CHROMELEON III
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System
S
Suitability
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Anlisis de pureza
Reporte Avanzado
Anlisis de Pureza del Pico
Definicin
El anlisis de pureza del pico se realiza mediante una comparacin matemtica entre
el espectro de la muestra y el espectro de un estndar.
Cuando los espectros normalizados de la muestra y el estndar estn perfectamente
sobrepuestos se concluye que se trata del mismo compuesto.
compuesto
Partes que conforman el PPA
Informacin de la muestra
Cromatograma de la muestra seleccionada
Espectro
C
Campo
3D
Usos
Analizar la ppureza de un ppico
Extraccin de cromatogramas, espectros y trayectoria ptima de integracin
Identificacin de picos a travs de su espectro
Mtodos para evaluar PPA
Verificacin visual del ggrfico de Isoabsorbancia
Peak Purity Index y el Peak Purity Match Factor
Normalizacin de espectros
Grfico de Isoabsorbancia
Todos los mximos de absorbancia estn localizados verticalmente en direccin
del eje de longitud de onda.
Cada mximo de absorbancia esta separado de tal manera que no existen a su
alrededor algn otro mximo de absorbancia.
Los picos que son puros son simtricos en sus mximos de absorbancia.
Peak Purity Index (PPI)
El PPI representa
p
la longitud
g
de onda central de un espectro.
p
Es decir,, es la longitud
g
de
onda donde las reas de un espectro a la derecha y a la izquierda son idnticos.
Peak Purity Index (PPI)
Un ppico es ppuro cuando los valores individuales del PPI forman un rectngulo.
g
Desviaciones estndar relativas (RSD) del PPI mayores del 2% nos indican que el
pico es impuro.
Peak Purity Match Factor
El Match Factor esta referido a la correlacin entre el espectro
p
en el pice
p del pico
p y el
espectro en los bordes inicial y final del pico de tal manera que nos expresa el grado de
similitud entre las curvas.
Peak Purity Match Factor
Un ppico es ppuro cuando los valores individuales del Match forman un rectngulo.
g
Valores de Match arriba de 990 nos indica que el pico es puro, valores entre 900 y
990 nos indica que el pico probablemente este impuro y finalmente valores debajo
de 900 nos indican que el pico es impuro.
Normalized Spectra Overlay
Normalizacin
En el rango lineal
lineal, la respuesta del analito a un tiempo de retencin particular es siempre
proporcional a la concentracin del analito que se encuentra en ese tiempo en la celda
de deteccin.
Para poder comparar dos respuestas es indispensable tener la misma concentracin del
analito.
Como esta condicin es raramente lograda, y no es posible convertir una respuesta a una
concentracin especfica de otra concentracin,
concentracin la altura de la respuesta debe ser
escalada a la altura de la otra. A este procedimiento se le llama Normalizacin.
Tipos de Normalizacin
Normalization off
Normalize at relative maximum
Normalize at absolute maximum
N
Normalize
li att fixed
fi d wavelength
l th
Normalize at absolute maximum
La altura mas grande del pico es definida como la altura absoluta de la respuesta, y
despus
p
de la normalizacin esta altura recibe un valor de 1 (=100%).
(
)
Normalize at relative maximum
La longitud de onda mas grande del pico en el espectro es definido como el mximo
relativo de la respuesta.
p
Despus de la normalizacin, este pico tiene una altura de 0.5 (50%). Esto previene
normalizaciones con mximos incompletos en los espectros.
Normalize at relative maximum
La longitud de onda mas grande del pico en el espectro es definido como el mximo
relativo de la respuesta.
p
Despus de la normalizacin, este pico tiene una altura de 0.5 (50%). Esto previene
normalizaciones con mximos incompletos en los espectros.
Normalize at fixed wavelength
La normalizacin a una longitud de onda especifica es similar a la normalizacin a un
mximo relativo.
En vez de utilizar el mximo relativo para realizar la normalizacin el usuario puede
seleccionar una longitud de onda especfica.
Normalized Spectra Overlay
Un ppico es ppuro cuando en los espectros
p
normalizados no se observan desviaciones
en la figura del espectro.
Valores de Match arriba de 990 nos indica que el pico es puro, valores entre 900 y
990 nos indica que el pico probablemente este impuro y finalmente valores debajo
de 900 nos indican que el pico es impuro.
Baseline Correction of Spectra
La correccin
L
i de
d la
l lnea
l
base
b
de
d los
l espectros
t en ell PPA se utiliza
tili en aquellas
ll muestras
t
en las cuales existe una absorcin de fondo alta la cual no permite realizar el anlisis de
pureza de los picos en el cromatograma.
Extraccin de cromatogramas
El PPA nos ppermite extraer los cromatogramas
g
de cualquier
q
longitud
g
de onda cuando
tenemos activado el campo 3D.
Podemos guardar el cromatograma de las muestras como un canal separado.
Optimum Integration Path
Un cromatograma
g
qque ha sido adquirido
q
a una longitud
g
de onda fija
j normalmente no
tiene una relacin seal-ruido ptima para todos los picos.
Optimum Integration Path nos permite:
Optimizar la relacin seal-ruido
Minimiza la sobreposicin de picos vecinos
Optimiza la linealidad
Libreras Espectrales
El PPA nos ppermite crear libreras espectrales
p
las cuales nos sirven para
p identificar
sustancias desconocidas.
Comparacin de espectros
La desviacin de la seal, esto es, la diferencia entre el espectro UV y un espectro de
referencia se realiza a travs de las condiciones del Match que hallamos definido.
El mtodo provee un valor que nos indica el grado de similitud entre el espectro UV y el
espectro de referencia. Un valor de 0 nos indica que los espectros son completamente
dif
diferentes
y un valor
l de
d 1000 nos indica
i di que son idnticos.
id i
Entre las opciones que podemos utilizar tenemos:
Least
L t Square
S
Weighted Least Square
Correlation
Comparacin de espectros
Cuando utilizamos la opcin Check Derivative podemos realizar la comparacin de los
espectros a travs de un anlisis de primera o segunda derivada.
El anlisis de primera y segunda derivada es til para poder observar pequeas
diferencias entre los espectros. Tambin lo utilizamos para reducir los efectos de
i
interferencias
f
i debidas
d bid a la
l dispersin,
di
i matriz
i de
d la
l muestra o fase
f
mvil.
il
Extraccin de espectros
El PPA nos ppermite copiar
p cada espectro
p
extrado del campo
p 3D a travs del clipboard
p
de Windows.
Usos
Extraccin de cromatogramas,
g
, espectros
p
y trayectoria
y
ptima
p
de integracin
g
Identificacin de picos a travs de su espectro
Realizar el anlisis cuantitativo para picos sobrepuestos
