CLONACIN Y PROYECTO GENOMA
Por
Crdenas Freire Marcos Adrin
Ingeniera en Biotecnologa de los Recursos Naturales. Universidad
Politcnica Salesiana
INTRODUCCION
La competencia estimula los
nuevos
descubrimientos,
al
fomentar los restos cientficos. Un
buen ejemplo de esto, lo podemos
observar a travs de la historia y
los diversos esfuerzos que han
hecho los cientficos por encontrar
el mapa del hombre e incluso
manipularlo. Dos grandes avances
se han llevado a cabo en los
ltimos aos, se ha experimentado
la clonacin y se ha descubierto el
Genoma Humano, considerado la
mayor proeza cartogrfica de la
historia.
MARCO TERICO
CLONACION
Es una copia idntica de un
organismo a partir de su ADN) se
puede definir como el proceso por
el que se consiguen, de forma
asexual, 2 copias idnticas de un
organismo, clula o molcula ya
desarrollado. Se deben tomar en
cuenta
las
siguientes
caractersticas:
-
En primer lugar se necesita
clonar las clulas (producto
embrionario), porque no se
puede hacer un rgano o
parte del "clon" si no se
cuenta con las clulas que
forman a dicho cuerpo.
Ser parte de un organismo
ya "desarrollado", porque la
clonacin responde a un
inters por obtener copias
de
un
determinado
organismo, y slo cuando es
adulto se pueden conocer
sus caractersticas.
Por otro lado, se trata de crearlo
de
forma
asexual.3
La
reproduccin sexual no permite
obtener copias idnticas, ya que
este tipo de reproduccin por su
misma
naturaleza
genera
diversidad mltiple.
El primer clon se hizo en una oveja
(Dolly).
Por lo general, los miembros de un
clon
tienen
caractersticas
hereditarias idnticas, es decir sus
genes son iguales, con excepcin
de algunas diferencias a causa de
las mutaciones. Por ejemplo, los
gemelos idnticos, que proceden
de la divisin de un huevo
fecundado nico, son miembros de
un clon, mientras que no lo son
mellizos que se originan a partir de
la fecundacin de dos huevos
independientes. Esta tcnica se
denomina
clonacin
porque
emplea clones de organismos o
clulas. Tiene un gran potencial
mdico y econmico, y es objeto
de
intensas
investigaciones.
Tambin
pueden
producirse
mediante
clonacin
animales
gemelos idnticos. Un embrin en
una fase de desarrollo precoz se
extrae del tero y se divide.
Entonces, cada parte se implanta
por
separado
en
un
tero
sustituto. Algunos mamferos como
ratones y ovejas se han obtenido
de este modo.
Tipos de clonacin
-
Clonacin
naturaleza
en
la
La clonacin es una forma natural
de reproduccin utilizada por
numerosas formas de vida por ms
de 50 milenios por plantas,
hongos, y bacterias, esta es la
forma en que se reproducen las
colonias
clonales,
algunos
ejemplos de estos organismos son
arndano,
avellanos,
Pando,
Cafetero de Kentucky, Myricas y
liquidmbar americano.
-
Clonacin molecular
La clonacin molecular se utiliza
en una amplia variedad de
experimentos biolgicos y las
aplicaciones prcticas van desde
la toma de huellas dactilares a
produccin de protenas a gran
escala.
En la prctica, con el fin de
amplificar cualquier secuencia en
un organismo vivo, la secuencia a
clonar tiene que estar vinculada a
un origen de replicacin; que es
una secuencia de ADN.
o
Transfeccin
Se introduce la secuencia formada
dentro de clulas.
o
Seleccin
Finalmente se seleccionan las
clulas que han sido transfectadas
con xito con el nuevo ADN.
Inicialmente, el ADN de inters
necesita ser aislado de un
segmento de ADN de tamao
adecuado. Posteriormente, se da el
proceso de ligacin cuando el
fragmento amplificado se inserta
en un vector de clonacin: El
vector se linealiza (ya que es
circular), usando enzimas de
restriccin y a continuacin se
incuban en condiciones adecuadas
el fragmento de ADN de inters y
el vector con la enzima ADN
ligasa.
Tras la ligacin del vector con el
inserto de inters, se produce la
transfeccin dentro de las clulas,
para ello las clulas transfectadas
son cultivadas; este proceso, es el
proceso determinante, ya que es
la parte en la que vemos si las
clulas han sido transfectadas
exitosamente o no. Tendremos que
identificar por tanto las clulas
transfectadas
y
las
no
transfectadas, existen vectores de
clonacin modernos que incluyen
marcadores de resistencia a los
antibiticos con los que slo las
clulas que han sido transfectadas
pueden crecer. Hay otros vectores
de clonacin que proporcionan
color azul/ blanco cribado. De
modo, que la investigacin de las
colonias
es
necesaria
para
confirmar que la clonacin se ha
realizado correctamente.
-
Clonacin celular
Clonar una clula consiste en
formar un grupo de ellas a partir
de una sola. En el caso de
organismos
unicelulares
como
bacterias
y
levaduras,
este
proceso es muy sencillo, y slo
requiere la inoculacin de los
productos adecuados.
Sin embargo, en el caso de
cultivos de clulas en organismos
multicelulares, la clonacin de las
clulas es una tarea difcil, ya que
estas clulas necesitan unas
condiciones
del
medio
muy
especficas.
Una tcnica til de cultivo de
tejidos
utilizada
para
clonar
distintos linajes de clulas es el
uso
de
aros
de
clonacin
(cilindros).
De acuerdo con esta tcnica, una
agrupacin de clulas unicelulares
que han sido expuestas a un
agente mutagnico o a un
medicamento
utilizado
para
propiciar la seleccin se ponen en
una alta dilucin para crear
colonias
aisladas;
cada
una
proviniendo de una sola clula
potencialmente y clnicamente
diferenciada. En una primera
etapa de crecimiento, cuando las
colonias tienen slo unas pocas
clulas; se sumergen aros estriles
de poliestireno en grasa, y se
ponen sobre una colonia individual
junto con una pequea cantidad
de tripsina.
Las clulas que se clonan, se
recolectan dentro del aro y se
llevan a un nuevo contenedor para
que contine su crecimiento en
forma natural.
-
Clonacin de organismos
de forma natural
La clonacin de un organismo es
crear un nuevo organismo con la
misma
informacin
gentica
proveniente
de
una
clula
existente. Es un mtodo de
reproduccin asexual, donde la
fertilizacin no ocurre. En trminos
generales, slo hay un progenitor
involucrado.
Esta
forma
de
reproduccin es muy comn en
organismos como las amebas y
otros seres unicelulares, aunque la
mayora de las plantas y hongos
tambin
se
reproducen
asexualmente.
Tambin se incluye la obtencin de
gemelos idnticos de manera
natural. Se considera como una
alteracin espontnea durante el
desarrollo
embrionario,
ignorndose su causa, aunque
existe una correlacin familiar
estadsticamente significativa.
Gemelacin artificial
Este tipo de clonacin consiste en
tomar un embrin de hasta 8
clulas y generar embriones
idnticos preimplantatorios (se
podran
generar
hasta
8
embriones idnticos, uno a partir
de
cada
blastmera).
Las
blastmeras
biopsiadas
del
embrin original se introducen
individualmente o de dos en dos
en una zona pelcida vaca (puede
proceder de otro animal, pues
despus el embrin sale de ella), o
en una cubierta artificial (ZPA), y
de
cada
uno
se
generan
embriones idnticos al original
(clones).
En la pelcula Los nios del Brasil
se explica lo que la ciencia saba
en los aos 80 sobre la clonacin.
La pelcula The 6th Day (El 6 da)
plantea lo que la ficcin del 2000
esperaba de la clonacin para el
2015 en ambiente de crimen.
-
Clonacin teraputica (o
androptica)
La clonacin teraputica, rea en
la que se est investigando mucho
actualmente, no consiste en clonar
personas o crear bebs de
reserva,5 sino tejidos y rganos
que poder trasplantar al paciente
donante
y
curar
as
enfermedades.6 Los diferentes
avances
en
legislacin
internacional
e
investigacin
permiten
la
clonacin
de
determinados tejidos animales y
humanos
con
fines
de
investigacin mdica. Este tipo de
clonacin consiste en fusionar el
ncleo de una clula adulta
(madre o diferenciada) y un
ovocito enucleado, al que se le ha
extrado el ncleo, para crear un
embrin con el que trabajar.
De dicho embrin se pueden aislar
clulas
madre
embrionarias
compatibles con el futuro receptor
del tejido. Las clulas madre se
aislan de la masa celular interna
del embrin clonado una vez
alcanzado el estado de blastocisto.
Estas clulas madre poseen la
misma dotacin gentica que el
paciente del que se tom la clula
adulta y, por tanto, reproducen su
misma dotacin antignica, la
estructura de protenas superficial
de la clula, por lo que se puede
evitar una reaccin de rechazo al
trasplante. Una vez que se han
extrado las clulas madre de la
masa celular interna, se destruye
el embrin clonado.
De hecho, en enero de 2008, se
anunci que se haban creado
cinco embriones clonados a partir
de clulas de piel humana, con
vistas a proporcionar una fuente
viable
de
clulas
madre
embrionarias para el tratamiento
de enfermedades; valindose de la
misma tcnica que dio origen a la
oveja Dolly, cientficos de la
empresa californiana Stemagen
Corporation, con sede en La Jolla,
California,
encabezados
por
Andrew French, han empleado las
clulas de la piel de dos varones
adultos as como los vulos de tres
mujeres jvenes (entre 20 y 24
aos) que se estaban sometiendo
a un tratamiento de fertilidad.7
Adems, en mayo de 2013 la
Universidad de Oregn desvel
que se haban conseguido obtener
mediante
clonacin
clulas
embrionarias humanas. La tcnica
tiene grandes implicaciones en la
medicina regenerativa, ya que se
podran obtener clulas madre de
un embrin en fase de blastocisto
con las que poder regenerar
partes del cuerpo humano del
propio donante sin riesgo de
rechazo durante el trasplante.
Adems, en el ao 2013 se
consigui la clonacin de un
ejemplar de ratn de laboratorio a
partir de una simple gota de
sangre de la cola del ratn
donante, hecho que produjo un
cambio en el panorama de la
clonacin animal, pues esta ha
sido la primera vez que se ha
conseguido clonar un animal sin
necesidad de eutanasiar al animal
donante, que es lo que se vena
haciendo hasta ahora en la
clonacin de animales como por
ejemplo en el caso de la oveja
Dolly.8
-
Clonacin de sustitucin
Un cuarto tipo de clonacin sera
la llamada clonacin de sustitucin
que sera una combinacin de la
clonacin
reproductiva
y
la
clonacin teraputica. En este tipo
de clonacin se producira la
clonacin parcial de un tejido o
una parte de un humano necesaria
para realizar un trasplante.
Clonacin de especies
extintas y en peligro de
extincin
La clonacin de especies extintas,
ha sido un sueo para muchos
[Link] de los objetivos
previstos para la clonacin fue el
mamut lanudo, pero los intentos
de extraer ADN de mamuts
congelados no han tenido xito,
aunque un equipo ruso-japons
est trabajando en ello.
En 2001, una vaca llamada Bessie
dio a luz a un gaur (un bisonte
indio) clonado de Asia, una
especie en peligro, pero el ternero
muri despus de dos das. En
2003, un banteng (tipo de toro)
fue clonado con xito, adems
tambin fueron clonadas con xito
tres fieras de frica a partir de
embriones
congelados.
Estos
xitos han dado esperanzas sobre
la posibilidad de que otras
especies extintas puedan ser
clonadas.
De
cara
a
esta
posibilidad; las muestras de tejidos
del
ltimo
bucardo
(cabra
montesa)
fueron
congelados
rpidamente tras su muerte.
Los investigadores tambin estn
considerando la clonacin de
especies en peligro de extincin
como el panda gigante, el ocelote,
y guepardos.
En 2002, los genetistas en el
Museo Australiano anunciaron que
haban replicado el ADN del Tigre
de Tasmania, extinto hace 65 aos
con la reaccin en cadena de la
polimerasa. Sin embargo en el ao
2005, tuvieron que parar el
proyecto ya que las clulas no se
haban conservado bien.
Uno de los obstculos en el intento
de clonar especies extintas es la
necesidad de mantener el ADN en
perfecto
estado,
muy
bien
conservado.
-
Cmo
Dolly
se
ha
fabricado
La clonacin de Dolly es una
operacin
difcil
y
compleja,
resultado
de
dcadas
de
investigaciones
y
de
experimentaciones en diversos
laboratorios. Ha habido muchos
fracasos y, tambin, el desaliento
de muchos equipos. Intereses
privados
estaban
en
juego.
Adems, es posible que no se
hayan dado a conocer todos los
detalles.
He aqu las principales etapas de
la operacin. En realidad, la mayor
parte son un concentrado de una
serie de subetapas, cada una de
las
cuales
implica
muchas
elecciones,
por
ejemplo,
el
momento
exacto
de
cada
intervencin, la composicin de
unos determinados medios de
cultivo, la sucesin de los gestos
del
experimentador,
los
instrumentos
utilizado.
Los
investigadores escoceses tambin
han obtenido corderos a partir de
clulas de un feto de 26 das
Los
investigadores
escoceses
tomaron, por biopsia, clulas de
glndula mamaria de una oveja
blanca Fin Dorset de seis aos. El
animal estaba en el ltimo
trimestre
de
su
gestacin,
momento en que las clulas
mamarias estn ms diferenciadas
y se multiplican. Las clulas
tomadas se cultivaron in vitro y
luego se colocaron durante cinco
das en un medio de cultivo muy
empobrecido en suero, dieta
rigurosa cuyo efecto es provocar
poco a poco la suspensin
completa del ciclo. Seguidamente,
cada una de estas clulas, en
estado de casi hibernacin, se
introdujo en un ovocito no
fecundado y enucleado de oveja
Scottish Blackface (de cabeza
negra).
Los
ovocitos
se
obtuvieron
quirrgicamente por perfusin de
los oviductos despus de una
estimulacin
ovrica.
En
el
momento de la obtencin, su ciclo
celular qued en suspenso. Los
ovocitos
se
encuentran
naturalmente
en
esta
fase,
llamada metafase II, en el
momento de la ovulacin. A causa
de
la
meiosis,
nicamente
contienen un solo juego de
cromosomas, que forman, en este
momento preciso, una placa casi
plana, excntrica, situada no lejos
del glbulo polar, una pequea
bola que contiene otro juego de
cromosomas y que est destinada
a ser eyectada. Entonces, los
experimentadores aspiraron
la
placa cromosmica, arrastrando
de una sola vez el glbulo polar y
una parte del citoplasma. Los
ovocitos as enucleados, que
haban conservado la mayor parte
de
su
citoplasma,
fueron
transferidos a un medio de cultivo
a 37 C. Se activaron con la
ayuda de un primer impulso
elctrico; luego, y gracias a una
serie
de
nuevos
impulsos
elctricos, cada uno de ellos se
fusion con una clula mamaria de
la oveja donante. La aplicacin de
la corriente elctrica tambin tena
por objeto facilitar el desarrollo de
la nueva clula acabada de formar
(un nuevo embrin).
De esta manera se crearon no
menos de 277 embriones a finales
de enero de 1996. A continuacin,
fueron colocados en el oviducto
ligado
de
diversas
hembras.
Despus de seis das, 247 fueron
recuperados.
Veintinueve
se
haban desarrollado hasta el
estado de mrula o de blastocito y
fueron transferidos al tero de 13
ovejas
portadoras.
Aparentemente,
tan
slo
un
embrin se desarroll en feto y,
posteriormente, en un cordero
viable que naci el 5 de julio de
1996, al final de una gestacin de
duracin casi normal y con un
peso tambin normal. Dolly no
muestra
ningn
signo
de
anomala. Falta por ver si ms
tarde se presenta algn problema
y si podr procrear normalmente.
Si bien este tipo de experimento
se haban realizado antes en
animales como los ratones, el
inters aument al ser el clonado
un bovino, ya que tienen un mayor
inters econmico. A partir de
embriones recogidos in vivo o por
FIV (fecundacin in vitro), han
nacido ya unos 2.000 terneros
gracias a esta tcnica, sobre todo
en
Estados
Unidos,
aunque
tambin en Francia. Hasta 1992,
los investigadores tuvieron un
ndice de fracasos muy alto con los
mamferos. Algunas anomalas
cromosmicas
inducan
la
suspensin del desarrollo. Muy
pronto, el fenmeno se interpret
como una consecuencia de la
dificultad, en el momento de la
fusin, de sincronizar los ciclos de
la clula donante y de la clula
receptora (citoplasma enucleado).
En la naturaleza, en el momento
de la fecundacin, las clulas se
hallan manifiestamente en fase.
Cmo conseguirlo en laboratorio?
Primero, los cientficos buscaron
los
medios
de
preactivar
qumicamente o elctricamente,
antes de la fusin, el ovocito
enucleado. Un impulso elctrico
induce la liberacin de calcio
intracelular, lo mismo que lo hara
un espermatozoide en el momento
de
la
fecundacin.
La
preactivacin del ovocito permite,
sobre todo al ncleo de la clula
donante, no perder su envoltura
nuclear en el momento de la
fusin.
Este
mtodo
de
preactivacin elctrica se practica
habitualmente desde hace dos
aos en diversos laboratorios.
Cada clula del organismo lleva
todo el material gentico del
individuo.
Durante
la
diferenciacin progresiva que se
produce desde las primeras fases
del desarrollo embrionario hasta el
nacimiento o ms all de l, las
clulas se especializan: slo una
parte de los, aproximadamente,
cien mil genes del individuo se
expresa en cada clula. El resto de
los genes son mudos. Pero qu
significa mudos? La opinin de
que
estos
genes
no
estn
necesariamente
perdidos,
definitivamente paralizados, en
cierta manera muertos, y que sera
posible reprogramarlos, ha sido
una idea que, durante treinta
aos, desde comienzos de la
dcada de 1950 hasta comienzos
de la de 1980, alimentaron
muchos bilogos, para luego,
sbitamente, tacharla de la lista
de posibilidades.
Los que experimentaron con xito
en los batracios desde los aos
1950, tenan esta idea muy
presente. Llevaron a cabo muchos
experimentos tomando clulas de
embriones
cada
vez
ms
desarrollados, e incluso clulas de
animales adultos, para tratar de
producir
con
ellas
animales
viables. Y lo consiguieron, pero
nicamente hasta cierto punto.
Clulas tomadas de renacuajos y
del intestino de ranas adultas,
colocadas en ovocitos enucleados,
produjeron renacuajos. Pero jams,
contrariamente a lo que por un
momento pudo creerse, ranas
adultas.
PROYECTO GENOMA
El Proyecto Genoma Humano
(PGH)
fue
un
proyecto
de
investigacin cientfica con el
objetivo
fundamental
de
determinar la secuencia de pares
de bases qumicas que componen
el ADN e identificar y cartografiar
los
aproximadamente
20.00025.000 genes del genoma humano
desde un punto de vista fsico y
funcional.
El proyecto, dotado con 3000
millones de dlares, fue fundado
en 1990 en el Departamento de
Energa y los Institutos Nacionales
de la Salud de los Estados Unidos,
bajo la direccin del doctor Francis
Collins, quien lideraba el grupo de
investigacin pblico, conformado
por
mltiples
cientficos
de
diferentes pases, con un plazo de
realizacin de 15 aos. Debido a la
amplia colaboracin internacional,
a los avances en el campo de la
genmica, as como los avances
en la tecnologa computacional, un
borrador inicial del genoma fue
terminado
en
el
ao
2000
(anunciado conjuntamente por el
expresidente Bill Clinton y el exprimer ministro britnico Tony Blair
el 26 de junio de 2000), finalmente
el
genoma
completo
fue
presentado en abril del 2003, dos
aos antes de lo esperado. Un
proyecto paralelo se realiz fuera
del gobierno por parte de la
Corporacin Celera. La mayora de
la secuenciacin se realiz en las
universidades
y
centros
de
investigacin
de
los Estados
Unidos, Canad, Nueva Zelanda,
Gran Bretaa y Espaa.
El
genoma
humano
es
la
secuencia de ADN de un ser
humano.
Est
dividido
en
fragmentos que conforman los 23
pares de cromosomas distintos de
la especie humana (22 pares de
autosomas y 1 par de cromosomas
sexuales). El genoma humano est
compuesto por aproximadamente
entre 22500 y 25000 genes
distintos. Cada uno de estos genes
contiene codificada la informacin
necesaria para la sntesis de una o
varias
protenas
(o
ARN
funcionales, en el caso de los
genes ARN). El "genoma" de
cualquier persona es nico.
Conocer la secuencia completa del
genoma humano puede tener
mucha relevancia cuanto a los
estudios
de
biomedicina
y
gentica clnica, desarrollando el
conocimiento de enfermedades
poco
estudiadas,
nuevas
medicinas y diagnsticos ms
fiables y rpidos. Sin embargo
descubrir toda la secuencia gnica
de un organismo no nos permite
conocer
su
fenotipo.
Como
consecuencia, la ciencia de la
genmica no podra hacerse cargo
en la actualidad de todos los
problemas ticos y sociales que ya
estn empezando a ser debatidos.
Por eso el PGH necesita una
regulacin legislativa relativa al
uso del conocimiento de la
secuencia genmica, pero no
tendra
por
qu
ser
un
impedimento en su desarrollo, ya
que el saber en s, es inofensivo.
Antes de los ochenta ya se conoca
la secuencia de genes sueltos de
algunos
organismos,
como
tambin se conocan los genomas
de entidades subcelulares, tales
como virus y plsmidos. As pues,
no fue hasta 1986 cuando el
Ministerio de
Energa (DOE),
concret
institucionalmente
el
Proyecto Genoma Humano (PGH)
durante un congreso en Santa Fe.
El PGH contaba con una buena
suma econmica y sera utilizado
para estudiar los posibles efectos
de las radiaciones sobre el ADN. Al
siguiente ao, en el congreso de
bilogos en el Laboratorio de Cold
Spring Harbor, el Instituto Nacional
de la Salud (NIH) quiso participar
del proyecto al ser otro organismo
pblico
con
mucha
ms
experiencia biolgica, si bien no
tanta en la organizacin de
proyectos de esta magnitud.
El debate pblico que suscit la
idea capt la atencin de los
responsables polticos, no solo
porque
el
Proyecto
Genoma
Humano
era
un
gran
reto
tecnocientfico,
sino
por
las
tecnologas de vanguardia que
surgiran, as como porque el
conocimiento obtenido asegurara
la superioridad tecnolgica y
comercial del pas. Antes de dar
luz verde a la iniciativa del PGH se
necesit por un lado el informe de
1988 de la Oficina de Evaluacin
Tecnolgica del Congreso (OTA) y
el del Consejo Nacional de
Investigacin (NRC). Ese ao se
inaugur HUGO (Organizacin del
Genoma Humano) y James D.
Watson fue nombrado alto cargo
del proyecto. Sera reemplazado
por Francis Collins en abril de
1993, en gran parte por su
enemistad con Bernadine Healy
que era su jefe por aquel
entonces. Tras esto el nombre del
Centro cambi a Instituto Nacional
de Investigaciones del Genoma
Humano (NHGRI).
En
1990
se
inaugur
definitivamente
el
Proyecto
Genoma Humano calculndose
quince aos de trabajo. Sus
objetivos
principales
en
una
primera etapa eran la elaboracin
de mapas genticos y fsicos de
gran resolucin, mientras se
ponan a punto nuevas tcnicas de
secuenciacin, para poder abordar
todo el genoma. Se calcul que el
Proyecto
Genoma
Humano
estadounidense necesitara unos
3000 millones de dlares y
terminara en 2005. En 1993 los
fondos pblicos aportaron 170
millones de dlares, mientras que
la
industria
gast
aproximadamente 80 millones.
Con el paso de los aos, la
inversin privada cobr relevancia
y amenaz con adelantar a las
financiaciones pblicas.
El proyecto genoma humano tiene
una extensin que es el proyecto
microbioma humano. El mismo
intenta
caracterizar
las
comunidades
microbianas
encontradas
en
diversas
localizaciones del cuerpo humano
para determinar las posibles
correlaciones entre los cambios del
microbioma y el estado de salud.
Se considerara al microbioma
como la rama ms alta de al
ltimo
rgano
humano
por
investigar.
-
Mtodos de estudio
Existen dos tcnicas de cartografa
gentica principales: el ligamiento,
que intenta averiguar el orden de
los genes; y la cartografa fsica,
que se encarga de estudiar la
distancia de los genes en el
interior del cromosoma. Las dos
tcnicas
utilizan
marcadores
genticos, que son caractersticas
moleculares o fsicas que se
heredan, y son detectables y
distintas para cada individuo.
Thomas Hunt Morgan desarroll en
la dcada de 1900 la cartografa
mediante ligamiento al estudiar la
frecuencia con la que ciertas
caractersticas
se
heredaban
unidas en moscas de la fruta. As
lleg a la conclusin de que
algunos
genes
deban
estar
ligados en los cromosomas. Los
mapas de ligamiento humano se
han creado estudiando pautas de
herencia de familias muy extensas
y
con
varias
generaciones
conocidas. Aunque al principio se
limitaban a los rasgos fsicos
heredables,
fcilmente
reconocibles, actualmente hay
tcnicas ms elaboradas que
permiten
crear
mapas
de
ligamiento comparando la posicin
de genes diana en comparacin
con el orden de los marcadores
genticos o de partes conocidas
del ADN.
La cartografa fsica es capaz de
medir la distancia real entre
puntos de los cromosomas. Las
tcnicas ms avanzadas combinan
robtica, informtica y uso de
lser para calcular la distancia
entre
marcadores
genticos
conocidos. Para conseguirlo, se
fragmenta
el
ADN
de
los
cromosomas
humanos
aleatoriamente. A continuacin se
duplican muchas veces para
estudiar en los clones, que son las
secuencias duplicadas, la ausencia
o presencia de marcas genticas
identificables. Los clones que
comparten
varias
marcas
provienen
de
segmentos
solapados normalmente. Estas
regiones
pueden
utilizarse
despus para determinar el orden
de las marcas en los cromosomas
y su secuencia. Para obtener la
secuencia real de nucletidos
hacen
falta
mapas
fsicos
altamente detallados que recogen
el orden de las piezas clonadas
con exactitud.
En el Proyecto Genoma Humano se
utiliz un mtodo de secuenciacin
desarrollado por Frederick Sanger,
bioqumico britnico y dos veces
premio Nobel. Este mtodo replica
piezas especficas de ADN y las
modifica de modo que acaben en
una forma fluorescente.
Actualmente
se
detecta
el
nucletido modificado del extremo
de las cadenas con modernos
secuenciadores
de
ADN
automticos. Estos determinan los
nucletidos que hay exactamente
en la cadena. A continuacin se
combina esta informacin de
manera informatizada, y as se
reconstruye la secuencia de pares
de bases del ADN original. Un
aspecto
muy
importante
es
duplicar
rpidamente
y
con
exactitud el ADN, tanto para
despus cartografiarlo como para
secuenciarlo. Al comienzo de la
investigacin en este campo se
clonaba el material gentico
introducindolo en organismos
unicelulares de rpida divisin,
pero en la dcada de los ochenta
se generaliz el uso de la PCR
(reaccin
en
cadena
de
polimerasa). Esta tcnica se puede
automatizar fcilmente y es capaz
de copiar una sola molcula de
ADN muchos millones de veces en
poco tiempo. Kary Mullis obtuvo el
Premio Nobel de Qumica por
idearla, en 1993.
-
Donantes de genoma
El PGH e IHGSC internacional
(sector pblico) recogieron el
semen de hombres y la sangre de
mujeres de muchos donantes
diferentes, pero solo unas pocas
de
estas
muestras
fueron
estudiadas despus realmente. As
se garantiz que la identidad de
los
donantes
estuviera
salvaguardada de modo que nadie
supiera
qu
ADN
sera
el
secuenciado. Tambin han sido
utilizados clones de ADN de varias
bibliotecas, la mayora de las
cuales fueron creadas por el Dr. J.
Pieter de Jong. Se comunic de
manera informal, pero es bien
conocido por la comunidad en
general, que gran parte del ADN
secuenciado provena de un nico
donante annimo de Buffalo,
Nueva York, su nombre en clave
era
RP11.
Los
cientficos
encargados
utilizaron
principalmente
los
glbulos
blancos de dos hombres y dos
mujeres elegidos al azar
-
Ventajas
o Conocer las bases
moleculares de las
enfermedades
hereditarias
Se puede conocer la base molecular de
muchas enfermedades genticas y se
puede realizar un diagnstico adecuado.
Diagnsticos
de
enfermedades
posibles gracias al
PGH.
El
diagnstico
de
cierta
enfermedad, gracias al PGH se
puede
realizar
de
manera
presintomtica y prenatal. El
conocimiento de la base molecular
de las enfermedades permite
realizar
el
diagnstico
presintomtico y gracias a l
tomar medidas preventivas, como
alteraciones en el estilo de vida,
evitar la exposicin a factores de
riesgo, realizar un seguimiento
continuo del individuo o realizar
intervenciones puntuales, para
poder
tratar
la
enfermedad
aunque todava no haya aparecido.
o
Terapia
gnica,
terapia farmacolgica
y medicina predictiva.
La
terapia
gnica
es
una
consecuencia directa del PGH y
supone la probabilidad de curar las
enfermedades
hereditarias
cartografiadas por ste, insertando
copias
funcionales
de
genes
defectivos o ausentes en el
genoma de un individuo para
tratar dicha enfermedad.
La terapia farmacolgica se ve
tambin facilitada por el PGH ya
que
ste
permite
encontrar
alteraciones en la secuencia del
ADN de genes especficos y esto
conlleva a que se realice el
tratamiento con medicamentos de
una manera dirigida, neutralizando
las alteraciones y modificando
favorablemente el curso de la
enfermedad de forma ms efectiva
que los tratamientos de la
medicina
actual,
que
estn
generalmente dirigidos a aliviar los
sntomas.
La medicina predictiva permite
diagnosticar
enfermedades,
gracias a los conocimientos del
genoma, que an no se han
desarrollado en el paciente. Se
distinguen
dos
tipos
de
enfermedades que se pueden
diagnosticar mediante la medicina
predictiva. Las monognicas, que
se pueden identificar fcilmente
ya que se conocen perfectamente
las leyes deterministas que las
regulan; y las polignicas, para
cuyo buen estudio es necesario
realizar sondeos poblacionales.
BIBLIOGRAFA
-
CONCLUSIONES
Si bien este avance cientfico
todava
no
termina,
est
produciendo un gran revuelo
mundial, se busca determinar la
manera de combatir las grandes
enfermedades causantes de la
mayor prdida humana.
Todava queda un largo camino por
recorrer que incluye relacionar
cada uno de los 100 mil genes con
una enfermedad especfica para
poder
encontrar
un
nuevo
tratamiento, luego conocer el
Proteotoma humano que es el
conocimiento de las protenas del
ADN y su funcionamiento.
Se ha podido estimar que estos
estudios
tardaran
aproximadamente 30 aos ms en
mostrar resultados concreto; sin
embargo
existe
la
gran
controversia sobre estos estudios
realizados y las bases ticas para
poder realizar experimentacin, y
si bien es cierto hasta la posible
obtencin de nuevos seres, o
regenerarlos.
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base/[Link]?
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