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Determinación del Factor RhD en Hematología

El documento detalla la determinación del factor Rh (D) y su importancia en inmunohematología, describiendo el sistema Rh, los antígenos y anticuerpos relacionados, así como las variantes débiles del antígeno D. También se incluye un protocolo para la clasificación del fenotipo D y la composición del reactivo anti-D utilizado en el laboratorio. Se enfatiza la necesidad de utilizar sueros adecuados para detectar variantes del antígeno D y se presentan controles para asegurar la validez de los resultados.

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Determinación del Factor RhD en Hematología

El documento detalla la determinación del factor Rh (D) y su importancia en inmunohematología, describiendo el sistema Rh, los antígenos y anticuerpos relacionados, así como las variantes débiles del antígeno D. También se incluye un protocolo para la clasificación del fenotipo D y la composición del reactivo anti-D utilizado en el laboratorio. Se enfatiza la necesidad de utilizar sueros adecuados para detectar variantes del antígeno D y se presentan controles para asegurar la validez de los resultados.

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LABORATORIO

DETERMINACIN DEL
FACTOR RH (D)

Prof. Mnica Maldonado R.


INMUNOHEMATOLOGA - 2014

Sistema Rh
Se descubri en 1940 por Weiner y Landsteiner.

Cromosoma: 1p34.-p36.2
Nombre de genes: RHD, RHCE
Nombre del producto de los genes: polipptido RhD
polipptido RhCE
Se han descrito 52 antgenos
Antgeno D (RH1): define condicin de POSITIVO.
Otros antgenos: C,c,E,e.
Antgeno D: mosaico antignico, determinado por epitopos

La mayora que porta el gen RHD, tiene polipptido D completo,


pero existen variantes dbiles, por expresin disminuida o
incompleta

EXPRESIONES DEL ANTGENO RhD

Vsquez M; Maldonado M. Sistemas sanguneos eritrocitarios


de Importancia clnica. Ed. Universidad de Talca. 2013

EXPRESIONES DBILES

D dbil: Son aquellos


individuos con un
reducido nmero de
antgenos D por hemate.

D parcial: Se refiere a
los individuos que
han perdido eptopos
del antgeno D.

Vsquez M; Maldonado M. Sistemas sanguneos eritrocitarios


de Importancia clnica. Ed. Universidad de Talca. 2013

Sistema Rh
Anticuerpos Rh(D):
Los aloanticuerpos anti-Rh(D) son de origen inmunes

Clase IgG, usualmente IgG1 y o IgG3


Pocas veces fijan Complemento
Aparecen en individuos D negativos o en D parciales
Despus del ABO, el ms importante en la clnica:
Anti-D causa reaccin transfusional hemoltica
Incompatibilidad madre-hijo: enfermedad hemoltica del feto y del RN

Fenotipificacin Antgeno D
IMPORTANTE
Utilizar un suero anti D que sea capaz de detectar las variantes
parciales y dbiles del antgeno D
COMPOSICIN DEL REACTIVO Anti D
Es una mezcla de anticuerpos IgG e IgM anti-D monoclonales humanos, o
mezcla policlonal humano (IgG) y monoclonal humano (IgM)
Ag D no es inmunognico para ratones BALB/c: difcil obtener monoclonales
murinos anti-D.
Se obtienen de humanos inmunizados:
(Leucocitos + VEB) + Cl Mieloma = Hibridoma
Cada Laboratorio informa la composicin del reactivo que produce:
ANTI-D (IgG+IgM)
Lnea celular IgG MS-26, IgM RUM-1.
Tampn fosfatos que incluye: Cloruro sdico 0,9 g %, Albmina bovina
3 g %, Azida sdica <0,1% y potenciadores macromoleculares.

Protocolo Clasificacin Rh
(Fenotipo D)

Muestra:

Reactivos:

GR 4% en PBS

Anti D : Mezcla Ig M e Ig G

SAGH

Cel control
SAGH

Protocolo Clasificacin Rh (Fenotipo D)


Procedimiento:

Muestra

Anti D

Rh positivo

Leer
Agregar ms
Anti D

15 a 37 C

Tcnica Du

SAGH

Rh negativo (-)
Leer
Realizar TAD muestra (+)

Lavar 4
veces

Leer

Lavar 4
veces

(-)

(+)
Rh

positivo

(-) Rh positivo dbil (Dw)


SAGH

Leer

(+) Rh indeterminado

Nuevo tubo

Elucin con Cloroquina

Registro en protocolo de resultados:

Anti D

TAD

Conclusin

+++

Rh positivo

0/0

Rh Negativo

0/++

Rh positivo dbil

0/++

++

Rh indeterminado

Estudio incompleto
(no se puede informar Rh)

Controles:

Control (+) Control (-)

Anti D GR R1/r

GR r/r

Si se observa aglutinacin en el control Negativo se debe probar con


el suero control RH (proporcionado por el fabricante de la marca del

suero anti D) para verificar si la aglutinacin podra deberse a los


potenciadores macromoleculares.

Nota: La fase AGH debe ser validada con clulas sensibilizadas

Macaco Rhesus

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