Prctica No.
1
Determinacin cuantitativa de Bilirrubina total y directa
Objetivo:
Realizar el mtodo
Fundamento
La bilirrubina se convierte en azobilirrubina mediante el cido sulfanlico diazotado
midindose fotomtricamente. De las dos fracciones presentes en suero, bilirrubinglucurnido y bilirrubina libre ligada a la albmina, solo la primera reacciona en
medio acuoso (bilirrubina directa) precisando la segunda la solubilizacin con
dimetilsulfxido (DMSO) para que reaccione (bilirrubina indirecta). En la
determinacin de la bilirrubina indirecta se determina tambin la directa,
correspondiendo el resultado a la bilirrubina total. La intensidad del color formado
es proporcional a la concentracin de bilirrubina presente en la muestra ensayada.
Introduccin
La bilirrubina total e indirecta generalmente se mide para detectar o monitorear
problemas en el hgado o la vescula biliar. Las cantidades grandes de bilirrubina
en el cuerpo pueden llevar a que se presente ictericia.
Este examen sirve para determinar si se tiene una enfermedad heptica o una
obstruccin en las vas biliares
El metabolismo de la bilirrubina comienza con la descomposicin de los glbulos
rojos en muchas partes del cuerpo. Los glbulos rojos contienen hemoglobina, la
cual se descompone en hemoglobina; la hemoglobina se transforma en bilirrubina,
la cual luego es transportada por la albmina en la sangre hasta el hgado.
En el hgado, la mayor parte de la bilirrubina se adhiere qumicamente a otra
molcula antes de ser liberada en la bilis. Esta bilirrubina conjugada" (adherida)
se denomina bilirrubina directa; mientras que la bilirrubina no conjugada se llama
bilirrubina indirecta. La bilirrubina total en el suero equivale a la bilirrubina directa
ms la bilirrubina indirecta.
La bilirrubina conjugada es excretada en la bilis por el hgado y almacenada en la
vescula biliar o transferida directamente al intestino delgado. La bilirrubina es
descompuesta posteriormente por bacterias en los intestinos y esos productos de
la descomposicin contribuyen al color de las heces. Un pequeo porcentaje de
estos compuestos es reabsorbido de nuevo por el cuerpo y finalmente aparece en
la orina.
La bilirrubina se origina por la degradacin de la hemoglobina. Es transportada del
bazo al hgado y se excreta en la bilis. La hiperbilirrubinemia es el resultado de un
incremento de la bilirrubina en plasma. Causas ms probables de la
hiperbilirrubinemia: Bilirrubina Total: Aumento de la hemlisis, alteraciones
genticas, anemia neonatal, alteraciones eritropoyticas, presencia de drogas.
Bilirrubina Directa: Colestasis heptica, alteraciones genticas y alteraciones
hepticas. El diagnstico clnico debe realizarse teniendo en cuenta todos los
datos clnicos y de laboratorio.
La bilirrubina se convierte en azobilirrubina mediante el cido sulfanlico diazotado
midindose fotomtricamente. De las dos fracciones presentes en suero,
Bilirrubina- glucurnido y bilirrubina libre ligada a la albmina, slo la primera
reacciona en medio acuoso (bilirrubina directa) precisando la segunda la
solubilizacin con cafena para que reaccione (bilirrubina indirecta). En la
determinacin de la bilirrubina indirecta se determina tambin la directa,
correspondiendo el resultado a la bilirrubina total. La intensidad del color formado
es proporcional a la concentracin de bilirrubina presente en la muestra ensayada.
La bilis es el subproducto liberado por el hgado que contiene bilirrubina, as como
tambin colesterol, sales biliares y otros productos de desecho. Si los conductos
biliares estn bloqueados es debido a causas como clculos biliares, el pncreas
o tumores del conducto biliar, quistes, inflamaciones o lesiones debido a ciruga o
la acumulacin de bilirrubina en el hgado.
Una enfermedad del hgado como la cirrosis, la cual es debido al consumo
excesivo de alcohol o la hepatitis, afecta a la funcin del hgado. Ambos trastornos
contribuyen a niveles elevados de bilirrubina debido a que estos trastornos matan
a las clulas del hgado y causan cicatrices. La disminucin de las clulas del
hgado puede afectar su funcin, resultando en niveles de bilirrubina aumentados.
Algunos trastornos genticos afectan a la capacidad del hgado para funcionar
correctamente o procesar la bilirrubina, tal como el sndrome de Crigler/Najjar,
erthroblastosis fetalis y la enfermedad de Gilbert. Si bien cada uno afecta al
hgado de diferentes maneras, todos implican la incapacidad para descomponer
apropiadamente la bilirrubina en el cuerpo, aumentando los niveles.
Significado clnico
La bilirrubina se origina por la degradacin de la hemoglobina. Es transportada del
bazo al hgado y se excreta en la bilis. La hiperbilirrubinemia es el resultado de un
incremento de la bilirrubina en plasma. Causas ms probables de la
hiperbilirrubinemia: Bilirrubina Total: Aumento de la hemlisis, alteraciones
genticas, anemia neonatal, alteraciones eritropoyeticas, presencia de drogas.
Bilirrubina Directa: Colestasis heptica, alteraciones genticas y alteraciones
hepticas. El diagnstico clnico debe realizarse teniendo en cuenta todos los
datos clnicos y de laboratorio.
Procedimiento
1. Condiciones del ensayo:
Longitud de onda: .. 555 nm (530-580)
Cubeta:.1 cm paso de luz
Temperatura:15-25C
2. Ajustar el espectrofotmetro a cero frente a agua destilada.
3. Pipetear en una cubeta: Blanco B. Directa R 1 (mL) 1,5 1,5 R 2 (L) -- 50
Muestra / Calibrador (L) (Nota 1) 100 100
4. Mezclar e incubar exactamente 5 minutos a 15-25C.
5. Leer la absorbancia (A).
Valores de referencia:
Bilirrubina total
: 1.10mg/dl
Bilirrubina directa: 0.25mg/dl
Resultados
Nombre:
Edad:
Sexo :
Diagnstico
csar de la cruz Martnez
35 aos
masculino
alcoholismo
Bilirrubina directa: 3.33mg/dl
Bilirrubina indirecta: 1.44 mg/dl
Bilirrubina total: 5.1mg/dl
Interpretacin de resultados
De acuerdo a los valores de referencia, el paciente presenta hiperbilirrubinemia ,
ya que Bilirrubina total, directa e indirecta altas , lo cual quiere decir que puede
tener problemas del hgado, de acuerdo a su diagnstico que presenta el cual es
alcoholismo , se podra tratar de una cirrosis heptica , aunque tambin puede ser
por diversas enfermedades posibles .
Hepatitis
Enfermedad heptica
Enfermedad de Gilbert
Los resultados de bilirrubina altos
tambin pueden estar relacionados con
problemas en la vescula biliar o las vas biliares, y puede deberse a
enfermedades como
Estenosis biliar
Cncer del pncreas o de la vescula biliar
Clculos biliares
Conclusin
El examen de bilirrubina es muy importante para descartar o confirmar una posible
enfermedad en el hgado o vescula biliar.
Se hace por presentar problemas en el hgado o vescula biliar, la bilirrubina se
origina por la degradacin de la hemoglobina, es un pigmento amarillento que se
encuentra en la bilis, un lquido producido por el hgado.; el hgado ayuda a
descomponer la bilirrubina para que el cuerpo la pueda desechar a travs de las
heces.
Una de las razones ms comunes para realizar esta prueba tambin se debe a la
ictericia, ya que cuando se presentan grandes cantidades de bilirrubina en la
sangre se presenta la coloracin amarillenta en la piel, membranas mucosas o en
los ojos. Cabe mencionar que no solo a los adultos se les realizar este examen,
sino tambin a los recin nacidos por presentar ictericia.
Bibliografa:
http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003479.htm
https://quimicoclinico.wordpress.com/2008/01/16/bilirrubina-directa-indirectatgpfalggtfa/
http://www.tuotromedico.com/temas/bilirrubina.htm