Tema 3
Mutacin en microbios
No hay Gentica sin mutantes
La mutacin es el origen de toda variacin heredable
Mutacin
Alteracin heredable del genotipo
Genotipo
Constitucin gentica de una estirpe
Fenotipo
Carcter o conjunto de caracteres
experimentalmente detectable
Mutante
Estirpe con un genotipo diferente
del silvestre
Alelo
Cada una de las formas alternativas
del mismo gen
Nomenclatura
Bacterias:
Fenotipo RecAProtena RecA
Gen recA
Mutante recA
Levaduras:
Fenotipo SptProtena Spt6
Gen SPT6
Mutante spt6
Auxotrofa
Prdida de la capacidad para crecer en medio mnimo,
debido a una mutacin que impide la biosntesis de un
compuesto esencial
Fosforribosilpirofosfato
+
ATP
MM
Auxtrofo His-
Histidina
MM + His
Mutaciones condicionales:
Se manifiestan en determinadas condiciones
(restrictivas) pero no en otras (permisivas)
Mutacin termosensible
Temperatura permisiva: 30o
Temperatura restrictiva: 42o
RNA polimerasa II
Mutacin crosensible
Temperatura permisiva: 37o
Temperatura restrictiva: 20o
Mutacin letal condicional (ej. termosensible)
Lamarckismo: las mutaciones son consecuencia
de la seleccin
Darwinismo:la mutacin y la seleccin son
procesos independientes
(Jacques Monod: las mutaciones se producen con
ignorancia de sus efectos)
Cultivo de
E. coli
Suspensin de
fago T
Mezclar alcuotas
y sembrar
Hiptesis lamarckista
Cada bacteria individual tiene una probabilidad pequea, pero
finita, de mutar como respuesta a la presencia del fago
La mutacin se produce como consecuencia de la seleccin
Hiptesis darwinista
Las mutaciones se producen al azar, y la presencia del fago
se limita a ponerlas de manifiesto
La mutacin y la seleccin son sucesos independientes
Nature of mutation
Luria-Delbrck fluctuation experiment
Add
phage
Little variation from tube to tube
Add
phage
Great variation from tube to tube
Cultivos independientes
Cultivo
en masa
Bacterial Mutation is
Independent of Selection
Luria and Delbrck found that
the variance of the number of
mutants from small cultures
was larger than the variance
from large cultures.
This is consistent with the
first model, in which mutants
arise in the absence of
selection.
Selection is still very important,
but only after the mutation has
arisen, nor in favor the mutant
that will arise.
Small
Culture
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
# T1-r
1
0
3
0
0
5
0
5
0
6
107
0
0
0
1
0
0
64
0
35
Mean
11.4
Variance
694
Var/Mean
60.8
Large
Sample
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
Mean
Variance
Var/Mean
# T1-r
14
15
13
21
15
14
26
16
20
13
16.7
15
0.9
Nature of mutation
Lederbergs replica plating experiment
Acquired hereditary immunity
Random mutation
En cultivo, E. coli y otras especies bacterianas
tienen frecuencias de mutacin alrededor de 10-7
1 colonia = 106-107 clulas
Cultivo saturado en medio rico = 2-3 x 109 clulas/ml
Silvestre
Lac+
Mutacin
Mutante
LacReversin
Silvestre
(revertiente)
Lac+
Retromutacin
Reversin Lac-
Lac+
Supresin
Delecin
Fenotipo
Nulo
Efecto sobre
protena
Prdida de aminocidos
Posibilidad de desfase
Reversin
Nunca por retromutacin
Supresin por rodeo
Delecin
AUG UGG GGA CCC AAG GGU AGC CCU
Met Trp Gly Pro Lys Gly Ser
Pro
Delecin con desfase
AUG UGG GGA CCC AAG GGUA GCC
Met Trp Gly Pro Lys
Val Ala
Insercin
Fenotipo
Nulo
Efecto sobre
protena
Adicin de aminocidos (infrecuente)
Destruccin del gen (frecuente)
Reversin
Retromutacin
Supresin por rodeo
Desfase
Fenotipo
Nulo
Efecto sobre
protena
Cambio en la pauta de lectura
Terminacin prematura (frecuente)
Reversin
Retromutacin
Supresin intragnica
Desfase -1
AUG UGG GGA CCC AAG GGU AGC CCU
Met Trp Gly Pro Lys Gly Ser
Pro
AUG UGG GAC CCA AGG GUA GCC CC..
Met Trp Gly Pro Arg Val Ala ...
C
Desfase +1
AUG UGG GGA CCC AAG GGU AGC CCU
Met Trp Gly Pro Lys Gly Ser
Pro
AUG UGG CGG ACC CAA GGG UAG CCC
Met Trp Arg Thr Gln Gly Stop
Supresin intragnica de un desfase +1
C
AUG UGG GGA CCC AAG GGU AGC CCU
Met Trp Gly Pro Lys Gly Ser
Pro
AUG UGG CGG ACC CAA GGG UAG CCC
Met Trp Arg Thr Gln Gly Stop
AUG UGG CGG ACC CAA GGG UAG CCC
Met Trp Arg Thr Gln Gly Stop
AUG UGG CGG ACC CAA GGG AGC CCU
Met Trp Arg Thr Gln Gly Ser
Pro
Sustitucin de un par de nucletidos
Clases de sustituciones
Transicin A
C
Efectos de las
sustituciones
G
T
Transversin A
C, T
C, T
A, G
A, G
Ninguno (mutacin
silenciosa)
Cambio de un aminocido
Terminacin prematura
Sustitucin de un par de nucletidos
Caso 1: Mutacin silenciosa
AUG UGG GGA CCC AAG GGU AGC CCU
Met Trp Gly Pro Lys Gly Ser
Pro
AUG UGG GGG CCC AAG GGU AGC CCU
Met Trp Gly Pro Lys Gly Ser
Pro
AUG UGG GGA CCC AAA GGU AGC CCU
Met Trp Gly Pro Lys Gly Ser
Pro
AUG UGG GGA CCC AAG GGU AGU CCU
Met Trp Gly Pro Lys Gly Ser
Pro
Ej. valina
Ej. leucina
1 pareja
UUA
UUG
1 cuarteto
CUU
CUC
CUG
CUA
UUPu
CUX
1 cuarteto
GUX
GUU
GUC
GUA
GUG
Leu 6
Ser 6
Arg 6
Val
Pro
Thr
Ala
Gly
4
4
4
4
4
Ile
Tyr
His
Asn
Gln
Cys
Glu
Asp
Tyr
Asn
2
2
2
2
2
2
2
2
2
Met 1
Trp 1
Cambio de un aminocido
Fenotipo
Efecto sobre
protena
Reversin
Silencioso, rezumante o nulo
Sustitucin de un aminocido
Retromutacin
Supresin intragnica
Supresin intergnica
GUU
Val
AUU Ile
CUU Leu
UUU Phe
GUU
Val
GAU Asp
GCU Ala
GGU Gly
Supresin intragnica de una mutacin
de cambio de sentido missense
AUG
Met
UGG
Trp
GGA
Gly
CCC
Pro
AAG
Lys
GGU
Gly
AGC
Ser
CCU
Pro
AUG
Met
UGG
Trp
GGA
Gly
CUC
Leu
AAG
Lys
GGU
Gly
AGC
Ser
CCU
Pro
AUG
Met
UGG
Trp
GGA
Gly
CUC
Leu
AAG
Lys
GGU
Gly
AGA
Arg
CCU
Pro
Compensa el efecto de la primera mutacin
sobre la estructura de la protena
Supresin extragnica de una mutacin
de cambio de sentido (missense)
Gen 1
Gen 1
Gen 2
Gen 2
Supresin extragnica de una mutacin
de cambio de sentido (missense)
Gen 1
Gen 1
Gen 2
Gen 2
Terminacin prematura (nonsense)
Fenotipo
Nulo
Efecto sobre Finalizacin prematura de la traduccin
protena
(protena truncada)
Reversin
Retromutacin
Supresin extragnica por tRNAs
mutados
UGG
Trp
UUG
Leu
UCG
Ser
CAG
Gln
UAG
mbar
GAG
Glu
AAG
Lys
UAU
UAC
Tyr
AUG
Met
AUG
Met
UGG
Trp
UGG
Trp
GGA
Gly
GGA
Gly
CCC
Pro
CCC
Pro
AAG
Lys
UAG
Stop
GGU
Gly
GGU
AGC
Ser
AGC
CCU
Pro
CCU
AUG
Met
UGG
Trp
GGA
Gly
CCC
Pro
AAG
Lys
GGU
Gly
AGC
Ser
CCU
Pro
AUG
Met
UGG
Trp
GGA
Gly
CCC
Pro
UAG
Stop
GGU
AGC
CCU
AUG
Met
UGG
Trp
GGA
Gly
CCC
Pro
UAC
Tyr
GGU
Gly
AGC
Ser
CCU
Pro
Gln
Gln
GUC
GUC
tRNAGln
CAG
RNAm
Mutacin en un gen
de tRNAGln
tRNAGln con un
anticodn alterado
(GUC
AUC)
Gln
AUC
tRNAGln con un
anticodn alterado
(GUC AUC)
AUG
Met
UGG
Trp
GGA
Gly
CCC
Pro
UAG
Stop
GGU
AGC
CCU
AUG
Met
UGG
Trp
GGA
Gly
CCC
Pro
UAG
Gln
GGU
Gly
AGC
Ser
CCU
Pro
Terminacin
prematura
Terminacin
natural
UAG
UAG
RNAm
El tRNA supresor compite
favorablemente con los
factores de liberacin
El tRNA supresor compite
desfavorablemente con los
factores de liberacin
Otras interacciones genticas adems de la supresin):
Letalidad sinttica (fenotipo sinttico)
mutA
mutB
mutA mutB
Viable
Viable
No viable
(o crecimiento lento)
