Discrepancias del
grupo ABO
Prueba Directa e
Inversa
Mster Rosa Chiriboga
Aglutinacin Directa
O Aglutinacin No Aglutinacin
Mster Rosa Chiriboga
Grupo Directo Grupo Indirecto
Sangre Suero
Clulas A, Clulas
Reactivos: anti-A, B
anti-B, anti-AB
Clulas O
Mster Rosa Chiriboga
Mster Rosa Chiriboga
Fundamento de las
pruebas inversas
Mster Rosa Chiriboga
Bsqueda de Enfrenta con
anticuerpos clulas Aglutinacin
en suero conocidas
Mster Rosa Chiriboga
Protenas presentes en la Protenas anti- presentes en
Grupo membrana de los glbulos rojos el plasma
A A Anti-B
B B Anti-A
AB AB Ninguna
0 Ninguna Anti-A y Anti-B
Mster Rosa Chiriboga
Clulas + Suero
Clulas-A Cllulas-B
Grupo B
Grupo A
Grupo O
Grupo AB
Mster Rosa Chiriboga
Recordar
Mster Rosa Chiriboga
Tres principales tipos de
reaccin antgeno-anticuerpo
Aglutinacin Precipitacin Hemlisis
CAUSAS COMUNES DE RESULTADOS FALSO
POSITIVO FALSO NEGATIVO EN LA
TIPIFICACION ABO
RESULTADOS FALSO RESULTADOS FALSO
NEGATIVO POSITIVO
No se agreg reactivo o Centrifugacin excesiva.
suero.
Uso de reactivos, glbulos
Proporcin inapropiada de rojos o solucin salina
suero y de eritrocitos. contaminada.
Centrifugacin Uso de material de vidrio
insuficiente. sucio.
Incubacin a ms de 20 - Interpretacin o registro
24C. incorrecto de los
resultados.
Interpretacin o registro
incorrecto de los
resultados.
TIPIFICACION ABO DE
RUTINA
GR vs. Suero vs.
Anti-A Anti-B Anti-A,B GR A1 GR B GR O GRUPO
ABO
0 0 0 + + 0 0
+ 0 + + + 0 ? DISCREPANCIA
0 + + + + 0 ? DISCREPANCIA
+ + + + + + ? DISCREPANCIA
O Se produce una discrepancia cuando la interpretacin de
las pruebas de determinacin del grupo hemtico no
coincide con el srico.
O En estos casos deben analizarse los resultados
discrepantes:
O La interpretacin del grupo ABO debe retrasarse hasta
que se resuelva la discrepancia.
O Si la sangre que se est analizando es una unidad de
donante, no puede autorizarse para transfusin hasta
resolver la discrepancia de resultados
Cuando la sangre proviene de un posible
receptor, el estado clnico del paciente obliga
a administrar hemates del grupo O con factor
Rh compatible antes de finalizar el estudio.
Porqu puede
ocurrir???
Los problemas tcnicos pueden
Errores producir discrepancias en las
pruebas ABO bien por la
tcnicos obtencin de resultados
negativos en lugar de positivos o
positivos en lugar de negativos.
Falsos negativos
O No aadir suero o antisuero a una prueba.
O Identificar la hemlisis como negativa.
O Inadecuada relacin suero (o
antisuero)/hemates.
O Centrifugado incorrecto.
O No incubar a temperatura de 20-25C o menos.
O Uso de reactivos que no funcionen
adecuadamente.
O No interpretar o registrar los resultados
correctamente
Falsos positivos
O Sobrecentrifugacin
O Uso de antisueros, hemates o
solucin salina contaminados.
O Uso de utensilios de vidrio sucios.
O Interpretacin o registro incorrecto de
los resultados.
Factores intrinsecos
muestras obtenidas de pacientes que
han recibido recientemente
transfusiones o trasplante de mdula
sea
pueden dar lugar a reacciones
inesperadas si contienen una mezcla de
hemates no homogneos en cuanto a su
grupo ABO.
Tambin pueden Las muestras de estos
Las muestras de sangre
detectarse antgenos pacientes pueden no
de personas que han
dbilmente expresados producir las reacciones
heredado variantes de
en los hemates de esperadas en las
genes A o B pueden
algunos individuos con pruebas de aglutinacin
tener antgenos
enfermedades como la directas con anti-A y
dbilmente expresados
leucemia anti-B.
Las anomalas de Las concentraciones
pueden producir
naturaleza heredada o anormales de protenas
agregaciones
adquirida que conducen a sricas, la presencia de
inespecficas que simulan
lo que se llaman estados macromolculas (en
la aglutinacin si se
poliaglutinables pueden muestras de sangre de
suspenden los hemates
dar lugar a hemates con cordn, la presencia de
en su propio suero.
membranas modificadas. gelatina de Wharton)
las concentraciones elevadas de Estos anticuerpos pueden
sustancias del grupo A o B en producir falsos positivos en las
Los sueros de algunas personas
suero inhiben la actividad de los reacciones de aglutinacin si se
contienen anticuerpos contra los
antisueros de tal manera que se suspenden los hemates en
colorantes utilizados para
obtienen reacciones negativas suero o plasma para realizar la
colorear los reactivos anti A y
inesperadas cuando se utilizan prueba.
anti B.
hemates resuspendidos en
suero o plasma .
Factores intrnsecos
del suero
concentraciones sricas
anormalmente elevadas de
plasma o suero no totalmente protenas anmalas, que presentan
coagulado se producen pequeos relacin suero/protenas alterada, La muestra puede contener
cogulos de fibrina. anticuerpos distintos a los anti A y
o que han recibido expansores del anti B que produzcan una
Los cogulos de fibrina pueden plasma de elevado peso molecular aglutinacin inesperada de los
interpretarse errneamente por una o materiales de contraste eritrocitos reactivos A y B.
aglutinacin verdadera. intravenoso pueden dar lugar a una
agregacin inespecfica de los
hemates
resultados dbiles o negativos
inesperados en las pruebas
prueba contiene anticuerpos La interaccin entre los sricas
contra los constituyentes anticuerpos y las sustancias si la muestra que se est
qumicos de los diluyentes qumicas produce reacciones analizando proviene de una
utilizados para conservar los inespecficas con los hemates persona inmunodeficiente
hemates A y B. que da lugar a reacciones debido a una enfermedad o
. inesperadas de aglutinacin tratamiento y tiene niveles
descendidos de
inmunoglobulinas
pruebas ABO sricas dbiles en
En las pruebas sricas, el suero
muestras de pacientes ancianos
del paciente puede contener
cuyos niveles de anticuerpos han resultados negativos o dbiles anti-A y anti-B
disminuido con la edad, en las pruebas sricas si se
realizan con muestras de nios inusualmente potentes que fijan
y en muestras de pacientes
de menos de 4-6 meses de el componente C1 del
cuyos anticuerpos se han diluido
edad. complemento hasta tal punto
de manera importante en
que ste interfiere con la fijacin
procedimientos de recambio
del anticuerpo y la aglutinacin
plasmtico.
Factores extrnsecos
de la prueba
O Estaran relacionados con los problemas
previos a la realizacin de la prueba como
por ejemplo errores en la extraccin del
tubo, por no ser el tipo de tubo adecuado
o la proporcin hemates anticoagulante.
Resolucin de
discrepancias
Como muchas discrepancias son producto de errores
tcnicos, el primer paso a tener en cuenta para resolver el
problema debe ser, simplemente, repetir la prueba con la
misma muestra
Si se realizaran las pruebas iniciales con hemates
suspendidos en suero o plasma, la repeticin
debe incorporar hemates lavados y
resuspendidos en solucin salina
Obtener una nueva muestra
Esto ayudar a identificar
de sangre de la unidad de
las discrepancias debidas a
donante o del paciente y
muestras mal etiquetadas o
repetir las pruebas con la
contaminadas
nueva muestra.
Analizar el suero
Lavar los hemates
Analizar los frente a hemates Esto ayudar a
problema para
hemates frente a del grupo A2 si se identificar las
eliminar el suero
anti-A, B, anti-A1 o sospechan discrepancias
que puedan
anti-H, segn interferencias debidas a muestras
producir reacciones
corresponda al debidas a la mal etiquetadas o
positivas
problema particular. presencia de anti- contaminadas
inesperadas.
A1.
Resolucin de
discrepancias
CAUSAS DE DISCREPANCIA
SUBGRUPOS DEL ABO
PRESENCIA DE ANTICUERPOS
IRREGULARES
POLIAGLUTINACION
GR vs. Suero vs.
Anti-A Anti-B Anti-A,B GRA1 GRB GRO
+ 0 + + + 0
Anti-A Anti-B Anti-A,B GRA1 GRA2 GRB GRO
+ 0 + + 0 + 0
Conclusiones: presencia de anti-A1
GR vs. Suero vs.
Anti-A Anti-B Anti-A,B GRA1 GRB GRO
0 0 0 + + +
GR O GROh
+ 0
Conclusiones: Oh (BOMBAY)
Prueba de laboratorio
Error:
Grupo directo
A
Grupo inverso
O
investigacin
Ante la presencia de
subgrupos
Mtodo de absorcin y elucin
Los hemates que poseen una dbil expresin de
antgenos de A B
Tienen la capacidad de absorber los anticuerpos
Anti-A y anti-B comerciales bajo condiciones
adecuadas
Una vez absorbido, este puede desprenderse de
las clulas mediante la tcnica de elucin al
calor. El sobrenadante resultante puede
aglutinar a clulas comerciales A B
Procedimiento:
O 1) Lavar 1 ml de clulas problema tres veces en solucin salina 0,85%
O 2) Colocar 1ml de reactivo anti-A o anti-B de acuerdo a su apreciacin en la
primera reaccin.
O 3) Mezclar e incubar a 4C por una hora con agitacin ocasional.
O Centrifugue unos dos minutos a 3.000 rpm y descarte el sobrenadante
O 4) Lave 8 a 10 veces con solucin salina al 4C. En el ltimo lavado
transfiera el sobrenadante a otro tubo para examinar si est libre de
anticuerpos residuales, esto se logra al colocar una gota del sobrenadante
ms clulas A o B.
O Si an aglutina significa que existe anticuerpos. (Observar al microscopio)
Elucin
O Una vez que se han eliminado los
anticuerpos residuales, agregar a las clulas
empaquetadas un volumen igual de
solucin salina
O Incuba el tubo 56C por 10 minutos para
Grupo A dbil. Ax, Am
eluir el anticuerpo (elucin por calor).
O Agitar peridicamente el tubo
O Centrifuga 1 minuto a 3.000 rpm y se
transfiere el sobrenadante ligeramente
hemolizado a un tubo limpio.
O El paquete de clulas es descartado
conclusin
Si el sobrenadante tuvo la
capacidad de aglutinar
clulas A1 o B
Se concluye que la muestra
utilizada corresponde a un
subgrupo dbil de A B
Grupo A dbil el suero del
paciente habr anticuerpos
anti-A y Anti-B
Antgeno b
adquirido
Anti-A Anti-B Anti-AB
Este fenmeno Ciertas El profesional
solo ocurre en enfermedades debe sospechar
personas de patolgicas como que esta frente a
grupo sanguneo carcinoma de un antgeno B
A coln, recto,
cuello uterino,
prstata
Clasificacin Los Mientras que
directa o hemates se en el suero
globular comportan del paciente
como AB se evidencia
presencia de
un anti-B
Para resolver esta
discrepancia???
Consultar la historia clnica
del paciente para
correlacin de los hallazgos
del laboratorio
Necesario determinar la
presencia de los antgenos
solubles A y B en saliva
Si el individuo es secretor se
encontrar sustancia A y H.
Mientras B estar ausente.
Otra forma Clasificacin El anti-B
de resolver hemtica acidificado
esta con no
discrepancia antisuero de reacciona
origen con el
humano antgeno B
acidificado adquirido
pH 6.0
Fundamento de este
antgeno adquirido
Enzimas Bacterianas se
produce desacetilacin del
azcar
Porque solo presenta
anti-B. N-acetilgalactosamina
convierte en galactosa que
es componente del grupo B
Pacientes pueden ser
transfundidos sin riesgo
alguno con sangre A.
Antgenos dbiles o
auscentes
Antgenos de los
grupos Patologas
sanguneos malignos como La caracterstica
pueden leucemias y serolgica de
debilitarse o ser carcinomas estos pacientes
imperceptibles es no encontrar
anticuerpos
esperados
Ejemplo: Pacientes de grupo O
que no presentan anticuerpos
anti-A
En Recin nacidos los antgenos
pueden ser de expresin dbil y en el
suero anticuerpos estn ausentes.
Hemates que
aglutinan en campo
mezclado
Ocurre cuando dos poblaciones de
hemates se encuentran en la
sangre del paciente
Esto se observa en pacientes
recientemente transfundidos como
en el caso de AB que reciben
grandes cantidades de O
Siendo comn en hemorragias
materno-fetales
O Este fenmeno se denomina Quimera
conclusin
Edad, sexo, Medicamente y
antecedentes no olvidar el
obsttricos proceso tcnico
Transfusionales,
diagnstico
