GLUCOLISIS

Es la va metablica encargada de oxidar la glucosa mediante una serie de

reacciones qumicas catalizadas enzimticamente, consiste en 10 reacciones enzimticas
consecutivas que convierten a la glucosa en dos molculas piruvato, durante la gluclisis se
utiliza energa proveniente del ATP y parte de la energa liberada por la glucosa cuando es
sometida a los 10 pasos consecutivos se utiliza para la formacin de ATP Y NADH. El
piruvato formado por la va glucoltica es capaz de seguir otras vas metablicas y as
continuar entregando energa al organismo.

FASES DE LA GLUCLISIS:
FASE DE PREPARACION DE LA GLUCOSA PRECISA DE ATP: La primera
fase consiste en transformar una molcula de glucosa en dos molculas de gliceraldehdo 3fosfato (una molcula de baja energa) mediante el uso de 2 ATP. Esto permite duplicar los
resultados de la segunda fase de obtencin energtica.

PASO 1 Fosforilacin de la glucosa: La primera reaccin de la gluclisis es

la fosforilacin de la glucosa, para activarla (aumentar su energa) y as poder utilizarla en
otros procesos cuando sea necesario. Esta activacin ocurre por la transferencia de un
grupo fosfato del ATP, una reaccin catalizada por la enzima hexoquinasa, la cual puede
fosforilar (aadir un grupo fosfato) a molculas similares a la glucosa, como la fructosa y
manosa.
PASO 2 Conversin de la glucosa 6-fostato en fructosa 6-fosfato: En esta
reaccin,

la

glucosa-6-fosfato

se

isomeriza

fructosa-6-fosfato,

mediante

la

enzima glucosa-6-fosfato isomerasa. La isomerizacin ocurre en una reaccin de 4 pasos,

que implica la apertura del anillo y un traspaso de protones a travs de un intermediario cisenediol.

PASO 3 Fosforilacion de la fructosa 6-fosfato a fructosa 1.6-bifosfato: En esta

Reaccin se produce la fosforilacin de la fructosa 6-fosfato en el carbono 1, con gasto de
un ATP, a travs de la enzima fosfofructoquinasa-1 (PFK1). Tambin este fosfato tendr una
baja energa de hidrlisis. Por el mismo motivo que en la primera reaccin, el proceso es
irreversible. El nuevo producto se denominar fructosa-1,6-bisfosfato. La irreversibilidad
es importante, ya que la hace ser el punto de control de la gluclisis.
PASO 4 Ruptura de la fructosa 1,6-bifosfato: La enzima aldolasa (fructosa-1,6bisfosfato aldolasa), mediante una condensacin aldlica reversible, rompe la fructosa-1,6bisfosfato en dos molculas de tres carbonos (triosas): dihidroxiacetona fosfato y
gliceraldehdo-3-fosfato. Existen dos tipos de aldolasa, que difieren tanto en el tipo de
organismos donde se expresan, como en los intermediarios de reaccin.
PASO 5 Isomerizacin de las triosas fosfato: Puesto que solo el gliceraldehdo-3fosfato puede seguir los pasos restantes de la gluclisis, la otra molcula generada por la
reaccin anterior (dihidroxiacetona-fosfato) es isomerizada (convertida) en gliceraldehdo3-fosfato mediante una reaccin catalizada por la triosa fosfato isomerasa.

FASE DE GANANCIA DE LA GLUCLISIS PRODUCCION DE ATP Y

NADH: Hasta el momento solo se ha consumido energa (ATP), sin embargo, en la
segunda etapa, el gliceraldehdo es convertido a una molcula de mucha energa, donde
finalmente se obtendr el beneficio final de 4 molculas de ATP.
PASO 6 Oxidacin del gliceraldehdo-3-fosfato a 1,3 bifosfoglicerato: Esta
reaccin consiste en oxidar el gliceraldehdo-3-fosfato utilizando NAD+ para aadir un ion
fosfato a la molcula, la cual es realizada por la enzima gliceraldehdo-3-fosfato
deshidrogenasa en 5 pasos, y de esta manera aumentar la energa del compuesto.
Tcnicamente, el grupo aldehdo se oxida a un grupo acil-fosfato, que es un derivado de un
carboxilo fosfatado. Este compuesto posee una energa de hidrlisis sumamente alta
(cercana a los 50 kJ/mol) por lo que se da inicio al proceso de reacciones que permitirn
recuperar el ATP ms adelante. Mientras el grupo aldehdo se oxida, el NAD+ se reduce, lo

que hace de esta reaccin una reaccin redox. El NAD+ se reduce por la incorporacin de
algn [H+] dando como resultado una molcula de NADH de carga neutra.
PASO 7 Transferencia de un grupo fosforilo del 1,3 bifosfoglicertao al ADP
para formar ATP: En este paso, la enzima fosfoglicerato quinasa transfiere el grupo
fosfato de 1,3-bisfosfoglicerato a una molcula de ADP, generando as la primera molcula
de ATP de la va. Como la glucosa se transform en 2 molculas de gliceraldehdo, en total
se recuperan 2 ATP en esta etapa. Ntese que la enzima fue nombrada por la reaccin
inversa a la mostrada, y que esta pera en ambas direcciones.
Los pasos 6 y 7 de la gluclisis nos muestran un caso de acoplamiento de
reacciones, donde una reaccin energticamente desfavorable (paso 6) es seguida por una
reaccin muy favorable energticamente (paso 7) que induce la primera reaccin. En otras
palabras, como la clula se mantiene en equilibrio, el descenso en las reservas de 1,3bisfosfoglicerato empuja a la enzima GAP deshidrogenasa a aumentar sus reservas. La
cuantificacin de la energa libre para el acople de ambas reacciones es de alrededor de -12
kJ/mol. Esta manera de obtener ATP sin la necesidad de O2 se denomina fosforilacin a
nivel de sustrato.
PASO 8 Conversin del 3-fosfoglicerato en 2-fosfoglicertao: Se isomeriza el 3fosfoglicerato procedente de la reaccin anterior dando 2-fosfoglicerato, la enzima que
cataliza esta reaccin es la fosfoglicerato mutasa. Lo nico que ocurre aqu es el cambio de
posicin del fosfato del C3 al C2. Son energas similares y por tanto reversibles, con una
variacin de energa libre cercana a cero.
PASO 9 Deshidrogenacin del 2-fosfoglicerato a fosfoenolpiruvato: La enzima
enolasa propicia la formacin de un doble enlace en el 2-fosfoglicerato, eliminando una
molcula de agua formada por el hidrgeno del C2 y el OH del C3. El resultado es el
fosfoenolpiruvato.
PASO 10 Transferencia de un grupo fosforilo del fosfoenolpiruvato al ADP
para formar ATP: Desfosforilacin del fosfoenolpiruvato, obtenindose piruvato y ATP.
Reaccin irreversible mediada por la piruvato quinasa.

REGULACION DE LA GLUCLISIS

A- Regulacin de los transportadores de hexosas:

El primer paso posible para controlar la gliclisis es el transporte de glucosa hacia
adentro de la clula. En la mayor parte de las clulas de mamferos, la concentracin
intracelular de glucosa es mucho menor que la concentracin de glucosa en la sangre, y la
glucosa entre en las clulas, en direccin de su gradiente de concentracin, por transporte
pasivo. Todas las clulas de mamferos poseen transportadores de glucosa por toda la
membrana. Las clulas intestinales y renales tienen un sistema de cotransporte dependiente
de Na+, llamadoSGLT1, para absorber la glucosa de la dieta y la glucosa de la orina,
respectivamente. Otras clulas de mamferos contienen transportadores de la familia GLUT
de transportadores pasivos de hexosa. Cada uno de los seis miembros de la familia GLUT
tiene propiedades nicas adecuadas para las actividades metablicas de los tejidos donde se
forman. La hormona insulina estimula altas velocidades de absorcin de glucosa en las
clulas esquelticas y del msculo cardiaco y adipocitos, mediante el transportadorGLUT4.
Cuando la insulina se enlaza a receptores en la superficie de la clula, se funden vesculas
intracelulares, que tienen GLUT4 embebido en sus membranas, con la superficie de la
clula, por exocitosis, y as aumenta la capacidad de las clulas para transportar glucosa.
Como el GLUT4 se encuentra en altas concentraciones slo en los msculos estriados y en
el tejido adiposo, la absorcin de glucosa regulada por insulina slo se efecta en esos
tejidos.
En la mayor parte de los tejidos, GLUT1 y GLUT3 mantienen un nivel basal de
transporte de glucosa en ausencia de insulina. El GLUT2 transporta glucosa que entra y
sale del hgado, y GLUT5 transporta fructosa en el intestino delgado. GLUT7 transporta
glucosa 6-fosfato del citoplasma al interior del retculo endoplsmico. Una vez dentro de
una clula, la glucosa se fosforila rpidamente por accin de la hexocinasa. Esta reaccin
atrapa a la glucosa dentro de la clula.

B- Regulacin de la hexocinasa:
La reaccin que cataliza la hexocinasa es metablicamente irreversible, y como
muchas reacciones irreversibles, es un punto potencial de control. En las bacterias y en
muchos eucariotas, la enzima no se regula alostrmicamente, pero en los mamferos, las
diversas formas de hexocinasa estn sujetas a una regulacin compleja. El producto de la
enzima, glucosa 6-fosfato, inhibe en forma alostrica las isozimas I, II y III de la
hexocinasa, pero no a la glucocinasa (isozima IV). La glucocinasa es ms abundante que las
dems hexocinasas en el hgado, y en las clulas secretoras de insulina en el pncreas. La
concentracin de glucosa 6-fosfato aumenta cuando se inhibe la gliclisis en sitios ms
adelante en la ruta.
En consecuencia, la inhibicin de las hexocinasas I, II y III por la glucosa 6-fosfato
coordina la actividad de la hexocinasa con la actividad de enzimas posteriores en la
gliclisis.
La glucocinasa se presta al papel fisiolgico del hgado, para manejar el suministro
de glucosa para todo el organismo. En la mayor parte de las clulas, las concentraciones de
glucosa se mantienen muy por abajo de la concentracin en la sangre. Sin embargo, la
glucosa entra libremente al hgado a travs de GLUT2, y la concentracin de glucosa en las
clulas hepticas iguala a la que hay en la sangre. La concentracin de glucosa en la sangre
es tpicamente de 5 mM, aunque despus de un alimento puede subir hasta 10 mM. La
mayor parte de las hexocinasas tienen valores de Km para glucosa de casi 0.1 mM o menos.
En contraste, la glucocinasa tiene una Km de 2 a 5 mM para glucosa; adems, no est
inhibida por glucosa 6-fosfato. Por consiguiente, las clulas hepticas pueden formar
glucosa 6-fosfato (para sntesis de glucgeno) por accin de glucocinasa, cuando la glucosa
es abundante y otros tejidos tienen glucosa suficiente.
La actividad de la glucocinasa es modulada por los fosfatos de fructosa. En las
clulas hepticas, una protena reguladora inhibe a la glucocinasa en presencia de
fructosa6-fosfato, y reduce su afinidad hacia la glucosa hasta unos 10 mM (figura 11.14).
Las curvas de contra [S] para la glucocinasa son sigmoidales, y no las curvas hiperblicas
esperadas para una enzima que se apegue a la cintica de Michaelis-Menten. Es una

caracterstica comn de las protenas alostricamente reguladas. Indica que no hay valor
real de Km para la glucocinasa. Puede decirse que el efecto de la protena reguladora es
elevar la Km aparente de la enzima. El flujo por la glucocinasa suele ser bajo, porque las
clulas hepticas contienen siempre bastante fructosa 6-fosfato. El flujo puede aumentar
despus de una comida, cuando la fructosa 1-fosfato, derivada slo de la fructosa en la
dieta, disminuye la inhibicin de glucocinasa por la protena reguladora. En consecuencia,
el hgado puede responder a aumentos de concentracin de carbohidratos en la sangre, con
aumentos proporcionales en la velocidad de fosforilacin de la glucosa.
C. Regulacin de la fosfofructocinasa-1:
El segundo sitio de regulacin alostrica de la gliclisis es la reaccin catalizada por
fosfofructocinasa-1 (PFK-1). La PFK-1 es una enzima oligmera grande, con peso
molecular, en las distintas especies, que va desde unos 130 000 hasta 600 000. La estructura
cuaternaria de la PFK-1 tambin vara entre las especies. Las enzimas bacterianas yde
mamferos son tetrmeras, en tanto que la enzima de levadura es un octmero. Esta enzima
compleja

tiene

varios

sitios

reguladores.

Las

propiedades

reguladoras

de

la

fosfofructocinasa-1 de Escherichia coli se describieron en la seccin 5.10A. El ATP es a la

vez un sustrato, y en la mayor parte de las especies, un inhibidor alostrico de la PFK-1. El
ATP aumenta la Km aparente de la PFK-1 para el fructosa 6-fosfato.
En las clulas de mamferos, el AMP es un activador alostrico de PFK-1 que acta
disminuyendo la inhibicin causada por ATP. El ADP activa la PFK-1 en los mamferos,
pero inhibe la cinasa en las plantas; en las bacterias, protistas y hongos, los efectos
reguladores de los nucletidos de purina varan entre las especies.
La concentracin de ATP vara poco en la mayor parte de las clulas de mamferos,
no obstante los grandes cambios en la velocidad de su formacin y utilizacin. Sin
embargo, como se describi en la seccin 10.6, se presentan cambios importantes en las
concentraciones de ADP y AMP, porque esas molculas existen en las clulas en
concentraciones mucho menores que la de ATP, y pequeos cambios en la concentracin de
ATP causan cambios proporcionalmente mayores en las concentraciones de ADP y AMP.
En consecuencia, las concentraciones de estado estable de estos compuestos pueden

controlar el flujo a travs de la PFK-1. El citrato, un intermedio en el ciclo del cido ctrico,
es un inhibidor de importancia fisiolgica para la PFK-1. Una concentracin elevada de
citrato indica que el ciclo del cido ctrico est bloqueado, y que no tendra objeto producir
ms piruvato. El efecto regulador del citrato sobre la PFK-1 es un ejemplo de inhibicin por
retroalimentacin, que regula el abasto de piruvato al ciclo del cido ctrico.
La actividad de la PFK-1 est regulada por el pH intracelular. Por ejemplo, durante
el ejercicio pesado, la gliclisis anaerbica produce cido lctico en las clulas musculares.
Si el cido lctico no es eliminado con la rapidez suficiente por la sangre, baja el pH y se
inhibe la PFK-1 por el exceso de iones hidrgeno. La fructosa 2,6-bisfosfato (figura 11.16)
es un activador potente de PFK-1, eficaz en los dominios micromolares. Este compuesto
existe en los mamferos, hongos y plantas, pero no en los procariotas.
La fructosa 2,6-bisfosfato se forma a partir de fructosa 6-fosfato, por accin de la
enzima fosfofructocinasa-2 (PFK-2, o fructosa 6-fosfato, cinasa 2). La PFK-2 es estimulada
por fosfato inorgnico e inhibida por citrato. En forma sorprendente, en el hgado de los
mamferos, un sitio activo diferente en la misma protena es el que cataliza la
desfosforilacin hidroltica de fructosa 2,6-bifosfato para volver a formar fructosa 6fosfato. Esta actividad de la enzima se llama fructosa 2,6-bifosfatasa. Las actividades
paralelas de la PFK-2 controlan la concentracin de fructosa 2,6-bifosfato en estado estable.
En el hgado, la actividad de la PFK-2 se vincula con la accin del glucagn,
hormona producida en el pncreas como respuesta a concentraciones bajas de glucosa en la
sangre. Una elevacin en la concentracin de glucagn en la sangre dispara la ruta de
sealizacin de adenilil ciclasa en las clulas hepticas, lo que culmina en la fosforilacin
de un residuo de serina en la PFK-2. La fosforilacin desactiva la actividad de la cinasa, de
la enzima bifuncional, y activa su actividad de fosfatasa. Bajo estas condiciones baja la
concentracin de fructosa 2,6-bifosfato, la PFK-1 se vuelve menos activa y disminuye la
gliclisis. Bajo las condiciones en las que la glucosa se metaboliza rpidamente, la
concentracin de glucagn baja, la concentracin de fructosa 6-fosfato aumenta y se forma
ms fructosa 2,6-bifosfato, ya que la fructosa 6-fosfato es un sustrato de PFK-2 y a la vez
es un inhibidor potente de la fructosa 2,6-bifosfatasa.

Una fosfoprotena fosfatasa cataliza la desfosforilacin de PFK-2. As, en las clulas

hepticas se logra controlar la gliclisis mediante el glucagn, y la glucosa mediante el
control de la enzima bifuncional cuya actividad establece la concentracin de fructosa 2,6bifosfato en estado estable.
D-Regulacin de piruvato cinasa:
El tercer sitio de regulacin alostrica de la gliclisis es la reaccin catalizada por la
piruvato cinasa. Hay presentes cuatro isozimas diferentes de piruvato cinasa en los tejidos
de mamferos. Las isozimas que se encuentran en hgado, rin y glbulos rojos producen
una curva sigmoidal cuando se grafica la velocidad inicial en funcin de la concentracin
de fosfoenolpiruvato. Estas enzimas estn activadas alostricamente por la fructosa 1,6bifosfato y son inhibidas por ATP. En ausencia de fructosa 1,6-bifosfato, las
concentraciones fisiolgicas de ATP inhiben casi por completo a la enzima aislada. La
presencia de fructosa 1,6-bifosfato, que probablemente sea el modulador ms importante in
vivo, hace desplazar la curva hacia la izquierda. Cuando hay suficiente fructosa 1,6bifosfato, la curva se vuelve hiperblica.
La actividad enzimtica es mayor en presencia del activadoralostrico para diversas
concentraciones de sustrato. Recurdese que el fructosa 1, 6-bifosfato es el producto de la
reaccin catalizada por la PFK-1. Su concentracin aumenta cuando se eleva la actividad de
la PFK-1.

BALANCE ENERGETICO GLOBAL DE LA GLUCLISIS

La gliclisis es una secuencia de diez reacciones catalizadas por enzimas, con las
que la glucosa se convierte en piruvato, la conversin de una molcula de glucosa en dos
molculas de piruvato se acompaa de la conversin netade dos molculas de ADP en dos
molculas de ATP y la produccin de dos molculas de NADH. La mayor parte de las
enzimas de esta ruta se encuentra en todas las especies vivas, y estn en el citosol. La ruta
glicoltica es activa en todos los tipos celulares diferenciados en los organismos

multicelulares. En algunas clulas de mamferos (como lasde la retina y algunas clulas

cerebrales), es la nica ruta de formacin de ATP.
La reaccin neta de la gliclisis se ve en la siguiente ecuacin:

Se puede dividir en dos etapas: la etapa de hexosa y la etapa de triosa. En el paso 4,

se rompe el enlace C-3C-4 de fructosa 1,6-bifosfato y en adelante los productos
intermedios en la ruta son triosas fosfato.
Se forman dos triosas fosfato a partir de 1,6-bifosfato de fructosa. La
dihidroxiacetona fosfato se convierte en gliceraldehdo 3-fosfato en el paso 5, y el
gliceraldehdo 3-fosfato contina por la ruta. Todos los pasos en adelante, en la etapa de
triosa de la gliclisis son recorridos por dos molculas, por cada molcula de glucosa
metabolizada.
En la etapa de hexosa de la gliclisis, dos molculas de ATP se convierten en ADP.
En el paso de triosa se forman cuatro molculas de ATP a partir de ADP por cada molcula
de glucosa metabolizada. As, la gliclisis tiene un rendimiento neto de dos molculas de
ATP por molcula de glucosa.

Las primera y tercera reacciones de la gliclisis se acoplan a la utilizacin del ATP.

Estas reacciones de cebado ayudan a impulsar la ruta en la direccin de la gliclisis, porque
las reacciones inversas se favorecen termodinmicamente en ausencia de ATP. Dos
productos intermedios posteriores de la gliclisis tienen potenciales de transferencia de

grupo suficientes para permitir la transferencia de un grupo fosforilo al ADP, produciendo

ATP (pasos 7 y 10). El paso 6 se acopla a la sntesis de equivalentes reductores en forma de
NADH. Cada molcula de NADH equivale a varias molculas de ATP, y la ganancia neta
de energa en la gliclisis se debe principalmente a la produccin de NADH, estos
compuestos se reoxidan por la transferencia de electrones en la cadena respiratoria.

ENTRADA DE OTROS AZCARES EN LA VA GLILCOLTICA

Adems de la glucosa procedente de la degradacin de almidn y glucgeno, hay
otras hexosas de importancia, como la fructosa, que procede de la hidrlisis del azcar de
mesa y tambin de la fruta, la galactosa, que procede de la hidrlisis del azcar de leche
(lactosa), y la manosa, obtenida a partir de la digestin de polisacridos y glucoprotenas.
La fructosa es fosforilada en el msculo y convertida directamente a fructosa-6fosfato, siguiendo despus la va glucoltica gracias a la accin de la hexoquinasa. No
obstante, en el hgado la fructosa sigue una ruta ms compleja cuyo resultado final es la
produccin de dos unidades de gliceraldehido-3-fosfato que se incorpora a la ruta.
La galactosa se transforma en glucosa-6-fosfato, aunque este proceso parece simple
las enzimas de la glucolisis no son capaces de reconocer la configuracin de la galactosa, lo
que hace que el proceso sea catalizado por 5 enzimas. Una de las enzimas cataliza la
trasformacin de la galactosa-1-fosfato a su derivado de uridina fosfato, revelando el papel
que pueden jugar los nucleotidil-azcares en el transporte activo de determinado
metabolitos.
La manosa es fosforilada para rendir manosa-6-fosfato y a continuacin se produce
una isomerizacin hasta fructosa-6-fosfato.

ENVENENAMIENTO POR ARSENICO

El arsnico, como el fsforo, est en el grupo V de la tabla peridica. En
consecuencia, el arseniato (AsO4-3) es un anlogo del fosfato inorgnico. El arseniato
compite con el fosfato para el sitio de enlazamiento en la gliceraldehdo 3-fosfato
deshidrogenasa. Igual que el fosfato, el arseniato rompe el compuesto intermedio enzimatioacilo, rico en energa. Sin embargo, el arseniato produce un anlogo inestable del 1,3bifosfoglicerato, llamado 1-arseno-3-fosfoglicerato, que se hidroliza rpidamente al
contacto con el agua. Esta hidrlisis no enzimtica produce 3-fosfoglicerato y regenera el
arseniato inorgnico, que puede reaccionar de nuevo con un intermedio de tioacilo-enzima.
En presencia de arseniato, la gliclisis puede efectuarse a partir del 3-fosfoglicerato, pero se
salta la reaccin productora de ATP donde interviene el 1,3-bifosfoglicerato. El resultado es
que no hay formacin neta de ATP en la gliclisis. El arseniato es un veneno porque puede
sustituir al fosfato en muchas reacciones de transferencia de fosforilo. El arsenito, AsO2 ,
es mucho ms txico que el [Link] arsenito envenena por un mecanismo totalmente
diferente al del arseniato. El tomo de arsnico del arsenito se une fuertemente a los dos
tomos de azufre de la lipoamida y con ello inhibe a las enzimas que requieren a esa
coenzima