Procariotas
Eucariotas
replication
Regulacin de la
expresin gnica en
procariotas
Diferencias entre la transcripcin
procariota y eucariota
ARNm policistrnico
ARNm monocistrnico
transcripcin y traduccin
acopladas
transcripcin y
procesamiento acoplados
ARN Polimerasa nica
3 ARN Polimerasas
diferentes
Regulacin de la expresin gnica
Ej: Metabolismo de azcares
Bacterias
Glucosa
Lactosa
Maltosa
Ramnosa
Galactosa
Rafinosa
Melibiosa
Xilosa
Clulas eucariotas
Glucosa
Las bacterias tienen vas catablicas para varios
azcares, si se expresaran todas implicara un
enorme gasto de energa.
El cambio en la expresin ocurre en pocos minutos.
Opern
Sistemas de regulacin
Unidad transcripcional que contiene:
genes estructurales que codifican para protenas
que cumplen funciones relacionadas
Prender y apagar ciertos genes o grupos de genes.
regiones regulatorias.
Mecanismo sensor que reconozca que enzimas se
necesitan en cada momento, (que genes deben ser
expresados).
Activacin y desactivacin del sistema en el tiempo.
Enz. 1
Enz. 2
Enz. 3
Induccin
Clasificacin de los operones
de acuerdo a su regulacin.
Ejemplo
Va metablica
Inducibles
Opern lactosa
Utilizacin de
nutrientes
(catabolismo)
Represibles
Opern triptofano
Biosntesis
Constitutivos
Metabolismo glucosa
Esenciales
(housekeeping)
INDUCCION sntesis aumentada en respuesta a un metabolito
Inductores gratuitos: metabolitos que inducen el sistema pero no
pueden ser metabolizados ( IPTG )
Represin
Opern lactosa
Inducible
Cuando hay lactosa
en el medio, se
expresan las
enzimas que
degradan la lactosa.
REPRESION sntesis reducida en respuesta a un metabolito
http://vcell.ndsu.nodak.edu/~christjo/vcell/animationSite/lacOperon/movie.htm
Opern lactosa
Los genes del metabolismo de la glucosa se
expresan en forma continua en E. coli
El metabolismo de los otros azcares como
fuentes energticas
est regulado, es inducible.
Lactosa = disacrido (glucosa + galactosa)
La lactosa estimula el aumento de 1000 X de
la expresin de 3 protenas.
-galactosidasa (lacZ)
glucosa + galactosa
Alolactosa Inductor
Permeasa (lacY)
lactosa
Transporta
lactosa a travs de la membrana
Transacetylasa (lacA) Funcin no conocida
Cis OPERON
Promotor
Operator
Secuencias codificantes
Terminador
Trans
Represor
Inductor
La regulacin se estudia mediante el efecto de
mutaciones en los distintos elementos del opern
Mutacin del gen lacZ, gen estructural
No hay actividad -galactosidasa.
Disminuye la produccin de permeasa
y transacetilasa.
-gal
Permeasa
Transac
Mutaciones en las regiones reguladoras
1.
F
C
Mutaciones en el operador (lacO)
lacO+
lacOc
lacZlacZ+
lacY+
lacY-
permease (slo con lactosa)
-galactosidasa (sin lactosa)
(expresin constitutiva)
2. Mutaciones en el promotor (Plac): Afecta la expresin de las 3
3. Mutaciones en el represor (lacI) Bacterias diploides (plsmido F)
F
C
lac I+
lacI-
lacO+
lacO+
Sin lactosa, no se produce galactosidase ni permeasa
Con lactosa, se producen galactosidase y permeasa
(la lactosa induce).
lacO acta en cis
El represor codificado
por lacI acta en trans
lacZlacZ+
lacY+
lacY-
Antecedentes
genticos para
el modelo del
operon.
Genotipo
+
I O Z
I O Z
I- Oc Z+
I+ Oc Z+
I- O+
Los signos + y se
+
c
refieren a la presencia I O
ausencia de actividad I+ O+
de -galactosidasa.
I+ O+
Z+ / F I+
Z+ / F O+
Z+ / F IZ+ / F Oc
c/lact: lactosa presente
Is O+ Z+
s/lact: sin lactosa
Is O+ Z+ / F I+
c/lact
s/lact
+
+
+
+
+
+
+
-
+
+
+
-
Organizacin del operon lac de E. coli wt
Estado funcional del operon lac de E. coli
wt en medio con lactosa
Estado funcional del operon lac de E. coli
wt en medio sin lactosa
Modelo de la protena tetrmero represor
lac (4 polipptidos)
Regulacin
Positiva
La protena CAP (Catabolite
activator protein) se une al
AMP cclico.
En el opern
lactosa existe
otro
mecanismo de
control
CAP se une a un sitio
blanco del promotor, cambia
la conformacin del ADN y
aumenta la afinidad de la
ARN Pol.
CAP-AMPc
Cuando la
lactosa es la
nica fuente de
carbono en E.
coli (medio sin
glucosa).
CAP-AMPc-DNA
Si hay glucosa y lactosa, se
usa preferencialmente la
glucosa porque los niveles
de AMPc son bajos.
Si se agrega AMPc al medio, se transcribe el operon lac aun
en presencia de glucosa.
CAP-AMPc-DNA
Secuencia del operon lac de E. coli.
Regulacin del operon lac
Operon Trp de E. coli
Operon triptofano Represible
Codifica 5 enzimas de la sntesis de triptfano
1. Represor/operador (70 X)
2. Atenuacin (8 10 X)
Trp presente: Las enzimas no se transcriben.
Trp presente: Represor activo. El Trp acta
como co-represor.
Trp ausente: Las enzimas s se transcriben.
Trp ausente: Represor inactivo.
Regulacin del operon Trp de E. coli
1. Represor / operador
Opern trp: control negativo,
con represin por producto
El triptofano es el co-represor
protein (enzyme) synthesis
trpR
P O
trpE
active repressor
no protein (enzyme) synthesis
Una secuencia leader y 5 protenas de la va del trp
El represor Trp se asocia al promotor en presencia
de producto
Organizacin de la regin
lder/atenuador del opern trp
Modelo de Atenuacin: Ausencia de Trp
Acoplamiento transcripcin-traduccin en bacterias
Opern trp:
trp: atenuacin
Modelo de Atenuacin: Presencia de Trp
ATENUACION
ANTITERMINACION
Secuencia de aminocidos de los
atenuadores (pptidos lder) de los
operones de E. coli
phe, his, leu, thr, e ilv.