MICROPIPETAS.
La micropipetas es un instrumento de laboratorio empleado para absorber y
transferir pequeos volmenes de lquidos y permitir su manejo en las
distintas tcnicas cientficas.
Los volmenes captables por estos instrumentos varan segn el modelo: los
ms habituales, denominados p20, p200 y p1000, admiten un mximo de 20,
200 y 1000 l, respectivamente.
Es de destacar que el uso de micropipetas permite emplear distintos lquidos
sin tener que lavar el aparato: para ello, se emplean puntas desechables, de
plstico, que habitualmente son estriles. Existen varios tipos de puntas:
por ejemplo, las amarillas para pipetear volmenes pequeos (por ejemplo,
10 l), y las azules para pipetear volmenes grandes (por ejemplo, 800 l).
Tipos:
Existen micropipetas manuales, en las que el volumen a aspirar se fija
girando un botn en su parte superior que est conectado a un sistema
analgico de confirmacin de volumen, y automticas, en las cuales dicho
sistema es digital.
Hay micropipetas simples, que slo acogen una punta cada vez, y
multicanales, que permiten incorporar mltiples puntas (por ejemplo, ocho),
absorbiendo el mismo volumen en todas ellas.
Partes de Micropipetas
Operacin del Equipo
Tcnica de pipeteo para lquidos claros:
a. Se presiona el botn superior suavemente hasta el primer tope.
b. Se sumerge la punta, en la solucin que se necesita pipetear estando
seguros que la punta este bien colocada y que no haya ningn tipo de
residuos entre la punta y el cuerpo de la pipeta.
c. Mantenga la pipeta verticalmente mientras toma la solucin.
d. Para descartar la solucin de la punta presione el botn hasta el segundo
tope.
e. Descarte las puntas utilizando el eyector que traen las pipetas.
Tcnica de pipeteo para lquidos con alta viscosidad:
a. Presione el botn superior hasta el segundo tope.
b. Sumerja la punta en la solucin (2-3 mm) y suelte el botn despacio. La
punta tiene que estar bien llena.
c. Descarte el lquido de la punta presionando suavemente el botn
superior hasta el primer tope.
Mantenimiento que podemos Realizar
Se sealan a continuacin los lineamientos generales de las rutinas de
mantenimiento requeridas
por las pipetas mecnicas. Se deben realizar rutinas especficas de los
diversos modelos,
de acuerdo con las instrucciones de los manuales suministrados por los
fabricantes.
Frecuencia: Diaria
Las pipetas son dispositivos que requieren inspecciones frecuentes para
detectar desgastes
anormales o daos y/o verificar que las mismas se encuentran en buenas
condiciones de funcionamiento.
La inspeccin debe cubrir los siguientes aspectos:
1. Verificar la integridad y ajuste de los mecanismos. Los mismos deben
poder moverse de forma suave. El pistn debe desplazarse
suavemente
2. Confirmar que el porta puntas no presente distorsiones o marcas de
desgaste, dado que
es esencial para la exactitud de las medidas, que no estn amarillas.
3. Verificar el ajuste de las puntas.
4. Colocar una punta y llenarla con agua destilada. La pipeta no debe
presentar ningn tipo
de fuga.
Limpieza y descontaminacin
1. Verificar cada da que la pipeta se encuentra limpia, en sus superficies
interiores y exteriores.
Si se detecta suciedad, la misma debe limpiarse utilizando un solvente
adecuado o una
solucin jabonosa.
2. Esterilizar la pipeta siguiendo las indicaciones de los fabricantes. Algunas
pipetas se pueden esterilizar en una autoclave, algunas requieren ser
desensambladas para que el vapor est en contacto con sus componentes
internos.El desensamble consiste en liberar o desenroscar el cuerpo central
de la pipeta. Para desensamblar o ensamblar algunas pipetas, se requiere
utilizar un conjunto de herramientas llaves que normalmente
proporcionan los fabricantes, junto con la pipeta..
3. Si una pipeta ha sido utilizada con sustancias peligrosas para la salud,
asegurar que est completamente descontaminada, antes de sea utilizada en
otros procedimientos o sea retirada del laboratorio
Calibracin
Seleccionar la micropipetas y las puntas adecuadas
Colocar la tapa de la caja Petri en la balanza y tarar a cero
Tomar el volumen del lquido y dispensarlo en la tapa de la caja Petri,
registrar el peso aadido
Repetir el proceso 5 veces mnimo
Calcular la exactitud y la precisin usando las formulas apropiadas
Comprobar que los resultados estn entre los lmites dados por el
fabricante de la pipeta
DEFINICIONES BSICAS
Coeficiente de variacin [CV]. Parmetro estadstico que representa la
fraccin de la desviacin tpica con respecto a la media.
Desviacin estndar [S]. Parmetro estadstico que se utiliza para
determinar el error global de una muestra.
Error (de una medida). Diferencia que se presenta entre el valor medido y el
valor correcto.
Exactitud. Concepto relacionado con los errores que presentan las medidas.
Se dice que un instrumento es exacto cuando los valores de un grupo de
mediciones se acercan bastante al valor real.
La precisin, es la dispersin del conjunto de valores que se obtiene a partir
de las mediciones repetidas de una magnitud: a menor dispersin, mayor
precisin. La exactitud, en cambio, hace referencia a la cercana del valor
medido al valor real.
Objetivo General
Conocer el uso adecuado de equipo instrumental de laboratorio,
principalmente micropipetas de diversos volmenes
Objetivos especficos
Adquirir destreza en la utilizacin de equipo e instrumental general de
laboratorio
Conocer los tipos, las partes, y el funcionamiento de las micropipetas que
utilizara en el laboratorio de Biotecnologa
Determinar si su juego de micropipetas esta calibrado de acuerdo a CV y
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