UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS
Universidad del Per, Decana de Amrica
Ao de la Inversin para el Desarrollo Rural y la Seguridad Alimentaria
E.A.P. FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUMICA
Semestre Acadmico 2013-I
DEPARTAMENTO ACADMICO DE FARMACOLOGA,
BROMATOLOGA Y TOXICOLOGA
TOXICOLOGA Y QUMICA LEGAL
Prctica N 09:
Determinacin de Txicos Orgnicos Fijos-
Identificacin de Residuos 1 y 4
GRUPO: Lunes, Mesa 01
INTEGRANTES:
Campos Salazar, Brayan 09040052
Limas Pino, Priscila 08040096
Serna Torres, Yuli 08010464
Torpoco Vivas, Yovana 09040138
Yarin Carrizales, Carlos 09040081
Yataco Lazaro, Marcela 09040134
PROFESOR: Dr. Moiss Garca Ortiz
FECHA DE PRCTICA REALIZADA: 14/05/2013
OBJETIVOS
Identificar los compuestos orgnicos fijos presentes en una muestra
biolgica de orina mediante reacciones especficas.
Determinar la presencia de salicilatos, fenotiazidicos y benzodiacepinas
presentes en una muestra biolgica de orina.
Conocer las propiedades, mecanismos de accin y las consecuencias de sus
efectos lesivos.
INTRODUCCIN
NEUROLEPTICOS TRICICLICOS
FENOTIAZINAS: Como se mencion, la fenotiazina es un ncleo heterocclico formado
por tres anillos resultantes de la unin de dos anillos benznicos a travs de un puente de
N y S. En el grupo de tioxantenos, el puente de N se reemplaza por un puente de C,
siendo el clorprotixeno el anlogo de la CPZ.
El ncleo fenotiazina no posee acciones psicofarmacolgicas, pero los adquiere por
sustituciones en posiciones 2 y 10 (R1 y R2). En los neurolpticos, derivados
fenotiaznicos, la cadena lateral en R1 posee siempre 3 tomos de C seguidos de 1 tomo
de N. Esta cadena lateral, es indispensable para el mantenimiento de las propiedades
antipsicticas. La adicin de un cloro en R2 origina una asimetra en el ncleo
fenotiaznico, con lo que se incrementa la accin farmacolgica. El agregado de un radical
CF3 en la misma posicin, incrementa an ms las acciones antipsicticas y antiemticas
de las fenotiazinas.
a. Fenotiazinas dimetlicas: Estas fenotiazinas, tienen dos grupos metilos en el
nitrgeno terminal de la cadena lateral (R1). Poseen una accin sedativa evidente.
Sus efectos tranquilizantes son intensos por lo que son utilizados comnmente en
episodios esquizofrnicos agudos, excitacin manaca, delirios, agitacin ansiosa, etc.
Provocan usualmente hipotensin ortosttica y extrapiramidalismo moderados. Su
accin antiemtica, es tambin de moderada intensidad. El prototipo es la CPZ. La
levomepromazina, se diferencia de la CPZ, en que posee un grupo CH3 adicional en el
segundo carbono de la cadena lateral siendo ms sedativa, y posee adems una
potente accin antilgica. La promazina, no posee el Cl en posicin 2, nica diferencia
con la CPZ, siendo la intensidad de sus efectos menores que ella.
b. Fenotiazinas piperaznicas: (con un grupo piperazina o piperazinil en la
cadenalateral). Son las fenotiazinas ms potentes. Su accin antipsictica permite su
uso crnico en pacientes esquizofrnicos. Prcticamente no provocan hipotensin
ortosttica, o su accin es muy pequea, en este sentido. Son marcadas sin embargo
sus acciones extrapiramidales (de mayor intensidad que las dimetlicas). Son activas
en dosis menores que las CPZ, y su accin es ms rpida provocando escasa accin
sedativa.
c. Fenotiazinas piperidlicas: (contiene un grupo piperidina, en la cadena lateral).
Son las drogas menos potentes. La ms conocida es la tioridazina, que tiene una
indicacin encasos de esquizofrenia con sndromes depresivos. Tomando como base
las acciones de la clorpromazina, se ha demostrado que la flufenazina, es a dosis
iguales, aproximadamente 20 veces ms potente que aquella, y que la trifluoperazina
y tioproperazina lo son 10 veces ms. La tioridazina, por otra parte, posee solo la
mitad de la actividad farmacolgica de la clorpromazina. En general, las diferencias
de accin observadas, son solo cuantitativas, y no cualitativas. Se puede afirmar que
las fenotiazinas piperaznicas, son ms potentes que las dimetlicas y estas ms
potentes que las piperidlicas, corriendo por otra parte la potencia de la accin
antipsictica paralela a la intensidad de los efectos extrapiramidales, pudiendo esto
considerarse como ndice de la accin antipsictica.
GENERALIDADES:
Se incluye un grupo de sustancias que comnmente producen intoxicaciones que pueden
ser de evolucin mortal, lo cual muchas veces puede evitarse por la celeridad del
tratamiento aconsejado en cada caso.
De ah la importancia de este captulo de la toxicologa, en la cual se usarn para la
identificacin de dichas sustancias, reacciones relativamente simples, rpidas y en
algunos casos especficos.
REACTIVOS
Tetracloruro de fierro Cl3Fe 5%
cido clorhdrico HCl 10%
Rvo de Trinder
Rvo F.P.N.
Rvo Dragendorf
Nitrito de sodio NO2Na 0.1%
Sulfamato de amonio 1%
N-naftiletilendiamino clorhidrato 0.1%
MATERIALES
Capsula de porcelana
Tubo de ensayo de vidrio
Bao maria
Placa cromatogrfica de silicagel
Cmara cromatogrfica
Capilar
Pipeta de vidrio de 1, 5 y 10 ml
Propiteta de plstico o bombilla
EQUIPOS
Cmara extractora de gases de laboratorio
Espectrofotmetro
Reactivo FPN (cloruro frrico, c. perclrico, c. ntrico):
N03H: hacer una dilucin 1:2 de NO3H concentrado
Cl04H: 20 ml de Cl04H 70% en 50 ml de agua, dejar enfriar y llevar a 100 ml
Cl3Fe: disolver 5 gr de Cl3Fe en 50 ml de agua destilada, llevar a 100ml
Mezclar stas soluciones en las siguientes proporciones. una parte de la solucin de Cl 3Fe,
nueve partes de la solucin de Cl04H y diez partes de la solucin de N0 3H. Conservar en
frasco color caramelo.
REACCIONES COLORIMETRICAS:
Fenotiazinas:
1) Reaccin con reactivo FPN: A 0,5 ml del extracto se le agregan unas gotas del
reactivo FPN. Observar los diferentes colores.
Esta reaccin tiene valor cuando da negativo, ya que permite afirmar que no hay
fenotiazinas.
2) Reaccin de Denigs: A 0,5 ml del extracto etreo se le agrega 0,5 ml de CIH
concentrado. Observar los distintos colores.
Agregar una granalla de Zn, calentar a bao de Mara durante 5 minutos hasta
decoloracin, separar la granalla, enfriar y agregar dos gotas de N0 2Na al 1 %, formando
dos capas. En la interfase aparece un color similar al de la salificacin con ClH, que por
agitacin desaparece.
INVESTIGACION CROMATOGRAFICA:
Luego de ensayar distintos mtodos de anlisis, se observ que el que presentaba mayor
ductilidad y permita obtener una primera orientacin sobre la especie investigada era la
metodologa de cromatografa en capa fina (TLC).
Por ende y partiendo de esta tcnica se procede a realizar un estudio diferencial de los
distintos elementos txicos que pueden ser identificados mediante el agregado
secuencial de distintos reactivos.
Es as que tomando las tres fracciones tpicas obtenidas por los mtodos de aislamiento
de txicos orgnicos fijos (ter de petrleo, ter alcalino, ter cido, cloroformo alcalino)
y empleando una sola corrida cromatogrfica para cada una de ellas, logramos por el
agregado sucesivo de diversos reactivos revelantes combinados y con el empleo de luz
ultravioleta, la orientacin hacia la identificacin de: plaguicidas, barbitricos,
benzodiacepinas, fenotiazinas, hidantonas, carbamatos, analgsicos antipirticos,
anestsicos, drogas morfelicas y alcaloides en general.
Debemos dejar aclarado que con esta tcnica no pretendemos identificar un compuesto
en forma categrica, sino que nos permite acotar el nmero de txicos posibles y luego
mediante otras tcnicas ms sofisticadas identificar el producto con certeza, como por
ejemplo empleando: HPLC, CG, CG MASA.
PARTE EXPERIMENTAL:
El proceso analtico que se describe consta de los siguientes pasos.
a) Preparacin de las cromatoplacas: se emplea slicagel G, H HP254
b) Eleccin del solvente de desarrollo: se trata de elegir solventes rpidos, de buena
resolucin, que nos aseguren una buena diferenciacin de los diversos txicos.
c) Desarrollo del cromatograma: Las sucesivas placas se desarrollan en cubas
rectangulares previamente saturadas con el solvente de corrida y a temperatura
ambiente,
d) Eleccin de reactivos reveladores: En general, son los empleados comnmente en la
prctica toxicolgica. Entre ellos y mediante un estudio exhaustivo de sus caractersticas
cromticas, se seleccionaron aquellos que permitan su utilizacin secuencia sin perder
sus propiedades especficas y sin interaccin entre s.
Identificacin de Fenotiaznicos (R4)
Reaccin de caracterizacin
Fundamento
Se basa en la formacin de un compuesto coloreado verde oscuro o azul-verde que
indica la presencia de compuestos fenlico como el cido fenilpiruvico (metaboltos) o de
cidos relacionados. El color puede aclararse lentamente pasando al amarillo.
Mtodo operatorio
Gts R4(diluido en etanol)
Evaporar
II gts Cl3Fe al 5%
Agrega gt de
HCl al 10%
El color azul-
verde no debe
Reaccin qumica
Mecanismo de accin
Resultado
Reactivo Positivo/Negativo Coloracin
Cl3Fe ++ Azul
No
HCl 10% ++
desaparece
Reaccin especfica
Fundamento: Forrest F.M y Forrest F.L, en 1960, propusieron un mtodo de
determinacin cualitativa basado en el uso de FeCl3, HClO3 y HNO3 (el reactivo FPN, de
fierro, perclrico y ntrico), el cual produce un radical libre con coloracin variable (azul,
azul violceo).
Mtodo Operatorio
III Gts del Rvo
FPN
5 mlCl3Fe 5%
45ml NO3H C
Gts R4 (diluido en 50ml Ac.
etanol) Perclrico
Evaporar
Mecanismo de Accin
Resultado
Reactivo Positivo/Negativo Coloracin
FPN + Rojo violceo
BIBLIOGRAFIA
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QUMICA LEGAL. Cuerpo Mdico Forense, Corte Suprema de Justicia de
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