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Cargado por
Juan Diego Saraya Salas31666794
Cargado por
Juan Diego Saraya SalasUNIVERSIDAD NACIONAL
SANTIAGO ANTNEZ DE MAYOLO
FACULTAD DE INGENIERA DE INDUSTRIAS ALIMENTARIAS
OBTENCIN DE SUSTANCIAS AROMATICAS POR
FRACCIONAMIENTO DEL ACEITE ESENCIAL DEL
MOLLE (Schinus Molle L.) y USOS
Tesis para Optar el Titulo Profesional de
INGENIERO EN INDUSTRIAS ALIMENTARIAS
Ronald Julian Gamarra Macedo
HUARAZ PER
2010
II
DEDICATORIA
A la memoria de mi Dios, quien me qua
en los momentos ms difciles para seguir
caminando, el que me da sabidura cuando
faltan ideas para la lucha en esta vida.
A mi madre por su lucha incansable para
la realizacin de los logros de su
primognito y con la fuerza de voluntad
constante para la realizacin de estos
sueos.
A todas las personas, amigos, docentes,
compaeros
de
estudios
que
hayan
colaborado con la realizacin de esta
Tesis.
Ronald
III
AGRADECIMIENTO
Al Ing. Rosario Tarazona Minaya e Ing. Mario Leyva Collas, por el
asesoramiento del estudio.
A la Comisin de Grados y Ttulos en especial a la Ing. Ydania Espinoza
Bardalez por su apoyo y facilidades durante la aprobacin del Plan de Tesis.
A los jurados de esta Tesis por su colaboracin y consejos brindados para la
realizacin de la misma.
Al Ing. Edel Aliaga por su colaboracin en la parte de anlisis qumico analtico.
A todas las personas del rea de los laboratorios de la UNASAM en especial a
los laboratorios de Qumica, Ciencias del Ambiente y el de Anlisis de
Alimentos FIIA.
A todas las personas del rea de los laboratorios de Qumica de la Universidad
Pontificia Catlica del Per.
IV
INDICE GENERAL
Pg.
DEDICATORIA.........................................................
II
AGRADECIMIENTO.................................................
III
INDICE GENERAL.......................................
IV
INDICE DE CUADROS....................
INDICE DE FIGURAS..
XII
INDICE DE GRAFICOS....
XIII
RELACION DE ANEXOS.................
XIV
RESUMEN
ABSTRACT
I.
INTRODUCCIN........
II.
REVISION BIBLIOGRFICA...................................
2.2
Aceites esenciales......
2.2.1
Definicin.......
2.2.2
Teora de la formacin de los aceites esenciales en los
vegetales......
2.2.3
Funcin de loa aceites esenciales....
2.2.4
Clasificacin de los aceites esenciales
[Link] Por su origen.......
2.2.5
[Link] Por su punto de ebullicin.......
[Link] Por su composicin elemental.
Composicin qumica de los aceites esenciales......
[Link] Terpenos......
[Link] Composicin sistemtica general de los aceites
esenciales.
[Link].1 Hidrocarburos......
2.3
Aromas...........
11
2.4
Schinus molle L..
14
2.4.1
Identificacin de la especie........
14
2.4.2
Origen.....
14
2.4.3
Condiciones del hbitat natural y de las localidades donde la
especie ha sido cultivada exitosamente.......
14
2.4.4
Importancia y usos..
16
2.4.5
Produccin......
17
2.4.6
Descripcin botnica......
17
2.4.7
Antecedentes biolgicos y comportamiento ecolgico...
18
2.4.8
Susceptibilidad a daos y enfermedades.
19
2.4.9
Morfologa de las semillas Schinus molle L
19
[Link] Descripcin morfolgica de la semilla de Schinus
2.4.10
molle L.
19
Descripcin del aceite esencial de Schinus molle L
19
VI
[Link] Propiedades/Acciones...
19
[Link] Componentes.....
20
[Link] Remedio tradicional.....
20
[Link] Temperatura de ebullicin de algunos compuestos
del aceite esencial de Schinus molle L...
21
Tcnicas de separacin de mezclas...
21
2.5.1
Mtodos de separacin qumica.....
21
[Link] Electrolisis......
21
[Link].1 Electroforesis convencional...
22
[Link].2 Electroforesis capilar (CE)....
24
Mtodos de separacin fsica.....
28
[Link] Destilacin......
28
[Link] Cromatografa........
29
[Link] Cromatografa de papel..
33
[Link] Cromatografa de gases......
36
MATERIALES Y MTODOS....
58
3.1
Lugar de ejecucin.....
58
3.2
Materia prima.........
58
3.3
Materiales...
58
3.4
Reactivos........
59
3.5
Equipos.......
60
2.5
2.5.2
III.
VII
3.6
Mtodos......
60
3.6.1
Caracterizacin de la materia prima
66
3.6.2
Pruebas preliminares para la extraccin del aceite esencial....
66
3.6.3
Caracterizacin del aceite esencial de Schinus molle L...
68
1 Determinaciones fsicas..
68
1.1 Preparacin de la muestra para el anlisis
(INDECOPI P319077)....
68
1.2 Densidad y densidad relativa
(INDECOPI P319081)....................................................
68
1.3 ndice refraccin (INDECOPI P319075)...
69
1.4 Determinacin de la solubilidad en etanol
IV.
(INDICE P319084)....
69
2 Determinaciones qumicas......
70
2.1 ndice de acidez (INDECOPI P319085)..
70
2.2 ndice de Ester...
70
3.6.4
Fraccionamiento aceite esencial de Schinus molle L.....
71
3.6.5
Caracterizacin de las sustancias aromticas.....
72
3.6.6
Almacenamiento de las fracciones obtenidas....
73
3.6.7
Comprobacin de las fracciones obtenidas...
73
RESULTADOS Y DISCUSIN......
74
4.1
74
Resultado de la caracterizacin del fruto de Schinus molle L.
VIII
4.1.1
Identificacin del ecotipo de Schinus molle L..
74
4.1.2
Resultado de las medidas biomtricas.
74
4.1.3
Resultado de la composicin qumico proximal de Schinus
molle L.
4.1.4
75
Resultado de las pruebas preliminares para la extraccin del
aceite de los frutos de Schinus molle L., de 04 tratamientos
estudiados T1, T2, T3 y T4..
4.1.5
Resultado de la caracterizacin del aceite esencial de
Schinus molle L
4.1.6
77
79
Resulado del fraccionamiento del aceite esencial de Schinus
molle L................................................................
81
4.1.7
Resultado del anlisis fsico-qumico del FELANDRENO
82
4.1.8
Resultado del anlisis fsico-qumico del DLIMONENO
84
4.1.9
Resultado de los efectos en el almacenamiento de los
factores externos en el aceite esencial Schinus molle L, en
85
sus caractersticas fsicas de color....
4.1.10
Resultado de los efectos externos en el almacenamiento de
los principios activos, en sus caractersticas fsicas de color...
4.1.11
Resultado de la identificacin de las sustancias armaticas
por cromatogrficas de gases del tratamiento ptimo T1....
4.2
86
Usos de las sustancias aromticas obtenidas....
88
92
IX
V.
CONCLUSIONES....
94
VI.
RECOMENDACIONES..
95
VII.
BIBLIOGRAFA..
96
VIII
ANEXOS...
100
INDICE DE CUADROS
Titulo
Pg.
01
Caractersticas de algunos terpenos
02
Diseo experimental.......
62
03
Resultado de las Medidas Biomtricas del Fruto de Schinus molle L
75
04
Resultado de la Composicin Qumico Proximal de Fruto Schinus molle L.
76
05
Resultado Comparativo de la Composicin Qumico Proximal del
Tratamiento T3 vs. Referencia Bibliogrfica.....
06
76
Resultado de las Pruebas Preliminares de los Tratamientos T1, T2, T3 y T4
de la Extraccin del Aceite Esencial Schinus molle L., para 100 gr de
muestra
77
07
Resultado del Rendimiento del Aceite Esencial vs. Volumen de Extraccin
78
08
Calculo del Peso de Aceite Esencial Schinus molle L..
79
09
Resultado del Anlisis Fsico-Qumico del Aceite Esencial Schinus molle
L..
10
80
Resultado de la Comparacin de los Resultados del Anlisis del Aceite
Esencial Schinus molle L vs. Referencia Bibliogrfica.........
80
11
Resultado del Fraccionamiento Aceite Esencial de Schinus molle L....
81
12
Resultado de la Comparacin del Fraccionamiento del Aceite Esencial de
Schinus molle L. vs Referencia Bibliogrfica
81
XI
13
Resultado del Anlisis Fsico-Qumico del -Felandreno
14
Resultado del Anlisis Fsico-Qumico -Felandreno del Tratamiento T1
82
vs. Referencia Bibliogrfica...
83
15
Resultado del Anlisis Fsico-Qumico del D-Limoneno..
84
16
Resultado de la Comparacin del Anlisis Fsico-Qumico DLimoneno
del Tratamiento T1 vs Referencia Bibliogrfica....
17
Resultado de Condiciones de Almacenamiento del Aceite Esencial Schinus
molle L...
18
88
Resultado de la Composicin Qumica del Aceite Esencial Schinus molle
L., por Cromatografa de Gases del Tratamiento T1.
21
87
Resultado de los Efectos de los Factores Externos en el Almacenamiento
del D-Limoneno, en sus Caractersticas Fsicas de Color..
20
86
Resultado de los Efectos de los Factores Externos en el Almacenamiento
del -Felandreno, en sus Caractersticas Fsicas de Color...
19
84
89
Resultado del Anlisis Cromatogrfico del Tratamiento T1 vs. Referencia
Bibliogrfica...
90
22
Resultado de la Composicin Qumica del -Felandreno...
91
23
Resultado de la Composicin Qumica del D-Limoneno..
92
XII
INDICE DE FIGURAS
TITULO
01
Diagrama de flujo de la Obtencin de Sustancias Aromticas a partir de la
Pg.
Extraccin y Fraccionamiento del Aceite Esencial de molle (Schinus molle
02
L.)...
63
Factores y Variables del estudio...
67
XIII
INDICE DE GRAFICOS
Titulo
Pg.
01
Morfologa de la semilla Schinus molle L...
19
XIV
RELACIN DE ANEXOS
1.
Determinacin de la Humedad Schinus molle L.
2.
Determinacin de Grasas Schinus molle L.
3.
Determinacin de Cenizas Schinus molle L.
4.
Determinacin de Protenas Schinus molle L.
5.
Determinacin de Fibras Schinus molle L.
6.
Extraccin Aceite Esencial Shinus molle L. Tratamientos T1 y T2
7.
Extraccin Aceite Esencial Schinus molle L. Tratamientos T3 y T4
8.
Condiciones de Extraccin Aceite Esencial Schinus molle L.
9.
Densidad Relativa Aceite Esencial Schinus molle L.
10.
ndice de Refraccin Aceite Esencial Schinus molle L.
11.
Solubilidad en Etanol Aceite Esencial Schinus molle L.
12.
ndice de Acidez Aceite Esencial Schinus molle L.
13.
ndice de Ester Aceite Esencial Schinus molle L.
14.
Mapa de Localizacin de Schinus molle L., del Departamento de Ancash.
15.
Extractor de Aceites Esenciales por Arrastre de Vapor Escala Laboratorio.
16.
Grficas de los Compuestos que contiene el Aceite Esencial Schinus molle L.
17.
Grficas Cromatogrficas del Aceite Esencial, -Felandreno, D-Limoneno
XV
RESUMEN
El trabajo de investigacin que se presenta se evaluara las condiciones de contenido de
aceite esencial dentro de las semilla de Schinus molle L., comparndolas a dos estados
de madures, en estado de madurez verde y en estado de madurez ptimo.
Para ello se estudi dos tratamientos para dos estados de madurez, humedad de
12 y 14% y la cantidad de aceite contenido en l, cada uno con 3 repeticiones. El
resultado permiti determinar las condiciones ptimas para la extraccin y lograr
mximo contenido de aceite.
La materia prima se caracteriz mediante anlisis qumico proximal, mientras
que los aceites obtenidos mediante anlisis fsico-qumico.
Los anlisis se realizaron tanto desde el fruto hasta la obtencin de la fraccin
final que se quera obtener, estos son el Felandreno y DLimoneno en estado puro.
Para ello se realiz la extraccin del aceite virgen de Schinus molle L., para luego
utilizar el mtodo de destilacin fraccionada para lograr separar las fracciones deseadas.
La finalizacin de este trabajo se efecta cuando se lleva a anlisis de
cromatografa para ver si realmente el compuesto obtenido es en estado puro listo para
su uso, y ver si realmente este mtodo nos permite separar en estado puro los
compuestos antes mencionados. Lo que se pudo comprobar que la mxima pureza
obtenida para el Felandreno es de 94% y el DLimoneno de 92%, lo cual indica que
no se puede obtener principios activos en estado totalmente puro por este mtodo.
Palabra Clave: Fraccionamiento, Sustancias Aromticas, Felandreno, DLimoneno
XVI
ABSTRACT
The work of research that one presents there were evaluated the conditions of content of
essential oil inside the seed of Schinus molle L., comparing them to two states of
mature, in state of green maturity and in ideal state of maturity.
For it I study two treatments of treatments for two states of maturity, dampness
of 12 and 14 % and the quantity of oil contained in, each one with 3 repetitions. The
result allowed to determine the ideal conditions for the extraction and to achieve
maximum contained of oil.
The raw commodity I characterize by means of chemical analysis proximal,
whereas the oils obtained by means of analysis physicist chemist.
The analyses realized so much from the fruit up to the obtaining of the final fraction that
these wanted to be obtained they are Phellandrene and DLimonene in pure state. For
it I realize the extraction of the virgin oil of Schinus molle L., then to use the method of
distillation divided to manage to separate the wished fractions.
The ending of this work is carried out when it removes to analysis of chromatography to
see if really the obtained compound is in pure state ready for his use, and to see if really
this method allows us to separate in pure state the compounds before mentioned. What
could verify that the maximum purity obtained for Phellandrene is 94% and
DLimonene is 92%, which indicates that it is not possible to obtain active beginning
for this method.
Key Words: Fraction, Aromatic substances, Phellandrene, DLimonene
I. INTRODUCCIN
La investigacin que se presenta se basa en el estudio de la problemtica de materias
primas nativas disponibles no aprovechadas en la Regin Ancash, el fruto de Schinus
molle L., es una fuente de aceite esencial, el cual es factible de aprovechar en la
Industrias Alimentarias como aditivo en la formulacin de saborizantes, y en la
Industria Farmacutica por sus propiedades analgsicas y antiespasmdicas.
El objetivo principal consiti en la extraccin del aceite del fruto de Schinus
molle L., y la obtencin por medios fsicos, como la destilacin fraccionada, de
sustancias aromticas Felandreno y DLimoneno.
Los objetivos especficos fueron:
Purificar el Aceite Esencial.
Caracterizar el Aceite Esencial.
Fraccionar el Aceite Esencial.
Caracterizar los Principios Activos obtenidos.
Almacenar los Principios Activos obtenidos.
Realizar el Anlisis Cromatogrfico por gases de los Principios Activos.
Encontrar los posibles usos que se le pueden dar en la Industria Alimentaria.
Logrndose as la separacin de dicho compuesto para su utilizacin en la Industria
Alimentaria, con una pureza de 92 y 94% respectivamente.
V.- CONCLUSIONES
El contenido de aceite es influenciado por el grado de madurez del fruto.
La cantidad de aceite obtenido de la extraccin por arrastre de vapor de frutos
con alto contenido de humedad de 18% es menor
frente al contenido de
humedad de 12%.
El rendimiento de aceite esencial mxima alcanzada por arrastre de vapor es de
5.1%.
El anlisis fsico-qumico de los aceites de los tratamientos T1 y T3 no fueron
muy diferentes en cuanto en su composicin.
Se logro obtener 34.34% de -Felandreno por cada 100 ml de muestra de
aceite esencial de Schinus Molle L.
Se logro obtener 0.10% de D-Limoneno por cada 100 ml de muestra de aceite
esencial de Schinus Molle L.
Para almacenar aceites esencial es necesario extraerle todo el agua contenida en
el para evitar la oxidacin y mejorar el almacenamiento del mismo
El grado de pureza de la fraccin obtenida de Felandreno fue de 92%.
El grado de pureza de la fraccin obtenida de D-Limoneno fue de 94%.
VI.- RECOMENDACIONES
Se recomienda utilizar los mtodos cromatogrficos como el de gases para la
separacin efectiva de las sustancias aromticas presentes en un aceite esencial
para obtener grados de pureza al 100%.
Para mas efectividad utilizar un equipo diseado con vidrio borosilicato para la
mejor extraccin del aceite esencial llegue a su mxima extraccin.
Explorar nuevas fuentes que contengan aceite esencial en proporcin aceptable y
de bajo precio para tratar de extraer los compuestos de ms demanda en el
mercado.
I. INTRODUCCIN
La investigacin que se presenta se basa en el estudio de la problemtica de
materias primas nativas disponibles no aprovechadas en la Regin Ancash, el fruto de
Schinus molle L., es una fuente de aceite esencial, el cual es factible de aprovechar en
Industrias Alimentarias como aditivo en la formulacin de saborizantes, y en la
industria farmacutica por sus propiedades analgsicas y antiespasmdicas.
El objetivo principal consisti en la extraccin del aceite del fruto de Schinus
molle L., y la obtencin por medios fisicos, como la destilacin fraccionada, de
sustancias aromticas -felandreno y D-limoneno,
Los objetivos especficos que se realizaron fueron
Purificar el aceite.
Caracterizar el aceite.
Fraccionar el aceite esencial.
Caracterizar los principios activos obtenidos.
Almacenar los principios activos obtenidos.
Se realiz el anlisis cromatogrfico por gases de los principios activos.
Se encontr los usos que se le dan dentro de la industria alimentaria.
Logrndose as la separacin de dicho compuesto para su utilizacin en la industria, con
una pureza de 92 y 94% respectivamente.
II. REVISIN BIBLIOGRFICA
2.2 ACEITES ESENCIALES
2.2.1
DEFINICIN
Los aceites esenciales se obtienen preferentemente por destilacin en corriente
de vapor de las plantas (compuestas o sus partes), tales como yemas o clavo, limn,
alcaravea, hinojo y frutos de cardamomo. Despus de la destilacin en corriente de
vapor, los aceites esenciales se separan de la fase acuosa, se clarifican y almacenan. La
presin y temperatura del proceso se selecciona a fin de incurrir lo menos posible en
prdidas de sustancias aromticas por descomposicin trmica, oxidacin o hidrlisis.
Muchos aceites esenciales, tales como los de los ctricos, contienen hidrocarburos
terpnicos que contribuyen poco al aroma pero que se auto oxidan fcilmente y se
polimerizan (formacin de resinas). Estos constituyentes no deseados del aceite
esencial (por ejemplo el limoneno a partir del aceite esencial de naranja) se pueden
eliminar por destilacin fraccionada. La destilacin fraccionada tambin se utiliza para
enriquecer o aislar un compuesto aromtico nico. Ordinariamente este compuesto es el
constituyente dominante del aceite esencial. Ejemplos de compuestos aromticos nicos
aislados como el principal constituyente del aceite esencial tenemos: el 1,8-cineol del
aceite de eucalipto, el mentol de la menta, el acetol del aceite de ans estrellado, el
eugenol del clavo o el citral a partir del aceite de Li-tsai.(BELITZ-GROSH; 1982)
Los aceites esenciales son sustancias odorferas, voltiles, de naturalezas
qumicas muy variables y complejas, solubles en alcohol, que generalmente se hallan en
forma natural en rganos y tejidos de diversos vegetales, los cuales confieren a la planta
el aroma y fragancia caracterstico (BRAVERMAN, JOSEPH; 1980).
Los aceites esenciales son sustancias voltiles y olorosas de naturaleza qumica
muy variable, slidos y lquidos que generalmente se encuentran en el reino vegetal,
capaces de producir una sensacin generalmente agradable al olfato. Los aceites
voltiles difieren, en su composicin y en propiedades de los aceites grasos o fijos, que
se componen de glicridos y de los aceites minerales que se componen de
hidrocarburos (JOHN H. PERRY; 1990).
2.2.2 TEORIA SOBRE LA FORMACIN DE LOS ACEITES ESENCIALES
EN LOS VEGETALES
Origen intracelular: Segn Meyen, Muder y Martinet mencionado por Irma
(1986), reportan que los aceites esenciales se formaran en el interior de la clula donde
residiran o bien difundiran a travs de las membranas para acumularse donde se los
encuentra.
Origen extracelular: Segn Sanio (1873) Citado por Irma (1986), se formaran
en meatos intercelulares de los que difundiran hacia el interior de las clulas que los
contienen.
Origen membranar: Segn Tachirich (1893) Citado por Irma (1986), se
originaran a partir de las membranas celulares a expensas de sus constitutivas
membranas al producirlos se hincha, melifica y forma como una hernia de la que
escapan los aceites esenciales, si se ha formado hacia una glndula portadora de aceite
esencial interna y monocelular, si la formacin es en la parte externa de la membrana
provoca la formacin de glndulas pluricelulares o de canales.
Orgenes fotosintticos: Segn Charabot, Lalue Citado por Irma (1986) y otros,
se formaran en las hojas para luego migrar o no, teniendo influencia la nervadura de la
hoja.
La tendencia moderna se inclina hacia la teora que los vincula con la actividad de
la membrana fisiolgica, de la que sern una secrecin particular.
En forma general segn el Dr., en Qumica A. Leandro Montes, los aceites
esenciales se hallan preformados en los vegetales, o formando parte de hetercidos de
los que son liberados por hidrlisis o bien son producidos constantemente y en pequeas
cantidades (MARTIN, F; 1989).
2.2.3
FUNCIN DE LOS ACEITES ESENCIALES
BRAVERMAN (1957), manifiesta que la formacin fisiolgica de los aceites
esenciales en el metabolismo vegetal es todava oscura. Mientras que el principio
oloroso de las hojas se puede asumir que es til para atraer a los insectos hacia el polen,
tal propiedad no puede adscribirse al aceite presente en otras porciones de la planta. El
aceite acta posiblemente como una proteccin contra el ataque de los insectos. Hasta la
fecha, sin embargo, no hay ninguna prueba a favor de ninguna teora y la nica
alternativa que existe es la de considerar a los aceites esenciales como a otros productos
secundarios, antocianinas, alcaloides, taninos, etc., como productos de desechos del
metabolismo vegetal (BRAVERMAN, J; 1982).
2.2.4
CLASIFICACIN DE LOS ACEITES ESENCIALES
[Link] POR SU ORIGEN
a) VEJETAL
Flores
: rosa, jazmin.
Hojas
: patchuli, azahar.
Toda
: lavanda.
Corteza
: canela.
Maderas
: cedro, pino.
Fruto
: Schinus Molle L., naranja, limn.
Semillas
: Schinus Molle L., ans.
Exudantes
: tol, benju.
b) ANIMAL
civeles, mbar.
[Link] POR SU PUNTO DE EBULLICIN
a) FIJO
Tambin se les llama fijadores, tiene frecuencia ondulatoria ancha y peso molecular
elevado.
b) PERSISTENTE
Ms voltiles que las anteriores su accin dura por varios das e imprime un carcter
especial a los perfumes.
c) FUGACES
Duran unos segundos, poseen bajo peso molecular.
[Link] POR SU COMPOSICIN ELEMENTAL
a) POBRES EN OXIGENO (ricos en terpenos):
Trementina, limn, bergamota, romero, eucalipto, laurel, naranja y mandarina, poco
soluble en alcohol.
b) RICOS EN OXIGENO:
Como el ans, hinojo, comino, menta, gualteria, manzanilla, rosas, violeta, son
aceites esenciales ms solubles en alcohol.
c) ESENCIAS NITROGENADAS: berro, mastuerzo, capuchino.
d) ESENCIAS SULFONADAS: ajo, cebolla, asaftido, mostaza.
2.2.5
COMPOSICIN QUMICA DE LOS ACEITES ESENCIALES
[Link] TERPENOS
El trmino terpenoide se refiere a un grupo de substancias que tienen un origen
biosinttico comn, que siguen la llamada regla del isopreno esbozada por Wallach
(1866).
Pueden clasificarse como monoterpenos (C10), sesquiterpenos (C15), diterpenos
(C20), sesterpenos (C25), triterpenos (C30), y tetraterpenos (C40), segn el nmero de
unidades de isopreno (2,3,,8) que los forman (CUYA, O y LOMBARDI, I; 1991).
En el Cuadro 01 se indican el mono y el sesquiterpenos de las frutas y las
hortalizas. Estos compuestos crean un amplio espectro de aromas percibido casi siempre
como muy agradable. Los umbrales olfatorios de los terpenos son muy distintos. En las
especias se encuentran cantidades tan elevadas de algunos terpenos, que incluso los que
tienen umbrales olfatorios relativamente altos pueden tener importancia como
compuestos impacto, por ejemplo, el S(+)--felandreno en el eneldo (LOCK DE UGAS,
OLGA; 1988).
CUADRO 01: CARACTERSTICAS DE ALGUNOS TERPENOS
Cualidad
aromtica
a hierba, metlico
Floral
Dulce-a madera
Compuesto
Mirceno (I)
Linalool (IV)
xido de cisFuranolinalool (IVb)
Geraniol (V)
Geranial (Va)
Citronelol (VII)
Rosenxido (VIIa)
R(+)-Limoneno (IX)
R(-)-
-Felandreno (XI)
S(+)-
-Felandreno (XI)
-Terpineol (XVII)
1,8-Cineol (XXIII)
(todo E)-
-Sinensal
(XXXIX)-(-)-p-Cariofileno (XLIX)
Unidad olfativa
(g/kg a agua)
14
6
6.000
a rosas
a ctrico
a rosas
a geranio
a ctrico
Terpnico, a medicina
a eneldo, a hierba
a lilas, a melocotn
a hierba, alcanforado
a naranja
a hierba, seco
40
32
40
0,5
200
500
200
330
12
0,05
64
FUENTE: (BELITZ-GROSCH; 1982)
Estructuralmente
los
terpenos
estn
constituidos
por
varias
cadenas
pentacarbonadas ramificadas, presentando una periodicidad caracterstica, estas cadenas
se encuentran unidas por los extremos de cabeza o cola (cclico o lineal) siendo la
unidad principal la molcula del isopreno o metil butadieno.
CH 2 = C CH = CH 2 Alquenos
CH 3
Puede clasificarse como:
Monoterpenos
C10
Esencias
Sesquiterpenos
C15
Esencias
Diterpenos
C20
Resinas
Triterpenos
C30
Resinas
Tetraterpenos
C40
Carotenoides
Politerpenos
C>40
Caucho
Sobre la cadena de terpenos lineal o cclica ocurren; oxidaciones, reducciones,
migracin de dobles enlaces, polimerizaciones, saturaciones o instauraciones con uno o
ms grupos funcionales (hidroxilos, aldehdos, cetonas, etc).
[Link] COMPOSICIN
SISTEMATICA
GENERAL
DE
LOS
ACEITES
ESENCIALES
[Link].1
HIDROCARBUROS
A. HIDROCARBUROS ALIFTICOS de cadena abierta, entre los que tienen
importancia tcnica estn:
Mirceno C10H16
O-cimeno C10H16
B. HIDROCARBUROS AROMTICOS
Naftaleno C10H8
P-cimeno C10H14
C. HIDROCARBUROS MONOTERPNICOS
Todos en C10H16:
Canfeno levgiro.
Limoneno y dipenteno.
-Pineno.
-Terpineno (1metil-4-iso-propil-:4-ciclohexano) presentes en las esencias de
cilandro, limn, ajowan, tomillo. Con punto de ebullicin = 183 C, se mezclan
con el -Terpineno.
-Terpineno.
D. HIDROCARBUROS SESQUITERPNICOS
Hierven entre 250 y 280 a presin atmosfrica, pertenecen a los sesquiterpenos de
frmula general C15H24. Ejemplo: y BISABOLENO:
Cadineno.
Cedreno.
E. ALCOHOLES ALIFTICOS. Son los alcoholes terpnicos siendo los ms
importantes:
Alcohol Isoamilico C5H11OH (3-metil-butanol)
Geraniol, Nerol, Linalol, que son ismeros.
Citronelol C10H17OH
Farsenol C15H16OH
Myrtenol.
F. ALCOHOLES CICLOALIFTICOS
-Terpineol.
Terpinenol (origanol)
Mentol C10H19OH
Alcohol Benclico C7H7OH
10
G. ALDEHIDOS ALIFTICOS
Aldehido Etlico C2H4O
Aldehido Isovalernico C5H10O
Citral C10H16O
Citranelal C10H18O
H. ALDEHIDOS CCLICOS
I.
Vainillina C8H8O3
Aldehido Anmico C8H8O2
Aldehido Cumnico C10H2O
CETONAS ALIFTICAS
Acetona C3H6O
J. CETONAS CCLICAS
Anisona C10H12O2
Pulegona C10H16O
Mentona C10H18O
K. CIDOS ALIFTICOS. Los siguientes se presentan libres o esterificados con
diversos alcoholes:
cido Frmico CH2O2
cido Actico C2H4O2
cido Butrico C4H6O2
11
L. CIDOS CICLICOS
cido Benzoico (blsamo del Per)
M. ESTERES
Entre los identificadores ms importantes tenemos el acetato de geranilo (geranio,
citronela, lavanda), acetato de terpinilo (ciprs, cayep), benzoato de metilo (clavo
nardo).
N. FENOLES Y SUS DERIVADOS
Acetol, Timol, carvacol, Eugenol.
O. PRODUCTOS VARIOS
Cumarina.
Citraptenol
Cielo oxido conocido con mayor seguridad.
P. CIDO CIANHIDRICO (CNH)
Extraordinariamente venenoso.
Q. INDOL Y ESCATOL, de muy mal olor.
2.3 AROMAS
Todos los aromas previenen originariamente de la comida. Podemos extraer, por
ejemplo, el sabor de un pltano mediante una serie de tcnicas y concentrarlo. Uno
productor de pasteles de pltano, adems de emplear esta fruta como ingrediente, puede
decidir aadir aroma de pltano para resaltar el sabor de su producto y evitar que resulte
inspido. El pastelero slo tiene que decidir que tipo de aroma quiere usar: natural,
12
idntico al natural o artificial. Un buen ejemplo de esto es la vainilla, el aroma ms
usado en nuestros das.
Natural
Su aroma distintivo se debe a una sustancia qumica, la vainillina, descubierta en
1874. Si se extrae directamente de la semilla de vainilla, se clasifica como sustancia
aromatizante natural. Los aromas naturales se obtienen, por tanto, a partir de materias
primas vegetales o animales.
Idntico al natural
La industria de los aromas aprendi a analizar las molculas que configuran un
sabor. Si se conoce la estructura qumica de un determinado sabor y se utiliza el
material qumico apropiado, puede copiarse esa molcula y fabricarse industrialmente
en una planta qumica. Cuando se copia exactamente la estructura qumica de un aroma
natural, se obtiene un aroma idntico al natural. As, es imposible distinguir un aroma
natural de uno idntico al natural en lo que respecta al sabor y la estructura qumica.
La vainillina es un buen ejemplo de aroma idntico al natural. No es artificial, ya
que puede encontrarse en la naturaleza, y el hombre ha descubierto la manera de
copiarlo.
Artificial
Por ltimo, existe un tercer grupo: el de los aromas artificiales. Los cientficos,
despus de analizar las molculas que definen un sabor determinado, pueden, gracias a
una vez ms a las herramientas apropiadas, modificar dichas molculas a fin de reforzar
y mejorar el sabor.
13
Por ejemplo, la etilvainillina es una versin ms potente de la vainillina natural o
idntica a la natural siendo, tres o cuatro veces ms fuerte. Aunque los puristas afirman
que estos aromas tienen un sabor ms artificial, a veces son necesarios debido al alto
coste de extraccin de los aromas natural o idntico al natural, y al hecho de que el
paladar de los consumidores pide sabores reforzados.
Qu dice la Ley?
La principal legislacin europea acerca de la informacin que debe incluirse en las
etiquetas se conoce como la Directiva Europea relativa a los aromas (88/388). Junto con
la Directiva 91/71, estas normativas europeas establecen conjuntamente la definicin de
aroma, las normas generales de uso de los niveles mximos permitidos.
A diferencia de los Estados Unidos, donde los aromas se clasifican siempre como
naturales o artificiales, la ley europea slo requiere el uso de la palabra aroma. Si la
sustancia es natural, la etiqueta precisar aroma natural o especificar el tipo, como
aroma de vinagre de malta. Si es idntica a la natural o artificial, entonces la etiqueta
indicar simplemente aroma.
Seguridad
La UE dispone de un registro de todos los aromas que se utilizan en la UE.
Actualmente se realizan mayores esfuerzos para evaluar todas las sustancias segn
criterios de seguridad y elaborar una nica lista positiva (o autorizada). El propsito de
esta lista de mbito europeo es acabar con la situacin actual, en la que algunos aromas
artificiales seguros son aceptados en algunos Estados miembros y no en otros
(FRANCISCO JAVIER, CHICHON; 2001).
14
2.4 Schinus molle L.
2.4.1
IDENTIFICACIN DE LA ESPECIE
Nombre Cientfico
Schinus molle L.
Nombre comn
Schinus molle boliviano (Chile), molle
(Argentina,
Bolivia,
aguaribay,
huaribay,
Per),
cuyas,
molli,
falsa
pimienta, kullaks (Per), peruvian mactic
(USA), Schinus Molle de California (Costa
Rica), anacahuita, aguaribay (Uruguay),
pirul, falsa pimienta (Bolivia)
Familia
2.4.2
Anacardiaceae
ORIGEN
rbol tpicamente americano, originario de los valles interandinos del centro del
Per. Es una especie arbrea americana de gran difusin como ornamental en zonas
ridas y semiridas a nivel mundial. En Per es una especie forestal tpica de las estepas
espinosas y de los bosques montanos bajos (HUECK, K; 1978).
2.4.3
CONDICIONES DEL HABITAT NATURAL Y DE LAS LOCALIDADES
DONDE LA ESPECIE HA SIDO CULTIVADA EXITOSAMENTE
El Schinus molle L., se encuentra ampliamente difundido fuera de sus zonas de
distribucin geogrfica original, crece en Amrica Central y El Caribe, Norteamrica,
frica oriental, Medio oriente, Israel. Tambin es cultivado en la zona del Mediterrneo
en el sur de Europa (HUECK, K; 1978).
15
Variables climticas:
El Schinus molle L., es un rbol que crece en zonas de alta insolacin y muy
resistente a las sequa. Su mejor desarrollo lo alcanza con precipitaciones entre 250-600
mm; aunque sin embargo, en el norte de Chile puede crecer en ambientes
extremadamente ridos, pero con presencia de acuferos subterrneos (MARTIN, F;
1989).
Moderadamente resiste al fro. Prefiere temperaturas medias mnimas cercanas a
12,8C, entre 8 y 16,4C. Las temperaturas medias mximas son de alrededor a los
26,1C, siendo muy tolerante a las altas temperaturas, pudiendo resistir largos perodos
sobre los 34C.
Variables edficas:
El Schinus molle L., presenta escasas exigencias en cuanto a la calidad de suelo. Se
considera una especie vaga respecto a las preferencias edficas ya que crece tanto en
suelos pesados arcillosos a livianos arenosos profundos. Prefieren suelos bien drenado,
aunque resiste anegamientos estacinales (PADILLA, S; 1995).
Habita en suelos neutros a alcalinos, muy resistentes a la salinidad, como lo
demuestra su presencia en la Pampa del Tamarugal en el norte de Chile (PRETELL, J;
1985).
Variables topogrficas:
Se encuentran en altitudes que varan entres los 10 y 3.500 msnm. En Per es
frecuente en los valles interandinos del sur, centro y norte, creciendo en hondonadas en
16
todos los Andes del Per. Puede crecer en la costa en terrenos desrticos, mdanos y
quebradas secas (PAREDES, C.A.; 1993).
2.4.4
IMPORTANCIA Y USOS
En Per es utilizado como rbol de linderos para proteger a la finca de la entrada
de animales y como rbol rompevientos. Tambin se emplea como estabilizador de
mdanos y en control de dunas (PAREDES, C.A.; 1993).
Las ventajas del cultivo del molle (Schinus molle L.) se basan en la gran
plasticidad edfica y climtica y a su rpido crecimiento, lo que permite su aplicacin
en diversos usos. Se asocia con los cultivos agrcolas sin incompatibilidades, en
linderos, cortinas rompevientos, proteccin de riberas, conservacin de cuencas, etc.
En general se presenta al Schinus molle L., como un rbol de usos limitados,
debido a la ausencia de valor forrajero y en cuanto a la produccin de combustible, es
considerado un recurso energtico de valor moderado. Se reconoce un alto contenido de
aceites esenciales o aromticos, de usos tradicionales y potenciales. Utilizando en
medicina popular, es reconocido como antidiarreico y antiespmodico.
La corteza del Schinus molle L., presenta una importante cantidad de extrables
qumicos: taninos, oleoresinas, cido linoleico, ercico y lignocrico (MARTIN, F;
1989).
Las hojas tambin presentan taninos, flavonoides libres y combinados,
carbohidratos, saponinas, cido linoleico, bohmico, lignocrico, adems de triterpenos
y glicsidos. Las hojas se utilizan para el teido de las lanas, proporcionando un tinte
amarillo (TORRES-CARBAJAL, J.M.; 1978).
17
Las semillas contienen cido linoleico. El aceite extrado de las semillas presenta
actividad fungo txica y puede ser efectiva como fungicida natural. Se ha comprobado
que la variacin estacional afecta la concentracin de los aceites en la semilla.
Los frutos y semillas presentan adems varios aceites esenciales: mirceno,
felandreno, limoneno y cadinol, los que pueden extraerse fcilmente por arrastre de
vapor de agua. Con los frutos fermentados se prepara chicha, miel de molle y vinagre
(TORRES-CARBAJAL, J.M.; 1978).
La fruta puede contener el aceite esencial del hasta 5% y en las hojas puede
contener el aceite esencial del hasta 2% (RAINTREE NUTRITION; 1996).
Por su fcil y econmica propagacin, es una importante especie ornamental
para terrenos urbanos y rurales. En Chile, el molle (Schinus molle L.) se utiliza
frecuentemente como rbol urbano y en bordes de carreteras, destacndose por la
resistencia a la contaminacin y a la escasa demanda de riego (RODRIGUEZ, R.;
1983).
La madera es durable y dura, de albura gris-rojiza y duramen de color amarillo
oscuro. Presenta una variada aplicacin en ebanistera rstica, construccin de
exteriores, soportes de frutales, confeccin de tiles domsticos, parquets y mangos de
herramientas. Debido al contenido de taninos, los postes o varas de molle (Schinus
molle L.) presenta una durabilidad de alrededor de 50 aos.
2.4.5
PRODUCCIN
En vivero crece normalmente entre 50 cm a 1,20 m de altura en el primer ao de
vida, y a los 3-4 aos los arbolitos pueden medir entre 2-2,5 m de altura y presentar un
18
dimetro de 10 m los 10 aos pueden alcanzar un tamao de 5 a 6 metros
(GALLOWAY, G; 1983).
2.4.6
DESCRIPCIN BOTNICA
rbol de 10 a 12 m pudiendo alcanzar hasta 25 m de altura, de fuste poco
desarrollado en altura, pero de 0,5-1,5 m de dimetro en la base, muy ramificado en la
parte superior. La corteza es de color caf claro a ligeramente grisceo, spera y
agrietada, la que se desprende a los individuos ms viejos.
Follaje perenne, denso o abierto, con ramas y ramillas notablemente colgantes,
hojas compuestas o pinnadas, aromticas, fololos ssiles de 1,5-4,0 cm de largo,
lanceolados o linear lanceolados, de margen liso o aserrado, 5-9 yugadas a 7-16
yugadas.
Especie polgamo - dioca. Flores unisexuales o hermafroditas, dispuestas en
panculas alargadas. El fruto es una drupa globosa, de 4-6 mm de dimetro, mesocarpio
azucarado, con el exocarpio delgado y crustceo, de un llamativo color rojizo. Semillas
negras, rugosas, redondeadas, de 3-5 mm de dimetro (PAREDES, C.A.; 1993).
2.4.7
ANTECEDENTES
BIOLGICOS
COMPORTAMIENTO
ECOLGICO
La primera floracin ocurre despus de los 10 aos y luego florece anualmente
entre los meses de octubre a enero. Los frutos maduran entre los meses de febrero a
marzo, los que persisten prcticamente durante todo el ao.
El Molle (Schinus molle L.) presenta races laterales superficiales y la raz
central es pivotante y profunda.
19
2.4.8
SUSCEPTIBILIDAD A DAOS Y ENFERMEDADES
El Molle (Schinus molle L.) es poco tolerante a las bajas temperaturas. En climas
ms fros y hmedos, las heladas el follaje adquiriendo una tonalidad caf oscura, pero
con la llegada de la primavera recupera rpidamente su aspecto lozano.
Resistente a las termitas. El follaje es atacado por insectos del grupo de los
Homptera los que forman agallas o cecidios de forma lenticular en las hojas y el caqui,
con cavidad nica, de forma esfrica con un solo husped.
2.4.9
MORFOLOGA DE LA SEMILLA Schinus molle L.
[Link] Descripcin morfologa de la semilla de Schinus molle L.
GRAFICO 01: MORFOLOGIA SEMILLA Schinus molle L.
Mesocarpio Endocarpio
Deposito de Resina
Endosperma
Embrion
Testa
Corte del mesocarpio
Aceite esencial libre (liquido)
FUENTE: (HUECK, K.; 1978)
2.4.10 DESCRIPCIN DEL ACEITE ESENCIAL DE Schinus molle L.
[Link] Propiedades/Acciones:
Analgsica, Anti-bacteriano, Antidepresivo, Antimicrobiano, Anti hongos,
Antivirus,
Antiespasmdico,
Astringente,
Balsmico,
Citotxico,
Diurtico,
20
Expectorante,
Hipotenso,
Purgativo,
Stomachic,
Tnico,
Estimulante Uterino
(RAINTREE NUTRITION; 1996).
[Link] Componentes:
a-Amyrin, Behenic Acid, A-Bergamont-trans-ene, Bourbonene, d-Cadinene, aCadinol,
d-Cadinol,
t-Cadinol,
a-Calacorene,
g-Calacorene,
iso-Calamenediol,
Calamenene, Calcium, Camphene, Car-3-ene, Carvacrol, b-Caryophyllene, Cerotic
Acid, a-Copaene, Croweacin, a-Cubebene, para-Cymene, b-Elemene, Fisetin, Gallic
Acid, Geraniol Butyrate, Germacrene D, b-guaiene, a-Gurjenene, Heptacosanoic Acid,
a-Humulene, Laccase, Lignoceric acid, Limonene, (+)Limonene, Linoleic Acid,
dihydro-Malvalic acid, iso-Masticadienoic acid, 3-epi-Iso-Masticadienolalic acid, isoMasticadienolic acid, Menth-cis-2-en-1-ol, a-Muurolene, g-muurolene, t-Muurolol,
Myrcene, Nerol hexanoate, Octacosanoic acid, Octanoic Acid Methyl Ester, Oleic acid,
Palmitic acid, Pentacosanoic acid, Penta-1-ol,3-methyl, Peroxidase, a-Phellandrene, bPhellandrene, ortho-ethyl Phenol, Pinene, a-Pinene, b-Pinene, Piperene, trans-Piperitol,
Protocatechuic acid, Quercetin, Quercetrin, Quercitrin, iso-Quercitrin, Raffinose, Rutin,
Sabinene, b-Sitosterol, b-Spathulene, Ta, a-Terpinene, g-Terpinene, a-Terpineol,
Terpinolene, Tricosanoic acid, Cyanidin-3-o-alpha-1-galactoside, Peonidin-3-o-beta-dglucoside (RAINTREE NUTRITION; 1996). En el Anexo 16 se muestran las
estructuras graficas de cada compuesto.
[Link] Remedio Tradicional:
Una mitad de taza seca de la corteza o la decoccin de la semilla 1-2 veces
diarias o 1-2 ml de un tinte 1-2 de 4:1 mide el tiempo del diario 1-2 gramos de la
21
corteza pulverizada en tabletas o diario de las cpsulas pueden ser substituidos si estn
deseados (RAINTREE NUTRITION; 1996).
[Link] TEMPERATURA DE EBULLICIN DE ALGUNOS COMPUESTOS
DEL ACEITE ESENCIAL DE Schinus molle L.
La importancia de cada una de ellas en diversos aceites esenciales. Es as que,
el canfor se presenta en el aceite esencial de la ocimum basilicum; el acetol, en el aceite
esencial de la pimpinella anisum y star; el a-pineno, el D-limoneno, y el -felandreno
presentes en las frutas ctricas, la ocimum basilicum y el coriandum satirum; el 1,8cineol presente en el aceite del euclyptus y el timol, en el aceite esencial del origanum
vulgare y el thymus vulgare (DAUBERT, T.E.; 1989).
En el Schinus molle L., para este trabajo tenemos a:
D-limoneno
145.03 C
-felandreno
117.50 C
2.5 TCNICA DE SEPARACIN DE MEZCLAS
De acuerdo a lo reportado por YAWS en (1999) existen dos mtodos de separacin para
sustancias, el mtodo de separacin qumica y el mtodo de separacin fsica.
2.5.1
MTODOS DE SEPARACIN QUMICA
[Link] ELECTRLISIS
La electrlisis es la produccin de una reaccin redox no espontnea, mediante
el paso de una corriente elctrica. Es por lo tanto el proceso inverso al que ocurre en una
pila elctrica y se lleva a cabo en un contenedor llamado cuba electroltica. Un ejemplo
22
sencillo es el de la electrlisis del agua, en la que el paso de corriente descompone este
lquido en sus elementos constituyentes, hidrgeno y oxgeno.
Es uno de los principales mtodos qumicos de separacin. La principal ventaja
del mtodo electroltico es que no es necesario aumentar la temperatura para que la
reaccin tenga lugar, evitndose prdidas energticas y reacciones secundarias
Industrialmente es uno de los procesos ms empleados en la diferentes reas, como la
obtencin de elementos a partir de compuestos (cloro, hidrgeno, oxgeno), la
purificacin de metales (el mineral metlico se disuelve en cido, obtenindose por
electrlisis el metal puro) o la realizacin de recubrimientos metlicos protectores y/o
embellecedores (niquelado, cromado, etc.) (EDUCARED; 2001).
[Link].1
ELECTROFORESIS CONVENCIONAL
La electroforesis convencional ha sido utilizada durante muchos aos para
separar especies complejas de elevado peso molecular de inters biolgico y
bioqumico. Las separaciones se llevan a cabo sobre una capa delgada y plan o placa de
un gel semislido y poroso que contiene un tampn acuoso en el interior de sus poros.
Esta ser la sustancia encargada de ofrecer resistencia al movimiento de las molculas,
controlando as su migracin uniforme.
Mediante esta tcnica se pueden separar varias muestras simultneamente.
Dichas muestras se depositan sobre el gel, se aplica un potencial de corriente continua a
travs del mismo durante un tiempo fijo. Cuando las separaciones se han completado se
interrumpe el paso de corriente y las especies separadas se tien para visualizarse.
23
La electroforesis en gel es muy utilizada en la deteccin, control de pureza,
caracterizacin, cuantificacin (por comparacin con controles) as como preparacin y
purificacin (por extraccin de bandas desde el gel) de molculas y fragmentos de DNA
y [Link] geles que se emplean son geles tridimensionales de polmeros ramificados
que tienen los espacios entre ramificacin rellenos de lquido. Las redes de polmeros no
solo reprimen la coleccin sino que tambin actan como cribas que pueden retardar y
hasta bloquear la migracin de los analitos polimricos ms grandes. En cambio los
iones pequeos pueden moverse libremente a travs de la estructura porosa del gel. De
este modo la electroforesis en gel tiene dos mecanismos de separacin: electroforesis,
que separa por la relacin carga/tamao y tamizado, que separa mayormente por
tamao. Los geles ms comunes son azarosa y poliacrilamida.
La azarosa es un polmero derivado de un polisacrido neutro, que gracias a
su poder gelificacin y propiedades fsico-qumicas, lo han convertido en el soporte ms
comn para electroforesis en el rea de Biologa Molecular. La poliacrilamida es un
polmero formado a partir de archilamida y N, N metilenbisacriamida. La
concentracin de ambos reactivos define el grado de reticulacin del gel.
Ambos geles tienen en comn que adquieren la misma forma y estn
prcticamente libres de cargas inicas. Esto es importante para evitar que la disolucin
tampn se desplace por el gel cuando se active el campo elctrico.
Este tipo de electroforesis es ampliamente utilizado en la esfera
biotecnolgica, aspecto este que se ha podido comprobar a partir de los numerosos
resultados que se encuentran en la literatura ms actual.
24
Existen otros tipos de electroforesis en gel como son la electroforesis en
geles desnaturalizantes de azarosa, electroforesis en campo pulsado y la electroforesis
preparativa. Estas tcnicas no son de aplicacin tan general pero no por ello dejan de ser
importantes (GERARDO, R.G.; 2001).
[Link].2
ELECTROFORESIS CAPILAR (CE)
La electroforesis capilar es una tcnica alternativa de la electroforesis
convencional y surge debido a que la velocidad de separacin y resolucin de los
compuestos mejora a medida que aumenta el campo elctrico aplicado. Esta afirmacin
no nos permite aumentar el potencial, aun sabiendo que existe una dependencia directa
de ste con el campo elctrico. Esto se debe a que el calentamiento de Joule aumenta
hasta afectar la calidad de la separacin. Para solucionar esta dificultad es que se realiza
la electroforesis en un tubo capilar con un dimetro interno inferior a 0,1 mm y una
longitud de 50 cm a 1 m.
El mecanismo de separacin est basado en las relaciones carga/mas de los
analitos. Su utilidad est en la separacin de protenas y pptidos entre otras sustancias.
Entre las ventajas que ofrece la electroforesis capilar se puede apuntar que da
lugar a separaciones con volmenes de muestra extraordinariamente pequeos (de 0,1 a
10 nL), en contraste con la electroforesis convencional en la cual se emplean volmenes
de muestra en el orden de los L, con una elevada resolucin y rapidez. Ofrece adems
mayor calidad y velocidad que la cromatografa lquida de alta resolucin (HPLC).
Esta tcnica elimina el problema de los solventes de la HPLC, la toxicidad
de los mismos y su costo, pues emplea soluciones acuosas en su gran mayora con muy
25
baja concentracin inica, incorpora los principios de la automatizacin a travs de un
hardware creado especialmente con un software altamente optimizado, aunque la
reproducibilidad en el anlisis cuantitativo es peor.
Como las especies separadas eluyen de uno de los extremos del capilar, se
pueden utilizar detectores cuantitativos como los empleados en HPLC. Como resultado
se obtiene un electroferograma con picos caractersticos de cada compuesto separado.
En realidad ambas tcnicas son complementarias al basarse en mecanismos de
separacin diferentes.
Podemos diferenciar varios tipos de electroforesis capilar:
La electroforesis capilar en gel combina la tcnica de electroforesis con la
cromatografa de reparto. Permite la separacin en funcin de la migracin
electrofortica y tambin en funcin del peso molecular de las muestras. Se lleva a cabo
en una matriz polimrica con estructura de gel poroso, cuyos poros contienen una
mezcla tampn donde ocurre la separacin. Estos geles estn contenidos en un tubo
capilar. Los geles utilizados son tambin de azarosa y poliacrilamida.
Electroforesis capilar de zona:
Es una de las tcnicas ms importantes y ms utilizada debido,
probablemente a su simplicidad y elevado poder de separacin. Est basada en la
separacin de los analitos segn la relacin carga/tamao.
En esta tcnica la composicin del tampn es constante en toda la zona de
separacin. El potencial aplicado hace que los diferentes componentes inicos de la
mezcla migren cada uno segn su propia movilidad y se separen en zonas que puedan
26
estar completamente resuelta o parcialmente solapadas. Entre las zonas completamente
resueltas hay hueco, ocupados por el tampn. Su principal inconveniente es que no
permite separar los componentes neutros.
Enfoque isoelctrico:
La diferencia de los puntos isoelctricos de las protenas se aprovecha para
separarlas por el mtodo de isoelectroenfoque. Este mtodo se basa en establecer un
gradiente de pH estable en una disolucin o gel. Este gradiente se establece por un
conjunto de tampones especiales llamados anfolitos que migran por si mismos hasta que
alcanzan sus puntos isoelctricos. Cuando al gradiente de pH se le introduce una
protena, cada zona intercambia protones con la muestra proteica, generando una
separacin isoelctrica conocida como electro enfocado.
La isotocoforesis significa electroforesis a velocidad uniforme. Esto significa
que el tiempo de recorrido en el capilar bajo condiciones isotacororticas es
independiente de la velocidad. Es una tcnica de separacin por desplazamiento.
Antes de iniciar la corrida, el capilar se debe llenar con un electrolito lder o
gua en un extremo. Este debe tener una gran movilidad y debe ser mayor que la de los
componentes a separar. Luego se introduce la muestra seguida del electrolito Terminal o
cola, cuya movilidad debe ser menor que cualquiera de los componentes de la muestra.
La seleccin de los electrolitos guas y terminales depende del conocimiento de los
valores de las movilidades y del pKa para todos los componentes de la muestra.
27
En la isotacoforesis las bandas siempre estn en contacto con la zona
adyacente. Esta caracterstica es necesaria para mantener la continuidad elctrica a lo
largo del sistema, dado que no hay un electrolito de soporte.
Esta tcnica puede ser utilizada para determinar cationes y aniones. Se
requiere usualmente corridas separadas para determinar cada forma inica.
El electro cromatografa capilar es un hbrido ente la HPLC y la CE donde se
renen algunas de las mejores caractersticas de cada tcnica por separado, por lo que
tiene ventajas sobre ellas. De esta manera el electro cromatografa capilar puede usarse
para la separacin de especies no cargadas. Proporciona una elevada eficacia en las
separaciones de micro volmenes de disolucin de muestra, sin necesidad de aplicar un
bombeo de alta presin.
En el electro cromatografa capilar la fase mvil se transporta a travs de la
fase estacionaria por el bombeo ejercido por el flujo elecroosmtico y no por un
bombeo mecnico, lo que implica significativamente el equipo.
Se diferencian dos tipos de electro cromatografa capilar:
Electro cromatografa rellena
En la cual un disolvente polar se conduce por el flujo electro osmtico a
travs de un capilar que contiene un relleno tpico de un capilar que contiene un relleno
tpico de HPLC en fase diversa. Las separaciones dependen de la distribucin de los
analitos entres la fase mvil y la fase estacionaria lquida retenida por el relleno
(GERARDO, R.G.; 2001).
28
Cromatografa capilar electrocintica micelar:
Esta tcnica requiere la utilizacin de un tenso activo en un nivel de
concentracin en el cual se formen micelas. Estas micelas son capaces de alojar
compuestos no polares en su interior. La interaccin de las micelas y los solutos es la
que produce la separacin.
En resumen la cromatografa y la electroforesis son en la actualidad tcnicas
ampliamente utilizadas en la resolucin de macromolculas de inters en la industria
biotecnolgica, biolgica y bioqumica. Muestra de ello es el numeroso grupo de
estudios realizados que se encuentra en la literatura especializada.
Se destaca en las ltimas dcadas un mayor uso de la electrofresis capilar.
Esta versin instrumental de la electroforesis convencional resulta ms ventajosa debido
a los pequesimos volmenes que se necesitan para el estudio en cuestin y los
resultados se obtienen en un tiempo mnimo. Estos aspectos la hacen preferida entre las
tcnicas de separacin (CASTAGNINO, J.M.; 2000).
2.5.2
MTODOS DE SEPARACIN FSICA
[Link] DESTILACIN
La destilacin es el procedimiento ms utilizado para la separacin y
purificacin de lquidos, y es el que se utiliza siempre que se pretende separar un lquido
de sus impurezas no voltiles.
La destilacin, como proceso, consta de dos fases: en la primera, el lquido pasa
a vapor y en la segunda el vapor se condensa, pasando de nuevo a lquido en un matraz
distinto al de destilacin (MARY, TERNERO ANGULO; 2006).
29
[Link] CROMATOGRAFA
La cromatografa se define como la distribucin de una sustancia o partcula en dos
fases:
CRISTALIZACIN (Lquido-Slido)
DESTILACIN (Lquido-Vapor)
SUBLIMACIN (Slido-Vapor)
No se consideran cromatografas las distribuciones entre fases muy voluminosas. Se
pueden clasificar por varios principios.
1. Por principio F-Q.
De reparto.
2.
De adsorcin.
Por la naturaleza de las fases.
Gas-Lquido.
Gas-Slido.
Lquido-lquido.
Lquido-Slido.
3.
Por el equipo utilizado.
En columna.
En papel.
En capa fina.
De cambio inico.
30
Principios de la cromatografa
Vamos ha hacer una descripcin de los diferentes tipos de cromatografas,
detenindonos en los principios en los que se basa y lo que se puede obtener de ellas.
Reparto
Si utilizamos diferentes concentraciones de X (X, X, X) y cuantificamos en cada
una de las pruebas el cociente de
concentracin de X en cada uno de
los lquidos, veramos que es
constante, y se llama K, constante de reparto.
nicamente, K no es constante si variramos la temperatura en cada una de las pruebas.
La determinacin de esta constante se denomina Ley del reparto.
DISTRIBUCIN EN CONTRACORRIENTE
No cumple estrictamente la definicin de cromatografa, sin embargo, se trata de un
proceso de reparto al 100%. Se trata de dos juegos de casillas que se pueden desplazar
unas sobre otras. stas se llenan de dos lquidos inmiscibles, de modo que si aadimos
una sustancia con una K=1, en una de las casillas y agitamos, sta se distribuira al 50%
en cada uno de los lquidos. Si ahora desplazamos la fila una casilla y volvemos a
agitar, la sustancia volvera a distribuirse. Despus de 5 pases obtendramos una
distribucin como la que aparece en la figura. Si eso lo extrapolamos para la variable n
de pases tendiendo a
, obtendramos una Campana de Gauss.
31
0,5
0,25
0,25
0,125
0,25
0,125
0,031
0,125
0,187
0,125
0,031
0,5
0,25
0,25
0,125
0,25
0,125
0,031
0,125
0,187
0,125
0,031
Eso sera para una valor de 1 para la constante de distribucin, si ste valor fuera de 3,
obtendramos algo como lo observado en la figura a los 5 pases. Si representamos las
grficas.
5
0.003 0,036 0,159 0,317 0,238
0,001 0,012 0,053 0,106 0,079
Como la anterior para valores de K de 1, 3, y 0,3 veramos que sustancias con diferente
constante de distribucin se separaran, o mejor dicho se encontraran en mayor
concentracin en distintas casillas.
Como se ve en la grfica, la resolucin no
es extremadamente buena, para obtener
una mejor purificacin habra que
escoger bien los solventes. En general
funciona bastante bien con esteroides.
Lo ms importante de este proceso es el
recordar que se trata de una cromatografa 100% de reparto.
32
Adsorcin
Proceso de retencin de una molcula a travs de una interfase. En l intervienen gran
cantidad de
Fuerzas de
Vander Walls
fuerzas, principalmente de Vander
Walls, que recordemos que actan a
dipolo permanente
dipolo permanente
dipolo inducido
dipolo permanente
dipolo inducido
dipolo inducido
-7
distancias del orden de X , y que en
compuestos biolgicos son de tipo
dipolar. Estas interacciones no se dan en cualquier lugar, sino en los llamados centros
activos del soporte. Evidentemente, tambin hay procesos de desorcin, lo que implica
un equilibrio, muy dependiente de la cantidad de centros activos, que a su vez es
funcin del material, de la temperatura.
Analicemos matemticamente las variables implicadas en el proceso:
a= n total de centros activos
a = n de centros ocupados
Va= velocidad de adsorcin
Vd= velocidad de desorcin
Ka= constante de adsorcin
Kd= constante de desorcin
Ka/Kd= K
Va = (a a ) P K a
en equilibrio Va = Vd
Vd = a K d
33
a
PK
a PK
a cK
=
a=
en lquidos ) a =
(
a 1 + PK
1 + PK
1 + cK
K
K a
PK a
Kd
a
(a a )PK a = aK d aPK a aPK a = aK d a PK a = a(K d + PK a ) =
Kd
K
a Kd + PK a
+P a
Kd
Kd
Si representamos grficamente estas ecuaciones (para gases con la P y para lquidos
para c) obtendramos algo parecido a lo
a
mostrado
en
la
figura,
donde
un
determinado valor de la ordenada se saturan
los centros activos y, por tanto, nos da a el
Pc
n total de centros.
Por lo general, la mayor parte de las cromatografas se basan en principios de adsorcin
y reparto mezclados aunque en distintos porcentajes.
[Link] CROMATOGRAFA DE PAPEL
Se ajusta perfectamente a la definicin de cromatografa, y se basa principalmente en el
reparto. Consiste en la distribucin de molculas en dos fases.
Segn el dibujo las dos fases seran:
34
Fase mvil: consistente en una capa de solvente orgnico que asciende por
capilaridad por el papel y sobre la capa hidratada, por supuesto sin mezclarse con
ella.
Fase estacionaria: que consiste, no en el papel, que es slo el soporte, sino en la
capa hidratada.
Ya que el movimiento se restringe al solvente orgnico, es el tiempo que permanezcan
en esta fase el que determinar la distancia recorrida; a ms tiempo, ms distancia. Esto
suele significar que el compuesto que ms distancia recorre es ms apolar ya que
permanece ms tiempo en el solvente afn.
Termodinmicamente la distribucin entre las dos fases cumple:
G = RT ln K
G =
Gi
2
Siendo K la constante de reparto.
Ponemos un ejemplo con dos aminocidos, que se diferencian nicamente en un CH2:
CH3 CH2 CH2 CH COO
A
NH3+
CH3 CH2 CH COO
B
NH3+
G A = GCH 3 + 2 GCH 2 + GCH + GCOO + G NH +
G B = GCH 3 + GCH 2 + GCH + GCOO + G NH +
GCH 2
G A G B = RT ln
KA
KB
35
Esto significa que en principio se pueden llegar a separar sustancias con diferente K, y
como hemos visto con diferentes grupos funcionales. Este principio es engaoso, ya que
experimentalmente se ve como en ocasiones no podemos separar compuestos con
diferentes grupos funcionales, mientras que podemos separar azcares con idnticos
grupos, debido a la distinta orientacin y distribucin de los mismos.
La cromatografa en papel se puede realizar de dos formas con igual resolucin.
Descendente: Ms cmoda. Se trata de una caja saturada de vapor de agua,
atravesada
por
una
cajetn
Posicin inicial
de la muestra
semicilndrico lleno con el solvente
Solvent
Varilla
orgnico. En el se deposita, como
muestra la figura el papel con la
cajetilla
banda de muestra justo al salir el
Pap
papel del cajetn. Para sujetar el papel
introducimos una varilla a lo largo de
la
caja.
El
solvente
Atmsfera saturada de
vapor de agua
comenzar
ascendiendo por el papel por capilaridad y
continuar
bajando
al
de
salir
cajetilla,
por
la
la
pasando
zona
de
muestra y arrastrndola, consiguindose as la
separacin.
36
Ascendente: Evidentemente con el mismo principio, salvo que ahora el
solvente se encuentra en la parte inferior de la cubeta y asciende por el papel
haciendo que se separe la muestra.
Bien, como nota personal he de decir que posiblemente la resolucin de la
cromatografa en papel descentente sea mayor ya que si recordamos las prcticas de
primero, al separar las clorofilas nos salieron cambiadas en el papel, ya que, por lo
menos segn nos dijeron, una de ellas tena el peso molecular mayor y por tanto le
costaba ms ascender que a la otra menos apolar pero de menor peso molecular.
[Link] CROMATOGRAFA DE GASES
O tambin llamada cromatografa gas lquido, en clara referencia a las dos fases que la
caracterizan:
Fase mvil: gas. ste debe presentar algunas caractersticas de las que hablaremos
posteriormente.
Fase estacionaria: lquido. Que al igual que el gas presenta algunas peculiaridades.
En principio se trata de un gas que atraviesa una columna rellena de lquido. A la
entrada de la columna colocamos tres compuestos (en estado gaseoso), stos sern
Deteccin
X, Y, Z
GAS
Pi
LQUIDO
GAS
P0
37
arrastrados por el gas, pero dependiendo de su coeficiente de reparto irn quedando ms
o menos tiempo en el lquido, lo que provoca la separacin de los tres compuestos,
saliendo antes aquel que halla permanecido ms tiempo en la fase mvil. A la salida se
coloca un aparato que detecta la salida de los compuestos.
La velocidad de los componentes de la muestra depender entonces de la
velocidad que demos al gas, al que llamaremos gas portador y de su naturaleza, as
como la de la fase estacionaria (que hemos dicho que es un lquido, pero que tambin
puede tratarse de un slido) y por supuesto de la suya propia.
El detector colocado al final de la columna enva una seal que se refleja en
forma de picos, cada uno correspondiente a un componente de la muestra. El primer
pico que aparece se denomina pico del aire y corresponde a la deteccin de una
cantidad muy pequea de aire que entra a la columna cuando se introduce la muestra en
el cromatgrafo. En muchas ocasiones se toma como punto de referencia. La lnea base
Pico
correspondiente
algn
Sea
arrastrado
compuesto
por
Xel gas Lnea
Z
t
es la parte del registro que corresponde al gas portador puro, o sea, a la seal de
ausencia de componente.
Identificacin
Al igual que en las dems cromatografas vistas hasta ahora hay que definir cuanto hay
y de que compuesto se trata, lo que significa descomponer lo obtenido de dos formas:
38
Cuantitativo: para averiguar la cantidad de muestra hay un mtodo eficaz, no como
en el caso de las cromatografas en papel y en capa fina, y consiste en averiguar la
relacin entre el rea del pico y la masa del compuesto, relacin definida por la
ecuacin rea = Cte.
Seal
[sustancia]. Todo eso
est
tabulado,
antiguamente se proceda
a recortar el pico y
pesarlo, lo que implicaba
td
t
tener un papel especial de grosor constante adems de buen pulso. En la actualidad es
el ordenador el que se encarga de todo.
Cualitativo: cuyo parmetro clave es el tiempo que tarda en salir, pero como nos
ocurre siempre este depende de muchas ms cosas y, por tanto, puede no ser
especfico del compuesto.
El tiempo de retencin bruto tdr se define, como se ve en la figura como el tiempo que
tarda en salir el compuesto.
t dr = t d + t r
En esta ecuacin td se define como el tiempo que permanece en la fase mvil y tr como
el tiempo que permanece en la estacionaria, (por lo que es lgico que la suma de ambos
sea igual al tiempo que tarda en salir). El tiempo que se permanece en la fase mvil es el
mismo para todos los compuestos, ya que todos tienen que salir de la columna y
nicamente se desplazan cuando estn en la fase mvil. Lo que si es caracterstico de
39
cada sustancia es en tr, ya que es el tiempo que quedan retenidos en la fase estacionaria
el que hace aumentar el tiempo de retencin bruto, y al ser, por tanto, ms especfico se
le denomina tiempo de retencin corregido.
Pero no est tan corregido, an depende de muchas
Vdr = t dr Fc = t d Fc + t r Fc
Vdr = Vd + Vr = t d Fc + t r Fc
variables, por lo que, mejor que hablar de tiempos
de retencin hablaremos de volmenes de retencin
Vdr. Mediante estas ecuaciones se define el volumen de retencin, que es igual al
tiempo de retencin multiplicado por el flujo de gas portador (Fc) e igual al volumen
intersticial ms el volumen de retencin corregido, que es igual al tiempo de retencin
corregido con el flujo de gas portador.
Al igual que suceda con los tiempos Vd es comn, mientras que Vr es caracterstico de
los componentes y debe ser corregido por variables experimentales:
1. Presin: Si recordamos, el gas portador es inyectado a una presin Pi, saliendo de la
columna con menor presin Po, esto se denomina cada de presin (Pi- Po).
Deteccin
X, Y, Z
GAS
Pi
Y
LQUIDO
Aumenta la
Presin
GAS
Po
Pi Po P1 F1
F
P
Pi Po P2 F2 1 = 1
P
F2
Pi Po P3 F3 2
40
Cmo se ve, hay una proporcionalidad entre las cadas de presin y el flujo del gas
portador, con lo que llegamos a que F2 = F1 P2 , siendo esta relacin para lquidos por su
P1
condicin de incompresibles, mientras que para gases, la relacin cambia,
siendo F2 f F1 P1 .
P2
Con todo esto llegamos a la conclusin que el volumen de retencin a presin constante
es directamente proporcional al tiempo de retencin, al flujo del gas portador y a f,
siendo esta la reunin de varios parmetros.
2
Pi
1
Po
3
f =
3
2 Pi
1
Po
V rP = tr Fc f
2. Temperatura: En el cromatgrafo, slo podemos medir la temperatura externa, pero
es suficiente para modificarnos el flujo del gas portador.
FC = Fm
TC
sustituimos el flujo corregido en la ecuacin anterior
Tm
VrP ,T = tr Fm
Fm = Flujo de la muestra
vaporizada.
Tm = Temperatura de la muestra
vaporizada
Tc = Temperatura del gas portador
Tc
Tm
Con esto ya tenemos el volumen de retencin corregido por presin y temperatura.
3. Cantidad absoluta de fase estacionaria (WL): Tambin influye la fase estacionaria
en el parmetro, de modo que hay que incluirla.
Es ahora cuando aprovecho a explicar la naturaleza de la fase estacionaria. sta puede
ser un slido que puede estar rellenando la columna, o bien dispuesto, en forma de
recubrimiento, sobre otro slido que har de soporte. Pero la que vamos a estudiar es la
41
cromatografa gas lquido, el cual se encuentra dispuesto sobre un slido portador. En
este caso el slido portador puede ser un relleno (columnas de relleno) o bien la propia
pared, en su cara interna, de un tubo ms o menos capilar
Lquido
(columnas capilares).
A la vista de la naturaleza del relleno, no podemos medir el
Slido
soporte
volumen, nos permite corregir de nuevo el volumen de retencin,
que ahora ser el volumen de retencin especfico (Vg).
Este valor nos permite valorar las
homlogas,
molculas
(series
con
VrP ,T
Vg =
WL
llamadas
series
de
Diinsaturado
s
grupos
funcionales idnticos y que se
diferencian en el n de carbonos
Log Vg
Monoinsaturad
os
Saturado
s
o, como con los cidos grasos
en el n de insaturaciones). La
relacin es entre el log Vg y el
N
C
n de carbonos, lo que da como resultado en grfica, algo como lo observado en la
figura, con lneas paralelas crecientes que indican que aumenta el logaritmo del
42
volumen de retencin especfico en relacin con el tamao creciente de los cidos
grasos, y que las series homlogas con diferencias de insaturaciones muestran patrones
paralelos, aunque las distancias entre las rectas no son constantes.
El volumen de retencin especfico no es mensurable, mientras que el tiempo de
retencin es el dato que nos da el cromatgrafo, de modo, que podemos intentar
desrelativizarlo igual que hicimos con la cromatografa en papel y en capa fina. De
esta forma si dividimos el tr de un pico por el de otro sera igual que dividir el volumen
de retencin especfico, con lo que eso conlleva:
De modo que no hay ms que dividir los tiempos de retencin para obtener un
parmetro, que aunque no caracterstico de la molcula si nos permite obtener buenos
resultados en la identificacin.
Eficacia de la columna
Evidentemente es importante calibrar los posibles errores de la columna para poder
entender la separacin de los componentes de una muestra y poder extrapolar algo
significante del resultado. Buscaremos el ajuste de la eficacia desde el punto de vista de
la transferencia de materia que se realiza entre la fase mvil y la estacionaria en los
procesos sucesivos de adsorcin y desadsorcin que tienen lugar en la columna.
La eficacia es funcin de un parmetro denominado plato terico, y que se define como
el segmento de columna que necesitamos para que se produzca un equilibrio de reparto
entre las dos fases del cromatgrafo. Se mide en unidades de longitud en forma de otro
parmetro, altura equivalente a un plato terico (HETP). Hemos dicho que la eficacia
es funcin del n de platos tericos, de modo, que un aumento de los mismos
43
aumentara la eficacia de la columna, de modo que hay que aumentar el nmero de
platos tericos para obtener una mayor resolucin, y la mejor manera de hacerlo es
disminuir su altura, de modo que se une un parmetro a la funcin:
La ecuacin de Van Demper relaciona la altura equivalente a un plato terico con
variables como el grado de empaquetamiento de la columna (A), la facilidad de difusin
en el lquido (B), la mayor o menor dificultad de entrar en el lquido (C), funcin a su
vez de y del grosor de la capa de lquido sobre el soporte), y la velocidad del gas
portador ( ).
Grosor de la fase
HETP = A +
B
+ Cu
u
Esta ecuacin representada mediante una grfica HETP/
da
como
HETP
resultado una
parbola,
ptima
donde, como hamos dicho antes el punto de
menor valor de altura ser el valor a escoger
Lnea base
44
y su proyeccin sobre el eje de ordenadas nos define la velocidad del gas portador
ptima. Esto no no implica ms que el llegar a un compromiso en la ecuacin, ya que
se encuentra en el divisor como en el sumando y, por tanto, hay que encontrar el valor
de la velocidad para que HETP sea mnima.
La altura equivalente a un plato terico tambin se puede valorar, una vez realizado un
cromatograma como directamente proporcional a la anchura del pico a la mitad de su
altura (b) elevada alcuadrado multiplicada por la longitud de la columna e
inversamente proporcional al tdr elevado al cuadrado.
2
b1
HETP = 180 2 L
t dr
El cromatgrafo de gases
Un cromatgrafo de gases no es ms que la concatenacin funcional de una serie de
elementos, y en principio es un aparato sencillo. En esquema consiste en una bombona
de gas, que recordemos debe ser inerte, de modo, que se suele utilizar el Helio (He). La
salida del gas a unas 150-180 atm requiere de una serie de manoreductores, 2, 3, en todo
caso suficiente para que la presin no supere las 4 o 5 atm al llegar a la siguiente pieza,
el inyector. ste como su propio nombre indica es el encargado de introducir la muestra
en la columna. Hay que resear que el volumen muerto del inyector debe ser el menor
posible, con el fin de compactar lo ms posible la muestra gaseosa y hacer que entre en
la columna lo mas junta posible, para as lograr una separacin mucho ms exacta, al
igual que suceda con la electroforesis.
45
La columna puede ser de vidrio, pero se confecciona ms habitualmente de otros
materiales (cobre, aluminio, acero inoxidable). Como ya he dicho las hay de muchos
tipos, normalmente especficas para un tipo especfico de muestra. sta se encuentra
dentro de una cavidad denominada horno, cuya funcin consiste en mantener la
temperatura deseada, que dependiendo del programa nos puede interesar que
permanezca constante, o bien que vare de una forma u otra con el tiempo.
A la salida de la columna se encuentra el detector, como ya haba mostrado en repetidas
ocasiones. Es el encargado de mostrarnos la salida de los componentes, normalmente en
grficas en forma de picos. A l se conectan dos bombonas de gas, una de H2 y otra de
aire.
Columna
Horno
Manoreductores
Cromatograma
H2
Analicemos ms profundamente algunas de las partes:
Inyector: Es importante, como ya se ha dicho, que presente el menor volumen
muerto posible. Su misin es la de volatilizar la muestra e introducirla en la
columna lo ms empaquetada posible. La primera de la funciones la realiza
46
elevando la temperatura 100 C por encima de la de la de al columna, consiguiendo
as su volatilizacin. El proceso debe realizarse lo ms rpidamente posible para no
pirrolizar la muestra.
Columna: Hay dos tipos principales de columnas, aunque su heterogeneidad es
cada vez mayor. Estos dos grandes grupos
Columnas
Convencionales
de 1 a 2 m de longitud
diametro comprendido entre 1 y 2 mm
RELLENO CON SOPORTE
Capilares
de ms de 100 m de largo
Diametro de dcimas de milimetro
LAS PAREDES HACEN DE SOPORTE
Como ya hemos explicado la columna se compone de platos tericos, que de forma
matemtica se define como:
n platos tericos =
Longitud ( m ) 1000 L
=
HETP ( mm )
HETP
Sobre esta ecuacin vamos a sustituir la altura equivalente de un plato terico que
n platos
tericos
Longitud ( m )
1000 L
=
HETP ( mm )
HETP
b1
HETP = 180 2
t dr
n platos
tericos
t
= 5 , 54 dr
2
b
12
L/
1000 L/
b1
2
180
t dr
47
obtuvimos con anterioridad.
Detector: Los ms utilizados y precisos son los
denominados detectores de
ionizacin de llama, y consisten, como su propio nombre indica en analizar los
cambios inicos producidos en la llama,
los cuales sern debidos a la quema se
uno de los componentes de la muestra.
Columna
__
La base consiste en la propia naturaleza
de la llama, la cual con el combustible
H2 Aire
de hidrgeno y aire que le aplicamos quema a un gran nivel, produciendo iones y,
por tanto, una
V estando el mechero cargado negativamente y el detector
positivamente. Al introducirse en el detector un compuesto salido de la columna, se
quemar, produciendo una alteracin en los iones, que repercutir, como es lgico
en la diferencia de potencial, la cual se mantena estable formando lo que
conocemos como lnea base y que se ver alterada, como hemos dicho al variar el
combustible. ste dura muy poco tiempo, volviendo a quemarse entonces slo
hidrgeno y aire, y volviendo, por tanto, a la lnea base. El resultado es un pico en
el cromatograma, de modo que el punto ms elevado del mismo nos indica el
tiempo en el cual se quem ms cantidad de componente, o lo que es lo mismo, el
tiempo que ha tardado en salir la mayor concentracin de dicho componente.
Estos detectores son muy sensibles, pudiendo detectar materia con una concentracin
del orden de 310-3 gramos/segundo, y, adems, son muy resistentes. Una de las
ventajas que presentan es la de no detectar compuestos inorgnicos, con lo que
48
eliminamos del cromatograma los posibles contaminantes de las fases como de la
muestra, adems de eliminar aquel primer pico que apareca en los cromatogramas
correspondiente al aire contenido y arrastrado por el gas portador. Si detecta, sin
embargo, la gran cantidad de solventes utilizados, siendo uno de los ms comunes el
hexano.
Resolucin del cromatograma
Puede pasar que un cromatograma no salga todo lo resuelto que nos gustara, o lo que es
lo mismo, que los picos salgan solapados. En estos casos hay una relacin de distancias
que nos permite calcular el n de platos tericos que haran falta para separar los dos
picos.
En primer lugar hay de definir una serie de puntos, los que se muestran en la figura.
Estos puntos de corte son el resultado del trazado de una serie de lneas, siguiendo estos
pasos:
1. Trazar la lnea base.
2. Trazar una lnea recta que pase por los dos picos.
3. Trazar una lnea perpendicular a la lnea base
que pase por el punto ms bajo entre los dos
picos.
Lnea
C
Estos puntos de corte determinan una serie de segmentos, de modo, que definimos el
trmino resolucin (
), en tanto por ciento, y definido por la siguiente ecuacin.
49
Resolucin =
Si
AB
= 1 = 50%
AC
AB
100 %
AC
Si AC = 0 = 100%
Sobre esto ya podemos configurar muestro objetivo, que no es otro que hallar el n de
platos tericos necesarios en la columna para separar eso dos picos. Antes tenemos
hacer unos cuantos cambios, como el transformar la ecuacin a tantos por una (algo ms
matemtico) y definir como la divisin del tdr del primer pico entre el del segundo,
algo que ser til para simplificar la ecuacin final.
tdr (1)
tdr (1)
2
+
1
(
)
2
tdr
2
2
+1
ln
n de platos necesario = 2
n de platos necesario = 2
ln
tdr (1)
1 1
( 2 ) 1 1 AB AC
dr
= AB
AC
tdr (
2)
Con esta ecuacin tan aparatosa, pero a la vez tan sencilla podramos mejorar la
resolucin de la columna sin ms que cambiar algn parmetro que haga variar el n de
platos tericos, como podra ser el caso de la longitud de la columna.
Naturaleza de la fase lquida
No hay que dudar a estas alturas que la fase lquida, bien sobre bolas o sobre las paredes
de la columna, juega un papel crucial en la cromatografa de gases. Por esto hay de
intentar restringir la gran cantidad de lquidos que podran entrar a formar parte de esta
50
cromatografa. Esta exclusin se realiza por las necesidades o requisitos que debe
cumplir, estas son:
1. Viscosidad (
): No deber ser muy alta a la temperatura de operacin, para facilitar
la velocidad de establecimiento de los equilibrios de reparto entre las fases.
2. Tensin superficial: La fase estacionaria lquida deber mojar bien el soporte, sea
relleno o sea pared interior de tubo, asegurndose en lo posible que la adherencia
soporte-lquido sea suficiente para evitar que la fase mvil arrastre a la estacionaria,
provocando una mala distribucin de la misma en la columna. Adems, debe
formar capas lo ms uniformes posible.
3. Tensin de vapor: Deber ser mnima, con el fin de que la evaporacin de la fase
estacionaria lquida no provoque el paso de la misma a la fase mvil, lo cual
provocara perturbaciones en la separacin y en el anlisis posterior.
4. Selectividad respecto a los componentes de la fase mvil1: Esta condicin es la
que define en s a la cromatografa de gases. Las constantes de reparto de los
componentes a separar entre la fase mvil y la estacionaria debern ser
suficientemente diferentes para que la fase estacionaria oponga resistencias
distintas al paso de cada componente a travs de la columna, proporcionando as
una buena separacin de los componentes a la salida de la misma.
5. Reversibilidad del reparto: El reparto de cada componente entre las fases deber
ser reversible, para favorecer que los procesos consecutivos de adsorcin y
desadsorcin, que se realizan a lo largo de la columna, sean rpidos y completos en
51
alcanzar el equilibrio. Esta condicin excluye implcitamente cualquier relacin
qumica entre los componentes a separar y la fase estacionaria.
6. Estabilidad trmica: Es de gran importancia que la fase estacionaria sea estable,
en s misma y respecto de los componentes de la mezcla a resolver, a la temperatura
de trabajo. Esta condicin limita algunas veces la aplicacin de un lquido dado
como fase estacionaria.
Recordemos, el lquido que va a formar parte de la fase estacionaria debe cumplir estor
requisitos, y al elegirla debemos estar seguros de lo que queremos conseguir, si separar
compuestos apolares o polares.
Como ya hemos dicho, las series homlogas de cidos grasos forman lneas paralelas
crecientes en diagramas log Vg/n C, lo que significa que cada carbono aadido (aunque
van de dos en dos) aumenta el tdr, y al comparar con las rectas de las series insaturadas
vemos que saldra antes un cido graso insaturado que el saturado del mismo n de
carbonos. Esto es algo muy a tener en cuenta ya que nos puede ser til.
En caso de querer separar series homlogas de sustancias polares utilizando una fase
estacionaria
polar
CH3 CH2 O + C CH2 O + C CH2 O +
hay que tener en C EGS (etilenglicol succinato) O OO
cuenta la lgica, de
modo, que aquellas molculas (de cadena larga, como la mostrada en la figura) con ms
insaturaciones incrementarn su tdr, al contrario que ocurra con una fase estacionaria
apolar.
52
Esto es debido a las nubes electrnicas de tipo que estn implicadas en el enlace
doble, lo que facilita la formacin de dipolos inducidos y, por tanto, favorece la
aparicin de fuerzas electrostticas entre las fases, que sern de atraccin (aumento de
tdr) en l caso de tratarse de una fase estacionaria polar y de repulsin (disminucin de
tdr) en caso de tratarse de una fase apolar.
En definitiva esto implica que al tener un cromatograma debemos saber, en primer
lugar, cual es la naturaleza de la fase estacionaria, para as poder interpretarlo
correctamente. Casi a modo de ancdota, comentar que en las series homlogas cada
carbono de ms requiere un aumento de temperatura de unos 20 C para poder
volatilizarlo en el inyector, ya que presenta mayor cantidad de interacciones de tipo
dipolar, (fuerzas de Vander Walls).
Introduccin de la muestra
Aunque en un principio se pueda pensar que en un cromatgrafo de gases slo se
pueden separar gases, ya hemos visto que no es as, debido principalmente al inyector,
capaz de vaporizar la muestra para que pueda ser arrastrada por el gas portador, pero,
como suele pasar las cosas no son tan fciles, ya que los compuestos orgnicos, tal cual,
no se suelen poder gasificar, ya que por ejemplo los azcares se caramelizan a altas
temperaturas.
Adems, y como es lgico la muestra una vez en la columna ha de permanecer con las
mismas caractersticas fisico-qumicas ya que la constante de reparto, debe de
permanecer constante, valga la redundancia.
53
Ahora vamos a ver los procedimientos qumicos que se aplican a las distintas molculas
biolgicas para pasar por el cromatgrafo de gases con garantas:
metilacin
+
NH
NH
CH COO
R
CH COO CH
butrico
R
3
CF
CH O NH
AcH
+
CF CH CH CH COO C H
3
R
Compuesto preparado
para la volatilizacin
NH
CH COO C H
4
R
(CF CH) O
3
Aminocidos
Si un aminocido presenta dos grupos activos (por lo menos en el esqueleto) hay
que anularlos. En primer lugar anulamos el grupo carbonilo metilndolo en primer lugar
y aadindole un cido butrico para que quede pegado butano. Al compuesto resultante
de esta reaccin se le aade un compuesto fluorado, de forma que se elimina el grupo
amino, quedando en la molcula un residuo de flor.
De esta forma conseguimos nuestro objetivo, y como se puede observar el
compuesto resultado tiene muy poco que ver con un aminocido, pero como todos
reciben el mismo tratamiento, slo se diferenciarn en el radical pudindose separar
unos de otros.
54
Azcares
Con los azcares se trata de bloquear los grupos alcohol con cloruro de trimetil xilano.
Me
R OH + Cl Si Me
Me
Me
R O Si Me
Me
cidos grasos
Se trata de formar steres metlicos (Met
OH) para anular el grupo carbonilo.
O
R C
R C
OH
O
OH CH
Esteroides
En primer lugar hay que anular los grupos alcohol, normalmente por metilacin o,
al igual que con los azcares con cloruro de trimetil xilano. En segundo lugar hay que
esterificar los posibles grupos cidos por medio de la esterificacin.
Con esto terminamos la cromatografa de gases, un mtodo muy prctico y
relativamente barato. Como se ha podido observar tiene una resolucin muy buena,
aunque las molculas introducidas en el cromatgrafo no tienen mucho que ver con la
original.
Cromatografa de afinidad
La base es simple, y se basa en la especificidad biolgica, algo que no es tan fcil de
conseguir. Si finalmente funciona es el mejor mtodo de separacin por ser altamente
especfico.
55
Como sabemos hay muchas molculas con capacidad de unir a otras especficamente,
como los anticuerpos, o los receptores de membrana. En
principio la cromatografa consta de una matriz con unos
brazos, a modo de separador que estn unidos a una
molcula pequea con sta capacidad especfica. El brazo
acta a modo de separador para que la unin no tenga
impedimentos de tipo estrico. Al ir eluyendo por la
columna la muestra, aquellas partculas especficas para el ligando irn quedando
secuestradas del modo que se ve en la figura. Una vez que eluye toda la muestra menos
la molcula en cuestin se efecta un lavado para asegurarnos de la especificidad y
posteriormente se procede a eliminar la unin molcula-ligando.
Caractersticas del ligando
1. Debe ser inerte: con
Poducto comercial
esto eliminamos la unin
Matriz
O CN
OH + BrCN
especfica
en
O C NH
centros
OH
+
H N (CH ) NH
activos de enzimas.
2. Debe unir el ligando
manteniendo
la
especificidad:
sino
NH
COO +
O C O (CH ) NH
2
Brazo
habra
que
estar
fabricando resinas con
cada experimento.
NH
O C O (CH ) CO
2
Brazo
56
3. Debe posibilitar una desunin sencilla: por medio de cambios en el pH o en la
fuerza inica.
Matrices
Agarosas.
Sepharosas. La formacin del brazo se describe en la figura. Su configuracin,
distancia a la matriz y algunas caracterstica ms son parte le la galera comercial.
Vidrio
Disociacin del complejo
Como ya he dicho, una de las condiciones que hay que cumplir es la de una disociacin
rpida y fcil. Para ello debemos conocer a la perfeccin el equilibrio que lo regula,
para as poder disociar el complejo sin peligro de daar la molcula a separar.
Ventajas
La gran especificidad que muestra esta cromatografa es su mayor ventaja. El resultado,
por tanto, es una molcula de gran pureza.
La segunda gran ventaja es la de conseguir formas activas de las molcula ya que lo
mtodos no son drsticos.
El mayor problema que presenta este tipo de cromatografa es la dificultad de encontrar
el ligando, es molcula pequea, inerte y reciclable especfica de una sola molcula.
57
Una vez terminada la descripcin de los mtodos cromatogrficos creo que es
conveniente hacer un repaso.
Tipos de Cromatografa
En contracorriente
100% reparto
K: constante de
reparto
En papel
Descendente
Ascendente
Bidimensional
Adsorcin + Reparto
Rf
En capa fina
Ascendente
De gases
Adsorcin
HETP, tr, Vg
De cambio ionico
Preferencia por iones
Kav
De filtracin molecular
P de entrar en los poros
Ve
De Afinidad
Unin especfica
HPLC
Adsorcin
Reparto
Cambio Ionico
Exclusin
58
III. MATERIALES Y MTODOS
3.1. LUGAR DE EJECUCIN
E l presente trabajo de investigacin se ejecuto en los laboratorios de la Facultad
de Ingeniera de Industrias Alimentarias y de la Facultad de Ciencias de la Universidad
Nacional Santiago Antunez de Manolo, as como tambin en los laboratorios de la
Facultad de Qumica de la Universidad Nacional de San Marcos y de la Universidad
Pontificia Catlica del Per.
3.2. MATERIA PRIMA.
Se empleo como materia Prima los frutos de Schinus molles L. procedente del
callejn de Huaylas desde la zona denominada Olleros hasta el Distrito de Jangas
correspondientes a la Provincia de Huaraz, Departamento de Ancash.
3.3. MATERIALES.
Vernier.
Materiales de vidrio: Probeta graduada, placas petri, desecador, buretas,
pipetas, envases de vidrio oscuro, perlas de vidrio, vasos de precipitado.
Tamices N 20.
Crisoles.
Pinza para crisoles.
Cocinilla elctrica.
Gotero.
59
Embudo Buchner.
Termmetro.
Rejilla de amianto.
Soporte universal.
Trpode.
Gradillas.
Picnmetro
Papel filtro.
Tamices N 20.
3.4. REACTIVOS.
Alcohol etanol al 70%, 85% y 95%
Acido sulfrico (H2SO4) al 1.25%
Acido brico al 4%
Hidrxido de sodio al 50%
Hidrxido de sodio al 2.5%
Hidrxido de potasio (KOH) 0.1N, 0.5N
Acido clorhdrico (KOH) 0.5N
Acido sulfrico (H2SO4) cc
Acido sulfrico (H2SO4) 0.1 N
Indicador mixto de protenas (Azul metileno y Rojo de metilo)
Catalizado de protenas.
Indicador fenolftalena.
60
3.5. EQUIPOS.
Molino manual y mecnico.
Balanza analtica.
Equipo de extraccin directa tipo soxhlet
Equipo destilacin Fraccionada
Equipo destilador de protenas.
Estufa
Mufla.
Bomba de vaco
Equipo destilador intermitente.
Balanza Elctrica.
Tamices normalizados para clasificacin de tamao.
3.6. METODOS
La metodologa que se aplico se desarrollo en 07 etapas. Los mismos que se
muestran en el cuadro 02.
I ETAPA: Se caracterizo a la materia prima mediante: Medidas biomtricas de los
frutos de Schinus molle L., anlisis fsico-qumico y la identificacin del eco tipo.
II ETAPA: Se procedi a extraer el aceite esencial de Schinus molle L., determinndose
tambin los rendimientos y los tiempos de extraccin. Obteniendo as el parmetro
optimo de la extraccin.
61
III ETAPA: Se realizo los anlisis fsicos qumicos del aceite esencial obtenido. Con
estos resultados se comparara las caractersticas fisicoqumicas de los compuestos
activos que se obtendrn en la siguiente etapa.
IV ETAPA: Se realizo la destilacin fraccionada para lograr separar los compuestos
-felandreno y D-limoneno que es el objetivo de la investigacin.
V ETAPA: Se caracterizo los compuestos obtenidos en la etapa anterior para conocer
las caractersticas de dichos compuestos.
VI ETAPA: Se realizo los anlisis por cromatografa de gases para saber si los
compuestos obtenidos son puros y corresponden a los compuestos -felandreno y
D-limoneno.
Para la obtencin de sustancias aromticas a partir de la extraccin y fraccionamiento
del aceite esencial de molle (Schinus molle L.), se sigui las operaciones que se
muestran en la figura 01.
62
CUADRO 02: DISEO EXPERIMENTAL
I
II
Caracterizacin de Extraccin del Aceite Esencial:
la Materia Prima:
Identificacin
tipo
Eco
III
Fraccionamiento
de Aceite
Esencial:
Para la obtencin
de los principios
activos:
Medidas Biomtrica
Evaluacin de Rendimientos ptimos y
Parmetros ptimos
-Felandreno
Anlisis
fisicoqumico:
Protena.
Grasa.
Fibra
Ceniza
Carbohidratos
Caracterizacin del Aceite Esencial T1, T3:
Solubilidad en Etanol.
ndice de refraccin a 20 C.
ndice de Ester.
Densidad Relativa.
ndice de Acidez.
Factor A: Grado de madurez
Variable A1: Maduro. Variable A2: Verde.
Factor B: % Humedad
Variable B1: 12%
Variable B2: 14%
A temperatura de
243.5 C
Madurez.
Verde
Maduro
Arreglo Factorial:
2x2 = 04 tratamiento diferentes con 03
repeticiones cada uno.
De los 04 tratamientos se eligi los
tratamientos T1 y T3 con mayor rendimiento
de aceite esencial en diferentes grados de
madurez
FUENTE: [Link].2007
D-Limoneno
A temperatura de
249 C
IV
Caracterizacin
de los principios
activos:
-Felandreno:
Solubilidad en
Etanol.
ndice de refraccin
a 20 C.
ndice de Ester.
Densidad Relativa.
ndice de Acidez.
D-Limoneno:
Solubilidad en
Etanol.
ndice de refraccin
a 20 C.
ndice de Ester.
Densidad Relativa.
ndice de Acidez
De los resultados
se obtuvo el
tratamiento
optimo: T1
V
Almacenamiento
de los principios
activos (sustancias
aromticas) T1 y
T3:
Factores externos a
Controlar durante el
almacenamiento:
Tipo y color de
envase.
Temperatura
Tiempo
Comprobacin de
las sustancias
obtenidas
Siendo el
tratamiento Optimo:
T1
63
FIGURA 01: DIAGRAMA DE FLUJO DE LA OBTENCIN DE SUSTANCIAS
AROMTICAS A PARTIR DE LA EXTRACCIN Y FRACCIONAMIENTO
DEL ACEITE ESENCIAL DE MOLLE (Schinus molle L.)
FUENTE: [Link].2007
64
DESCRIPCION DE LAS OPERACIONES:
RECEPCION DE MATERIA PRIMA: Tiene como objetivo medir la cantidad y
calidad de M.P. en esta operacin se hizo uso de la balanza elctrica de capacidad 10 Kg
y se evalu la madurez organolptica por color.
SELECCIN: Tiene como objetivo separar a la M.P., segn el grado de deterioro o
daos fsicos, se realizo manualmente.
SECADO: Tiene como objetivo eliminar el contenido de agua de la materia prima hasta
obtener un % humedad final para obtener rendimientos ptimos de aceite, se
acondiciono humedad final de 12% y 14% para ello se utilizo para lograr el objetivo
bandejas expuestas a temperatura ambiente con luz solar y se midi la humedad
mediante el determinador de humedad sartorius.
MOLIENDA/TAMIZADO: Tiene por objetivo reducir el tamao de la materia prima
con la finalidad de obtener rendimientos ptimos de aceite, se utilizo para ello un
molino mecnico y adems se realizo el granulado del producto molido con el objetivo
de uniformizar el tamao, se utilizo el tamiz de dimetro N 12
EXTRACCION DEL ACEITE ESENCIAL: Tiene como objetivo obtener el aceite
de la materia prima acondicionada para tal fin, se utilizo el mtodo denominado
destilacin por arrastre por vapor para el cual se hizo uso del equipo que consta de 02
balones, condensador, cuello de cisne, pera de decantacin y flujo de agua,
acondicionndose la materia prima se obtuvo el aceite esencial de molle (Schinus molle
L.)
65
ALMACENADO: El objetivo de esta operacin fue que en un tiempo prudencial de 30
das como mximo a una temperatura de 4 C se tenga disponibilidad de aceite esencial
crudo de molle. Para dar lugar a la siguiente operacin, se utilizo envase de vidrio
transparente y mbar.
FRACCIONAMIENTO: El objetivo de esta operacin es separar los principios
activos del aceite esencial de molle como el -Felandreno, D-Limoneno, se utilizo el
mtodo denominado equipo de destilacin fraccionada, que cont con una columna de
fraccin, baln, cuello de cisne y flujo de agua.
Que para identificar los principios y su pureza se llevo a cabo una cromatografa de
gases, el mismo que se realizo en la Universidad Pontificia Catlica del Per.
66
3.6.1. CARACTERIZACIN DE LA MATERIA PRIMA:
Para la caracterizacin se uso el fruto del Schinus molle L.
a) Identificacin del Eco tipo: Se estableci a que variedad de Schinus molle
L., corresponde la materia prima a utilizar. Mediante identificacin en
laboratorio y referencias bibliogrficas.
b) Medidas Biomtricas: Se determin las medidas biomtricas de los frutos
de Schinus molle L. mediante el uso del vernier.
c) Composicin Qumico Proximal: Se determino de los frutos del Schinus
molle L. mediante las siguientes evaluaciones.
Protenas: Mtodo Kjeldahl, descrito por PEARSON (1982).
Grasa: Mtodo Soxhlet, descrito por PEARSON (1982).
Fibra: Mtodo descrito por LEES (1981).
Ceniza: Mtodo descrito por LEES (1981).
Carbohidratos Por diferencia.
3.6.2. PRUEBAS PRELIMINARES PARA LA EXTRACCIN DEL ACEITE
ESENCIAL
Se procedi a la extraccin del aceite esencial de Schinus molle L.,
determinndose los rendimientos ptimos de extraccin de acuerdo al grado de madurez
del fruto y por destilacin por arrastre por vapor, se aplico los factores y variables de
estudio que se muestran en la figura 02.
67
Donde:
A1: Fruto de Schinus molle L., maduro.
A2: Fruto de Schinus molle L., verde.
B1: 12% de humedad.
B2: 14% de humedad.
Con las variables de estudio se desarrollaron 04 tratamientos:
T1: A1B1: 12% y Fruto Maduro.
T2: A1B2: 14% y Fruto Maduro.
T3: A2B1: 12% y Fruto Verde.
T4: A2B2: 14% y Fruto Verde.
FIGURA 02: FACTORES Y VARIABLES DEL ESTUDIO.
FUENTE: [Link].2007
68
3.6.3
CARACTERIZACIN DEL ACEITE ESENCIAL DE Schinus molle L.
En la caracterizacin del aceite esencial de Schinus molle L., se realiz dos tipos de
determinaciones:
1
DETERMINACIONES FSICAS
1.1 METODO DE LA PREPARACIN DE LA MUESTRA PARA EL ANLISIS
(INDECOPI P319077)
Consiste en agregarle a la muestra sulfato de magnesio anhidro en una proporcin
del 10% en peso del aceite esencial por espacio de 2 horas, a fin de que absorba la
humedad residual que contiene para luego filtrarse y est apta para el anlisis.
1.2 DENSIDAD Y DENSIDAD RELATIVA (INDECOPI P319081)
Se define como la relacin entre la densidad del aceite a 20 C y la de H2O destilada
a 20 C 4 C es d 2020 d 20 smbolos sin unidades, la densidad es la relacin entre el
peso de un volumen dado de aceite esencial y su volumen a 20 C en gr/ml, la densidad
relativa se calcula:
d=
P2 P
P1 P
Donde:
d = Densidad relativa
P = Peso en gramos del picnmetro vaco a 20 C.
P1= Peso en gramos del picnmetro ms agua a 20 C.
P2= Peso en gramos del picnmetro lleno con la esencia a 20 C
69
1.3 NDICE DE REFRACCIN (INDECOPI P319075),
Es la relacin del seno del ngulo de incidencias, al seno del ngulo de refraccin de
un rayo luminoso de longitud de onda determinada, que pasa del aire al aceite
manteniendo su temperatura constante, se procede midiendo el ngulo de refraccin del
aceite esencial manteniendo en condiciones de transparencia isiotropismo, la longitud
de onda de la luz til es de 589.3 nm que corresponde a la lnea de sodio (Na) a una
temperatura de 20 C o en su defecto luz difusa del da, si el equipo est provisto de un
dispositivo compensador.
1.4 DETERMINACIN DE LA SOLUBILIDAD EN ETANOL (INDECOPI
P319084),
Se define como la obtencin de una solucin clara, cuando determinando volumen
de etanol de graduacin conocida es aadida en forma controlada al aceite esencial,
consumo que se apunta, agregndosele luego ms cantidad de ste hasta completar los
10 ml; si aparece turbidez u opanilidad durante estas condiciones se anotarn; as como
el volumen de disolvente a que corresponden:
s=
v
v1
Donde:
S = Solubilidad del etanol
V = Volumen en ml de solucin de etanol a la dilucin conocida necesaria para obtener
una solucin clara.
V1= Volumen ml de aceite esencial
70
2.
DETERMINACIONES QUMICAS
2.1 NDICE DE ACIDEZ (INDECOPI P319085)
Es la cantidad de K(OH) necesario para neutralizar a los cidos liberados contenidos
en 1 gr de esencia. Se introduce la muestra en un dispositivo de saponificacin y se
agrega 5 ml de etanol al 95% (V/V) 5 gotas de fenolftalena, neutralizndose la solucin
obtenida con K(OH) 0.1N hasta que de coloracin rosada que persiste por unos
segundos:
IA =
5.61 (V)
P
Donde:
A = ndice de acidez
V = Volumen en ml de K(OH) alcohlico 0.1N
P = Peso de gramos de la muestra ensayada
2.2 NDICE DE ESTER
Es el nmero de miligramos de K(OH) necesarios para neutralizar los cidos
liberados por hidrlisis de los steres contenidos en 1 gr de aceite esencial.
Se introduce 2 gramos de esencia en un dispositivo de saponificacin conjuntamente
con 25 ml de K(OH) 0.5N y se lleva a ebullicin suave durante 1 hora, luego de enfriar;
se aade 20 ml de agua destilada luego 5 gotas de fenolftalena y se neutralizan la
solucin obtenida con HCl 0.5N, realizar una prueba en blanco:
IE =
28.05 (V1 V)
IA
P
71
Donde:
IE = ndice de Ester
V1= Volumen en ml de HCl usado en la prueba de blanco
V = Volumen HCl usado en la determinacin (ml)
P = Peso en gramos de la muestra tomada
IA= ndice de acidez
3.6.4 FRACCIONAMIENTO ACEITE ESENCIAL DE Schinus molle L.
Es necesario para el desarrollo y ejecucin optima del fraccionamiento del aceite
esencial de Schinus molle L., el armado correcto del equipo de destilacin fraccionada:
1
Monte el aparato de destilacin fraccionada, utilizando un matraz de fondo
redondo de 100 ml. Ponga un poco de grasa en todas las juntas esmeriladas.
2
Ponga en el matraz 50 ml de aceite esencial de Schinus molle L., y dos o tres
trocitos de plato poroso.
3
Haga circular una corriente suave de agua del grifo por el refrigerante,
uniendo la entrada de este al grifo mediante una goma. El agua que sale del refrigerante
por su parte superior se conducir a un desage mediante otra goma.
4 Etiquete y numere tres matraces erlenmeyer pequeos para recoger las
fracciones siguientes:
*
I) 117.50 C
II) 145.03 C
III) Residuo
72
5 Caliente el matraz de forma que el destilado se recoja de una manera continua
a una velocidad aproximada de una gota por segundo. Cambie los matraces colectores
con rapidez a los intervalos de temperatura indicados. Cuando la temperatura alcance
145.03 C interrumpa la destilacin y enfri el matraz de destilacin dejando que gotee
en l, el condensado del cuello.
6
Mida con una probeta graduada los volmenes de destilado obtenido en cada
fraccin as como el del residuo del matraz. Anote los volmenes obtenidos.
7
La fraccin I est formada principalmente por -felandreno y otros
componentes. La fraccin II es una mezcla de D-limoneno y otros compuestos.
8
Deje que el matraz de destilacin vaco se enfre y ponga en l contenido del
matraz II y vuelva a montar el aparato de destilacin. Aada dos o tres trocitos porosos
nuevos y destile de nuevo, aadiendo la fraccin que destile entre 115.50 C al
recipiente I y recogiendo de nuevo en el matraz II la que destile a 145.03 C.
9
Una ve que el matraz de destilacin se haya enfriado algo, vierta el residuo
que quede en el matraz III. Mida de nuevo y anote el volumen total de cada fraccin.
Apunte todos sus datos en el informe.
10 note los resultados.
3.6.5
CARACTERIZACIN DE LAS SUSTANCIAS AROMTICAS
Se identificaron 02 sustancias a las cuales se les realizaron los siguientes
anlisis:
Densidad relativa (INDECOPI P319081).
ndice de Refraccin (INDECOPI P319075).
73
Determinacin de la solubilidad en etanol (INDECOPI P319084).
ndice de Acidez (INDECOPI P319085).
ndice de Ester.
3.6.6
ALMACENAMIENTO DE LAS FRACCIONES OBTENIDAS.
Las sustancias aromticas obtenidas fueron sometidas a factores externos,
controlndose los mismos como: la temperatura, luz solar, Humedad Relativa. La
evaluacin se hizo a las 8:00 a.m., en periodos de 5 das cada uno durante 30 das.
3.6.7
COMPROBACIN DE LAS FRACCIONES OBTENIDAS.
Los anlisis para esta etapa se realizaron en los laboratorios de la Universidad
Pontificia Catlica del Per, Facultad de Qumica. En el cual utilizaron el mtodo de
cromatografa de gases para determinar si los compuestos obtenidos en la anterior etapa
eran los esperados y as poder determinar la eficacia del mtodo de destilacin
fraccionada para la separacin de compuestos en un aceite esencial.
74
IV. RESULTADOS Y DISCUSIN
4.1 RESULTADO DE LA CARACTERIZACION DEL FRUTO DEL Schinus
molle L.
4.1.1
IDENTIFICACIN DEL ECO TIPO DE Schinus molle L.
Se identifico al plantn del cual se obtuvo los frutos los mismos que son:
Nombre Cientfico
Schinus molle L.
Nombre comn
molle
Familia
Anacardiaceae
Se muestra un mapa de localizacin de Schinus molle L., en el Anexo 14, en el
departamento de Ancash.
4.1.2
RESULTADO DE L AS MEDIDAS BIOMTRICAS.
Los resultados de las medidas biomtricas de Schinus molle L., es el producto del
promedio de 10 mediciones. Se muestran en el cuadro 03.
75
CUADRO 03: RESULTADO DE LAS MEDIDAS BIOMTRICAS DEL FRUTO
DE Schinus molle L.
TRATAMIENTO
T1
T1a
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
T2
T1b
T1c
T2a
T2b
T2c
L
(mm)
(mm)
L
(mm)
(mm)
L
(mm)
(mm)
L
(mm)
(mm)
L
(mm)
(mm)
L
(mm)
(mm)
3.4
4.5
4.6
3.4
4.6
4.2
4.6
4.7
4.5
4.4
4.8
4.7
5.1
4.1
4.8
4.8
4.8
4.8
4.8
4.8
3.6
4.2
4.6
4.7
4.2
4.6
4.3
4.4
4.5
4.6
4.8
4.3
4.8
4.8
4.8
4.8
4.8
5.0
4.6
4.8
4.3
4.5
4.6
3.8
3.4
4.2
4.6
4.3
3.9
3.8
4.8
4.8
4.8
4.8
4.8
4.2
4.2
4.5
4.8
4.8
4.2
4.6
4.4
4.5
4.3
4.2
3.8
4.2
3.6
4.6
4.8
4.8
4.8
4.8
5.0
4.6
4.8
4.8
4.6
4.8
3.8
4.5
4.2
3.8
4.7
4.5
4.2
3.8
4.2
4.6
4.8
4.8
4.8
4.8
5.0
4.8
4.8
5.1
4.8
4.8
3.8
4.2
4.5
4.6
4.4
4.6
3.8
4.6
4.4
3.6
4.8
4.8
4.6
4.8
4.8
5.1
4.6
4.8
4.8
4.8
4.29
4.75
4.37
4.75
4.14
4.65
4.24
4.78
4.23
4.85
4.25
4.79
FUENTE: [Link].2007
Segn PAREDES, C.A. (1993), el fruto de Schinus molle L., es una drupa
globosa de unos 4-6 mm de dimetro, en este estudio de investigacin por lo que
observamos en el cuadro 03 obtenemos un rango de 4.25 a 4.81 mm de dimetro que se
encuentra dentro del rango permitido.
4.1.3
RESULTADO DE LA COMPOSICIN QUMICO PROXIMAL DEL
Schinus molle L.
Los resultados de la composicin qumico proximal del Schinus molle L se muestran en
el cuadro 04
76
CUADRO 04: RESULTADO DE LA COMPOSICIN QUMICO PROXIMAL
DE FRUTO Schinus molle L.
MUESTRA
% Humedad
% Grasa
% Ceniza
% Protena
% Fibra
% Carbohidratos (Azcar Reductor)
% Total
T1
13.775
12.36
6.23
9.3428
26.4905
11.3767
100
T3
16.42
14.1825
5.64
7.9462
30.659
2.4623
100
FUENTE: [Link].2007
Los resultados son el promedio de 03 repeticiones. El tratamiento T3 es comparado
con los reportes realizados por Cornejo (1998), debido a que dicho tratamiento es el
que reporta mayor contenido en grasa siendo este de 14.1825%. En el cuadro 05 se
muestran el resultado de la comparacin del T3 con respecto al anlisis representado
en la bibliografa. En el Anexo 01, 02, 03, 04 y 05 se muestran todos los datos para
cada uno de los tratamientos.
CUADRO 05: RESULTADO COMPARATIVO DE LA COMPOSICIN
QUMICO PROXIMAL DEL TRATAMIENTO T3 vs. REFERENCIA
BIBLIOGRFICA
Componentes
Humedad
Grasas
Protenas
Cenizas
Fibras
Azcar Reductor
% T3
16.60
14.1825
9.42
6.36
14.891
11.47
% Referencia Bibliogrfica
18.62
15.47
7.12
7.20
14.70
12.80
Total Componentes
100
100
FUENTE: [Link].2007.
77
Segn CORNEJO (1998), que expresa rangos de humedad de hasta 18.62% en
el estudio 16.60%, Grasas de 15.47% en el estudio 14.1825%, Protenas de 7.12% en el
estudio 9.42%, Cenizas de 7.20% en el estudio 6.36%, Fibras de 14.70% en el estudio
14.891% y Carbohidratos de 12.80% en el estudio 11.47%.
4.1.4
RESULTADO
DE
LAS
PRUEBAS
PRELIMINARES
PARA
LA
EXTRACCIN DEL ACEITE ESENCIAL DE LOS FRUTOS DE Schinus
molle L., DE 04 TRATAMIENTOS ESTUDIADOS T1, T2, T3 y T4.
Al culminar la extraccin del aceite esencial de Schinus molle L., por el mtodo
de destilacin por arrastre de vapor, se obtuvo los datos promedios que se presenta en el
cuadro 06.
CUADRO 06: RESULTADO DE LAS PRUEBAS PRELIMINARES DE LOS
TRATAMIENTOS T1, T2, T3 y T4 DE LA EXTRACCION DEL ACEITE
ESENCIAL Schinus molle L., PARA 100 GR DE MUESTRA.
TRATAMIENTOS
T1
T2
T3
Aceite
Agua Aceite
Agua
Aceite Agua
5.1
201.6
4.97
196.2
3.6
199.0
FUENTE: [Link].2007.
T4
Aceite Agua
3.43 201.6
En el cuadro 06 se observa que la mejor extraccin de aceite esencial se encuentra en el
tratamiento T1 (Fruto maduro con 12% de humedad) y T3 (Fruto verde con 12% de
humedad). En el Anexo 06 y 07 se muestran todos los datos de pruebas preliminares
para cada uno de los tratamientos.
78
En el cuadro 07 se muestran las parmetros ptimos encontrados para los tratamientos
T1 y T3 durante la extraccin del aceite esencial de Schinus molle L.
CUADRO 07: RESULTADO DEL RENDIMIENTO DEL ACEITE ESENCIAL
vs. VOLUMEN DE EXTRACCIN
TRATAMIENTOS
W muestra
T inicial
T final
T recepcin
W aceite
T1
T3
100.007
20.5
90.5
30.835
100.0113
20.67
90.67
31.17
5.1
3.6
FUENTE: [Link].2007.
Segn la FAO, la concentracin de aceite esencial en los frutos de Schinus
molle L, esta en el rango que va desde el 3% hasta los 5%, mientras que en el estudio se
ha encontrado un rango de 3.155% a 4.52% dicho valor se encuentran en el rango
reportado por la FAO. Un equipo de destilacin de arrastre de vapor para laboratorio de
fabricacin Argentina logra un rendimientote hasta 7%, (Anexo 04).
El rango ptimo de extraccin se encuentra para la temperatura final encima
de los 90 C que es la temperatura de ebullicin mxima alcanzada en este sistema de
arrastre de vapor, la temperatura final de recepcin de el extracto debe estar entre 30 a
33 C para lograr la separacin de las dos fases inmiscibles sin correr el riesgo de que la
solucin se emulsifique. En el Anexo 08 se muestran todos los rendimientos y las
condiciones ptimas para cada tratamiento.
79
4.1.5 RESULTADO DE LA CARACTERIZACIN DEL ACEITE ESENCIAL
DE Schinus molle L.
a) PREPARACIN DE LA MUESTRA
Para realizar el anlisis, el aceite este debe estar libre de humedad por lo que se
utiliza sulfato de magnesio anhidro al 10% del peso del aceite.
En el cuadro siguiente se muestra
CUADRO 08: CALCULO DEL PESO DE ACEITE ESENCIAL Schinus molle L.
Volumen del vaso en ml
15
25
50
80
Peso vaso precipitado
69.603
69.603
69.603
69.603
69.603
Peso vaso + aceite
74.090
82.425
90.808
107.347
133.075
Peso de aceite esencial
4.487
12.822
21.205
37.744
63.472
W (MgSO4 + 7H2O
0.449
1.282
2.120
3.774
6.347
FUENTE: [Link].2007.
Para 150 ml de aceite; interpolando los resultados del cuadro 06 se determina
que se necesita 12.4292 gramos de sulfato de magnesio anhidro (MgO4+7H2O), lo que
eliminara el contenido humedad de la muestra.
b) RESULTADO DEL ANALISIS FSICO-QUMICO DEL ACEITE
ESENCIAL Schinus molle L.
Los resultados del anlisis fsico-qumico se muestran en el cuadro 09.
80
CUADRO 09: RESULTADO DEL ANLISIS FSICO-QUMICO DEL ACEITE
ESENCIAL Schinus molle L.
TRATAMIENTO
T1
T3
0.84895
1.47448
0.5
0.25
0.87536
3.44661
Densidad relativa (gr/ml)
ndice de Refraccin
90%
85%
70%
Solubilidad en Etanol
ndice de Acidez (%)
ndice de Ester
0.84899
1.47449
0.5
0.25
0.87536
3.50347
FUENTE: [Link].2007.
En el cuadro 10 se muestran los resultados segn MONTES (1982).
CUADRO 10: RESULTADO DE LA COMPARACIN DEL ANLISIS DEL
ACEITE ESENCIAL Schinus molle L. vs REFERENCIA BIBLIOGRFICA
Anlisis
T1
Densidad Relativa
ndice de Refraccin
Solubilidad Etanol
ndice de Acidez
ndice de Ester
90%
85%
70%
0.84895
1.47448
0.5
0.25
0.87536
3.44661
Referencia
Bibliogrfica
0.8483
1.4745
0.5
0.25
0.87536
3.750
FUENTE: [Link].2007.
Segn Montes (1982), la densidad relativa del aceite esencial de Schinus molle
L., es de 0.8483 en el estudio 0.84895, ndice de Refraccin reportado por el IBIDEN
indico el valor de 1.4745 mientras que en el estudio 1.47448, para la solubilidad en
etanol a: 70%, 85% y 90% no existe diferencia alguna, ndice de acidez reporta el autor
0.87536 y el estudio 0.87536 lo cual indica que es ligeramente menos acido, ndice de
81
Ester 3.750, y en el estudio se obtuvo 3.44661. En el Anexo 09, 10, 11, 12 y 13 se
muestran todos los datos para cada uno de los tratamientos.
4.1.6
RESULTADO DEL FRACCIONAMIENTO DEL ACEITE ESENCIAL
DE Schinus molle L.
Los resultados se muestran en el cuadro 11.
CUADRO 11: RESULTADO DEL FRACCIONAMIENTO ACEITE ESENCIAL
DE Schinus molle L.
145.03
Presin
Destilacin
(mmHg)
30
117.50
30
0.13
D-Limoneno
145.03
30
18.25
-Felandreno
117.50
30
0.02
D-Limoneno
Tratamientos
T1
T3
Temperatura
Destilacin (C)
Volumen (ml)
Componente
identificado
34.34
-Felandreno
FUENTE: [Link].2007.
Los resultados obtenidos se compararon son comparados en el cuadro 12 con datos
segn LOCK (1988).
CUADRO 12: RESULTADOS DE LA COMPARACIN DEL
FRACCIONAMIENTO DE ACEITE ESENCIAL DE Schinus molle L. vs
REFERENCIA BIBLIOGRFICA
Compuesto
T1
Referencia Bibliogrfica
-Felandreno
33.34
34.34
D-Limoneno
0.10
0.14
FUENTE: [Link].2007.
82
Segn LOCK (1988), reporta que la extraccin de la fraccin -felandreno
representa un 34.34% mientras que la investigacin reporta una lectura de 33.34% lo
que significa un 1% menos que la referencia, en tanto para el D-limoneno se reporta
0.10% frente al 0.14% de lo indicado por LOCK (1988).
4.1.7
RESULTADO DEL ANALISIS FSICO-QUMICO DEL
-FELANDRENO.
Los resultados del anlisis fsico-qumico del -felandreno se muestran en el cuadro
13.
CUADRO 13: RESULTADO DEL ANLISIS FSICO-QUMICO DEL
-FELANDRENO
Anlisis Ejecutado
Densidad relativa
ndice de Refraccin
Solubilidad en Etanol
ndice de Acidez
ndice de Ester
90%
85%
70%
TRATAMIENTO
T1
T3
0.8431
0.8442
1.4727
1.4732
0.5
0.5
0.25
0.25
0.8698
0.8683
3.3128
3.3134
FUENTE: [Link].2007.
Los resultados obtenidos de los tratamientos T1 y T3 son poco significativos
por lo que se consideran los resultados del tratamiento T1 en funcin del
resultado del contenido de aceite esencial. El tratamiento T1 es comparado con
la referencia bibliogrfica segn Montes (1982), que se muestran en el cuadro
14.
83
CUADRO 14: RESULTADO DE LA COMPARACIN DEL ANLISIS
FSICO-QUMICO -FELANDRENO DEL TRATAMIENTO T1 vs
REFERENCIA BIBLIOGRFICA
Anlisis fisicoqumico
Densidad Relativa
ndice de Refraccin
Solubilidad Etanol
ndice de Acidez
ndice de Ester
T1
Referencia
Bibliogrfica
0.8431
1.4727
0.8483
1.4745
90%
85%
0.5
0.25
0.5
0.25
70%
0.8698
3.3128
0.87536
3.750
FUENTE: [Link].2007.
Segn MONTES (1982), para el compuesto -felandreno la densidad relativa
es de 0.8483 en comparacin de lo obtenido 0.8431 considerndose diferencia no
significativa , el ndice de Refraccin de la referencia es 1.4745 mientras que para el
tratamiento T1 se obtuvo 1.4745 se considera una diferencia no significativa, para la
solubilidad en etanol al 90% y 85% segn la referencia es de 0.5, 0.25 respectivamente
y en el caso del tratamiento T1 los resultados fueron los mismos. Similar resultados se
obtuvo para el ndice de acidez segn la referencia bibliogrfica indica 0.87536
mientras que para el tratamiento T1 fue 0.8698. El ndice de Ester segn la referencia es
de 3.750 y para el tratamiento T1 se obtuvo 3.3128 encontrndose diferencia
relativamente significativa.
84
4.1.8 RESULTADO DEL ANLISIS FSICO-QUMICO DEL D-LIMONENO.
Los resultados del anlisis fsico-qumico del D-limoneno de los tratamientos T1 y T3
se muestran en el cuadro 15
CUADRO 15: RESULTADO DEL ANLISIS FSICO-QUMICO DEL
D-LIMONENO
TRATAMIENTO
T1
T3
0.8325
0.8358
1.4615
1.4645
0.5
0.5
0.25
0.25
0.8658
0.8632
3.3218
3.3263
Anlisis Ejecutado
Densidad relativa
ndice de Refraccin
90%
85%
70%
Solubilidad en Etanol
ndice de Acidez
ndice de Ester
FUENTE: [Link].2007.
Los resultados obtenidos de los tratamientos T1 y T3 son poco significativos
por lo que se consideran los resultados de los tratamientos del T1 en funcin del
resultado del contenido de aceite esencial. El tratamiento T1 es comparado con la
referencia bibliogrfica segn MONTES (1982), que se muestran en el cuadro 16.
CUADRO 16: RESULTADO DE LA COMPARACIN DEL ANLISIS
FSICO-QUMICO D-LIMONENO DEL TRATAMIENTO T1 vs REFERENCIA
BIBLIOGRFICA
Anlisis fisicoqumico
T1
Referencia
0.8325
1.4615
0.8298
1.4674
90%
85%
0.5
0.25
0.5
0.25
70%
0.8658
3.3218
0.8612
3.3297
Densidad Relativa
ndice de Refraccin
Solubilidad Etanol
ndice de Acidez
ndice de Ester
FUENTE: [Link].2007.
85
Segn MONTES (1982), para el compuesto -felandreno la densidad relativa
es de 0.8298 en comparacin de lo obtenido 0.8325 considerndose diferencia no
significativa , el ndice de Refraccin de la referencia es 1.4674 mientras que para el
tratamiento T1 se obtuvo 1.4615 se considera una diferencia no significativa, para la
solubilidad en etanol al 90% y 85% segn la referencia es de 0.5, 0.25 respectivamente
y en el caso del tratamiento T1 los resultados fueron los mismos similar resultados se
tuvieron para el ndice de acidez segn lar referencia de 0.8612 y para el tratamiento T1
se obtuvo 08658 y el ndice de Ester segn la referencia es de 3.3297 y para el
tratamiento T1 se obtuvo 3.3218 encontrndose diferencia relativamente no tan
significativa.
4.1.9
RESULTADO DE LOS EFECTOS EN EL ALMACENAMIENTO DE
LOS FACTORES EXTERNOS EN EL ACEITE ESENCIAL Schinus molle
L., EN SUS CARACTERSTICAS FSICAS DE COLOR.
Los Efectos de los factores externos (temperatura, HR y Luz) en el almacenamiento del
aceite esencial del Schinus molle L., en sus caractersticas fsicas de color se muestran
en el cuadro 17.
Este aceite estuvo almacenado en envases de vidrio de color mbar por 30 das y se
tom las mediciones a las 8:00 am durante cada 5 das.
86
CUADRO 17: RESULTADO CONDICIONES DE ALMACENAMIENTO DEL
ACEITE ESENCIAL Schinus molle L.
DAS
FACTORES
EXTERNOS
10
15
20
25
30
Temperatura
4.2
4.1
4.6
4.3
4.1
4.0
4.2
HR
45
55
47
46
50
45
42
Luz
Ausencia
Ausencia
Ausencia
Ausencia
Ausencia
Ausencia
Ausencia
Absorbancia
0.052
0.052
0.052
0.052
0.052
0.052
0.052
FUENTE: [Link].2007.
Segn JOHN (1990), los aceites esenciales cambian de color, se oxidan
formando nuevos compuestos complejos, que hacen prcticamente imposible la
separacin de los mismos, para evitar esas reacciones indeseables se deben almacenar
en envases de vidrio oscuro color mbar. En el cuadro 17 se observa que teniendo
temperaturas de refrigeracin con ausencia de luz, HR controlada, no se presentan
cambios significativos en cuanto al color en un periodo de tiempo de 30 das, la
Absorbancia no presenta cambio alguno en su composicin.
4.1.10 RESULTADO DE LOS EFECTOS EN EL ALMACENAMIENTO DE
LOS FACTORES EXTERNOS EN LOS PRINCIPIOS ACTIVOS, EN SUS
CARACTERITICAS FSICAS DE COLOR.
a) -FELANDRENO
Los resultados de las condiciones de almacenamiento del -felandreno se muestran
en el cuadro 18.
87
CUADRO 18: RESULTADO DE LOS EFECTOS EN EL ALMACENAMIENTO
DE LOS FACTORES EXTERNOS -FELANDRENO, EN SUS
CARACTERSTICAS FSICAS DE COLOR.
DAS
FACTORES
EXTERNOS
10
15
20
25
30
Temperatura
4.2
4.1
4.6
4.3
4.1
4.0
4.2
HR
45
55
47
46
50
45
42
Luz
Ausencia
Ausencia
Ausencia
Ausencia
Ausencia
Ausencia
Ausencia
Absorbancia
0.054
0.054
0.054
0.054
0.054
0.054
0.054
FUENTE: [Link].2007.
En el cuadro 18 se observa que teniendo temperaturas de refrigeracin con
ausencia de luz y HR controlada, no se presentan cambios significativos en cuanto al
color en el principio activo -felandreno en un periodo de tiempo de 30 das. La
Absorvancia no presenta cambio alguno durante todo este tiempo de almacenamiento
por lo que no presenta cambio alguno en su composicin.
88
b) D-LIMONENO
Los resultados de las condiciones de almacenamiento del D-limoneno se muestran
en el cuadro 19.
CUADRO 19: RESULTADO DE LOS EFECTOS EN EL ALMACENAMIENTO
DE LOS FACTORES EXTERNOS EN EL D-LIMONENO, EN SUS
CARACTERSTICAS FSICAS DE COLOR
DAS
FACTORES
EXTERNOS
10
15
20
25
30
Temperatura
4.2
4.1
4.6
4.3
4.1
4.0
4.2
HR
45
55
47
46
50
45
42
Luz
Ausencia
Ausencia
Ausencia
Ausencia
Ausencia
Ausencia
Ausencia
Absorbancia
0.057
0.057
0.057
0.057
0.057
0.057
0.057
FUENTE: [Link].2007.
En el cuadro 19 se observa que teniendo temperaturas de refrigeracin con ausencia de
luz y HR controlada, no se presentan cambios significativos en cuanto al color en el
principio activo D-limoneno en un periodo de tiempo de 30 das.
4.1.11 RESULTADO DE LA IDENTIFICACION DE LAS SUSTANCIAS
AROMTICAS
POR
CROMATOGRAFA
TRATAMIENTO OPTIMO T1.
DE
GASES
DEL
89
a) ACEITE ESENCIAL SCHINUS MOLLE L.
Los resultados del anlisis de cromatografa de gases realizado en los laboratorios de la
Universidad Pontificia Catlica del Per se presentan en el cuadro 20 donde se indica la
composicin del aceite esencial Schinus molle L.
CUADRO 20: RESULTADO DE LA COMPOSICIN QUMICA DEL ACEITE
ESENCIAL Schinus molle L., POR CROMATOGRAFA DE GASES DEL
TRATAMIENTO T1
Composicin %
Sustancias
Peso Molecular
Aromticas
12.94
Sabineno
136.40
31.15
136.00
-Felandreno
136.00
0.19
-Felandreno
0.10
Limoneno
136.24
21.81
Terpineno
136.24
4.36
Canfeno
136.67
4.36
Cadineno
204.00
9.16
3-ciclo Hexen
154.00
7.70
1,4,6 Hepta-triene
136.00
FUENTE: LABORATORIO DE [Link].2006
Los resultados obtenidos fueron comparados con referencias bibliogrficas segn
MARTIN (1989) que se muestran en el cuadro 21. Las estructuras de la composicin
del Aceite Esencial del Schinus molle L., se muestran en el Anexo 17.
90
CUADRO 21: RESULTADO DEL ANLISIS CROMATOGRFICO DEL
TRATAMIENTO T1 vs. REFERENCIA BIBLIOGRFICA
Sustancias Aromticas
Sabineno
-Felandreno
-Felandreno
Limoneno
Terpineno
Canfeno
T1
12.94
31.15
0.19
0.10
21.81
4.36
Referencia Bibliogrfica
11.94
30.15
0.21
0.11
20.80
4.35
Cadineno
4.36
4.38
3-ciclo Hexen
9.16
9.15
1,4,6 Hepta-triene
7.70
7.32
FUENTE: LABORATORIO DE [Link].2006.
Segn MARTIN (1989), la composicin del aceite esencial de Schinus Molle L.,
reporta en el cuadro 21, se observa que la composicin del sabineno representa el 12.9%
en el tratamiento T1 mientras que la referencia bibliogrfica seala 11.94% con respecto
a la composicin del -Felandreno para el tratamiento T1 vs. Referencia bibliogrfica
existe 1% de diferencia, para el -Felandreno 0.21 en el tratamiento T1 0.19, en el
limoneno 0.11 en el tratamiento T1 se obtuvo 0.10, en el Terpineno 20.80 en el
tratamiento T1 se obtuvo 21.81, en el Canfeno 4.35 en el tratamiento T1 se obtuvo 4.36,
en el Cadineno 4.38 en el tratamiento T1 se obtuvo 4.36, en el 3-ciclo Essen 9.15 en el
tratamiento T1 se obtuvo 9.16, en el 1,4,6 Hepta-triene 7.32 en el tratamiento T1 se
obtuvo 7.70.
Lo cual podria deberse a los diferencias climaticas en la cual se cultivo la planta de
Schinus molle L.
91
b) -FELANDRENO
Los resultados cromatogrficos del -Felandreno se muestran en el cuadro 22
CUADRO 22: RESULTADO DE LA COMPOSICIN QUMICA DEL
-Felandreno
Composicin %
Nombre
Peso Molecular
136.00
90
-Felandreno
2
136.00
-Felandreno
8
Otros compuestos
FUENTE: LABORATORIO DE [Link].2006.
Segn MARTIN (1989), la concentracin de -Felandreno debe estar en una
concentracin ms alta que los otros compuestos, para ello observa en el cuadro 21, la
composicin del -Felandreno es de 90%, mientras que del -Felandreno es de 2% y
hay presencia de otros compuestos en un 8%, lo que significa que el compuesto
analizado no es completamente puro.
92
c) D-LIMONENO
Los resultados cromatogrficos del D-limoneno se muestran en el cuadro 23
CUADRO 23: RESULTADO DE LA COMPOSICIN QUMICA DEL
D-FELANDRENO
Composicin %
Nombre
Peso Molecular
94
D-Limoneno
136.24
6
Otros compuestos
FUENTE: LABORATORIO DE [Link].2006.
Segn MARTIN (1989), la concentracin de D-Limoneno debe estar en una
concentracin ms alta que los otros compuestos, para ello observa en el cuadro 22 que
existe la mayor abundancia de D-Limoneno en un 94% con la presencia de otros
compuestos de 6% lo cual nos indica que el compuesto no est en estado puro.
En el Anexo 17 se muestran las grficas cromatogrficas del aceite esencial de molle
(Schinus molle L.), del -Felandreno y de D-Limoneno.
4.2 USOS DE LAS SUSTANCIAS AROMTICAS OBTENIDAS
En la actualidad se le encuentran dando uso en diferentes etapas dentro de la industria
alimentaria, para ello mencionamos algunos de los usos mas comunes dentro de los
mismos.
93
4.2.1
-Felandreno.
Este compuesto al tener el olor idntico al eneldo se utiliza como sustituto de esta planta
por lo que se generalmente se le da uso en:
En carnes: Como condimento en enlatados de carne.
En Sopas: Como condimento.
En Bebidas: Como Aditivo en la preparacin de gaseosas.
En conservas: Como condimento en las menestras y carnes.
4.2.2
D-Limoneno.
Este compuesto tiene el olor idntico al limn por lo que se lo utiliza en la industria
alimentaria para simular el contenido de este, utilizndose en:
En Bebidas: Como Aditivo en la preparacin de gaseosas con olor a limn.
En caramelos: Como Aditivo para la simulacin del olor a limn.
VII. BIBLIOGRAFA
1. Belitz-Grosh. 1982. Qumica de los Alimentos 2da Edicin. ZaragozaEspaa.
Editorial Acribia S.A.
2. Braverman, Joseph. 1980. Introduccin a la Bioqumica de los Alimentos 2da
Edicin. Mxico: Editorial el manual moderno S.A.
3. Braverman, J. 1982. Introduccin a la Bioqumica de los Alimentos; Espaa.
Editorial Omega; Barcelona.
4. Castagnino, J. M. 2000. Electroforesis capilar. Bioqumica, vol.25. No.1-98;
Espaa. Editorial Acribia S.A.
5. Cornejo A. 1991. Plantas y sus Utilidades; Editorial UNSCH p14-15, 1983.
6. Cuya, O. y Lombardi, I. 1998. Influencia del tamao de la semilla en la
germinacin y crecimiento de plntulas de Schinus molle L. Revista Forestal del
Per 18(2); 7-27.
7. Daubert, T.E. 1986. Danner, R.P.; Sibul, H.M.; Stebbins, C.C.: Physical and
Thermodynamic Properties of Pure Chemicals: Data Compilation; Taylor &
Francis; Bristol, PA.
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ANEXO 01: DETERMINACIN HUMEDAD Schinus molle L.
Muestra
T1
T2
T3
T4
T1a
T1b
T1c
T2a
T2b
T2c
T3a
T3b
T3c
T4a
T4b
T4c
W final
45.5995
57.3418
57.531
91.5165
47.0669
79.518
87.39
47.27
57.229
91.572
51.497
58.229
W muestra
5.00
5.01
5.02
5.00
5.00
5.00
5.01
5.00
5.00
5.02
5.01
5.00
W placa vaca
41.30
53.03
47.20
87.20
42.75
75.20
83.20
43.10
53.05
87.32
47.30
54.05
% Humedad
14.01
13.939
13.725
13.67
13.662
13.64
16.37
16.60
16.42
16.49
16.228
16.42
FUENTE: [Link].2006
ANEXO 02: DETERMINACIN DE GRASAS Schinus molle L.
Muestra
T1
T2
T3
T4
T1a
T1b
T1c
T2a
T2b
T2c
T3a
T3b
T3c
T4a
T4b
T4c
W grasa
1.237
1.247
1.222
1.238
1.219
1.257
1.408
1.489
1.477
1.370
1.379
1.401
W final
113.655
107.520
124.399
105.490
106.401
123.630
116.071
107.769
125.793
95.757
115.746
107.219
W muestra
10.010
10.002
10.007
10.010
10.004
10.002
10.015
10.002
10.005
10.026
10.005
10.003
W baln vaco
112.418
96.271
113.171
104.252
95.178
112.372
114.663
96.278
114.312
94.387
104.361
95.815
% Ceniza
12.358
12.471
12.217
12.363
12.189
12.571
14.060
14.891
14.768
13.700
13.665
14.012
FUENTE: [Link].2006.
ANEXO 03: DETERMINACIN DE CENIZAS Schinus molle L.
Muestra
T1
T2
T3
T4
T1a
T1b
T1c
T2a
T2b
T2c
T3a
T3b
T3c
T4a
T4b
T4c
W ceniza
0.06621
0.06525
0.06318
0.0648
0.06225
0.06718
0.05912
0.05818
0.05827
0.05717
0.05924
0.05847
W final
37.9314
43.743
38.278
57.9928
54.2915
37.3046
34.5127
47.3188
35.998
49.365
40.9122
40.9122
W crisol
37.8872
42.6210
37.1820
57.9438
53.2017
36.1853
33.436
46.2375
34.8926
48.2518
39.8204
53.2815
W muestra
1.0466
1.0563
1.0329
1.0678
1.0275
1.0521
1.0176
1.02312
1.04711
1.0562
1.0326
1.0432
% Ceniza
6.3262
6.1770
6.081
6.3679
6.0358
6.385
5.8097
5.687
5.565
5.413
5.737
5.605
FUENTE: PROPIA. [Link].2006
ANEXO 04: DETERMINACIN DE PROTENAS Schinus molle L.
T1
MUESTRA
T2
T3
T4
T1a
T1b
T1c
T2a
T2b
T2c
T3a
T3b
T3c
T4a
T4b
T4c
0.1005
0.1016
0.1023
0.1016
0.1003
0.1005
0.1007
0.1009
0.1010
0.1001
0.1007
0.1009
0.2
0.2
0.2
0.2
0.2
0.2
0.2
0.2
0.2
0.2
0.2
0.2
Gasto H2SO4
1.28
1.27
1.29
1.28
1.28
1.28
1.12
1.11
1.12
1.11
1.12
1.11
% Nitrgeno
1.5045
1.4744
1.4780
1.5020
1.5075
1.5045
1.2790
1.2689
1.2758
1.2727
1.2790
1.2626
9.4031
9.2150
9.2375
9.3763
9.4219
9.4031
7.99
7.931
7.970
7.9545
7.9940
7.8915
W muestra
Gasto H2SO4
blanco
Protena
Cruda (factor
6.25)
FUENTE: [Link].2006.
ANEXO 05: DETERMINACIN DE FIBRA Schinus molle L.
T1
MUESTRA
T2
T3
T4
T1a
T1b
T1c
T2a
T2b
T2c
T3a
T3b
T3c
T4a
T4b
T4c
W fibra
0.525
0.531
0.528
0.5354
0.5291
0.5341
0.6142
0.6136
0.6121
0.6132
0.6140
0.6138
W fibra + papel
1.3019
1.2964
1.3011
1.3002
1.2932
1.2994
1.3791
1.3774
1.3764
1.3785
1.3802
1.3796
W papel filtro
0.7769
0.7654
0.7731
0.7648
0.7641
0.7649
0.7649
0.7638
0.7643
0.7653
0.7662
0.7658
W muestra
2.0029
2.0018
2.0014
2.0018
2.0031
2.0021
2.0018
2.0015
2.0012
2.0009
2.0003
2.0001
% Fibra
26.212
26.526
26.368
26.746
26.4141
26.677
30.682
30.6570
30.587
30.645
30.6954
30.689
FUENTE: [Link].2006.
TIEMPO
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
70
75
80
85
90
95
100
105
110
115
120
125
ANEXO 06: EXTRACCIN ACEITE ESENCIAL Schinus molle L., Tratamientos T1 y T2
MUESTRA
T1
T2
T1a
T1b
T1c
T2a
T2b
T2c
Aceite
Agua
Aceite
Agua
Aceite
Agua Aceite Agua Aceite Agua Aceite
Agua
0.7
0.5
0.4
0.4
0.3
0.3
0.3
0.2
0.2
0.2
0.2
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
5.1
6.1
6.8
7.1
7.6
8.1
8.3
7.9
8.3
7.9
7.9
8.1
8.4
8.3
8.8
7.9
8.8
8.4
8.4
8.4
8.5
8.1
8.3
8.5
8.4
7.5
200.8
0.7
0.5
0.4
0.4
0.4
0.3
0.3
0.3
0.2
0.2
0.2
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
5.3
6.4
6.7
7.5
7.9
8.2
8.4
8.8
8.6
8.8
7.9
8.1
8.4
8.5
8.2
7.9
8.2
8.4
8.2
8.4
8.2
8.4
8.5
8.3
8.4
6.4
201.7
FUENTE: [Link].2006.
0.6
0.5
0.4
0.4
0.3
0.3
0.3
0.2
0.2
0.2
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
4.9
6.6
7.2
7.8
8.2
8.3
8.1
8.5
8.1
8.5
7.5
8.7
8.5
8.2
7.8
8.3
8.5
7.8
8.6
8.0
8.3
8.6
8.0
8.2
8.4
7.5
202.2
0.8
0.5
0.4
0.4
0.3
0.3
0.3
0.2
0.2
0.2
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
5.1
6.6
6.6
8.2
7.8
8.1
8.4
8.5
7.8
8.5
7.5
8.7
7.8
8.2
8.3
8.5
8.5
8.3
8.6
8.1
8.3
8.6
8.2
7.9
8.2
7.2
192.8
0.8
0.5
0.4
0.4
0.3
0.3
0.2
0.2
0.2
0.2
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
5.0
6.5
7.0
7.8
8.1
8.4
8.2
7.8
8.2
8.3
7.9
8.1
8.4
8.5
8.2
7.9
8.3
8.4
8.2
8.4
8.3
8.4
8.5
8.3
8.4
7.2
193.7
0.9
0.5
0.4
0.3
0.3
0.2
0.2
0.2
0.2
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
4.8
6.6
7.2
7.8
8.2
8.3
8.1
8.5
8.1
8.5
7.5
8.7
8.2
7.8
8.3
8.5
8.5
7.8
8.6
8.0
8.3
8.6
8.0
8.2
8.4
7.5
202.2
TIEMPO
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
70
75
80
85
90
95
100
105
110
115
120
125
ANEXO 07: EXTRACCIN ACEITE ESENCIAL Schinus molle L., Tratamientos T3 y T4
MUESTRA
T3
T4
T3a
T3b
T3c
T4a
T4b
T4c
Aceite
Agua
Aceite
Agua
Aceite
Agua Aceite Agua Aceite Agua Aceite
Agua
0.4
0.3
0.3
0.3
0.2
0.2
0.2
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
3.7
6.2
7.4
7.8
8.1
8.3
8.2
8.1
8.3
7.9
8.2
8.1
8.4
8.3
8.8
7.9
8.8
8.4
8.4
8.4
8.5
8.1
8.3
8.5
8.4
6.8
202.6
0.4
0.3
0.3
0.2
0.2
0.2
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
3.5
6.5
7.0
7.8
8.1
8.4
8.2
7.8
8.2
8.3
7.9
8.1
8.4
8.5
8.2
7.9
8.3
8.3
8.4
8.2
8.4
8.3
8.4
8.5
8.4
7.2
201.7
FUENTE: [Link].2006.
0.4
0.4
0.3
0.2
0.2
0.2
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
3.6
6.1
6.8
7.0
7.6
8.1
8.3
7.9
8.3
7.9
7.9
8.1
8.4
8.3
8.8
7.9
8.8
8.4
8.4
8.4
8.5
8.1
8.3
8.5
8.4
7.5
192.7
0.4
0.3
0.3
0.2
0.2
0.2
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
3.5
6.5
7.0
7.8
8.1
8.4
8.2
7.8
8.2
8.3
7.9
8.1
8.4
8.5
8.2
7.9
8.3
8.4
8.2
8.4
8.3
8.4
8.5
8.3
8.4
7.2
201.7
0.4
0.3
0.3
0.2
0.2
0.2
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
3.5
6.5
7.0
7.8
8.1
8.4
8.2
7.8
8.2
8.3
7.9
8.1
8.4
8.5
8.2
7.9
8.3
8.4
8.2
8.4
8.3
8.4
8.5
8.3
8.4
7.2
201.7
0.4
0.3
0.3
0.2
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
3.3
6.6
6.6
8.2
7.8
8.1
8.4
8.5
7.8
8.5
7.5
8.7
7.8
8.2
8.3
8.5
8.5
8.3
8.6
8.1
8.3
8.6
8.2
7.9
8.2
7.2
201.4
ANEXO 08: CONDICIONES DE EXTRACCIN ACEITE ESENCIAL Schinus molle L.
MUESTRA
W muestra
T inicial
T final
T recepcin
W aceite
T1a
T1
T1b
T1c
T2a
T2
T2b
T2c
T3a
T3
T3b
T3c
T4a
T4
T4b
T4c
100.0090
100.0095
100.0167
100.0022
100.0061
100.0058
100.0043
100.0075
100.0035
100.0020
100.0065
100.0053
21
90
30
20
91
32
21
90
30
20
91
31
2
90
30
21
91
32
21
91
31
20
90
30
21
91
31
21
91
32
20
90
31
21
91
32
4.58
4.76
4.40
4.58
4.49
4.31
3.32
3.14
3.23
3.14
3.14
2.96
FUENTE: [Link].2006.
ANEXO 09: DENSIDAD RELATIVA ACEITE ESENCIAL Schinus molle L.
MUESTRA
T1
T2
T3
T4
T1a
T1b
T1c
T2a
T2b
T2c
T3a
T3b
T3c
T4a
T4b
T4c
W picnometro vacio
38.8186
38.8185
38.8247
38.8186
38.8187
38.8185
38.8212
38.8188
38.8187
38.8189
38.8185
38.8186
W picnometro + agua
87.3995
87.3993
87.4118
87.3991
87.3996
87.3994
87.3994
87.3993
87.3995
87.3992
87.3996
87.3994
W picnometro + aceite
80.0635
80.0632
80.0634
80.0627
80.0638
80.0631
80.0630
80.0629
80.0628
80.0630
80.0631
80.0628
W agua
48.5809
48.5808
48.5871
48.5805
48.5809
48.5809
48.5782
48.5805
48.5808
48.5803
48.5811
48.5808
W aceite
41.2449
41.2447
41.2387
41.2441
41.2451
41.2446
41.2418
41.2441
41.2441
41.2441
41.2446
41.2442
D relativa
0.84889
0.84899
0.848876
0.84898
0.84899
0.84899
0.84898
0.84898
0.84898
0.84899
0.84898
0.84898
FUENTE: [Link].2006.
ANEXO 10: NDICE DE REFRACCIN ACEITE ESENCIAL Schinus molle L.
MUESTRA
T1
T2
T3
T4
T1a
T1b
T1c
T2a
T2b
T2c
T3a
T3b
T3c
T4a
T4b
T4c
Repet 1
1.47450
1.47448
1.47448
1.47446
1.47447
1.47448
1.47446
1.47448
1.47450
1.47448
1.47448
1.47450
Repet 2
1.47448
1.47446
1.47446
1.47445
1.47446
1.47446
1.47450
1.47450
1.47448
1.47450
1.47446
1.47448
Repet 3
1.47447
1.47445
1.47450
1.47446
1.47448
1.47450
1.47448
1.47448
1.47446
1.47448
1.47450
1.47448
Promedio
1.47448
1.47446
1.47448
1.47446
1.47447
1.47448
1.47448
1.47449
1.47448
1.47449
1.47448
1.47449
FUENTE: [Link].2006.
ANEXO 11: SOLUBILIDAD EN ETANOL ACEITE Schinus molle L.
MUESTRA
T1a
Etanol
90%
Etanol
85%
Etanol
70%
T1
T1b
T1c
T2a
T2
T2b
T2c
T3a
T3
T3b
T3c
T4a
T4
T4b
T4c
1:2
1:2
1:2
1:2
1:2
1:2
1:2
1:2
1:2
1:2
1:2
1:2
1:4
1:4
1:4
1:4
1:4
1:4
1:4
1:4
1:4
1:4
1:4
1:4
FUENTE: [Link].2006.
ANEXO 12: NDICE DE ACIDEZ ACEITE ESENCIAL Schinus molle L.
MUESTRA
T1a
T1
T1b
T1c
T2a
T2
T2b
T2c
T3a
T3
T3b
T3c
T4a
T4
T4b
T4c
W
muestra
Gasto
KOH
(0.1N)
0.8972
0.8973
0.8973
0.8972
0.8972
0.8972
0.8972
0.8973
0.8972
0.8972
0.8972
0.8973
0.14
0.14
0.14
0.14
0.14
0.14
0.14
0.14
0.14
0.14
0.14
0.14
IA
0.87539
0.87529
0.87529
0.87539
0.87539
0.87539
0.87539
0.87529
0.87539
0.87539
0.87539
0.87529
FUENTE: [Link].2006.
ANEXO 13: NDICE DE ESTER ACEITE ESENCIAL Schinus molle L.
MUESTRA
T1a
T1
T1b
T1c
T2a
T2
T2b
T2c
T3a
T3
T3b
T3c
T4a
T4
T4b
T4c
W muestra
Gasto HCl
Gasto Blanco
IA
1.0051
1.0015
1.0026
1.0015
1.0015
1.0045
1.0035
1.0025
1.0036
1.0042
1.0053
1.0025
20.02
20.02
20.03
20.02
20.03
20.03
20.02
20.02
20.03
20.02
20.03
20.02
20.18
20.18
20.18
20.18
20.18
20.18
20.18
20.18
20.18
20.18
20.18
20.18
0.87539
0.87529
0.87529
0.87539
0.87539
0.87539
0.87539
0.87529
0.87539
0.87539
0.87539
0.87529
IE
3.50272
3.60598
3.32591
3.60589
3.32581
3.31326
3.59696
3.60152
3.31702
3.59384
3.30993
3.60152
FUENTE: [Link].2006.
616
8860000N
8870000N
8880000N
8890000N
8900000N
8910000N
8920000N
8930000N
8940000N
Ruta
624
622
100
500
Departamental
Vecinal
100000E
Aeropuerto
Tunel
Capital Provincial
Capital Distrital
Pueblo
Puente
110000E
130000E
515
CHULLHUAY
eb
rad
a
Qu
104
ari
Ta
mb
014A
YAPACALLAN
OYOS
TUQUILLO
632
PUERTO HUARMEY
612
PAY PAY
001N
150000E
552 QUINCHAN
559
170000E
PUNTA COLORADO GRANDE
HACIENDA SANTA ROSA
a
ad
br
ue
n
a
an
Sh
Quebrada Murpa
180000E
PUNTA BERMEJO
GRAMADAL
560
Quebrada Jaupac
HACIENDA MARIA CRISTINA
HUAMBA
108
108
190000E
505
PUENTE FORTALEZA
MAL PASO
NIVIN
PIRA
CORAY
106
POCOR
HUANCAR
MALVADO
106
210000E
640
HUAYTO
POMAY
ALPAS
220000E
COCHAS
106
641
CASAVIEJA
CHUQUINA
PAMPACHACRA
CAHUALLIN
UTCUYACU
PUMA HUAIN
003N
PACHACOTO
POSADA
MINA MADRE DE DIOS
LAGUNA MASHACOCHA
567
567
CHURUN
PUENTE PARCO
SHIQUI
638
CATAC
BUENOS AIRES
PATACANCHA
COLLGAPUNCO
TRANCA
SAN NICOLAS
COPA
643
CUCHILLAS
645
240000E
RINAU PATA
CURCUY
CORIMANTA
CARHUAPAMPA
HUANRI
RAJAN
PARIAHUARA
106
MAYUSH
ACO
PIMACHE
250000E
CARHUAYOC
SAN LUIS
CONIN
CHUHUAYTA
CUTACANCHA
AQUIA
FLORIDA
260000E
CARA
JUITO COCHA
COPA
TUMAC
CAJATAMBO
TACTABAMBA
HUACRA HUAIN
8980000N
8860000N
8870000N
8880000N
8890000N
8900000N
8910000N
8920000N
8930000N
8940000N
8950000N
8960000N
8970000N
8820000N
8830000N
8840000N
8850000N
LA UNION
HIGIN
SUSUCOCHA
8990000N
RAPAYAN
PORVENIR
HUACCHIS
YANAS
VISCAS
9000000N
SANTIAGO ANTUNEZ DE MAYOLO
UNIVERSIDAD NACIONAL
TURPA
JAHUACCOCHA
PALLPA
HUARASILLO
PINRA
LA LIBERTAD
HUALHUAS
9020000N
9030000N
9040000N
9050000N
9060000N
9070000N
9080000N
9090000N
9100000N
9110000N
310000E
Prov.
HUARAZ
REVISADO/APROBADO
TESIS
PLOTEO
Ronald Julian Gamarra Macedo
RESPONSABLE
Ronald Julian Gamarra Macedo
TOPOGRAFO
CTAR - ANCASH
01
FECHA
2007
ESCALA
INDICADA
Dist.
HUARAZ, INDEPENDENCIA
LOCALIZACION DE SCHINUS MOLLE L.
PLANO
UBICACION
Depto.
ANCASH
FACULTAD DE INGENIERIA DE INDUSTRIAS ALIMENTARIAS
TESIS: OBTENCION DE SUSTANCIAS ROMATICAS
POR FRACCIONAMIENTO DEL ACEITE ESENCIAL
DEL MOLLE ( Schinus Molle L.) Y USOS
106A
PUQUIAN
270000E
NANIS
MANGAS
106
TAURIPOM
POCPA
CUNCUSH
MATACANCHA
ISPAC
PAMPAHUAY GRANDE
MAHUAY
LLAMAC
PACLLON
HUARANCALLO
300000E
PUENTE TINGO
PAMPACANCHA
HUALLANCA
ABRA YANASHALLA
ANDACHUPA
PUNTA HUAYI
BUENAVISTA
HACIENDA HUAYI
TRANCA
QUERO
POMAPATA
GORGORRILLO
LLACLLA
PUENTE PAMPLONA
CONCHOC
CANIS
003N
HUANSALA
HDA. PALMAR
MINA HUANSALA
LLAYRE
CALANNIOC
YACUPAMPA
BOLOGNESI
JOCANCA
HUASTA
PAPU
CORPANQUI
TICLLOS
ROCA
LLAULLINA
YACRAC RUMI
LAGUNA SHAGUANGA
COLLACHICO
MINA PACHAPAQUI
PUENTE CALICANTO
RACRA CHACA
PACHE
PACARENCA
PACHAPAQUI
AYASH
LAGUNA ANTAMINA
MINAS ANTAMINA
562
USHNO HUAIN
TACTA
ILLAHUASI
HUANCAYOC
CASHAPATA
SAN JUAN
PAUCAS
HUACACHI
CONTAN
SAN PEDRO DE CHANA
CONIN
VIOC
YUNGUILLA
ANRA
PIUROC
CASCAY
UCO
MARNE
PUENTE MARNE
VILCABAMBA
CHOCCHI
PONTO
RAMBRAN
VILCABAMBA
PUENTE CHASCHAN
HUACAYBAMBA
CHINGAS
LAGUNA CONIN
PALCA
VICHON
HDA. MASHRA
HUANQUIN
PICHCARAGRA
ISCOCOCHA
SUYAN
DESAGUE
LLIPA
MINA LIPA
TAMBILLO
SAN MARCOS
SAN ANTONIO DE QUISPATA
LIMA
PUENTE CAHUA
TUNAS
566
CARCAS
CAJAMARQUILLA
CUARTEL CORRAL
OCROS
ACAS
TUCO
HUACHIS
QUILLO
QUECAS
CHUPAN
HUAYTUNA
HUARI
QUIRUCANCHA
CHIQUIAN
CACHI HUARANAN CUCHO
UPAPAMPA
MAYOCANCHA
TACRA
ROLLO
MINA SANTON
CAMPAMENTO YANAMARCA
SANTIAGO DE CHILCAS
646
COCHCO PAMPA
MINA EL DORADO
HUAYLILLAS CHICO
230000E
PIEDRA HUECA
HUAYACOCHA
HUANCHAY
RINCONADA
643
643
644
HUALLAC
CAMAPUICHQUI
USHCU RAGRA
RODEO GRANDE
MILLPO
LLIHUAN ARHUE
ARHUAY GRANDE
CHAVIN DE HUANTAR
CAMPAN
TAMBILLOS
597
YARACYACU
UCHUPATA
ACCHAS
HDA. GANTO
MATEC
PUENTE POMACHACA
SUCCHA
CHUYO
OLAYAN
MACHAC
HDA. ROTA
MACHCAS
YURAYACO
CARHUASCANCHAPATAC
HUANTAR
ANYANGA
HDA. GUESALIA
MALLAS
CARHUA
ACZO
CHAHUARCON
COTO
SAN JUAN DE RONTOY
JUPAYCOCHA
RAHUAPAMPA
MASIN
HUAYOCHACA
CAJAY
COLCAS
CHINCHAS
YACYA
CRUZ POMACHACA
HUARI
ACOPALCA
PURHUAYPAMPA
HUAMANTANGA
LAGUNA PURUHUAY
CHACCHO
290000E
HUANUCO
280000E
MACCHAR
CARY
LLAMELLIN
MIRGAS
QUERORAGRA
TULLOUCRO
ILLAURO
CASA BLANCA
MOJON
TUCO
VISTA ALEGRE
SHINUAC
VADO PATA
LLAMACA
PARAS GRANDE
JAROC
DURAZNO
ANDAS PAMPA
CHIHUAN
QUENHUARAGA
HUAMPARAN
HACIENDA CRUZ CANCHA
PAMPA HUAY
CONOCOCHA
VISTA ALEGRE
CUNOC
OCROS
CASHACOTO
643
VISTA ALEGRE
BELLAVISTA
LUSGA
PAMPAS CHICO
COCHA PAMPA
QUISUA CANCHA
CARHUAC
CONGAS
LACCHAS
UMAS
CARPA
HACIENDA HUAYTO
PUSHAN MINA
HUAYLLACAYAN
YAMOR
HUAROSHIMPA
CAJACAY
ICHOCA
270000E
[Link]
PALMADERA
TUNEL DE KAHUISH
TUCTOPAMPA
PONTO
LINDERO
FDO. DESPENSA
MINA JIRCA
MINAS HUAYCHO PAMPA
MALQUIBAMBA
HACIENDA TINCOC
ICHICHUANUCO
ANTARRAGA
566
105
YANAMARAY
HDA. PUMPA
SINTA RAGRA
HUACLLA PUQUIO
SALAPAMPA
AURINJA
PAMPA CANCHA
CAPILLA CANCHA
LAGUNA QUEROCOCHA
cu
TICAPAMPA
MEMBRILLO
CHOQUE
PARAPACO
LA UNION
MIRAMAR
MARAVILLA
VINDOC
YUMPE
BUENAVISTA
JARACHACRA
ALIZO
CHURAP
RAQUIA
CHOPAC
HDA. PURUS
RECUAY
PARCO
COLCA
POSADAPAMPA
SAN LUIS
SAUCEPAMPA
UTUTUPAMPA
CHACAS
RECUAY
MARCA
COLQUIOC
LLAMARUMI
CHIMU
FUNDO ESPACHIN ALTO
641
CHURURO
MOGOTE
ALONSO
CHAUCAYAN
CHAMANA
PACAR
HUAMANCAY
PITEC
HUAQUION
CHINCHIPI
UNCHOS
HDA. JANCO
CABRACANCHA
VENTANILLA
TOMA PAMPA
TAPACOCHA
HUAYLLAPAMPA
HUAQUISH
CHASQUITAMBO
COY COY
SUPE
JULQUILLAS
SHURAC
HUASPOC
TUPUC
COTO
JABOM
anya
uam
JULCAN
H
ada
MINA SANTA ELENITA
MINA CARMELITA
RANTA RAGIA
COTAPARACO
PARIN
TARUGO
br
Que
003N
PARIAPATA
544
MINA SAN SALVADOR
LAGUNA UTUTO
CHINCHO
YAUYA
ISHANCA
YANAPAMA
UTUSH
PUENTE TOMA
OCOPAMPA
VESUBIO
OLLEROS
545
HUANCAPETI
HDA. COLLARACRA
QUINUA PAMPA
HDA. RINCONADA
ACO
SAN NICOLAS
COLLAHUASI
CAMPAMENTO
TARUGO
JARANCOCHA
LLAMA
9010000N
PACOSBAMBA
MUSGA
SOCOSBAMBA
VISCACHA
ASUNCION
HUALLCOR
MACASHCA
ACOCHACA
PAMPASH
CHINILLA
PUENTE ACOCHACA
AJUSHARADO
YUPA
ICHOCA
LOS PINOS
CENTENARIO
MINA BOLICHE
ARO CANCHA
MALLQUI
AIJA
LLACLLIN
HUERTAS
HUARIPATA
HUANCHA
611
CUNYA
SAPCHA
MAYUSH
ORUM
UCROS
PAMPAMSH
RANCA
SANACHGAN
SISCO
260000E
MCAL. LUZURIAGA
PISCOBAMBA
9020000N
ULLUCUYOC
HUARAUYAPAMPA
PACAJIRCO
SOCOS
C. F. FITZCARRALD
PARIA
MONTERREY
SECSECPAMPA
CHAVIN
HUANTA
LLACMA
PACARISCA
CRUZPAMPA
SHOGA
LLUMPA
ACAPAMPA
CUCHITANAN
9030000NPACHACHIN
HUACHIPATA
CAJAPANCA
COCHA PAMPA
ATASHIN
CASCA
HUINCHOS
LUCMA
YANAMA
MACHCO
MINAS HUAMANC
COLLON
LA TRINIDAD
HERCULES
PUCA RANCA FUNDO
LLANQUI
HUAYLLAN
PUENTE ARMAS
QUINIRANCA
HUAMARIN
QUECHCA
LLAURA HUASHAN
EQUIPARCO
MAQUIA
PACAN
SACSA
PARARIN
FDO. PILCO
MALVAS
SAN ISIDRO
SAN MIGUEL
HUARAZ
PICUC
MARCAT
LA MERCED
SUCCHA
COLCA
ACO
SANTA CRUZ DE RUREK
MONSERRATE
PALMIRA
YACTUN
CARMEN
HUACNA
COCHAPETI
200000E
001N
506
014
500
PIRAUYA
CUCHI
SAN MIGUEL
HUAYAN
PUENTE IRMAN
PARAC
RANCHIN
CORIS
HUACLLAN
AIJA
MINAS HUINAC
ULLUCURAN
MAQUIR
YUPASH
AMAPAMPA
JACHUNAYOC
CUCHILLA CUCHO
SANACHGAN
TULIPAMPA
HUARCABAMBA
te
Tin
da
TORREJIRCA
ra
PUCARUMI
9040000N
eb
Qu
240000E
MANTA
TAYABAMBA
CERA RAGRA
SHIRICUCHO
POMABAMBA
HUARCCUY
QUIRRABAMBA
RANRAIRCA
HUARIPAMPA
HUAPRA
VICOS
CHANCOS
TARICA
ATIPALLAN
STO. TORIBIO
CASHACOTO
TINGO
MESA RUMI
GEHUANCANCHA
TUCAHUACHANAN
COPAGRANDE
HUANTALLON
ANTANRAN
MATAQUITA
TRANCA
SHUMPILLAN
CARGA
HUANCHAYLLO
PULPERIA
JARA URAN
HACHACOTO
HUAMAN CRUZ
CUNYAC
CONDOR SENGA QUINUABAMBA
NUNUMIA
CHOGO
PISCOS
LAJARUMI
PAROBAMBA
CHAQUIQUISUAR
SOTOPAMPA
JAMANA
YANACOLLPA
CONOPA
PARIAHUANCA
JANGAS
YUNGAR
ANTA
HUARAZ
HUARANCAYOC
FDO. PAMPACANCHA
HDA. HUANGRA
ARCASH
URHUAY
AEROPUERTO DE ANTA
CRUZ DE ACERO
CARHUAZ
ANTARACA
HUANCHOYHUAGAY
250000E
PUENTE CUMARO
CHINCHAUCARA
HUASICANAY
YURACYACO
CUSCA
POMABAMBA
HDA. COCHAPAMPA
HUALCAN
MARCARA
RAMPAC GRANDE
ACOPAMPA
ATAQUERO
LLACMAPUCRO
HUAYPAN
PUENTE PUCARAMI
SHILLA
TINGUA
TISHTEC
CARHUAZ
MAYA
YURAC CANCHA
QUISHUAR
TUMPA
YANAMITO
PISCA
UTUPAMRA
HUAYAPON
MITA
HUELLAP CAJAMARQUILLA
LLANAS
HDA. SAN DAMIAN
HUAYUP
QUILCAP
MONTEVERDE
REIPA
PARIAN
PAMPAS
HUANCHAY
SAN JUAN
LA VICTORIA
n
Lla
o
uc
AMASHCA
CARHUAC
TINCO
ATAQUERO
COLCABAMBA
da
ra
GARAY
HUAMBOS
SHUPLUY
CASCAPARA
CHACCHAN
eb
Qu
n
ga
YANPANUCO
YURAC CORRAL
9010000N
9020000N
CUCHO
CAPILLA HUAYCHAO
MANZANA
OCOPON
TUMAC UCRO
CUYOC HUAYLLA
ISMOCRUZ
SHIRACUCHO
CULANDRILLO
HUANCHUCO
UMBE
ICHIC VENTANA
SHIRACAPAMPA
HUILLCA
SANTA RITA
EL POTRERO
QUILLAYACO
TAURICUCHO
9040000N
220000E
230000E
TASHTA LLAMA CORRAL
YANAHIRCA
RAYAN PAMPA
TULLOPAMPA
9050000N
SUYTURUMI
PUCAPATA
ULLULLUCO
SILLA IRCA
HUALSABAMBA
AHIJADERO HDA. STA. CLARA
SECSE PAMPA
HUARACAYOC
LA PAMPA
PACHAVILCA
PAYGA
OGACHAGRA
9060000N
JATUN CRUZ
PATRON CRUZ
RUPAC
INCARAGA
PALO SECO
9030000N
ASUY
LLOJLLAY
OCSHAY
PORVENIR
BELLAVISTA
240000E
CORRAPAMPA
JATUMPATA PARIS
SUCHINAM
HUANGA
SAN PEDRO
CANCHAPATA
PUENTE SAN PEDRO
UCHUGAGAY
YARHUACOCHO
SHULLUCYAYCUCHO
UCHUBAMBA
CAPRI
CHULLIN
YANACOCHA
MOYOBAMBA
HUARCA SHILLCOP
ANCAYOC
ARHUAY
CAJAPAMPA
SACSCHA
MUSHO
RANRAHIRCA
AURA
CUYASH PUNRO
HDA. PANPAN
COCHABAMBA
PAYAC
ATMA
Cru
LAGUNA PARON
YUNGAY
PARIASH
9040000N
210000E
TAPIAC HUAYTA
LLAMACORRAL
nta
a Sa
brad
Que
CHILCA
HDA. HUARCA
MANCOS
COJOPARA
PUEBLO VIEJO
HDA. QUELLAYCANCHA
PARIACOTO
CAYAC
HDA. OCCPACHAN
CHICHIMICURAN
HUANAYOC
MATACOTO
HUASHCAO
ALLMAY
LA HOYADA
PUENTE PUEBLO LIBRE
LA RINCONADA
YUNGAY
HUARMEY
108
CULLASH
RACRAO
FDO. HUACHAC
FDO. YUNGAYPAMPA
COCHAMARCA
CARAZ
LLACTA
QUITARACSA
CUNCASH
STA. CRUZ
PAMPACOCHA
CASHAPA
QUERAL
PATY
YURACOTO
CULLASHPAMPA
ANTASH
ANTIRCAN
ACOYO
QUICAYAN
PISHA
HUANCHUY
POMABAMBA
dro
Ce
HUARIPAMPA
CHOQUECHACA
HDA. JUYPUN
PUEBLO LIBRE
QUEMISH PAMPA
QUIAN
HDA. MATUA
PURUSH
HDA. HUALLME
BELLAVISTA
HUACHO
PAVAS
SHANYAYA
COCHATANCA
CARANCA
COLCAS
CHIHUAN
TINGO DE SIEMPRE VIVAS
CEBADILLA
TUNIRCA
ANDAYMAYO
RECUAY
200000E
PACAYBAMBA
QUICHES
PUENTE SANTO CRISTO
MARIBAMBA
HUAJLOS
PURUGUAY
500
TOGUINGA
HUAYLLABAMBA
SAURAPA SAN JOSE
GASAJPAMPA
SIHUAS
PIRPO
CARHUASA
POMPAY
CRUZ JIRCA
ATAGANA
HUANSHA
COLPA
PACHAPUCRO
MAQUIOC
COLPA PAMPA
SICSIBAMBA
AUYO
CUCHIPA MICUNAN
CHUSPI
CONDORHUASICHICO
HDA. CASA BLANCA
SIHUAS
SACSAY
210000E
MUNDO NUEVO
230000E
9070000N EL POTRERO
220000E
230000E
CONDOR CERRO
HDA. JOCOS BAMBA
PALTAS
CHINGALPO
VADO
9080000N
HDA. JOCOS
HUICHIBAMBA
CASHAMARCA
HUANSHA
HDA. QUILCA
ACOBAMBA
CAHUACHUCO
CASHAPAMPA
CALIA
USHCURUMI
ABRA CAHUACONA
MINA DE CARBON AGUILA
MAMAPAMPA
CHAQUICOCHA
TARICA
UTUTOPAMPA PASACANCHA
HUANCARHUAS
SAN DIEGO
MISME
CONAY
FDO. STO. DOMINGO
HUATA
SUCRE
FDO. HUAMANRARA
RACRACALLAN
LOS CEDROS
os
aL
rad
eb
Qu
COLTAN
SECSI
RAGASH
RELOJ
SAN MIGUEL
220000E
SAN PABLO
HDA. STA. ANA
LA PAMPA
MAYAS VIEJO
COLLOTA
TUCUSH
LA ESPERANZA
MANTA
CUEVA
PAICARAN
TINYACOCHA
CACHONA
PACCHA
PAREDONES
TAMBILLOS
RURA
TICA HUASI
QUINGA
QUINGA ALTO
SAN MATEO
TANYAR
HDA. HUATAULLU
HDA. SAN JOSE
DESEMBOCADURA
HDA. MAYAS
QUEROBAMBA
ATASH
HUAYLAS
CHAMPARA
PUENTE
9040000N
MOLINOPAMPA
HUANHUAMACHE
HDA. EL PATO
HUINO
HUANCUP
HUISHCA
FDO. KINKIN
FDO. PUMACUCHO BAJO
CRUCE CHACAYPUNTA
PUQUIO
HUAYASH
MANZANO
YACUP
HUAYLAS
SHUYO
COLCAP
PACHMA ALTO
RIHUAY
CHIRACACA
HUACANHUASI
ANCORACA
518
TAYABAMBA
CARAPAMPA
KIMAN AYLLU
SANTA ROSA
FUNDO BELEN
GIBRALTAR
HUAMANYACO
HDA. JARACSUCO
CUZMO
QUILLAPAMPA
ISCAP
PAMPAROMAS
PIRHUASH
YANAC
URCON
AGUA SANTA
HDA. LLAMARA
MARAYBAMBA
LANTABAMBA
CEDROS
MONTEGRANDE
200000E
CASANGA
COLLOTA
MINAS SANTA ROSA
9050000N
HUACTA
TUCUMACHAY
YURAC VILCA
HDA. HUARIRCA
YANTACON
CEDRO
MUROSH
UCHUBAMBA
ANTARRAGA
INCOSH
9060000N
HUALCALLANCA
HDA. MIRASANTA
HUALLANCA
STO. TORIBIO
YAUTAN
557
SONSON
EYMAR
QUITACOCHA
ACO
CORONGO
601
CHAMANA
COLCABAMBA
YURACMARCA
TRES CRUCES
LA PAMPA
9070000N
190000E
amba
mab
Que
brad
a To
OTUTO
PIRIRCA
SAN ISIDRO
NUEVA VICTORIA
CUSCA
SAN JUAN
FDO. NINABAMBA
QUICHACA
CULLASHPUNRO
CHACLACAYO
FDO. POCTAC
554
CANTARILLA
TURRIPAMPA
QUERALCOTO
SOLEDAD
RANCAP
YACUCHACANA
QUILLO
POCSO
NAHUIN
CHACO
YUPAN
BAMBAS
FDO. ALLAUCAN
ATACOPAMPA
SAN MIGUEL
556
160000E
PUNTA LAS ZORRAS
PUNTA PACAYAL
PUNTA HUASCACHICA
PUNTA SAN ANTONIO
PUNTA MALA CUESTA
PUNTA CERRO NEGRO
PUNTA NEGRA
PUNTA CABEZA LAGARTO
108
ARENAL
HUARMEY
LA CRUZ
PUENTE HUARMEY
LECHERAL
PUNTA BOQUERON
PUNTA CRUZ DEL CABO
TRES PIEDRAS
LA CALETA DE CULEBRAS
QUITA SOMBRERO
AMPANU
557
MOLINO
CALAVERA GRANDE
PACAE
NIVIN
518
CAJAY
TINCO
PONCAJ
ANTA
PORTADA ALTA
CASA BLANCA
HDA. JAIGUA BAJA
550
104
CHUNYA
CUYASH CUNCA
PULLPAN
HORNILLO
PUENTE UCHU
COSMA
ATOC
SAN PEDRO
CULASHPAMPA
PAMPA LIBERTAD
HDA. PASHPA
HUACAPAMPA
RECUAYBAMBA
TAULI
HUITUTO
STA. ROSA DE HUASHLA
CONCHUCOS
CAYARENGA
109
ORTIGA
LABRASCOCHA
HDA. CHALAN
HUACHUA
MAGISTRAL cha
co
ua
alh
aC
rad
eb
Qu
JONGOS
CORONGO
PUCHUSCANRRA
GUACORCORRAL
ATICARA
PILLIPAMPA
FDO. CASTILLO
ARAHUAY
FDO. ATAQUERO
CACHAP
HUARASACAPE
SACARUMI
SHUTOC
003N
HUANDO
EL INGENIO
CAYNUMACA
CHUNYAY
MACATE
ESCALON
GUADALUPE
SANTA ROSA
HUISCO
POCOS
CALAVERA CHICA
PUQUIO GRANDE
550
PURGATORIO
HUAQUIA
FUNDO SAN LUIS
HUATCUPAMPA
RAYAN
CASMA
PUNTA EL RELOJ
140000E
102
UNCHUCO
507
HDA. SAN JUAN
CONCHAS
CAYAN
QUILCAY GRANDE
HUANROC
BUENA VISTA ALTA
518
HUARCOS
MORO
CAPTUY
507
QUIHUAY
012
COBABIRES
CHORA
LACABAMBA
109
COCHACONCHUCOS
TILACO
109
PALLASCA
QUEROBAMBA
LLAPO
TAUCA
SINSACAPE
SAN JUAN
505
EL PORVENIR
659
SAN BLAS
HDA. TAQUILPON
JIMBE
STO. DOMINGO
505
ANCOS
HUANGAMACA
003N
591
HUAMBO
PUCA
003N
PAMPAS
SENGOR
PUENTE TABLACHACA
HUANDOBAL
003N
NINABAMBA
CABANA
HUALALAY
100
SANTA ROSA
COCABAL
QUERO CANCHA
LAMPARIN
PUNTA MARIN
PUNTA CULEBRAS
VILLA CULEBRAS
PLAYA GRANDE
001N
PAMPA CHUPICA
ALLAYMUCHA
CHUCANA
SHINDOL
UCULBAMBA
TABLACHACA
PALLASCA
CANTA GALLO
BOLOGNESI
003N
UCHUPAMPA
COLMENA
210000E
SAN SEBASTIAN
CHAMANAS
MONGON VIEJO
QUIRUBAMBA
CASGA
PEREJIL
CHUGUR
PACHACHACA
QUEROBAMBITA
PAMPATUCO
MOLLEBAMBITA
QUICHUAS
YUCAPAMPA
SAUCE
SITABAMBA
200000E
CONTADERA
CHINCHANGO
NAUCHABANA
PAMPA LA CASA
VADO DE HONGOS
666
HUAYLLAPON
PERDIZ
SAUCO
HUARA
SAN LUIS
109
ALTO EL CONDOR
609
190000E
ima
120000E
Puerto
Otros
Planta
Mina
Abra
Muelle
PUNTA LOBOS
PUNTA COLORADO
En Proyecto
Caleta
Embarcadero
Puerto Fluvial
NARANJO
CHACHAS
CONOCUARMI
MALLAY
EL CASTILLO
PATASCA
CANTINA
STA. ANA
PUENTE CARRIZALES
100
PUEBLO VIEJO
a An
Sant
ada
uebr
ALGARROBAL
YERBA BUENA
104
ra
nta
Ta
LUPAHUARI
da
ra
b
ue
TREBOL
012
SHUSHUN
SAN JACINTO
CASMA
001N
LA PONDEROSA
PUERTO CASMA
Afirmado
Capital Departamental
SAN JOSE
CERRO BLANCO
EL DOCE
517
180000E
PUYALLI
PAMPA EL CONDOR
109
ALTO DE TAMBORAS
MOLLEPATA
HUACASCHUQUE
506
CAMBALT
SAN FRANCISCO
MINA LA GALGADA
MIRADOR
ESTACION SHACSHA
ESTACION CHUQUICARA
506
SANTA MELANIA TABON
BUENA VISTA BAJA
PUERTO POBRE
SANTA ELENA
PUIRA
014A SECHIN ALTO
630
628
Trocha Carrozable
Sin Afirmar
Toro
GALGADA
506
EL CHOLOQUE
MINA DEL REY CARBON
ESTACION QUIROZ
PUENTE QUIROZ
SANTA ANA
LACRAMARCA
HDA. SALITRE
SANTA
Asfaltado
Superficie de Rodadura
LAS CRUCES
MINAS
Queb
rada Pa
mpa de
l
PUNTA EL HUARO
PUERTO CASMA
626
001N
HUAMBACHO
TORTUGAS
Signos Convencionales
001N
Nacional
104
PUENTE HUAMBACHO
623
LOS CHIMUS
PUERTO SAMANCO
623
LA CUMBRE
620
LEYENDA
P
A
C
I
F
I
C
O
O
C
E
A
N
O
8960000N
PUNTA FILOMENA
SAMANCO
PUNTA LA VIUDA
PUNTA SAMANCO
PUERTO VESIQUE
AEROPUERTO DE CHIMBOTE
BUENOS AIRES
102
LA AGUADA
CASCAJAL DERECHO
SAN FRANCISCO
VILLA MARIA BAJA
001N
618
TRES DE OCTUBRE
FLORIDA ALTA
PUNTA VENADITA
8950000N
LABOR
512
LA RINCONADA
CHIMBOTE
PESQUERA FLORIDA
001N
HDA. SAN JOSE
COISHCO
012 SANTA CLEMENCIA
8970000N
8980000N
PUNTA ISLA BLANCA
8990000N
PUNTA CHIMBOTE
PUNTA CORRAL GRANDE
PUNTA LA BALLENA
PUNTA LOS TRES BINCOS
9000000N
PUNTA LA BARCA
TAMBO REAL
AMAUTA
RINCONADA
012
HDA. SAN DIONICIO
PUENTE SANTA
SANTA
614
001N
TOMA
VINZOS
012
LA LIBERTAD
CAMPO DE ATERRIZAJE
PUNTA INFIERNILLO
PUERTO SANTA
PUNTA SANTA
9010000N
9020000N
9030000N
9040000N
9050000N
9060000N
9070000N
9080000N
9090000N
uam
arca
9100000N
Carh
rada
Queb
170000E
oc
160000E
ay
nc
150000E
ara
Schinus Molle L., del Departamento de Ancash
Hu
da
140000E
bra
130000E
Qu
e
120000E
110000E
up
an
c
100000E
rad
aY
9110000N
8850000N
8840000N
8830000N
8820000N
8810000N
8800000N
a
Cut
Que
brad
a
Qu
eb
odo
da Rec
Quebra
A Trujillo
aL
9010000N
ANEXO N 15: EXTRACTOR DE ACEITES ESENCIALES POR ARRASTRE DE
VAPOR ESCALA LABORATORIO
NOMBRE COMN
ANIS
ORIGEN
Pinpinellaanisum
% DE REND.
COMP. PRINCIPAL
1,5-4
Anetol
0,1-0,2
Geraniol,Citrial
0,1-0,2
Metilchaviclo,
0,5-0,7
Linalil,Esteres
0,3-1
Azuleno,A-bisabol
Frutos
MELISA
Melissaofficinalis
Hojas
ALBAHACA
Ocimunbasilicum
Hojas
BERGAMOTA
Citrusbergamia
Linallol
Cscaradelfruto
MANZANILLA
Matricariachamomilla
Flores
CANANGA
Canangaodorota
0,5-1
CARDAMOMO
Elettariacardamomun
Alcoholes
Sesquiterpenos
Flores
3,6
Cineol,Terpineoles
0,3-0,5
Cinamaldehido
1,5-2,5
Sedanlidos
0,5-0,8
Cinamaldehido
Frutos
CASSIA
Cinnamonuncassia
APIO
Apiumgraveolens
Corteza
Frutos
CANELA
Cinnamomunzeylanicum
Corteza
PIMIENTA
Pipersp.
1-2,7
Monoterpeno
0,5-1,2
Cineol,Borneol
4,5-6
Santaloles
5-7
B-felendreno
0,6-1
Carvona
0,5-1,5
Timol
1-1,5
Carvacrol,Timol
Frutossecos
ROMERO
Rosmarinusofficinalis
Hojas
SANDALO
Santalumalbum
Leo
MOLLE
Schinusmolle
Frutossecos
MENTAAMERICANA
Menthaspicata
Hojas
TOMILLO
Thymussp.
Hojas
OREGANO
Origanumsp. Hojas
ANEXO N 16: GRFICAS DE LOS COMPUESTOS QUE CONTIENE EL
ACEITE ESENCIAL Schinus molle L.
H
HO
H
alpha-Amyrin
O
behenic acid
Ca
OH
camphene
car-3-ene
HO
carvacrol
H
beta-caryophyllene
O
cerotic acid
OH
alpha-copaene
alpha-cumenene
para-cymene
beta-Elemene
OH
HO
O
OH
OH
O
fisetin
OH
HO
OH
O
OH
gallic acid
geraniol butyrate
germacrene D
OH
heptacosanoic acid
alpha-Humulene
O
lignoceric acid
Limonene
(+)limonene
OH
OH
O
linoleic acid
HO
menth-cis-2-en-1-ol
myrcene
nerol hexanoate
OH
octacosanoic acid
octanoic acid methyl ester
OH
O
oleic acid
O
palmitic acid
alpha-Phellandrene
OH
beta-Phellandrene
OH
ortho-ethyl phenol
pinene
alpha-pinene
beta-pinene
OH
HO
OH
O
protocatechuic acid
OH
OH
HO
OH
OH
quercetin
OH
OH
HO
O
OH
OH
O
OH
OH
Quercitrin
OH
HO
OH
OH
O
HO
OH
O
O
O
OH
HO
OH
OH
OH
raffinose
OH
HO
O
OH
O
O
HO
S
O
OH
OH
O
OH
OH
OH
HO
O
HO
Rutin
OH
Sabinene
HO
beta-Sitosterol
alpha-Terpinene
OH
alpha-Terpineol
Terpinolene
tricosanoic acid
D-limonene
OH
ANEXO N 17: GRFICAS CROMATOGRFICAS DEL ACEITE ESENCIAL,
FELANDRENO, DLIMONENO
1. CROMATOGRAFA DE GASES
1.1 ACEITE ESENCIAL DE SCHINUS MOLLE L.
1.2 -Felandreno
1.3 -Felandreno
1.4 D- Limoneno
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