DETERMINACIN DE CREATININA (sangre)
INTRODUCCIN
La creatinina es una molcula de deshecho que se genera a partir del metabolismo
muscular. La creatinina proviene de la creatina, una molcula muy importante para la
produccin de energa muscular. Aproximadamente el 2% de la creatina del cuerpo se
convierte en creatinina cada da. La creatinina se transporta desde los msculos por
medio de la sangre hacia el rin. Los riones filtran la mayora de la creatinina y la
eliminan en la orina.
Aunque es una sustancia de deshecho, la creatinina es una prueba diagnstica
esencial, ya que se ha observado que su concentracin en sangre indica con bastante
fiabilidad el estado de la funcin renal. Si los riones no funcionan bien, no eliminan
bien la creatinina y por lo tanto sta se acumula en la sangre. Por esto la creatinina
puede avisar de una posible disfuncin o insuficiencia renal, incluso antes de que se
presenten sntomas. Por eso la creatinina suele figurar en los anlisis de sangre que
se realizan comnmente.
MATERIALES
Pipeta automtica, de ul
Pipeta de 1ml
Muestra (sangre)
Espectrofotmetro
Tubos de ensayo
Cubetas de 1cc
Tubo tapa lila
REACTIVOS
Reactivo Tapa Blanca: solucin de cido pcrico
Reactivo Tapa Azul: solucin de hidrxido
Standard: solucin de creatinina 2 mg/dl.
PROCEDIMIENTO
1. Preparar el reactivo de trabajo, con la mezcla de los reactivos de los frascos de tapa
blanca y azul
2. Centrifugar la muestra de sangre a 3000 rpm por 5 minutos.
4. En tres cubetas de 1cc marcadas B (Blanco), S (Estndar) y D (Desconocido),
colocar:
R. Trabajo
Estndar
Muestra
B
0.5 ml
-
S
0.5 ml
100 ul
-
D
0.5 ml
100 ul
5. Leer la densidad ptica en espectrofotmetro a 492 nm.
6. Leer la absorbancia despus de 30 s de haber puesto la cubeta, esperar a los 90 s y
tomar anotar una nueva medida.
7. Calcular el resultado.
Valores normales de Creatinina:
0,7 1,4 mg/dl Varones
0,6 1,1 mg/dl Mujeres
Los adultos con mucha masa muscular pueden tener ms creatinina en la sangre que
la poblacin normal. Las personas ancianas, por otro lado, pueden tener menos
creatinina en la sangre de lo normal.
RESULTADOS
Absorbancia
Blanco 0,000 nm
Estndar Muestra
30 s 0,608nm 0,527nm
90 s 0,623nm 0,532nm
0,608 0,623 = 0, 015
0,527 0,532 = 0,005
0,005 / 0,015 = 0,333 * 2 = 0,666 Normal
CONCLUSIN
Realizamos una determinacin de creatinina cintica, tomando la cantidad de reaccin a los
30s y a los 90s. Se puede notar, mientras se esperar los segundos, el incremento de la medida
de absorbancia en el espectrofotmetro. Por cual trabajamos junto al espectrofotmetro para
tener una medida ms exacta y, al colocar el reactivo en la cubeta inmediatamente iniciar la
medicin de la absorbancia. El color del reactivo fue azul, una vez actuado sobre la muestra y
estndar result amarillo.
Para obtener el resultado se rest la absorbancia de los 90s menos la de los 30s, una vez
obtenido el resultado se dividi la muestra para el estndar y este resultado se multiplic para
la cantidad conocida del reactivo estndar: 2 mg/dl. As obteniendo el resultado de 0,66 mg/dl,
el cual entra en el rango de la normalidad.
DETERMINACIN DE CREATININA (orina)
INTRODUCCIN
La creatinina es una molcula de desecho que se genera a partir del metabolismo
muscular. La creatinina proviene de la creatina, una molcula muy importante para la
produccin de energa muscular. Aproximadamente el 2% de la creatina del cuerpo se
convierte en creatinina cada da. La creatinina se transporta desde los msculos por
medio de la sangre hacia el rin. Los riones filtran la mayora de la creatinina y la
eliminan en la orina.
Aunque es una sustancia de desecho, la creatinina es una prueba diagnstica
esencial, ya que se ha observado que su concentracin en sangre indica con bastante
fiabilidad el estado de la funcin renal. Si los riones no funcionan bien, no eliminan
bien la creatinina y por lo tanto sta se acumula en la sangre. Por esto la creatinina
puede avisar de una posible disfuncin o insuficiencia renal, incluso antes de que se
presenten sntomas. Por eso la creatinina suele figurar en los anlisis de sangre que
se realizan comnmente.
La determinacin de creatinina es un indicador til para evaluar la funcin glomerular
renal, teniendo en cuenta el prerrequisito que la produccin de creatinina y su
excrecin sean iguales. Esto se cumple en individuos sanos con dieta normal. Las
variaciones intra individuales en estas condiciones son mnimas mientras que las
interindividuales son muy fluctuantes debido a:
Diferencia en la masa muscular y por tanto de produccin de creatinina en
distintos individuos.
Diferencia en la ingesta de carne. Un Kg de carne contiene de 2 a 5 g de
creatina que se convierte en creatinina en el proceso de coccin. Del 15 al
30% de la creatinina excretada diariamente es de origen alimentario.
MATERIALES
Suero para las determinaciones qumicas
Reactivo para la determinacin de creatinina por el mtodo de Jaffe
Reactivo enzimtico colorimtrico para la determinacin de urea
Soluciones estndar de:
o Creatinina
o Urea
Cubetas
Micropipetas
Puntas para micropipetas
Fotmetro
Reloj
PROCEDIMIENTOS
1. Creatinina
a) Tomar dos tubos limpios b) Identificar los dos tubos de la siguiente forma: uno como
St (de estndar) y uno como M (de muestra)
c) Colocar en los dos tubos 1000 l de reactivo de Jaffe y pre incubar por dos minutos
a 37C
d) Programar el espectrofotmetro a 505 nm y ponerlo en cero con blanco de agua
destilada
e) Agregar al tubo St 100 l (microlitros) de solucin estndar de creatinina, activar
inmediatamente el cronmetro y transferir a la cubeta de lectura
f) Introducir la cubeta al espectrofotmetro y a los 30 segundos leer la primera
absorbancia del estndar y anotarla como Ast1
g) Leer la segunda absorbancia del estndar 60 segundos despus de la primera y
anotarla como ASt2
h) Sacar la cubeta del fotmetro, descartar su contenido y golpearla sobre papel
absorbente para eliminar el exceso de lquido remanente
i) Repetir los pasos 5, 6 y 7 utilizando el suero del paciente en vez del estndar,
anotando las absorbancias correspondientes como AM1 (a los 30 segundos) y AM2
(60 segundos despus de la primera lectura)
j) Calcular las diferencias de absorbancia del estndar (St) y de la muestra (M):
ASt = ASt2 - ASt1
AM = AM2 AM1
k) Determinar la concentracin de creatinina utilizando S y M en la ecuacin de
Beer-Lambert
Concentracin de Creatinina en la muestra =AM ASt Concentracin del
estndar
2. Nitrgeno de urea
a) Tomar tres tubos limpios
b) Identificar los tres tubos de la siguiente forma: B (de blanco), St (de estndar) y M
(de muestra)
c) Colocar en los tres tubos 500 l de reactivo enzimtico (reactivo 1) para
determinacin de nitrgeno
de urea
d) Agregar al tubo St 5 l de solucin estndar de urea y mezclar suavemente
e) Agregar al tubo M 5 l de suero del paciente y mezclar suavemente
f) Dejar los tres tubos en reposo por 10 minutos a temperatura ambiente
g) Agregar a los tres tubos 500 l del reactivo de color (reactivo 2)
h) Dejar en reposo los tres tubos por 10 minutos a temperatura ambiente
i) Programar el espectrofotmetro a 600 nm y ponerlo en cero con blanco de reactivos
(tubo B)
j) Leer la absorbancia de la solucin del tubo St y anotarla como Ast
k) Leer la absorbancia de la solucin del tubo M y anotarla como Am
l) Determinar la concentracin de BUN utilizando la ecuacin de Beer-Lambert
Concentracin de BUN en la muestra = AM ASt Concentracin del estndar
RESULTADOS
Valores de creatinina en hombres adultos: entre 0,7 y 1,3 mg/dl
Valores de creatinina en mujeres adultas: entre 0,5 a 1,2 mg/dl
Valores de creatinina en nios: entre 0,2 a 1 mg/dl
CONCLUSIN
Compare los resultados obtenidos con los valores de referencia correspondientes
Profundice, en forma ordenada, sobre las condiciones clnicas en las que se podran
obtener valores fuera de lo normal de cada uno de ellos, estableciendo las causas
probables.
Este examen puede utilizarse como prueba de deteccin para evaluar la funcin renal
y tambin usarse como parte del examen de la depuracin de creatinina.
