-Sistema de digestin asistida por microondas.
Es una tcnica ms moderna que
ha sustituido a los mtodos clsicos. Las nuevas mejoras en los equipos
comerciales permiten la determinacin de un alto nmero de muestras en un
corto perodo de tiempo. Generalmente, estos sistemas son mucho ms
eficientes que la digestin hmeda abierta convencional.
La digestin por microondas es uno de los procedimientos estndar en la
preparacin de muestras para el anlisis elemental en qumica analtica. La
muestra es calentada en vasos cerrados transparentes a las microondas (MW)
junto con los cidos recomendados. Estas microondas interactan con los cidos
y sus soluciones acuosas (por rotacin de dipolos y conduccin inica)
resultando en un rpido calentamiento. La combinacin del calentamiento por
microondas con los recipientes de alta presin supera estas limitaciones,
permitiendo alcanzar muy altas temperaturas, en pocos minutos y con mezclas
simples, reducindose tanto los tiempos de digestin de horas a minutos como
la contaminacin, se requiere menos cantidad de reactivos y muestra, y se
consigue reducir la prdida de voltiles. La temperatura mxima de trabajo
normalmente est entre 180-220 C, dependiendo del tipo de muestra, siendo la
principal ventaja por tanto la alta eficacia en alcanzar esa temperatura. A esta
temperatura se produce la degradacin parcial o completa de la muestra,
adems de producirse un aumento de la presin debido a la evaporacin de los
cidos en la digestin durante la descomposicin de la matriz de la muestra. La
alta temperatura y presin del medio de la muestra de bajo pH aumentan tanto
la velocidad de la descomposicin trmica de la muestra como la solubilidad de
los metales en la solucin. Los reactivos ms utilizados para la mineralizacin de
las muestras en el horno de microondas son cido ntrico, cido clorhdrico y
agua oxigenada. Su eleccin depende del origen de la muestra. El tipo de cido
usado en el procedimiento puede tener importantes consecuencias en la etapa
de medida. En todas las tcnicas de espectrometra atmica, el HNO3 es el
reactivo ms adecuado, no se ha observado problemas analticos para
concentraciones de hasta 10-25% siempre y cuando su concentracin sea
similar a la de las soluciones de calibracin y muestra. El H2O2 es tambin muy
raro que d problemas analticos, aunque debe contener la mnima
concentracin posible de impurezas. Sin embargo, el uso del HCl puede ser
problemtico para algunas tcnicas, en este caso para el ICP-MS el uso del cido
clorhdrico es indeseable debido a la formacin de interferencias espectrales
poliatmicas. El uso del HF es tambin indeseable, porque no se debe utilizar
con el vidrio o el cuarzo. Como resultado, cuando el HF es usado en la etapa de
mineralizacin, tiene que ser eliminado antes de la introduccin de la muestra
en el ICP, o en sistemas de introduccin resistentes al HF, lo cul es ms costoso
y requieren tiempos de lavado ms largos.
El resultado tras la digestin es una disolucin acuosa cida de la
muestra,
adecuada
para
su
posterior
anlisis
mediante
tcnicas
espectroscpicas. La gran ventaja de la digestin con horno microondas frente
a la digestin en vaso abierto convencional es la posibilidad de controlar de forma
precisa parmetros como la presin o la temperatura, o la posibilidad de digerir
la muestra en tiempos muy reducidos, ya que la velocidad de calentamiento
dentro del horno es muy alta.
A pesar de que se puede realizar en vasos abiertos o cerrados, se prefiere
el sistema cerrado normalmente como se muestra en la Fig. 8. En este trabajo
utilizamos la digestin asistida por microondas en vasos cerrados.
Ventajas:
Relativamente rpida.
Descomposicin de la muestra completa.
Menor riesgo de contaminacin.
Vasos cerrados. No prdida de elementos voltiles.
Temperaturas y presiones de digestin pueden ser controladas.
Desventajas:
Relativamente alto coste.
Aplicaciones: el digestor asistido por microondas se puede utilizar para
mineralizar todas aquellas muestras slidas de las cuales queramos
obtener
informacin
nivel
elemental
mediante
tcnicas
espectroscpicas, las cuales requieren que la muestra est en estado
lquido. Algunos campos de aplicacin son: medioambiente, agricultura,
alimentacin, plsticos, industria petroqumica, industria geoqumica,
metales, cermica, etc.
En la Fig. 8. se muestra el digestor asistido por microondas utilizado en la
realizacin de este trabajo.
Fig. 8.
Digestor asistido por microondas MARSXexpress. Capaz de procesar hasta 40 muestras
simultneamente, no requiere conexiones ni herramientas, garantiza un control exacto de la temperatura
interna y permite regular la presin sin conexiones.
-ICP-MS. Se utiliza rutinariamente en diversos campos de investigacin,
incluyendo ciencias de la alimentacin. Las altas temperaturas alcanzadas en un
ICP, hasta 8000-10000 K, lo convierten en el atomizador y en el elemento
ionizador disponible ms verstil, ya que ningn material puede soportar esa
temperatura. El ICP-MS utiliza un plasma de argn para vaporizar, atomizar e
ionizar las especies elementales de una muestra en disolucin y utiliza una
deteccin espectral.
Los componentes de la muestra se ionizarn por efecto de un plasma de
argn (plasma: volumen de gas con parte de sus tomos o molculas ionizados).
Estos iones producidos sern separados en base a su relacin masa/carga en
un espectrmetro de masas y posteriormente cuantificados por un detector
multiplicador de electrones. Esta tcnica tiene una amplia aplicacin en la
determinacin de elementos de inters medioambiental, pudiendo analizar ms
de 70 elementos de forma simultnea.
La tcnica de espectrometra de masas con plasma de acoplamiento
inductivo, es una variante de las tcnicas de anlisis por espectrometra de
masas. Las ventajas principales de esta tcnica radican en la alta precisin,
bajos lmites de deteccin y bajo coste econmico, analizando la mayora de los
elementos e istopos presentes en la tabla peridica de manera simultnea en
no ms de un par de minutos. Es por lo tanto una tcnica ideal en el anlisis de
aguas, lixiviados de rocas y minerales, alimentos etc. Adems, desde los ltimos
aos la utilizacin del LASER acoplado al ICP-MS, permite el anlisis de
elementos trazas y tierras raras en minerales, fsiles, metales, semiconductores,
etc, en un rea de muestra de hasta 50 m. La tcnica de ICP-MS combina dos
propiedades analticas que la convierten en un potente instrumento en el campo
del anlisis de trazas multi-elemental. Por una parte obtiene una matriz libre de
interferencias debido a la eficiencia de ionizacin del plasma de Ar y por otra
parte presenta una alta relacin seal-ruido caracterstica en las tcnicas de
espectrometra de masas. El plasma de acoplamiento inductivo de argn es
usado como una fuente muy eficaz de iones en su estado M+. El espectro de
masas de esta fuente de iones es medido por medio de un espectrmetro de
masas cuadrupolar.
A continuacin se procede a realizar una descripcin de las distintas
partes del equipo:
1) Introduccin de la muestra:
Nebulizador: la muestra lquida es introducida en la corriente de
gas en forma de aerosol. La funcin del nebulizador es crear un
aerosol con gotitas de tamao pequeo y uniforme, puesto que
solo las gotitas pequeas se transportan al plasma.
Existen diferentes tipos de nebulizadores en funcin de sus
caractersticas:
- Eficacia segn caudal de la muestra.
- Tolerancia a slidos suspendidos o disueltos.
- Tolerancia a cidos y bases fuertes y a solventes orgnicos.
-
Diferentes posibilidades de que las muestras puedan
causar efecto memoria.
- Capacidad de aspiracin.
Fig. 9. Nebulizador.
Spray chambers: separa y desecha las grandes gotas de disolucin
que se han formado, para que solo las pequeas se encuentren en
suspensin en el flujo de gas y alcancen el plasma.
Fig. 10. Spray chambers.
2) Fuente de ionizacin:
Antorcha: consiste en tres tubos concntricos de cuarzo a travs
de los cuales fluyen corrientes de argn. La antorcha est rodeada
por una espiral de 2-4 vueltas, la cual genera una radiofrecuencia,
un campo electromagntico. En ella se genera el plasma y se
produce la ionizacin de la muestra.
Fig. 10. Antorcha.
Fig. 11. Plasma.
Un plasma es cualquier volumen de gas con parte de sus
molculas o tomos ionizados, es una mezcla gaseosa conductora
de la electricidad que contiene cationes y electrones. Se produce
porque una chispa de alto voltaje provoca iones de Ar+ y e- en las
paredes del tubo ms externo de la antorcha creando el plasma.
La radiofrecuencia origina colisiones no elsticas entre Ar+ y e-,
dando lugar a ms iones de Ar. La interaccin campo-ioneselectrones genera movimiento de las especies en juego. La
resistencia al movimiento genera calentamiento. En el ncleo del
plasma se alcanzan temperaturas de 10.000 K. El plasma de Ar
excita los iones positivos de los tomos de la muestra. Conociendo
la temperatura en el canal central y los valores de las primeras
energas de ionizacin, se sabe que la mayora de los elementos
se ionizarn.
Los espectrmetros de masas trabajan a baja presin (alto
vaco). El mantenimiento de una alta presin en la regin del
analizador es esencial para reducir el fondo y los efectos de
dispersin que causaran altos niveles de molculas residuales de
gas. La configuracin preferida es la de tres etapas diferenciadas
por sistemas de bombas de vaco, que comprenden la zona de la
interfase, la inmediata anterior al analizador y la zona del
analizador, en las que las presiones son progresivamente ms
bajas. El vaco en la interfase se consigue mediante una bomba
rotatoria, que se desconecta cuando el equipo est en standby, lo
cual permite el fcil acceso a esta zona para su mantenimiento. El
vaco en las otras dos zonas se obtiene gracias al bombeo de dos
bombas turbomoleculares separadas o por una sola bomba dual.
3) Interfase de extraccin: la interfase comprende una etapa de bajo vaco
localizada entre dos placas cnicas de metal conocidas como Cono
Sampler (cono de muestreo) y Cono Skimmer (cono de separacin) que
llevan perforados un pequeo orificio. El trmino interfase es aplicado a
estos conos y al espacio formado entre ellos.
El papel de la interfase es extraer una porcin representativa de la
poblacin de iones del plasma y transferirla eficientemente a las regiones
de alto vaco, donde se encuentran las lentes de enfoque, el
espectrmetro de masas y el detector.
Cono Sampler: es un cono de nquel con un pequeo orificio central
(1 mm), a travs del cual pasa el plasma a una cmara con una
presin de 10 mbar, all se produce una expansin rpida del gas
que provoca su enfriamiento.
Cono Skimmer: una fraccin del gas pasar a este cono o cono
separador que es tambin de nquel y a travs del cual el plasma
pasar a una cmara mantenida a la presin del espectrmetro de
masas. En ella el gas es separado de los iones positivos y
bombeado hacia fuera. Los cationes son enfocados al MS a travs
de las lentes inicas.
4) Celda de colisin/reaccin: octapolo.
La celda de colisin/reaccin consiste en un octopolo (ORS) en el
que se eliminarn las interferencias poliatmicas por el efecto de:
Hidrgeno: gas reactivo, que reacciona con las interferencias.
Helio: gas inerte que colisiona con los interferentes.
Las principales fuentes de interferencias espectrales en ICP-MS son:
a) Superposicin directa de un elemento diferente con un istopo de
la misma masa nominal, es una interferencia isobrica. Sn-114
con Cd-114.
b) Superposicin de un in poliatmico formado por la combinacin
de especies derivadas del gas del plasma, disolvente de la
muestra y/o matriz de la muestra. Ca40O16 con Fe56.
c) Especies dobles cargadas formadas por la prdida de dos
electrones en vez de uno. El cuadrupolo separa los iones en base
a su relacin m/c, as un in doble cargado tendr la masa M/2.
As 136Ba2+ se solapa con 68Zn+.
5) Lentes Inicas: las lentes inicas son placas electrostticas situadas en la
zona intermedia, que enfocan el haz de iones que proviene del skimmer,
se les aplica un voltaje que har que los iones positivos del plasma sean
atrados y puedan ser manipulados en la trayectoria requerida. Adems
de dirigir y enfocar los iones, el sistema de lentes inicas es responsable
de separar los iones de las especies neutras y de los fotones gracias a los
campos electrostticos creados.
6) Espectrmetro de masas: cuadrupolo.
Son cuatro barras de metal que se encuentran paralelas y
equidistantes, a las cuales se les aplica un potencial de corriente continua
y un potencial de radiofrecuencia. La combinacin de estos campos hace
que solo aquellos iones de una determinada relacin m/z tengan una
trayectoria estable y lleguen al detector. Por lo tanto, el cuadrupolo
separa los iones en base a su relacin m/z.
7) Detector: multiplicador de electrones.
Cuando los iones chocan con su superficie se originan electrones
secundarios que se movern, debido al cambio de potencial, hacia otras
zonas donde originarn ms electrones secundarios, los cuales
provocarn una seal elctrica.
Ventajas que posee el ICP-MS como:
Alta precisin de cuantificacin.
Bajos lmites de deteccin.
Costes econmicos razonables, salvo en la preparacin de las muestras
y en el Ar del plasma.
Anlisis de la mayora de los elementos e istopos (elementos con distinta
masa y en definitiva distinto nmero de protones) de la tabla peridica de
manera simultnea en 5 minutos, aunque no analiza elementos inferiores
al Na, salvo Li, B, y Be.
Alta sensibilidad.
Cuantificacin de mltiples elementos.
Gran rango dinmico.
En la Fig. 12. se muestra el espectrmetro de masas con fuente de plasma
de acoplamiento inductivo de cuadrupolo utilizado en la realizacin de este
trabajo.
Fig. 12. Espectrmetro de masas con fuente de plasma de acoplamiento inductivo de cuadrupolo,
modelo 7500a (Agilent Techologies, Ca, EE.UU) equipado con un nebulizador Babington, una
cmara de pulverizacin de cuarzo refrigeracin Peltier y una antorcha estndar (2,5 mm de
dimetro interno).
