TEMA IV.
GLUCLISIS
1.Generalidades
2.Reacciones de la gluclisis
3.Control de la gluclisis
PRINCIPALES DESTINOS DE LA GLUCOSA
SNTESIS DE GLUCGENO,
ALMIDN, SACAROSA
Reserva
GLUCOSA
Oxidacin va
Pentosas fosfato
RIBOSA-5-FOSFATO
Oxidacin va
gluclisis
PIRUVATO
PRECURSOR
INTERMEDIARIOS
(METABOLITOS)
PRODUCTO
Ecuacin global:
GLUCOSA + 2NAD+ + 2ADP + 2Pi
2 PIRUVATO + 2NADH + 2H+ +2ATP+2H2O
La conversin de glucosa en piruvato es exergnica:
Glucosa + 2NAD+
2 piruvato + 2NADH + 2H+
G1o = -146 kJ/mol
y la formacin de ATP a partir de ADP y Pi, que es endergnica:
2ADP + 2Pi
2 ATP + 2 H2O
G2o = 61 kJ/mol
Por lo tanto, la variacin global de energa libre estndar es:
Gso = G1o + G2o = -146 kJ/mol + 61 kJ/mol = -85 kJ/mol
La gluclisis es un proceso esencialmente IRREVERSIBLE
IMPORTANCIA DE LOS METABOLITOS FOSFORILADOS
1. Los metabolitos fosforilados no pueden abandonar la clula
2. Los grupos fosforilo son componentes esenciales en la conservacin
enzimtica de la energa metablica
3. La fijacin de los grupos fosfato a los centros activos de los enzimas
proporciona energa de fijacin que contribuye a reducir la energa de
activacin aumentando adems la especificidad de las reacciones
catalizadas enzimticamente
TRANSFORMACIONES QUMICAS EN LA GLUCLISIS
La degradacin del esqueleto carbonado de la glucosa que produce piruvato
La fosforilacin del ADP a ATP por la accin de compuestos fosfato de alta
energa formados durante la gluclisis
La transferencia de un ion hidruro al NAD+, lo cual da como resultado la
formacin de NADH
NIVELES DE ESTUDIO DE LA VA GLUCOLTICA:
1. Los pasos de interconversin qumica
2. El mecanismo de la transformacin enzimtica
3. La energtica de las transformaciones
4. Los mecanismos de control
FASES DE LA GLUCLISIS
Primera
Fase:
Fase Preparatoria:
Fosforilacin de glucosa
y su conversin en
Gliceraldehdo 3-fosato
Segunda
Fase:
Fase de beneficios:
Conversin oxidativa del
gliceraldehdo 3-fosfato
a piruvato con formacin
acoplada de ATP y NADH
FASE PREPARATORIA DE LA GLUCLISIS
1. Fosforilacin de la glucosa
Glucosa + ATP
Glucosa-6-fosfato + ADP
FASE PREPARATORIA DE LA GLUCLISIS
1. Fosforilacin de la glucosa
Es el primer paso de la gluclisis
Es una reaccin irreversible Go=-16.7 kJ/mol
La Hexocinasa cataliza la reaccin (Transferasa), es un enzima citoslica
Requiere de Mg2+
La hexocinasa cataliza la transferencia de un grupo fosforilo del ATP a la glucosa
para formar glucosa-6-fosfato y ADP
LA HEXOCINASA ES UN MONMERO
8A
De Levadura
Kuser et al. (2008)
Proteins 72:731
8A
MECANISMO CATALTICO DE LA HEXOCINASA
1. Forma un complejo ternario con la glucosa y el Mg2+-ATP
2. El Mg2+ forma un complejo con los oxgenos del ATP de tal modo que
apantalla las cargas negativas
3. Favoreciendo el ataque nucleoflico por un OH de la glucosa al ATP
ES EL PRIMER CONSUMO DE ATP
LA CTALISIS ES POR PROXIMIDAD
Kuser et al. (2008)
Proteins 72:731
FASE PREPARATORIA DE LA GLUCLISIS
2. Conversin de la glucosa 6-fosfato en fructosa 6-fosfato
FASE PREPARATORIA DE LA GLUCLISIS
2. Conversin de la glucosa 6-fosfato en fructosa 6-fosfato
Es una reaccin reversible Go=1.7 kJ/mol
La Fosfohexosa isomerasa cataliza la reaccin, es un enzima citoslica
La Fosfohexosa isomerasa cataliza el reordenamiento de los grupos carbonilo y
e hidroxilo en el C-1 y C-2 de la glucosa
Es un dmero
de Thermus
termophilus
Yamamoto et al. (2008)
J. Mol. Biol. 382:747
Residuos de la
interface del dmero
responsables de
la estabilidad
Yamamoto et al. (2008)
J. Mol. Biol. 382:747
Residuos del sitio
cataltico
Yamamoto et al. (2008)
J. Mol. Biol. 382:747
REACCIN DE LA FOSFOHEXOSA ISOMERASA
CATLISIS BSICA
Glu
Glu
Glu
FASE PREPARATORIA DE LA GLUCLISIS
3. Fosforilacin de la fructosa 6-fosfato a fructosa 1,6-bifosfato
Fosfofructoquinasa-1
Mg2+
ATP
Fructosa-6-fosfato
ADP
Fructosa-1,6-bifosfato
MgATP2-
FASE PREPARATORIA DE LA GLUCLISIS
3. Fosforilacin de la fructosa 6-fosfato a fructosa 1,6-bifosfato
Es una reaccin irreversible Go=-14.2 kJ/mol
La Fosfofructocinasa-1 (PFK-1) cataliza la reaccin, es un enzima citoslica
La Fosfofructocinasa-1 cataliza la transferencia de un grupo fosforilo desde el ATP
a la Fructosa 6-fosfato para formar Fructosa 1,6-bifosfato
ES EL SEGUNDO CONSUMO DE ATP
ES CONSIDERADO EL PRIMER PASO COMPROMETIDO, EL PRODUCTO
FORMADO SLO PUEDE SEGUIR LA GLUCLISIS Y NO OTRA RUTA
ESTRUCTURA DE LA FOSFOFRUCTOCINASA (PFK-1)
La PFK-1 es un tetrmero
Es un enzima alostrica
La PFK-1 es un tetrmero
Es un enzima alostrica
(ATP ES UN MODULADOR
ALOSTRICO NEGATIVO)
[ATP] DISMINUYE
AUMENTO EN LA ACTIVIDAD
DE LA PFK-1
Schirmer et al. (1990)
Nature 343:6254
FASE PREPARATORIA DE LA GLUCLISIS
4. Rotura de la fructosa 1,6-bifosfato
FASE PREPARATORIA DE LA GLUCLISIS
4. Rotura de la fructosa 1,6-bifosfato
Es una reaccin reversible Go=23.8 kJ/mol
La Fructosa 1,6-bifosfato aldolasa cataliza la reaccin, es un enzima citoslica
La Aldolasa cataliza una condensacin aldlica reversible
La fructosa 1,6-bifosfato se rompe dando dos triosas fosfato diferentes, el
gliceraldehdo 3-fosfato, una aldosa, y la dihidroxiacetona fosfato, una cetosa
La aldolasa es un homotetrmero
Msculo de Conejo
Sherawat et al (2008)
Acta Cryst. D64:543
Residuos del sitio activo del Aldolasa
Sherawat et al (2008)
Acta Cryst. D64:543
IMINA
FASE PREPARATORIA DE LA GLUCLISIS
5. Interconversin de las triosas fosfato
Es una reaccin reversible Go=7.5 kJ/mol
La triosa fosfato isomerasa cataliza la reaccin, es un enzima citoslica
La isomerasa cataliza la conversin de dihidroxiacetona fosfato a gliceraldehdo
3-fosfato
1
2
3
FASE DE BENEFICIOS DE LA GLUCLISIS
GLUCOSA
2 ATP
2 ADP
2 MOLCULAS DE GLICERALDEHDO 3-FOSFATO
4 ADP
4 ATP
PASOS DE FOSFORILACIN
CONSERVADORES DE ENERGA
2 MOLCULAS DE PIRUVATO
POR UNA MOLCULA DE GLUCOSA SE FORMAN
2 MOLCULAS DE ATP
FASE DE BENEFICIOS DE LA GLUCLISIS
6. Oxidacin del gliceraldehdo 3-fosfato a 1,3-bifosfoglicerato
FASE DE BENEFICIOS DE LA GLUCLISIS
6. Oxidacin del gliceraldehdo 3-fosfato a 1,3-bifosfoglicerato
Es una reaccin reversible Go=6.3 kJ/mol
La gliceraldehdo 3-fosfato deshidrogenasa cataliza la reaccin, es un enzima
citoslica
La gliceraldehdo 3-fosfato deshidrogenasa cataliza la conversin del gliceraldehdo
3-fosfato a 1,3-bifosfoglicerato (HOLOENZIMA= ENZIMA + NAD+)
Es un tetrmero
E. coli
REACCIN DE LA GLICERALDEHDO 3-FOSFATO DESHIDROGENASA
OXIDACIN
ACIL FOSFATO
Grupo
aldehdo
Anhdrido de
cido carboxlico
con cido fosfrico
G= -49.3 kJ/mol
(Compuesto fosforilado con
alto valor de G de hidrlisis)
ACEPTOR DE HIDRGENO EN LA REACCIN ES EL NAD+
LOS NUCLETIDOS DE NICOTINAMIDA
HIDROGENACIN
340 nm
OXIDORREDUCTASAS
DESHIDROGENASAS
260 nm
+ 2e-
+ 2H+
NADH + H+
Eo
NADP+ + 2e-
+ 2H+
NADPH + H+
Eo
NAD+
LA ASOCIACIN ENTRE UNA DESHIDROGENASA Y
EL COFACTOR (NAD O NADP):
ES DBIL Y DIFUNDE FCILMENTE DESDE
UN ENZIMA A OTRO
PLIEGE DE ROSSMANN
FASE DE BENEFICIOS DE LA GLUCLISIS
7. Transferencia de fosforilo desde el 1,3-bifosfoglicerato al ADP
LA FORMACIN DE ATP POR
TRANSFERENCIA DEL GRUPO
FOSFORILO A PARTIR DE UN
SUSTRATO SE CONOCE COMO
FOSFORILACIN A NIVEL DE
SUSTRATO
IMPLICANDO ENZIMAS SOLUBLES
E INTERMEDIARIOS QUMICOS
FASE DE BENEFICIOS DE LA GLUCLISIS
7. Transferencia de fosforilo desde el 1,3-bifosfoglicerato al ADP
Es una reaccin irreversible Go= -18.5 kJ/mol
La fosfoglicerato cinasa cataliza la reaccin, es un enzima
citoslica
La fosfoglicerato cinasa cataliza la transferencia del grupo fosforilo de el
gliceraldehdo 1,3-bifosfoglicerato al ADP
FASE DE BENEFICIOS DE LA GLUCLISIS
8. Conversin del 3-fosfoglicerato en 2-fosfoglicerato
FASE DE BENEFICIOS DE LA GLUCLISIS
8. Conversin del 3-fosfoglicerato en 2-fosfoglicerato
Es una reaccin reversible Go= 4.4 kJ/mol
La fosfoglicerato mutasa cataliza la reaccin, es un enzima
citoslica
La fosfoglicerato mutasa cataliza un desplazamiento reversible del grupo fosforilo
entre C-2 y C-3 del glicerato
ES UN DMERO
Humano
Levadura
Bacteria
Wang et al. (2005)
Biochem. Biophys. Res. Commun. 331:1207
Transferencia del gpo. Fosforilo del enzima
al sustrato
Transferencia del gpo. Fosforilo del C-3 del
Sustrato al enzima
SITIO ACTIVO DE LA FOSFOGLICERATO MUTASA DE LEVADURA
Wang et al. (2005)
Biochem. Biophys. Res. Commun. 331:1207
FASE DE BENEFICIOS DE LA GLUCLISIS
9. Deshidratacin del 2-fosfoglicerato a fosfoenolpiruvato
FASE DE BENEFICIOS DE LA GLUCLISIS
9. Deshidratacin del 2-fosfoglicerato a fosfoenolpiruvato
Es una reaccin reversible Go= 7.5 kJ/mol
Es la segunda reaccin glucoltica que genera un compuesto con potencial
elevado de transferencia del grupo fosforilo
La enolasa cataliza la reaccin, es un enzima citoslica, promueve
la eliminacin reversible de una molcula de agua del 2-fosfoglicerato
(HOLOENZIMA= ENZIMA + Mg2+)
Es un dmero
MECANISMO CATALTICO DE LA ENOLASA
2-Fosfoglicerato unido al enzima
Intermediario enlico
Fosfoenolpiruvato
1. Unin coordinada por dos iones Mg2+
2. Extraccin de un protn por catlisis bsica
3. Extraccin de un hidroxilo por catlisis cida
FASE DE BENEFICIOS DE LA GLUCLISIS
10. Transferencia del grupo fosforilo desde el fosfoenolpiruvato al ADP
FOSFORILACIN A
NIVEL DE SUSTRATO
FASE DE BENEFICIOS DE LA GLUCLISIS
10. Transferencia del grupo fosforilo desde el fosfoenolpiruvato al ADP
Es una reaccin irreversible Go= -31.4 kJ/mol
La piruvato cinasa cataliza la reaccin, es un enzima citoslica, promueve la
transferencia del grupo fosforilo desde el fosfoenolpiruvato al ADP
Es un tetrmero
Es un enzima alostrica
Fosforilacin
Hexocinasa
GLUCOSA
Isomerizacin
Fosfohexosa FRUCTOSA 6-FOSFATO
GLUCOSA 6-FOSFATO isomerasa
Fosforilacin
PFK-1
FRUCTOSA 1,6-BIFOSFATO
Rotura
FRUCTOSA 1,6-BIFOSFATO
Aldolasa
GLICERALDEHDO 3-FOSFATO Oxidacin y
Fosforilacin
Fosforilacin a nivel
de sustrato
G 3-P
Deshidrogenasa
DIHIDROXIACETONA FOSFATO
1,3-BIFOSFOGLICERATO
Fosforilacin a nivel
de sustrato
PIRUVATO
Piruvato cinasa
3-FOSFOGLICERATO
Isomerizacin
Fosfoglicerato
cinasa
FOSFOENOLPIRUVATO
Mutasa
Enolasa
2-FOSFOGLICERATO
DESTINOS DEL PIRUVATO
Condiciones
Aerbicas
Condiciones
Anaerbicas
Piruvato
CO2
Acetil-CoA
Ciclo de
Krebs
CO2
e-
Piruvato
NADH
NAD+
Lactato
Fermentacin del
cido lctico
Condiciones
Anaerbicas
(Levadura)
Piruvato
Etanol + CO2
Fermentacin
alcohlica
Fosforilacin
Oxidativa
Destino anablico: Precursor de la sntesis de alanina
CONDICIONES AERBICAS
PIRUVATO
NADH
Oxidacin
ACETATO
Ciclo de
Krebs
CO2 + H2O
eFosforilacin
oxidativa
NAD+
EN CONDICONES DE HIPOXIA
Msculo esqueltico muy activo, plantas sumergidas
EL NADH NO PUEDE SER REOXIDADO POR EL OXGENO
PARA REGENERAR LA POZA DE NAD+
SE REALIZA UNA TRANSFERENCIA DE LOS ELECTRONES
DESDE EL NADH PARA FORMAR
UN PRODUCTO FINAL REDUCIDO
ETANOL O LACTATO
LOS ERITROCITOS NO TIENEN
MITOCONDRIAS POR LO TANTO
EN CONDICIONES AERBICAS
DURANTE LA GLUCLISIS
PRODUCEN LACTATO
11. El piruvato es el aceptor electrnico terminal en la fermentacin lctica
ltimo paso de la va glucoltica
nica reaccin que dispone el
cuerpo para formar L-lactato o
utilizarlo.
Totalmente reversible.
11. El piruvato es el aceptor electrnico terminal en la fermentacin lctica
1. Es una reaccin irreversible Go= -25.1 kJ/mol
2. La reaccin esta catalizada por la lactato deshidrogenasa
LDH
NO HAY CAMBIO NETO
DE NAD+ O DE NADH
GLUCOSA
LACTATO
(C6H12O6)
(C3H6O3)
2 PASOS DE OXIDO-REDUCCIN
NO HAY CAMBIO EN
EL CONTENIDO NETO
DE NAD+ O DE NADH
HAY PRODUCCIN DE
2 ATP
NO HAY CAMBIO EN EL ESTADO DE
OXIDACIN DEL CARBONO
LA PROPORCIN H:C ES LA MISMA
FERMENTACIN.- Es un proceso que extrae energa (ATP) pero no hay consumo
de oxgeno ni cambian las concentraciones de NAD+ o NADH
Fermentacin alcohlica
La levadura y otros microorganismos
DOS PASOS:
1. Descarboxilacin del piruvato (irreversible) catalizada por la piruvato descarboxilasa
2. Reduccin del acetaldehdo para formar etanol a travs de la accin de la
alcohol deshidrogenasa
La piruvato descarboxilasa Holoenzima= Enzima + TPP (Tiamina pirofosfato) y Mg2+
Grupo prosttico
Anillo de
tiazolio
Protn relativamente
cido
Tiamina Pirofosfato (TPP)
Mecanismo cataltico de
la Piruvato descarboxilasa
Mecanismo de la
Alcohol
deshidrogenasa
EL NADH FORMADO EN LA GLUCLISIS DEBE RECICLARSE
PARA REGENERAR EL NAD+
CONDICIN:
AERBICA SE REGENERA DURANTE LA FOSFORILACIN OXIDATIVA
ANAERBICA: MSCULO, ERITROCITOS MEDIANTE FERMETACIN
LCTICA
LEVADURA Y OTROS MICROORGANISMOS MEDIANTE
FERMENTACIN ALCOHLICA
REGULACIN DE LA GLUCLISIS
GLUCOSA
HEXOCINASA
GLUCOSA 6-FOSFATO
FRUCTOSA 6-FOSFATO
FOSFOFRUCTOCINASA-1
FRUCTOSA 1,6-BIFOSFATO
DIHIDROXIACETONA FOSFATO + GLICERALDEHDO 3-FOSFATO
1,3-FOSFOGLICERATO
3-FOSFOGLICERATO
2-FOSFOGLICERATO
FOSFOENOLPIRUVATO
PIRUVATO CINASA
PIRUVATO
HEXOCINASA
ES UN MONMERO
REGULACIN
ALOSTRICA
ES INHIBIDA POR SU PRODUCTO,
LA GLUCOSA 6-FOSFATO
POR LA PRESENCIA DE
4 ISOENZIMAS (I A IV)
HEXOCINASA I A III EN MSCULO KM= 0.1 mM
HEXOCINASA IV EN HGADO
GLUCOCINASA KM= 10 mM
UNA BAJA [GLUCOSA] ES UTILIZADA POR MSCULO
UNA ELEVADA [GLUCOSA] ES UTILIZADA POR EL HGADO
FOSFOFRUCTOCINASA-1
La PFK-1 es un tetrmero
Es un enzima alostrica
Regulacin alostrica de la PFK-1
ELEVADO CONTENIDO DE ATP
INHIBE ALOSTRICAMENTE LA PFK-1
ELEVADO CONTENIDO DE CITRATO
(intermediario de la oxidacin aerbica
del piruvato) INHIBE LA PFK-1
AMP, ADP Y LA
FRUCTOSA 2,6-BIFOSFATO
AUMENTAN LA ACTIVIDAD
DE LA PFK-1
ESTRUCTURA DE LA FOSFOFRUCTOCINASA-2
CONTROL DE LA SNTESIS Y DEGRADACIN DE LA
FRUCTOSA 2,6-BIFOSFATO
GLUCOSA ABUNDANTE
(Gliclisis activa)
CONTROL DE LA SNTESIS Y DEGRADACIN DE LA
FRUCTOSA 2,6-BIFOSFATO
GLUCOSA ESCASA
ELEVADA
GLUCOSA
ESCASA
GLUCOSA
PFK-2
FRUCTOSA 2,6-BIFOSFATO
PFK-1
MS
ACTIVA
PFK-2
FRUCTOSA 2,6-BIFOSFATO
PFK-1
FBPasa-2
FRUCTOSA 6-FOSFATO
PFK-1
MENOS
ACTIVA
+ ++2+ADP
GLUCOSA
GLUCOSA
+ 2 ATP
+ 2+NAD
2 NAD
4 ADP
+ 2+ Pi
2 Pi
2 PIRUVATO
2 PIRUVATO
+ 2 ADP
+ 2+NADH
2 NADH
+ 2H
+ +2H
+ +2+ATP
4ATP
+ 2+ H
2 2H
O2O
MECANISMOS
DE REGULACIN
DE LOS
ENZIMAS
RECUPERAR
LA POZA
DE
NAD+
QUE CATALIZAN LAS REACCIONES IRREVERSIBLES
Aerobiosis:
Anaerobiosis:
PIRUVATO
Fosforilacin oxidativa
Fermentacin lctica o alcohlica
HEXOCINASA: REGULACIN POR ALOSTERISMO Y POR ISOFORMAS
PFK-1: REGULACIN ALOSTRICA
PIRUVATO CINASA
Es un tetrmero
Es un enzima alostrica
1)REGULACIN ALOSTRICA:
ELEVADO CONTENIDO DE ATP Y LA ALANINA
LA INHIBEN ALOSTRICAMENTE
LA FRUCTOSA 1,6-BIFOSFATO LA
ACTIVAN ALOSTRICAMENTE
2) POR ISOENZIMAS
LA L PREDOMINA EN HGADO
LA M EN MSCULO Y CEREBRO
3) POR MODIFICACIN COVALENTE
SLO LA ISOFORMA L
LA FOSFORILACIN DEL ENZIMA RESULTA EN SU INHIBICIN
LA PIRUVATO CINASA SE REGULA POR EFECTORES ALOSTRICOS, POR LA
PRESENCIA DE ISOFORMAS Y POR MODIFICACIN COVALENTE
MODIFICACIN
COVALENTE
(Regulacin
Hormonal)
NIVEL ALTO
DE GLUCOSA
SANGUNEA
Piruvato cinasa
fosforilada
(Menos activa)
Piruvato cinasa
desfosforilada
(Ms activa)
EFECTORES ALOSTRICOS
NIVEL BAJO
DE GLUCOSA
SANGUNEA
REGULACIN DEL TRANSPORTE DE GLUCOSA
REGULACIN DE LA GLICLISIS
COMPARTAMENTALIZACIN: Se lleva a cabo en el citosol
ENZIMTICO: HEXOCINASA (Por alosterismo, isoformas)
PFK-1 (Por alosterismo)
PIRUVATO CINASA (Alosterismo, isoformas, modificacin covalente)
TRANSPORTE: Por isoformas
LA GLUCOSA PUEDE SER OBTENIDA A PARTIR DE
OTROS CARBOHIDRATOS Y ENTONCES ENTRAR A
GLUCLISIS
MALTOSA + H2O
LACTOSA + H2O
SACAROSA + H2O
Maltasa
Lactasa
Sacarasa
2 D-GLUCOSA
D-GALACTOSA + D-GLUCOSA
D-FRUCTOSA + D-GLUCOSA
LOS SUSTRATOS
O PRODUCTOS
DE LA
GLUCLISIS
PUEDEN SER A
SU VEZ
SUSTRATOS DE
OTRAS VAS
METABLICAS
FORMACIN DE ATP ACOPLADA A LA GLUCLISIS
Ecuacin global:
Glucosa + 2NAD+ + 2ADP + 2Pi
2 piruvato + 2NADH + 2H+ +2ATP+2H2O
La conversin de glucosa en piruvato es exergnica:
Glucosa + 2NAD+
2 piruvato + 2NADH + 2H+
G1o = -146 kJ/mol
y la formacin de ATP a partir de ADP y Pi, que es endergnica:
2ADP + 2Pi
2 ATP + 2 H2O
G2o = 61 kJ/mol
Por lo tanto, la variacin global de energa libre estndar es:
Gso = G1o + G2o = -146 kJ/mol + 61 kJ/mol = -85 kJ/mol
La gluclisis es un proceso esencialmente IRREVERSIBLE
