UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR
DE SANMARCOS
FACULTAD DE QUIMICA E INGENIERIA
QUMICA
E.A.P DE INGENIERIA AGROINDUSTRIAL
LABORATORIO N2: DETERMINACIN DE CAFENAS EN BEBIDAS
GASIFICADAS
PROFESOR:
Quim. MARIA ANGELICA RODRIGUEZ BEST
CURSO: LABORATORIO DE ANALISIS INSTRUMENTAL
ALUMNOS:
1. GONZALES ESCALANTE ANDRS
2. VILA CASTRO ROCIO KORINA
HORARIO:
MARTES 8:00 -12:00 h
INDICE
I. INTRODUCCION............................................................................................3
II. OBJETIVOS................................................................................................. 4
III.
MARCO TEORICO...................................................................................4
IV. MATERIALES Y EQUIPOS....................................................................12
V.
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL...................................................13
VI. DATOS......................................................................................................... 15
VII. EJEMPLO DE CALCULOS....................................................................19
VIII. RESULTADOS.........................................................................................20
IX. DISCUSION DE RESULTADOS..........................................................23
X.
CONCLUSIONES......................................................................................24
XI. BIBLIOGRAFIA.........................................................................................24
I.
INTRODUCCION
La cafena es la sustancia psicoactiva ms ampliamente utilizada en el mundo, y su
consumo para favorecer la alerta y aliviar el cansancio no produce dao en la mayora
de las personas. Aunque ms dbil que otros estimulantes, la cafena comparte ciertos
sntomas de la intoxicacin, tolerancia y abstinencia causados por esas sustancias en
algunos individuos.
La determinacin de cafena tiene mucha importancia debido a su uso en la
industria farmacutica y en la industria de alimentos, ya sea como ingrediente en la
elaboracin de refrescos y bebidas energticas o por su presencia en productos como el
t, el mate, el cacao y el caf. Debido a su variada presencia existen diferentes tcnicas
de anlisis.
En el presente estudio se realiz la cuantificacin de los niveles de cafena
presentes en las bebidas carbonatadas.
La cuantificacin de cafena se realiz por medio de la aplicacin del mtodo de
Espectrofotometra UV- VISIBLE
II.
OBJETIVOS
GENERAL
Determinar por medio de tcnicas espectrofotomtricas actuales la cantidad de
cafena en bebidas carbonatadas de mayor consumo por nios en edad escolar y
preadolescentes de colegios privados de la ciudad capital.
ESPECFICO
Analizar, cientfica y experimentalmente, las diferentes muestras, haciendo uso de
un espectrofotmetro UV/VIS de doble haz.
Comprobar por medio de una muestra representativa que los diferentes lotes de
bebidas carbonatadas contengan la cantidad en las etiquetas
III. MARCO TEORICO
Las bebidas carbonatadas, no alcohlicas, se consideran como un lquido
burbujeante y refrescante al que se le ha agregado cierta mezcla de ingredientes
con el fin de satisfacer las preferencias de las personas que las consuman.
Contienen dixido de carbono disuelto, saborizantes, colorantes, etc. A pesar de ser
un producto competitivo en el mercado, algunos de los ingredientes que posee son
nocivos al organismo si se consumen en exceso ya que puede producir daos a
corto y largo plazo en la salud.
Alcaloide (C8H10O2N4H2O) del caf, el t, el cacao y otras plantas. Tambin
contienen la mayora de los refrescos de cola. Es una purina.
La cafena es una xantina metilada, posee
una estructura 1,3,7 trimetilxantina. Las
metilxantinas
solubilidad,
poseen
aunque
sta
una
se
escasa
intensifica
mucho por la formacin de complejos con
muy diversos compuestos. Los complejos
ms notables son los que se forman entre la
teofilina y la etilendiamina. La formacin de
sales dobles en complejo o sales verdaderas tambin mejora su hidrosolubilidad.
Instrumentacin para la medicin de absorbancias de la luz visible y
ultravioleta: espectrofotmetro UV-visible:
La medicin de absorbancia de la luz por las molculas se realiza en unos aparatos
llamados espectrofotmetros. Aunque pueden variar en diseo, en especial con la
incorporacin
de
ordenadores
para
el
anlisis
de
datos,
espectrofotmetros constan, segn se indica en la figura, de:
- Una fuente de energa radiante: lmpara de deuterio y tungsteno.
todos
los
- Un monocromador para la seleccin de radiaciones de una determinada longitud
de onda: filtros, prismas, redes de difraccin.
- Un compartimento donde se aloja un recipiente transparente (cubetas o
tubos)
que contenga la muestra Pueden ser de vidrio, cuarzo o plstico transparente. Para
medir en UV se deben usar las de cuarzo o slice fundido, porque el vidrio no
transmite la radiacin UV.
- Un detector de luz y un amplificador convertidor de las seales luminosas en
seales elctricas.
- Un registrador o sistema de lectura de datos.
Desde el punto de vista operativo, el primer paso es seleccionar la fuente de luz y
longitud de onda a la que se va a realizar la medida.
Hay espectrofotmetros de un solo haz (con una sola celdilla para alojar la cubeta
con la muestra) y de doble haz (con dos celdillas para dos cubetas); (*) en nuestro
caso se trabaj con un equipo de doble haz y por lo tanto de dos cubetas.
No necesita estar colocando y sacando el blanco, simplemente se coloca el blanco
en una celda y en la otra los estndares, todo esto primero para construir la curva
patrn.
Curvas de Calibrado:
Para obtener una curva de calibrado de un compuesto se preparan soluciones
de diferentes concentraciones del mismo, determinndose para cada una de
ellas el valor de absorbancia a max. Estos valores de absorbancia se
representan en el eje de abscisas (eje de x) y los de concentracin en el eje de
ordenadas (eje de y). Se observar que, a bajas concentraciones, el aumento
de concentracin se corresponde con un incremento lineal en la absorbancia
(zona de cumplimiento de la ley de Lambert-Beer). A concentraciones altas la
linealidad se pierde y se observa que la lnea se aplana, por lo que las
medidas son poco fiables.
La representacin de Lambert-Beer, A = cl, nos permitir calcular el valor del
coeficiente de extincin molar, que corresponde a la pendiente de la recta.
IV. MATERIALES Y EQUIPOS
Equipos:
- 01 Espectrofotmetro UV 1700 - SHIMADZU.
-
Agitador magntico.
A la izquierda se observa el equipo de espectrofotometra UV1700-SHIMADZU; y a la derecha se observa el agitador
magntico para desgacificar las muestras de gaseosa.
Materiales:
- 04 vasos de 50 mL.
- 02 fiolas de 25 mL.
- 04 fiolas de 50 mL.
- 02 fiolas de 10 mL.
- 01 pipeta volumtrica de 1 mL.
- 01 pipeta volumtrica de 2 mL.
- 01 pipeta volumtrica de 5 mL.
- 01 pipeta volumtrica de 3 mL.
- 01 propipeta.
Reactivos:
Estndar de cafena.
Agua destilada.
04 Muestras de bebidas gasificadas (guarana, inka kola, 7up y red bull)
V.
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
A. PREPARACIN DE LA MUESTRA:
-
Colocar 50 mL de la bebida gasificada en un vaso de 100 mL, luego
desgacificar en un agitador magntico por 15 minutos.(excepto con el red bull)
Tomar 1 mL de la bebida desgacificada y llevar a volumen de 50 mL en una
fiola con agua detilada.
B. PREPARACIN DE ESTNDARES:
-
Pesar 0,100 g de cafena y llevar a fiola de 100 mL. Enrasar con agua
destilada.
Tomar 1 mL de la solucin anterior y llevar a volumen de 100 mL en fiola con
agua destilada. (patrn A: 10 ppm).
Tomar del patrn A 5 mL y llevar a fiola de 50 mL. Enrasar con agua
destilada.
Tomar del patrn A 3 mL y llevar a fiola de 10 mL. Enrasar con agua
destilada.
Tomar del patrn A 5 mL y llevar a fiola de 10 mL. Enrasar con agua
destilada.
C. PROCEDIMIENTO
PARA
LA
OPERACIN
DEL
ESPECTROFOTMETRO
ULTRAVIOLETA VISIBLE UV 1700, SHIMADZU:
-
Encender el supresor de picos y el estabilizador.
Antes de encender el espectrofotmetro retirar del compartimiento de muestra
la bolsa que contiene el desecante.
Encender el espectrofotmetro, levantar la pantalla y esperar a que se realice
la verificacin del instrumento.
Encender la computadora.
Presionar el espectrofotmetro F4 (PC CONTROL) y cerrar la pantalla.
Ingresar al software UV PROBE haciendo clic en el cono UV PROBE.
Ingresar al modo SPECTRUM y hacer clic en CONECT, luego seleccionar
BASELINE para hacer la correccin de la lnea base (rango: 190 400 nm).
Colocar en el compartimiento de muestra las celdas (muestra y referencia)
con el blanco y presionar AUTOZERO.
D. DETERMINACIN DE LA LONGITUD DE ONDA DE LA CAFENA:
Colocar en el compartimiento de la muestra uno de los patrones.
Presionar START.
Seleccionar la longitud de onda de la cafena.
Retirar el patrn del compartimiento de muestra y descartar lan solucin.
Ir al modo PHOTOMETRIC, seleccionar METHOD e ingresar el valor obtenido
de la longitud de onda de la cafena.
Llenar la tabla con el blanco (BK) y los estndares (ST1; ST2; ST3).
Colocar nuevamente le blanco en las 2 celdas. Hacer click en blanco (BK) y
luego click en READ.
Retirar el blanco del compartimiento de muestra y descartar.
E. TRAZAR LA CURVA CON LOS ESTNDARES DE 1, 3, 5 y 10 ppm:
Colocar en la celda de muestra el estndar de 1 ppm y hacer click en READ.
Retirar y descartar la solucin.
Lavar la celda 2 veces con la solucin estndar de 3 ppm y llenarla.
Colocar en la celda de muestra el estndar de 3 ppm y hacer click en READ.
Retirar y descartar la solucin.
Lavar la celda 2 veces con la solucin estndar de 5 ppm y llenarla.
Colocar en la celda de muestra el estndar de 1 ppm y hacer click en READ.
Retirar y descartar la solucin.
F. LECTURAS DE LAS MUESTRAS:
-
Llenar la tabla con las muestras (M1; M2; M3; M4 y M5).
Lavar la celda 3 veces con agua destilada.
Colocar en la celda de muestra M1 y hacer click en READ.
Retirar y descartar la solucin.
Lavar la celda 3 veces con agua destilada.
Colocar en la celda de muestra M2 y hacer click en READ.
Retirar y descartar la solucin.
Lavar la celda 3 veces con agua destilada.
Colocar en la celda de muestra M3 y hacer click en READ.
Retirar y descartar la solucin.
Lavar la celda 3 veces con agua destilada.
Colocar en la celda de muestra M4 y hacer click en READ.
Retirar y descartar la solucin.
Lavar la celda 3 veces con agua destilada.
Colocar en la celda de muestra M5 y hacer click en READ.
Retirar y descartar la solucin.
G. GRFICAS DE LA CURVA PATRN:
Con los datos obtenidos de absorbancia y concentracin, trace la curva
patrn.
H. DETERMINACIN DE LAS CONCENTRACIONES DE LAS MUESTRAS:
Con las absorbancias obtenidas de la medicin de las muestras, obtenga la
concentracin de cada una de las muestras ubicndolas en la curva patrn.
VI. DATOS
TABLA N1: CONCENTRACIONES Y ABSORBANCIAS DE LAS SOLUCIONES STNDAR
Concentracin
(ppm)
[ ]
Absorbancia
273.0 nm
Bk
0.000
St1
0.059
St2
0.181
St3
0.299
St4
10
0.581
BK : Blanco)
St1 : Cafena 1 ppm(5 mL en 50 mL)
St2 : Cafena 3 ppm(3 mL en 10 mL)
St3 : Cafena 5 ppm(5 mL en 10 mL)
St3 : Cafena10 ppm
(5 mL en 10 mL)
TABLA N2: CONCENTRACIONES Y ABSORBANCIAS DE LAS MUESTRAS DE
GASEOSAS
Concentracin
(ppm)
Absorbancia
[ ]
Observacin:
M!
4.225
0.249
M2
2.606
0.155
M3
5.186
0.305
M4
0.825
0.051
M5
7.806
0.457
[ ] = concentracin obtenida de la lectura del equipo.
M1 : Guaran
(1 mL en 50 mL)
M2 : Inka kola
(1 mL en 50 mL)
M3 : Inka Kola
(2 mL en 50 mL)
M4 : 7up
(10 mL en 50 mL)
M5 : Red bull(2 mL en 100 mL)
VII. GRAFICAS
GRFICA N1: CURVA DE CALIBRACIN
0.7
0.6
0.58
f(x) = 0.06x + 0
R = 1
0.5
0.4
ABSORBANCIA
0.3
Abs vs [ ]
0.3
0.2
Linear (Abs vs [ ])
Linear (Abs vs [ ])
0.18
0.1
0.06
0
0
10
12
CONCENTRACIN (ppm)
GRFICA N2: CONCENTRACIN DE LAS MUESTRAS VS ABSORBANCIA
0.5
0.45
0.46
f(x) = 0.06x + 0
R = 1
0.4
0.35
0.31
0.3
ABSORBANCIA
0.25
0.25
Abs vs [ ]
0.2
Linear (Abs vs [ ])
0.16
0.15
Linear (Abs vs [ ])
0.1
0.05
0.05
0
0
CONCENTRACIN(ppm)
VIII.
RESULTADOS
Concentracin
Concentracin
(ppm)
(ppm)
[ ]
[ ]
M!
4.225
4.232
0.249
M2
2.606
2.614
0.155
M3
5.186
5.196
0.305
M4
0.825
0.824
0.051
M5
7.806
7.812
0.457
Absorbancia
[ ] = concentracin obtenida de la lectura del equipo.
[ ] = concentracin obtenida en la curva de calibracin.
M1 : Guaran
(1 mL en 50 mL)
M2 : Inka kola
(1 mL en 50 mL)
M3 : Inka Kola
(2 mL en 50 mL)
M4 : 7up
(10 mL en 50 mL)
M5 : Red bull(2 mL en 100 mL)
La obtencin de las concentraciones de las muestras M1, M2, M3, M4 y M5, se obtuvieron
por la ecuacin de la grfica de la curva de calibracin de las muestras estndar de
cafena.
Y=0.0581.X + 0.0031
X= (Y 0.0031)/ 0.0581
Siendo X : Concentracin
Y : Absorbancia
IX. DISCUSION DE RESULTADOS
-
Al momento de hacer las lecturas el equipo arroja varios picos de las cuales
con ayuda de la teora (que nos dar como referencia en que se dar la
correcta lectura, por ejemplo, para la cafena 273 nm) se descartar las
lecturas de los dems picos.
Las concentraciones de las muestras obtenidas en la curva de calibracin de
las muestras estndar difieren de las lecturas que arroj el equipo.
E las 5 muestras, todas se encuentran dentro del rango de 0-10ppm, los
cuales tambin concuerdan con la lectura del equipo aunque su valor difiere
por una pequea diferencia.
Segn la etiqueta de Red Bull, contiene 32 mg por 100 mg, la muestra
contuvo 6.4 ppm, y comparando con los resultados difiere significativamente.
X.
CONCLUSIONES
Los mtodos de instrumentacin son muy susceptibles a errores cometidos por
el analista, as que se debe tener cuidado al momento de preparar las muestras
ya que estas son diluidas y esto afectara en la lectura de las absorbancias.
La que tiene ms contenido de cafena fue la bebida energizante Red Bull y la
que tiene menos concentracin es la gaseosa 7UP.
Los niveles de cafena encontrados en las bebidas carbonatadas analizadas,
variaron de acuerdo a la marca.
XI. BIBLIOGRAFIA
Espectrofotometra: Espectros de absorcin y cuantificacin calorimtrica de
biomolculas. Nieves Abril Daz, Antonio Brcena Ruz, Emilio Fernndez Reyes.
Bioqumica y Biologa Molecular Universidad de Crdova.
Skoog D. West D. Anlisis Instrumental Edit. Mc. Graw Hill Mexico 1992.
Anlisis Qumico e Instrumental Moderno-Autores: Harold F. Walton/Jorge
Reyes Pag. 213.
Fundamentos de la Qumica Analtica- Octava edicin-Autores: Skoog, West,
Holler, Crouch Pgs: 770, 781, 795 - 800
XII. ANEXO
