ESTUDIO DE LA SANGRE
1.- Introduccin:
Desde el punto de vista histolgico, la sangre es un tejido conectivo lquido,
consiste en alrededor del 45% de elementos celulares: glbulos rojos, glbulos
blancos y plaquetas y 55% de lquido intercelular, dado por el plasma donde se
hallan suspendidos los elementos celulares o masa sangunea.
Su funcin de la sangre es el transporte de muchos materiales hacia los
rganos y tejidos del cuerpo. Este mecanismo vital depende del sistema
circulatorio y como resultado de la circulacin de la sangre, el medio ambiente
de cada clula del organismo que muestra una constancia notable.
Se logra una distribucin del color que permite mantener la temperatura
corporal uniforme y constante, la composicin qumica del lquido que baa a
las clulas est en equilibrio con la sangre circulante, as las concentraciones
de: H - O2 - PCO2 Na - Cl - K, sustancias nutritivas y otros productos vitales,
permanecen relativamente fijas y los productos metablicos celulares en lugar
de acumularse son removidos continuamente.
A este medio celular casi invariable, Claude Bernard le llam MEDIO INTERNO
cuya composicin normal es indispensable para la fisiologa de los diversos
rganos y sistemas para la vida del individuo.
La interrupcin de la circulacin sangunea durante unos cuantos minutos
puede ocasionar daos irreparables o la muerte, por las alteraciones nocivas
que acarrea en el medio ambiente de las clulas que son muy sensibles. La
conservacin de la constancia del medio interno constituye un aspecto de
control biolgico llamado por Cannon HOMEOSTASIS.
La constancia de la composicin de la sangres es relativa, debido a que
conforme fluye a lo largo del organismo, deja y recibe Material de todos los
lquidos corporales de suerte que muestra variaciones continuas. Cada
componente de la sangre muestra diferencias entre las personas normales y no
existe cifras uniformes debido a una serie de factores: edad, sexo, medio
ambiente, factores genticos, estado fisiolgico o patolgico del individuo; que
pueden hacer variar esta constancia.
2.- Marco Terico:
El interior de nuestro cuerpo no es exactamente como nos lo ensearon en clase
de anatoma. Abrir un cadver permite ver y estudiar la arquitectura y la estructura
orgnica, examinar la geografa de los msculos y los enlaces de cada sistema.
Sin embargo, no nos permite entender la constitucin del ser vivo... puesto que
falta la Vida en s. Faltan el movimiento, la circulacin de los lquidos orgnicos, de
la sangre y de la linfa que riegan, humedecen, calientan y nutren la intimidad
orgnica. Por lo tanto, la observacin microscpica de cualquier tejido muerto y
fijado con colorantes nunca nos ensear nada ms all de su estructura.
Tampoco ser posible descubrir qu es la vida si analizamos un tejido vivo, pero
aislado de su conjunto.
La vida es un conjunto de equilibrios con numerosas interdependencias. El medio
interno est compuesto por la sangre que circula por las arterias, las venas, los
capilares y por la linfa que es filtrada a travs de las paredes de los capilares, en el
interior de cada uno de los tejidos y rganos. Podra decirse que existe un medio
interno general que sera la sangre y un medio interno local, determinado por la
linfa intersticial. Esta proviene de la sangre y es, a la vez, la que la produce. Por el
hecho de que todas nuestras clulas se baan en este medio interno, existe una
relacin ntima de reciprocidad entre aqullas y ste: las clulas son modificadas
por el medio interno y tambin lo modifican. Cualquier acontecimiento que suceda
en nuestro interior depende del estado fsico, qumico y metablico del medio
interno.
Desde el punto de vista histlogico, la sangre es un tejido conectivo lquido.
Constituye en alrededor del 45% de elementos celulares: glbulos rojos, glbulos
blancos y plaquetas y 55% de lquido intercelular, dado por el plasma donde se
hallan suspendidos los elementos celulares o masa sangunea. Su funcin
principal de la sangre es el transporte de muchos materiales hacia los rganos y
tejidos del cuerpo. Este mecanismo vital depende del sistema circulatorio y como
resultado de l circulacin de l sangre, el medio ambiente de cada clula del
organismo muestra una constancia notable.
Se logra una distribucin del calor que permite mantener la temperatura corporal
uniforme y constante, la composicin qumica del liquido que baa a las clulas
esta en equilibrio con la sangre circulante, as las concentraciones de: H PO2
PCO3 Na K Cl, sustancias nutritivas y otros productos vitales, permanecen
relativamente fijas y los productos metablicos celulares en lugar de acumularse,
son removidos continuamente.
A este medio celular casi invariable, Claudio Gamard le llamo MEDIO INTERNO
cuya composicin normal es indispensable para la fisiologa de los diversos
rganos y sistemas para la vida del individuo.
La interrupcin de la circulacin sangunea durante unos cuantos minutos puede
ocasionar daos irreparables o la muerte, por las alteraciones nocivas que acarrea
en el medio ambiente de las clulas que son muy sensibles. La conservacin de
las constantes del medio interno constituye un aspecto del control biolgico
llamado por Cannon Homeostasis.
La constancia de la Composicin de la sangre es solo relativa, debido a que
conforme fluye a lo largo del organismo, deja y recibe materiales de todos los
tejidos corporales de suerte que muestra variaciones continuas. Cada componente
de la sangre muestra diferencias entre las personas normales y no existen cifras
uniformes, debido a una serie de factores: edad, sexo, medio ambiente, factores
genticos, estado fisiolgico o patolgico del individuo; que pueden hacer variar
esta constancia.
La sangre est formada por diversos componentes:
Glbulos Rojos o Hemates :
Son las clulas sanguneas ms numerosas y la hemoglobina que contienen es
la responsable de su color rojo.
Se forman en la mdula sea, que se halla dentro de los huesos del esqueleto,
desde donde son liberados en el torrente sanguneo.
Su funcin es transportar el oxgeno desde los pulmones a los diferentes
tejidos del cuerpo para que las clulas respiren, y tambin eliminan los
residuos producidos por la actividad celular (anhdrido carbnico).
Glbulos Blancos o Leucocitos
Son los encargados de proteger al organismo contra los diferentes tipos de
microbios. Cuando hay una infeccin aumentan su nmero para mejorar las
defensas. Unos se forman en la mdula sea y otros en el sistema linftico (bazo,
ganglios, etc).
Plaquetas
Son las clulas sanguneas ms pequeas. Se producen tambin en la mdula
sea y viven unos 6-7 das. Las plaquetas intervienen cuando se produce una
rotura en alguna de las conducciones de la sangre. Se adhieren rpidamente al
lugar de ruptura para que cese la hemorragia, dando tiempo a la formacin del
cogulo definitivo.
El Plasma
Es un lquido compuesto de agua, protenas, sales minerales y otras sustancias
necesarias para el funcionamiento normal del organismo y en donde se encuentran
"nadando" las clulas sanguneas.
Entre las sustancias de importancia que transporta el plasma estn las
siguientes:
La Albmina: Es una protena que ayuda a mantener el agua del plasma en
una proporcin equilibrada.
Las Globulinas: Son los anticuerpos encargados de la defensa de nuestro
organismo frente a las infecciones. Su disminucin acarrear una bajada de
defensas.
Factores de Coagulacin: Son imprescindibles para evitar las hemorragias.
La ausencia de algn factor de coagulacin puede ocasionar trastornos
hemorrgicos ya que se dificulta la formacin del cogulo.
Otras protenas transportan sustancias necesarias para el normal
funcionamiento de las clulas (grasas, azcares, minerales, etc).
Tipos de sangre
Una de las cosas ms ampliamente divulgadas acerca de la sangre humana es
que hay varios tipos de sangre o grupos sanguneos. Hasta ahora se han
identificado ms de 20 tipos de sangre 3. Por ejemplo, la sangre del tipo (o
grupo) A, o de algunos de los otros tipos comunes, B, AB y O. Si a una persona
con un tipo de sangre se le transfunde sangre de otro tipo se puede enfermar
gravemente e incluso morir. As es que los hospitales tratan de hallar sangre
compatible en los bancos de sangre, es decir, sangre del mismo tipo que la del
paciente.
Cabe destacar que entre los grupos sanguneos de menos compatibilidad se
encuentra el grupo "AA" por el contrario los grupos "O+" Y el "O-" tienen
compatibilidad con cualquier tipo de sangre.
3.- Materiales:
Material Biolgico:
- Alumno Voluntario por mesa de trabajo.
Material Qumico:
- Anticoagulante: oxalato de potasio al 2%
- Solucin de Turk; diluyente para glbulos blancos.
- Solucin de Hayem; diluyente para glbulos rojos.
- Solucin de Hidrxido de amonio al 0.4%
Material de Vidrio
- Cmara cuenta glbulos rojos y blancos: Neubauer.
- Tubos de Hematocrito: Wintrobe
- Tubos de Cuttler: para determinar velocidad de sedimentacin.
- Micropipetas de Shali; para dosje de hemoglobina.
- Tubos de ensayo por 15 mm.
- Pipetas cuenta glbulos rojos y blancos.
- Pipetas Pasteur.
- Pipetas por 15 mm.
- Lminas portaobjetos.
- Lminas cubreobjetos.
Equipos
- Centrfuga
- Foto colormetro.
- Microscopio.
4.- Procedimiento y resultados :
a) Obtencin de la muestra de sangre.- se hace una limpieza en la zona elegida
con alcohol yodado y luego introducimos la aguja en el vaso sanguneo
superficial. La muestra extrada es extravasada a un recipiente que contenga
un anticoagulante y luego se agita para que se homogenice
b) Recuento de Glbulos Rojos.- se siguen los siguientes pasos:
- Utilizando el tubo de goma de la pipeta, succionar sangres hasta la seal 0.5,
limpiando el exceso de sangre que haya quedado alrededor de la pipeta. Luego
llenar la pipeta con la solucin de la sangre ser igual a 1/200. Esta solucin
debe ser exacta ya que de ello depender que los resultados sean correctos,
quitamos el tubo de goma de la pipeta y taponando ambos extremos con los
dedos de la mano, mezclando el contenido con mucho cuidado. El recuento
deber llevarse acabo despus de realizada la dilucin y si esto no fuera
posible deber agitarse nuevamente antes del recuento
- Descartar las primeras gotas de la dilucin antes de llenar la cmara.
- Colocar una gota en el borde del cubre objeto de la cmara, de tal manera que
el lquido fluya por debajo, llenndose de esta manera la cmara.
- Poner la cmara en el microscopio y a un aumento de 45x contar las clulas en
los cuatro campos de las esquinas y el del centro de 16 cuadraditos cada uno.
Calcular el nmero de clulas por cada cuadrado (5x16=80).
- Clculo: las dimensiones de la cmara y el grado de dilucin, constituyen la
base del clculo. Cada uno de los cuadritos ms pequeos tiene una superficie
de 1/400 mm2, de los cuales se han contado 80, la profundidad es de 1/10 mm.
y la dilucin es de 1/200, por lo que la formula para calcular el numero de
hemates por mm3 seria el siguiente:
N x 4000 x 200 o N x 400 x 10 x 200
80 80
Donde:
N = # de hemates en los cuadrados contados
4000 = producto de superficie de cada cuadrito (1/400) x la altura (1/10)
200 = grado de dilucin
Regla Prctica: contar 80 cuadrados y agregarle 4 ceros, el resultado ser al
numero de glbulos rojos por mm3
c) Recuento de Glbulos Blancos: se siguen los pasos para el recuento de
glbulos rojos con la diferencia de:
- La pipeta de glbulos blancos se llena con las muestras de sangre hasta la
seal de 0.1se diluye con la solucin de TURK hasta la marca , quedando de
esta manera la solucin de 1/20
- Llenar la cmara con el lquido y comenzar el conteo con pequeo aumento de
los cuatro campos de las esquinas y sumarlos.
- Clculos: la altura de la cmara es de 0.1 mm, el grado de dilucin es de 1/20
por lo que , para el calculo de los glbulos x mm3 ser utilizado la siguiente
formula:
N x 10 x 20
2
Donde:
N= # de glbulos blancos contados en las cuatro esquinas.
Regla Prctica: a la suma total de glbulos blancos de los cuadrados se le agrega dos
ceros y se le saca la mitad, el resultado ser el numero de glbulos blancos por mm3
Glbulos Blancos = 16 x 4 = 64 cuadrados
Glbulos Rojos = 16 x 5 = 80 cuadrados
Glbulos Rojos:
ERITROCITOS =
Glbulos Blancos:
d) Hematocrito
Colocar en un tubo Wintrobe sangre oxalatada hasta la maraca de 100.
Centrifugamos por 15 minutos a 300 r/m, hasta que el nmero de hemates
permanezca estable, luego leer o hacer la lectura dada por el lmite superior
de la masa de los glbulos rojos en la escala graduada.
Los valores normales son:
Lactantes.. 44 a 66%
Nios.... 35 a 47%
Varones Adultos.. 40 a 45%
Mujeres Adultas 36 a 45%
Los valores normales varan no solo por la edad y sexo sino tambin dentro del
organismo.
Por el hematocrito en sangre arterial es menor que en sangre venosa, adems
difiere de un tejido a otro.
El hematocrito se emplea en clnica para calcular el volumen sanguneo total y
se toma como ndice en los trastornos caracterizados por alteraciones en la
cantidad de los elementos celulares de la sangre.
En la policitemia puede llegar al 70% mientras que en la anemia puede
descender al 25%.
Hematocrito: %
e) Dosaje de Hemoglobina
- Colocar en la micropipeta para el dopaje de hemoglobina 0.02ml. de la muestra
de sangre y luego pasarlo varias veces en un tubo de ensayo que contiene la
solucin de hidrxido de amonio al 0.4%. despus aforamos a 5ml. con dicha
solucin.
- Luego dejamos en reposo unos 10 minutos aproximadamente, para
posteriormente leerse en el fotocolormetro.
- La lectura dada por el fotocolormetro la multiplicamos por el factor
correspondiente y su resultado ser expresado en gramos de Hb. x 100ml. de
sangre
f) Constantes Corpusculares
Son en nmero de tres:
1. Volumen Corpuscular Medio (V.C.M).- volumen medio correspondiente a un
eritrocito.
V.C.M. = Ht.% x 10 = micras cbicas.
de hemates en millones
2. Hemoglobina Corpuscular Media (Hb.C.M).- cantidad media de hemoglobina
correspondiente a un eritrocito.
Hb.C.M. = Hb.% x 10 = micromierogramos (uug.)
de hemates en millones
Hb.C.M. =
3. Concentracin de Hemoglobina Corpuscular Media (C.Hb.C.M).-
concentracin de la hb dentro del eritrocito.
C.Hb.C.M. = Hb.% x 100 = %
Hematocrito
C.Hb.C.M.
g) Velocidad de Sedimentacin o Eritosedimentacin
Colocamos en el tubo de Cutler, que tiene una capacidad de 1ml. y esta
marcado con 50 divisiones de 1mm. Con el 0 en la parte superior de la
muestra de sangre con anticoagulante hasta la marca superior.
Dejamos en reposo en posicin vertical sobre un cubo de madera por el
lapso de una hora, al final del cual se leer el lmite que alcanza la columna
clara plasma en mm.
La sedimentacin de eritrocitos ocurre en tres fases:
1. Formacin de pilas de moneda o acumulacin de glbulos rojos,
no se forma cuando los eritrocitos son de morfologa anormal,
como puede ser en la anemia drepanocitica y la velocidad es
ms lenta.
2. Descenso rpido
3. Aglomeracin final de la masa eritroctica
La velocidad de sedimentacin se ve alternada cuando la concentracin de las
protenas plasmticas se halla aumentada y ellas tienden a acelerar la sedimentacin
de la sangre y facilitan la formacin de pilas de monedas, entre ellos tenemos el
fibringeno, globulinas, mientras que la albmina tiene efecto mnimo.
La velocidad de sedimentacin suele estar acelerada en las infecciones agudas,
crnicas (fiebre reumtica, TBC, artritis) anemias graves, trombosis coronaria aguda y
neoplasias malignas. En la diabetes sacarina, la velocidad de sedimentacin esta
disminuida en los estados alrgicos, la policitemia, insuficiencia cardiaca congestiva y
la intoxicacin con aspirina
La velocidad de sedimentacin normal oscila en el hombre entre 2 y 8mm a la hora y
entre 2 y 10mm en la mujer por hora.
Velocidad de Sedimentacin: 7 ml/h.
h) Tiempo de Coagulacin
Existen varios mtodos que miden el tiempo de coagulacin; estos son:
1.- Mtodo Capilar: consiste en llenar un tubo capilar directamente en el lugar mismo
donde se ha hecho la puncin, al mismo tiempo se toma la hora como cero hasta el
momento que se forman los hilos de fibrina, para ello se fracciona cada 30 hasta el
momento que aparece la coagulacin, esto corresponde al tiempo de coagulacin.
2.- Mtodo Laminar: consiste en colocar 1 o 2 gotas de sangre sobre un portaobjeto
limpio, desgrasado y seco y as mismo medir el tiempo que tarda en aparecer los
filamentos de fibrina para ello ir levantando despus del primer minuto, con un alfiler
limpio y seco cada 30 hasta que aparecern los filamentos de fibrina correspondiendo
a la finalizacin del tiempo de coagulacin.
En el proceso de coagulacin se desarrolla en tres fases:
La primera genera tromboplastina, la segunda se activa la protrombina en trombina por
activacin de la primera y la tercera la trombina activa al fibringeno en fibrina.
Tiempo de Coagulacin: 5
i) Tiempo de sangra
- Es el resultado que demora la salida de la sangre por efecto de una puncin
provocada por una pequea hemorragia con una lanceta en el pulpejo del
dedo, lbulo de la oreja de una persona mayor o de un nio recien nacido en el
taln del pie secando con un papel absorbente la sangre que sale a periodo de
30, el resultado se expresa en minutos.
- Esta determinado por la coagulacin de la sangre y la elasticidad de los vasos
y tejidos circunvecinos a la lesin (es un mecanismo vascular homeosttico
inmediato, es til en pacientes que se van a producir quirrgicamente.)
Tiempo de Sangra: 2
j) Determinacin de los Grupos Sanguneos y Factor Rh o Anti D
Grupos Sanguneos:
La mezcla de glbulos rojos de un individuo con plasma o suero sanguneo de otra
persona puede suceder dos casos: uno de ellos es que los glbulos rojos al cabo de
poco tiempo (30) se aglomeren en pequeos grupos, fenmeno denominado
Aglutinacin.
Grupo Sanguneo: OH+
BIBLIOGRAFIA:
GUYTON, Arthur... TRATADO DE FISIOLOGA MDICA. 10 Ed.
Interamericana, Mxico, 2001.
GANONG, William... FISIOLOGA MDICA. 16 Ed. El Manual Moderno. Mxico,
1998.
