COLESTEROL TOTAL LS (CHOD PAP)
Reactivo lquido para la determinacin fotomtrica de
Colesterol total en suero o plasma.
Para uso en el diagnstico in Vitro. Apto para usar en autoanalizador.
SIGNIFICANCIA CLINICA
TECNICA
El colesterol se encuentra presente en la sangre, bilis y tejido cerebral.
Es precursor de los cidos biliares, esteroides, y vitamina D. Su
determinacin contribuye al diagnstico y clasificacin de las
dislipidemias.
Llevar el reactivo a la temperatura que se realizar el ensayo. Las
pipetas a utilizar deben estar limpias y libres de residuos para no
contaminar el reactivo.
Blanco
Calibrador
Muestra
FUNDAMENTOS DEL METODO
Muestra
(ml)
--
--
0.01
El colesterol se determina por accin de las enzimas Colesterol ester
hidrolasa y Colesterol oxidasa. La primera libera el colesterol de los
steres de colesterol, y la segunda oxida el colesterol libre
producindose perxido de hidrgeno, el cual en presencia de la enzima
peroxidasa reacciona con el sistema cromognico dando origen a un
compuesto coloreado que absorbe a 505 nm.
Calibrador
(ml)
--
0.01
--
Reactivo
(ml)
1.00
1.00
1.00
Colesterol ester
CEH
Colesterol + cidos grasos
Colesterol + O2
CHOD
Colest-4-en-3-ona + H2O2
2H2O2 + 4-AAP +p-HBA
PAP
Comp. Coloreado + 4H2O
Mezclar e incubar 5 minutos a 37C. 10 minutos a temperatura
ambiente (>20C.). Leer las absorbancias llevando a cero el
espectrofotmetro con el blanco de reactivo. El color resultante es
estable por a lo menos treinta minutos.
Adaptaciones para la aplicacin de este reactivo en autoanalizadores
estn disponibles a solicitud. Es responsabilidad del laboratorio validar
esta aplicacin.
CALIBRACION
REACTIVOS
Conservados entre 2 y 8C. y protegidos de la luz, estables hasta la
fecha de caducidad indicada en la etiqueta.
Composicin del Reactivo Enzimtico:
Buffer Pipes pH 7.3
Colesterol ester hidrolasa
Colesterol oxidasa (recombinante)
Peroxidasa
4-Aminoantipirina
Acido p-hidroxibenzoico
Azida sdica
Estabilizantes y preservantes no reactivos
50 mM
>150 U/l
>100 U/l
>1000 U/l
0.4 mM
10 mM
0.1 g/dl
c.s.
Preparacin del Reactivo de Trabajo: El reactivo se provee listo para su
uso. El reactivo con el tiempo puede tomar un leve color rosado que no
afecta los resultados. Descartar el reactivo si su absorbancia contra
blanco de agua es superior a 0.4 D.O. a 505 nm.
MUESTRA
CALCULOS
Factor = Concentracin Calibrador
Abs. Calibrador
Colesterol Total (mg/dL) = Factor x Abs. Muestra
CONTROL DE CALIDAD
Utilizar de preferencia suero o plasma (Heparina o EDTA) libre de
hemlisis. La muestra debe tomarse con el paciente en ayunas. Los
tubos y material de vidrio deben estar limpios y libres de residuos de
detergentes. El colesterol es estable 7 das a temperatura ambiente y 6
meses en congelador.
MATERIAL NECESARIO NO INCLUIDO
Espectrofotmetro manual o automtico o fotocolormetro de filtros
con cubeta termoestable, capaz de medir absorbancia a 505 nm (rango
500 a 530 nm), bao termoregulado, cronmetro, pipetas, calibrador y
sueros controles.
En la calibracin se recomienda utilizar calibrador srico VALTROLC (cdigo 210-130), proceder de igual forma que con las muestras.
Se recomienda recalibrar en cualquier momento que se evidencie
alguno de estos acontecimientos:
El lote de reactivo cambia
Se realiza un mantenimiento preventivo del equipo
Los valores de control han cambiado o se encuentran fuera
de escala.
Es conveniente analizar junto con las muestras sueros controles
valorados para Colesterol total por este mtodo. Se recomienda la
utilizacin de los sueros controles VALTROL-N (cdigo 210-100) y
VALTROL-P (cdigo 210-110).
Si los valores obtenidos para los controles se encuentran fuera del
rango de tolerancia, revisar el instrumento, el reactivo y el
calibrador.
Cada laboratorio debe disponer de su propio Control de Calidad y
establecer las correcciones necesarias en caso de que no se
cumpla con las tolerancias permitidas para los controles.
ADVERTENCIAS Y MEDIDAS DE PRECAUCION:
Los volmenes indicados pueden ser alterados proporcionalmente
sin alterar los resultados.
En el caso de sueros hiperlipmicos, deber hacerse un blanco
muestra con suero fisiolgico para
eliminar la posible
interferencia por la turbidez del suero.
Valtek S.A. Av. Marathon 1943, uoa, Santiago de Chile / Tel. + (562) 654 1100
Fax + (562) 654 1199 / [Link] / info@[Link]
Consultar en nuestra pgina WEB la ficha de seguridad de este
reactivo y observar todas las medidas de precaucin necesarias
para la manipulacin y eliminacin de residuos.
En autoanalizadores debe utilizarse contenedores de reactivos
nuevos.
- Certificado de Conformidad y Trazabilidad disponible a solicitud
RANGO DE REFERENCIA
140 a 200 mg/dl
ESPECIFICACIONES DE DESEMPEO:
PRESENTACIONES DISPONIBLES
-Linealidad: hasta 600 mg/dl.
Para valores superiores a 600 mg/dl, diluir la muestra con suero
fisiolgico y el resultado obtenido se multiplica por el factor de dilucin.
CODIGO
060-050
060-070
-Lmite de deteccin: 1,0 mg/dl.
060-150
-Interferencias: Hemoglobina sobre 0,5 gr/dl, bilirrubina sobre 10 mg/dl
y la lipemia (triglicridos sobre 1000 mg/dl) podran interferir en la
tcnica. Otros medicamentos y sustancias podran interferir (4).
060-160
060-170
-Exactitud: Los reactivos VALTEK no muestran diferencias sistemticas
significativas cuando se comparan con otros reactivos comerciales. Los
detalles del estudio comparativo estn disponibles bajo solicitud.
-Repetibilidad intraserie: n=20
Nivel
Normal
Patolgico
Media (mg/dl)
95,1
155
BIBLIOGRAFIA
C.V.
1,21%
1,1%
-Reproducibilidad interserie: n=20
Nivel
Normal
Patolgico
Media (mg/dl)
97,8
172,85
300070
200070
CONTENIDO
Reactivo Enzimtico
Standard
Reactivo Enzimtico
Standard
Reactivo Enzimtico
Standard
Reactivo Enzimtico
Standard
Reactivo Enzimtico
Standard
Reactivo Enzimtico
Reactivo Enzimtico
C.V.
1,89%
1,87%
Estos datos han sido obtenidos utilizando un autoanalizador. Los
resultados pueden variar al cambiar de instrumento o al realizar el
procedimiento manualmente.
1. Tietz N. (ed), Fundamentals of Clinical Chemistry,
W.B. Sauders Co. Philadelphia, 1976.
[Link], D., Clin. Chem. Acta 5 (637), 1960.
[Link], P., Ann Clin. Biochem. 6 (24), 1969.
4. Young D.S., effects of drugs on clinical laboratory tests,
4th ed. AACC Press,1995.
REV N 1
1 x 50 ml
1 x 3 ml
2 x 50 ml
1 x 3 ml
4 x 50 ml
1 x 3 ml
1 x 250 ml
1 x 3 ml
2 x 250 ml
1 x 3 ml
5 x 40 ml
5 x 40 ml
