UNIVERSIDAD NACIONAL DE JAN
CARRERA PROFESIONAL DE TECNOLOGIA MDICA
V- CILO
TOMA DE MUESTRAS Y AISLAMIENTO
DE HONGOS
CURSO:
MICOLOGIA CLINICA
PROFESOR:
Blog. Microbilogo POLO ZAVALA, Cristian
INTEGRANTES:
ABAD SEVILLANO, Leandra
CORONEL RONCAL, Lesly Arllet.
GUERRERO BECERRA, Alex
GUEVARA ESTELA, Olivia Mayoli.
GUEVARA FONSECA, Yovana
YAJAHUANCA GAYTAN, Shirley Ludy
VAZQUES GOICOCHEA, Kevin
JAN PERU
2014 I
I.
OBJETIVOS
Objetivo general
Identificar los distintos tipos de hongos que se pueden encontrar en
muestras biolgicas.
Aislar
y sembrar a estos hongos en placas Petri utilizando
correctamente sus respectivos agares A. Sabouraud.
Objetivo especfico
Conocer las caractersticas macro morfolgicas de colonias fngicas de
distintos tipos de hongos ya sea en: color, superficie, borde,
consistencia, aspecto y desarrollo.
Atender las explicaciones y sugerencias de nuestro docente antes de
realizar las prcticas de laboratorio de microbiologa en el aislamiento de
hongos.
MICOLOGIA CLINICA TECNOLOGA MDICA
II.
INTRODUCCION
Los hongos no son plantas ni animales, aunque se parezcan en algunas de sus
caractersticas tanto a las unas como a los otros. A las plantas, por ser
organismos sedentarios que se encuentran fijos a un sustrato y, mientras estn
vivos, no cesan de crecer. A los animales, pues, aunque las clulas de los
hongos poseen pared como las de las plantas, las paredes celulares fngicas
son ricas en quitina, la misma sustancia que hace duro el esqueleto externo de
los insectos.
En realidad, los organismos que conocemos como hongos tienen diferentes
orgenes en el rbol de la vida, razn por la cual se distribuyen en tres distintos
reinos. La mayora, los ms familiares y reconocibles, conforman el reino de los
hongos verdaderos (Fung o Eumycota). Otros se ubican en el mismo reino de
las amebas, el llamado Protozoo, como es el caso de los hongos
mucilaginosos; y otros ms, entre los que se cuentan ciertos mohos acuticos
que parasitan peces, comparten un tercer reino, el denominado Chromista, con
las diatomeas, esas particulares algas microscpicas de curiosa simetra.
En el presente informe se presentara como se da el crecimiento de hongos en
los alimentos, aguas, etc, para lo cual se est detallando cada procedimiento y
se est dando a conocer cada resultado para tener una idea ms clara de
cmo actan.
El xito de la prctica est en la observacin de cada detalle en la morfologa
de los tipos de hongos, en seguir en orden correcto los pasos de cada
experimento, en la habilidad en el manejo adecuado de cada material y reactivo
.Es por eso que para una correcta realizacin de trabajo de prctica es
necesario familiarizarse con los nombres, funciones, manejo adecuado del
material de laboratorio de microbiologa para la preparacin de aislamientos de
hongos.
MICOLOGIA CLINICA TECNOLOGA MDICA
III.
MARCO TERICO
3.1.
LOS HONGOS
Los hongos son un grupo extraordinariamente diverso de eucariontes que
difieren mucho por sus caractersticas estructurales y sus modos de
reproduccin. Tienen muy poco en comn, excepto la nutricin heterotrfica
obligada, por la ausencia de clorofila. Sus clulas estn incluidas en paredes
celulares por lo menos en alguna de su ciclo vital, y producen algn tipo de
espora, generalmente en gran nmero.
Existen dos grupos de hongos:
1. Myxomycota o mohos del
lgamo
incluyen
los
mohos
plasmodiales del lgamo que difieren
netamente en su estructura y por sus
medios de reproduccin.
Los mohos de lgamo celulares son
parecidos a los protozoarios y
remedan amibas durante la mayor
parte de sus etapas vitales. No tienen
clulas flageladas y las esporas no se
producen
por
divisiones
citoplasmticas, como en otros
hongos, sino por formacin de
paredes alrededor de clulas amiboides individuales.
2. Eumycota u hongos verdaderos hay unas 80000 especies de hongos
verdaderos, coinciden en muchas propiedades con las algas, por lo que
se piensa que proceden de una o varias divisiones de algas. Los
hongos verdaderos comprenden desde levaduras, ciertos mohos,
mildu, royas, tizones y setas.
Algunos hongos verdaderos son unicelulares, pero la mayora son
pluricelulares formados de filamentos ramificados llamados hifas. La pared
celular externa del hongo puede estar expuesta de quitina, lignina o celulosa.
Toda la masa de hifa ramificada que forma un solo hongo se llama micelio. La
presencia de micelio es una de las caractersticas de Eumycophyta. En el moho
comn del pan este micelio se presenta de forma presenta en forma de una
masa de hebras entrelazadas sobre la superficie, las que penetran en el
interior del pan. En otros hongos, por ejemplo las setas, gran parte del micelio
se encuentra bajo tierra. El sombrero del hongo que comemos es el cuerpo
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esporfero, una estructura reductora especializada que se desarrolla del micelio
subterrneo.
Los hongos son saprofitos o parsitos; se encuentran dondequiera que exista
substancia orgnica disponible; se desarrolla mejor en lugares obscuros y
hmedos. Algunos hongos pueden crecer an bajo condiciones al parecer muy
desfavorables, resisten considerablemente
la plasmlisis, pueden
desarrollarse en soluciones concentradas de sal o azcar, por ejemplo sobre
confitura. Al ramificarse el micelio y establecer contactos con substancia
orgnica, secreta enzimas que desdoblan las protenas, carbohidratos y
grasas, y absorbe productos secundarios.
En esta forma muchos hongos intervienen en forma importante en ciclos como
del carbono, nitrgeno; desintegran los compuestos orgnicos que existen en
las hojas muertas y troncos muertos, y los transforman nuevamente en
compuestos que pueden ser utilizados para el ciclo.
CLASES DE EUMYCOTA
ZYGOMICETES
Es una divisin de hongos, que incluye
alrededor de mil cincuenta especies. Los
hongos pertenecientes al filo Zygomycota
se caracterizan por formar zigosporas con
gruesas paredes, de origen sexual y
esporangiosporas no nadadoras, de
origen asexual. El moho negro del pan
(Rhizopus nigricans), un representante
bien conocido de este grupo del orden
Mucorales, produce masas de hifas sobre
pan, fruta y otros alimentos deteriorados.
El cuerpo de este hongo, compuesto de hifas no septadas, muestra que a
pesar de una pequea diferenciacin celular entre los hongos, las hifas pueden
especializarse por varios propsitos. Los hongos del orden Entomoftorales son
parsitos de las moscas, miniaturas y de otros insectos. Son organismos
sapotrficos, se mantienen de restos de plantas y animales del suelo. Tienen
esporangiosporas sencillas dentro de unos receptculos; en el interior de cada
uno de ellos se desarrollan unas estructuras que llegan a independizarse y
funcionar como conidios. El orden Zoopagales comprende hongos parsitos de
amebas, nematodos y artrpodos.
Los hongos zigospora producen esporas dentro de los
esporangios y durante la reproduccin sexual, se forma
una zigospora antes de la meiosis y la produccin de
esporas. La mayora de los hongos conocidos como
mohos, como los del pan o la fruta, pertenecen a esta
divisin.
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ASCOMYCETES
Son hongos con micelio tabicado que producen ascosporas endgenas. Hay
unas 64.000 especies. Es la Divisin (Filo) ms grande del Reino Fung.
Pueden ser unicelulares y talfitos. La reproduccin puede ser de dos tipos:
asexual, por esporas exgenas (conidios o conidioesporas), y sexual, esporas
endgenas (ascospora).Han sido aislados de lugares extremos, desde dentro
de rocas en la planicie helada de Antrtica hasta las profundidades del mar. En
los grupos ms evolucionados se forman ascocarpos o cuerpos de
fructificacin (esporocarpo).
Existen en ambientes terrestres y acuticos, en sustratos como la madera,
materiales de queratina (uas, plumas, cuernos y pelos), estircol, suelo y
alimento, entre otros. Pueden ser parsitos de animales y el hombre, adems
de atacar a las plantas. Entre los ms sencillos destacan las levaduras
responsables de la fermentacin.
DEUTEROMYCETES
Los
hongos
imperfectos
(fung
imperfecto),
antiguamente
llamados
deuteromicetes
(Deuteromycetes)
o
deuteromicotas
(Deuteromicotas),
comprenden ms de 15000 especies
diferentes1 que se clasifican juntas
porque no se conoce en ellas la fase
sexual de reproduccin. De ordinario, se
trata de hongos de los filos Ascomycota y
Basidiomycota
que
se
reproducen
asexualmente. Son de gran importancia
para el hombre por ser el filo de mayor patogenicidad humana dentro del Reino
Fung y tienen una gran peso en el campo de la Biotecnologa. Entre sus
miembros asimismo se encuentran los gneros Penicillium2 y Aspergillus, entre
otras de gran fama.
El trmino deuteromicotas antes considerado un filo formal ha cado hoy en
desuso dado que los hongos imperfectos no encajan en la clasificacin
taxonmica comn de los hongos basada en el concepto de especie biolgica o
en las caractersticas morfolgicas de las estructuras sexuales (porque, como
ya se dijo, no se conoce su fase de reproduccin sexual); de ah deviene la
denominacin de "imperfectos".
Los
deuteromicetes son
organismos
saprfitos oportunistas que se reproducen
asexualmente por medio de conidios. Cada
conidio forma una hifa y el conjunto de hifas
luego forman los micelios constituidos por
hifas tabicadas.
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BASIDIOMYCETES
Son una divisin del reino Fung que incluye los hongos que producen basidios
con basiodiosporas. Contiene a las clsicas setas y hongos con sombrero. Este
filo es el ms evolucionado y el ms conocido pues comprende numerosos y
variados tipos de hongos. Cuando son de carcter heterotlico, el micelio
primario sufre dicariotizacin (somatogamia o espermatizacin) produciendo
hifas dicariticas que corresponden al micelio secundario. En los hongos de
carcter homotlico una basiodiospora produce el micelio dicaritico. Hay
presencia de quitina en las paredes celulares, y aparecen unas estructuras
llamadas fbulas, muy parecidas a los uncnulos de los ascomicetos.
CARACTERSTICAS MACROMORFOLOGICAS DE COLONIAS FNGICAS
COLOR
ANVERSO
REVERSO produccin de
Pigmento difusible
SUPERFICIE
LISA
ACUMINADA
CRATERIFORME
RADIADA
UMBILICADA
CEREBRIFORME
BORDE
LISO
RADIADO
FESTONEADO
LOBULADO
CONSISTENCIA
BLANDA
FILANTE
ADHERENTE
LEOSA
ASPECTO
CREMOSO
YESOSO
CEREBRIFORME
ALGODONOSO
AFELPADO
ATERCIOPELADO
DESARROLLO
POBRE
REGULAR
ABUNDANTE
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IV.
MATERIALES
4.1. Materiales Biolgicos:
- Ua de pie
- Naranja
- Raspado interdigital de pie
4.2. Materiales de Vidrio:
- Lminas y Laminillas
- Placas Petri
4.3. Otros
- Mechero
- Asa de siembra
4.4.
Medios de cultivo:
- Agar Sabouraud
4.5. Reactivos:
- Azul lactofenol
- Agua destilada
V. METODO
1) Siembra por impregnacin en el centro de la placa
2) Dejar por 7 das a temperatura ambiente
VI. RESULTADOS
Los resultados se darn de acuerdo a lo observado en las distintas muestras.
A. Muestra ua de pie
Muestra: ua de pie
Coloracin: azul de lactofenol.
Estructura observada: Aspergillus niger
- hifas tabicadas.
- capas de filides
- esporangio
- esporangiosporas
- microconidios
Aumento: 400X
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B. Muestra de naranja
Muestra: Naranja en putrefaccin.
Coloracin: azul de lactofenol.
Estructura observada: Penicillium. chrysogenum
- Hifas
- Filide
- Conidios producidos en cadena, de formas esfricas o
elipsoidales, a menudo con una base trunca, hialinos,
de pared delgada y en ocasiones ornamentadas.
Aumento: 400X
C. Muestra de Raspado interdigital de pie
Muestra: Raspado interdigital de pie
Coloracin: azul de lactofenol.
Estructura observada: Trichophyton rubrum
- Hifas septadas
- Conidios
- microconidias piriformes.
- macroconidias multicelulares.
Aumento: 400X
VII.
DISCUSIONES
Muestra de naranja
Las colonias de este gnero son planas, aterciopeladas, pulverulentas,
lanosas, o algodonosas. De crecimiento rpido. Inicialmente tienen un aspecto
blanco que se torna verde azul, verde gris, verde oliva o amarillo. Conidiforos
rectos, hialinos o levemente pigmentados, con fialides que nacen directamente
de la hifa o sobre mtulas. Conidias producidas en cadena, de formas esfricas
o elipsoidales, a menudo con una base trunca, hialinas, de pared delgada y en
ocasiones ornamentadas.
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Muestra ua de pie
Las colonias de Aspergillus pueden ser negras, marrones, verdes,
amarillas, blancas o de otro color en funcin de la especie y de las condiciones
de crecimiento. El aspecto de la colonia puede orientar la identificacin inicial,
pero la identificacin definitiva precisa del estudio microbiolgico de las hifas y
la estructura de la cabeza conidial. Los aspergilos forman hifas tabicadas
ramificadas que producen cabezas conidiales cuando se exponen a aire en
condiciones in vitro e in vivo. Cada cabeza conidial se compone de un
conidiforo con una vescula terminal, la cual porta una o dos capas de filides,
o esterigmas. A su vez, las filides alargadas generan columnas de conidias
esfricas
Raspado interdigital de pie
El crecimiento en el agar dextrosa de Sabouraud es relativamente lento
y requiere 4 a 7 das hasta la madurez. Al comienzo, la superficie de la colonia
es blanca y la consistencia puede ser algodonosa, aterciopelada o granular, lo
cual depende de la cepa, el medio de cultivo que se emplea y la magnitud de la
esporulacin. Como indica el nombre de la especie, una observacin
importante es la produccin de un pigmento hidrosoluble, de color rojo vino en
el reverso de la colonia que se difunde al agar. La produccin de pigmento es
ms intensa en las colonias que crecen en agar harina de maz o agar patata
dextrosa que en el agar dextrosa de Sabouraud. Vistos con el microscopio, los
microconidios de T. rubrum tienden a presentar formas de lgrimas y suelen
distribuirse a cada lado de las hebras de las hifas, lo que origina un aspecto de
pjaros en un cerco, en lugar de la agrupacin laxa observada con M.
mentagrophytes. Raras veces se observan macroconidios multicelulares;
cuando estn presentes son largos y con forma de lpiz, con paredes lisas,
delgadas, similares a los generados por T. mentagrophytes.
10
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VIII.
ANEXOS
FUENTE:N01
El
podrido
producido
por
Penicillium, es el ms conocido y
el que ms se ve en nuestros
almacenes. Son los clsicos
mohos verde y azul
FUENTE:N02
Aspergillus en su aspecto de la
colonia
puede
orientar
la
identificacin inicial, pero la
identificacin definitiva precisa
del estudio microbiolgico de las
hifas y la estructura de la cabeza
conidial.
FUENTE N03
Trchophyton rubrum. Tincin
con azul algodn de lactofenol
que muestra microconidias
piriformes y macroconidias
multicelulares
(aumento 1000 x).
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MICOLOGIA CLINICA TECNOLOGA MDICA
IX.
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
Tortora Gerald J., Funke BerdellR., Case Christine L., Introduccin a la
Microbiologa, Editorial Medica Panamericana, 9 Edicin, Buenos
Aires, 2007, Pg. (345 -352)
Prescott, Lansing M., Harley, John P., Klein, Donald, Microbiologa,
Editorial McGraw-Hill, 5 Edicin, Espaa, 2004, Pg. 595
Teresa Mier, Conchita Toriello y Miguel Ulloa, Hongos microscpicos
saprobios y parsitos: mtodos de laboratorio, Mxico, 2002.
[Link]
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MICOLOGIA CLINICA TECNOLOGA MDICA
ESTERILIZACIN DE MATERIAL Y
PREPARACIN DE MEDIO DE
CULTIVO
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MICOLOGIA CLINICA TECNOLOGA MDICA
I.
INTRODUCCIN
Por su minsculo tamao, los microorganismos no pueden estudiarse como
individuos, sino que es necesario manejarlos como poblaciones. Para ello es
necesario cultivarlos, es decir, favorecer su multiplicacin in Vitro, en ambientes
especiales que proporcionen las condiciones semejantes a las de sus hbitats
naturales. En estos ambientes se debe eliminar a todos aquello
microorganismos que interfieren en el estudio del microorganismo de inters, al
que adems de proporcionar los nutrientes necesarios para su crecimiento
multiplicacin.
II.
III.
OBJETIVOS:
Lavar, preparar y envolver correctamente el material que se someter a
esterilizacin.
Seleccionar los mtodos de esterilizacin adecuados para las diversas
necesidades del laboratorio de microbiologa.
Comprobar la efectividad del proceso de esterilizacin.
Elaborar adecuadamente los medios de cultivo deshidratados y por
componentes.
Envasar los medios de cultivo de manera adecuada en los diferentes
recipientes de acuerdo al uso que se les dar.
Relacionar la composicin de los diversos medios de cultivo con sus
caractersticas y aplicaciones.
MARCO TERICO
En muchos aspectos, el pequeo tamao de los microorganismos los hace
sujetos ideales para la experimentacin. Se pueden cultivar millones de
organismos en un solo mililitro de medio para su estudio. La rpida
multiplicacin de estas diminutas criaturas constituye tambin una ventaja
experimental, ya que se puede trabajar con muchas generaciones en un solo
da, Es ms, los conocimientos adquiridos en el estudio de los
microorganismos pueden ser, a menudo, generalizados a los sistemas
celulares, plantas y animales, incluida la especie humana. Para llevar a cabo
experimentos con microorganismos es usualmente necesario cultivarlos en el
laboratorio.
3.1.
La esterilizacin
La esterilizacin es un proceso a travs del que se puede lograr la destruccin
total de losmicroorganismos viables presentes en un determinado material.
Este procedimiento es de gran utilidad dentro del campo farmacutico, ya que
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MICOLOGIA CLINICA TECNOLOGA MDICA
existen muchos procesos que requieren la utilizacin de materiales estriles.
Entre stos podemos destacar:
-
La esterilizacin de equipos quirrgicos y otros materiales de uso
mdico con el propsito de reducir el riesgo de infecciones en pacientes.
El acondicionamiento del material (pipetas, tubos, placas de Petri,
pinzas, etc.) que va a ser utilizado en los laboratorios de microbiologa.
La preparacin de medios de cultivo que sern empleados con
diferentes propsitos (cultivo de microorganismos, control de ambiente,
equipos o personal, anlisis microbiolgico de medicamentos,
cosmticos, alimentos, etc.)
Existen diversos mtodos de esterilizacin. La seleccin del mtodo a aplicar
en cada caso est determinada por el tipo de producto a esterilizar.
Clasificacin de los mtodos de esterilizacin:
En la siguiente pgina se presenta un esquema de los principales mtodos de
esterilizacin, clasificados de acuerdo al tipo de agente que acta.
1) Agentes fsicos
El calor se puede aplicar como agente esterilizante de dos formas: el calor
hmedo el cual destruye a losmicroorganismos por desnaturalizacin de las
protenas y el calor seco que destruye a losmicroorganismos por oxidacin de
sus componentes celulares. El calor es considerado como el mtodo de
esterilizacin por excelencia siempre y cuando el material a esterilizar soporte
altas temperaturas sin sufrir ningn tipo de dao.
a) Esterilizacin por calor: El calor es el mtodo de eleccin para esterilizar
el material de laboratorio resistente a las altas temperaturas. La
temperatura y el tiempo requerido para esterilizar un material dependen
de que se est utilizando calor seco o calor hmedo.
Esterilizacin con calor seco: La accin bactericida del calor seco se debe a
la oxidacin fsica de un procedimiento lento o coagulacin de la protena
bacteriana por quemadura. En ausencia de humedad se necesita una
temperatura ms alta, ya que en esta forma los microbios son destruidos al
absorber el calor. Pueden ser dos tipos:
Directa: flameado o incineracin ms utilizada en laboratorios y en
algunos hospitales pequeos.
Indirecto: aire caliente u horno de Pasteur con temperatura de 160C a
180C por 1 a 2 horas siendo el ms eficaz y seguro el elctrico.
15
MICOLOGIA CLINICA TECNOLOGA MDICA
Esterilizacin con calor hmedo: El calor hmedo es la forma de vapor
saturado a presin es eficaz para la destruccin de todas las formas
microbianas, incluso espora. La muerte de las bacterias es causada por la
desnaturalizacin y coagulacin de su protena o su sistema intercelular
enzima-protena. Estas reacciones son catolizadas por medio del agua. Estas
pueden ser de dos tipos:
Calor hmedo discontinuo: algunos medios de cultivo que contiene
carbohidratos como la gelatina, leche, etc. no soportan temperaturas
elevadas.
Vapor a presin: conocido como autoclave, que posee todos los
requisitos indispensables como grados de temperatura y tiempo de
exposicin, que junto con el tamao del autoclave y el flujo del vapor, la
densidad y el tamao de la carga en la cmara aumentan la tasa se
muerte de losmicroorganismos, en una temperatura de 121C 132C
durante 15 minutos o ms.
3.2.
Medios de cultivo
Los medios de cultivo son una mezcla de nutrientes que en concentraciones
adecuadas y en condiciones fsicas ptimas, permiten el crecimiento de los
microorganismos. Estos medios son esenciales en el Laboratorio de
Microbiologa por lo que un control en su fabricacin, preparacin,
conservacin y uso, asegura la exactitud, confiabilidad y reproducibilidad de los
resultados obtenidos.
Clasificacin de los medios de cultivo:
En los laboratorios de microbiologa se utilizan diferentes tipos de medios de
cultivo que pueden ser preparados en forma lquida o en forma slida.
Usualmente para preparar un medio slido se parte de un medio lquido al que
se le aade un agente solidificante como el agar, la gelatina o la slicagel.
Los medios de cultivo se pueden clasificar de acuerdo a la naturaleza de sus
constituyentes en:
Medios naturales o complejos: constituidos por sustancias complejas de
origen animal o vegetal, las que son usualmente complementadas por la
adicin de minerales y otras sustancias. En ellos no se conocen todos
los componentes ni las cantidades exactas presentes de cada uno de
ellos.
Medios definidos o sintticos: son los medios que tienen una
composicin qumica definida cualitativa y cuantitativamente.
Generalmente se usan en trabajos de investigacin.(Para bacterias
como: Echerichia coli y Leuconostoc citrovorum)
16
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De acuerdo al uso del medio de cultivo, stos se clasifican en:
Medios de enriquecimiento: son medios lquidos que favorecen el
crecimiento de un tipo de microorganismo en particular. Permiten
aumentar el nmero de microorganismos de ese tipo. Usualmente
contienen una o ms sustancias inhibidoras del crecimiento de los
microorganismos con excepcin de los que se quieren cultivar.
Medios selectivos: son parecidos a los de enriquecimiento, se
diferencian por ser medios slidos y estn diseados para el aislamiento
de microorganismos especficos. (Para bacterias como Salmonella typhi
y Clostridium botulinum).
Medios diferenciales: son medios que contienen indicadores de
productos derivados de la actividad microbiana de los microorganismos.
No contienen ningn tipo de sustancia con actividad antimicrobiana.
Permiten revelar caractersticas fisiolgicas de los microorganismos. (
para bacterias como: Streptococcus pyogenes y Escherichia coli)
Por su composicin los medios de cultivo se clasifican en:
Lquidos: conocidos como caldos, estos son especialmente tiles para
hacer diluciones, para homogenizar mezclas de microorganismos, para
enriquecer cultivos y para rehidratar cepas liofilizadas.
Slidos: Para separar microorganismos y favorecer el desarrollo de las
colonias aisladas en las que es posible observar las caractersticas
tpicas de un solo tipo de microorganismo.
Semislidos: Son aquellos medios lquidos a los que se adiciona agar en
concentraciones de 0.4 a0.8%. Estos se emplean para determinar la
movilidad de los microorganismos microaeroflicos.
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MICOLOGIA CLINICA TECNOLOGA MDICA
IV.
MATERIALES
V.
EQUIPOS
VI. DISCUSIONES Y RESULTADOS
o Se investigaron previamente para la realizacin de esta prctica
conceptos bsicos para la preparacin de medios de cultivo, as como
los tipos de esterilizacin para los mismos, que en este caso se utiliz un
mtodo fsico: presin a vapor, es decir la autoclave que posee los
requisitos indispensables (temperatura y tiempo de exposicin) para
eliminar los microorganismos que pudieran haber quedado en el medio.
o Antes de servir en las cajas de Petri, se realiz la asepsia del rea
limpiando meticulosamente la mesa de trabajo y despus eliminando
impurezas restantes con alcohol prendido. Despus se colocaron 2
mecheros (uno en cada lado, paralelamente) para por medio del calor
eliminar cualquier impureza proveniente del are, para servir el medio en
las cajas de Petri esterilizadas colocando la boca del matraz en el fuego
(antes de servir) y despus sirviendo en las cajas una cantidad
considerable, para despus semitaparlas y dejando las muestras cerca
de los mecheros sobre la mesa de trabajo. Esto se realiz para todas las
cajas de Petri.
o Despus de 10 minutos se revis que se hubieran solidificado las
muestras para despus proceder a taparlas y envolverlas en papel
(volteadas boca abajo) para que si se evaporaba el lquido lo hiciera
hacia la misma muestra y de esta manera no quedaran gotas del lquido
sobre la tapa ya que sera despus esto una posible contaminacin
cuando se quisiera sembrar una muestra y para evitar la deshidratacin.
Por ltimo se coloc el paquete en refrigeracin.
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MICOLOGIA CLINICA TECNOLOGA MDICA
VII.
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS.
Murray, P. 1999. Manual of Clinical Microbiology. 7th edition.
American Society for [Link], DC. Standards of
Sterilization.
2001.
Monitoring
the
Sterilization
Process.
OnlineEducation.
URL: [Link] .com/c3/c3_monitoring.htm
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