Los medios de cultivo en microbiologa
Uno de los sistemas ms importantes para la identificacin de microorganismos es
observar su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el
laboratorio. El material alimenticio en el que crecen los microorganismos es el Medio
de Cultivo y el crecimiento de los microorganismos es el Cultivo. Se han preparado
ms de 10.000 medios de cultivo diferentes.
Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe
reunir una serie de condiciones como son: temperatura, grado de
humedad y presin de oxgeno adecuadas, as como un grado
correcto de acidez o alcalinidad. Un medio de cultivo debe
contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y
debe estar exento de todo microorganismo contaminante.
La mayora de las bacterias patgenas requieren nutrientes
complejos similares en composicin a los lquidos orgnicos del
cuerpo humano. Por eso, la base de muchos medios de cultivo es
una infusin de extractos de carne y Peptona a la que se aadirn otros ingredientes.
El agar es un elemento solidificante muy empleado para la preparacin de medios de
cultivo. Se lica completamente a la temperatura del agua hirviendo y se solidifica al
enfriarse a 40 grados. Con mnimas excepciones no tiene efecto sobre
el crecimiento de las bacterias y no es atacado por aquellas que crecen
en l.
La Gelatina es otro agente solidificante pero se emplea mucho menos
ya que bastantes bacterias provocan su licuacin.
En los diferentes medios de cultivo se encuentran numerosos
materiales de enriquecimiento como hidratos de carbono, suero,
sangre completa, bilis, etc. Los hidratos de Carbono se adicionan por
dos motivos fundamentales: para incrementar el valor nutritivo del
medio y para detectar reacciones de fermentacin de los
microorganismos que ayuden a identificarlos. El suero y la sangre completa se aaden
para promover el crecimiento de los microorganismos menos resistentes.
Tambin se aaden colorantes que actan como indicadores para detectar, por
ejemplo, la formacin de cido o como inhibidores del crecimiento de unas bacterias y
no de otras (el Rojo Fenol se usa como indicador ya que es rojo en pH bsico y amarillo
en pH cido. La Violeta de Genciana se usa como inhibidor ya que impide el
crecimiento de la mayoria de las bacterias Gram-positivas).
Condiciones generales para el cultivo de
microorganismos
El desarrollo adecuado de los microorganismos en un medio de cultivo se ve afectado
por una serie de factores de gran importancia y que, en algunos casos, son ajenos por
completo al propio medio.
1- disponibilidad de nutrientes adecuados
Un medio de cultivo adecuado para la investigacin microbiolgica ha de contener,
como mnimo, carbono, nitrgeno, azufre, fsforo y sales inorgnicas. En muchos
casos sern necesarias ciertas vitaminas y otras sustancia inductoras del crecimiento.
Siempre han de estar presentes las sustancias adecuadas para ejercer de donantes o
captadores de electrones para las reacciones qumicas que tengan lugar.
Todas estas sustancias se suministraban originalmente en forma de infusiones de
carne, extractos de carne o extractos de levadura. Sin embargo, la preparacin de
estas sustancias para su aplicacin a los medios de cultivo provocaban la prdida de
los factores nutritivos lbiles.
Actualmente, la forma ms extendida de aportar estas sustancias a los medios es
utilizar peptona que, adems, representa una fuente fcilmente asequible de nitrgeno
y carbn ya que la mayora de los microorganismos, que no suelen utilizar
directamente las protenas naturales, tienen capacidad de atacar los aminocidos y
otros compuestos ms simples de nitrgeno presentes en la peptona.
Ciertas bacterias tienen necesidades nutritivas especficas por lo que se aade a
muchos medios sustancias como suero, sangre, lquido asctico, etc. Igualmente
pueden ser necesarios ciertos carbohidratos y sales minerales como las de calcio,
magnesio, manganeso, sodio o potasio y sustancias promotoras del crecimiento,
generalmente de naturaleza vitamnica.
Muy a menudo se aaden al medio de cultivo ciertos colorantes, bien como indicadores
de ciertas actividades metablicas o bien por sus capacidades de ejercer de inhibidores
selectivos de ciertos microorganismos.
2- consistencia adecuada del medio
Partiendo de un medio lquido podemos modificar su consistencia aadiendo productos
como albmina, gelatina o agar, con lo que obtendramos medios en estado semislido
o slido.
Los medios solidificados con gelatina tienen el gran inconveniente de que muchos
microorganismos no se desarrollan adecuadamente a temperaturas inferiores al punto
de fusin de este solidificante y de que otros tienen la capacidad de licuarla.
Actualmente los medios slidos son de uso universal, por su versatilidad y comodidad,
pero hay tambin gran cantidad de medios lquidos cuyo uso est ampliamente
extendido en el laboratorio.
3- presencia (o ausencia) de oxgeno y otros gases
Gran cantidad de bacterias pueden crecer en una atmsfera con tensin de oxgeno
normal. Algunas pueden obtener el oxgeno directamente de variados sustratos. Pero
los microorganismos anaerobios estrictos slo se desarrollarn adecuadamente en una
atmsfera sin oxgeno ambiental. En un punto intermedio, los microorganismos
microaerfilos crecen mejor en condiciones atmosfricas parcialmente anaerobias
(tensin de oxgeno muy reducida), mientras los anaerobios facultativos tienen un
metabolismo capaz de adaptarse a cualquiera de las citadas condiciones.
4- condiciones adecuadas de humedad
Un nivel mnimo de humedad, tanto en el medio como en la atmsfera, es
imprescindible para un buen desarrollo de las clulas vegetativas microbianas en los
cultivos. Hay que prever el mantenimiento de estas condiciones mnimas en las estufas
de cultivo a 35-37C proporcionando una fuente adecuada de agua que mantenga la
humedad necesaria para el crecimiento de los cultivos y evitar as que se deseque el
medio.
5- Luz ambiental
La mayora de los microorganismos crecen mucho mejor en la oscuridad que en
presencia de luz solar. Hay excepciones evidentes como sera el caso de los
microorganismos fotosintticos.
6- pH
La concentracin de iones hidrgeno es muy importante para el crecimiento de los
microorganismos. La mayora de ellos se desarrollan mejor en medios con un pH
neutro, aunque los hay que requieren medios ms o menos cidos. No se debe olvidar
que la presencia de cidos o bases en cantidades que no impiden el crecimiento
bacteriano pueden sin embargo inhibirlo o incluso alterar sus procesos metablicos
normales.
7- Temperatura
Los microorganismos mesfilos crecen de forma ptima a temperaturas entre 15 y
43C. Otros como los psicrfilos crecen a 0C y los temfilos a 80C o incluso a
temperaturas superiores (hipertemfilos). En lneas generales, los patgenos humanos
crecen en rangos de temperatura mucho ms cortos, alrededor de 37C, y los
saproftos tienen rangos ms amplios.
8- Esterilidad del medio
Todos los medios de cultivo han de estar perfectamente estriles para evitar la
aparicin de formas de vida que puedan alterar, enmascarar o incluso impedir el
crecimiento microbiano normal del o de los especimenes inoculados en dichos medios.
El sistema clsico para esterilizar los medios de cultivo es el autoclave (que utiliza
vapor de agua a presin como agente esterilizante)
La evolucin de los medios de cultivo
Podemos decir que la microbiologa empieza su verdadero desarrollo como ciencia en el
momento en que se descubre el microscopio y comienza la observacin de los primeros
microorganismos, pero es indudable que la puesta a punto de los medios de cultivo y
la utilizacin del agar como solidificante, marcan dos importantes puntos de inflexin
en su evolucin.
La primera noticia de la utilizacin de medios de cultivo nos llega del miclogo Brefeld,
que consigui aislar y cultivar esporas de hongos en medios slidos realizados a base
de gelatina.
Sin embargo este sistema no era adecuado para las bacterias (por su menor tamao) y
no fue hasta el ao 1878 cuando Lister populariz un mtodo enfocado al cultivo puro
basado en diluciones seriadas en un medio lquido.
Koch realiz sus investigaciones utilizando en un primer momento rodajas de patata
como soporte nutritivo slido, pero no tard en recurrir al caldo de carne lquido,
diseado por Loeffler, al que, en 1881, aadi gelatina, logrando un medio slido
transparente ideal para la observacin de la morfologa macroscpica de las colonias
microbianas.
En el ao 1882 tiene lugar uno de los grandes avances de la microbiologa en relacin
con los medios de cultivo: el mdico alemn Walter Hesse introduce el agar-agar
(polisacrido extrado de algas rojas) como solidificante.
En 1887 un ayudante de Koch llamado Petri, comienza a utilizar placas de cristal
planas, que se llaman desde entonces placas de Petri, para sustituir a las clsicas
bandejas de vidrio cubiertas con campanas que se usaban hasta entonces.
Beijerinck y Winogradsky, que desde de 1888 realizaron sus investigaciones sobre las
bacterias quimioauttrofas (utilizacin de nitrgeno y azufre sobre todo) tuvieron gran
importancia en el desarrollo de los medios selectivos y de enriquecimiento. Disearon
este tipo de medios de tal forma que su especial composicin qumica favoreca el
crecimiento de ciertos tipos de microorganismos que, en funcin de sus procesos
metablicos, eran los nicos capaces de utilizar para su desarrollo ciertos nutrientes
del medio.
En 1892 Wrtz impuls el uso de los medios diferenciales, incorporando indicadores de
pH a la composicin de ciertos medios con lo cual se poda observar la produccin de
cidos en la fermentacin en ciertos microorganismos.
Tipos bsicos de medios de cultivo
atendiendo a su estado fsico:
lquidos
semislidos
slidos
CLASIFICACIN DE LOS
MEDIOS DE CULTIVO
Los medios de cultivo pueden clasificarse
segn diferentes criterios, pero los ms
importantes son aquellos que se basan en:
a) Su consistencia
b) Su utilizacin
c) Su composicin
d) Su origen
SEGN SU ESTADO FSICO
(CONSISTENCIA).
1) Medios lquidos: Son los que se presentan
en este estado, denominndose por esta razn
caldos. El medio lquido ms utilizado es el
llamado caldo nutritivo, compuesto
principalmente de extracto de carne, peptona y
agua. Se utiliza fundamentalmente cuando se
pretende la obtencin de una suspensin
bacteriana de una determinada concentracin.
2) Medios slidos: Se preparan a partir de los
medios lquidos, agregndoles un agente
gelificante. Los ms utilizados son la gelatina y
el agar. Gelatina: Es una protena animal
obtenida de los huesos. Tiene el inconveniente
de que es hidrolizada por muchas bacterias, y
adems su uso est muy limitado porque su
punto de fusin es bajo (lica a temperatura
ambiente) razn por la que no puede utilizarse
para cultivos a 37C, que es la tempera ptima
de crecimiento para muchos microorganismos.
Agar-agar:Es un polmero de azcares obtenido
de algas marinas. Se trata de una molcula
insoluble enagua pero soluble en agua caliente;
una solucin al 1,5% p/v forma un gel firme
entre 32 y 39C y nose funde por debajo de
85C. Funde a 90C y solidifica una vez
fundido alrededor de los 45C. Tiene el
inconveniente de que introduce compuestos
orgnicos indefinidos que pueden falsear los
resultados de las necesidades nutritivas de un
microorganismo. Aunque el agar es una mezcla
de polisacridos, Araki, en 1937, los dividi en
dos grupos:- agarosa, con poco sulfato, libre de
cido pirvico, y- agaropectina, con mucho
sulfato y gran cantidad de cenizas. La
proporcin de agarosa a agaropectina en el agar
vara segn el alga de origen. El agar puede
utilizarse para diferentes fines, aunque los ms
importantes son: agar comercial para la
industria alimenticia, agar bacteriolgico,
agares purificados y agarosa, utilizada para
electroforesis en gel. Aproximadamente la
mitad de todo el agar que se produce, se utiliza
en trabajo microbiolgico, por lo que es
importante la ausencia de metales txicos.
3) Medios semislidos: Se preparan a partir de
los medios lquidos, agregando a stos un
agente solidificante en una proporcin menor
que para preparar medios slidos. Uno de sus
usos es la investigacin de la movilidad de las
bacterias
SEGN SU UTILIZACIN.
1) Medios comunes: Son aquellos que poseen
los componentes mnimos para que pueda
producirse el crecimiento de bacterias que no
necesiten requerimientos especiales. El medio
ms conocido de este grupo es el agar nutritivo
o agar comn, que resulta de la adicin de agar
al caldo nutritivo. Otros representantes de este
grupo son el agar tripticase de soja, el agar
Columbia, etc.
2) Medios de enriquecimiento: Son aquellos
que, adems de las sustancias nutritivas
normales, incorporan una serie de factores
indispensables para el crecimiento de
microorganismos exigentes. Este
enriquecimiento se hace por adicin de sangre
u otros productos biolgicos (sangre, suero,
leche, huevo, bilis, etc.) que aportan dichos
factores. En ocasiones es posible aadir
suplementos artificiales a los medios para
producir un enriquecimiento del mismo (p. ej.
Polivitex, Isovitalex, etc)El gonococo, por
ejemplo, necesita cistina y cistena para su
crecimiento. Estas sustancias son aportadas por
la sangre calentada adicionada al medio de
cultivo (agar chocolate).
3) Medios selectivos: Son medios utilizados
para favorecer el crecimiento de ciertas
bacterias contenidas en una poblacin
polimicrobiana. El fundamento de estos medios
consiste en facilitar nutricionalmente el
crecimiento de una poblacin microbiana
especfica. Un ejemplo de medio selectivo es el
caldo selenito, que se utiliza para favorecer el
crecimiento de salmonellas y frenar el del resto
de enterobacterias.
4) Medios inhibidores: Cuando las sustancias
aadidas a un medio selectivo impiden
totalmente el crecimiento de una poblacin
microbiana, se denomina inhibidor. Los medios
inhibidores podran considerarse como una
variante ms restrictiva de los medios
selectivos. Los medios inhibidores se
consiguen habitualmente por adicin de
sustancias antimicrobianas o de cualquier otra
que inhiba completamente el desarrollo de una
poblacin determinada. Un medio inhibidor es
el MacConkey que permite el crecimiento de
los grmenes Gram negativos e impide el
crecimiento de los Gram positivos.
5) Medios diferenciales: Se utilizan para
poner en evidencia caractersticas bioqumicas
que ayuden a diferenciar gneros o especies.
La adicin de un azcar fermentable o un
sustrato metabolizable se utilizan para este fin.
El medio MacConkey es un medio diferencial
porque permite distinguir los grmenes que
fermentan la lactosa de aquellos que no lo
hacen. Tambin lo son el C.L.E.D. (lactosa
+/lactosa -), el agar sangre (tipo de hemlisis),
el SS (que es doblemente diferencial), etc.
6) Medios de identificacin: Son los
destinados a comprobar alguna cualidad
especfica que puede servirnos para reconocer
la identidad de un microorganismo. Estos
medios han de poseer los elementos necesarios
para asegurar el crecimiento de los
microorganismos, el sustrato especfico que
vaya a ser metabolizado y el indicador que nos
muestre el resultado. El agar Kligler, el medio
de Simmons y en general, cualquier medio al
que se le haya aadido un elemento diferencial
de un microorganismo, son medios utilizados
en identificacin. Actualmente estn
apareciendo en el mercado una gran cantidad
de medios especficos de identificacin para
ciertos microorganismos, con lo cual se
consigue simultneamente abaratar el costo y
reducir el tiempo de identificacin. Son
ejemplos de esto ltimo los medios CPS ID3 o
Uriline ID(Biomerieux), utilizados para
identificar los grmenes urinarios ms
importantes a partir de la placa de cultivo
gracias a la utilizacin de sustratos
cromognicos especficos.
7) Medios de multiplicacin: Sirven para
obtener una gran cantidad de clulas a partir de
un microorganismo ya aislado. Seemplean en
la obtencin de vacunas, en la investigacin y
en la industria. Los medios ms adecuados para
la multiplicacin suelen ser lquidos. El caldoinfusin cerebro-corazn (BHI), es un ejemplo
tpico de estos medios.
8) Medios de conservacin: Se utilizan para
conservar una cepa que, por diversas razones
nos interese mantener. Fundamentalmente se
utilizan como controles de calidad de las
pruebas y reactivos utilizados en elLaboratorio
de Microbiologa. En el laboratorio se pueden
conservar las cepas de tres formas:
a) haciendo pases peridicos de placa a placa,
b) mediante liofilizacin de una suspensin
bacteriana, y
c) congelando las cepas en leche descremada
estril al 0,1%.
9) Medios de transporte: Se usan para el
transporte de muestras clnicas que no pueden
sembrarse inmediatamente. Suutilizacin debe
hacerse introduciendo la torunda con la que se
obtuvo la muestra en el interior delmedio
(generalmente en un tubo). Son ejemplos
tpicos de este grupo los medios de StuartAmies,Cary-Blair, etc.
ATENDIENDO A SU COMPOSICIN.
Segn las sustancias que entren a formar parte
en su composicin, los medios de cultivo
pueden ser clasificados en:
1) Medios complejos: Fueron los primeros
utilizados, y los ms empleados se preparan a
partir de tejidos animales, y ms raramente de
vegetales. Su composicin no es exactamente
definida, y por consiguiente no es
rigurosamente constante. Esto puede tener
ciertos inconvenientes en condiciones
experimentales, donde la reproductibilidad no
podr ser exacta. En la prctica corriente estos
medios dan excelentes resultados y son los ms
empleados.
2) Medios sintticos: Son aquellos que
contienen en su composicin exclusivamente
sustancias qumicas conocidas y disueltas en
agua destilada en proporciones determinadas,
resultando un medio de composicin
perfectamente definida.
3) Medios semisintticos: El gran nmero de
factores de crecimiento exigidos para ciertos
grmenes hace que la fabricacin de un medio
sinttico para estos grmenes sea imposible o
demasiado cara. En este caso se aportan los
factores de crecimiento bajo la forma de un
extracto orgnico complejo (extracto de
levadura, extracto de tejidos, etc.).Ciertos
grmenes no crecen en ningn medio por muy
enriquecido que est ste, hacindolo
exclusivamente en clulas vivas con unas
caractersticas determinadas. Ejemplos de este
tipo son, aparte de los virus, las Chlamydias,
Rickettsias, etc.
Segn su origen:
a) NATURALES: son los preparados a partir
de sustancias naturales de origen animal o
vegetal como ser
extractos de tejidos o infusiones y cuya
composicin qumica no se conoce
exactamente.
b) SINTTICOS: son los medios que
contienen una composicin qumica definida
cuali y
cuantitativamente. Se utilizan para obtener
resultados reproducibles.
c) SEMISINTTICOS son los sintticos a los
que se les aaden factores de crecimiento bajo
una forma
de un extracto orgnico complejo, como por
ejemplo extracto de levadura.
DESCRIPCIN Y UTILIZACIN DE
LOS MEDIOS DE CULTIVO
MEDIOS DE CULTIVO COMUNES.
Son los ms corrientemente utilizados, y
aunque no vamos a enumerarlos todos, s son
los ms conocidos en un laboratorio de
Microbiologa.
Agar nutritivo: Este medio es bastante
bueno para el cultivo de grmenes que no
presentan exigencias particulares. No es
diferencial.
Agar sangre: Es un medio enriquecido que
se utiliza adems para la investigacin de los
diversos tipos de hemlisis(, gamma ). Se
utiliza para el crecimiento de estreptococos.
Para la preparacin del agar sangre se puede
utilizar el agar nutritivo enriquecido con
cloruro sdico o un preparado enriquecido con
otras sustancias como Columbia o el tripticase
de soja. La adicin de sangre a un medio de
cultivo no proporciona las sustancias que estn
en el interior de los hemates, pero s puede
aadir factores inhibidores del crecimiento
bacteriano presentes en el suero. Este es un
inconveniente que puede solucionarse
calentando la sangre para romper los eritrocitos
y para que se destruyan las sustancias
inhibidoras, que son termolbiles.La sangre
utilizada como aditivo a estos medios suele ser
sangre de carnero diluida al 5%, pero en
algunas ocasiones es necesario utilizar sangre
de otras especies (caballo, conejo, humana),
pues facilitan las reacciones hemolticas o
contienen determinados factores de
enriquecimiento o no poseen sustancias
inhibidoras del crecimiento de determinados
grmenes. Agar chocolate: El agar chocolate se
obtiene calentando la sangre antes de
adicionarla al medio base. Por esta razn el
agar chocolate contiene hemoglobina, que
aporta al medio un importante elemento para el
crecimiento: el factor X o hemina termoestable.
El agar chocolate es un medio destinado
principalmente al aislamiento de Neisserias
(gonococos ymeningococos) y Haemophilus,
pero en l pueden crecer muchos otros
microorganismos exigentes. El agar chocolate
puede convertirse quizs en uno de los medios
ms enriquecidos si aadimos una mezcla de
factores de crecimiento no contenidas en la
sangre. Estas mezclas, denominadas de forma
diferente segn las casas comerciales
(Polivitex, Isovitalex, etc.) contienen ms de
una docena de compuestos que confieren a este
medio unas cualidades nutritivas
extraordinarias. Por adicin de uno o varios
antibiticos pueden lograrse medios
inhibidores o selectivos para el crecimiento de
determinados microorganismos. Un ejemplo
clsico es el Thayer-Martin, utilizado para el
aislamiento del gonococo y que no es otra cosa
que un agar chocolate enriquecido al cual se ha
aadido unamezcla de tres antibiticos
especficos que impedirn el crecimiento del
resto de la flora acompaante. Agar
MacConkey: Es un medio utilizado para el
aislamiento e identificacin de enterobacterias.
Es un medio inhibidor de los grmenes Gram
positivos por su contenido en cristal violeta y
selectivo para enterobacterias por su contenido
en sales biliares. En su composicin lleva un
azcar (lactosa) y un indicador (rojo de metilo)
que lo convierten en un medio diferencial. Los
grmenes que fermenten la lactosa producen
una acidificacin del medio que hacen aparecer
de color rojo fuerte a las colonias resultantes.
Las colonias lactosa negativas sern incoloras,
apareciendo del mismo color que el medio
subyacente (naranja).
Agar C.L.E.D.: El medio C.L.E.D. (Cistina
Lactosa Electrlito Deficiente) est
recomendado para el recuento e identificacin
presuntiva de los microorganismos de las vas
urinarias. Su bajo contenido en electrolitos
evita la invasin de los cultivos por Proteus.La
presencia de lactosa en su composicin le
confiere el carcter de medio diferencial,
aunque la interpretacin sea diferente al
anterior medio por la incorporacin de otro
indicador: el azul de bromotimol. Las colonias
lactosa positivas aparecern de color amarillo y
las lactosa negativas lo harn con un color
verdoso, blanco o azulado.
Agar S.S.:El agar SS es un medio selectivo
empleado para el aislamiento de Salmonella y
Shigella a partir demuestras fecales. El medio
contiene sales biliares y verde brillante para
impedir el crecimiento de coliformes y
grmenes Gram positivos. La presencia de
lactosa y rojo de metilo nos permiten
diferenciar las colonias que fermentan la
lactosa (rosas o rojas) de las que no lo hacen
(incoloras).Las especies de Salmonella y
Shigella no fermentan nunca la lactosa por lo
que este medio es excelente para descartar
todas las colonias que no cumplan este
requisito. El agar SS es doblemente diferencial,
porque adems de indicarnos el
comportamiento de los grmenes con relacin
a la lactosa, nos muestra los grmenes que son
capaces de producir cido sulfhdrico, que se
manifiesta como un precipitado de color negro
en el centro de la colonia. As, una colonia
incolora y con un punto negro central es
sospechosa de Salmonella, y ser
exclusivamente a estas colonias a quienes se
hagan las pruebas bioqumicas confirmatorias
de esta especie. El agar SS es un medio muy
inhibidor que a veces impide incluso el
crecimiento de ciertas especies de Salmonella y
sobre todo de Shigella. Por esta razn debe
utilizarse siempre junto con otro medio menos
inhibidor como el Hektoen.
Agar Hektoen :Es un medio ms diferencial
y menos selectivo que el agar SS. Se utiliza
para facilitar el aislamiento de las
enterobacterias. La presencia de tres azcares
(lactosa, sacarosa y salicilina ) permiten
ampliar el poder diferencial de este medio. Este
medio es capaz de detectar los grmenes
formadores de SH2, igual que el SS. Las
cualidades del agar Hektoen se deben a su
riqueza en peptonas y azcares, que neutralizan
el efecto inhibidor de las sales biliares respecto
a ciertos grmenes de cultivo delicado
(Shigella en particular).El crecimiento de
Salmonella es excelente, igual que el de
Shigella, obtenindose colonias ms numerosas
y voluminosas que en los medios selectivos
usuales. La inhibicin tiene lugar,
esencialmente, sobre E. coli y en menor
medida sobre Proteus y Citrobacter. Hay que
sealar que el vibrin colrico crece bien en
este medio.
C.P.S. ID3. :Medio cromognico
desarrollado por Biomerieux, que permite la
identificacin de E. coli, P. mirabilisy E.
faecalis, con la simple visualizacin del cambio
de color de la colonia sobre el medio (rojo
burdeos, azulo marrn). La identificacin solo
requiere la adicin de un reactivo para
confirmar o descartar la especie sospechada.
Otros microorganismos diferentes requieren los
sistemas de identificacin habituales (API, p.
ej) Granada, Islam o New GBS: Medios
utilizados para deteccin de Streptococcus
agalactiae, mediante la utilizacin de un
sustrato cromognico especfico de este
microorganismo.
Agar Mueller-Hinton: Es el medio
universalmente aceptado para la realizacin de
los antibiogramas o pruebas de sensibilidada
los antimicrobianos. A l nos referiremos ms
ampliamente en el captulo correspondiente
Agar Tripticase de soja: Es un medio
utilizado para el crecimiento de grmenes
exigentes, como Brucella, Neisseria o
Streptococcus. Es un medio muy enriquecido,
pero no es diferencial. Caldo tioglicolato con
resazurina: Es un medio recomendado para
controles de esterilidad. Permite el cultivo de
aerobios, anaerobiosy microaerfilos. Tiene un
bajo potencial redox que, al aumentar, se
manifiesta por un color rosa del medio.
Agar Chapman: Es un medio selectivo para
el aislamiento de estafilococos. Su elevado
contenido en cloruro sdico permite la
inhibicin de la mayora de los otros grmenes.
La presencia de manitol y rojo fenol convierten
a este medio en diferencial: as se puede
identificar presuntivamente el Staphylococcus
aureus, ya que estegrmen crece bien en
medios salados y fermenta el manitol (colonias
amarillas).
Agar Baird-Parker: Permite el crecimiento
de estafilococos coagulasa positivos, a la vez
que los diferencia del resto.
Medio de Loeffler: Es un medio especfico
para el cultivo de Corynebacterium difteriae.
Agar Desoxicolato Citrato Lactosa
Sucrosa (DCLS):Similar al agar SS. Es un
medio diferencial e inhibidor a la vez.
Agar Kligler: Medio especfico para pruebas
de identificacin de enterobacterias. Aunque de
l hablaremos conms detenimiento en el
captulo de pruebas de identificacin
bacteriana, podemos ir adelantando que se
tratade un medio diferencial que permite
conocer el comportamiento del
microorganismo ante dos azcares (glucosa y
lactosa), investigar la formacin de gas y
comprobar si el microorganismo puede
producir sulfatoferroso a partir del tiosulfato
sdico.
Agar Levine EMB (Eosina azul de
metileno):Se utiliza para aislamiento de
enterobacterias, pues impide el crecimiento de
Gram positivos y diferencia muy bien a E. coli,
cuyas colonias adquieren un color negruzco
con un brillo metlico caracterstico. Caldo
selenito-F: Se utiliza exclusivamente para
enriquecimiento de Salmonellas.
Agar Cetrimida. Agar King: Permiten el
crecimiento de Pseudomonas, inhibiendo Gram
positivos y la mayora de enterobacterias.El
segundo pone adems de manifiesto la
pigmentacin fluorescente de Pseudomonas
bajo luz UV.
Agar Schaedler: Es un medio con sangre y
vitamina K muy adaptado para el cultivo de
anaerobios.
Agar Gardnerella:Agar con sangre humana
ms una mezcla de antibiticos que permiten la
observacin de colonias betahemolticas
caractersticas de Gardnerella vaginalis
Campylosel: Se utiliza para el aislamiento de
Campylobacter intestinales creciendo a 42 C
en microaerofilia.
Agar BCYE (Buffer Charcoal Yeast
Extract):Se utiliza para el aislamiento de
bacterias del gnero Legionella
Lwenstein-Jensen:Este medio se utiliza
para el cultivo de Mycobacterium tuberculosis.
Contiene verde malaquita parainhibir
parcialmente el crecimiento de otras bacterias.
El huevo se utiliza como sustancia de
enriquecimiento.
