Ejercicio 1.
- Los siguientes datos cinticos fueron obtenidos:
Inversos
[Sustrato] mM
0.25
0.5
1
2
3
5
10
Vo (moles/min)
1.7
3
5
7.3
8.6
10.1
11.6
[Sustrato] mM
4.00
2.00
1.00
0.50
0.33
0.20
0.10
Vo (moles/min)
0.59
0.33
0.20
0.14
0.12
0.10
0.09
Realizar la grfica y determinar KM y Vmax
CINETICA ENZIMTICA
0.7
0.6
0.5
0.4
1/Vo
f(x) = 0.13x + 0.07
R = 1
0.3
0.2
0.1
0
0.00
0.50
1.00
1.50
2.00
2.50
1/[Sustrato]
Hallando KM
3.00
3.50
4.00
4.50
b= 0.073
m= 0.129
1/KM= b/-pendiente = 0.073/0.129= 0.566 sacando K M= 1/0.566= 1.767 mM
Vmax
1/ Vmax=0.073 sacando Vmax= 1/ 0.0743= 13.70 moles/min
Ejercicio 2.- Se analiz la cintica de una enzima en ausencia y presencia de
inhibidores A y B
Vo (moles/min)
Inversos Vo (moles/min)
[Sustra
to] mM
Sin
inhibidor
Inhibidor A
(5mM)
Inhibidor B
(0.1mM)
[Sustrato]
mM
Sin
inhibidor
Inhibidor A
(5mM)
Inhibidor B
(0.1mM)
43
30.00
26.00
1.000
0.023
0.033
0.038
68
50.00
41.00
0.500
0.015
0.020
0.024
105
86.00
64.00
0.200
0.010
0.012
0.016
10
128
113.00
77.00
0.100
0.008
0.009
0.013
20
144
134.00
88.00
0.050
0.007
0.007
0.011
Qu tipo de inhibicin se debe por la presencia de A y cual por la presencia de
B? determina todos los parmetros cinticos, incluyendo Ki
Sin inhibidor Hallando KM
b= 0.0061
m= 0.0172
1/KM= b/-pendiente = 0.0061/0.0172= 0.354 sacando
KM= 1/0.354= 2.82 mM
Vmax
1/ Vmax=0.0061 sacando Vmax= 1/ 0.0061= 163.93 moles/min
Inhibidor A Hallando KM
b= 0.0062
m= 0.0273
1/Ki= b/-pendiente = 0.0062/0.0273= 0.2271 sacando
Ki= 1/0.2271= 4.40 mM
Vmax
1/ Vmax=0.0062 sacando Vmax= 1/ 0.0062= 161.90 moles/min
La Vmax se mantiene igual, la KM es diferente por lo tanto es una inhibicin
competitiva
Inhibidor B Hallando KM
b= 0.01
m= 0.0285
1/Ki= b/-pendiente = 0.01/0.0285= 0.3508 sacando
Ki= 1/0.3508= 2.85 mM
Vmax
1/ Vmax=0.01 sacando Vmax= 1/ 0.01= 100 moles/min
La Vmax es diferente, la KM se mantiene igual por lo tanto es una inhibicin no
competitiva
Ejercicio 3.- El salicilato inhibe la accin cataltica de la glutamato deshidrogenasa.
Realiza las grficas y estima los parmetros cinticos en ausencia y presencia del
inhibidor. Qu tipo de inhibicin es?
Vo (moles/min)
Inverso
[Sustrato] mM
Sin inhibidor
Salicilato 40 mM
[Sustrato] mM
Sin inhibidor
Salicilato 40 mM
1.5
0.21
0.08
0.67
4.76
12.50
0.25
0.10
0.50
4.00
10.00
0.28
0.12
0.33
3.57
8.33
0.33
0.13
0.25
3.03
7.69
0.44
0.16
0.13
2.27
6.25
16
0.4
0.18
0.06
2.50
5.56
Sin inhibidor Hallando KM
b= 2.04
m= 4.04
1/KM= b/-pendiente = 2.04/4.04= 0.505 sacando
KM= 1/0.50= 2 mM
Vmax
1/ Vmax=2.04 sacando Vmax= 1/ 2.04= 0.4901 moles/min
Inhibidor salicilato Hallando KM
b= 11.109
m= 4.8
1/Ki= b/-pendiente = 4.8/11.109= 0.4382 sacando
Ki= 1/0.4382= 2.28 mM
Vmax
1/ Vmax=11.109 sacando Vmax= 1/ 11.109= 0.09 moles/min
La Vmax es diferente, la KM es semejante por lo tanto es una inhibicin no
competitiva
Ejercicio 4.- A continuacin se presentan los resultados de dos experimentos en
donde se determin el efecto de la inhibicin de 2 compuestos para dos enzimas
diferentes del metabolismo de degradacin de la glucosa. Se vari la
concentracin de sustrato en ausencia y presencia de tres concentraciones
diferentes de inhibidores para cada enzima. En cada uno de los casos encontrar
los parmetros cinticos.
[Inhibidor A] (nM)
[Sustrato]
mM
Inversos [Inhibidor A] (nM)
0
0.0286
0.057
1.057
Velocidades iniciales (moles/min/mg
protena)
[Sustrato]
mM
0
0.0286
0.057
1.057
Velocidades iniciales (moles/min/mg
protena)
0.0075
2.39
1.81
1.47
0.94
133.33
0.42
0.55
0.68
1.06
0.0174
4.14
3.31
2.81
1.85
57.47
0.24
0.30
0.36
0.54
0.036
5.98
5.10
4.48
3.32
27.78
0.17
0.20
0.22
0.30
0.063
6.89
6.59
5.72
4.47
15.87
0.15
0.15
0.17
0.22
0.093
7.72
7.14
6.71
5.51
10.75
0.13
0.14
0.15
0.18
0.129
8.62
7.80
7.64
6.30
7.75
0.12
0.13
0.13
0.16
0.197
8.85
8.44
8.26
7.17
5.08
0.11
0.12
0.12
0.14
0.3
9.05
8.62
8.53
8.19
3.33
0.11
0.12
0.12
0.12
Sin inhibidor Hallando KM
b= 0.1025
m= 0.0024
1/KM= b/-pendiente = 0.1025/0.0024= 42.70 sacando
KM= 1/42.70= 0.0234 mM
Vmax
1/ Vmax=0.1025 sacando Vmax= 1/0.1025 = 9.756 moles/min
Inhibidor 0.0286 Hallando KM
b= 0.1025
m= 0.0034
1/Ki= b/-pendiente = 0.1025/0.0034= 30.147 sacando
Ki= 1/30.147= 0.0331 mM
Vmax
1/ Vmax=0.1025 sacando Vmax= 1/ 0.1025= 9.756 moles/min
La Vmax se mantiene igual, la KM es diferente por lo tanto es una inhibicin
competitiva
Inhibidor 0.057 Hallando KM
b= 0.1019
m= 0.0044
1/Ki= b/-pendiente = 0.1019/0.0044= 23.16 sacando
Ki= 1/23.16= 0.0431 mM
Vmax
1/ Vmax=0.1019 sacando Vmax= 1/ 0.1019= 9.8135 moles/min
La Vmax se mantiene igual, la KM es diferente por lo tanto es una inhibicin
competitiva
Inhibidor 1.057 Hallando KM
b= 0.1045
m= 0.0073
1/Ki= b/-pendiente = 0.1045/0.0073= 14.3150 sacando
Ki= 1/14.3150= 0.0698 mM
Vmax
1/ Vmax=0.1045 sacando Vmax= 1/0.1045= 9.567 moles/min
La Vmax se mantiene igual, la KM es diferente por lo tanto es una inhibicin
competitiva
