BACTERIAS ACIDFILAS
I.
INTRODUCCIN
Actualmente la biotecnologa se ha convertido
en una alternativa viable para el procesamiento
de diversos materiales y derivados, una de sus
reas de desarrollo es la biohidrometalurgia,
que se refiere a la oxidacin de azufre
elemental, y minerales sulfurados Cu, Pb, Zn,
Fe, Ni mediante microorganismos de tipo
acidfilas (Misari, Fidel; 1985), usndose
tambin en el pretratamiento oxidante de
menas
de
oro
refractarias;
tornndola
disponible para los procesos subsecuentes,
como la lixiviacin con cianuro (Hernndez, G.
et al., 1998), proceso alternativo y sostenible
frente a la calcinacin y oxidacin por presin.
Los
drenajes
cidos
de
mina
(DAM)
caracterizados por acidez extrema (pH 2.5-4.0)
y altas concentraciones de metales pesados,
contienen poblaciones nativas de bacterias
oxidantes, responsables de la oxidacin
progresiva de los sulfuros. Dentro de los
microorganismos encontrados en los ambientes
cidos y dentro de la familia de los procariotas
se ha identificado las bacterias del gnero de
Thiobacillus, Leptospirillum y cidophilium
(Segura, D., 1998), capaces de contribuir en la
degradacin de sulfuros metlicos. La Bacterias
de gnero thiobacillus tienen gran avidez por
compuestos sulfurados metlicos, obteniendo
su fuente energtica a partir de la oxidacin de
sulfuros reducidos y sales ferrosas (Jagnow, G;
2003) y en medio con temperatura moderada
(mesofilos) y acidez en el rango de 0.5 a 4 pH,
obteniendo crecimiento ptimo a pH entre 1.5 a
2.5. Las bacterias de gnero Leptospirillum se
desarrollan oxidando al hierro ferroso en
compuestos frricos como la pirita (Hallberg, K;
2003). Este gnero de bacterias consideradas
como aerobias estrictas se desarrollan en el
rango 1.5 a 4.0 pH, estn ampliamente
distribuidas
en
depsitos
de
minerales
alterados y en drenajes que se generan a travs
de ellos (Abanto, M; 2008). Las bacterias del
gnero Acidophilium son clulas de forma de
bacilos rectos, Gram-negativos, mesfilas,
quimiorganotrofas obligadas que se inhiben a
partir de determinadas concentraciones de
materia orgnica. Estas bacterias pueden vivir a
condiciones anaerbicas bajo el mecanismo de
intercambio inico de los compuestos de hierro
favoreciendo la lixiviacin de sulfuros de cobre.
En el gnero Acidithiobacillus se han estudiado
las
Acidithiobacillus
Thiooxidans,
Acidithiobacillus Caldus y Acidithiobacillus
Ferroxidan; son caracterizadas por su evolucin
favorable a temperaturas entre 28 y 35 C,
utilizan CO2 como fuente de carbono y obtienen
energa de la oxidacin del azufre, hierro y
sulfuros metlicos.(Silverman, M. P., 1959 y
Mena, J. et al., 2003). La A. Ferrooxidans es la
bacteria ms ampliamente estudiada en
procesos de biolixiviacin. Aislada por primera
vez de drenajes cidos en minas de carbn
(Colmer y Hinkle, 1947) y de hbitat comn en
drenajes cidos de mina. Son bacterias no
patgenas,
Gram-negativas
no
forman
esporulacin, tiene forma de bastn y tamao
promedio de 0.5 a 0.6 m de ancho y 1 a 2 m
de largo, con extremos redondeados (Panos
1996, Iglesias 1997, Rossi, 2001, Bosecker,
2001, Ho Lock 2004).
II.
CARACTERIZACIN MORFOLGICA
La evaluacin morfolgica de un consorcio de
bacterias aisladas para su clasificacin, est
basada en observaciones microscpicas para
determinar su forma, emparejamiento.
III. IDENTIFICACIN POR TINCIN GRAM
Una coloracin diferencial ampliamente usada en
bacteriologa es la denominada tincin Gram y est en
funcin a la adsorcin de su pared celular, a una
coloracin de contraste (Gram positivas o negativas).
Se utilizan colorantes para teir las clulas y aumentar
as su contraste facilitando su observacin (Madigan,
2008). La respuesta celular de la bacteria a colorearse
o no frente a un tinte orgnico especfico. Un
microorganismo Gram positivo debe presentar en su
pared celular una capa de peptidoglicano externa a su
membrana celular, a diferencia del Gram negativo,
que tiene dos capas celulares entre las cuales se
encuentra el peptidoglicano. La importancia del tipo de
pared celular para la retencin o el escape de un
colorante orgnico. Varias son las teoras emitidas
para explicar el mecanismo de la tincin de Gram.
basadas en la combinacin qumica entre el colorante
y las protenas de las bacterias. Las protenas y
aminocidos son cuerpos anfteros, esto es, tienen la
facultad de reaccionar con cidos y con bases, gracias
a sus grupos amino y carboxilo; en soluciones cidas,
reaccionan con los cidos, y en soluciones alcalinas lo
hacen con las bases (Segura D., 1998).
IV. MECANISMO DE TINCIN
1. Adicionar un colorante (cristal de violeta), este colorea
a los microorganismos cargados negativamente por
tratarse de un colorante bsico.
2. Aadir el mordiente (lugol) para fijar el cristal de
violeta. En las clulas Gram negativas, los lpidos de la
pared se disuelven por este tratamiento facilitando su
expulsin.
3. Luego se agrega el decolorante que es un solvente
orgnico (alcohol-acetona). El alcohol y/o acetona
empleados para aclarar, deshidrata las paredes de los
microorganismos Gram positivos, tratados con
mordiente.
4. Finalmente, se adiciona un contracolor (safranina)
buscando contrastar con el cristal de violeta. Una vez
terminada la tincin de Gram, las bacterias Gram
positivas aparecen de color morado mientras que las
Gram negativas presentan color rosado (Figura N. 1)
estas diferencias en la tincin de Gram se debe a
diferencias en la estructura de la pared celular.
(Wistreich, G. A. et al., 1983).
V.
MEDIOS DE CULTIVO
Se ha desarrollado una gran variedad y tipos de
medios de cultivo especficos dependiendo de
las necesidades de cada bacteria para proveer
el ambiente bioqumico adecuado. Los medios
de cultivo son empleados para el aislamiento,
mantenimiento
de
cultivos
puros
e
identificacin de bacterias, de acuerdo a sus
propiedades bioqumicas y fisiolgicas.
VI. DATOS SOBRE LAS BACTERIAS
ACIDFILAS
Qu Son?
Son organismos que se desarrollan
preferentemente en un medio cido. Suele
tratarse de bacterias y otros organismos
muy simples que son capaces de
desarrollarse en condiciones de pH
demasiado bajo para la mayora de formas
de vida.
Donde se Encuentran?
Comunmente se encuentran en lugares
naturales como grietas volcnicas
submarinas, aguas termales y otros
lugares, normalmente hmedos, donde el
pH est muy por debajo del del agua
neutra (pH=7). Tambien se encuentran en
los jugo gstrico de la persona.
Caractersticas
Sobreviven en condiciones que seran
letales para cualquier otra forma de vida.
Resisten temperaturas extremas, por
encima del grado de ebullicin del agua y
por debajo del de congelacin,
condiciones de acidez, de falta de luz solar
y de oxgeno. Pueden permanecer en
estado de letargo durante miles de aos y
volver a reanimarse al contacto con el
agua.
