Desarrollo e identificacin de metabolitos secundarios en la especie Sambucus nigra.
Development and identification of secondary metabolites in the species sambucus nigra
Autores: Cusgen J, Snchez M.A, Surez S.N.
Corporacin Tecnolgica de Bogot. Tecnologa en Regencia de Farmacia
Bogot. Colombia
Fecha 18/05/2016
RESUMEN
El objetivo principal de la investigacin es el
reconocimiento de los metabolitos secundarios de
las flores de la especie Sambucus nigra, para esto
se utilizaron las tcnicas de Soxhlet para obtener
el extracto etanolico, el arrastre con vapor para
obtener los aceites esenciales. Se realiz una
marcha fitoqumica preliminar utilizando las
pruebas indicadas para la identificacin de cada
metabolito secundario y por ltimo se realizaron
tcnicas cromatograficas como la cromatografa
en capa fina y la cromatografa en columna para
separar los diferentes metabolitos presentes en la
muestra de Sauco. En base a las pruebas
realizadas se pudo determinar que la especie
Sambucus nigra presenta flavonoides, alcaloides
y taninos. Las posibles variaciones en los
resultados pueden ser por varios factores como la
presencia de ms sustancias qumicas que
acompaan el extracto, que tan diluido se
encontraba o factores ambientales que influyeran
en la planta alterando las concentraciones de
metabolitos secundarios al momento de su
recoleccin.
Palabras Clave:
Extracto
etanolico,
techniques were used to obtain the ethanol
extract, the steam stripping to obtain essential
oils. one phytochemical march was performed
using preliminary tests indicated for identifying
each
secondary
metabolite
and
last
chromatographic techniques were performed as
thin layer chromatography and column
chromatography to separate the different
metabolites present in the sample Sauco. Based
on tests it was determined that the species
Sambucus nigra presents flavonoids, alkaloids
and tannins. Possible variations in results may be
due to several factors such as the presence of
more chemicals that accompany the extract,
which was so diluted or environmental factors
that influenced the plant by altering the
concentrations of secondary metabolites at the
time of collection.
Key Words:
Ethanolic
extract,
chromatographic
secondary
metabolites,
techniques,
extraction,
phytochemical march.
INTRODUCCIN
Sambucus nigra o comnmente conocido como
Sauco es una especie del gnero Sambucus,
metabolitos
secundarios,
perteneciente a la familia de las adoxceas. Es un
tcnicas cromatograficas, extraccin, marcha
rbol o arbusto caducifolio de 4-6 m de altura
fitoqumica.
nativos de Europa, noroeste de frica, sudoeste
ABSTRACT
de Asia. Crece en una variedad de condiciones
The main purpose of the research is the
recognition of secondary metabolites flowers
Sambucus nigra species, for this Soxhlet
ambientales, tanto en suelo hmedo como en
seco, primariamente en localidades soleadas.
Aspectos Etnobotnicas
Es una especie utilizada en forma de infusin
Se recolectaron las flores de la especia Sambucus
para curar la tos, enfermedades respiratorias,
nigra del norte de Bogot, Colombia. Se pusieron
enfermedades del estmago, como laxante,
sobre
enfermedades el hgado y del rin. til como
directamente
antiviral, especialmente para los resfriados.
semanas hasta que estuviera completamente seca.
(Imagen 1).
Extraccin de metabolitos secundarios
Taxonoma
Maceracin: el material vegetal fue depositado en
Sambucus: nombre genrico que deriva de la
un recipiente de vidrio al cual se le adiciono
palabra griega sambuke de un instrumento
etanol al 95% hasta que este cubriera todo el
musical hecho de madera de saco y un nombre
material, se agito constantemente y se dej as
usado por Plinio el Viejo para un rbol
durante 5 das, se filtr el producto final y las
posiblemente relacionado con el saco.
muestras separadas se llevaron al material para
Reino: Plantae;
trabajar con ellas.
Subreino:
Tracheobionta;
papel
peridico
se
expusieron
a los rayos del sol durante dos
Divisin:Magnoliophyta; Clase:Magnoliopsida;
Montaje de soxhlet: el material vegetal fue
Subclase: Asteridae; Orden:Dipsacales; Familia:
envuelto en un papel de filtro, el cual se ubic en
Adoxaceae; Gnero: Sambucus; Especie: S. nigra
la camisa para soxhlet, se arm el montaje
Descripcin y clasificacin taxonmica
teniendo cuidado con la ubicacin de la entrada y
Arbusto o arbolito ramificado que mide unos 6-
salida de las mangueras por las cuales circulaban
10 m de altura. Tallos leosos de color marrn
agua, sustancia que nos produca el vapor y era
grisceos, con aspecto suberoso. Existe una
esencial para la contabilizacin de sifones.
segunda corteza llamada lber que aparece al
Arrastre por vapor: La muestra vegetal se
rasgar superficialmente la planta.
introdujo en un baln de tres bocas y se realiz la
Hojas: Compuestas, pinnadas de hasta 12 cm. De
tcnica con agua para la produccin de vapor el
5 a 7 foliolos ovados y dentados.
cual nos desplaz el aceite esencial a un
Flores: Olorosas agrupadas en inflorescencia
Erlenmeyer.
llamadas corimbos, muy aplanadas de hasta 20
Identificacin de metabolitos secundarios
cm de dimetro. Corola de color crema de unos
El extracto etanolico (muestra concentrada) se
5mm. Con ptalos en forma de estrella.
diluyo en ter de petrleo para luego desarrollar
Frutos: Carnosos en drupa que cuelgan hacia
las pruebas de identificacin con los reactivos
abajo en la madurez, de color negro. En el
correspondientes para cada metabolito.
interior contienen 3 semillas diminutas. (Imagen
Separacin por mtodos cromatograficos
2).
Se eligi el tipo de solvente de la fase mvil de
MATERIALES Y MTODOS
acuerdo a su polaridad y el tipo de planta a
Muestra vegetal
trabajar.
Cromatografa en capa fina: Se sembr cada
la planta como las interacciones de estas con los
muestra en la placa de aluminio y posteriormente
reactivos.
se introdujo en la cmara cromatrogafica que
Observamos cambios fsicos en las reacciones
contena la fase mvil. Se agreg el revelador de
que
vainillina a cada placa y en una plancha de
flavonoides y alcaloides, ya que observbamos
calentamiento se obtuvieron los resultados.
cambios de coloracin, precipitados, turbidez,
Cromatografa en columna: Se us como fase
entre otros.
estacionaria Silica en gel y como fase mvil ter
Los taninos precipitan en presencia del cloruro
y cloroformo. La muestra vegetal se adiciono en
frrico por el ataque producido por el ataque
la silica y mediante la ayuda de la fase mvil y la
producido por el ion cloruro al hidrogeno del
gravedad esta se fue desplazando hacia abajo.
grupo hidroxilo provocando una ruptura de
Posteriormente al llegar la muestra a la boquilla
enlace y la unin del grupo fenoxido al hierro
de la pipeta Pasteur se recogen 4 gotas en 5 tubos
(Formacin del complejo).
eppendor cada uno.
Con la prueba de shinoda las reacciones de
RESULTADOS
DISCUSIN
DE
indicaban
la
presencia
de
taninos,
coloracin son caractersticas segn el tipo de
RESULTADOS
ncleo de los flavonoides. De esta manera, en las
Extraccin de material vegetal:
chalconas,
Por el mtodo de extraccin por arrastre de vapor
coloracion. En isoflavonas da coloracion amarillo
no se obtuvieron los resultados esperados ya que
rojiza. Flavanonas es azul magenta, violeta, rojo.
no se obtuvo ninguna muestra de aceites
Flavanonoles rojo a magenta. Flavonas y
esenciales.
flavonoles amarillo a rojo.
Por otro lado la extraccin de metabolitos fue
Lo
exitosa por el mtodo de soxhlet ya que se
Leucoantocianidinas
observ que despus de trascurrido 5min sucede
flovafenos son tintes rojos e insolubles los cuales
el primer sifn (Es el periodo en que se llena y se
son polmeros de las leucoantocianidinas.
desocupa el cartucho), al transcurrir un minuto se
Para la identificacin de taninos y flavonoides las
observaron 2 sifones lo cual determina que en 1
pruebas pueden presentar falso positivos para
minuto se obtuvo 2 extracciones de muestra ya
taninos o flavonoides o alguna de estas dos
que la extraccin existe cuando se realizan los
pruebas ya que los taninos son polmeros de un
sifones.
flavonoide llamado antocianidina.
Marcha fitoqumica preliminar
Las tcnicas de reconocimiento son basadas en la
que
auronas,
sucede
isoflavononas
en
es
el
la
no
hay
ensayo
de
formacin
de
Los resultados obtenidos en el laboratorio no
capacidad que tienen los alcaloides en estado de
fueron los indicados en la gua, sin embargo esto
sal (extractos cidos), de combinarse con el yodo
no quiere decir que los resultados sean errneos
y metales pesados como bismuto, mercurio,
sino que esto pude deberse a factores directos con
tugsteno formando precipitados; estos ensayos
preliminares se realizan con reactivos la solucin
compuestos polares se retiene ms tiempo en la
de yodo-yoduro de potasio (Reactivo de Wagner),
columna.
mercurio tetrayoduro de potasio (reactivo de
Conclusiones
Mayer), tetrayodo bismuto de potasio (reactivo
Se comprob que el montaje ms sencillo
de Dragendorff).
y eficaz es el de Soxhlet para la
Adems, la prueba de Ehrlich nos dio positivo lo
extraccin de metabolitos secundarios.
cual nos puede indican la presencia de cumarinas,
La extraccin por arrastre de vapor para
pero de acuerdo la literatura tambin pudiera
aceites esenciales dio nula por diferentes
indicar la presencia de alcaloides por lo que este
factores relacionados con la muestra.
reactivo se puede tomar como un falso positivo.
La Sambucus Nigra presenta en sus
Tcnicas cromatograficas
flores flavonoides identificados con las
En la cromatografa de capa fina se pudo
pruebas de Shinoda y leucoantocianidina,
identificar el mejor solvente a usar en la fase
taninos con cloruro frrico, acetato de
mvil, los cuales fueron ter y cloroformo en
plomo, gelatina-sal y alcaloides con los
proporcin 2.5:2.5. Ambos son dos lquidos
reactivos de Valser, Mayer, Dragendorff,
voltiles pero el ter es un compuesto polar y el
Schleiber y Wagner.
cloroformo uno apolar. La vainillina fue usada
como revelador que acta identificando grupos
corteza de la Sambucus Nigra y lo que se
pero se tom proporcin 10:10 para llegar a los 2
la
fase
estacionaria
analiz fueron las flores.
presentes en ella son apolares. Mientras que los
realizar
la
en mayor proporcin el componente
retencin bajo, es decir bajan mucho ms rpido
de la columna ya que los metabolitos secundarios
debe
disolvente adecuado, el cual debe estar
Los compuestos apolares tiene un tiempo de
Sambucus nigra baja de manera rpida a travs
se
cromatografa en capa fina para elegir el
absorbente colocada en el interior de la columna.
tiempo en ella. Es por ello que la muestra del
Antes de realizar la cromatografa en
columna
por la columna, no se retienen durante mucho
propiedades
identificar ya que se encuentran en la
mvil ya elegida en la cromatografa e capa fina
como
las
son
metabolitos restantes no se pudieron
Para la cromatografa en columna se us la fase
denominada
de
secundarios
farmacolgicas de la planta y los
peso molecular estructuras altamente polares.
slida insoluble con la fase mvil y que es
metabolitos
caractersticos
glucsidos, compuestos no voltiles de elevado
mL que deban interactuar con la silica, sustancia
Estos
menos polar.
Las manchas reveladas por vainillina
corresponden a grupos glucsidos en la
planta del sauco.
Bibliografa
Anlisis y evaluacin Fitoqumica de
Len .T Girbes y P, J. (s.f.). Tema 7:
los metabolitos secundarios. [En lnea].
taninos.
Disponible
en:
de inters. Centro tecnolgico nacional
analisis-fitoquimica-metabolitos-
de la conserva y alimentaci
Sauco. [En lnea]. Disponible en:
Nuez C.E. 2007. Extracciones con
equipo soxhlet
Captulo 4: tcnicas de extraccin y
2016.
concentracin.
Sambucus nigra. [En lnea]. Disponible
Universidad
en:
distancia.
Botanical online. (2015). Propiedades del
saco. Botanical online SL.NUEZ, J.
A. (2015). Propiedades farmacologicas
del Saco. Plantas para curar. (s.f.).
Siembra de saco. Plantas medicinales.
R.M., R. (1997). Anlisis fitoqumico
preliminar.
Armenia,
Colombia:
Universidad del Quindo.
Robles, J. J. (20 de Noviembre de 2012).
scribd. Recuperado el 18 de Abril de
2016,
de
https://es.scribd.com/doc/113961008/ME
TODOS-DE-ANALISIS-DEALCALOIDES-doc
Farmacognosia.
Edicin. Acribia, Zaragoza.
nigra. Recuperado: 15 de mayo del 2016.
2001.
Recuperado: 15 de mayo del 2016.
https://es.wikipedia.org/wiki/Sambucus_
J.
Fitoqumica. Plantas medicinales. 2
co.html. Recuperado: 15 de mayo del
Bruneton,
metabolitos-secundarios.shtml.
http://www.etnobotania.com/2012/01/sau
Agro Waste. Extraccin de compuestos
http://www.monografias.com/trabajos85/
secundarios/analisis-fitoquimica-
S.Martnez- Flrez, J.-G. L. (2002). Los
flavonoides: propiedades y acciones
antioxidantes. Espaa: Universidad de
Arrastre
nacional
con
abierta
vapor.
y
