extendan desde
el material fue girado de manera que la superficie un 25 % a un 75 % de la superficie foliar. Por otro
en observacin quedara hacia arriba (DAmbrogio lado, no se detect desarrollo fngico en la superficie
de A., 1986). de las hojas enfermas.

19
Vugin y col.

Figura 1.- Limbo de hoja sana observado con microscopio en orientacin paralela al eje del ostolo, con paredes
estereoscpico laterales internas cncavas y externas profundamente
convexas (Varela, 2003). El mismo patrn se repiti
en ambas epidermis. Las hojas enfermas mostraron
una alteracin generalizada en la zona estomtica y
las clulas circundantes.

Figura 3.- Diafanizado de hoja sana: clulas epidrmicas

y estomas

Escala: 5 mm.

Figura 2.- Lesin foliar observada con microscopio

estereoscpico

Escala: 100 m.

Figura 4.- Lesin observada en diafanizado de una hoja

enferma

La flecha indica la lesin. Escala: 5 mm.

Microscopa
Se compararon los preparados obtenidos con las
tcnicas de diafanizacin, raspado y de peeling.
En las zonas donde la hoja enferma presentaba las
lesiones macroscpicas fueron observados cambios
anatmicos que involucraban a las clulas de la epi- Escala: 100 m.
dermis y sus modificaciones (estomas).
Mediante la diafanizacin se comprob el estado
de las hojas sanas y de las lesiones en las hojas en-
fermas (Figuras 3 y 4). Las hojas sanas presentaron
clulas epidrmicas rectangulares a poligonales (4-6 La observacin del peeling en el microscopio p-
lados), de paredes rectas o algo curvadas. Los esto- tico revel la presencia de idioblastos que contenan
mas son de tipo paractico, con dos clulas anexas depsitos amorfos (Figura 5).

20
 Dominguezia - Vol. 31(2) - 2015

Figura 5.- Peeling. Epidermis de hoja infectada y dife- Figura 6.- Raspado de una hoja infectada
rentes estadios de lesiones adyacentes

Se observan alteraciones en el estoma y engrosamiento

Idioblasto con depsito de material amorfo (flecha). de las paredes del ostolo. Escala: 50 m.
Escala: 100 m.

Figura 7.- Raspado. Estoma con ostiolo engrosado

Los raspados realizados mostraron alteraciones

en las clulas oclusivas de los estomas, con engrosa-
miento de sus paredes o las del ostolo, y diferentes
estadios de destruccin. Adems, se observ que se
rodean de un grupo de clulas a medida que avanza
la destruccin del estoma (Figuras 6 - 11).
Con ninguno de los mtodos microscpicos
aplicados se observaron hifas ni otras estructuras
fngicas. Se compar con la bibliografa existente
sobre patologas vegetales y se consider que po-
dra tratarse de algn agente viral, afn al virus del Inicio de necrosis en clulas oclusivas, y grupo de clulas
mosaico del tabaco (Agrios, 2005). Debido a los que comienzan a rodear al estoma. Escala: 50 m.
estadios de las lesiones observadas, se supone que el
agente infeccioso penetra por el estoma y asume su
control y se rodea de clulas epidrmicas que forman Figura 8.- Raspado. Primer estadio
una corona a su alrededor. Las paredes del ostolo
comienzan a engrosarse y luego, las del resto del
estoma, y producen su necrosis. En forma espiralada
se afectan las zonas adyacentes a la lesin primaria,
y se forma una lesin macroscpicamente visible en
ambas superficies de la hoja. La infeccin se disemi-
na al resto de la hoja y, por ltimo, a la planta entera
a travs del floema, segn otros estudios realizados
(Hipper, 2013).
Los estudios histoqumicos revelaron la presencia
de engrosamientos de calosa en algunos sectores
afectados. La microscopa de fluorescencia revel
zonas fluorescentes en esos engrosamientos por la Engrosamiento del ostolo (arriba, derecha). Estadio ms
reaccin con azul de anilina, y se diferenci de la avanzado: destruccin parcial del estoma y corona de
fluorescencia de base del resto de la epidermis. clulas a su alrededor (centro). Escala: 50 m.

21
Vugin y col.

Figura 9.- Raspado. Estadio intermedio Estas manifestaciones indican que el vegetal re-
acciona, y en consecuencia, intenta frenar el avance
del agente infeccioso mediante el recubrimiento con
calosa de las zonas afectadas (Figura 12). Con la
evolucin, las plantas generaron sistemas de defensa
contra el ataque de patgenos basados en barreras
estructurales o qumicas, o bien una respuesta me-
tablica activa (Blanco-Labra y Aguirre Mancilla,
2002). Por otro lado, mediante la reaccin de carac-
terizacin con floroglucina no se detect lignina.

Estoma con una clula oclusiva destruida y la otra con

las paredes del ostolo engrosadas (centro). Estoma con
una clula oclusiva a punto de estallar (arriba, izquierda).
Escala: 100 m.

Figura 10.- Raspado. Estadio final

Figura 12.- Deteccin de calosa

Destruccin casi total del estoma y clulas alrededor de la

lesin (centro). Diferentes estadios de necrosis estomtica.
Escala: 100 m.

Figura 11.- Raspado. Estoma destruido completamente

Engrosamientos de calosa vistos con microscopa de

La lesin se propaga en forma centrfuga. Escala: 100 m. fluorescencia (flecha). Escala: 50 m.

22
 Dominguezia - Vol. 31(2) - 2015

Si bien los primeros estadios observados fueron Agrios, G.N. (2005). Plant Pathology. Academic
macroscpicamente semejantes a las lenticelas foliares Press, New York: 723-824.
descriptas en Tripodanthus acutifolius (R. & P.) Tiegh. Blanco-Labra, A.; Aguirre Mancilla, C. (2002). Pro-
(Loranthaceae), la microscopa fue diferente e indica tenas involucradas en los mecanismos de defensa
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DAmbrogio de A., A. (1986). Manual de Tcnicas
Conclusin en Histologa Vegetal. Hemisferio Sur, Buenos
Aires: 54-60.
Hasta el momento no se han descrito patologas cau- Darling, L. (1940). Protocoronospora on Pho-
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Phoradendron, ni en plantas relacionadas, pero las 5(8): 241-246.
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servados en las hojas enfermas seran consecuencia rncia de lenticelas en folhas de Tripodanthus
de una infeccin provocada en la hemiparsita. En acutifolius (R. & P.) Tiegh. (Loranthaceae). Rev.
cuanto a la cantidad de hojas enfermas por planta, Brasil. Bot. 8: 157-162.
es un dato que no se pudo precisar porque no se Dizeo de Strittmatter, C. (1973). Nueva tcnica
colect la planta entera (que puede tener un tamao de diafanizacin. Bol. Soc. Argent. Bot. 15:
considerable, y en general, son de acceso complicado 126-129.
por crecer sobre rboles), sino que se recogieron Franz, H. (1986). Request for an impartial discus-
ramas florferas. sion of the so-called Mistletoe therapy. Oncol-
Se propone continuar los estudios en trabajos ogy 43(1): 1.
futuros para analizar si la infeccin produce mo- Gepp, V. (1996). Virus y viroides fitopatgenos.
dificaciones anatmicas en los tejidos foliares ms Dpto. de Publicaciones de la Facultad de Agro-
internos; detectar y confirmar el agente infeccioso en noma, Montevideo, Uruguay: 27 pp.
las lesiones, adems de los cambios metablicos que Hipper, C.; Brault, V.; Ziegler-Graff, V.; Revers, F.
se producen en el ejemplar, y destacar la importancia (2013). Viral and cellular factors involved in
de la determinacin de este tipo de infecciones en phloem transport of plant viruses. Front. Plant
los controles farmacobotnicos. Sci. 4, articulo 154: 1-24.
Martnez Crovetto, R. (1964). Estudios etnobot-
nicos I. Nombres de plantas y su utilidad, segn
Agradecimientos los indios Tobas del este del Chaco. Bonplandia
1(4): 279-333.
Este trabajo fue realizado mediante el subsidio 01/ Martnez Crovetto, R. (1981). Las plantas utilizadas
W459 de la Secretara de Ciencia y Tcnica, Uni- en Medicina Popular en el Noroeste de Corrientes
versidad de Buenos Aires. Los autores agradecen al (Repblica Argentina). Miscelnea 69: 1-139.
Dr. Marcelo L. Wagner por la provisin del material Ruzin,S.E. (1999). Plant microtechnique and micro-
vegetal y la lectura crtica del trabajo. scopy. Oxford University Press, Oxford: 133.
Stevens, P.F. [en lnea]. Angiosperm Phylogeny
Website; ltima revisin: 2012 http://www.mo-
Referencias bibliogrficas bot.org/MOBOT/research/APweb/[Consulta:
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Abbiatti, D. (1946). Las Lorantceas Argentinas. Toursarkissian, M. (1980). Plantas medicinales de la
Rev. Mus. La Plata (N.S.), Sec. Bot. 7: 1-110. Argentina. Hemisferio Sur, Buenos Aires: 79.

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Varela, B.G. (2003). Anatoma foliar y caulinar com- Zarlavsky, G.E. (2014). Histologa vegetal. Tcnicas
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Mistletoes. The Golden Bough 9: 2-4. tos/FloraArgentina/FA.asp [Consulta: 02/2014].

24
Fecha de recepcin: 25 de marzo de 2015
Fecha de aceptacin: 28 de octubre de 2015 Dominguezia - Vol. 31(2) - 2015

Composicin de los aceites esenciales de especies de Verbena

nativas de la provincia de Buenos Aires bajo cultivo

Martn I. Rodrguez Morcelle1 *, Ana La Rossi1, Martha Gattuso2, Nancy M. Apstolo1

1
Programa Interdisciplinario de Estudios en Plantas Vasculares (PIEPVas). Departamento de Ciencias Bsicas, Uni-
versidad Nacional de Lujn, C.C. 221, (6700) Lujn, Buenos Aires, Argentina.
2
Facultad de Ciencias Bioqumicas y Farmacuticas, Universidad Nacional de Rosario, Suipacha 531, (2000) Rosario,
Santa Fe, Argentina.
*
Autor a quien dirigir la correspondencia: [email protected]

Resumen

Verbena gracilescens (Cham.) Herter, V. bonariensis L., V. intermedia Gillies y Hook., V. litoralis Kunth,
V. montevidensis Spreng. y V. rigida Spreng son las especies nativas del gnero en la provincia de Buenos
Aires. Excepto V. montevidensis, el resto presenta propiedades hepatoprotectoras, digestivas, antiinflama-
torias, antidiarreicas y antimicrobianas, entre otras. Este trabajo tiene por objetivo estudiar la composicin
de los aceites esenciales producidos por estas especies bajo cultivo durante dos temporadas en parcelas
experimentales del campo de la Universidad Nacional de Lujn. Las semillas utilizadas para el cultivo
fueron colectadas de poblaciones naturales. Los aceites esenciales fueron obtenidos a partir de las flores de
cada una de las especies por hidrodestilacin y analizadas por Cromatografa de Gases-Espectrometra de
Masas (GC-EM). La composicin qumica de los aceites esenciales de Verbena en cultivo fue similar a la
observada en estudios previos en poblaciones naturales. Los compuestos mayoritarios fueron fitol, 6,10,14-
trimetil-2-pentadecanona (pentadecanona) y oct-1-en-3-ol (octenol). Sin embargo, las esencias obtenidas en
el primer ao de cultivo mostraron un alto contenido de fitol y muy bajo de pentadecanona, contrariamente a
lo observado en los aceites esenciales del segundo ao de cultivo. La cantidad de componentes de la segunda
temporada aument con respecto a la primera. Estos cambios en la composicin de los aceites esenciales
durante el cultivo bianual de las especies podra deberse a las condiciones fisiolgicas de las plantas segn
su edad o a las condiciones climticas.

Essential Oils Composition of Cultivated Native Verbena Species

of Buenos Aires Province

Summary

Verbena gracilescens (Cham.) Herter, V. bonariensis L., V. intermedia Gillies & Hook., V. litoralis Kunth,
V. montevidensis Spreng., and V. rigida Spreng are the native species of the genus in the province of Buenos
Aires. Except V. montevidensis, the others exhibit hepatoprotective, digestive, anti-inflammatory, antidiarrheal,
and antimicrobial properties, among others. This work aims to study the composition of the essential oils

Palabras clave: Verbena - aceites esenciales - inflorescencias.

Key words: Verbena - essential oils - inflorescence.

25
Rodriguez Morcelle y col.

produced by these species under cultivation for two seasons in experimental field plots at the National Uni-
versity of Lujn. The seeds used for cultivation were collected from natural populations. The essential oils
of reproductive parts of each species were extracted by hydrodistillation. Distilled essences were analyzed
by Gas Chromatography - Mass Spectrometry. The composition of the essential oils of Verbena in culture
was similar to that observed in previous studies in natural populations. The major compounds were phytol,
6,10,14-trimethyl-2-pentadecanone (pentadecanone), and oct-1-en-3-ol (octenol). However, the essences
obtained in the first year of cultivation had a high content of phytol and a very low content of pentadecan-
one, contrary to what was observed in the essential oils of the second year of cultivation. The number of
components from the second season was increased relative to the first. These changes in the composition
of essential oils during the biennial culture could be attributed to the physiological condition of the plants
according to their age or to weather conditions.

Introduccin

La provincia de Buenos Aires tiene seis especies En el caso de las especies nativas aromticas o
nativas del gnero Verbena: V. gracilescens (Cham.) medicinales la domesticacin permite un mejora-
Herter, V. bonariensis L., V. intermedia Gillies y miento en la calidad de la hierba como materia prima
Hook., ex Hook., V. litoralis Kunth, V. montevi- para uso en herboristera, as como el abastecimiento
densis Spreng. y V. rigida Spreng. Todas, excepto sostenido.
V.montevidensis, son mencionadas como medicina- Se han realizado estudios integrales con el fin de
les, con propiedades hepatoprotectoras, digestivas, iniciar el proceso de domesticacin de las seis espe-
antiinflamatorias, antidiarreicas y antimicrobianas, cies de Verbena nativas de la provincia de Buenos
entre otras aplicaciones (Martnez Crovetto, 1981; Aires (Rodriguez Morcelle y col., 2012; 2013) y,
Castro-Gamboa y Castro, 2004; Barboza y col., especficamente, en este trabajo se estudia la com-
2006; 2009; Crivos y col., 2007). posicin de los aceites esenciales producidos por las
Las especies de Verbena son hierbas o sufrtices, especies bajo cultivo durante dos temporadas.
con tallos erectos con yemas de renuevo cerca del
nivel del suelo. Las hojas son simples y opuestas.
Las flores violceas se encuentran agrupadas en Materiales y mtodos
espigas dispuestas en grupos de a tres, la central es
de mayor tamao que las dos laterales. Su floracin Las parcelas experimentales de cultivo fueron ins-
es prolongada, va desde mediados de la primavera taladas en el campo de la Universidad Nacional de
hasta mediados del otoo (OLeary y col., 2007). Lujn (34 36 LS; 59 7 LO) durante las temporadas
La recoleccin indiscriminada de especies medi- 2009/2010 y 2010/2011. Las semillas utilizadas para
cinales en poblaciones naturales, sin ningn tipo de el cultivo fueron colectadas de poblaciones naturales
control respecto al cuidado del recurso y la susten- de los alrededores de la Universidad y de varios sitios
tabilidad de la actividad, provoca una disminucin del noroeste de la provincia de Buenos Aires. En cada
inquietante de las poblaciones y de las plantas fac- temporada se realizaron dos cortes o cosechas.
tibles de cosechar. Las especies medicinales nativas Mediante hidrodestilacin fueron extrados los
sufren erosin gentica acelerada, principalmente, aceites esenciales de las flores de cada una de las
como consecuencia de los altos volmenes de extrac- especies. Para ello fue utilizado un baln de 3.000
cin en sus ambientes naturales. Adems, la calidad ml de capacidad, que contena entre 500 y 750 g de
del producto derivado de poblaciones naturales es material fresco y 2.000 ml de agua destilada. El tiem-
difcilmente estable, debido a la alta variabilidad en po de destilacin fue de 8 h. Los extractos obtenidos
el contenido de compuestos activos y los mtodos fueron diluidos con hexano, filtrados (0,45 m), y
artesanales de secado y almacenamiento (Bandoni, guardados en frascos caramelo a 4 C (Laboratorio
2000; Ocampo, 1994; 2007). de Botnica, Universidad Nacional de Lujn).

26
 Dominguezia - Vol. 31(2) - 2015

Las esencias destiladas fueron analizadas por en la mezcla, esta operatoria es vlida a los fines
Cromatografa Gaseosa-Espectrometra de Masas comparativos del estudio de los aceites esenciales
(CG-EM) en un Perkin Elmer modelo Autosystem de las especies en estudio.
XL Gas Chromatograph-Turbomass Mass Spectro- Para la identificacin de los compuestos se uti-
meter, con una columna del tipo VF-1 ms (30 m lizaron las bases de datos NIST98 versin 1.5 y
x 0,25 mm de ID, Varian). La programacin de la NIST08 versin 2.0 (Servicio de GC-EM, Facultad
temperatura del horno consisti en 70 C iniciales de Ciencias Bioqumicas y Farmacuticas, Univer-
(5 min), luego 10 C/min hasta 310 C y se mantuvo sidad Nacional de Rosario, Tcnica Bioqumica
10 min en forma isotrmica, con una temperatura Mnica Hourcade).
de 250 C para el inyector. Se utiliz helio como
gas portador con un flujo de 1 ml/min. Se inyect
1 l de muestra diluida en hexano y el tiempo de la Resultados
corrida fue de 39 min. Los datos del espectrmetro
de masas fueron obtenidos con una energa de io- El rendimiento de los aceites esenciales fue bajo en
nizacin de 70eV y registrados en un rango de m/z todas las especies estudiadas, con valores menores
40-500. La cuantificacin se obtuvo a partir de los a 0,1 ml/100 g de masa seca.
cromatogramas correspondientes a la corriente total Se identificaron 22 componentes, en su mayora
de iones (TIC), considerando el rea de los picos y terpnicos, sobre un total de 25 compuestos detecta-
expresando las proporciones relativas como por- dos. Los compuestos mayoritarios fueron el fitol, la
centajes. Si bien la respuesta del detector de masas 6,10,14-trimetil-2-pentadecanona (pentadecanona)
(TIC) no es lineal a la presencia de cada compuesto y el oct-1-en-3-ol (octenol) (Figura 1).

Figura 1.- Espectros de masa de los componentes mayoritarios

Fitol

6,10,14-trimetil-2-pentadecanona
(pentadecanona)

Oct-1-en-3-ol (octenol)

27
Rodriguez Morcelle y col.

El componente principal fue el fitol (diterpeno Discusin

oxigenado). Sin embargo, todas las especies cul-
tivadas mostraron una reduccin del porcentaje Los aceites esenciales de las especies de Verbena
de este compuesto hasta un 50% en la segunda nativas de la provincia de Buenos Aires obtenidas
temporada respecto a la primera (Tablas 1 y 2). Por de plantas de las parcelas experimentales no mos-
el contrario, la presencia de hasta 42% de pentade- traron variacin en la composicin con respecto a
canona en la campaa 2010/2011 (Tabla 2) difiri los provenientes de plantas de la misma especie
sustancialmente de los valores observados en la de poblaciones naturales (Rodriguez Morcelle,
campaa anterior (de 0,1 a 8,6%) (Tabla 1). Ade- 2013). Sin embargo, los aceites esenciales obte-
ms, los hidrocarburos lineales y otros compuestos nidos de las especies cultivadas durante dos aos
oxigenados en la segunda temporada registraron (2009/2010 y 2010/2011) presentaron diferentes
un aumento de su porcentaje respecto a la primera caractersticas segn la temporada. Las esencias
(Tablas 1 y 2). obtenidas en el primer ao de cultivo (2009/2010)
Durante la campaa 2009/2010 todas las espe- mostraron un alto contenido de fitol y bajo de
cies mostraron mayor nmero de componentes (16 pentadecanona. En los aceites esenciales prove-
a 20) en la primera cosecha respecto a la segunda (6 nientes de material del segundo ao de cultivo
a 9) (Tabla 1). Para la segunda campaa de cultivo, (2010/2011), el porcentaje de fitol fue menor y
el comportamiento de las especies fue diferente. el de pentadecanona fue mayor que en el primer
Durante el primer corte de esa temporada el nmero ao.
de componentes vari de 13 a 15, mientras que en Asimismo, en las esencias de V. litoralis y
el segundo corte se observaron 19 a 21 compuestos V.montevidensis se observ un aumento en el
(Tabla 2). contenido de octenol. Estos cambios en la com-
Dentro de cada temporada se observaron es- posicin de los aceites esenciales durante el cul-
casas diferencias en la composicin y el nmero tivo bianual de las especies podra deberse a las
de compuestos de los aceites esenciales entre las condiciones fisiolgicas de las plantas segn su
especies cultivadas (Tablas 1 y 2). En la campaa edad. Por otro lado, esos cambios tambin podran
2009/2010, V. bonariensis se destac por el incre- atribuirse a las abundantes precipitaciones regis-
mento en el porcentaje de pentadecanona en el tradas en la primera temporada y al dficit hdrico
segundo corte (8,6%) respecto del primer corte observado en la segunda temporada de cultivo.
(1,3%). Sin embargo, en esta especie el porcentaje Estas condiciones climticas afectaron de igual
de fitol no present diferencias en ambas cosechas. manera a las poblaciones naturales, que mostraron
V. montevidensis mostr cantidades similares de el mismo comportamiento que el cultivo respecto
fitol y de pentadecanona en el primero y el segun- al contenido de los componentes mayoritarios de
do cortes. Por otro lado, V. gracilescens y V. rigida las esencias.
exhibieron un aumento del 10% en el contenido Por otra parte, no se registraron variaciones
de fitol en la segunda cosecha respecto a la pri- en el rendimiento de las esencias, y los niveles se
mera, en tanto que el contenido de pentadecanona mantuvieron debajo del 0,1% (ml/100 g de mate-
present una disminucin apreciable (Tabla 2). ria seca). Segn Ricciardi (2006), el rendimiento
En el segundo ao de cultivo (2010/2011), de las esencias de tres especies de Verbenaceae
V.gracilescens y V. rigida mostraron los mayores estuvo estrechamente vinculado con el perodo de
porcentajes de fitol. Estas especies, al igual que lluvias.
V. montevidensis, aumentaron su porcentaje de Diferentes autores informaron sobre la com-
fitol notablemente en la segunda cosecha. Por otra posicin qumica de los aceites esenciales de
parte, V. litoralis fue la especie con los mayores V. officinalis (Chalchat y Garry, 1996; Shams
porcentajes de octenol (13,7 y 26,3%), mientras Ardakani y col., 2003; Zoubiri y Baaliouamer,
que en las especies restantes solamente se obser- 2011), de V. bonariensis, V. venosa (=V. rigida)
v 0,3 a 7,7% de ese componente. Finalmente, y de V. supina (Al-Amier y col., 2005), que mos-
los sesquiterpenos oxigenados disminuyeron su traron diferente tipo y porcentaje de componentes
concentracin en la segunda cosecha en todas las respecto a las esencias de las especies de Verbena
especies (Tabla 2). nativas de Buenos Aires.

28
 Dominguezia - Vol. 31(2) - 2015

Tabla 1.- Composicin de los aceites esenciales de las sumidades florales de las especies de Verbena del estudio
V. V. V. V. V.
bonariensis litoralis montevidensis gracilescens rigida
Cosechas 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2
TR
Componentes
(min)
4,10 Nonano 0,01 0 0 0 0 0 0,01 0 0,01 0
6,52 Oct-1-en-3-ol 5,0 1,4 3,7 0,7 0,3 0,4 4,2 0,5 2,6 tr
9,21 Nonanal tr 0 tr 0 0 0 0 0 tr 0
9,25 3,7-Dimetil-1,6-octadien-3-ol 0,3 0 0,4 0 0,1 0 1,0 0 0,7 0
10,70 Salicilato de metilo tr 0 0,01 0 tr 0 tr 0 tr 0
10,90 Terpineol 0,1 0 0,1 0 0,1 0 0,2 0 0,2 0
12,84 Tridecano tr 0 tr 0 0 0 tr 0 tr 0
6,6-Dimetilciclohexa-1,3-
13,84 tr 0 0,1 0 0,1 0 0,3 0 0,2 0
dienilprop-1-enil cetona
15,06 Hexadecano 0,2 0 0,1 0 tr 0 0,3 0 0,1 0
15,36 Sin identificar 1,4 0 0,8 0 0,5 0 1,0 0 0,6 0
15,50 Sin identificar 2,3 0 1,4 0 0,8 0 1,5 tr 1,0 0
16,47 p -Menta-1(7),8(10)-dien-9-ol 3,4 1,0 1,6 0 0,8 tr 0,3 tr 0,8 tr
16,68 Tetradecanal 0,1 0 tr 0 tr 0 0,1 tr 0,1 0
6,10,14-Trimetilpentadeca-2-
19,26 1,3 8,6 0,5 4,2 0,3 0,3 1,1 0,9 1,4 0,1
ona
20,42 No identificado 0 0,9 0 0,7 0 0 0 0 0 0
21,77 Eneicosano 0,2 0 0,1 0 0,1 0,1 0,2 0,2 0,4 tr
21,85 Fitol 84,9 83,7 90,9 91,4 96,9 98,7 89,0 97,7 89,5 99,6
22,40 No identificado 0 0 0 0 0 0 0,1 0 0,3 0
23,48 Tricosano 0,4 2,6 0,1 1,9 0,1 0,2 0,3 0,3 0,7 0,1
4,8,12,16-
23,80 0 0 0 0 tr 0 tr 0 tr 0
Tetrametilheptadecan-4-lido
25,04 Pentacosano 0,4 1,8 0,1 1,1 0,1 0,2 0,5 0,4 1,1 0,1
Nmero de componentes 18 7 17 6 16 7 19 9 20 7

Componentes agrupados
Hidrocarburos monoterpnicos (HM) - - - - - - - - - -
Monoterpenos oxigenados (MO) 3,7 1 2,1 - 1 - 1,7 - 2 tr
Hidrocarburos sesquiterpnicos (HS) - - - - - - - - - -
Sesquiterpenos oxigenados (SO) 1,3 8,6 0,5 4,2 0,3 0,3 1,1 0,9 1,4 0,1
Diterpenos oxigenados (DO) 84,9 83,7 90,9 91,4 96,9 98,7 89 97,7 89,5 99,6
Hidrocarburos lineales (HL) 1,2 4,5 0,4 3,1 0,2 0,5 1,3 0,8 2,3 0,2
Otros compuestos oxigenados (OC) 5,1 1,4 3,7 0,7 0,3 0,4 4,4 0,5 3 tr
Desconocidos (D) 3,7 0,9 2,2 0,7 1,3 0,1 2,5 tr 1,7 -
Componentes identificados 96 99,1 97,7 99,3 98,7 99,9 97,5 99,9 98,2 100

tr: trazas. 1: primer corte 15/01/2010 - (primera cosecha); 2: segundo corte 1/04/2010 - (segunda cosecha). Cultivo,
campaa 2009/2010.

29
Rodriguez Morcelle y col.

Tabla 2.- Composicin de los aceites esenciales de las flores de las especies de Verbena del estudio
V. bonariensis V. litoralis V. montevidensis V. gracilescens V. rigida
Cosechas 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2
TR(min) Componentes
4,10 Nonano 0,1 0,1 0,3 0,01 0,5 0,1 0,2 0,1 0,4 0,4
6,52 Oct-1-en-3-ol 2,8 2,0 13,7 26,3 7,7 6,0 1,9 0,9 0,9 0,3
9,21 Nonanal 0,5 0,1 0,8 3,2 0,3 2,4 0,1 0,1 0,1 0,1
9,25 3,7-Dimetil-1,6-octadien-3-ol 0,6 0,5 1,4 1,9 0,8 0,6 0,4 0,3 0,9 0,4
10,70 Salicilato de metilo tr tr 0 0,3 0 0,1 0 0 0 0
10,90 Terpineol 0,1 0,1 0,3 0,4 0,1 tr 0,1 tr 0,1 0,2
12,84 Tridecano 0,1 4,9 0,1 2,3 0,4 0,4 0,1 0,3 0,3 tr
6,6-Dimetilciclohexa-1,3-
13,84 0 0,1 tr 0,6 0 tr 0 tr tr 0,1
dienilprop-1-enil cetona
15,06 Hexadecano 2,2 2,9 0,9 2,7 0,4 0,9 0,4 0,1 0,3 0,1
15,36 No identificado 0 1,0 0 0,7 0 tr 0 tr 0 0,1
15,50 No identificado 0 2,1 0 1,1 0 tr 0 0,1 0 0,1
16,47 p -Menta-1(7),8(10)-dien-9-ol 0 0,9 0 1,7 tr 0,1 0 0,2 0 0,1
16,68 Tetradecanal 0 1,0 0 2,1 0 2,8 0 3,4 0 0,8
19,26 6,10,14-Trimetilpentadeca-2-ona 41,7 36,9 22,8 12,3 40,3 13,1 38,5 6,0 31,8 15,8
20,42 No identificado 0 1,5 0 1,8 0 0 0 0 0 0,1
21,77 Eneicosano 3,1 2,5 2,7 2,5 4,8 2,9 3,6 1,0 3,7 0,8
21,85 Fitol 40,9 36,6 53,3 36,2 32,9 66,1 48,6 84,3 52,1 77,8
22,40 No identificado 0,2 0,1 0 tr 0 0 0 0,1 0,3 0
23,48 Tricosano 4,0 4,6 2,2 2,6 4,6 2,9 3,4 1,7 3,7 1,2
4,8,12,16-Tetrametilheptadecan-
23,80 0,2 0,2 0,1 0,1 0,4 0,2 0,2 0,2 0,5 0,3
4-lido
25,04 Pentacosano 3,5 1,7 1,4 1,1 7,1 1,2 2,5 1,3 4,9 1,3
Nmero de componentes 15 21 14 21 14 19 13 19 15 19

Componentes agrupados
Hidrocarburos monoterpnicos (HM) - - - - - - - - - -
Monoterpenos oxigenados (MO) 0,7 1,7 1,7 4,6 0,8 0,7 0,5 0,4 1 0,8
Hidrocarburos sesquiterpnicos (HS) - - - - - - - - - -
Sesquiterpenos oxigenados (SO) 41,7 36,9 22,8 12,3 40,3 13,1 38,5 6 31,8 15,8
Diterpenos oxigenados (DO) 41,1 36,8 53,4 36,3 33,3 66,3 48,8 84,4 52,6 78,1
Hidrocarburos lineales (HL) 13,1 16,7 7,7 11,1 17,7 8,5 10,2 4,5 13,4 3,7
Otros compuestos oxigenados (OC) 3,3 3,3 14,4 32 8 11,3 2 4,4 1,2 1,2
Desconocidos (D) - 4,6 - 3,6 - tr - 0,1 - 0,3
Componentes identificados 100 95,4 100 96,3 100 99,9 100 99,9 100 99,6

tr: trazas; 1: primer corte 20/12/2010 - (primera cosecha); 2: segundo corte 15/04/2011 - (segunda cosecha).

30
 Dominguezia - Vol. 31(2) - 2015

El compuesto oxigenado octenol, encontrado en ecolgicos y geogrficos que producen diferencias

las esencias de las especies bonaerenses de Verbe- cuali y cuantitativas en la composicin de los aceites
na, tambin ha sido informado para otras especies esenciales (Bandoni, 2000; Ocampo, 2007).
de Verbenaceae, aunque en proporciones menores
(Stashenko y col., 2003; Tavares y col., 2005; Di
Leo Lira y col., 2008; Gouollaly y col., 2010; Rojas Referencias bibliogrficas
y col., 2010).
Al-Amier y col. (2005) tambin informaron la Al-Amier, H.; El-Hela, A.A.; Al-Khadrawy, F.M.;
presencia de 18% de fitol en las esencias de V. ve- Craker, L.E. (2005). Comparative evaluation
nosa (=V. rigida), pero en V. bonariensis (1,26%) y of the constituents in some Verbena species cul-
en V. supina (1,14%) su presencia fue mucho menor. tivated in Egypt. J. Herbs, Spices Med. Plants
En otros representantes de Verbenaceae, Crabas y 11(3): 25-33.
col. (2003) encontraron que este compuesto como Bandoni, A. (ed.). (2000). Los Recursos Vegetales
componente era mayoritario en las hojas de Aloysia Aromticos en Latinoamrica. Ed. UNLP-
triphylla (sin. A. citriodora) en un extracto CO2 CYTED: 410 pp.
obtenido con tecnologa supercrtica. Sin embargo, Barboza, G.; Cantero, J.; Nez, C., Ariza Espinar,
la extraccin supercrtica puede, en determinadas L. (2006). Flora Medicinal de la provincia de
condiciones de presin y temperatura, extraer la Crdoba (Argentina). Museo Botnico de Cr-
fraccin ms lipoflica de una planta. As estos doba. Argentina: 1251 pp.
autores encontraron una composicin tan atpica Barboza, G.; Cantero, J.; Nez, C.; Pacciaroni, A.;
en A. triphylla que no es representativa de su aceite Ariza Espinar, L. (2009). Medicinal plants: A
esencial, sino de la composicin de ceras presentes general review and a phytochemical and ethnop-
en esta especie. harmacological screening of the native Argentine
En la industria el fitol es utilizado como ingre- Flora. Kurtziana 34(1-2): 7-365.
diente de fragancias en cosmticos, fragancias finas, Castro-Gamboa, I.; Castro, O. (2004). Iridoids from
champs y jabones de tocador, as como en productos the aerial parts of Verbena littoralis (Verben-
no cosmticos, como detergentes y productos de aceae). Phytochemistry 65: 2369-2372.
limpieza (McGinty y col., 2010). La pentadecanona, Chalchat, J.C.; Garry, R. P. (1996). Chemical com-
en cambio, es una cetona aliftica sustituida que position of the leaf oil of Verbena officinalis L..
ha sido escasamente informada para especies de la J. Essent. Oil Res. 8(4): 419-420.
familia Verbenaceae. Crabas, N.; Marongiu, B.; Piras, A.; Pivetta, T.;
Las especies de Verbena estudiadas podran Porcedda, S. (2003). Extraction, separation and
presentar potencial uso medicinal debido a que los isolation of volatiles and dyes from Calendula
componentes mayoritarios de sus aceites esencia- officinalis L. and Aloysia triphylla (LHer.) Brit-
les presentan actividades biolgicas. El fitol y la ton by supercritical CO2. J. Essent. Oil Res.
pentadecanona son citados como posibles agentes 15(5): 350-355.
teraputicos en diversas enfermedades, como Crivos, M.; Martnez, M.; Pochettino, M.; Remorini,
artritis, diabetes, tuberculosis y cncer. Adems, C.; Sy, A.; Teves, L. (2007). Pathways as sig-
se ha demostrado que esencias con composicin natures in landscape: Towards ethnography of
similar a la observada en este estudio exhiben mobility among the Mbya-Guaran (Northeastern
actividad antimicrobiana y repelencia a mosqui- Argentina). J. Ethnobiol. Ethnomedicine 3:2.
tos vectores de la malaria (Phutdhawong y col., (En lnea) <http://www.ncbi.nlm.nih.gov/ pmc/
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Dangarembizi y col., 2013). Dambolena, J.S.; Zunino, M.P.; Lucini, E.I.; Zyg-
Este estudio representa una contribucin al cono- adlo, J.A.; Banchio, E.; Biurrun, F.; Rotman, A.;
cimiento de estas especies nativas en condiciones de Ahumada, O. (2010). Aromatic plants of north-
cultivo, ya que crecieron en las mismas condiciones west Argentina. Constituents of the essential oils
edficas y climticas. De esta manera los resulta- of aerial parts of seven Verbenaceae: Lantana and
dos son independientes de los numerosos factores Aloysia. J. Essent. Oil Res. 22(4): 289-293.

31
Rodriguez Morcelle y col.

Di Leo Lira, P.; van Baren, C.M.; Retta, D.; Bandoni, presentada para optar al Ttulo de Doctor, espe-
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32
Fecha de recepcin: 2 de noviembre de 2013
Fecha de aceptacin: 24 de febrero de 2015 Dominguezia - Vol. 31(2) - 2015

Fraccin aislada de Ricinus communis L. (Euphorbiaceae)

en el control del biodeterioro de documentos patrimoniales

Jos de la Paz Naranjo1, Sandra Gmez de Saravia2, Patricia Battistoni3 *,

Mara Larionova4, Patricia Guiamet3, 5

1
Museo Ernest Hemingway. Finca Viga, km 12 , San Francisco de Paula, 19180. San Miguel del Padrn, Ciudad
de La Habana, Cuba. [email protected]
2
Centro de Investigaciones y Desarrollo en Tecnologa de Pinturas-CIDEPINT (CICBA-CONICET), 52 e/121 y 122,
La Plata (1900), Argentina. [email protected]
3
Instituto de Investigaciones Fisicoqumicas Tericas y Aplicadas (INIFTA). UNLP, CCT La Plata CONICET. CC
16, Suc. 4, (1900), La Plata, Buenos Aires, Argentina.
4
Instituto Superior de Medicina Militar Dr. Luis Daz Soto Avenida Monumental y Carretera del Asilo. 11700. Ciudad
de La Habana. Cuba. [email protected]
5
Facultad de Ciencias Veterinarias, UNLP. CONICET. Argentina. [email protected]
*
Autor a quien dirigir la correspondencia: [email protected].

Resumen

Microorganismos, insectos y roedores causan alteraciones en documentos y objetos de inters patrimonial.

Para combatirlos son empleados numerosos mtodos; algunos causan un impacto negativo en el medio am-
biente, daan la salud del personal que los aplica y aceleran el proceso natural de deterioro. Los productos
naturales obtenidos de plantas son una eleccin efectiva para combatirlos pues, entre sus beneficios, est
el no contaminar el medio ambiente. El objetivo de este trabajo fue determinar el efecto biocida de una
fraccin aislada de hojas de Ricinus communis L. (Euphorbiaceae) en el control del biodeterioro de docu-
mentos patrimoniales. Se evalu su actividad antimicrobiana frente a microorganismos aislados de docu-
mentos depositados en el Archivo Nacional de la Repblica de Cuba y en el Archivo Histrico del Museo
de La Plata, Argentina. Se determin el efecto de la fraccin sobre la acidez y la reserva alcalina del papel
despus de un proceso de envejecimiento acelerado y se calcul la dosis letal media (DL50) en ratones. La
fraccin de R. communis se aisl por extracciones sucesivas con solventes orgnicos de polaridad creciente.
La caracterizacin qumica de la fraccin aislada se determin por espectroscopa IR y cromatografa en
silicagel. El espectro IR mostr la presencia de un grupo nitrilo y otro, grupo carboxilo. En la cromatografa
se identificaron 7 compuestos, entre los que predominaron ricinina y rutina. La actividad antimicrobiana se
determin por el mtodo de difusin radial simple y tuvieron efecto dosis dependiente sobre Enterobacter
agglomerans, Bacillus polimixa y Streptomyces sp. No se encontraron variaciones estadsticamente signifi-
cativas en los valores de pH y la reserva alcalina. Estos y futuros resultados permitirn obtener un producto
natural con actividad biocida, til en el control del biodeterioro.

Palabras clave: biocida - biodeterioro - Ricinus communis L.

Key words: biocide - biodeterioration - Ricinus communis L.

33
de la Paz Naranjo y col.

Isolated Fraction of Ricinus communis L. in the Control of Biodeterioration

of Heritage Documents

Summary

Microorganisms, insects and rodents cause alterations in documents and heritage objects of interest. To
combat them numerous methods are employed, some have a negative impact on the environment, they
also damage the health of the staff who apply them, and accelerate the natural process of deterioration.
Natural products from plants are an effective choice to combat them, among their benefits, one is not
polluting the environment. The objective of this work was to determine the biocidal effect of a fraction
isolated from leaves of Ricinus communis L. in the control of biodeterioration of heritage documents. We
evaluated their antimicrobial activity against isolates of documents deposited in the National Archives
ofthe Republic of Cuba and in the Historical Archive of the Museum of La Plata, Argentina. The effect of
the fraction of the alkaline reserve and acidity of paper after an accelerated aging process was determined,
and the median lethal dose (LD50) in B6D2F1 male mice (18-20 g) was calculated. The Ricinus communis
L. fraction was isolated by successive extractions with organic solvents of increasing polarity. The chemi-
cal characterization of the isolated fraction was determined by IR spectroscopy and chromatography on
silica gel. The IR spectrum showed a band at 2222 cm-1 attributed to the nitrile group and another band at
1659 cm-1 attributed to the carboxyl group. The chromatography showed 7 elements among which ricin
and rutine predominated. The antimicrobial activity was determined by single radial diffusion method.
Concentrations of 0.5 and 1.0 mg / hole were dose dependent on Enterobacter agglomerans, Bacillus
polimixa, and Streptomyces sp. There were no statistically significant variations in the values of pH and
alkaline reserve. The oral LD50 was calculated at 388.08 mg / Kg. These, and future results will get a
natural product with biocidal activity, useful in biodeterioration.

Introduccin

Hace ms de 2.300 aos ya Aristteles, en Historia Los agentes biolgicos que causan alteraciones
Animalium, escribi: El documento no debe ser vis- en archivos, bibliotecas y museos son esencialmente
to como objeto fsico sino como vnculo de memoria. microorganismos (hongos y bacterias), roedores e
Este nexo lo hace pieza clave del patrimonio cultural insectos.
de una nacin y de la humanidad. Su conservacin es Bacillus sp. por ejemplo, puede atacar la celulosa, el
una necesidad de primer orden. Sin l resulta impo- pergamino y las colas, provocan el deterioro de los do-
sible relatar los hechos que conforman la historia de cumentos debido a la produccin de metabolitos como
un pas. Los primeros factores de alteracin fueron, amilasa, celulasas, N - acetil - - glucosaminidasa,
el propio hombre con sus guerras lo que ocasio- cido lctico y fosfatasa cida, que causan descenso de
naba incendios y destruccin y las inundaciones pH y originan manchas violceas o rojizas y quiebres
de los grandes ros como el Tigris y ufrates que en el papel. Streptomyces sp. tiene actividad celuloltica
acabaron con poblados enteros y con sus archivos y y lignoltica y ha sido aislado de pegamentos, libros
bibliotecas. Posteriormente, fueron los insectos los antiguos, peridicos, pergaminos y documentos con
que ocasionaron las mayores prdidas. encuadernacin en cuero (Aktuganov y col., 2007).

34
 Dominguezia - Vol. 31(2) - 2015

Para combatir el biodeterioro del patrimonio Por lo expuesto fue objetivo de este trabajo
documental son empleados numerosos mtodos, estimar el efecto biocida de una fraccin aislada
como: agua oxigenada, hipoclorito de sodio, amonio, de las hojas de Ricinus communis en el control del
tributil estao, fenol, timol y salicilanilidas (Ramrez biodeterioro de documentos patrimoniales y valorar
Muoz, 2011); causan un impacto negativo en el su efecto sobre la estabilidad del papel.
medio ambiente, daan la salud del personal que los
aplica y aceleran el proceso natural de deterioro de
los materiales que los reciben. Otros, como el uso Materiales y mtodos
de gases inertes son de eficacia demostrada, pero sus
condiciones tcnicas y de costo limitan su generali- Material vegetal, aislamiento e identificacin de
zacin y la aplicacin en determinadas instituciones la fraccin
culturales (Valentin, 2004).
Ricinus communis L. (Euphorbiaceae) (higue- Como material vegetal se emplearon las hojas del
rilla, higuereta, palmacristi, ricino, higue- Ricinus communis (Figura 1) que crecen en la pro-
ra del diablo, entre otros), es una planta extica vincia de Ciudad de La Habana, Cuba.
invasiva presente en muchos pases y cultivada en
algunas regiones del mundo por el aceite de sus
semillas. Es nativa de clima tropicales aunque se ha Figura 1.- Ricinus communis detalle de la planta
adaptado a climas subtropicales y templados (Ali y
col., 2008).
La planta tiene diversos usos, por ejemplo;
los tallos se utilizan para la fabricacin de papel,
pero las semillas son lo ms importante econ-
micamente; de ellas se extrae el aceite de ricino
o de castor, que se utiliza para combatir el dolor
de estmago, la fiebre, la gripe, las infecciones y
las anginas, como emoliente y cicatrizante, pero
tambin como lubricante tcnico importante para
la manufactura de jabones y tinturas (Scarpa y
Guerci, 1982).
Las semillas de esta planta contienen alre-
dedor del 50% de aceite, ricinina (alcaloide) y
ricina, una glicoprotena - lectina, muy txica
que aglutina los glbulos rojos sanguneos y que
permanece en la pulpa despus de extraer el aceite. La especie en estudio pertenece a la familia
Los anlisis qumicos de las semillas y la com- Euphorbiaceae y se encontraba en estadio de flora-
posicin elemental de las clulas del endosperma cin en el momento de la recoleccin. Las hojas se
confirman el alto potencial de R. communis como lavaron con agua y luego se secaron en estufa con
una rica fuente de protena y aceite con posibles recirculacin de aire a temperatura entre 37 - 40 C
usos en la produccin de biodisel (Perea-Flores durante 24 horas.
y col., 2011). El material secado fue molido en forma mecnica
Estudios cientficos avalan su efecto biocida y se obtuvo un producto de partculas muy finas. Se
contra Escherichia coli, Staphylococcus aureus, hidrat con 1 litro de agua caliente y se concentr
Pseudomonas aeruginosa, Salmonella typhimurium, al vaco hasta del volumen inicial. Seguidamente,
Proteus vulgaris, Bacillus subtilis, Candida albicans, se filtr y el filtrado fue extrado con acetato de etilo
Streptococcus progenies, Klebsiella pneumonia y (EtOAc) en ampolla de decantacin. A continuacin
Aspergillus niger, as como sus propiedades antioxi- fue evaporado el solvente hasta su sequedad total,
dante, antiasmtica, antidiabtica, inmunomodula- y el residuo fue disuelto en etanol caliente y se
dora, hepatoprotectora, lipoltica y antiinflamatoria dej enfriar para su cristalizacin. Posteriormente
(Jena y Gupta, 2012). los cristales formados fueron recristalizados por

35
de la Paz Naranjo y col.

tres tiempos y secados a 40 C. Los tres tiempos se Previo al estudio las bacterias se mantuvieron en
hicieron con el objetivo de obtener cristales purifi- agar nutritivo por 24 h, y posteriormente se prepar
cados. La solucin de etanol fue evaporada al vaco una suspensin bacteriana que correspondi a 1x106
y obtenida la fraccin que se iba a evaluar. UFC/ml, segn escala de Mc Farland. La actividad
La identificacin de los cristales se determin por antimicrobiana de la fraccin fue determinada por
espectroscopa infrarrojo medio. Del mismo modo, el mtodo de difusin radial simple en pocillos
fue realizada una cromatografa en capa delgada (Borrego y col., 2011).
(TLC) (slica gel 60 F254) para conocer su compo- Se sembraron placas de Petri con 15 ml de agar
sicin qumica. El sistema de solvente utilizado fue nutritivo estril con la suspensin bacteriana y 10 l
EtOAc- MetOH- H2O (100:17:13) revelador: AlCl3 de la fraccin en medio acuoso que fue adicionado
5% en MeOH, UV 366 nm. Los patrones utilizados en los pocillos ( 5 mm). Cada ensayo fue realizado
para la corrida cromatogrfica fueron rutina (querce- por triplicado y se evaluaron 4 dosis (0,12; 0,25;
tina - 3 - rutinsido) y ricinina, alcaloide txico que 0,50 y 1,0 mg/pocillo). Un pocillo adicional con
se encuentra en las semillas del Riciunus communis y agua estril fue incluido en el ensayo como control
que acta inhibiendo la sntesis de protenas al unirse negativo, y otro con sulfato de gentamicina a la
de manera irreversible a los ribosomas eucariotas concentracin de 0,40 mg/pocillo como control
(Figura 2). positivo. Posteriormente las placas se incubaron por
24 h a 28 C y se observaron las zonas de inhibicin
del crecimiento, que fueron medidas en milmetros.
Figura 2.- Estructura qumica de la ricinina El dimetro (d) de los halos de inhibicin se midi
en mm: d 6 sin actividad; entre 6-9 actividad mo-
derada; 9 actividad positiva.

Determinacin de la dosis letal media (DL50 )

La toxicidad aguda de la fraccin aislada de las

hojas de R. communis fue determinada en ratones
hbridos machos B6D2F1 (18 20 g). Los animales
fueron mantenidos en ayunas 8 horas antes del ex-
Determinacin de la actividad antimicrobiana perimento. En el momento del ensayo recibieron la
fraccin aislada en dosis nica (no fraccionada) por
Fueron utilizadas en el ensayo Enterobacter agglo- va oral en medio acuoso, y fueron observados por
merans (bacteria Gram negativa), Bacillus polimixa un perodo de 48 h (corto plazo) para registrar la
y Streptomyces sp. (bacterias Gram positivas), aparicin de sntomas txicos o muerte. La DL50 fue
aisladas de documentos depositados en el Archivo calculada usando el mtodo Litchfield y Wilcoxon
Nacional de la Repblica de Cuba y en el Archivo (Glantz, 1992). Las dosis evaluadas se presentan
Histrico del Museo de La Plata, Argentina. en la tabla 1.

Tabla 1.- Estimacin de la DL50

Dosis Nmero de animales Valor Valor

Grupo
mg/kg Muertos Total observado calculado
1 250 0 10 0,12 0,41
2 300 1 10 10 6,11
3 350 2 10 20 26,76
4 400 4 10 40 57,21
5 450 9 10 90 81,29
6 500 10 10 97,88 93,59

36
 Dominguezia - Vol. 31(2) - 2015

Estudio de acidez en tiras de papel K: constante de la reaccin; Ea: energa de acti-

vacin; R: constante de los gases; T: temperatura
Las variables predictivas usadas fueron: contenido absoluta del proceso en grados Kelvin; S: factor de
mnimo de carbonato clcico que neutraliza la ac- frecuencia.
cin de los cidos, medida segn la reserva alcalina El extracto acuoso en concentracin de 100
y el pH, que se midi con un electrodo de mem- mg/ml (100 mg de cristales de fraccin aislada en
brana plana acoplado a un pH-metro de precisin 1 ml de agua destilada) se aplic con la ayuda de
(Metrohm 780, Suecia). Ambas determinaciones una pipeta automtica Eppendorf, hasta la satura-
se realizaron antes y despus del envejecimiento cin de las tiras de papel de 2 cm2 (Papel Archive
acelerado. Se utiliz agua destilada como control Text. Ref. 678-70A4). Fue incluido un control con
negativo (Figura 3). agua destilada. Todos los ensayos se realizaron
por cuadruplicado y el volumen absorbido fue de
1 ml.
Figura 3.- Marcha de trabajo para el estudio de la
acidez Anlisis estadstico

Para detectar diferencias significativas entre valores

antes y despus del proceso de envejecimiento del
papel (reserva alcalina y pH) y la actividad anti-
microbiana (0,12; 0,25; 0,50 y 1,0 mg/pocillo) de
la fraccin aislada, se utiliz el Test T. El nivel de
significacin fue de p menor o igual que 0,05.

Resultados y discusin

El mtodo de envejecimiento acelerado emplea- El anlisis espectroscpico y cromatogrfico de la

do fue el descrito por Browning (1969); utiliza el fraccin aislada de las hojas de R. communis, em-
calor seco a 100 C durante 72 horas para predecir pleando la cromatografa en capa delgada (TLC),
efectos en aproximadamente 25 aos a temperatura revel la presencia de rutina y el alcaloide ricinina.
ambiente y se sustenta en la ecuacin de Arrehenius Adems, en el espectro IR, se detect una banda
(Browning, 1969): intensa a 2222 cm-1 atribuida al grupo nitrilo y otra
k = s (- Ea/RT) banda relativa a los 1659 cm-1 atribuida al grupo
donde: carboxilo (Figura 4).

Figura 4.- Espectro IR de la fraccin aislada de las hojas de Ricinus communis

37
de la Paz Naranjo y col.

La literatura cientfica refiere que los flavonoides Se ha encontrado efecto txico de la ricinina so-
tienen efecto biocida y que los preparados obtenidos bre el sistema nervioso central en ratones, y efectos
de esta planta han demostrado efecto antibacteriano y como insecticida, ovicida y ovoposicida, frente a
antifngico, que sugiere que estos compuestos seran Callosobruchus chilensis L., uno de los colepteros
responsables de la actividad encontrada en nuestra ms destructores de granos de leguminosas almace-
investigacin (Jena y Gupta, 2012; Takano y col., nados. Este efecto es interesante, pues los insectos se
2007). encuentran entre los agentes biolgicos deteriorantes
La calidad, la composicin, las propiedades presentes en archivos, bibliotecas y museos.
fisicoqumicas y la naturaleza del aceite de Ricinus El sulfato de gentamicina, aminoglucsido, fue
communis vara de acuerdo con el mtodo de extrac- empleado como control positivo por ser activo contra
cin empleado (Perdomo y col., 2013). Gram negativas, especialmente Escherichia coli,
Por otro lado, Farah y col. (1988) plantea que Pseudomonas aeruginosa, especies de Klebsiella,
la ricinina inhibe la cadena de transporte electr- Enterobacter, Serratia, Citrobacter, y especies de
nico, que podra justificar el efecto encontrado en Staphylococcus.
este estudio de la actividad biocida ante bacterias, Por su parte, la DL50 de la fraccin fue estimada
partiendo de la base de que la cadena de transporte en los 388,08 mg/kg (coeficiente de regresin lineal
electrnico es fundamental para la vida celular de los R=0,95, p 0,05). No fueron observados efectos
organismos aerbicos, ya que es su principal fuente txicos en los animales que recibieron el vehculo
de obtencin de energa. (agua destilada). El efecto fue significativo en dosis
La actividad antibacteriana y antifngica de R. de 500 mg/kg. En estos ejemplares la muerte ocurri
communis ha sido informada por varios investigado- en las primeras dos horas despus de la administra-
res. Sin embargo, Upasani y col. (2003) encontraron cin de la droga ensayada. Estos resultados reco-
una actividad insignificante. miendan su uso, incluso, como rodentizida ya que los
En este trabajo, en general, se observ una acti- roedores son responsables de prdidas importantes
vidad moderada de R. communis, la mayor fue para en archivos y bibliotecas (Tabla 1).
Enterobacter agglomerans, posiblemente por ser La acidez es una de las causas que ms influyen
Gram negativa. Bacillus polimixa fue el ms resis- en el deterioro del papel y existen normas basadas
tente (Tabla 2). Este gnero bacteriano es el ms casi exclusivamente en la determinacin de la acidez
resistente entre las bacterias Gram positivas (Len- para predecir su permanencia. Uno de los mtodos
nette, 1985) y es una especie formadora de esporas. ms fiables es la determinacin del pH, debido a
Sin embargo, (Jena y Gupta, 2012) informan efecto la conductividad que se genera en presencia de
frente a Escherichia coli, Staphylococcus aureus, humedad.
Pseudomonas aeruginosa, Salmonella typhimurium, Por su parte, el contenido de carbonato clcico en
Proteus vulgaris, Bacillus subtilis, Candida albicans el papel es esencial para neutralizar la acidez gene-
y Aspergillus niger, de diferentes extractos a la con- rada como resultado del envejecimiento natural o de
centracin de 200 mg/mL. la polucin atmosfrica. Se entiende entonces, que

Tabla 2.- Halos de inhibicin obtenidos con las diferentes concentraciones ensayadas
Concentracin Enterobacter Bacillus Streptomyces
mg/pozo agglomerans polimixa sp.
1,00 10 5 8
Fraccin de Ricinus 0,50 10 3 6
communis L. 0,25 5 0 1
0,12 0 0 0
Sulfato de gentamicina 0,40 17 17 32
Agua estril 0 0 0
Valor promedio medido en milmetros de los dimetros de los halos.

38
 Dominguezia - Vol. 31(2) - 2015

la mnima reserva alcalina permitida para considerar Los resultados revelaron una reduccin del pH
permanente un papel es la equivalente a un 2% de de ms de una unidad, pero no alteraron el brillo y
carbonato clcico de su peso en seco (mnimo de 0,4 el grado de polimerizacin. Sin embargo, los autores
moles de cido por kilogramo). recomiendan la utilizacin de este aceite, a bajas
En este trabajo la reserva alcalina del papel em- concentraciones, como preventivo de la contami-
pleado estuvo casi 100 veces por debajo del mnimo nacin fngica en lugares donde se atesora piezas
considerado. Esto sera perjudicial en caso de gene- patrimoniales.
rarse un fenmeno de acidificacin provocado por el
producto aplicado. Sin embargo, segn los resultados
obtenidos, el pH y la reserva alcalina no variaron en Conclusiones
grado estadsticamente significativo al realizar las
comparaciones antes vs despus de someter el papel 1. La fraccin aislada de las hojas de Ricinus com-
tratado con el producto. No result as en los papeles munis mostr efecto antimicrobiano moderado y
que solo recibieron agua destilada (Tabla 3). dosis dependiente y una DL50 estimada en ratones
de 388,08 mg/kg.
2. Esta fraccin no modific la acidez y su reserva al-
calina en papeles sometidos a envejecimiento artificial
bajo las condiciones experimentales del estudio.
Tabla 3.- Valores de significacin estadstica en el estudio 3. Estos resultados favorecen el uso prometedor
de acidez
de la fraccin en el control del biodeterioro de los
Reserva documentos patrimoniales depositados en archivos,
pH
alcalina bibliotecas y museos.
Tratamiento
Significacin estadstica
p 0,05
Agradecimientos
Agua destilada 0,005 0,005
Los autores argentinos agradecen a la Universidad
Ricinus communis 0,873 0,698
Nacional de La Plata (UNLP) Proyecto de incenti-
vos 11N/578 y 11X/632, al CONICET- PIP 0200 y
a CICBA (Res-833/14).

Se podra atribuir a la presencia de polifenoles Referencias bibliogrficas

que constituyen uno de los metabolitos secundarios
ms numerosos en las plantas, con ms de 800 es- Aktuganov, G.E.; Galimzyanova, N.F.; Melentev,
tructuras conocidas en la actualidad. A.I.; Kuzmina, L.Y. (2007). Extracellular
Su propiedad como antioxidante proviene de su hydrolases of strain Bacillus sp. 739 and their
gran reactividad como donantes de electrones de involvement in the lysis of micromycete cell
hidrgenos y de la capacidad del radical formado. walls. Microbiology 76(4): 413-420.
Un estudio similar con aceites esenciales ob- Ali, R.M.; Elfeky, S.S.; Abbas, H. (2008). Response
tenido de flores de Lavandula angustifola Mill. of salt stressed Ricinus communis L. to exoge-
(Lamiaceae) fue desarrollado por Rakotonirainy nous application of glycerol and/or aspartic acid.
y Lavdrine (2005). En esta investigacin las Journal of Biological Science 8(1): 171-175.
variables predictivas de dao empleadas fueron: Borrego, S.; Valds, O.; Vivar, I.; Lavin, P.; Guiamet,
pH (extraccin en fro); factor de difusin de P.; Battistoni, P.; Gmez de Saravia, S.; Borges,
refractancia (brillo); y grado de polimerizacin P. (2012). Essential oils of plants as biocides
viscosimtrica, y se midieron, igualmente, antes against microorganisms isolated from Cuban and
y despus de un proceso de envejecimiento acele- Argentine documentary heritage. International
rado (temperatura 80 C y humedad relativa 65% Scholarly Research Network. ISRN Microbiology
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40
 ndice acumulado

Dominguezia 30(1) 2014

Anatoma comparada de races medicinales de hierbas terrestres rioplatenses (Buenos Aires, Repblica Argentina) (Marta
N. Colares, Marcelo P. Hernndez, Mara C. Novoa, Vanesa G. Perrotta, Silvana Auguet y Ana Mara Arambarri)

Relacin entre actividad antioxidante y contenido de fenoles y flavonoides totales en semillas de Cucurbita spp. (Gabriela
M. Valenzuela, Alicia L. Cravzov, Adriana S. Soro, Alicia L. Tauguinas, Mara C. Gimnez y Mabel R. Gruszycki)

Control de calidad farmacobotnico y fitoqumico de Hibiscus sabdariffa L. (Malvaceae) (Laura V. Vivas Leguizamn,
Marcelo L. Wagner y Rafael A. Ricco)

Identificacin de C-glicosilflavonas por HPLC y FTIR en extractos acuosos y metanlicos de Passiflora coerulea y
P.foetida (Passifloraceae) (Marta E. Petenatti, Mara A. Gettel, Mariana C. Popovich, Mara F. Garro, Gerardo Cam,
Leslie Aragn, Luis A. Del Vitto y Elisa M. Petenatti)

Caracteres anatmicos, morfofuncionales y qumicos de Senecio subpanduratus (Asteraceae) (Adriana Gratti, Mabel S.
Feijo, Elizabeth A. Barrientos, Roxana B. Peneff y Evangelina Laztra)

Dominguezia 30(2) 2014

Determinacin de calidad de marcela Achyrocline satureioides (Lam.) DC. (Asteraceae). Parmetros fitoqumicos
(Daiana S. Retta)

Micromorfoanatoma de hoja de Piper patulum Bertol. (Piperaceae) colectadas en Samayac, Suchitepquez, Guatemala
(Luis E. lvarez, Carolina Rosales de Zea, Armando Cceres)

Estudios anatmicos y anlisis fitoqumicos preliminares de Monocotiledneas hidrfitas en mallines de la estepa

patagnica (Elizabeth A. Barrientos, Mabel S. Feijo, Roxana B. Peneff, Evangelina Laztra, Adriana C. Gratti)

Contenido de polifenoles en Ligaria cuneifolia y su relacin con la capacidad antioxidante (Cecilia B. Dobrecky, Ezequiel
Moreno, Mariana Garcs, Silvia Lucangioli, Rafael Ricco, Pablo Evelson, Marcelo L. Wagner)

Caracterizacin por HPLC y FTIR de los extractos acuosos de tres especies diurticas del centro-oeste argentino (Mara
F. Garro, Mara A. Gette, Marta E. Petenatti, Mariana C. Popovich, Gerardo Cam, Elbio Saidman, Luis A. Del Vitto,
Elisa M. Petenatti)

Plantas medicinales comercializadas en el mercado municipal de la ciudad de Pilar, Dpto. eembucu, Paraguay (Isabel
Basualdo, Nlida Soria)

Estudio morfoanatmico de dos especies de Myrcianthes de las yungas, Jujuy (Argentina) (Raquel A. Romeo, Alberto
A. Gurni)

Dominguezia 31(1) 2015

Qumica y farmacologa de una planta medicinal argentina: Artemisia copa (Valeria A. Moscatelli)

Identificacin de microestructuras y anlisis arqueobotnico en sitios del Holoceno tardo de la llanura aluvial del Paran
medio (Silvia Cornero, Luca Rangone, Osvaldo Di Sapio)

Flavonoides de Calendula officinalis L. bajo cultivo. Efecto de diferentes fechas de siembra y fertilizacin (Federico Russo;
Martn I. Rodrguez Morcelle; Nancy M. Apstolo)

Toxicidad de aceites esenciales de Verbenaceas sobre adultos de Diuraphis noxia (Hemiptera: Aphididade) (Carolina
Snchez Chopa, Lilian R. Descampsr)

Calidad de hierbas medicinales por recoleccin directa (Jaime R. Dubner, Perla L. Gonzlez, Graciela M. Ibargoyeni)

Recursos fitogenticos. Conservacin de las especies medicinales en Paraguay (Parte I) (Nlida Soria, Isabel Basualdo)

Etnobotnica histrica de las Misiones Franciscanas de Formosa I. Hallazgos documentales de fuentes primarias, anlisis
crtico y comparacin con la obra Erbe medicinali del Chaco de Franz (1925) (Leonardo M. Anconatani, Gustavo F.
Scarpa)