CIDOS NUCLICOS
PRCTICA UNIDAD 2
EXTRACCIN DE MATERIAL GENTICO EN CLULAS
I.
INTRODUCCIN.
El ADN se denomina cido desoxirribonucleico,
es un polmero formado por dos hebras
complementarias de desoxirribonucletidos, que
se unen antiparalelamente.
Su funcin principal, es el almacenamiento de
informacin gentica en todas las clulas.
En organismos procariotas, se encuentra en
forma libre a nivel citoslico, y en eucariotas
puede encontrarse en el ncleo y en otros
organelos como mitocondrias y cloroplastos.
Existen diferentes variedades de ARN o cido ribonucleico: mensajero, ribosmico,
de transferencia, ARN nucleares y citoslicos pequeos. La estructura qumica del
ARN se conforma por polmeros de ribonucletidos, con funciones especficas que
van desde la transmisin de la informacin gentica hasta la
catlisis
de
reacciones.
Las clulas poseen los dos tipos de cidos nucleicos, mientras que los virus, por no
ser clulas, nicamente poseen uno otro de ellos.
En la presente prctica, se pretende extraer ADN de diversos tejidos, utilizando
procedimientos y sustancias para aislarlo de los dems componentes celulares.
II. OBJETIVOS.
Al finalizar el laboratorio el estudiante estar en la capacidad de:
1. Extraer ADN de las clulas a travs de medios fsicos y qumicos.
2. Identificar la presencia de ADN en diferentes tejidos.
3. Explicar el procedimiento de extraccin de ADN y su utilidad en Biologa.
III. MATERIALES.
APORTADOS POR GRUPO
APORTADOS POR LA UNIDAD
DE ESTUDIANTES
DIDCTICA
taza de hgado (res o pollo)*
10 ml de alcohol isoproplico
taza de arvejas frescas*
fro 3 pipetas Pasteur de 3ml
taza de fresas*
1 varilla de vidrio
de levadura
2 beakers de 200 ml
granulada* 2 tubos de
10 ml de solucin tampn refrigerada a
ensayo grandes 4 filtros
4C
de papel para caf 1
tabla de picar
1 sobre de ablandador de
carne
Guantes
descartables
* Cada
grupo
deber
seleccionar uno de los tejidos sealados.
IV. CUESTIONARIO PRELABORATORIO.
Nota: Resulvalo ANTES de ingresar al laboratorio
1. Qu es un tejido?
2. Cul es el material gentico de una clula y en qu lugar se localiza?
3. Cules son las bases nitrogenadas, clasifquelas?
4. Cules son las azcares presentes en los cidos nucleicos?
5. En qu se diferencian un nuclesido de un nucletido?
6. Cmo se forman los cidos nucleicos?
7. Qu importancia tienen los cidos nucleicos en las clulas?
V. PROCEDIMIENTO.
A.
PREPARACIN DEL MATERIAL BIOLGICO.
El grupo de estudiantes debe preparar el material biolgico seleccionado
previamente en casa, licundolo con 30 ml de agua fra, durante 30 segundos a
velocidad mxima. Debe mantenerlo en refrigeracin hasta utilizarlo en la
prctica.
1.
Para qu necesita triturar el material vegetal o animal?
2. Por qu se recomienda que el agua est fra?
B.
PREPARACIN DE LA SOLUCIN TAMPN.
Esta solucin es elaborada por el personal de la sala de preparacin de la
Unidad Didctica de Biologa de la siguiente manera:
Se mezclan 240 ml de agua mineral, 3 gramos de sal, 10 gramos de bicarbonato
y 10 ml de jabn lquido, y se dejan reposar en refrigeracin a 4C por 3 horas.
3.
C.
Cul es la funcin de la solucin tampn en el proceso de extraccin del
material gentico?
EXTRACCIN DEL MATERIAL GENTICO.
C1. En un tubo de ensayo grande, coloque con ayuda de
un gotero descartable, 5 ml del pur de tejido y 10 ml
de la solucin tampn con otro gotero.
C2. Agtelo vigorosamente por 2 minutos.
C3. Djelo en reposo por 10 minutos
C4. Coloque el filtro para caf en la parte superior de un
beaker de 250 ml y vierta el contenido de la mezcla de
tejido licuado-tampn
Figura 1. Mezcla de tejido licuadotampn
4.
Por qu debe filtrar dicha
mezcla?
Figura 2. Filtrado de mezcla de tejido licuadotampn
D.
COLECCIN DEL MATERIAL GENTICO EXTRADO.
[Link] 5ml del filtrado con un gotero descartable y colquelo en un
tubo de ensayo.
[Link] 1 pizca de ablandador de carne.
[Link] 5ml de alcohol isoproplico fro deslizndolo con mucho
cuidado por las paredes del tubo de ensayo.
[Link] reposar el tubo verticalmente y observar la formacin de un anillo
blanco en la porcin media del tubo.
5.
Cul es la razn de utilizar ablandador de carne?
[Link] el tubo de ensayo se observan dos fases, a qu material corresponde, lo
observado en:
La porcin superior:
La porcin inferior:
VI. REFERENCIAS.
Becker, W.,L. Kleinsmith & J. Hardin. (2007). El Mundo de la Clula. 6. ed.:Pearson
Educacin, Madrid.
Cooper, G. (2004). La Clula. 2. ed.: Marbn S.L., Madrid. 685 pp.
Karp, G. (2004). Biologa Celular y Molecular. Mc Graw-Hill Interamericana, Mxico.
746 pp.
Lodish, H., A. Berk, L. Zipursky, P. Matsudaira, D. Baltimore & J. Darrell.
Biologa Celular y Molecular. 4 ed.: Mdica Panamericana. 1084 pp.
(2002).
Manual de Laboratorio de Biologa Celular y Molecular. (2010). Facultad de Ciencias
Mdicas. USAC.
NCLEO CELULAR
PRCTICA UNIDAD 2
I.
INTRODUCCIN.
Todas
las
clulas
necesitan
una
membrana plasmtica, citoplasma y ADN
como material gentico. En las clulas
eucariotas el ADN est en un ncleo,
rodeado por una envoltura formada por
dos bicapas lipdicas.
El ncleo de la clula eucariota humana
contiene varias molculas de ADN, si
estas se pudieran desenrollar y unir extremo con extremo, alcanzara unos 2 m de
largo.
Una de las funciones ms importantes que realiza el ncleo, es mantener el
material gentico protegido de las reacciones metablicas dainas que ocurren en
el citosol; por ejemplo, las que producen radicales libres. Adems permite controlar
el paso de molculas como las enzima involucradas en la sntesis de las diferentes
variedades de ARN, que luego se utilizarn para la sntesis de protenas en el
citosol.
Para hacer tangible el aprendizaje del ncleo celular, se observarn clulas de
cebolla (clulas vegetales) y clulas hematolgicas humanas (clulas animales),
para hacer una comparacin del tamao, la forma y la coloracin de sus ncleos.
II. OBJETIVOS.
Al finalizar la prctica el estudiante ser capaz de:
1. Comprobar la presencia de ncleo en clulas eucariotas utilizando microscopio
ptico.
2. Establecer semejanzas y diferencias morfolgicas entre ncleos de clulas
animales y vegetales.
3. Asociar las caractersticas morfolgicas del ncleo
especializacin celular y la funcin que desempean.
con
el
proceso
de
III.
MATERIALES:
APORTADOS POR GRUPO
DE ESTUDIANTES
Una cebolla
pequea 1 bistur
con mango Cinta
adhesiva
1 caja de Porta y cubre objetos
IV.
APORTADOS POR LA UNIDAD
DIDCTICA
Microscopio ptico
compuesto Aceite de
inmersin
Frote de sangre humana teida con
Giemsa
Un frasco gotero de Lugol
CUESTIONARIO PRELABORATORIO.
Nota: Resulvalo ANTES de ingresar al laboratorio
1. Elabore un dibujo del ncleo y sus partes.
2. Describa las siguientes partes del ncleo:
Envoltura nuclear
Poro nuclear
Lmina nuclear
Cromatina
Cromosomas
Nuclolos
3. Qu diferencia existe entre una clula mono nucleada y poli nucleada?
4. Cules son las clulas que forman parte de la sangre?
5. Qu diferencia existe entre las clulas sanguneas polimorfonucleares y
monocitos?
6. Describa el ncleo de las siguientes clulas:
Neutrfilos
Eosinfilos
Basfilos
Linfocitos
Monocitos
Fibras musculares esquelticas
7. Qu clulas de la sangre humana carecen de ncleo?
8. Qu son clulas cenocticas? Investigue un ejemplo.
V.
PROCEDIMIENTO:
A. Observacin del ncleo en clula animal.
1. Observe en el microscopio el frote de sangre humana.
2. Localice los glbulos blancos y observe con objetivo de inmersin:
Indique la forma, dimensin y posicin del ncleo en los diferentes tipos
celulares.
3. Localice las clulas que carecen de ncleo.
4. Dibuje sealando las estructuras observadas y complete el reporte.
B. Observacin del ncleo en clula vegetal.
1. Haga un corte triangular en el centro de la cebolla con el bistur, para
obtener la epidermis de la parte cncava del trocito de catfila.
2. Aplique una gota del lugol sobre la parte central del portaobjetos y coloque
la epidermis de la cebolla, cuidando de que la misma no forme pliegues.
Cubra con el cubreobjetos.
3. Haga sus observaciones con seco fuerte, elabore sus dibujos sealando las
estructuras que observe en el ncleo y complete el reporte de laboratorio.
4. Qu estructuras observa dentro del ncleo?
Preparacin:
Ocular:
Objetivo:
Aumento total:
Descripcin:
Preparacin:
Ocular:
Objetivo:
Aumento total:
Descripcin:
VI.
REFERENCIAS.
Audesirk,T., G. Audesirk & B. Byers. 2008. Biologa la vida en la Tierra. 8. ed.:
Pearson Educacin, Mxico. Becker, W., L. Kleinsmith & J. Hardin. (2007). El
Mundo de la Clula. 6. ed.:Pearson Educacin, Madrid.
Cooper, G. (2004). La Clula. 2. ed.: Marbn S.L., Madrid. 685 pp.
Karp, G. (2004). Biologa Celular y Molecular. Mc Graw-Hill Interamericana, Mxico.
746 pp.
Lodish, H., A. Berk, L. Zipursky, P. Matsudaira, D. Baltimore & J. Darrell.
(2002).
Biologa Celular y Molecular. 4 ed.: Mdica Panamericana. 1084 pp.
