Espectrometra de luminiscencia
molecular
Cap.15
Luminiscencia
Luz cuyo origen no
radica exclusivamente
en las altas
temperaturas
Se da en sustancias que
pueden absorber
energa, excitndose a
niveles mayores y
emitirla bajo forma de
radiacin
electromagntica.
Hay 2 tipos de luminiscencia
Fotoluminiscencia: inducida por una
radiacin del espectro UV/Visible:
fluorescencia y fosforescencia.
Quimioluminiscencia: originada por una
reaccin qumica, incluso de tipo
biolgico.
Teora de la fluorescencia y de
la fosforescencia
Tiene lugar en sistemas qumicos
gaseosos, lquidos y slidos, sencillos o
complejos.
Proceso en dos etapas:
1.Excitacin
2.Relajacin:
Principio de exclusin de Pauli
No pueden haber 2 electrones con los
mismos nmeros cunticos; por lo tanto
solo 2 electrones en un mismo orbital con
espines opuestos.
Electrones apareados o no apareados.
Las molculas con espines apareados no
presentan un campo magntico: son
diamagnticas (no se alteran en un campo
magntico).
Las molculas con electrones
desapareados (radicales libres) presentan
un campo magntico: son paramagnticas
(se alteran en un campo magntico).
Singulete: estado electrnico molecular
con todos los espines apareados.
Doblete: estado electrnico molecular
donde el electrn impar puede tomar dos
orientaciones.
Diagrama de energa para un sistema fotoluminiscente
La quinina presenta dos bandas de excitacin (250 y 350 nm) y una
de emisin (450 nm).
Propiedades
Una molcula es paramagntica en estado
triplete y diamagntica en estado singulete.
Es ms probable una transicin singuletesingulete que una singulete-triplete.
Tiempo de vida de un estado triplete excitado
desde10-4 a varios segundos.
Tiempo de vida de un estado singulete excitado
es 10-8 a 10-5 segundos.
Rendimiento cuntico o eficiencia cuntica
de fluorescencia o de fosforescencia
Es la relacin entre el nmero de molculas que
emiten luminiscencia respecto al nmero total
de molculas excitadas.
Molculas altamente fluorescentes (fluorescena)
eficacia cuntica se aproxima a la unidad; en las
poco fluorescentes se aproxima a cero.
no presentan fluorescencia.
Las estructuras condensadas con stas normalmente si
la presentan.
Ncleos heterocclicos como los siguientes s presentan
fluorescencia.
Para recuperar su estado inicial, se desprenden
del excedente de energa, emitiendo un fotn,
generalmente de longitud de onda en el
espectro de la luz visible.
Fluorescencia: fotoluminiscencia que dura <
0.00000008 (8x10-8) segundos.
Fosforescencia: fotoluminiscencia que dura >
0.00000008 (8x10-9) segundos.
Teora de la
quimioluminiscencia
Tiene lugar en pocos sistemas qumicos.
La reaccin ms sencilla puede formularse:
Donde C* representa la especie C en estado
excitado.
Algunos de los compuestos que
reaccionan dando quimioluminiscencia
son componentes del medio ambiente.
Alta selectividad, sencillez y extrema
sensibilidad son causa del creciente uso
del mtodo de quimioluminiscencia.
Bioluminiscencia: se observa en organismos vivos.
Lmites de deteccin
Se encuentran dentro del intervalo de
partes por billn a partes por milln.
Debido a variaciones de intensidad de la fuente,
de la sensibilidad del detector y de otras
variables instrumentales, es imposible obtener
exactamente las mismas lecturas para una
disolucin o un conjunto de disoluciones de un
da a otro: calibracin diaria.
Aplicaciones
Determinacin de:
Especies inorgnicas (cationes que forman
quelatos fluorescentes).
Especies orgnicas y bioqumicas (cidos
nucleicos, aminocidos, enzimas, hidrocarburos,
etc.).
Cromatografa.
Anlisis de gases (mtodos quimioluminiscentes).
Deteccin de sangre en ciencias forenses
(luminol, hemascena, etc.)
Descripcin de los mtodos de
medida de O3 y NO2
Tcnicas electro-pticas son utilizadas como
mtodos de referencia para la medida de gases
en aire.
El aire muestreado se lleva a una cmara,
donde por una reaccin qumica que produzca
luz fluorescente, la cual se mide con un detector
para que la seal elctrica proporcione la
concentracin del gas deseado.
Medida en continuo de ozono:
quimioluminiscencia en fase gas
Se utiliza para medir ozono en aire.
Se basa en la deteccin de fotones
producidos en la reaccin exotrmica
entre etileno y ozono:
C2H4 + O3 +M productos + hv
Luz emitida de 350-550 nm proporcional a
concentracin de ozono.
Detector: tubo fotomultiplicador.
Rango de deteccin: 0.001 a 100 ppm.
No existen interferencias conocidas.
Respuesta en el orden de 1 seg.
Precisin: 2% a 50 ppb de ozono.
Medida en continuo de xidos de
nitrgeno
Reacccin entre NO y ozono produce
molculas excitadas de NO2, stas emiten
quimioluminiscencia.
Longitud de onda mayores a 600 nm,
centrada en 1200 nm.
Detector: tubo fotomultiplicador.
El aire muestreado se hace reaccionar
con ozono en cmara adyacente a tubo
fotomultiplicador.
Respuesta lineal en amplio rango (hasta
1000 ppm).
Lmite de deteccin hasta decenas de ppt.
Se enfra para evitar ruido trmico de
fotomultiplicador.
Catalizadores: acero inoxidable,
molibdeno calentado, oro calentado.
Precisin de 0.5 ppb y linealidad de +/- 1 %
para tiempo promedio de 60 seg.
Instrumentacin
