UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO
FACULTAD DE INGENIERA QUMICA
Escuela Profesional de Ingeniera Qumica
Materiales de laboratorio
y Normas de Seguridad
LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA
Profesora:
Ing. Herrera Snchez Sonia
Integrantes:
Alejos Gallo Mariana Alexandra
Cabrera Fernndez Aldo Leonardo
Chavarra Crdova Oliver Jess
2015
INDICE
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I.
II.
III.
Introduccin------------------------------------------------------------------------- 3
Objetivos ---------------------------------------------------------------------------- 4
Marco terico----------------------------------------------------------------------- 5
3.1 Normas de seguridad del laboratorio.4
3.2 Uniforme y cuidado personal del estudiante.7
3.3 Materiales y equipos usados en el desarrollo de las prcticas de
laboratorio..9
3.4 Esterilizacin..17
3.4.1 Mtodo de Esterilizacin
3.5 Desinfeccin..19
3.5.1 Mtodo de Desinfeccin
3.6 Diferencia entre Esterilizacin y Desinfeccin...21
IV.
V.
VI.
I.
Recomendaciones----------------------------------------------------------------- 24
Conclusiones-------------------------------------------------------------------------25
Bibliografa--------------------------------------------------------------------------- 26
INTRODUCCIN
Un laboratorio de microbiologa es un lugar convenientemente habilitado donde
se puede, manejar y examinar microorganismos. Este tipo de trabajo debe ser
llevado a cabo con una buena tcnica asptica y por tanto se requiere un
ambiente limpio y ordenado. Cuando manejamos cualquier tipo de muestra
debemos evitar que microorganismos ajenos a nuestros cultivos y presentes en el
ambiente se introduzcan en ellos contaminndolos, o que los microorganismos de
la muestra nos contaminen a nosotros. Por ello se debe trabajar en condiciones de
estabilidad. En el laboratorio de microbiologa encontraremos estas condiciones
bien en campanas de seguridad biolgica o bien en la proximidad de la llama de
un mechero de alcohol o de gas. Aunque los microorganismos que se manipulan
no se han considerados patgenos todos los cultivos de todos los
microorganismos deben ser manejados con precaucin por su potencial
patogenicidad. En resumen, nunca debe olvidarse la necesidad de cumplir estos
dos requisitos bsicos:
1.- Restringir la presencia de los microorganismos en estudio a sus recipientes y
medios de cultivo para evitar el riesgo de contaminarse uno mismo o a un
compaero.
2.- Evitar que los microorganismos ambientales (presentes en piel, pelo, aire,
ropa, etc.) contaminen nuestras muestras.
Adems de un ambiente microbiolgico, el laboratorio de microbiologa requiere
una instrumentacin bsica para llevar a cabo estudios elementales
II.
OBJETIVOS
1. OBJETIVOS GENERALES
Un objetivo general es el reconocimiento y utilidad de los diferentes
materiales y equipos que se utilizan en el laboratorio de microbiologa,
uniforme y cuidado personal del estudiante.
Otro objetivo general es el de tener el conocimiento sobre las normas de
Seguridad para prevenir todo tipo de accidentes ocasionados en el
laboratorio.
2. OBJETIVOS ESPECFICOS
Reconocer el ambiente del laboratorio de microbiologa, equipos y
materiales necesarios a utilizar en el desarrollo de la practica
Poseer un conocimiento general y uso adecuado de los materiales, equipos
utilizados en el laboratorio.
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El uso correcto del uniforme durante el desarrollo de la prctica a realizar.
III.
MARCO TERICO
1. NORMAS DE BIOSEGURIDAD
Bioseguridad
La seguridad biolgica o bioseguridad, es la aplicacin del conocimiento, de las
tcnicas y de los equipos necesarios para prevenir la exposicin del personal, del
rea de laboratorio y del medio ambiente a agentes potencialmente infecciosos o
biopeligrosos.
Agentes Biopeligrosos
Son todos aquellos agentes biolgicos y materiales que son potencialmente
peligrosos para los seres humanos, los animales y las plantas. Entre ellos
podemos citar: bacterias, virus, hongos, parsitos, productos recombinantes,
alergenos, priones, etc.
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Riesgo Microbiolgico
El Riesgo Microbiolgico se encuentra presente cada vez que se realiza una
actividad prctica en el Laboratorio, donde se requiera la manipulacin de cultivos
de microorganismos, los cuales pueden alcanzar concentraciones muy elevadas y
pueden llegar a provocar una infeccin si no son manipulados adecuadamente.
Para que se produzca un accidente por un agente biolgico deben estar presente
bsicamente 4 elementos: un husped susceptible, un agente infeccioso, una
concentracin suficiente de ste y una ruta de transmisin adecuada; siendo este
ltimo punto el que mejor se puede controlar en el laboratorio.
Vas de Infeccin
Los microorganismos pueden ingresar al organismo a travs de: la boca, los
pulmones, la piel (intacta o lesionada), la conjuntiva, etc. Las vas de
contaminacin ms frecuentes en el laboratorio se dan a travs de:
La boca
Comer, beber y fumar en el laboratorio.
Realizar transferencias con pipetas sin utilizar ningn tipo de proteccin.
Transferencia indirecta de microorganismos a travs de los dedos o
utensilios contaminados (lpices, bolgrafos, etc.).
La piel
Inoculacin accidental con una aguja hipodrmica u otros instrumentos
punzantes o de vidrio.
Los ojos
Salpicaduras de materiales infecciosos.
Transferencia indirecta de microorganismos a travs de los dedos
contaminados.
Los pulmones
Inhalacin de microorganismos transportados por el aire (aerosoles).
NORMAS DE SEGURIDAD EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGA
Entrar al laboratorio en forma ordenada, dejar las carteras, libros y otros
objetos personales en el lugar que se les indique para tal fin.
Llevar puesta la bata de laboratorio en todo momento. La misma debe
permanecer completamente cerrada.
Limpiar y desinfectar las superficies de trabajo, antes de comenzar y al
finalizar la sesin prctica.
Lavar las manos con agua y jabn antes de realizar las actividades
programadas, antes de salir del laboratorio y siempre despus de manejar
materiales que se sabe o se sospecha que son contaminantes.
Recoger el cabello largo.
Mantener el rea de trabajo ordenada, libre de libros, cuadernos u objetos
personales, exceptuando aquellos equipos y materiales necesarios para la
realizacin del trabajo prctico.
Tener cuidado con el alcohol cuando manipule el mechero. Nunca debe
dejar ste desatendido.
Regresar los reactivos y equipos empleados (microscopio, mechero, etc.),
limpios y de manera ordenada a su respectivo lugar una vez finalizada la
actividad. Reporte cualquier dao de los mismos al profesor.
Colocar los materiales de vidrio contaminados en los recipientes dispuestos
para tal fin, por ejemplo: las pipetas en los pipeteros, tubos y placas de Petri
en las ollas de desecho, etc.
No usar ningn reactivo que no est debidamente identificado, verificar las
etiquetas de los mismos y estar seguro de cmo emplearlo.
No devolver sustancias a sus envases originales.
Emplear la propipeta al medir lquidos. Est rigurosamente prohibido
pipetear con la boca. De igual manera las pipetas tendrn tapones de
algodn para reducir la contaminacin de estos dispositivos de pipeteo.
Realizar solamente aquellas actividades indicadas por el profesor, no llevar
a cabo experimentos no autorizados.
Reportar inmediatamente cualquier accidente al profesor (derrame de
material contaminado, heridas, quemaduras, etc.), ninguno puede ser
catalogado como menor.
Reducir al mnimo la formacin de aerosoles durante la realizacin de
cualquier trabajo prctico
Extremar las precauciones cuando se utilicen agujas y jeringas para evitar
la inoculacin accidental y la generacin de aerosoles durante su
manipulacin y desecho.
Emplear tcnicas aspticas para el manejo de cultivos de microorganismos.
MEDIDAS EN CASO DE EMERGENCIA
A continuacin mencionaremos los pasos que se deben seguir en caso de que
ocurran los siguientes accidentes:
Derrame de material biolgico sobre el cuerpo:
Remover la ropa inmediatamente.
Lavar vigorosamente el rea expuesta con agua y jabn por un minuto.
Reportar el incidente al profesor.
Buscar atencin mdica si es necesario.
La ropa contaminada debe ser colocada en una solucin desinfectante
antes de ser lavada.
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Salpicaduras en los ojos con materiales biopeligrosos:
Lavar inmediatamente el globo ocular e interior de la superficie del prpado
con abundante agua durante 15 minutos aproximadamente. Abrir el ojo para
asegurar efectivamente el lavado, comenzando por los prpados.
Reportar el incidente al profesor.
Buscar atencin mdica inmediatamente.
Cortadas menores y heridas por pinchazo:
Lavar vigorosamente la herida con agua y jabn por varios minutos.
Aplicar un antisptico adecuado
Reportar el incidente al profesor.
Buscar atencin mdica inmediatamente.
En el caso de derrames:
Reportar el incidente al profesor.
Colocarse guantes y cubrir con papel absorbente el rea del derrame.
Verter un desinfectante adecuado y dejar actuar por el tiempo necesario.
Retirar el material absorbente junto al material roto y colocarlos en un
recipiente para residuos contaminados o bolsa de desechos, la cual debe
esterilizarse junto con los guantes utilizados.
Limpiar y desinfectar nuevamente el rea empleando nuevas toallas de
papel y desinfectante.
Lavarse las manos con abundante agua y jabn
El xito de estas normas depende de la sinceridad, la constancia, la participacin
activa y cooperativa de cada estudiante, por ello antes de asistir al laboratorio,
deben leer el fundamento y las actividades a realizar, para as evitar posibles
accidentes, con el conocimiento y las tcnicas de trabajo apropiadas.
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2. MATERIALES USADOS EN LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA
2.1.
MATERIALES DE LABORATORIO:
PLACA PETRI
Es un recipiente redondo, de cristal o plstico, con una cubierta de la
misma forma que la placa, pero algo ms grande de dimetro, para que
se pueda colocar encima y cerrar el recipiente, aunque no de forma
hermtica. Es parte de la coleccin conocida como material de vidrio.
Se utiliza: en Microbiologa para cultivar clulas, observar la germinacin
de las semillas o examinar el comportamiento de pequeos animales.
TUBO DE ENSAYO
Es parte del material
de vidrio de un laboratorio
de qumica. Consiste en
un pequeo tubo cilndrico
de vidrio con un extremo abierto (que puede poseer una tapa) y el otro
cerrado y redondeado.
Se utiliza: en los laboratorios para contener pequeas muestras lquidas
o slidas, aunque pueden tener otras fases, como realizar reacciones
qumicas en pequea escala. Los tubos de ensayo estn disponibles en
una multitud de tamaos, comnmente de 1 a 2 cm de ancho y de 5 a
20 cm de largo.
GRADILLA
Es una herramienta que forma parte del material de laboratorio
(principalmente en laboratorios de biologa molecular, gentica y
qumica).
Es utilizada para sostener y almacenar gran cantidad de tubos de
ensayo o tubos [Link] principal funcin es facilitar el manejo de
los tubos de ensayo. Normalmente es utilizado para sostener y
almacenar este material. ste se encuentra hecho de madera, plstico o
metal; pero las ms comunes son las de madera.
PROBETA
Es un instrumento volumtrico que consiste en un cilindro graduado de
vidrio . Est formado por un tubo generalmente transparente de unos
centmetros de dimetro y tiene una graduacin desde 5 ml hasta el
mximo de la probeta, indicando distintos volmenes. En la parte inferior
est cerrado y posee una base que sirve de apoyo, mientras que la
superior est abierta (permite introducir el lquido a medir) y suele tener
un pico (permite verter el lquido medido). Generalmente miden
volmenes de 25 o 50 ml, pero existen probetas de distintos tamaos;
incluso algunas que pueden medir un volumen hasta de 2000 ml.
Permite contener lquidos y sirve para medir volmenes de forma
aproximada.
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ASA
BACTERIOLGICA O ASA DE PLATINO
Es un instrumento de laboratorio tipo pinza que consta de una base que
puede estar hecha de platino, acero, aluminio y un filamento que puede
ser de nicromo, tungsteno o platino que termina o en un arito de 5 mm o
en punta.
Se emplea para transportar o arrastrar o trasvasar inculos (pequeo
volumen que contiene microorganismos en suspensin) desde la
solucin de trabajo tambin llamada solucin madre al medio de
cultivo (slido o lquido) o de un medio a otro (resiembra). Tambin sirve
para la realizacin de frotis.
2.2.
EQUIPOS DE LABORATORIO:
INCUBADORA
Es un equipo que permite controlar temperatura, humedad para crear un ambiente
apto para el desarrollo y reproduccin de microorganismos vivos como: Cultivos
microbiolgicos, micolgicos, virales, entre otros.
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CONTADOR DE COLONIAS
Es un instrumento que se utiliza para contar colonias de microorganismos o
bacterias que crecen en una placa.
Las ventajas de este instrumento estn en el conteo fcil, rpido y seguro de las
colonias bacteriolgicas, as como su fcil manejo; convirtindose en un
instrumento indispensable en el laboratorio.
AUTOCLAVE
La autoclave es un equipo que se utiliza para esterilizar; es decir eliminar de forma
confiable toda forma de vida microbiana en los instrumentos usados en el
laboratorio. Son tambin llamados esterilizadores.
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MICROSCOPIO
Es un instrumento muy importante e indispensable en el laboratorio, ya que nos
permite ver microorganismos que el ojo humano no puede distinguir a simple vista,
por ser muy pequeos.
El ms utilizado es el de tipo ptico; este instrumento utiliza una o ms lentes para
conseguir una imagen aumentada del objeto en observacin.
BAO MARIA
Es tambin llamado bao serolgico, se utiliza para calentamiento indirecto por
conveccin trmica del medio.
Tambin es utilizado para procedimientos de incubacin, agitacin, inactivacin.
Se suele usar con agua, pero tambin se puede trabajar con aceite.
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ESTUFA DE SECADO U HORNO DE SECADO
La estufa de secado, como su mismo nombre lo indica se utiliza para secar y
esterilizar materiales de metal y vidrio utilizados en el laboratorio. Operan entre la
temperatura ambiente y los 350
El esterilizado que se realiza dentro de la estufa se llama Calor seco y se lleva a
cabo a 180
2.3.
por 2 horas.
UNIFORME
PERSONAL DEL ESTUDIANTE
CUIDADO
a) VESTIMENTA DURANTE LAS PRCTICAS
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La vestimenta deber ser apropiada para trabajar en el laboratorio. NO se
permite dejar al descubierto reas considerables de su piel cuando utiliza
pantalones, faldas o blusas cortas.
MANDIL DE LABORATORIO
Durante todo el tiempo que est llevando a cabo su ejercicio de
laboratorio, debe utilizar mandil de laboratorio. El mismo que tiene que
estar abrochado para que pueda proteger su ropa y su piel. Cada
estudiante deber adquirir su propio mandil para desarrollar su
respectiva prctica.
GUANTES DE PROTECCIN
El guante es una prenda cuya finalidad es la de proteger las manos o el
producto que se vaya a manipular. Conservar la integridad de las manos
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es de vital importancia por tal razn se deber utilizar el tipo de guantes
de acuerdo a la prctica de laboratorio programada.
COFIA
Es una gorra con vicera y malla; se utiliza para el manejo de alimentos y
algunos procesos de laboratorio, donde se requiere cubrir el cabello.
Es ms que todo utilizada por el personal femenino. Si el cabello esta
largo, se recomienda recogerlo con un gancho para evitar que el cabello
se salga de la cofia y caiga a los alimentos o contamine los procesos de
laboratorio.
MASCARILLA
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Las mascarillas quirrgicas estn principalmente destinadas a prevenir al
paciente de los agentes infecciosos procedentes del tracto respiratorio
del personal hospitalario y a los profesionales mdicos de los vertidos
lquidos potencialmente contaminados.
Limpieza: Conjunto de operaciones que permiten eliminar la suciedad visible o
microscpica. Estas operaciones se realizan mediante productos detergentes
elegidos en funcin del tipo de suciedad y las superficies donde se asienta.
Desinfeccin: Conjunto de operaciones que tienen como objetivo la reduccin
temporal del nmero de microorganismos vivos y la destruccin de los patgenos
y alterantes. Sin embargo, nicamente con la esterilizacin se obtendr un medio
completamente exento de grmenes.
DESINFECCIN
La desinfeccin es el procedimiento y uso de sustancias por las cual se eliminan o
inhiben microorganismos en superficies inanimadas, pero es su forma vegetativa
teniendo poca eficacia en esporas.
La eficacia del procedimiento de desinfeccin se ve determinada por:
Naturaleza del objeto a desinfectar
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El nmero y grado de resistencia de microorganismos
Cantidad de materia orgnica presente.
1. Desinfeccin de Alto nivel: Se utiliza esta desinfeccin para elementos
invasivos que no soportan los mecanismos de Esterilizacin. Tiene eficacia
mxima cuando se elimina todo resto de materia orgnica.
2. Desinfeccin de Medio Nivel: Se utilizan en materiales y equipos donde es
poco probable la contaminacin por esporas bacterianas.
[Link] de Bajo Nivel: Se utiliza en los materiales que no atraviesan
mucosas, solo contacto externo.
LASIFICACIN DE SPAULDING
La clasificacin de Spaulding es un criterio de indicadores para la desinfeccin,
que data y se rige desde 1968 en los objetos y materiales que se utilizan en el
mbito sanitario y hospitalario, que van a tener contacto con el paciente, tipificados
de acuerdo al riesgo de infeccin.
Nivel
Crtico
Tipo de
Equipo
Instrumento
inducido
directamente
en el torrente
sanguneo o
en zonas
estriles del
cuerpo.
Ejemplo
Instrumentales
quirrgicos,
cateterismos
cardacos;
Catteres IV,
etc.
Mnimo nivel
requerido
Esterilizacin
Objeto en
Endoscopios
Desinfeccin
Semicrtico contacto con
flexibles, tubos de Alto nivel
mucosa intacta endotraqueal,
(D.A.N.)
laringoscopios,
etc.
No Crtico Objeto en
contacto con
Manguito de
presin
sangunea,
Desinfeccin
de Mediano y
Bajo nivel
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Otoscopio, etc.
piel intacta.
Crticos: Penetran en los tejidos o cavidades. Normalmente deben estar
estriles.
Semicrticos: Entran en contacto con tejidos mucosos. Deben estar libre
de bacterias.
No Crticos: Deben por lo menos ser lavados, tienen contacto con piel
sana
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