FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES Y EXACTAS
DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA
Lisbeth Correa Melo. MSc. Maria Elena Cuellar MSc.
Laboratorio # 1
EL MICROSCOPIO COMPUESTO
INTRODUCCIN
El Microscopio es un instrumento ptico que permite observar, medir y cuantificar objetos y
organismos muy pequeos. El microscopio tiene dos propiedades importantes: el
aumento y la resolucin. El poder resolutivo es la capacidad que tiene un microscopio (o
el ojo humano, etc.) de percibir por separado dos puntos pequeos, adyacentes y cercanos,
es decir, la capacidad para percibir detalles. El poder resolutivo aumenta a medida que
disminuye la distancia que separa dichos puntos. Es decir, si dos puntos distan 1 cm uno del
otro y yo los veo como un solo punto borroso tendr menor poder resolutivo que alguien
que los distingue por separado o que distingue perfectamente puntos que distan de 0,5 cm
entre s. Cuanto mayor sea el poder resolutivo, mayor ser la definicin de un objeto. Los
microscopios de gran poder resolutivo son especialmente buenos para ver pequeas
estructuras.
El poder de aumento se define como la relacin entre el dimetro aparente de la imagen y
el dimetro o longitud del objeto. Esto quiere decir que si el microscopio aumenta 100
dimetros un objeto, la imagen que estamos viendo es 100 veces mayor que el tamao real
del objeto. Para calcular el aumento de un microscopio, basta multiplicar el aumento del
ocular por el aumento del objetivo. Por ejemplo, si estamos utilizando un ocular de 10X y un
objetivo de 45X, el aumento a que estamos viendo la preparacin ser: 10X x 45X = 450X,
lo cual quiere decir que la imagen del objeto est ampliada 450 veces.
Existen diferentes tipos de Microscopios los cuales varan en su poder de resolucin y
aumento Los rangos aproximados de magnificacin se encuentran entre 4X y 40X
(Microscopio Estereoscpico), 20X - 25X (Microscopio Simple o Lupa), 40X - 1500X
(Microscopio Compuesto), 10.000X - 16.000X (Microscopio Electrnico), donde X es el
nmero de veces que se aumenta el tamao real del objeto. Adems de estos existen
algunos Microscopios especiales como los Microscopios de Contraste de Fase y los
Microscopios invertidos.
OBJETIVO
Al finalizar la prctica el estudiante estar en la capacidad de:
1. Adquirir de experiencia sobre el uso y cuidado del microscopio.
2. Reconocer los nombres de las diferentes partes del microscopio y sus funciones
3. Observar objetos y preparar materiales para la observacin, as corno el ajuste
y enfoque correctos.
4. Aplicar las diferentes formas de medir los tamaos de los objetos microscpicos.
MATERIALES
Suministrado por el laboratorio: Microscopio, papel milimetrado, papel peridico, papel de
revista, cristales de azcar.
Cada estudiante debe traer: lminas portaobjetos y cubreobjetos, tijeras.
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PROCEDIMIENTO
1. Disposicin del Microscopio : tome el microscopio con ambas manos de tal forma que
una lo sostenga por el Brazo, y la otra por debajo de la Base; para descargarlo
suavemente sobre la mesa de trabajo. Encindalo con la menor intensidad lumnica sin
mover ni golpear cuando est encendido.
2. Partes del Microscopio: Utilizando la figura 1 distinga los nombres de las distintas
partes del Microscopio localizndolas en su propio aparato: oculares, objetivos, revolver
o porta objetivos, diafragma-iris, condensador, fuente de iluminacin, base, brazo,
platina, carro mecnico, tornillo macro y micromtrico. Es importante saber que las
partes varan de un instrumento a otro.
Figura 1. Microscopio compuesto y sus partes
Lente Ocular: Conjunto de lentes especializadas en aumentar la imagen previamente
formada por el objetivo. Puede desmontarse a intercambiarse por otros con diferentes
aumentos o funcionalidades, agujas para sealar, retculos para recuento.
Porta-ocular: donde estn ubicados los oculares y por cuyo interior avanza la luz hasta
estos.
Revolver: mecanismo giratorio en el que se pueden situar varios objetivos (4x, 10X,
40x, 100x) de manera que se consigan diferentes aumentos.
Lente Objetivo: conjunto de lentes responsables de aumentar y resolver el objeto a observar.
Muestra: objeto a observar que se coloca sobre una lmina de cristal (portaobjetos) y bajo
otra an ms fina (cubreobjetos) la muestra ha de ser tan fina (transparente) que la luz
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la atraviese. En algunos casos se debe usar colorantes.
Platina: soporte de la muestra. Puede acercarse mediante tornillos de enfoque
grueso (macromtrico) o fino (micromtrico), y puede desplazarse con ayuda del tornillo o
carro mvil.
Condensador: conjunto de lentes que focalizan la luz sobre la muestra.
Diafragma: sistema para controlar la cantidad de luz que llega al objeto. De esta manera se
puede controlar la definicin que en muchas ocasiones se consigue reducindola intensidad.
Ahora coloque el objetivo de menor aumento (el ms pequeo), hacindolo rotar
nicamente desde el revlver. Grade la intensidad de luz reflejada usando el
regulador de luz y el condensador. Observe a travs del microscopio y ajuste el
diafragma, de manera que el campo visual se encuentre iluminado en forma homognea. Si
el ocular o el objetivo se encuentran empolvados o empaados, lmpielos cuidadosamente
con una porcin de papel lente. NO USE en ningn caso, otro tipo de material para tal
efecto. Si la visin no se aclara consulte al profesor.
Preparacin de materiales : Los materiales para observacin microscpica se colocan
en una lmina de vidrio que generalmente es de 1 x 3 y tiene el nombre portaobjeto y
se cubren con laminillas cubreobjetos. Tanto estas como el porta-objetos deben estar
limpios. La limpieza del portaobjetos debe hacerse con agua y sostenindolo por los bordes
y luego se frota suavemente con una toalla de papel absorbente para secarlo. Los cubreobjetos son muy frgiles y por tanto deben manejarse con mucho cuidado, su limpieza
debe hacerse en, forma similar a la descrita antes teniendo as mismo el cuidado de no tocar
la superficie con los dedos.
Prepare el siguiente montaje: Corte un cuadro de papel peridico que tenga
aproximadamente 1 cm2 y que contenga la letra e tamao 10 en cualquier estilo. Colquelo
luego en el centro del portaobjetos y ponga una o dos gotas de agua sobre el papel. Despus
de esperar unos segundos hasta que el agua haya empapado el papel, coloque el
cubreobjetos sobre la preparacin, presione suavemente el montaje con la goma del
borrador evitando as que queden burbujas de aire que puedan dificultar la observacin.
Otro mtodo para eliminar burbujas de aire y secar el montaje del exceso de lquido, es
envolver el montaje en el papel adsorbente (tipo sndwich) hacindole una ligera presin
con su dedo pulgar al cubreobjetos.
Como enfocar el microscopio: Coloque su preparacin sobre la Platina en forma tal que el
objeto a observar quede justamente encima de la abertura y luego fije la lmina mediante
las pinzas que hay en la Platina. Enfoque con la ayuda del movimiento de los tornillos
macro y micromtricos. Es importante tener en cuenta que siempre que se haga una
observacin al Microscopio debe usarse en primer lugar el objetivo de menor aumento 4X.
Para continuar observando en un mayor aumento solo rote el revlver hasta que se
encuentre en posicin el siguiente objetivo de mayor aumento, enfoque suavemente con el
tornillo micromtrico evitando quebrar las lminas.
Ahora usando el montaje anterior y teniendo en cuenta que a simple vista debe ver la letra
e al derecho antes de comenzar a observar a travs del microscopio, mueva la lmina
sobre la platina de derecha a izquierda y haca delante y hacia atrs. Ahora cambie
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progresivamente el objetivo hasta llegar al de 40X. Responda las preguntas en la hoja de
respuestas. Retire la preparacin cuidadosamente y consrvela para observaciones
posteriores.
3. Medidas microscpicas: La unidad de longitud ms frecuentemente usada en
microscopa es la micra o micrn m que equivale a 1/1000 mm o 1/1'000.000 m. En los
laboratorios de investigacin se utiliza un instrumento, el micrmetro o retculo
micromtrico, sin embargo, es posible estimar el tamao de los objetos microscpicos
conociendo el dimetro del campo, correspondiente a cada objetivo.
Realice el montaje de un pedazo de papel milimetrado, enfoque y mida el dimetro del
campo correspondiente al objetivo de menor aumento (4X) en milmetros y su conversin
en micras. Haga lo mismo con el objetivo de 10 X.
4. Observacin de cristales de Azcar
Sobre un portaobjetos deposite unos cuantos granos de azcar, en este caso no cubra la
muestra con la laminilla. Monte en el microscopio y observe con los objetivos 4X y 10X.
BIBLIOGRAFA
BINNIG, G & H. ROHRER 1985. Microscopio de efecto tnel. Investigacin y Ciencia, octubre
de 1985. Pg. 30.
HAWELLS, M.R. & J. KIRZ. 1991. Microscopia de Rayos X. Investigacin y Ciencia. Abril
1991. Pg. 52.
LICHTMANN, J, W. 1994. Microscopia cofocal. Investigacin y Ciencia, Octubre 1994. Pg.
20.
MADER, SILVIA 2004. Biologa (captulo 1 pginas 1 a 4) McGraw Hill.
WICKRAMASINGHE, H. K. 1989. Microscopio de sonda de barrido. Investigacin y Ciencia.
Diciembre 1989. Pg. 28.
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LABORATORIO # 1
MICROSCOPIO COMPUESTO: DIBUJOS, RESPUESTA A PREGUNTAS Y EJERCICIOS
Sobre el enfoque del microscopio:
1. Con respecto al punto 4, responda: describa la posicin de la letra e.
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2. A medida que cambia de objetivos, como es el campo de observacin? Porque?
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3. Dibuje la letra
e conservando las proporciones observadas en los campos de los
objetivos 4x, 10x y 40x, indique a la derecha del crculo el aumento al que fue
dibujado.
Describa y compare lo observado con cada uno de los campos de observacin
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Sobre las medidas microscpicas:
1. Realice dibujos del papel milimetrado de lo observado en 4X y 10X
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2. Con el dato obtenido al medir con el papel milimetrado el dimetro del objetivo de menor
aumento, es posible determinar el dimetro del campo correspondiente a cualquiera de
los objetivos pticos de mayor aumento as:
Razn de magnificacin =
Objetivo de trabajo de mayor aumento 40 o 100X
Objetivo de menor aumento (4 o 10X)
Dimetro del campo del objetivo 40 o 100X = Dimetro objetivo menor aumento
Razn de magnificacin
Ejemplo hipottico
Tomemos el campo de 10X como ejemplo y su dimetro equivalente a 1000 m
Razn de magnificacin = 40 = 4
10
Dimetro del campo para el objetivo de 40x = 1000 m
4
= 250 m
R/ El dimetro del objetivo de 40x es de 250 m o 0.25 mm.
As se hace para cada campo de observacin. Ahora, con sus propios datos realice (en el
espacio en blanco), los clculos para los objetivos de 40 y 100X y complete la tabla que se
encuentra en la prxima pgina.
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Tabla 1. Aumentos, dimetros y reas aproximadas de los campos de observacin
usando los diferentes objetivos.
Dimetro aproximado de los
campos de observacin
Aumento
Objetivo
Ocula
r
Total
Objetivo
4X
10 X
40X
4X
Dimetro
(mm)
Dimetro
(m)
rea de los campos de observacin (mm2)
3. Cul el dimetro horizontal de la letra e observada anteriormente en milmetros y en
micras? mm _______________________ m ____________________.
Sobre el poder de resolucin:
1. Monte ahora un pedazo de un grabado de una revista. Registre el nmero puntos
promedio que puede ver en el campo del objetivo de 4X ____, 10X ____, 40 X _____.
Qu distancia hay aproximadamente entre cada dos puntos con el objetivo 10X?
_______.
2. Realice dibujos de lo observado en 4X y 10X
3. Cul es tu conclusin de este ejercicio respecto al poder de resolucin?
Sobre la observacin de cristales de azcar:
1. Realice dibujos de lo observado en 4X y 10X
2. Qu forma geomtrica tienen los cristales de NaCl
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3. Qu diferencia hay al observar los cristales con cada objetivo
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Carrera:______________________________________
NOMBRES COMPLETOS Y CODIGO:
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Fecha: _________________________
