!!"#$%"&'(!"#$"%&!
&'
:C40548,
De las lecturas determinar la media de la diferencia de absorbancia
por minuto ($A/min.) y emplear este valor para calcular la actividad de
la !-amilasa en la muestra. Usar los siguientes factores:
Prueba colorimetrica para !-Amylasa
!-1,4-glucan-4-glucanohidrolasa (EC 3.2.1.1)
)*+,+-./012-(3+4(+,.506+
12218
!"#$%"&
12018
12028
!"'()"&
16 x 5 ml
12 x 10 ml
6 x 50 ml
Estuche M-Test completo
Estuche completo
Estuche completo
#7.8385
La prueba colorimtrica !!"#$%"&'( !"#$"%&!&' utiliza un nuevo
substrato, 2-cloro-4-nitrofenil-maltotrisido (CNPG3). Este substrato
reacciona directamente con la !-Amilasa y no requiere de enzimas de
restriccin. La liberacin de 2-cloro-4-nitrofenol (CNP) del substrato y
el resultante incremento de absorbancia por minuto es directamente
proporcional a la actividad de la !-Amilasa en la muestra.
El mtodo se calibra para el nuevo mtodo4 IFCC, para recibir los
mismos valores de referencia.
!-Amilasa
5 CNPG3 """""# 3 CNP + 2 CNPG2 + 3 G3 + 2 G
!#*+&
;<<;=
16 x 5 ml
&845012-(3+(*+/0.1?8
MES buffer (pH 6,0)
CNPG3
Acetato de calcio
Cloruro de sodio
Tiocianato de potasio
Azida de sodio
;<>;=
12 x 10 ml
;<><=
6 x 50 ml
36 mmol/l
1,6 mmol/l
3,6 mmol/l
37 mmol/l
253 mmol/l
0,095 %
)*+9/*/012-(@(+,./A1413/3(3+(*+/0.1?8
!#*+& es estable sin abrirse hasta su fecha de caducidad cuando son
almacenados de 2...8C.
!#*+& est listo para usar.
Despus de abierto el reactivo es estable por 12 semanas cuando se
almacena de 2...8C y se protege de la luz, y por 4 semanas de
15...25C. Evitar la contaminacin del reactivo.
#5+,.*/,
Suero, plasma heparinizado, orina
No hay prdida de la actividad en 5 das de 4...25C.
'-,/@8
Longitud de onda: Hg 405 nm, (400 - 410 nm)
Paso de luz:
1 cm
Temperatura:
25C, 37C.
Medicin:
Frente a agua (incremento de absorbancia)
Llevar el reactivo y las cubetas a la temperatura deseada. La
temperatura debe permanecer constante ( 0,5C) durante la prueba.
)*80+31B1+-.8
Pipetear en las cubetas
Muestra
!#*+&
Factor de conversin de unidades tradicionales (U/l) en unidades SI
(kat/l):
1 U/l
1 kat/l
= 16,67 x 10-3 kat/l
= 60 U/l
:/*/0.+*D,.10/,(3+(4/(+E+05012Linearidad
La dilucin lmite para ambas temperaturas es $A/min. = 0,300.
Si se excede el lmite de la dilucin, diluir 0,1 ml de la muestra con 0,5
ml de solucin de NaCl (0,9%) y repetir el ensayo usando esta
dilucin. Multiplicar el resultado por 6.
Los datos tpicos de ejecucin de la prueba pueden ser encontrados
en el informe de verificacin, accesible va
www.human.de/data/gb/vr/en-amyli.pdf o
www.human-de.com/data/gb/vr/en-amyli.pdf
)*1-01918(3+(4/(*+/0012-
:8-.+-138,
!#$%&
U/l (25C)
= $A / min x 9864
U/l (37C)
= $A / min x 24820
IFCC: U/l (37C) = $A / min x 10183
25C
37C
20 l
1000 l
10 l
1000 l
Mezclar bien, incubar por 1 minuto a la temperatura deseada. Leer la
absorbancia y al mismo tiempo activar el cronmetro. Leer la
absorbancia exactamente despus de 1, 2 y 3 minutos.
F/48*+,(3+(*+G+*+-01/1,2,3,4
Temperatura
Suero, plasma
Orina espontnea
Orina de 24 horas **
25C
37C
IFCC
120 U/l
600 U/l
450 U/24 h
220 U/l
1000 U/l
900 U/24 h
28-100 U/l
% 460 U/l
% 410 U/l
** Valores calculados
:8-.*84(3+(0/413/3
Pueden ser empleados todos los sueros control con valores de !Amilasa determinados por este mtodo.
Nosotros recomendamos el uso de nuestro suero control de origen
animal HUMATROL nuestro suero de origen humano SERODOS.
"5.8B/.1H/012Proposiciones para la aplicacin de los reactivos sobre analizadores
estn disponibles sobre demanda. Cada laboratorio tiene que validar la
aplicacin en su propia responsabilidad.
I8./,
1. La saliva contiene !-amilasa. Evitar pipetear con la boca y el
contacto del reactivo y puntas de pipeta con la piel.
2. !#*+&, puede llegar a ser amarillento durante la vida til. Eso no
afecta la ejecucin de la prueba a condicin de que el blanco de
reactivo es de < 0,200 A. Si no, !#*+&, no debera continuar de
usarse.
3. !#*+& contiene azida de sodio (0,095%). No ingerirlo. Evitar el
contacto con la piel y membranas mucosas.
%1.+*/.5*/
1. Junge, W.,!"#$%., Clin. Biochem. <<,109 (1989)
2. Hohenwallner, W., J. Clin. Chem. Clin. Biochem. <J, 97 (1989)
3. Junge, W., Waldenstrm, J., Poster presented at 12th IFCC
European Congress of Clinical Chemistry, August 1997
4. Lorentz, K., Clin. Chem. Lab. Med. KL, 185-203 (1998)
5. Ying Foo A., Bais R., Clin. Chim. Acta <J<, 137-147 (1998)
EN-AMYLI
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