UNIVERSIDAD NACIONAL DEL LITORAL
FACULTAD DE Cs. VETERINARIAS
CTEDRA DE FISIOLOGATRABAJO PRCTICO N 10
TEMA: EXAMEN DEL LIQUIDO RUMINAL
El lquido ruminal puede extraerse por puncin, pero es mucho mejor extraerlo por sonda, la
cual posee en su extremo una rejilla con forma de tubo que impide que se adhiera a las
paredes del rumen, permitiendo mediante la accin del vaco (ejercido por una bomba de
Reufmen) su extraccin. El volumen optimo del lquido ruminal a extraer es de 500 ml a 1
litro.
PRUEBAS A REALIZAR
1- VERIFICAR EL COLOR
Vierta lquido ruminal en un tubo de ensayo hasta completar sus 2/3 partes. Observe el
color, normalmente es verde si el animal esta comiendo pasto. Cuando la alimentacin es
basada en ensilaje, el lquido es ms oscuro.
2- VERIFICAR EL OLOR
Normalmente es aromtico pero no desagradable.
3- VERIFICAR DENSIDAD Y CONSISTENCIA
Coloque lquido ruminal en una probeta de 200 ml hasta completar sus 2/3 partes,
determine la densidad con un densmetro. Para verificar la consistencia es preferible usar
lquido filtrado con papel o gasa, observando en el momento de filtrarlo, el modo en que cae
al recipiente. Coloque un poco de lquido ruminal entre sus dedos ndice y pulgar y
separndolos lentamente determine su viscosidad. Normalmente es algo viscoso debido a la
presencia de mucina aportada por la saliva.
4- VERIFICAR EL pH
Se puede medir con cintas reactivas o con un instrumento utilizado para tal fin
(peachmetro). Coloque lquido ruminal filtrado en un vaso de precipitado de 100 ml y mida
el pH, primero con cinta medidora y luego con peachimetro. Normalmente el PH del lquido
ruminal es de 5,5 a 7,5 dependiendo de:
* tipo de alimentacin
* actividad microbiana
* condiciones en que se tomo la muestra
Cuando usamos sonda se deber descartar los primeros 100 ml, en los que frecuentemente
existe gran cantidad de saliva.
Con una alimentacin basada en pastura o heno (alto contenido de fibra), el pH ruminal tiende
a la neutralidad, con valores de 6,8 a 7,0. La adicin a la racin de grandes cantidades de
hidratos de carbono fcilmente fermentescibles (granos molidos, balanceados), produce
altas concentraciones de cidos grasos voltiles (AGV) y cido lctico, que descompensan
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la funcin buffer y trae aparejado un descenso del pH pudiendo llegar a valores inferiores
a 5,4 y 6,0. Por el contrario, una sobrecarga proteica (pasturas jvenes, tortas de
oleaginosas), produce una liberacin excesiva de amoniaco con el consecuente incremento
del pH.
Existen variaciones horarias del pH dependiendo del momento en que se toma la muestra con
respecto al tiempo transcurrido desde la ultima ingesta. Un descenso paulatino comienza a
las dos horas, y los valores ms bajos se obtienen entre las 6 y 8 h desde la ultima comida.
Si el animal no ha comido por varias horas, es normal encontrar valores de pH de 8,0 a 8,2.
5- PRUEBA DE SEDIMENTACION - FLOTACION
Esta prueba nos permite determinar el grado de estratificacin que ocurre en el contenido
ruminal (los alimentos adquieren esta disposicin en el rumen de acuerdo con su peso
especifico) es un factor importante en la regulacin del pasaje del contenido
rumino-reticular al omaso y abomaso.
Se requiere lquido sin filtrar, que se coloca en una probeta y se lleva a bao termostatizado a
39 C.
Es posible observar dos fases o mas: en la parte superior, material grosero (flotacin), y en la
porcin inferior, el material fino ya desmenuzado (sedimentacin). El proceso se lee a los 4
a 8 minutos. Cuando la racin es escasa en fibra, el material grosero flotante disminuye.
6- FERMENTACION DE LA GLUCOSA
Esta prueba se realiza para determinar la tasa de fermentacin de los hidratos de carbono por
la micropoblacin del rumen. Para ello utilizaremos un SACAROMETRO que preparamos
de la siguiente manera: colocar lquido ruminal en un tubo hasta completar sus 2/3 partes;
agregar 1 ml de la solucin de glucosa al 16% . Para lograr anaerobiosis, colocar un tapn de
parafina. Llevar a bao termostatizado a 39 C durante 30 minutos. Transcurrido ese tiempo,
observar si hay presencia de burbujas de gas por debajo del tapn; normalmente aparecen
burbujas ocupando de 1 a 2 ml. Si la micropoblacin es inactiva no hay fermentacin, lo que se
traduce con ausencia de gas.
7- MEDIDA DEL POTENCIAL DE OXIDO REDUCCION
Normalmente el O2 es consumido por bacterias anaerobias y anaerobias facultativas del rumen
creando un potencial de oxido-reduccin negativo. A travs de la determinacin del potencial
redox, podemos evaluar la actividad bacteriana del lquido ruminal.
Llenamos dos tubos de ensayo con lquido ruminal hasta sus 2/3 partes. Uno lo utilizaremos
como testigo; en otro agregamos 1 ml de solucin de azul de metileno al 0,03 % y luego de
mezclar lo llevamos a bao termostatizado a 39 C. Si hay buena actividad microbiana se
reduce rpidamente el potencial redox y se decolora el azul de metileno antes de tres
minutos. Si la actividad microbiana es medianamente activa lo hace entre tres y seis minutos,
y si es escasa; luego de seis minutos.
8- EXISTENCIA Y ACTIVIDAD DE LOS PROTOZOARIOS
Coloque lquido ruminal sobre un portaobjetos utilizando una varilla de vidrio. Observe al
microscopio con una platina trmica en 100 aumentos. El examen microscpico es grosero y
nos indica la cantidad de protozoarios; la evaluacin es subjetiva y se hace adjudicando 1 a 3
cruces segn la cantidad por campo microscpico y su actividad. Normalmente la cantidad de
protozoarios es alta (1.000.000 x ml) y su actividad, intensa. Si bien la ausencia de protozoos
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en el rumen es compatible con la vida (a diferencia de lo que ocurre con las bacterias),
disminuye notablemente la digestibilidad y la calidad proteica.
9- ACTIVIDAD Y CONCENTRACION DE BACTERIAS
Con lquido ruminal filtrado se hace un extendido sobre un portaobjetos, se fija al aire y se
colorea con tincin de GRAM . Luego se observa la cantidad de G+ y G- (1.000.000.000 x
ml) que presenta en el campo y se determina el predominio. Normalmente es mayor la cantidad
de bacterias G-.
LIQUIDO RUMINAL - INFORME
MESA No
NOMBRES:
1- COLOR:
2- OLOR:
3- CONSISTENCIA:
4- pH:
5- SEDIMENTACIN - FLOTACIN:
6- FERMENTACIN DE LA GLUCOSA:
7- POTENCIAL DE OXIDO REDUCCIN:
8- EXISTENCIA Y ACTIVIDAD DE PROTOZOARIOS:
9- ACTIVIDAD Y CONCENTRACION DE BACTERIAS:
BIBLIOGRAFIA
Church, D. Fisiologa digestiva y Nutricinde los rumiantes. Vol. 1. Fisiologa Digestiva. Ed.
Acribia. 1974.
Material ofrecido por la ctedra.
