Fecha de publicacin: Julio 2002

REVISTA de la SOCIEDAD QUMICA de MXICO

(Rev. Soc. Qum. Mx.)

ISSN 0583-7693

Publicacin trimestral editada y distribuida por la Sociedad Qumica

de Mxico, A.C., Barranca del Muerto 26 (esq. Hrcules). Col. Crdito
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Revista de la Sociedad Qumica de Mxico, Vol. 46, Nm. 2 (2002) 73-78

Investigacin

Control de las propiedades texturales de ZrO2-TiO 2 Sol-Gel.

Efecto de parmetros de sntesis
Mara C. Barrera,*1 Margarita Viniegra,1 Jos Escobar3 y Jos A. de Los Reyes 2
1

Departamento de Qumica y 2Area de Ingeniera Qumica, UAM-Iztapalapa. Av. San Rafael Atlixco No. 186,
Col. Vicentina, Iztapalapa, Mxico 09340, D. F.; Tel: 5804-4648; Fax: 5804-4900; E-mail: [email protected]
3 Instituto Mexicano del Petrleo, Tratamiento de Crudo Maya. Eje Central Lzaro Crdenas 152.
San Bartolo Atepehuacan. Mxico 07730, D.F.
Recibido el 1 de noviembre del 2001; aceptado el 30 de enero del 2002
Resumen. Se sintetiz ZrO2-TiO 2 a varias composiciones por sol-gel
a baja temperatura con HNO 3, NH4OH o CH3COOH como aditivos.
Los alcogeles se calcinaron (300-700 C) y caracterizaron por fisisorcin de N2, DRX y ATG-ATD. Al estudiarse diferentes composiciones, relaciones H2O / alcxido, aditivo / alcxido y tipos de aditivo fue posible modular las propiedades texturales de los xidos
preparados. El mximo en el rea especfica se obtuvo en contenidos
cercanos al equimolar (muestras calcinadas a 500 C). La formulacin rica en TiO 2 (85 % peso) fue la que present poros mayores
(5-8 nm).
Palabras clave: ZrO2-TiO 2, sntesis, texturas.

Abstract. ZrO2-TiO 2 at different compositions was prepared by low

temperature sol-gel method with HNO3, NH4OH and CH3COOH as
additives. The alcogels were calcined (300-700 C) and characterized
by N2 physisorption, XRD and TGA-DTA. By varying the composition, the H2O / alkoxide and additive/alkoxide ratios and the type of
additive it was possible to modulate the textural properties of the prepared oxides. The TiO 2-rich formulation (85 w %) was the one with
larger pores (5-8 nm). The maximum in surface area was found for
samples of composition near the equimolar (samples calcined at 500
C).
Keywords: ZrO2-TiO2, synthesis, textures.

Introduccin

cado alternativas en lo referente a nuevos soportes con mejores propiedades que el Al2 O 3 tradicionalmente utilizado. En
este sentido, se han estudiado materiales tales como TiO2 [4],
ZrO2 [5] y algunos tipos de zeolitas [6]. Otros materiales con
propiedades promisorias para su aplicacin en esquemas de
HDT son los xidos mixtos de Al2O 3 -TiO2 [7] y ZrO2 -TiO2
[5], entre otros. Aunque este ltimo sistema presenta
propiedades interesantes como soporte de catalizadores para el
hidrotratamiento de gasleo [5], los principales inconvenientes
que presenta son volumen poroso (Vp) reducido y distribucin
de tamao de poros (DTP) estrecha, situndose generalmente
el mximo en el intervalo de 3-5 nm [8]. Se ha reportado [9]
que debido al dimetro cintico de heterocompuestos de S presentes tpicamente en cortes petroleros intermedios, se requiere de catalizadores con el mximo de la DTP en el intervalo 5
nm < p < 10 nm ( p , dimetro de poro). Por ello, deben investigarse diversas metodologas que permitan la preparacin
de xidos mixtos ZrO2 -TiO 2 con mayores valores de rea especfica (Sg), porosidad y dimetro de poros, caractersticas
que haran posible la aplicacin exitosa de estos materiales en
el HDT de destilados medios (diesel).
En este trabajo se investiga el efecto del contenido de
TiO2 , del tipo de aditivo de sntesis y de las relaciones molares
H 2O / alcxido y aditivo / alcxido sobre las propiedades texturales de soportes de ZrO2 -TiO 2 . Los materiales fueron caracterizados por fisisorcin de N2 , difraccin de rayos X y anlisis trmico.

En aos recientes se ha incrementado el inters por el estudio

de nuevos materiales catalticos aplicables al hidrotratamiento
(HDT) de fracciones derivadas del petrleo. El motivo principal consiste en que las formulaciones actuales probablemente
no podrn llevar a cabo la remocin de compuestos inde seables en las cargas a tratar hasta la concentracin que fijarn
las normas para el control de emisiones contaminantes que entrarn en vigor en el futuro prximo. stas restringirn severamente el contenido de azufre y compuestos aromticos en los
combustibles de uso industrial y automotriz para que, sin perderse sus propiedades, las emisiones nocivas al ser humano se
reduzcan al mnimo [1]. La problemtica se complica al considerar que para la obtencin de combustibles actualmente se
procesan crudos cada vez ms pesados, y por ende, con mayor
contenido de las especies que se requiere remover. Los materiales catalticos que ms comnmente se utilizan a escala industrial para efectuar el HDT de cortes petroleros son el CoMo y NiMo sulfurados soportados en almina [2]. Sin embargo, sus propiedades intrnsecas hacen que difcilmente puedan
ser utilizados en los esquemas de hidrodesulfuracin profunda,
cuya puesta a punto ser necesaria a la brevedad posible. Las
normas de calidad establecidas para combustibles diesel indican la necesidad de nuevos catalizadores con alto poder hidrogenante y gran resistencia al envenenamiento por azufre. A
este respecto se han propuesto diversas formulaciones de metales nobles tales como el Pt o el Pd [3]. Tambin se han bus-

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Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

Mara C. Barrera et al.

Fig. 1. Efecto de la composicin y del aditivo de sntesis sobre el rea

especfica de ZrO2-TiO 2 sol-gel calcinado a 500 C (h = 20, a =
0.05).

Fig. 3. Efecto de la composicin sobre la distribucin de poros de

ZrO2-TiO 2 sol-gel calcinado a 500 C (h = 20, a = 0.05).

Fig. 2. Efecto de la composicin sobre la estabilidad trmica de los

xidos equimolar y rico en TiO 2 (ZT6040 y ZT1585, respectivamente) preparados por sol-gel con HNO3 (h = 20, a = 0.05).

Fig. 4. Efecto del incremento en la relacin molar H2O / alcxido (h)

sobre la distribucin porosa del xido equimolar preparado con
HNO3 y calcinado a 500 C (a = 0.05).

Parte experimental

do a la nomenclatura utilizada, la ltima letra de cada clave representa el tipo de aditivo utilizado. Por ejemplo, el xido
mixto con 60 % peso de ZrO2 preparado con HNO 3 se designa
como: ZT6040A.

Materiales. Los alcxidos precursores fueron tetraisopropxido de titanio (98 % peso) y propxido de circonio (70 % peso)
(solucin en 1-propanol) (Aldrich). Se emple isopropanol
99.9 % (Baker) como disolvente y agua desionizada mediante
un sistema Milli-Q (Millipore Corp.). Como aditivos de sntesis se utilizaron HNO3 (66 %), NH4 OH (30 %) y CH3 COOH
(99.7 %) (Baker).
Sntesis de Soportes. Se prepararon soportes de ZrO2 (Z),
TiO2 (T) y de sus correspondientes xidos mixtos (ZTxy, x: %
peso de ZrO 2 , y: % peso de TiO2 ) por tcnica sol-gel a baja
temperatura de acuerdo a [10]. Se disolvieron los alcxidos de
Ti y/o Zr en isopropanol y se enfriaron a la temperatura de
sntesis (~ 0 C) utilizando un bao fro Cole-Parmer Polystat.
Posteriormente se adicion la mezcla de hidrlisis (aditivo +
H 2O). Se emplearon 3 distintos aditivos: HNO 3 (A) como catalizador de hidrlisis, NH4 OH (B) como catalizador de condensacin y CH3 COOH (C) como agente complejante. Las
relaciones molares utilizadas fueron: 2-propanol / alcxido =
65, H2 O / alcxido = 20 y 30, aditivo / alcxido = 0.05 y 0.2.
Estas dos ltimas relaciones se designaron h y a, respectivamente. Al trmino de la adicin, los geles se dejaron madurar
durante 24 h a la temperatura de sntesis. Los alcogeles se
secaron a vaco y temperatura ambiente y luego se trataron en
mufla bajo el siguiente programa: de temperatura ambiente a
120 C, mantenindose estas condiciones por 2 h para luego
llegar a la temperatura final de calcinacin (300, 500, 600 o
700 C) a la que se permaneci por 4 h. Para ambas etapas se
emple una rampa de calentamiento de 3 C min1 . De acuer-

Caracterizacin de Soportes. La caracterizacin textural de

los diferentes xidos se realiz por fisisorcin de N2 a 196
C utilizando un aparato AUTOSORB-1 (QUANTACHROME) determinndose los parmetros de rea especfica (Sg)
por el mtodo BET [11], la distribucin de poros (DTP) por el
mtodo BJH [12] y el volumen poroso (Vp ) con el valor mximo de volumen adsorbido. La identificacin de fases cristalinas para los xidos calcinados a distintas temperaturas se
efectu por difraccin de rayos X empleando un aparato Siemens D-500 Kristalloflex. La radiacin utilizada fue la CuKa
con = 0.15406 nm. Los termogramas (Anlisis Termogravimtrico, TG y Anlisis Trmico Diferencial, ATD) correspondientes a las muestras secas a vaco y sin calcinar se
determinaron con un equipo Netzch Thermische Analize, STA
409 EP bajo atmsfera esttica de aire.

Resultados y discusin
Fisisorcin de N2. En acuerdo con reportes previos [8], el
rea especfica del ZrO 2 -TiO2 es funcin de la composicin
(Fig. 1), con un mximo para el slido ZT4060A (materiales
con h = 20, a = 0.05, preparados con HNO3 y calcinados a 500
C). Para este xido, la tcnica sol-gel permite obtener mayor
rea especfica, en comparacin con otras metodologas utilizadas por otros autores [13, 14]. El S g de las formulaciones

Control de las propiedades texturales de ZrO2 -TiO2 Sol-Gel. Efecto de parmetros de sntesis

Fig. 5. Efecto del aditivo de sntesis sobre la distribucin de poros del

xido equimolar calcinado a 500 C (h = 30, a = 0.2).

Fig. 6. Efecto del aditivo de sntesis sobre la estabilidad trmica del

xido equimolar calcinado a diferentes temperaturas (h = 20, a =
0.2).

mixtas llega a ser 3 veces mayor que las de los xidos simples. El incremento es especialmente notable para xidos con
contenido cercano al equimolar (ZT6040). La adicin de
diferentes agentes (HNO3, NH 4OH, CH3 COOH) no afecta el
S g de este material. Para slidos preparados con cido ntrico
(A), la estabilidad trmica del material equimolar es mayor
que la del rico en TiO2 (ZT1585A), ya que su prdida de rea
especfica en el intervalo de temperaturas estudiado es menor
(Fig. 2). El sinterizado del material es completo luego del
tratamiento a 900 C (Sg = 15 m2 g 1, Vp = 0.14 cm 3 g1 ).
La distribucin de poros muestra un mximo en la frontera micro-mesoporosa (Fig. 3) para el material equimolar
preparado con HNO3 (ZT6040A). Este hecho y su alta Sg indican que se favorece la formacin de partculas ms pequeas
que las del resto de los materiales preparados. La formulacin
ZT1585A fue la que present poros de mayores dimensiones
con un mximo en el intervalo de 5-8 nm. Tal como se aprecia
en la Fig. 3, la presencia de ZrO2 en concentracin moderada
(15 % peso) produce un incremento notable en la cantidad de
poros que presenta el TiO 2, sin afectar su tamao. Por su
parte, el perfil de la DTP del ZrO2 sugiere una distribucin
amplia de tamao de partculas. El aumento en la relacin
H 2O / alcxido (h) de 20 a 30 produce una mayor cantidad de
mesoporos, desplazndose el mximo de la DTP del xido equimolar desde 2-4 nm (Fig. 3) a 3-6 nm (Fig. 4). En cuanto al
efecto de los distintos aditivos sobre la DTP de la misma
muestra (Fig. 5), se observa que el agente bsico promueve un
aumento notable en el volumen poroso debido a una alta proporcin de poros de gran tamao (p >10 nm). Efectos similares originados en el uso de aditivo alcalino (NH4OH) han
sido previamente reportados para otros sistemas de xidos
mixtos [10]. La utilizacin de CH3COOH (agente complejante) durante la sntesis de slidos equimolares resulta en la formacin de partculas pequeas de distribucin de tamaos

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Fig. 7. Efecto del aditivo de sntesis sobre la distribucin porosa del

slido rico en TiO2 (ZT1585) calcinado a 500 C (h = 20, a = 0.05).

estrecha, reflejndose sto en el perfil de su DTP, Fig. 5. A diferencia de lo observado para xidos mixtos Al 2 O 3 -TiO2
preparados va sol-gel [10], la estabilidad trmica del sistema
ZrO 2 -TiO2 en el intervalo de 500 a 600 C no mejora por la
adicin del agente bsico, Fig. 6. En la Fig. 7 se aprecia que el
aditivo bsico promueve una distribucin de poros bimodal
para el material ZT1585B. El mximo que se observa para este xido en la regin de poros de dimetro pequeo (10 nm <
p ) es ms estrecho y se desplaza a menores dimetros, en
comparacin con el del slido preparado con aditivo cido. El
segundo mximo aparece en el intervalo de 20-40 nm. Estos
resultados pueden explicarse considerando que mientras que
el HNO 3 acelera la hidrlisis, el NH 4 OH lo hace con la condensacin [15]. En medio alcalino, el crecimiento de las cadenas polimricas durante esta etapa se orienta a la parte media,
producindose geles con alto grado de entrecruzamiento [15]
dando como resultado partculas voluminosas con grandes
espacios interpartcula que aumentan el volumen poroso. Por
otra parte, la complejacin entre los acetatos y los tomos
metlicos (Ti y Zr) modifica la funcionalidad de los alcxidos
precursores, definida sta como el nmero de ligandos susceptibles a ser removidos durante el proceso de formacin del gel
[15]. La alta estabilidad de los enlaces entre los ligandos acetoxi terminales y los tomos metlicos impide el crecimiento
de grandes micelas, formndose cadenas cortas que resultan
en partculas pequeas y de distribucin de tamao homognea [16]. La morfologa de estas partculas propiciara la distribucin de poros estrecha y desplazada a dimetros pequeos tal, como se observa en la Fig. 5.
Los cambios en la textura de los xidos mixtos obtenidos
al variar diversos parmetros de sntesis se resumen en la Tabla 1. Aunque el uso del agente bsico promueve mayor volumen poroso para las formulaciones ricas en titania (ZT1585,
Filas 12-14) su rea especfica prcticamente no se altera en
funcin del aditivo empleado. Caso contrario, para el xido
equimolar (ZT6040) al utilizarse el catalizador de condensacin (NH 4 OH) en lugar del de hidrlisis (muestras con a = 0.2
y h = 30) el rea especfica aumenta ligeramente (~ 10%) en
tanto que el volumen poroso se duplica (Filas 5 y 8). Asimismo, el incremento en la relacin HNO3 / alcxido de 0.05 a
0.2 provoca una pequea disminucin en el rea especfica de
dicha formulacin y un decremento importante en su V p (Filas
4 y 5). Un inconveniente de aumentar la cantidad de agente cido radica en que se pueden alcanzar condiciones explosivas
durante la calcinacin de los alcogeles, probablemente debido

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Fig. 8. Evolucin de fases cristalinas con la temperatura de calcinacin para el xido equimolar (ZT6040) preparado con HNO 3 (h = 20,
a = 0.05).

Fig. 9. Evolucin de fases cristalinas con la temperatura de calcinacin para el xido rico en TiO 2 (ZT1585) preparado con HNO 3 (h
= 20, a = 0.05).

Fig. 10. Anlisis trmico diferencial de los xidos simples y mixtos

de ZrO2 y TiO2 sintetizados con HNO3 (h = 20, a = 0.05).

Mara C. Barrera et al.

a la presin generada por la eventual vaporizacin del disolvente ocluido en la matriz slida. En esta lnea, se han reportado [17] fenmenos de esa naturaleza durante la sntesis de
ZrO 2 sol-gel, atribuyndose este fenmeno a que la condensacin en medio cido de los precursores alcxido parcialmente hidrolizados podra conducir a la formacin de porosidad cerrada en donde el disolvente se acumulara. En nuestro
caso, al emplearse cantidades menores de cido ntrico, se evitaron los problemas ya mencionados, quiz debido a la formacin de una matriz slida ms abierta y porosa (Filas 4 y 5,
Tabla 1). El incremento en la relacin NH 4 OH / alcxido de
0.05 a 0.2 (muestras con h = 30) resulta en un aumento de
30% en el S g y el Vp se duplica (Filas 7 y 8). Este ltimo valor
de volumen poroso (0.56 cm 3 g 1) es similar al valor mximo
reportado para este parmetro [18], para slidos de composicin y rea especfica semejante preparados por precipitacin
a pH constante.
Difraccin de rayos X. En la Fig. 8 se observa la evolucin
trmica del slido equimolar preparado con HNO3 (ZT6040A,
h = 20, a = 0.05), calcinado a diferentes temperaturas. A 300 y
500 C se observa microcristalinidad, no registrndose seales
propias de TiO 2 (anatasa o rutilo). La cristalizacin a ZrTiO4
(JCPDD: 7-0290), se lleva a cabo a 700 C. La transformacin
desde una matriz amorfa a una cristalina produce una drstica
prdida en propiedades texturales (Fig. 2), indicando que el
aumento en las dimensiones de los cristales redunda en un
mayor tamao de partculas. Por su parte, el patrn del xido
ZT1585A tratado a 300 C muestra amorficidad para luego
transformarse al correspondiente a la fase anatasa (JCPDD:
21-1272), luego de la calcinacin a 500 C, Fig. 9. Al incrementarse la severidad del tratamiento (700 C) la estructura (y
la textura) permanecen prcticamente sin cambios. Esto difiere de lo observado para el TiO2 sol-gel preparado a condiciones similares, el cual bajo condiciones severas se transforma a rutilo, o a una mezcla anatasa-rutilo con alta proporcin
del ltimo [19]. Este impedimento al cambio de fase sugiere
una fuerte interaccin entre los xidos componentes. la cual
limitara la difusin en estado slido a travs de la cual se
dara el crecimiento de los cristales. En la misma lnea, Weissman y col. [5] consideran que la resistencia al sinterizado de
los sistemas mixtos ZrO 2 -TiO2 se relaciona a la presencia de
heteroenlaces Zr-O-Ti formados durante la condensacin de
precursores alcxido parcialmente hidrolizados.
Anlisis Trmico. En los anlisis trmicos diferenciales de
las muestras preparadas con HNO3 , a = 0.05 y h = 20 (Fig. 10)
se observan endotermicidades centradas a ~160 C confirmando la remocin de especies fisisorbidas (agua y/o disolvente).
Todas las muestras presentan seales exotrmicas tanto de
combustin de residuos orgnicos como de cristalizacin a
distintas fases. Para el TiO2 se registra un pico correspondiente a cristalizacin a anatasa a 400 C [19], transformacin que se desplaza a mayores temperaturas por la adicin de
un 15 % de ZrO 2 (muestra ZT1585A), tal como se observ
por difraccin de rayos X (Fig. 9). Por su parte, el xido de

Control de las propiedades texturales de ZrO2 -TiO2 Sol-Gel. Efecto de parmetros de sntesis

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Tabla 1. Efecto de la composicin, del aditivo de sntesis (A: HNO3,

B: NH 4OH, C: CH3COOH) y del incremento en las relaciones molares H2O / alc. (h) y aditivo/alc. (a) sobre las propiedades texturales de
las muestras calcinadas a 500 C.

Fig. 11. Anlisis trmico diferencial de la muestra equimolar

(ZT6040) sintetizada con diferentes aditivos (h = 20, a = 0.05).

Fig. 12. Anlisis trmico diferencial de la muestra equimolar sintetizada con NH4OH (ZT6040B, h = 20 y 30, a = 0.05).

circonio cristaliza, probablemente a un arreglo tetragonal [20]

a 420 C. Esta cristalizacin se retarda en la muestra ZT85
15A por la presencia del segundo xido (titania), efectundose
en este caso a 600 C.
Para el material equimolar (ZT6040A), la obtencin de
una fase mixta retardara la cristalizacin del ZrO 2 y del TiO2,
con lo cual se evita el sinterizado a baja temperatura. La cristalizacin a ZrTiO4 (observada en la Fig. 8) se registra a 700
C, identificndose con una intensa exotermicidad. Este fenmeno coincide con la drstica prdida de S g, la cual disminuye
en un 80% en el intervalo de 500-700 C (Fig. 2) y adems
sugiere un alto grado de interaccin entre los xidos componentes [21]. La evolucin trmica del slido ZT4060A fue
similar a la propia del equimolar por lo que no se le incluy en
la Fig. 10.
Se estudi el efecto del aditivo de sntesis y de la relacin
molar H2 O / alcxido (h) sobre la evolucin trmica del xido
mixto equimolar. Los resultados se muestran en las Figs. 11 y
12. La menor intensidad de la seal exotrmica observada a
~700 C para la muestra sintetizada con NH4 OH sugiere composicin ms homognea que la de la muestra preparada con
aditivo cido, debido a que la cristalizacin a ZrTiO4 implica
una menor evolucin de energa. Por tanto, la estructura del
xido amorfo debe ser muy similar a la de la fase titanato. El
desplazamiento a menor temperatura de la seal en cuestin al
disminuir h de 30 a 20 (Fig. 12) tambin es indicio de la formacin de una matriz mixta de composicin ms homognea.
Considerando que la cristalizacin al titanato se relaciona al
sinterizado masivo del material en cuestin (Fig. 2), nuestros
slidos poseen mayor estabilidad trmica que preparaciones
de composicin similar preparados por coprecipitacin con

Fila

xido

a
(mol adit.
mol alc.1)

1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15

ZA
ZT8515A
ZT6040A
ZT6040A
ZT6040A
ZT6040B
ZT6040B
ZT6040B
ZT6040C
ZT5050A
ZT4060A
ZT1585A
ZT1585B
ZT1585B
TA

0.05
0.05
0.05
0.05
0.20
0.05
0.05
0.20
0.20
0.05
0.05
0.05
0.05
0.05
0.05

h
Sg
(mol adit. (m 2 g1)
mol alc.1)
20
20
20
30
30
20
30
30
30
20
20
20
20
30
20

78
187
258
304
272
322
240
307
230
280
291
100
97
94
45

Vp
(cm3 g1)
0.26
0.37
0.18
0.40
0.26
0.36
0.28
0.56
0.20
0.22
0.25
0.14
0.20
0.20
0.06

urea [22], en donde la formacin del ZrTiO4 ha sido identificada a temperaturas menores (654 C).

Conclusiones
A travs del control de diversos parmetros de sntesis, la va
sol-gel permite adecuar la textura de sistemas mixtos ZrO 2 TiO2 para su potencial aplicacin en el hidrotratamiento de
cortes intermedios (diesel).
En funcin de su composicin, los sistemas mixtos ZrO2 TiO2 exhiben notables mejoras en sus propiedades texturales,
con relacin a las de sus xidos componentes. Este efecto es
especialmente notable para formulaciones con composiciones
cercanas a la equimolar. El mximo en la DTP de los slidos
equimolares preparados con aditivo cido se desplaza a mayores dimetros al aumentar la relacin molar H2 O / alcxido
de 20 a 30, incluyendo mesoporos en el intervalo 3 nm < p
<6 nm. En presencia de un catalizador de condensacin
(NH4 OH) se obtienen muestras de volumen poroso incrementado. Por otro lado, el aditivo complejante (CH3 COOH) promueve una disminucin en el tamao de las partculas formadas, con lo que las dimensiones de los espacios interpartcula
se reducen.

Referencias
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Revista de la Sociedad Qumica de Mxico, Vol. 46, Nm. 2 (2002) 79-82

Investigacin

Sntesis de 6-Acetamido- y 6-amino-1,2,3,4-tetrahidro-1-oxo--carbolinas

Jorge A. Haro-Castellanos,1* Atilano Gutirrez-Carrillo,3 Artemisa Romero-Martnez,2
Guillermo James-Molina,2 Leticia Ramrez-Chavarn1 y Wendy Prez-Yescas1
1

Departamento Biologa de la Reproduccin. Divisin de Ciencias Biolgicas y de la Salud.

Universidad Autnoma Metropolitana. Plantel Iztapalapa. Mxico, D. F.; A. P. 53-534. Tel: 5804-4901;
Fax: 5804-4930; E-mail: [email protected]
2 Departamento Sistemas Biolgicos. Divisin de Ciencias Biolgicas y de la Salud.
Universidad Autnoma Metropolitana. Plantel Xochimilco. Mxico, D. F.; A. P. 23-181.
3 Laboratorio de Resonancia Magntica Nuclear. Universidad Autnoma Metropolitana. Plantel Iztapalapa.
Mxico, D. F.; A. P. 53-534.
Recibido el 28 de noviembre del 2001; aceptado el 4 de febrero del 2002
Resumen. En este trabajo se obtuvo 6-amino-1,2,3,4-tetrahidro-1oxo--carbolina (9) por medio de dos rutas de sntesis, con mejor
rendimiento que el informado por Abramovitch (53.2 %): (a) por
optimizacin de la reduccin de 6-nitro-1,2,3,4-tetrahidro-1-oxo-carbolina (8), utilizada en la va de Abramovitch, empleando presin
de 20 p.s.i.; y (b) por una va alternativa, a partir de p-nitroacetanilida
(5) con rendimiento global de 76.6 %. Adems, como producto intermediario se obtuvo 6-acetamido-1,2,3,4-tetrahidro-1-oxo--carbolina
(12) con rendimiento de 92.4 % por ciclizacin de Fischer a partir de
la respectiva hidrazona (11), producto del cual no se encuentra informada su sntesis en la literatura. Los espectros de RMN confirman las
estructuras de los productos.
Palabras clave: 1,2,3,4-tetrahidro-1-oxo--carbolinas, ciclizacin de
Fischer, condensacin de Japp-Klingemann.

Abstract. 6-Amino-1,2,3,4-tetrahydro-1-oxo--carboline (9) was

synthesized in the present work with better yields than reported by
Abramovitch (53.2 %), employing two different ways, the first one is
an improvement of Shapiros route last step (reduction of 6-nitro1,2,3,4-tetrahydro-1-oxo--carboline (8), increasing the yield to 73.8
%. The second, an alternative route from p-nitroacetanilide (5),
improved the yield to 76.6. Furthermore, the new product 6-acetamido-1,2,3,4-tetrahydro-1-oxo--carboline (12), was obtained by ciclization of the respective hydrazone in 92.4 % of yield. RMN spectra
confirm the structures of the products.
Keywords: 1,2,3,4-Tetrahydro-1-oxo- -carbolines, FischerCiclization, Japp-Klingemann-Condensation.

Introduccin

do-1,2,3,4-tetrahidro-1-oxo--carbolina (12), de las que recientemente se ha informado una notable actividad en la conducta sexual de ratas macho [9] y cuya sntesis es objeto del
presente trabajo.

Las 1,2-dihidro-1-oxo--carbolinas, se conocen desde el primer cuarto del siglo XX en estudios relacionados con la sntesis de los alcaloides harmina y harmalina [1,2], pero las
1,2,3,4-tetrahidro-1-oxo--carbolinas aparecen hasta 1927,
obtenidas por Manske y Robinson [3]. Entre 1955 y 1956
Abramovitch y Shapiro [4,5] informan un mtodo conveniente para la sntesis de estos heterociclos, basada en la condensacin de Japp-Klingemann y la ciclizacin de Fischer,
con lo que obtuvieron adems de la 1,2,3,4-tetrahidro-1-oxo-carbolina, las sustituidas en C6 con los grupos metoxi, benciloxi y posteriormente [6] con metilo, cloro y nitro. En este
ltimo trabajo [6] (Esquema 2) se informa tambin la obtencin de la 6-amino-1,2,3,4-tetrahidro-1-oxo--carbolina (9),
por reduccin cataltica de la 6-nitro-1,2,3,4-tetrahidro-1-oxo-carbolina (8).
Estos compuestos, intermediarios en la sntesis de indolalquilaminas [4-10], han sido objeto de numerosos estudios por
su importancia biolgica y han dado origen a la sntesis de un
gran nmero de anlogos, entre los que se encuentran la 6amino-1,2,3,4-tetrahidro-1-oxo--carbolina (9) y la 6-acetami-

Resultados y discusin
La obtencin de la 3-carbetoxi-2-piperidona (4), necesaria para
la sntesis de 6-amino- (9) y 6-acetamido-1,2,3,4-tetrahidro-1oxo--carbolina (12), se realiz por cianoetilacin de malonato
de dietilo (1) con acrilonitrilo (2), seguida de hidrogenacin
cataltica, de acuerdo con la tcnica descrita por Albertson y
Fillman [11] (Esquema 1), y optimizada por Haro y col. [10].
Abramovitch [6] sintetiz 6-amino-1,2,3,4-tetrahidro-1oxo--carbolina (9) a partir de p-nitroanilina (6), por diazoacin y condensacin con el producto de hidrlisis de 3-carbetoxi-2-piperidona (condensacin de Japp-Klingemann), seguido por ciclizacin de Fischer (Esquema 2).
A diferencia de la tcnica anterior, nosotros iniciamos con
p-aminoacetanilida (10), obtenida por reduccin de p-nitroacetanilida (5), y de manera similar se le aplicaron subsecuente-

80

Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

O

Jorge A. Haro-Castellanos et al.

Tabla 1. Rendimientos de las reacciones de Japp-Klingemann y
Fischer con diferentes grupos en la misma posicin del anillo aromtico.

C N

+
O

1
EtONa / EtOH

H2 / Niquel- Raney
1000 psi
80C

C N
O

O
O

Esquema 1. Obtencin de 3-carbetoxi-2-piperidona, por cianoetilacin de malonato de dietilo y subsecuente hidrogenacin cataltica
[10].

mente las reacciones de Japp-Klingemann y Fischer, con lo

que se obtuvo 6-acetamido-1,2,3,4-tetrahidro-1-oxo--carbolina (12), la cual se transform finalmente en 6-amino-1,2,3,4tetrahidro-1-oxo--carbolina (9) por hidrlisis cida.
Para comparar los rendimientos globales de ambas rutas
de sntesis, la de Abramovitch y la realizada por nosotros en la
obtencin de 6-amino-1,2,3,4-tetrahidro-1-oxo--carbolina (9)
(Esquema 2), consideramos necesario tomar en cuenta el rendimiento de hidrlisis de la p-nitroacetanilida (5) (materia prima en nuestra va de sntesis), para obtener p-nitroanilina (6)
(materia prima en la va de sntesis de Abramovitch y Shapiro). El rendimiento informado es de 96 % [12].
En el caso de la primera sntesis fue necesaria otra consideracin, la de tomar el rendimiento de 100 % en la reaccin
de Japp-Klingemann para la produccin de la p-nitrofenilhidrazona de la 2,3-dioxopiperidona (7), puesto que, con base
en las cantidades de los reactivos (1.52 g, 0.011 moles de p-

HN

(c) : 95.6 %

[12]

NO2

HN

NO2

NH 2

10

[6] (a), (b):

100 %

(c): 88.5 %
O

O2 N

HN
N

7
[6]

NH
N

Grupo
acetamido

p-metoxi

Japp-Klingemann
Fischer

100
96.6

88.5
92.4

74.8
66.9

(a), (b):
96 %

Nitro

NH

H2 N

Reaccin

NH

nitroanilina y 1.7 g, 0.0099 moles de 3-carbetoxi-2-piperidona) y el producto (2.8 g, 0.01129 moles de p-nitrofenilhidrazona de la 2,3-dioxopiperidona) informadas por Abramovitch, el rendimiento resultara ser de 113.6 % [6].
De esta manera, el rendimiento global para la ruta de Abramovitch [6] es de 53.2 %, mientras que en nuestro caso fue
de 76.6 %.
En ambas rutas de sntesis de 6-amino-1,2,3,4-tetrahidro1-oxo--carbolina (9), fundamentalmente se emplean cuatro
reacciones, pero la diferencia es el orden de la secuencia, siendo en el primer caso hidrlisis, reaccin de Japp-Klingemann,
ciclizacin de Fischer y una reduccin, y en el segundo la reduccin va al principio y la hidrlisis al final del proceso.
Debido al orden secuencial diferente de las reacciones, el
grupo unido al anillo bencnico, determina la magnitud de los
rendimientos, tal es el caso de la reaccin de Japp-Klingemann, en la que se desfavorece el rendimiento cuando el grupo electroatractor (nitro; 100 %; Tabla 1) se sustituye por un
electrodonador (acetamido; 88.5 %). De igual forma, en la
ciclizacin de Fischer el rendimiento disminuye de 96.6 % a
92.4 %.
Los resultados obtenidos en las reacciones de Japp-Klingemann y Fischer son congruentes con los informados por
Abramovitch y Shapiro [4-6] como se puede ver en la Tabla 1, ya
que el grupo acetamido es un activador moderado, mientras que
el grupo metoxi es activador fuerte y el nitro desactivador fuerte.
En estas dos reacciones aludidas en el prrafo anterior, el
rendimiento de nuestra va de sntesis disminuye con relacin
a la ruta de Abramovitch, sin embargo, el rendimiento total
mejora (de 53.2 % a 79.6 %) debido a la mayor facilidad en la
reaccin de reduccin cataltica del grupo nitro en la p-nitroacetanilida (5) con referencia a la 6-nitro-1,2,3,4-tetrahidro-1oxo--carbolina (8).

11

(a), (b):
96.6 %

(c): 92.4 %
O

O2 N

Parte experimental

HN
NH

NH

(b): 79.6 %

(a): 57.4 %

(c): 98 %

12

[6]
H2 N
NH

9
Global (a): 53.2 % [6]

Global (b) :73.8 %

Global (c) :76.6 %

Esquema 2. Sntesis de 6-Amino-1:2:3:4-tetrahidro-1-oxocarbolina;

(a) Ruta de Abramovitch; (b) Ruta de Abramovitch modificada en el
presente trabajo; (c) Ruta desarrollada en el presente trabajo.

El cianoetilmalonato de dietilo (3) se produjo a partir de malonato de dietilo (1), con acrilonitrilo (2), empleando una modificacin [10] a la tcnica descrita por Albertson y Fillman
[11]. La 3-carbetoxi-2-piperidona (4) se obtuvo por la tcnica
descrita en el mismo trabajo [11]. La 6-nitro-1,2,3,4-tetrahidro-1-oxo--carbolina (8), se sintetiz usando la tcnica informada [6]. Las reducciones catalticas se realizaron en un reactor Parr Modelo 4581. La identificacin de los productos se
realiz con los datos espectroscpicos en RMN de 1 H y 13 C,
determinados en un espectrmetro Bruker modelo Avance

Sntesis de 6-acetamido- y 6-amino-1,2,3,4-tetrahidro-1-oxo--carbolinas

DMX500 empleando DMSO-d6 como disolvente. Los puntos

de fusin se determinaron en un Fisher Digital Melting Point
Analyzer Model 355 y fueron corregidos.
Obtencin de 6-nitro-1,2,3,4-tetrahidro-1-oxo-carbolina (8)
Para la sntesis de la carbolina 8 se emple la tcnica descrita
por Abramovitch [6]. Las constantes espectroscpicas son:
RMN 1 H (DMSO-d6, 500 MHz, asignaciones por GradienteCosy, Gradiente-Noesy y simulacin de espines-NMRSIMBruker) 12.39 (1H, s, H-9N), 8.62 (1H, d, J5,7 = 2.30, H-5),
8.08 (1H, dd, J5,7 = 2.30, J 7,8 = 9.07, H-7), 7.84 (1H, t, J2N,3 =
2.57, H-2N), 7.54 (1H, d, J7,8 = 9.07, H-8), 3.59 (2H, td, J2N,3
= 2.57, J3,4 = 6.95, H-3), 3.04 (2H, t, J3,4 = 6.95, H-4); RMN
13C (DMSO-d , 125 MHz, asignaciones por Gradiente-HSQC
6
y Gradiente-HMBC) 160.97 (C-1), 140.89 (C-6), 139.86 (C8a), 130.60 (C-9a), 124.18 (C-4b), 120.68 (C-4a), 118.78 (C7), 117.69 (C-5), 112.88 (C-8), 40.89 (C-3), 20.00 (C-4).
Obtencin de p-aminoacetanilida (10)
Se colocaron 30 g (0.167 moles) de p-nitroacetanilida (5), en el
reactor Parr con 350 mL de metanol y 0.15 g de PtO 2 ; se agit
mecnicamente para continuar con la inyeccin de H2 durante
4 h manteniendo la presin entre 20-40 psi. La temperatura inicial fue de 24 C y se increment espontneamente hasta un
mximo de 44 C. La mezcla de reaccin se filtr y luego se
elimin el disolvente a presin reducida quedando 23.92 g
(0159 moles) del producto, el cual despus de purificar por
tratamiento con carbn activado y cristalizacin con etanolagua dio un pf 163-165 C (informado [12]: 163.5-166 C).
Obtencin de p-acetamidofenilhidrazona
de la 2,3-piperidindiona (11)
Solucin A (sal potsica del cido 2-oxopiperidin-3-carboxlico): Se disolvieron 6.8 g (0.0398 moles) de 3-carbetoxi-2piperidona (4) en una solucin de 2.4 g de KOH en 80 mL de
agua y con agitacin se dej reposar a temperatura ambiente
por 24 horas.
Solucin B (cloruro de p-acetamidobencendiazonio): Se
disolvieron 6.1 g (0.0407 moles) de p-aminoacetanilida (10)
en una mezcla fra de 11.0 mL de cido clorhdrico concentrado y 60 mL de agua. La mezcla se enfri a 0-5 C y se adicion una solucin fra de 3.6 g (0.0522 moles) de nitrito de
sodio en 10 mL de agua. La temperatura se mantuvo a 0 C y
se destruy el exceso de cido nitroso con urea, a continuacin se neutraliz con carbonato de potasio al 10 % y se filtr
para eliminar impurezas.
La solucin B (cloruro de p-acetamidobencendiazonio) se
adicion a la solucin A (sal potsica del cido 2-oxopiperidin-3-carboxlico) con agitacin eficiente y previamente enfriada a 0-5 C. Inmediatamente se llev el pH a 3-4 por adicin de cido actico glacial fro, manteniendo la temperatura
entre 0-5 C. Se continu con la agitacin en fro por 8 h y la
mezcla de reaccin se guard en refrigeracin hasta el da
siguiente. El producto se separ por filtracin, se sec y se
pes (9.15 g, 0.0352 moles, 88.5 %, pf 253-5 C).

81

Obtencin de 6-acetamido-1,2,3,4-tetrahidro-1-oxo-carbolina (12)

7.61 g. (0.0293 moles) de p-acetamidofenilhidrazona de la
2,3-piperidindiona (11) se calentaron a reflujo con 40 mL de
cido frmico al 85 % durante 2 h. Se adicionaron 80 g de
hielo-agua a la mezcla de reaccin y se mantuvo por 2 h con
agitacin. El producto se separ por filtracin, se lav con
agua y se sec. Al neutralizar el filtrado con NaHCO3 se obtuvo ms producto, el cual despus de lavar y secar, se reuni
con el anterior dando un total de 6.58 g (0.0271 moles; 92.4
%) con pf > 320 C. RMN 1 H (DMSO-d 6 , 500 MHz, asignaciones por Gradiente-Cosy, Gradiente-Noesy y simulacin de
espines-NMRSIM-Bruker) 11.54 (1H, s, H-9N), 9.87 (1H, s,
HNCOCH3 ), 7.92 (1H, dd, J5,7 = 1.91, J5,8 = 0.74, H-5), 7.58
(1H, t, J2N,3 = 2.65, H-2N), 7.30 (1H, dd, J7,8 = 8.79, J5,8 =
0.74, H-8), 7.27 (1H, dd, J7,8 = 8.79, J5,7 = 1.91, H-7), 3.49
(2H, td, J3,4 = 6.94, J2N,3 = 2.65, H-3), 2.86 (2H, t, J3,4 = 6.94,
H-4), 2.04 (3H, s, CH3 CONH); RMN 13 C (DMSO-d 6 , 125
MHz, asignaciones por Gradiente-HSQC y Gradiente-HMBC)
167.82 (CH3 CONH), 161.84 (C-1), 133.80 (C-8a), 131.91
(C-6), 127.82 (C-9a), 124.65 (C-4b), 118.06 (C-7), 117.96 (C4a), 112.45 (C-8), 109.84 (C-5), 41.15 (C-3), 23.95 (C-4),
20.36 (CH3 CONH).
Obtencin de 6-amino-1,2,3,4-tetrahidro-1-oxo-carbolina (9)
Mtodo A: A 5 g (0.0206 moles) de 6-acetamido-1,2,3,4tetrahidro-1-oxo--carbolina (12) se adicionaron 20 mL de
HCl al 18 % y se calent a temperatura de reflujo por 2.5 h.
La mezcla de reaccin se vaci en 20 g de agua-hielo con
agitacin y se neutraliz con carbonato de sodio en fro, el
producto se filtr, se sec y se pes (4.05 g, 0.0202 moles; 98
%; pf 280-2 C; informado 281-282 C [6]).
Mtodo B: Se colocaron 12 g (0.0519 moles) de 6-nitro1,2,3,4-tetrahidro-1-oxo--carbolina con 1 g de Pd / C y 700
mL de AcOH en el reactor Parr; se inyect H2 a 20 psi con
agitacin vigorosa y se mantuvo la presin a 16-20 psi a temperatura ambiente. Al trmino de la reaccin (2.5 h) se filtr la
mezcla de reaccin y se elimin el cido actico por destilacin a presin reducida. El residuo se trat con agua, se neutraliz con NaHCO3 , se filtr y se pes (8.31 g, 0.0414 moles,
79.6 %; pf 280-2 C; informado 281-282 C [6]). RMN 1 H
(DMSO-d 6 , 500 MHz, asignaciones por Gradiente-Cosy,
Gradiente-Noesy y simulacin de espines-NMRSIM-Bruker)
11.07 (1H, s, H-9N), 7.40 (1H, d, J2N,3 = 2.38, H-2N), 7.11
(1H, m, H-7), 6.65 (1H, m, H-8), 6.66 (1H, m, H-5), 4.59 (2H,
sa, H2 N-C-6), 3.46 (2H, td, J2N,3 = 2.38, J 3,4 = 6.99, H-3), 2.78
(2H, t, J3,4 = 6.99, H-4); RMN 13C (DMSO-d 6 , 125 MHz, asignaciones por Gradiente-HSQC y Gradiente-HMBC) 162.13
(C-1), 141.65 (C-6),131.09 (C-8a), 126.82 (C-9a), 125.72 (C4b), 116.50 (C-4a), 115.63 (C-5), 112.68 (C-7), 101.70 (C-8),
41.20 (C-3), 20.44 (C-4).

82

Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

Conclusiones
Se desarrollaron dos vas de sntesis, ambas con mejor
rendimiento que el informado en la literatura (Tabla 1), para la
obtencin de 6-amino-1,2,3,4-tetrahidro-1-oxo--carbolina
(9). Adems se describe la obtencin de una nueva carbolina,
la 6-acetamido-1,2,3,4-tetrahidro-1-oxo--carbolina (12).

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Revista de la Sociedad Qumica de Mxico, Vol. 46, Nm. 2 (2002) 83-92

Investigacin

Micromecnica de deformacin de fibras de polietileno usando

espectroscopa Raman
P.I. Gonzlez-Chi*1 y R. J. Young2
1

Centro de Investigacin Cientfica de Yucatn, Calle 43, No. 130, Col. Chuburn de Hidalgo, Mrida 97200,
Yucatn, Mxico. E-mail:[email protected]
2 Manchester Materials Science Centre. University of Manchester/UMIST. Grosvenor Street, Manchester, M1 7HS, UK
Recibido el 25 de octubre del 2001; aceptado 26 de febrero del 2002
Resumen. La micromecnica de deformacin en fibras de ingeniera
de polietileno fue estudiada con espectroscopa Raman. Se observ el
desplazamiento de la banda 1129 cm1 respecto a la deformacin o el
esfuerzo aplicados a tensin; esta banda corresponde al estiramiento
simtrico del enlace C-C de la cadena principal del polietileno. As
mismo, el comportamiento de la fibra a compresin fue estudiado por
flexin a cuatro puntos. La banda Raman 1129 cm 1 se desplaz en
forma lineal tanto a tensin como a compresin hasta la falla. La
exactitud de las lecturas fue valorada estudiando la relajacin de la
fibra y su efecto sobre el desplazamiento de la banda Raman as
como la variabilidad de la seal Raman a lo largo de la fibra.
Palabras clave: Espectroscopa Raman, anlisis micromecnico,
fibra de polietileno.

Abstract. Raman spectroscopy was used to follow the micromechanics of deformation for single filaments of High Performance Gelspun Polyethylene Fibres. The shift of the 1129 cm 1 Raman band
corresponding to the symmetric C-C stretching mode of polyethylene
was followed in tension as a function of the applied stress or strain.
The compressive behaviour of the fibre was also studied using Fourpoint Bend geometry. The 1129 cm1 Raman band shifted in a linear
fashion, both in tension and in compression until failure. The accuracy of the results was assessed by studying the effect of fibre relaxation on the Raman band shifting and also by measuring the variability
of Raman signal along the fibre.
Keywords: Raman spectroscopy, micromechanical analysis, polyethylene fibres.

Introduccin

(radiacin Raleigh) de tal forma que su frecuencia no cambia

[2]. Una pequea fraccin de la radiacin incidente es difractada inelsticamente; sta corresponde al efecto Raman que se
produce por el intercambio de energa entre una molcula y
los fotones de la radiacin incidente. La frecuencia de esta
pequea fraccin se encuentra desplazada respecto a la de la
radiacin incidente en una cantidad equivalente a la frecuencia
de vibracin de las molculas.
La dispersin Raman de frecuencia menor a la de la incidente es conocida como la radicacin Stokes, y corresponde a
la transicin de las molculas a niveles altos de energa. La
dispersin Raman de frecuencia mayor a la de la incidente es
conocida como la radiacin anti-Stokes, y corresponde a la
transicin de las molculas a niveles bajos de energa [3]. La
cantidad de energa ganada o perdida por los fotones (o desplazamiento en la frecuencia respecto a la radicacin incidente) depende del estado rotacional y vibracional especfico de
cada molcula, el cual, a su vez, depende de la composicin y
tipos de enlaces presentes en ella.
Uno de los problemas ms importantes en espectroscopa
Raman es la fluorescencia, la cual se presenta cuando una
molcula excitada electrnicamente cae espontneamente a
menores niveles de energa, emitiendo una fuerte radicacin
que puede sobrepasar la seal Raman. Este fenmeno puede
ser intrnseco de la muestra o producida por sobre-exposicin
al lser, el cual puede quemar el material o las impurezas que
este pueda contener. Existen varias formas de solucionar este

La espectroscopa Raman se basa en la deteccin de la radiacin electromagntica difractada inelsticamente, originada

por la interaccin de las molculas de un material con una
radiacin monocromtica. Este fenmeno fue reportado por
primera vez en 1928 por C.V. Raman en la India, sin embargo,
solo en los ltimos aos ha encontrado una gran aplicabilidad.
Cuando un haz de radiacin electromagntica interacta
con un material, la radiacin puede ser transmitida, absorbida
o difractada. Un cuerpo trasparente transmitir toda la radiacin sin cambiar la frecuencia del haz. La absorcin de radiacin electromagntica depende principalmente de la naturaleza
vibracional de las molculas del cuerpo receptor y de la frecuencia de la radiacin incidente. A temperatura ambiente, las
molculas vibran permanentemente y, si su frecuencia corresponde a la frecuencia de la radiacin, la absorcin tiene lugar,
lo cual cambia los modos vibracionales de las molculas e incrementa su energa [1]. Este es el principio bsico para espectroscopa infrarroja.
Un material es capaz de difractar radiacin en tres diferentes procesos: El campo elctrico oscilante de la radiacin
incidente induce un dipolo en las molculas del material.
Dicho dipolo oscila a la frecuencia de la radiacin y cuya
amplitud es controlada por la frecuencia de la vibracin de las
molculas, lo que conduce a la emisin de radiacin. La mayor parte de la radiacin incidente es difractada elsticamente

84

Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

problema: usar diferentes frecuencias de excitacin, usar pulsos o utilizar lseres de alta potencia de cercano infrarrojo como Nd:Yag
Las grandes ventajas que esta tcnica posee son: No requiere preparacin de muestra, lo que permite probar piezas
reales (a diferencia de la espectroscopia de infrarrojo). Se
puede utilizar agua como disolvente, posee una alta sensibilidad a vibraciones de elementos poco pesados como carbono,
lo que la hace ideal para estudiar la cadena principal de polmeros. Se puede usar bsicamente cualquier tipo de fuente,
desde UV hasta IR dependiendo del tipo de material. Se
pueden tomar espectros a frecuencias menores de 400 cm1 y
la tcnica es de naturaleza no destructiva.
La espectroscopa Raman ha evolucionado rpidamente
en los ltimos aos hasta convertirse en una tcnica sencilla y
accesible. Hoy en da es una importante tcnica analtica para
identificar la composicin y estructura de materiales y est
siendo rpidamente adoptada por la industria como un medio
para determinar la calidad y consistencia de materiales nometlicos. Muchos fueron los problemas que en el pasado
impidieron que esta tcnica fuera una herramienta de anlisis
accesible, ya que los equipos eran caros, se requeran largos
tiempos de exposicin y la adquisicin y el procesamiento de
datos no eran simples. Tres fueron los avances tecnolgicos
que invirtieron esta situacin: El lser, las cmaras tipo CCD
y los filtros y gradillas hologrficas.
Un espectrofotmetro moderno de micro-Raman consiste
de las siguientes partes:
a) Lser. Esta es la fuente para iluminar la muestra. Es considerado como la fuente ideal para Raman, ya que el espectro, por su dbil naturaleza, requiere de una radiacin incidente muy fuerte. Provee un haz continuo de radiacin monocromtica a una frecuencia conocida y estable con una
intensidad tpica para Raman en el intervalo visible de 30
mW. Cualquier tipo de lser puede utilizarse, sin embargo
los He-Ne (632.8 nm) y de Ar (488 y 514.5 nm) son muy
populares por su bajo costo, mnimo mantenimiento, compactos, de fcil manejo, estables y enfriados por aire.
b) Monocromador. Su finalidad es separar la radiacin incidente de la radiacin Raman y analizarla. Los primeros
monocromadores eran dispersivos basados en un doble
monocromador de larga distancia focal o en un triple monocromador de distancia focal corta. Actualmente se usa un
filtro hologrfico que evita la entrada de la radiacin con la
misma frecuencia que la del haz incidente y transmite el
haz filtrado a una gradilla hologrfica que separa la radiacin Raman en sus distintas frecuencias en una forma eficiente y rpida.
c) Cmara CCD. Este tipo de cmara (Charge Couple
Device) es capaz de medir el ms dbil de los espectros
Raman. Es muy sensible y no puede ser sobresaturada. En
un principio un fotomultiplicador fue utilizado para convertir la seal luminosa en elctrica; sin embargo, posea varias

P. I. Gonzlez-Chi y R. J. Young

desventajas: Baja sensibilidad, alto ruido y largos tiempos

de exposicin [4]. Un CCD es un arreglo ptico que se basa
en la acumulacin de pixeles cargados fotogenerados [5].
Inicialmente, estas cmaras eran enfriadas con nitrgeno
lquido, ya que para mantener una relacin ruido / seal
baja requeran de una operacin a muy baja temperatura.
Las versiones modernas son enfriadas dielctricamente y
han conducido a la construccin de sistemas de alta resolucin, bajo costo, alta eficiencia y fcil uso.
d) Microscopio. Este provee del medio adecuado para manipular y observar la muestra y para enfocar el lser sobre la
superficie de sta en una rea muy pequea, permitiendo la
coleccin de espectros an en piezas de dimensiones
reducidas. El microscopio es utilizado adems para colectar
la radiacin Raman y dirigirla hacia el monocromador y el
CCD.
e) Computadora. Colecciona, procesa y almacena las imgenes de la muestra y la informacin espectral obtenida por
el CCD. Adems controla el monocromador y analiza el
espectro Raman.
f) Video. Los espectrofotmetros modernos poseen una
cmara de video que muestra la imagen magnificada de la
zona del especimen enfocada por el microscopio, de donde
se tomar el espectro. Permite, adems, el exacto enfoque
del lser sobre la muestra sin que el operador corra riesgo de
sobreexposicin a la radiacin.
Muchos han sido los materiales estudiados por espectroscopa Raman; sin embargo, existe un gran inters en los materiales conocidos como High Performance. Este trmino en
ingls ha sido aplicado a materiales que presentan propiedades
extraordinarias; en el caso de fibras, este trmino se refiere a
fibras ligeras con muy alta resistencia mecnica. Las fibras de
polietileno (PE) preparadas por el mtodo Gel-spun son
consideradas como las ms fuertes fibras sintticas hechas por
el hombre [6]: Son 10 veces ms fuertes que el acero, pero tan
ligeras que flotan en el agua. La misma naturaleza proporcion el modelo perfecto que condujo al diseo de este tipo de
fibra, el diamante: Un alto contenido de enlaces C-C de alta
resistencia es lo que le confiere a la gema su reconocida dureza. Como el diamante, la cadena principal de las molculas
de PE est formada por enlaces C-C, que en la fibra se encuentran alineados en la direccin axial de la fibra.
La espectroscopa Raman ha probado ser una buena tcnica para estudiar la deformacin de fibras de ingeniera, las
bandas Raman correspondientes a los enlaces C-C se des plazan linealmente respecto a la carga o la deformacin aplicadas. Esta relacin ha sido aprovechada para el estudio micromecnico de materiales compuestos, ya que la carga o la
deformacin transferida a una fibra usada como refuerzo, puede ser directamente medida de su espectro Raman [7, 8, 9, 10,
11, 12, 13]. En el caso de las fibras de PE, es posible obtener
espectros Raman bien definidos [8, 12, 13, 14]; sin embargo,

Micromecnica de deformacin de fibras de polietileno usando espectroscopa Raman

Fig. 1. Patrn de difraccin de rayos X de ngulo amplio para Spectra

1000 (US).

la intensidad y el desplazamiento de sus bandas son relativamente bajos en comparacin con otros materiales como Kevlar o polidiacetilenos, en los cuales la intensidad de sus bandas Raman se incrementa por resonancia y sus desplazamientos son fuertes [14, 15]. El estudio de la deformacin molecular de fibras Gel-spun de PE usando espectroscopa Raman
[7, 8, 13] demostr que las bandas correspondientes a las
vibraciones simtrica (1129 cm1) y antisimtrica (1060 cm1)
del enlace C-C muestran una distribucin bimodal cuando son
deformadas. Este comportamiento se debe a la presencia de
dos tipos de cristales en la estructura de la fibra; uno de los
cuales, no se encuentra eficientemente orientado con el esfuerzo aplicado y en consecuencia su acoplamiento con ste es
pobre. Por lo tanto el desplazamiento de banda es menor [8,
10, 16]. Este comportamiento no es notorio a bajos niveles de
carga o deformacin, ya que ambas bandas estn muy cerca
una de la otra; la separacin se hace ms notoria a altos niveles de deformacin. La principal inconveniencia de este fenmeno se presenta cuando se ajustan las bandas para determinar su posicin. Normalmente se usan ajustes gausianos o
lorencianos, los cuales son funciones simtricas. Se ha encon-

Flujo de Calor (W/g)

US

-10

TS

-20

-30

-40
0

50

100

150

200

250

Temperatura ( C)

Fig. 2. Termograma por calorimetra diferencial de barrido (DSC): 10

mg de muestra con rampa de calentamiento de 10 / min. Fibras de
polietileno Spectra 1000, sin (US) y con (TS) con tratamiento plasma.

85

trado que la separacin de bandas es particularmente notoria a

niveles de deformacin superiores a 1.5 %, lo cual conduce,
en un principio, a una banda asimtrica que posteriormente se
transforma en dos picos bien definidos [20, 25].
En el presente estudio, monofilamentos de PE fueron
deformados a tensin a diferentes niveles de carga o deformacin y simultneamente se observ el desplazamiento de la
banda a 1129 cm1 . Las fibras fueron deformadas tambin
usando una geometra de flexin a cuatro puntos, lo que nos
permiti someter la fibra tanto a tensin como a compresin.
Finalmente, la exactitud de las lecturas en la fibra fue estudiada mediante el efecto de la relajacin sobre el desplazamiento
de la banda Raman, as como la variabilidad de la banda a
1129 cm 1 a lo largo de la fibra bajo diferentes niveles de deformacin.

Parte experimental
La fibra. Dos diferentes grados comerciales de fibras fueron
proporcionados por la empresa Allied-Signal, Petersburg,
USA: Spectra 1000 (US) y Spectra 1000 con tratamiento plasma (TS)El tipo exacto de tratamiento superficial es un
secreto industrial. El dimetro de la fibra fue de 34.2 7.4 m
para US y de 32.4 5.4 m para TS. El productor describe
estas fibras como materiales con un mdulo elstico de 170
GPa, una resistencia de 3 GPa y una mxima elongacin de
2.7 % (a una velocidad de deformacin de 0.02 s1 ) [6]. La
orientacin molecular de estas fibras puede ser observada en
la Fig. 1, la cual corresponde a los patrones de difraccin de
rayos X de ngulo amplio para US (TS present el mismo
comportamiento). Los patrones ecuatoriales agudos y la presencia de una capa de lneas meridionales indican que los
cristales estn bien orientados a lo largo del eje principal de la
fibra [8].
La Fig. 2 muestra los termogramas de las fibras US y TS,
medidos por calorimetra diferencial de barrido (DSC). La
fusin de la fibra de PE tipo Gel-spun presenta picos endotrmicos mltiples que se atribuyen a la existencia de cristales
con dos componentes morfolgicamente diferentes [18]. El
pico inicial de fundido es causado por la fusin de cristales ortorrmbicos no constreidos, el segundo pico se debe a la
transicin de ortorrmbico a hexagonal. Algunas veces se presenta un tercer pico, el cual se puede separar en varios picos
menores que se deben a la fusin de la fase hexagonal [19].
El punto de fusin (T m) y la entalpa de fusin (H) de US fue
146.9 1.3 C y 250.9 14.6 J / g, respectivamente. Para TS,
Tm =147.4 0.8 C y H = 234.8 13.3 J/g. El grado de
cristalinidad de la fibra (x c) puede ser calculado dividiendo
H entre la entalpa de fusin de muestra 100 % cristalina;
este valor ha sido reportado como 295.5 J / g [20]. Para US, xc
= 84.9 4.9 %, y para TS, 79.5 0.4 %.
Espectrofotmetro Raman. El espectrofotmetro Raman utilizado en el presente trabajo fue un Micro-espectrofotmetro
Renishaw 1000 [21] equipado con un lser He-Ne (633 nm)

86

Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

de 30 mW de Spectra-Physics. El poder del lser en la superficie de la muestra pudo ser controlado en un intervalo de 0.110 mW usando un filtro de atenuacin. En el caso de las fibras
de PE, se us una intensidad de aproximadamente 1.4 mW. El
espectrofotmetro estaba equipado con un microscopio
Olympus BH2 con objetivos de 20 y 50. La principal caracterstica del sistema Renishaw se basa en que el microscopio
puede ser operado como un sistema confocal [22] lo que permite que el lser pueda ser enfocado de forma precisa a diferentes niveles de profundidad en la muestra en la forma de una
pequea elipse de 2 1 mm (ejes principales) con 2 mm de
penetracin (objetivo de 50). El monocromador es una rejilla de difraccin simple con una resolucin espectral de 1
cm1 . La intensidad de las bandas Raman en materiales con un
alto grado de orientacin molecular es muy sensible a la direccin de polarizacin del lser; esto ocurre con las fibras de
ingeniera de PE y por ello, el instrumento est equipado con
un lente polarizador paralelo a la direccin axial de la fibra.
Finalmente, un detector multicanal tipo CCD (Charge-coupled device) enfriado por aire, fue utilizado para el conteo de
fotones y registro de los espectros. La gran ventaja del sistema
Renishaw es su alta sensibilidad. Sin embargo, el poder del
lser, su alineamiento, el ajuste de las aperturas y el rea del
CCD, necesitan un control adecuado para obtener buenos
resultados.
Procedimiento experimental
Desplazamiento de bandas inducido por el aumento en la
deformacin. El desplazamiento de la banda Raman a 1129
cm1 () fue estudiado como funcin de la deformacin () de
la fibra PE en aire para determinar el cociente d / d, conocido como el Factor de Sensibilidad Raman a la deformacin
aplicada.
Los especmenes fueron preparados segn el procedimiento antes descrito. Las fibras montadas en los marcos de
papel fueron pegadas por los extremos con adhesivo cianoacrlico a un marco de carga controlado por un micrmetro
(Fig. 3). El marco de carga fue colocado en la plataforma del
microscopio Raman y ambas orillas del marco de papel fueron
cortadas. La fibra fue ligeramente extendida, y un punto en su
parte central fue enfocado, de donde se tom un espectro con
4 s de exposicin. El paso siguiente fue deformar la fibra a
intervalos de 0.02 % usando el micrmetro. Despus de cada
deformacin se dieron 30 s para permitir que la fibra se relajara. Se enfoc otro punto en el centro de la fibra y se tom un
segundo espectro de 4 s. Este procedimiento se repiti hasta
alcanzar 1.5 % de deformacin en la fibra.
Desplazamiento de bandas inducido por un aumento en el
esfuerzo. El desplazamiento de la banda Raman a 1129 cm1
() fue estudiado como funcin del esfuerzo () aplicado a la
fibra PE en aire para determinar d / d, conocido como el
Factor de Sensibilidad Raman al esfuerzo aplicado.
Filamentos individuales de la fibra fueron enrollados y
pegados a los extremos de marcos rectangulares de papel de

P. I. Gonzlez-Chi y R. J. Young

Fibra de polietileno

Deformacin

Deformacin
Marco de papel

Fig. 3. Deformacin de un filamento de PE.

100 mm de largo, utilizando una resina epxica (Ciba-Geigy

5052). Las muestras fueron almacenadas y probadas en un
cuarto con atmsfera controlada (23 C 1 C y 50 % 2 %
de humedad relativa) al menos una semana despus de pegadas para asegurarse que la resina haba curado completamente.
La fibra enmarcada (100 mm de longitud de prueba) fue
sujetada a un marco de carga controlado por pesos muertos.
Uno de los extremos de este marco de carga posea una
plataforma en donde pequeos eran depositados pequeos
pesos de 2 g. El extremo opuesto del marco posea una celda
de carga de 1 N (Fig. 3). El marco de carga con la fibra se
coloc en la plataforma del microscopio Raman. El marco de
papel fue cortado por ambos lados, se enfoc un punto en el
centro de la fibra fue enfocado y se tom un espectro de 4 s de
exposicin.
Un peso de 2 g fue colocado en la plataforma del marco
de carga; 15 s despus, la seal de la celda de carga se estabiliz y se registr su lectura (este tiempo fue necesario para
permitir que la fibra reaccionara al esfuerzo aplicado). Se
enfoc la fibra y se tom un nuevo espectro de 4 s. Este procedimiento fue repetido sistemticamente a intervalos de 2 g
hasta un mximo de 48 g.
Flexin a cuatro puntos. El mtodo de flexin a cuatro puntos
fue utilizado para estudiar la distribucin de esfuerzos en una
fibra deformada tanto a tensin como a compresin. Una viga,
al ser flexionada a cuatro puntos, su parte central sufre
simultneamente 2 tipos de deformacin en su direccin axial:
una cara est sometida a tensin y la opuesta a compresin.
De esta forma, una fibra situada longitudinalmente en una de
las caras de la viga estar sometida a la deformacin correspondiente.
Una fibra continua fue ocluida en la superficie de una de
las caras de una barra de poli(acrilato de metilo) (PMMA) de
84 1.2 60 mm. Para ello una solucin diluida de este mismo material fue evaporada en la superficie de la barra para
formar una pelcula de tal forma que la fibra fue cubierta completamente. Se tomaron espectros de 5s de exposicin en el
centro de una fibra adherida, sometiendo esta cara de la barra
a tensin; de la misma forma, se tomaron espectros del centro
de una fibra adherida a la cara de la barra sometida a compresin. Una pequea galga extensomtrica fue pegada a la barra
con adhesivo cianoacrlico y utilizada para controlar la deformacin aplicada a la barra a intervalos de aproximadamente
0.01 % (Fig. 4).
Relajacin de la fibra. El cambio de posicin de la banda a
Raman 1129 cm1 en la fibra de PE fue estudiado como fun-

Micromecnica de deformacin de fibras de polietileno usando espectroscopa Raman

Superficie interna
Deformacin por compresin

Fibra de polietileno

Carga

87

7500

Carga

Carga

Carga
Superficie externa
Deformacin por tensin

a)

Intensidad

7000

Deformacin en Fibra
0.16 %

6500
0.8 %

b)

1.4 %

6000

Fig. 4. Geometra de Flexin a cuatro puntos.

1090

1100

1110

1120

1130

1140

1150

1
-1
Nmero
de de
onda
Raman
Nmero
Onda
Raman(cm
(cm ))

cin del tiempo a diferentes niveles de deformacin. Las

fibras fueron montadas en marcos de papel. Cada especimen
fue pegado por sus extremos con pegamento cianoacrlico a
un marco de carga controlado por un micrmetro (Fig. 3). El
marco de carga fue entonces colocado en la plataforma del
microscopio Raman, el marco de papel fue cortado en ambos
lados y la fibra fue ligeramente estirada para mantenerla
estable. Un punto en la zona central de la fibra fue seleccionado al azar y 50 espectros fueron tomados en este punto con 2 s
de exposicin (no se reenfoc entre espectros).
El paso siguiente fue deformar la fibra aproximadamente
0.5 %; de inmediato se enfoc al azar un punto central de la
fibra y 50 espectros de 2 s de exposicin fueron tomados y de
esta forma monitorear los 100 s siguientes a la aplicacin de la
deformacin. A la muestra se le permiti relajarse libremente
por 10 minutos y entonces, un segundo punto central fue
seleccionado (para evitar sobre-exposicin al lser) y otros 50
espectros fueron tomados como antes. Este procedimiento fue
repetido para 1 y 1.5 % de deformacin en una sola fibra.

Fig. 6. Desplazamiento y ensanchamiento de la banda Raman a 1129

cm1 de la fibra de PE (US).

en la plataforma del microscopio Raman, el marco de papel

fue cortado por sus costados y la fibra ligeramente estirada
para mantenerla estable; un punto en la parte central de la
fibra fue escogido al azar y 50 espectros de 2 s de exposicin
fueron tomados sin reenfoque. Despus, 50 espectros ms
fueron tomados al azar a lo largo de una seccin central de la
fibra de 2 cm de largo.
El paso siguiente consisti en deformar la fibra un 0.5 %
usando el micrmetro del marco de carga. La fibra se dej
relajar por 10 minutos; un segundo punto central fue escogido
al azar (para evitar sobre-exposicin al lser) y dos grupos de
50 espectros fueron tomados como se explic anteriormente.
Todo este proceso se repiti para 1 y 1.5 % de deformacin en
la misma fibra.

Resultados y discusin
Distribucin espectral. La distribucin de la posicin de la
banda Raman 1129 cm 1 , as como la variacin de las mediciones a lo largo de la fibra fueron monitoreadas.
La fibra montada en un marco de papel (Fig. 3.1) fue
pegada por sus extremos a un marco de carga usando pegamento cianoacrlico (Fig. 3). El marco de carga fue colocado
14000
13000
-1

1129 cm
C-C simtrico

Intensidad

12000
11000

-1

1418 cm
flexin de CH2

10000
-1

9000

1060 cm
C-C asimtrico

1296 cm

-1

torcin de CH 2
torsin

8000
7000
1000

1100

1200

1300

1400
-1

1) )
Nmero
Nmero
de de
onda
Onda
Raman
Raman
(cm
(cm

Fig. 5. Espectro Raman de la fibra de PE (US).

1500

Movimiento de bandas inducido por deformacin. La Fig.

5 muestra un espectro Raman tpico de la fibra de PE [23].
Las bandas correspondientes a la vibracin simtrica (1129
cm1 ) y antisimtrica (1060 cm 1) del enlace C-C presentan
normalmente el movimiento mas grande respecto al esfuerzo
aplicado (d / d) [12]. La banda a 1129 cm1 present la ms
alta intensidad y definicin, por lo que fue seleccionada para
el presente estudio. La Fig. 6 muestra el movimiento y el
ensanchamiento de la banda 1129 cm1 causado por el incremento en el nivel de esfuerzo aplicado a tensin [16].
La Fig. 7 muestra la dependencia de la posicin de la
banda Raman a 1129 cm 1 respecto a la deformacin aplicada
a tensin de 3 monofilamentos individuales tanto para US
como para TS. Los valores de d / d fueron calculados de la
pendiente de la regresin lineal de los resultados experimentales (Tabla 1). A pesar de la buena linealidad de los datos,
cierto grado de variacin fue encontrada, probablemente causada por la lenta relajacin de la fibra al ser deformada. Por
otra parte, la fibra pudo haberse despegado de la resina epxica que la sostena al marco de papel, lo que posiblemente
caus un aumento la longitud de prueba de la fibra y por con-

88

Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

P. I. Gonzlez-Chi y R. J. Young
b)
TS
1
2
3

-1

Nmero de Onda Raman (cm )

1127

1126

1125

1124

1123

1122

1121
-0.1

0.0

0.1

0.2

0.3

0.4

0.5

0.6

0.7

0.8

0.9

Esfuerzo
(Gpa)
Esfuerzo
(GPa)

Fig. 7. Desplazamiento de la banda Raman a 1129 cm1 respecto a la

deformacin aplicada a un monofilamento de PE deformado a tensin. a) US, b) TS.

1132

b)
TS
1

-1

Nmero de Onda Raman (cm )

1131

1130

2
3

1129

1128

1127

1126

1125

1124
0.0

0.5

1.0

1.5

2.0

Deformacin
Deformacin
(%)
(%)

Fig. 8. Desplazamiento de la banda Raman a 1129 cm 1 respecto al

esfuerzo aplicado a un monofilamento de PE deformado a tensin. a)
US, b) TS.

1126
-1

Nmero de Onda Raman (cm )

secuencia, en el nivel de deformacin de la misma. La concentracin de esfuerzos generados por el adhesivo epxico en los
extremos de la fibra normalmente provoca la falla prematura
de un filamento [20]. Sin embargo, en el presente caso esta
influencia fue leve ya que se usaron muestras con una longitud de prueba larga. La fibra fue ligeramente pre-estirada para
mantenerla estable y poder tomar el primer espectro. Sin
embargo, esto produjo una variacin en el intervalo de desplazamiento de la banda Raman ya que la deformacin inicial no
fue la misma para cada espcimen.
Este comportamiento ha sido observado con otras fibras
de ingeniera como la de carbn [27, 28] o Kevlar [10, 11].
Debido a la alta cristalinidad y orientacin longitudinal de los
cristales en la estructura de la fibra, la aplicacin de carga deforma efectivamente los enlaces C-C y reduce su movilidad y
como consecuencia, su frecuencia de vibracin. La principal
diferencia encontrada respecto a otras fibras de ingeniera es
que la fibra de PE presenta una menor rapidez de desplazamiento; sin embargo, es lo suficientemente sensible para utilizarse para anlisis micromecnico. Se observ tambin que
la posicin de la banda a un nivel de carga especfico no era
muy estable con el tiempo.

1125

1124

1123

1122

Tensin
Compresin

1121
-1.0

-0.5

0.0

0.5

1.0

1.5

Deformacin
de la Barra
de PMMA
(%) (%)
Deformacin
de la Barra
de PMMA

Fig. 9. Desplazamiento de la banda Raman a 1129 cm-1 de la fibra de

PE (US) en funcin de la deformacin aplicada por flexin a cuatro
puntos.

Desplazamiento de bandas inducido por esfuerzo. La Fig. 8

muestra la dependencia de la posicin de la banda a 1129
cm1 respecto al esfuerzo aplicado a tensin a monofilamentos
de US y TS. En ambos casos se observ un comportamiento
lineal. La principal diferencia entre ambas fibras es que la
fibra US mostr una mayor variacin en la pendiente. La
Tabla 2 presenta los valores promedio de dn / ds calculados a
partir de las pendientes de las distribuciones lineales. No se
encontr evidencia de dependencia respecto al tiempo del
desplazamiento de la banda Raman: Durante la prueba, cuando un peso era agregado, la lectura de la celda de carga cambiaba continuamente; sin embargo, despus de 15 s la lectura
se estabilizaba.
La carga aplicada es medida durante el experimento y es
independiente de la longitud de prueba del especimen; por lo
que el desprendimiento de la fibra no afecta los resultados
como en el caso anterior. Los valores medidos de dn / ds para
PE son ligeramente bajos si se comparan con los de Kevlar
[10, 11] y Carbn [27, 28]. Esto se debe a la naturaleza de la
fibra; sin embargo, el desplazamiento de la banda como resultado de la carga aplicada es claro y bien definido.
Flexin a cuatro puntos. La Fig. 9 muestra la posicin de la
banda Raman a 1129 cm1 para la fibra US en funcin de la
deformacin aplicada a una viga de PMMA tanto a tensin
como a compresin.
La posicin de la banda Raman para la fibra embebida en
la viga antes de la deformacin fue aproximadamente igual a
la de la fibra en aire sin deformar; por lo tanto, el embebido de
la fibra por evaporacin no condujo a esfuerzos residuales. La
banda a 1129 cm1 es muy sensible a la deformacin a tensin
y muestra una relacin lineal (Fig. 9). Sin embargo, a compresin se observan dos zonas; de 0 a -0.25 % de deformacin la

Micromecnica de deformacin de fibras de polietileno usando espectroscopa Raman

89

a)

b)

-1

Nmero de Onda Raman (cm )

1128

1127

1126

1125
0%
0.5 %
1%

1124

1.5 %

40

80

720

760

800

Tiempo
Tiempo (s)
(s)

Fig. 10. Fallas reticulares (kink bands) generadas en la fibra de PE

(US) a comprensin por flexin a cuatro puntos.

Fig. 11. Relajacin de la fibra de PE (US) bajo diferentes niveles de

deformacin: a) 0-100 s, b) > 700 s despus de la deformacin inicial.

distribucin es lineal y su pendiente es prcticamente idntica

a la de la zona a tensin. La segunda zona a compresin se
encuentra mas all de 25 % donde la posicin de la banda se
estabiliza en un valor constante. Este comportamiento ha sido
observado en fibras de aramida [24, 25] pero en el caso de PE,
la parte lineal de la zona a compresin es mas corta.
A tensin la fibra muestra un desplazamiento de banda
con cierta dispersin, lo cual muy probablemente se deba a la
pobre interaccin entre la fibra de PE y el PMMA. A compresin la mxima posicin de banda coincide con la generacin
de fallas reticulares (kink bands) a lo largo de la fibra (Fig.
10) lo cual es un conocido modo de falla a compresin para
fibras de ingeniera [17]. Bajo esta condicin la falla interfacial evita que la deformacin a compresin aplicada a la viga
ya no sea transmitida a la fibra, lo cual explica la presencia de
un valor mximo en la posicin de la banda Raman. La zona
lineal de los datos a tensin y la de los datos a compresin
(hasta-0.25 %) fueron ajustados con una regresin lineal comn para calcular el Factor de Sensibilidad Raman a deformacin, d / d = 2.68 cm1 / %.
Al comparar este resultado con el correspondiente a un
filamento deformado en aire (Tabla 1) la prueba en la viga
condujo a valores d / d mas altos. Este comportamiento
puede ser relacionado con la baja adherencia que la fibra de
PE mostr con la resina epxica usada para pegar el filamento
al marco del papel. En trabajos previos con fibras cermicas
[26] se encontr que al reducir la longitud de prueba de la
fibra en aire, d / d aumenta hasta alcanzar el valor obtenido
por flexin a cuatro puntos. El desprendimiento de la fibra de

la resina epxica efectivamente incrementa la longitud de

prueba.
El esfuerzo a compresin de la fibra pudo ser estimado
usando flexin a cuatro puntos: la seccin lineal en comprensin se extiende hasta -0.25% de deformacin, la cual corresponde a un movimiento de banda Raman de 0.675 cm1 (usando d / d). Este desplazamiento puede ser transformado a
esfuerzo con d / d (Seccin 2.3.1) usando d / d: 114.4
34.4 MPa.

Tabla 1. Factor Raman de sensibilidad a la deformacin de 1129

cm1 en PE.

Fibra

Flexin a 4 puntos
d / d
Dev. Std.
(cm1

US
TS

(cm1

/ %)

2.7

Monofilamento solo
d / d
Dev. Std.

0.2

Relajacin. La Fig. 11 muestra el cambio en la posicin de la

banda Raman 1129 cm 1 en un punto de la superficie de la
fibra US como una funcin del tiempo a diferentes niveles de
deformacin. La Fig. 11a corresponde al comportamiento de
los primeros minutos despus de haber deformado la fibra y la
Fig. 11b al comportamiento 11 minutos despus (a diferentes
niveles de deformacin en la fibra). Claramente se observa el
proceso de relajacin de la fibra: Justo despus de deformar la
fibra, la banda Raman se desplaza a valores de nmero de
onda menores que los que presenta la fibra sin deformar; pero,
la relajacin hace que con el tiempo, la banda Raman regrese
valores de nmero de onda mas altos. La velocidad de relajacin aumenta con el nivel de deformacin aplicado a la
fibra, es por ello que la pendiente de la distribucin aumenta
con la deformacin (Fig. 11a). Despus de 12 minutos, la
posicin de la banda se estabiliza en un valor aproximadamente constante para cada nivel de deformacin la velocidad de relajacin se hace lenta.

Tabla 2. Factor Raman de sensibilidad al esfuerzo de la banda 1129

cm1 de PE.

Fibra

/ %)

2.1
2.3

0.1
0.3

US
TS

d / d

Dev. Std.

(cm1 / GPa)

(cm1 / GPa)

5.9
5.6

1.1
0.4

90

Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

P. I. Gonzlez-Chi y R. J. Young

US / En un punto
a)

15
10

0%
DS = 0.09

5
0
1123

No. de Lecturas

15

1124

1125

1126

1127

1128

1129

1130

1131

1125

1126

1127

1128

1129

1130

1131

1125

1126

1127

1128

1129

1130

1131

1125

1126

1127

1128

1129

1130

1131

0.5 %

10
5
0
1123

DS = 0.11
1124

15

1%

10
5

DS = 0.12

0
1123
15
10

1124

1.5 %

5
0
1123

DS = 0.27
1124

-1

Nmerode
deonda
Onda
Raman
(cm
1 )
)
Nmero
Raman
(cm
TS / En un Punto
10
5

DS = 0.15

No. de Lecturas

0
1123
10
5

1124

5
0
1123
10
5
0
1123

1125

1126

1127

1128

1129

1130

1131

1125

1126

1127

1128

1129

1130

1131

1125

1126

1127

1128

1129

1130

1131

0.5 %
DS = 0.17

0
1123
10

b)

0%

1124

1%
DS = 0.20
1124

1.5 %
DS = 0.24

1124

1125

1126

1127

1128

1129

1130

1131

1 ) -1
Nmero
Raman
(cm(cm
Nmerode
deonda
Onda
Raman
)

Fig. 12. Distribucin de la posicin de la banda Raman a 1129 cm 1

en un punto a diferentes niveles de deformacin: a) US, b) TS.
Tabla 3. Posicin de la banda Raman 1129 cm1 en PE medido en un
solo punto.

Fibra
US

TS

Deformacin

Media

Dev. Std.

(%)

(cm1 )

(cm1 )

0
0.5
1
1.5
0
0.5
1
1.5

1129.73
1128.73
1127.75
1126.71
1128.54
1127.38
1126.29
1125.17

0.09
0.11
0.12
0.27
0.15
0.17
0.20
0.24

Tabla 4. Posicin de la banda Raman 1129 cm1 en PE a lo largo de

2 cm.

Fibra
US

TS

Deformacin

Media

Dev. Std.

(%)

(cm1 )

(cm1 )

0
0.5
1
1.5
0
0.5
1
1.5

1129.86
1129.31
1128.17
1127.26
1128.54
1127.38
1126.29
1125.17

0.35
0.21
0.22
0.20
0.38
0.22
0.20
0.17

La deformacin aplicada al monofilamento produce la

deformacin de los enlaces C-C de su estructura cristalina en
la direccin longitudinal. Esta deformacin limita los movimiento vibracionales naturales del enlace, lo que se traduce en
una posicin de banda a nmeros de onda mas bajos, lo que se
hace evidente al exponer el filamento a un rayo lser polarizado en la direccin longitudinal de la fibra.
Las fibras de PE usadas en el presente estudio tenan
entre 80 y 85 % de cristalinidad; aunque ste, es un valor alto
y los cristales estn orientados en la direccin longitudinal de
la fibra (Seccin 2.1), la presencia de la fase amorfa en el
material contribuye grandemente al proceso de relajacin, ya
que, bajo tensin a deformacin constante, los cristales son los
que responden de manera instantnea a la deformacin aplicada (respuesta elstica), pero con el tiempo, los enredamientos
moleculares presentes en la fase amorfa fluyen, de tal forma
que las secciones de molculas capaces de deslizarse se
mueven (respuesta viscosa). Este fenmeno libera parte de la
tensin aplicada y como consecuencia los enlaces C-C de la
zona cristalina recuperan parte de su movilidad hasta llegar a
un estado de equilibrio lo que se traduce en posiciones de
banda a nmeros de onda mayores.
Distribucin espectral. La Fig. 12 muestra la posicin de la
banda Raman a 1129 cm1 en un punto de una fibra a diferentes niveles de deformacin. La desviacin estndar es
pequea, lo que sugiere que los errores al azar asociados con
el equipo y a la recoleccin de los espectros es pequea. Este
comportamiento es particularmente notorio a 0 % de deformacin. Un incremento en los niveles de deformacin produce
un incremento en el valor de la desviacin estndar; este comportamiento es causado por el ensanchamiento de banda, lo
que incrementa su asimetra y, por lo tanto, los errores de
ajuste aumentan tambin [25].
La Tabla 4 presenta la media de la posicin de la banda a
1129 cm 1 de los espectros Raman tomados al azar a lo largo
de 2 cm de la fibra PE a diferentes niveles de deformacin. La
desviacin estndar en todos los casos es baja; sin embargo,
tiende a ser ms grande que para los espectros tomados en un
solo punto (Tabla 3). Este comportamiento es un claro reflejo
de las diferencias estructurales existentes a lo largo de la fibra.
Por otro lado, la media de la posicin de la banda tiende a ser
ligeramente mas grande, muy probablemente debido a la relajacin de la fibra. Todos los espectros fueron obtenidos de la
misma fibra, despus de haber tomado los espectros en un solo
punto. La Fig. 13 muestra los histogramas de los espectros
Raman tomados al azar a lo largo de 2 cm de la fibra de PE
sometida a diferentes niveles de deformacin. Todos ellos presentan distribuciones anchas a niveles bajos de deformacin y
mientras mayor es la deformacin, ms angosta es la distribucin. Aparentemente, la posicin de la banda Raman es sensible al ordenamiento local de las molculas en la superficie de
la fibra causado por la deformacin aplicada. Molculas mejor
orientadas en la direccin axial de la fibra implica un mayor
acoplamiento a la deformacin y por consecuencia, una
respuesta Raman mas homognea.

Micromecnica de deformacin de fibras de polietileno usando espectroscopa Raman

91

US / En 2 cm

0
1123

1124

1125

1126

1127

1128

1129

1130

1131

0.5%
DS = 0.21

10
5
0
1123

1124

1125

1126

1127

1128

1129

1130

1131

1%
DS = 0.22

10
5

0%
DS = 0.09

5
0
1123

1124

1124

1125

1126

1127

1128

1129

1130

0
1123

1124

1127

1128

1129

1130

1131

1125

1126

1127

1128

1129

1130

1131

En 2mm
0%
DS = 0.35

0
1123

1124

DS = 0.20

1126

1131

1.5 %

10

1125

US

10
5

0
1123

a)

US
En un Punto

10

No. de Lecturas

No. de Lecturas

a)

0%
DS = 0.35

10

Nmero
de onda
Raman
(cm1) (cm-1 )
Nmero
de Onda
Raman
1125

1126

1127

1128

1129

1130

1131

-1

Nmero de
Raman
(cm1(cm
)
Nmero
deonda
Onda
Raman
)

DS = 0.24

No. de Lecturas

0
1123
10
5

1124

5
0
1123
10
5
0
1123

1125

1126

1127

1128

1129

1130

1131

0.5 %
DS = 0.22

0
1123
10

b)

0%

1124

1125

1126

1127

1128

1129

1130

No. de Lecturas

10

1126

1127

1128

1129

1130

1126

1127

1128

1129

1130

1131

En 2 mm
1.5 %

1131

DS = 0.20
1124

1125

1126

1127

1128

1129

1130

1131

Nmero
de onda
Raman
(cm1) (cm-1 )
Nmreo
de Onda
Raman

1131

Fig. 14. Comparacin de las distribuciones de la posicin de la banda

Raman a 1129 cm1, en un punto vs. a lo largo de 2 cm: a) US a 0%,
b) US a 1.5%.

1.5 %
DS = 0.17
1124

1125

US

0
1123
1125

1124

10

DS = 0.20
1124

DS = 0.27

0
1123

1%

b)

US
En un Punto
1.5 %

10

TS / En 2 cm

1125

1126

1127

1128

1129

1130

1131

-1

Nmero de
Raman
(cm1
)
Nmero
deonda
Onda
Raman
(cm
)

Fig. 13. Distribucin de la posicin de la banda Raman a 1129 cm1 a

lo largo de 2 cm de la fibra a diferentes niveles de deformacin: a)
US, b) TS.
No. de Lecturas

5
0
1123

10
5
0
1123

a)

TS
En un Punto
0%
DS = 0.15
1124

1125

1126

1127

1128

1129

1130

1131

1125

1126

1127

1128

1129

1130

1131

TS
En 2 mm
0%
DS = 0.24
1124

-1

Nmero
de de
onda
Raman
(cm1) (cm )
Nmero
Onda
Raman

TS
En un Punto

10

No. de Lecturas

Para tener una idea ms clara de lo que est sucediendo,

es necesario comparar dos distribuciones de la misma fibra al
mismo nivel de deformacin; una tomada en un solo punto y
la otra a lo largo de la fibra. Para el caso a 0 % de deformacin (Figs. 14a y 15a) el ensanchamiento es claramente causado por las diferencias estructurales a lo largo de la fibra.
Todos los espectros corresponden a una pequea rea en la
superficie de la fibra y representan el promedio de todas las
molculas en esa zona cuando el lser es movido a lo largo de
la superficie de la fibra, diferentes reas son expuestas. Por
otro lado, no existe control en el grado de penetracin del
lser en la fibra, y lo ms probable es que la estructura interna
de la fibra sea diferente a la de la superficie, contribuyendo a
la variacin.
Las Figs. 14b y15b se comparan dos distribuciones a un
nivel de deformacin mayor (1.5 %). El efecto del reordenamiento de las molculas en la superficie de la fibra es
aparentemente ms fuerte que el ensanchamiento de las bandas: la desviacin estndar de los espectros tomados a lo largo
de la fibra tiende a ser ms pequea que la desviacin estndar
de los espectros tomados en un solo punto.

10

1.5 %
DS = 0.24

5
0
1123

1124

1125

1126

1127

1128

1129

1130

1131

TS

10

En 2 mm
1.5 %
DS = 0.17

5
0
1123

b)

1124

1125

1126

1127

1128

1129

1130

1131

Nmero
dede
onda
Raman
(cm1)(cm-1)
Nmero
Onda
Raman

Fig. 15. Comparacin de las distribuciones de la posicin de la banda

Raman a 1129 cm1, en un punto vs. a lo largo de 2 cm: a) TS a 0 %
b) TS a 1.5 %.

92

Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

P. I. Gonzlez-Chi y R. J. Young

Conclusiones

Referencias

La espectroscopa Raman prob ser un buen mtodo para

entender la micromecnica de deformacin de monofilamentos de PE.
El estudio de la posicin de la banda Raman a 1129 cm-1
respecto a la deformacin en un monofilamento libremente
extendido, demostr que d / d es afectado por el desprendimiento de la fibra en los extremos del marco de papel, lo
que aumenta efectivamente la longitud de prueba. Esto condujo a una diferencia entre dn/de medido por flexin de cuatro
puntos y medido en un monofilamento libre: para la fibra US,
2.7 cm 1 / % y 2.1 cm1 / %, respectivamente. El factor de sensibilidad Raman respecto al esfuerzo aplicado d / d no es
afectado por la relajacin o desprendimiento de la fibra como
lo es d / d. El valor obtenido fue 5.9 cm 1 / GPa (US).
El sistema Renishaw prob ser muy exacto para medir el
desplazamiento de bandas. Los histogramas tomados en un
punto mostraron poco ensanchamiento. Sin embargo, a altos
niveles de deformacin, la disminucin de la simetra de las
bandas causada por la divisin de la banda Raman (1129 cm1)
increment la dispersin. Los histogramas obtenidos al azar a
lo largo de la fibra mostraron una distribucin ms ancha como
resultado de las irregularidades a lo largo de la superficie de la
fibra: Un espectro representa la difraccin de todas las molculas del rea iluminada por el lser (2 m de dimetro); el arreglo molecular es diferente a lo largo de la fibra. Cuando la
fibra es deformada, las molculas en la superficie de la fibra se
alinean, conduciendo a una distribucin ms estrecha de lecturas al incrementar el nivel de deformacin, ya que la transferencia de carga del material es ms homognea y eficiente.

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27. Robinson, I.M.; Zakiklhani, M.; Day, R.J.; Young, R.J.; Galiotis,
C. J. Mat. Sci. Lett. 1991, 6, 1212-1214.
28. Young, R. J.; Day, R. J. British Polym. J. 1989, 21, 17-21.

Agradecimientos
P. I. G.-Ch. agradece al Consejo Nacional de Ciencia y
Tecnologa por su apoyo financiero y R. J. Y. agradece a The
Royal Society por la Wolfson Research Professorship y a
EPSRC por su apoyo al programa de espectroscopa Raman
para el anlisis de la deformacin de fibras y materiales compuestos.

Revista de la Sociedad Qumica de Mxico, Vol. 46, Nm. 2 (2002) 93-104

Investigacin

Determinacin del estado de equilibrio de un sistema hdrico

Icela D. Barcel,1* Ignacio Allende,2 Hugo E. Sols,1 Anne-Laure Bussy, 1 y Carmen Gonzlez1
1

Universidad Autnoma Metropolitana-Azcapotzalco, Av. San Pablo No. 180, Col. Reynosa Tamaulipas, Azcapotzalco,
Mxico 02200, D.F. Tel: 55 5318-9360; Fax: 55 5318-9360; E-mail: [email protected]
2 Instituto Superior Politcnico Jos Antonio Echeverra, ISPJAE, La Habana, Cuba
Recibido el 27 de noviembre del 2001; aceptado el 12 de marzo del 2002
Resumen. Se comparan dos mtodos analticos para la determinacin
del comportamiento qumico de un sistema hdrico natural con poca
movilidad hidrodinmica. En el primero, se consideran nicamente
los iones calcio y al sistema carbonato; en el segundo se propone la
importancia de considerar la fuerza inica y se comprueba a travs de
un conjunto de ecuaciones, la relacin del Ca2 +, H2CO3, HCO3 y
CO32, con otros iones denominados iones ajenos presentes en un sistema hdrico, con ello adems, se demuestra la influencia de los iones
disueltos a los ndices de saturacin lo que hace deficiente el empleo
del primer mtodo.
Palabras clave: Agua, sistema carbonato, contaminantes, curva de
estabilizacin, precipitacin, iones ajenos.

Abstract. Two analytical methods are compared in order to determine the chemical behaviour of a natural water system, with low
hydrodynamic mobility. The first method considers only the carbonate species and Ca2+ whereas the ionic force is taken into account in
the second. A series of equations is presented, in order to establish
the relations of Ca 2+, H2CO3, HCO3 y CO32 with other significant
ions that are present in the reservoir, called foreign ions. It is demonstrated that foreign ions modify Saturation Indexes, discrediting the
first method.
Keywords: Water, carbonate species, contaminants, stability curve,
precipitation, foreign ion.

Introduccin

podr reaccionar con los carbonatos presentes para formar ms

bicarbonatos, segn el siguiente equilibrio:

El CO2 es un cido dbil de gran importancia en las aguas naturales, que proviene tanto del CO2 atmosfrico, como de la
degradacin microbiana de la materia orgnica y de los procesos fotosintticos. La presencia de minerales carbonatados en
los sedimentos en conjunto con el CO2 , generan un efecto de
amortiguacin sobre el pH del agua, principalmente a travs
de los dos siguientes equilibrios [1, 2]:
CO 2 ac
MCO3 s

CO 2 g
M 2 ++ CO 32

El comportamiento de los contaminantes qumicos en las

aguas naturales y residuales, es funcin de las propiedades
fisicoqumicas que predominan en stas. La presencia del CO2
disuelto y de sus productos de ionizacin HCO3 y CO32 en
los cuerpos hdricos, influye en los equilibrios de precipitacin
y disolucin de compuestos inorgnicos [3]. La concentracin
de este CO2 se puede relacionar con la presencia de bicarbonatos; para ello, es conveniente tomar en cuenta la cantidad de
CO 2 necesaria para mantener en disolucin el HCO3 que se
encuentra en el agua; este CO2 se define como CO2 de equilibrio ([CO2 ] eq, [1]). Sin embargo, en un sistema natural, por los
procesos de produccin citados anteriormente, puede existir
CO 2 disuelto en mayor o menor concentracin respecto a
[CO 2 ]e q. Si se tiene [CO2] ac > [CO2 ]eq, el excedente de CO2

CO 2
3 + CO 2 + H 2 O

2 HCO 3

A este CO2 , se le denominar potencialmente agresivo,

y el agua correspondiente ser agresiva, favoreciendo las
disoluciones, es decir, manteniendo en solucin a los contaminantes [3-5]. Por lo contrario, si [CO2 ]ac < [CO 2 ]eq, el equilibrio se desplazar hacia la izquierda, favoreciendo la precipitacin de carbonatos con los cationes presentes; en este caso,
el agua ser de naturaleza incrustante [3-5].
Originalmente, los criterios de pH (pHs ) e ndice de saturacin (Is) de Langelier, este ltimo tambin conocido como
ndice de Langelier [4, 6, 7], se utilizaron para el control en el
tratamiento de las aguas naturales que se empleaban en servicio domstico (potable) y en la industria [8], mediante su caracterizacin en incrustantes o agresivas en funcin de los
iones Ca2+, Mg2+ y del sistema carbonato [8-11]. Otros investigadores [9] modificaron este ndice con el objeto de considerar interferencias debidas a sulfatos o iones alcalinos, por
ejemplo, en el tratamiento de aguas residuales de origen minero. Sin embargo, estas modificaciones se establecieron en forma emprica.
Las descargas industriales y agrcolas han generado una
contaminacin de los cuerpos acuticos, en particular al incorporar compuestos inorgnicos, como los metales pesados, derivados fosfatados, nitrogenados, etc. Las especies inicas

Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

provenientes de estos contaminantes influyen en la alcalinidad, la electroneutralidad, la salinidad y la fuerza inica (entre
otros). El ndice de Langelier [4, 6, 7], as como pHs, son de
gran utilidad, no solo para el control del tratamiento de aguas
de servicio, sino en la reutilizacin de aguas residuales y en la
caracterizacin de cuerpos hdricos contaminados para su saneamiento. Sin embargo, para poder usar adecuadamente pH s
en aguas residuales industriales y agrcolas, es necesario modificarlo de manera que incluya de alguna forma la influencia
de estos iones disueltos en concentraciones relevantes.
Se ha observado que al aplicar pHs y por lo tanto Is, sin
considerar la fuerza inica (), a dos aguas con la misma agresividad, stas pueden tener distintos ndices de saturacin o,
por el contrario, dos aguas con el mismo Is pueden presentar
agresividades diferentes [4, 8], lo que hace a este ndice semicuantitativo. Barcel [3] y Allende [4] han encontrado que un
mayor valor de Is (sin correccin por fuerza inica), no coincide necesariamente con una mayor agresividad, sino que slo
es til para definir cualitativamente si el agua es agresiva o
incrustante. Tambin, permite calcular el pH que tendr el
agua agresiva al estabilizarse si el exceso de CO2 se elimina
mediante una aeracin (inyeccin de aire), o para el control
durante el proceso de desacidificacin del agua; pero nicamente en el caso de un tratamiento del agua en una planta
tratadora. En un cuerpo hdrico, ro o presa, el inters ser ms
bien el estudio de la evolucin de la calidad del agua y de los
equilibrios qumicos en el tiempo y/o en el espacio. Para ello,
es necesario la obtencin de un ndice ms cuantitativo, donde
se consideren formalmente las concentraciones del mximo
nmero de iones disueltos presentes, as como la fuerza inica, ya que esta influye en los equilibrios qumicos. Relacionar
los cocientes de las concentraciones de los iones componentes
de cierta especie qumica para obtener una relacin de equilibrio, no sera confiable por su susceptibilidad ante cualquier
cambio del medio, como la influencia de otros iones presentes
que afectaran los equilibrios qumicos; es importante considerar las actividades en lugar de las concentraciones [12] para
garantizar realmente una constante de equilibrio, principalmente cuando se conoce la existencia de una multiplicidad de
iones en el sistema acuoso. Tener en cuenta lo anterior y considerarlo en el clculo del ndice de Langelier, permite estudios ms finos del comportamiento qumico de los contaminantes inorgnicos en un cuerpo hdrico y su influencia en la
naturaleza y calidad del agua.
En este trabajo, se presentan dos metodologas para caracterizar las aguas de un sistema hdrico contaminado y de poca
movilidad hidrolgica; la primera considera nicamente la
influencia del calcio y del sistema carbonato, mientras que la
segunda toma en cuenta la fuerza inica causada por otros
iones de importancia presentes en el medio, empleando los
ndices de Langelier [3-5, 7, 9, 13]. Esta ltima propuesta se
presenta mediante una serie de ecuaciones que permiten llegar
a una determinacin cuantitativa de la naturaleza del agua, a
travs de una modificacin a pH s , y por tanto a Is de Langelier, a partir de las concentraciones de cationes y aniones de
influencia, presentes en el medio, diferentes del calcio y del

Icela D. Barcel et al.

sistema carbonato, aunque indirectamente estn relacionados.

Se demuestra que al combinar el conjunto de concentraciones
predominantes y la fuerza inica resultante de estos iones,
modifica pHs cambiando la naturaleza del agua en funcin de
su clasificacin en agresiva o incrustante.
El sistema hdrico seleccionado para el estudio, fue la
presa Jos Antonio Alzate, embalse situado en el curso del ro
Lerma en el Estado de Mxico, unos 30 kilmetros aguas abajo del puente de la carretera Toluca-Mxico. Se construy
principalmente para el control de inundaciones y para irrigacin [14]. La industrializacin en el corredor Toluca-Lerma,
ha generado desechos industriales y el desarrollo de la ciudad
de Toluca y de poblados aledaos rurales ha producido tambin desechos domsticos y agrcolas [15, 16]. Actualmente la
presa est altamente contaminada por las descargas de aguas
residuales industriales, agrcolas y municipales [3, 17-20].
Para ilustrar la metodologa, se seleccion una temporada, la
posterior al periodo de lluvias, en el mes de noviembre, cuando el embalse est lleno [17].
Desarrollo de las ecuaciones
Ecuaciones matemticas para la construccin de las curvas
de equilibrio considerando dominante al sistema carbonato
y al calcio. Para calcular [CO2 ]e q, es necesario tomar en cuenta el pH del agua y las concentraciones de HCO3 y CO 3 2 .
Mediante los valores de las constantes del sistema carbonato
(ecuaciones 1 y 2), se construy el diagrama de predominio de
las tres especies CO2, HCO3 y CO3 2 en funcin del pH (Fig.
1), para una concentracin total de 5.13 0.86 mmol / L; este
valor representa el promedio medido en la presa J.A. Alzate
(36 medidas [3]).
K a1 [H 2 CO 3 ] = [H+ ] [HCO3 ]

(1)

K a2 [HCO3 ] = [H+] [CO32 ]

(2)

Un cuerpo hdrico superficial como esta presa, al ser un

sistema abierto, la concentracin total de las especies carbonato no es constante (por el flujo atmosfrico, catablico y fotosinttico), como sera el caso cuando se maneja un sistema
cerrado [10]. Por est razn, es ms conveniente el empleo de

Concentracin (mmol/l)

94

5
CO2

2-

CO3

HCO3

4
3
2
1
0
2

8
pH

10

12

14

Fig. 1. Distribucin de las especies carbonatadas en el agua de la

presa J.A. Alzate en funcin del pH.
: intervalo de pH medidos in situ.

Determinacin del estado de equilibrio de un sistema hdrico

95

la concentracin de Ca2+ (mediante la electroneutralidad), en

lugar del HCO3 en los clculos.
A continuacin se desarrollan las ecuaciones que permiten construir la curva de estabilizacin del agua respecto al
CO 2 de equilibrio.
Se consideran las siguientes limitaciones:

En consecuencia, la electroneutralidad del sistema acuoso

se resume a [4]:

[H 2CO3]

pH = 7

pH = 8
-

1/2 [HCO3 ]

Fig. 3. Relaciones

H2CO3HCO3

para pH constante.

3.5
[H2CO3] (x 10 -3 mol/l)

1. Se estima que las actividades y las concentraciones son

equivalentes (factores de actividad f 1).
2. La fuerza inica y la temperatura del agua se consideran constantes (respectivamente 0.013 0.005 mol / L
y 16 3 C [3]).
3. Se desprecian las concentraciones del H+ y del OH por
ser muy bajas frente a otras especies (los pH del agua
del embalse se encuentran entre 6 y 7.8 [3]).
4. A estos valores de pH, el ion CO32 no influye fuertemente (Fig. 1).
5. Se consideran el Ca2+ y el HCO3 (Fig. 1), como los
principales responsables de la salinidad del agua.

pH = 6

3
2.5
2
1.5
1
0.5
0
0

0.7

1.4

2.1
-

2[Ca2+] = [HCO3 ]

(3)

Al combinar los equilibrios cido-base (ecuaciones 1 y 2)

y el de disolucin-precipitacin (ecuacin 4), se tiene la ecuacin 5.
K ps = [Ca2+ ][CO 3 2 ]
[ H 2CO 3 ] =

(4)

K a2
[ HCO 3 ]3
2 K a1 K ps

(5)

La ecuacin es una parbola cbica Y = AX3. Si se considera la ordenada Y = [H 2 CO3 ] y la abscisa X = [HCO 3 ] (=
[Ca2+]), se obtiene la curva que se representa en la Fig. 2, que
se denominar curva de estabilidad del agua respecto al CO2
de equilibrio. Esta se considera como referencia comparativa
del desplazamiento del Ca2+ en disolucin o precipitable, en
funcin del CO2 disuelto (H 2CO 3 ).
Al despejar [H 2 CO 3 ] de la ecuacin 1, considerando [H +]
constante, se tiene la ecuacin 6, que representa una recta que

[H2CO3] (x 10 -3 mol/l)

3.5

2.8

3.5

-3

1/2 [HCO3 ] (x 10 mol/l)

Fig. 4. Curva de evolucin para agua en contacto con el aire.

pasa por el origen. Por tanto, las curvas para diferentes valores
de pH se representan por lneas rectas que pasan por el origen
(Fig. 3), y se observa que para mayores valores de pH, la pendiente de la recta ser menor.
[H2 CO 3] = C [HCO 3 ]

(6)

Segn Morel y Hering [21], la velocidad de difusin del

CO2(g) en el agua es ms rpida que la cintica de formacin
del HCO3 . En consecuencia, si el agua est en contacto con el
aire, se puede considerar constante [HCO 3 ], mientras que
[H 2CO 3 ] (=[CO2 ]ac ) ser variable, debido al aporte atmosfrico. As X = constante y Y = variable, esto correspondera a la
recta paralela al eje [H2 CO 3] de la Fig. 4.
Si el agua est en contacto con el CaCO3 , como sucede
con el agua del fondo del embalse, se tiene el siguiente equilibrio dinmico:
CaCO 3 + CO 2 + H 2O

2+

Ca + 2HCO

Lo cual indica que un mol de H2 CO 3 permite la formacin de dos moles de HCO3 , o su equivalencia en iones Ca 2+
(un mol). Si se considera el agua de fondo como un sistema
cerrado, se tiene la ecuacin 7, representada en la Fig. 5.

2.5
2
1.5
1
0.5

[H 2CO 3] = [HCO 3 ] + constante

(7)

0
0

0.7

1.4

2.1
-

-3

2.8

1/2 [HCO3 ] (x 10 mol/l)

Fig. 2. Curva de estabilizacin del CO2.

3.5

En la ecuacin 5, se considera la relacin (K a2 / K a1.K ps )

= constante, sin tomar en cuenta otros iones diferentes al calcio y al sistema carbonato (limitacin 5), esto conduce a que

96

Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

Icela D. Barcel et al.

log f = 0.5 z2

(12)

[H2 CO3]

Las ecuaciones 1, 2, 4, 5 y 9 se corrigieron por los factores

de actividad. Al emplear la ecuacin 12, todos los aniones y
cationes monovalentes tendrn el mismo factor de actividad f1,
al igual que los aniones y cationes divalentes tendrn a f2 , etc.
En particular, las ecuaciones 2 y 4 se transforman:
-

1/2 [HCO3 ]

K a2 [HCO3 ] = f2 [H+ ][CO 3 2 ]

(13)

K ps = f2 2 [Ca2+] [CO32 ]

(14)

Fig. 5. Curva de evolucin del agua en contacto con el CaCO3.

la curva de estabilidad sea igual para todas las aguas [4]. Esta
simplificacin se aleja mucho de la realidad, en particular en
aguas contaminadas por cationes y aniones inorgnicos, donde
es importante considerar la influencia de estos iones (iones
ajenos) en el agua, para mantener tanto la electroneutralidad
y la fuerza inica del medio, como los diferentes equilibrios
qumicos que puedan presentarse.

Si se despeja [CO3 2 ] de la ecuacin 13 y [OH ] de la

ecuacin 15, y se sustituyen en la ecuacin 8, se obtiene la
ecuacin 16.

Clculo del pH de saturacin considerando

la fuerza inica

Al dividir la ecuacin 14 entre la ecuacin 13, al despejar

[HCO3 ] y al sustituir en la ecuacin 16, se obtiene:

Por definicin, la alcalinidad del medio es [10]:

Alcalinidad = [HCO3 ] + 2[CO3 2 ] + [OH ] [H +]

(8)

f1 2 [H +] [OH ] = Kw

(15)

2K a2 [HCO 3 ]
K

+ [HCO 3- ] + 2 w + = Alcalinidad + [H + ] (16)

f2
[H + ]
f1 [H ]

+
2K a2
K ps [H ]
+ 2K w + = Alcalinidad + [H + ]

+ 1
+
2+
f

[H
]
f

[Ca
]
2
2 a2
f1 [H ]
(17)

Si se designa [H +] = [H+ ]s ; (concentracin de H+ de saturacin), la ecuacin se representa como:

y segn Langelier [6]:

pH s = pKa2 pKps log [Ca2+] log[HCO3 ]

(9)

Cuando sea necesario tener en cuenta todos los iones, hay

que considerar el efecto interinico [8]. Este efecto traduce las
fuerzas de repulsin y atraccin existentes entre los iones. La
magnitud del efecto interinico es funcin de la fuerza inica
[22, 23], por lo que conviene tomar en cuenta la correccin
de las concentraciones por el factor de actividad f, para obtener las actividades [22-24]. La fuerza inica del embalse no fue
mayor de 0.1 mol / L en los muestreos y la temperatura se
mantuvo en un promedio de 16 3 C [3]. Al considerar estos
datos, se seleccion la ecuacin de Debye-Hckel extendida
para el clculo del factor de actividad [24]:
log f =

0.5 z 2
1 + 0.9

(10)

donde: f = factor de actividad

z = carga del ion cuyo coeficiente de actividad
se determina
= fuerza inica del disolvente

al despejar [H +]s :

[H + ]s =

f 2 K a2 [Ca
K ps

2+

Alcalinidad + [H + ] s

(11)

Kw
f [H + ] s
2
1

2K a2
+1
f 2 [H + ]s

(19)

ado que el pH promedio en el agua de la presa no es superior a 8 ni inferior a 5, se pueden establecer las siguientes consideraciones:
1. [H+ ]s y K w / [H+ ]s son muy pequeos con relacin
a la alcalinidad.
2. 2K a2 / [H +] s es muy pequeo respecto a la unidad.
Lo que simplifica la ecuacin 19 en:
f K
[H + ]s = 2 a2 [Ca 2+ ] Alcalinidad
K ps

Para simplificar la ecuacin 10, se consider:

=
1 + 0.9

2K a2
K ps [H+ ]s
+ 2 K w + = Alcalinida d + [H+ ]s

+ 1
+
2+
f

[H
]
f

[Ca
]
2
s
2 a2
f1 [H ]s
(18)

(20)

Al aplicar logaritmos:
log [H+] s = log Ka2 + log Kps log f2 log [Ca2+]
log Alcalinidad
(21)

Determinacin del estado de equilibrio de un sistema hdrico

97

Se puede introducir el pH de saturacin (pHs ) en la ecuacin 21 mediante la ecuacin 22.

pHs = log [H+] s log f1

(22)

Se reemplaza log f1 y log f2 por su expresin en funcin

de , segn la ecuacin 12. Si se considera que la alcalinidad
es igual al contenido de bicarbonato (Fig. 1), la ecuacin 21 se
escribe:
pHs = pKa 2 pK ps log[Ca2+ ] log[HCO 3 ] + 2.5

[HCO3 ] + 2[CO3 2 ] + [OH ] + [An ] + 2[An 2] + 3[An3 ] +

...= [H +] + 2[Ca 2+] + [Cat+] + 2[Cat2+] + 3[Cat3+ ] + ...
(25)
donde An 3 = aniones trivalentes
An 2 = aniones divalentes diferentes a CO3 2
An = aniones monovalentes diferentes a HCO 3
y OH
3+
Cat = cationes trivalentes
Cat2+ = cationes divalentes diferentes a Ca2+
Cat+ = cationes monovalentes diferentes a H +

(23)
Adems, la fuerza inica se puede escribir como:

Al utilizar el ndice de saturacin propuesto por Langelier

[4, 6, 7, 10]:
Is = pH real pHs

(24)

con pHreal = pH medido in situ,

se considera que si Is < 0, el agua es agresiva y si Is > 0, el
agua es incrustante.
Mediante el criterio de Langelier, se pueden relacionar
los conceptos de corrosin e incrustacin con la influencia
principal del sistema carbonato y de los cationes Ca2+ y Mg 2+,
en funcin del concepto de pH de saturacin de cualquier
agua [4, 6, 7, 10]. Si el pH real del agua est por debajo de
pH s, el ndice de saturacin ser positivo, entonces el equilibrio de la reaccin:
CaCO 3 + CO 2 + H 2O

Ca 2 + + 2HCO 3 -

se desplazar hacia la izquierda, precipitando al CaCO3 ,

mxime si el agua no est saturada de CO 2 , mientras que
cuando existe un exceso de CO2 , la reaccin se desplazar
hacia la formacin de HCO3 , y permaneciendo ms Ca2+ en
disolucin.

Clculo del pH de saturacin considerando iones

diferentes de Ca 2+ y de HCO3
Como se indic antes, el ndice de Langelier que se ha presentado hasta el momento, incluye a la alcalinidad en funcin del
sistema carbonato y de la concentracin de Ca2+. Para estudios de caracterizacin o de comportamiento qumico en sistemas acuticos contaminados (ros, costas, etc.), es importante relacionar el ndice de saturacin con la fuerza inica y
el mayor nmero de iones disueltos medibles. A continuacin,
se presentan las ecuaciones conducentes a este nuevo contexto, donde el ndice de saturacin de Langelier se expresa en
funcin de las concentraciones de los iones diferentes a
CO 3 2 , HCO3 y Ca2+ (iones ajenos).
Para el clculo del pH de saturacin en el que se consideran los iones ajenos, se parte de una ecuacin de electroneutralidad ms completa que la ecuacin 3, como sigue:

= 1/2 [H +] + 1/2 [Cat+] + 2[Ca2+ ] + 2[Cat2+] + 9/2 [Cat3+]

+ ...+ 1/2[OH ] + 1/2 [HCO3 ] + 1/2 [An] + 2[CO3 2]
+ 2[An 2] + 9/2 [An 3] + ...
(26)
Al combinar las ecuaciones 8 y 25, se obtiene otra definicin de la alcalinidad (ecuacin 27), que puede considerarse
como la diferencia entre la suma de las concentraciones en
miliequivalentes de todos los cationes (excepto el H+) y la
suma de las concentraciones en miliequivalentes de todos los
aniones procedentes de cidos minerales diferentes de HCO3 ,
CO 3 2 y OH .
Alcalinidad = 2 [Ca2+] + [Cat+ ] + 2 [Cat2+] + 3 [Cat3+ ] + ...
[An ] 2 [An2 ] 3[An 3] ...
(27)
Los cationes y aniones trivalentes (o ms) se pueden despreciar ya que prcticamente se encontraran formando compuestos insolubles con ms naturaleza covalente (reglas de
Fajans [25], diagramas de solubilidad [26]). Por lo tanto, los
clculos siguientes se efectuarn en funcin de los iones
mono- y divalentes.
Para simplificar las ecuaciones, se definen los siguientes
parmetros en funcin de los iones ajenos:
A = 3 [Cat2+ ] + [Cat+ ] + [An 2]
B = 4 [An 2] + 3/2 [An ] 1/2 [Cat+]
C = 12 [Cat2+] + 5 [Cat+] 4 [An 2] 3 [An ]

(28)
(29)
(30)

A partir de estos parmetros, se pueden determinar tres

diferentes expresiones de la fuerza inica. Al dividir la ecuacin 25 entre dos y al adicionar el resultado a la ecuacin 26,
se establece la expresin A de la ecuacin 28, con ello se representa segn la ecuacin 31. Si se sustrae la ecuacin 25 de
la 26, tomando en cuenta la ecuacin 29, se obtiene la ecuacin 32. Por ltimo al multiplicar la ecuacin 25 por dos y al
adicionar el resultado a la ecuacin 26, despejando C de la ecuacin 30, se define la ecuacin 33.
= A + 3 [Ca 2+] + [CO32 ] + [H+ ]
(31)
= B + 4 [CO3 2] + 3/2 [HCO3 ] 1/2 [H+ ] + 3/2 [OH ] (32)
= 1/2 C + 6 [Ca2+] 2 [CO32 ] 3/2 [HCO3 ] +
(33)
5/2 [H +] 3/2 [OH ]

98

Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

Icela D. Barcel et al.

Generalmente, las aguas naturales no presentan un pH

menor de 4.5 ni mayor de 9.5, por lo que se puede despreciar
[H +] y [OH ]. Con estas restricciones, las ecuaciones 31 a 33
se simplifican en:
= A + 3 [Ca2+] + [CO3 2]
= B + 4 [CO 3 2 ] + 3/2 [HCO3 ]
= 1/2 C + 6 [Ca2+ ] 2 [CO3 2] 3/2 [HCO3 ]

(34)
(35)
(36)

Con estas ecuaciones, se determinan las expresiones de

[Ca2+] y alcalinidad en funcin de los iones ajenos y la fuerza
inica que se reemplazan en la ecuacin 21. Al sustituir el
[CO3 2] en la ecuacin 34 por su expresin despejada de la
ecuacin 14, se llega a:
3 f22 [Ca 2+ ]2 f2 2 ( A)[Ca2+] + K ps = 0

(37)

Esta ecuacin de segundo grado tendr las soluciones:

( A ) + ( A ) 2
[Ca 2 + ] =

12 K ps

( A ) ( - A )

f 22

y [Ca 2+ ] =

12 K ps

f 22

Se seleccionar la primera solucin, con la que se obtendr la ms alta concentracin de Ca2+ ; definindose de esta
forma la ecuacin 38.

( A ) + ( A )2
[Ca 2 + ] =

12 K ps
f 22

(38)

Si se multiplica por dos la ecuacin 34 y si se adiciona el

resultado a la ecuacin 36, para luego reemplazar [Ca2+ ] por
su expresin en la ecuacin 38 y despejando [HCO3 ], se llega
a la expresin 39:
1

[HCO 3 ] = C 2 + 4
3

( A )

6 K ps

[CO 23 ] =

f 22

( A ) 2

12 K ps
f 22

(43)

= 1/2 [Cat+] + 2[Ca2+ ] + 2[Cat2+] + 1/2 [HCO3 ] +

Alcalinidad =

1
A 2B + +
3

( A ) 2

12 K ps

f 22

(45)

1/2 [An ] + 2[CO 3 2 ] + 2[An 2]

(42)
Por otro lado, si se combinan las ecuaciones 34 a 36, se
tiene que C = 4A 2B
(44)
Lo que transforma la ecuacin 43 en:
Al reemplazar [Ca2+] y la Alcalinidad por sus expresiones
12K ps
1
pH s = pK a2 pK ps log A + ( A)
6
f 22

(46)
12K ps
1
log A 2B + + ( A)
+ 2.5e
3
f 22

en funcin de los iones ajenos (ecuaciones 38 y 45) en la

ecuacin 21, se define un pH de saturacin en funcin de las
concentraciones de los iones presentes, menos el Ca 2+ , el
HCO3 y CO 3 2 (ecuacin 46).
A=

( A) 2

12 K ps

(47)

f 22

Por lo general los cuerpos acuticos contienen un pH que

no sobrepasa el valor de 8.3, as la concentracin del CO32 es

( A )

(48)

[HCO 3 ] = alcalinidad =

f 22

( A )2

[CO3 2 ] por sus expresiones en las ecuaciones 39 y 41, se

define nuevamente la alcalinidad en la ecuacin 43.

(39)

12 K ps

12 K ps

f 22

C 1
+
6 3 3

[Ca 2+ ] =

(40)

( A ) + ( A )2

1
[CO 23 ] = ( A )
2

12 K ps

f 22

Alcalinidad = A B

2 ( B)
3

(49)

despreciable. Al considerar lo anterior, la ecuacin 41 se

puede simplificar en:
pHs = pK a2 - pK ps log

( A )
3

log

2( B )
+ 2.5e
3

(50)

(41)

Al despejar [CO3 2 ] de la ecuacin 14, y reemplazar

[Ca2+] por su expresin (ecuacin 38), se llega a la ecuacin
40. Si se multiplican numerador y denominador por el conjugado del denominador, se simplifica la ecuacin 40 en la
ecuacin 41.
Al combinar las ecuaciones 27 y 35 con la definicin
modificada de la fuerza inica, considerando las simplificaciones anteriores (ecuacin 42), y reemplazando [HCO3 ] y

De la misma manera las ecuaciones 38, 39 y 45 tambin

simplifican en:
Lo que genera la expresin simplificada de pHs en funcin de los iones ajenos:

Parte experimental
Medidas de campo y muestreo. La presa Alzate, por su
forma y tamao se dividi en seis sitios (Fig. 6). Durante la
campaa de muestreo, se tomaron muestras a 20 cm de la

Determinacin del estado de equilibrio de un sistema hdrico

99

Tabla 1. Profundidad, pH, temperatura y conductividad del agua en cada sitio de la presa Alzate.
Sitio
A
B
C
D
E
F

Punto

Profundidad
(m)

pH*

Temperatura
(C)*

Conductividad
(mho / cm)*

Superficie
Fondo
Superficie
Fondo
Superficie
Fondo
Superficie
Fondo
Superficie
Fondo
Superficie
Fondo

2.30

6.47
6.42
7.40
7.51
7.69
7.70
6.97
6.87
6.87
6.80
7.63
7.37

19.0
15.6
18.2
16.9
21.6
18.1
15.0
15.0
16.0
16.0
20.0
16.0

1121
1139
1333
1729
1727
1848
837
842
980
834
783
787

2.18
2.23
2.00
3.94
8.45

*: Dispersin anlitica relativa promedia (dispersin mxima), obtenidas con tres medidas: pH: 1.3 % (2.3 %), temperatura: 1.6 % (2.7 %),
conductividad: 0.3 % ( 0.6 %).

Tabla 2. Alcalinidad del agua en cada sitio de la presa Alzate ( 103

M*).
Punto
Superficie
Fondo

Sitio
A

1.76
1.89

2.66
2.68

2.82
2.84

1.87
2.18

2.14
2.17

2.60
2.60

HNO 3 concentrado (Merck, Suprapur). Se analizaron los

cationes Ca2+, Fe2+, K +, Mg 2+, Mn2+ y Na + mediante espectrofotometra de absorcin atmica por flama (Varian,
Spectra AA-20Plus). Los resultados estn reunidos en la
Tabla 4.

*: Dispersin anlitica relativa promedia = 2.0 %, dispersin mxima obtenida

= 3.3 %.

Resultados y discusin
superficie y en el fondo (el cual fue variable en cada sitio,
Tabla 1) de las diferentes columnas de agua para cada sitio de
la presa, despus de medir los parmetros fisicoqumicos
(temperatura, pH y conductividad).
Se estableci el momento de la recoleccin de muestras
de agua mediante un estudio preliminar de parmetros fisicoqumicos, incluyendo al oxgeno disuelto [3, 11]. Se seleccion las 13 horas del da, donde se midi la concentracin de
oxgeno disuelto mxima, correspondiendo a una actividad
microbiolgica mxima y por consecuencia relativamente
reproducible en el agua. En la Tabla 1 se indican los valores
del pH, temperatura y la conductividad a la hora del muestreo,
as como la profundidad de cada columna de agua en los sitios
de recoleccin.
Pretratamiento y anlisis
Las aguas colectadas se filtraron con membranas de 0.45
m de poro (HA, Millipore) para separar los compuestos
disueltos de los compuestos asociados con partculas [27].
Las muestras filtradas se refrigeraron hasta su anlisis.
Se determin la alcalinidad por potenciometra [28]. Los
resultados estn reunidos en la Tabla 2.
Se determinaron las concentraciones aninicas por espectrofotometra (NO3 , HPO 4 2 [28]) o por volumetra (Cl,
SO 42 [3, 28]). Los resultados se indican en la Tabla 3.
Las muestras destinadas al anlisis de cationes se conservaron a pH 2, en refrigeracin, mediante la adicin de

A partir de la Fig. 2, se determin la situacin de cada muestra

de agua estudiada en funcin de las concentraciones [Ca2+] y
[HCO3 ] medidas (Tablas 2 y 4) y de las ecuaciones 1 y 3, se
consideraron las concentraciones iguales a las actividades (f =
1); el calcio y el sistema carbonato fueron las nicas especies
de influencia. La Fig. 7 ilustra los resultados encontrados para
el agua superficial (Fig. 7a) y en el fondo (Fig. 7b). En todos
los sitios y en las dos profundidades, las aguas presentaron
CO2 disuelto en exceso ([CO2 ]e x). El agua del sitio A result
ms alejada de la curva de estabilidad, tanto en la superficie

19 2755LN

Ro Lerma
salida

F
E

99 3750LW

C
B

99 4215LW

Ro Lerma
entrada

Sitios de muestreo
Poblados

Fig. 6. Sitios de muestreo en la presa Alzate.

100

Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

Icela D. Barcel et al.

2.5
2

-3

-3

3
A

[H2 CO3] (x 10 mol/l)

[H2 CO3] (x 10 mol/l)

1.5

0.5
F

C
B

2.5
2
E
1.5

1
F

0.5

C
B

0
0

0.5

1
-

1.5
2+

2.5

-3

0.5

1
-

1/2 [HCO 3 ] = [Ca ] (x 10 mol/l)

1.5

2+

2.5

-3

1/2 [HCO3 ] = [Ca ] (x 10 mol/l)

Fig. 7. Diagramas de equilibrio en la fase acuosa de la superficie y del fondo en varios

sitios de la presa J.A. Alzate. Se consideraron nicamente al Ca y al sistema carbonato
(a: superficie, b: fondo).

como en el fondo. Este estado se justifica por el valor promedio del pH medido in situ, que fue el ms bajo (Tabla 1), ya
que es un sitio donde predomina el agua residual industrial.
En los sitios E y D, el [CO2 ]ex fue menor que en el sitio A, y
el agua de los sitios B, C y F se acerc ms a la estabilidad del
sistema carbonato.
El sitio A present la diferencia ms importante entre el
agua de la superficie y la del fondo, notndose un aumento en
[CO2 ]ex del fondo. En el sitio F, la concentracin del CO 2ex
del agua de fondo fue casi el doble del valor calculado en la
superficie, sin embargo, en ambos casos las concentraciones
resultaron muy bajas respecto al sitio A, lo que le resta importancia a esta variacin. Los sitios E y D mostraron simultneamente una tendencia al aumento de la superficie al fondo,
aunque en menor proporcin, esto puede provenir de la
degradacin microbiolgica del material orgnico presente en
los sedimentos, principalmente como resultado de los procesos oxidativos del material orgnico biodegradable en CO2 .
En una segunda etapa, se volvieron a calcular los valores
de [H2 CO 3 ] para cada muestra de agua, tanto en superficie
como en fondo, empleando la curva de estabilidad de la Fig. 2
y la ecuacin 1, pero considerando esta vez los iones ajenos

en la ecuacin de electroneutralidad, y tomando en cuenta la

fuerza inica del medio (a travs de los factores de actividad).
Al ser diferente la fuerza inica de cada muestra, esta ltima
modificacin, en particular, genera una curva de estabilidad
diferente para cada agua colectada. En la Fig. 8, se representan los resultados obtenidos por este mtodo. La curva representada por la lnea slida es la misma que en las Figs. 2 y 7,
mientras que la lnea punteada, corregida por la fuerza inica,
muestra el promedio de todas las curvas obtenidas (12 muestras). Es interesante notar que si las nuevas curvas son muy
similares entre s (lo que parece lgico para muestras pertenecientes al mismo cuerpo hdrico), el desplazamiento de la
curva generada por la fuerza inica no es despreciable y
aumenta con las concentraciones. En ambas profundidades, si
se emplea la primera curva como referencia, por ejemplo en el
caso de los sitios D y E como muy cercanos a la estabilidad
del sistema carbonato respecto al CO 2eq, se origina un error
grave, ya que estos se pueden considerar muy cercanos a la
estabilidad del sistema carbonato; situacin diferente se presenta al emplear la curva corregida, en este caso el agua de los
sitios D y E presentan un exceso de CO2 relativamente importante, lo mismo sucede con los sitios B y C, que en la curva

Tabla 3. Concentraciones aninicas el agua en cada sitio de la presa

Alzate ( 103 M).

Tabla 4. Concentraciones catinicas el agua en cada sitio de la presa

Alzate ( 103 M)*.

Sitio
A
B
C
D
E
F

Punto

[Cl]

[SO42]

[HPO42]

[NO 3]

Superficie
Fondo
Superficie
Fondo
Superficie
Fondo
Superficie
Fondo
Superficie
Fondo
Superficie
Fondo

2.09
2.12
2.14
1.81
1.38
1.35
1.41
1.24
1.13
1.13
1.27
1.18

1.79
1.79
1.49
1.61
1.56
1.42
1.31
1.33
1.23
1.20
1.18
1.18

0.11
0.11
0.09
0.09
0.06
0.06
0.06
0.06
0.05
0.05
0.06
0.05

0.24
0.21
0.19
0.29
0.16
0.16
0.32
0.24
0.24
0.32
0.19
0.24

*: Dispersin anlitica relativa promedia (dispersin mxima), obtenidas con

tres medidas: [Cl]: 4.0 % (7.1 %), [SO42]: 4.4 % (6.3 %), [HPO42]: 6.1 %
(9.0 %), [NO 3]: 5.3 % (7.2 %).

Sitio
A
B
C
D
E
F

Punto

[Ca2+]

[Fe2+]

[K+]

[Mg2+]

[Na+ ]

Superficie
Fondo
Superficie
Fondo
Superficie
Fondo
Superficie
Fondo
Superficie
Fondo
Superficie
Fondo

0.97
0.97
0.86
0.84
0.77
0.83
0.77
0.74
0.72
0.72
0.74
0.71

0.033
0.046
0.019
0.048
0.015
0.014
0.015
0.016
0.018
0.016
0.016
0.015

0.051
0.047
0.037
0.040
0.026
0.027
0.026
0.021
0.020
0.021
0.022
0.019

0.60
0.58
0.58
0.56
0.52
0.52
0.48
0.49
0.46
0.47
0.50
0.46

4.38
6.59
3.30
3.35
3.54
3.41
3.26
3.30
2.80
2.52
2.81
2.25

*: Dispersin anlitica relativa promedia (dispersin mxima), obtenidas con

tres medidas: [Ca2+]: 1.7 % (2.8 %), [Fe2+]: 0.4 % (1.3 %), [K+ ]: 1.6 % ( 2.5
%), [Mg 2+]: 1.5 % (2.5 %), [Na+ ]: 0.7 % (0.8 %).

Determinacin del estado de equilibrio de un sistema hdrico

101

2.5

-3

2
1.5

E
1

0.5

C
F
B

0
0

[H2 CO3] (x 10 mol/l)

-3

[H2 CO3] (x 10 mol/l)

0.5
1
1.5
2
2.5
-3
1/2 [HCO3 ] (x 10 mol/l)

2.5
2
1.5

D
F C

0.5
B

0
3

0.5
1
1.5
2
2.5
-3
1/2 [HCO 3 ] (x 10 mol/l)

Fig. 8. Diagramas de equilibrio en la fase acuosa de la superficie y del fondo en varios sitios
de la presa J.A. Alzate, considerando la influencia de ms cationes y aniones adems del Ca

slida estn por arriba y en el otro caso se desplazan hacia

abajo. Adems la curva punteada es la especfica para las
condiciones de los parmetros medidos en el agua de la presa
de este estudio
Con la comparacin de las Fig. 7 y 8, se demuestra que
no se puede simplificar el conjunto de compuestos inorgnicos disueltos de un agua contaminada como un sistema donde
se considera nicamente al Ca2+ y al HCO3 . En particular, en
el caso de la presa J.A. Alzate, no se verifica la ecuacin 3,
donde 2[Ca2+] = [HCO 3 ]. El empleo de la concentracin
medida para el bicarbonato, as como de las actividades, modifica poco la posicin relativa de los puntos, pero provoca un
traslado importante del conjunto de puntos hacia la derecha.
Este fenmeno tiene una consecuencia considerable en la percepcin de la calidad del agua de los sitios B, C y F, que
pasan de un ligero exceso a una deficiencia en CO2, lo que
podra interferir negativamente en decisiones futuras relativas
a estos sitios, ya que de sitios con tendencia agresiva, donde el
calcio y el carbonato estarn en estado disuelto, pasan a sitios
de naturaleza incrustante, en donde existe la probabilidad de
que el calcio tienda a precipitar. Por ltimo, se nota que al
considerar las concentraciones en lugar de las actividades, el
clculo sobrestima a la concentracin de CO2 disuelto.
La comparacin entre los resultados encontrados en la
superficie (Fig. 8a) con los del fondo (Fig. 8b) muestra el
mismo comportamiento de [H2 CO3 ] de una profundidad a la
otra con los dos mtodos (Fig. 7 y 8), aunque en una amplitud
menor, mientras que [Ca2+] (Fig. 7) tiene una evolucin inversa (con excepcin del sitio C) a la de [HCO3 ] (Fig. 8).
Los ndices de saturacin de Langelier permiten tambin
determinar la naturaleza de una agua como agresiva o incrustante, pero con ms claridad, ya que se maneja un valor nico
en lugar de la posicin de un punto en un plano (Fig. 7 y 8).
Sin embargo, el empleo de logaritmos puede modificar la percepcin de los resultados, aminorndolos.
Se presentan en la Fig. 9 los ndices de saturacin obtenidos para cada sitio, donde se consideran primero (sist. 1), nicamente a los iones Ca2+ y HCO3 donde se utiliz la ecuacin
9 para los clculos. En otro caso (sist. 2), tomando en cuenta
adems a los cationes Mg2+, Na +, K+, Fe2+ y los aniones Cl,
SO 4 2 , NO3 , HPO 4 2 , cuyas concentraciones son influyentes,
a travs de la fuerza inica, para los clculos se utiliz la

ecuacin 23. Como se observa en los diagramas respecto al

CO2 disuelto (Fig. 7 y 8), se pueden clasificar los sitios en tres
grupos: el sitio A como el ms agresivo (aunque se supone
que en el sist. 1, Is es un indicador cualitativo) en ambas profundidades, las aguas de los puntos B, C y F con una agresividad baja o caractersticas tendientes a una posible naturaleza
incrustante y los puntos D y E con agresividad intermedia.
Sin embargo, en la caracterizacin de las aguas, se presentan contradicciones: la Fig. 7 y el sistema 1, se basan en el
predominio de los iones Ca2+ y HCO3 y deberan presentar
resultados parecidos y, por el contrario, la primera clasifica a
todas las muestras como agresivas cuando el Is es positivo en
varios casos; similarmente, si se compara la Fig. 8 con el sist.
2, en la que ambos toman en cuenta la fuerza inica generada
por iones ajenos, la situacin se invierte, donde el Is presenta
nicamente carcter agresivo aun cuando la Fig. 8 indica un
dficit de CO2 disuelto en los sitios B, C y F. Esta contradiccin demuestra que las dos formas de caracterizar la naturaleza del agua no reflejan los mismos fenmenos y no se
pueden emplear igualmente. Las Fig. 7 y 8 ilustran nicamente el estado de estabilidad del agua respecto al CO2 de
equilibrio, y no se podr hacer el nexo con las caractersticas
agresivas o incrustantes de las aguas estudiadas.
La evolucin de los ndices de saturacin entre la superficie (Fig. 9a) y el fondo (Fig. 9b), en los dos sistemas, muestra
la misma tendencia que la evolucin del CO2 disuelto: el agua
del fondo es ms agresivo que el de la superficie en los sitios
A, D, E y F, y ms incrustante en los sitios B y C.
Al igual que la comparacin de las Fig. 7 y 8, el estudio
de los sistemas 1 y 2 considerados en la Fig. 9, demuestra la
influencia notable de los iones ajenos en la caracterizacin de
las aguas. En particular, el sist. 1 clasifica cuatro muestras
como agresivas (B superficie y fondo, C fondo y F superficie),
mientras que el sist. 2 presenta a todas como agresivas. De hecho, se observa que la influencia de los iones ajenos sobre los
ndices de saturacin es un desplazamiento hacia valores ms
negativos o un desplazamiento de las aguas hacia caractersticas ms agresivas, donde otra vez, reduce el valor de la informacin dada cuando se considera un sistema simplificado de
manera exagerada, y hace que el Is modificado por la fuerza
inica se acerca ms a la realidad, generando una informacin
ms confiable.

102

Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

Icela D. Barcel et al.

0.3

IS

-0.3

-0.9
sist.1
concentr.

sist.2
conductiv.

-1.5
A

C
D
Sitio

0.3

IS

-0.3

-0.9
sist.1
concentr.

sist.2
conductiv.

-1.5
A

D
Sitio

Fig. 9. Indices de saturacin del agua de los sitios de la presa J.A.

Alzate (a: superficie, b: fondo).

0.4
Aguas incrustantes
B

0.0

Is (sist. 1)

F
-0.4

= 1.6 10 5 C (con , fuerza inica y C, conductividad)

-0.8

D
E

-1.2

Aguas agresivas

-1.6
6.4

6.7

7.0
7.3
pH medido

7.6

7.9

0.4
Aguas incrustantes
B

0.0

Is (sist. 1)

C
-0.4
F
-0.8
D
E

-1.2

Aguas agresivas

-1.6
6.4

Tambin se muestran en la Fig. 9 (que se represent como

concentr.) los resultados de los clculos cuando se utiliz la
expresin del ndice de saturacin dependiente de la fuerza
inica y de las concentraciones de los iones ajenos, eliminando por completo las concentraciones de los iones Ca2+ y
HCO3 (ecuacin 46). Estos Is resultaron prcticamente idnticos a los del sist. 2, lo que apoya todava ms la necesidad de
tomar en cuenta la fuerza inica en el clculo de los ndices de
Langelier. Adems, esta serie de ecuaciones indica que con
esta correccin, el ndice pasa de cualitativo a cuantitativo, y
se pueden aceptar las comparaciones entre diferentes sitios de
misma caracterstica, lo que aumenta el valor de este indicador. Por ltimo, la restriccin de estos clculos a aguas naturales con pH inferior a 8.3, permite considerar al bicarbonato como la especie ms importante, aunque est relacionado a
la fuerza inica y a la expresin B (ecuacin 29), sigue siendo
el principal responsable de la alcalinidad (ecuacin 49).
La medida de todos los iones del sist. 2 puede parecer
muy compleja, sin embargo, la informacin que refleja es ms
estricta y cuantitativa. No obstante, si se tiene poca informacin sobre la contaminacin del cuerpo hdrico, se corre el
riesgo de omitir algunas especies inicas de importancia,
generando errores en el clculo del Is. En particular, en estudios sencillos, como para tratamiento de aguas provenientes
de plantas industriales, en el que no se requiere de un estudio
detallado sobre los equilibrios qumicos, al contrario del caso
de estudios ms finos como el de cuerpos hdricos. Eaton et
al. [28] presentan una relacin emprica que permite calcular
la fuerza inica mediante la conductividad, simplificando los
anlisis y los clculos:
(51)

6.7

7.0
7.3
pH medido

7.6

7.9

Fig. 10. Indices de saturacin del agua de la presa J.A. Alzate en funcin del pH medido in situ (a: superficie, b: fondo).

Empleando las ecuaciones 23, 24 y 51 es posible calcular

los Is midiendo solamente temperatura, conductividad, pH,
[Ca2+] y alcalinidad. La diferencia observada con los Is del
sist. 2 (Fig. 9, conductiv.) es poco importante (en promedio
0.04), y tiende a un desplazamiento hacia aguas ms incrustantes. Todava se necesita repetir el estudio con nuevas muestras para verificar la realidad de esta tendencia. Sin embargo,
se tiene aqu un cuarto mtodo para calcular los Is que fortalece la importancia de la influencia de los iones ajenos en este
clculo.
Eso implica que, si se quiere llevar a cabo la caracterizacin completa de un cuerpo hdrico, incluyendo estudios de
especiacin qumica y determinacin de predominio de
especies qumicas, es decir establecer los equilibrios qumicos
del conjunto de especies qumicas que coexisten bajo las condiciones de CO2 disuelto, pH, temperatura, fuerza inica, etc.,
en una cierta estacin del ao, es necesario (y se tienen todos
los datos para ello) considerar la expresin del ndice de
Langelier en funcin de los iones ajenos (ecuacin 46).
En la Fig. 10, se presenta un grfico de Is (sist. 2) vs.
pH real, donde se nota claramente la diferencia de valores de Is
en cada sitio. Si bien, todos los sitios resultaron agresivos, A,
D y E presentaron propiedades an ms agresivas que los

Determinacin del estado de equilibrio de un sistema hdrico

otros. El menos agresivo fue el sitio B, tanto en el agua de la

superficie como la del fondo. La zona A, en toda la columna
de agua (superficie y fondo), segn el modelo de Langelier es
la ms agresiva. Se puede observar que los sitios B, C y F en
superficie y fondo, son los ms cercanos a la estabilizacin (Is
= 0) y relacionados con el CO2 eq, como lo indican tambin las
concentraciones de CO2 disuelto, lo que demuestra la gran
influencia de los bicarbonatos en los ndices de Langelier.
Existe una aparente relacin lineal entre el Is y el pH real, sin
embargo, necesita verificarse con otros muestreos en diferentes estaciones del ao.

Conclusiones
1. Los sistemas hdricos naturales tienden hacia una estabilizacin heterognea del agua relacionada con los equilibrios
qumicos. En particular, la relacin de estabilidad de un agua
frente al equilibrio del sistema carbonato puede favorecer
reacciones de precipitacin cuando el sistema se encuentra
debajo de la curva de estabilidad o reacciones de disolucin
cuando el sistema se encuentra arriba de la curva de estabilidad. Esta caracterizacin de un agua es importante para predecir el comportamiento del Ca2+ disuelto o su tendencia a la
precipitacin, siempre y cuando no existan otros cationes y
otros aniones diferentes a HCO3 en aguas a pH entre 5 y 8.3;
ya que para el tratamiento de aguas a pH < 5, se tendr que
considerar a H+, y para el tratamiento de aguas a pH > 8.3, se
tendr que considerar a CO3 2 . An ms, para agua en
tratamiento con pH > 9, se deber considerar adems a OH .
2. Los diagramas CO 2 / HCO3 permiten determinar la estabilidad de un sistema hdrico respecto al CO2 en exceso, siempre y cuando no existan iones en concentraciones importantes
que influyan en los equilibrios qumicos del sistema carbonato
y en la concentracin del Ca2+. Sin embargo, la contaminacin
de un agua implica en general un aumento de las concentraciones inicas, lo que hace caduca la suposicin anterior. En
este caso es importante considerar la fuerza inica.
3. Los ndices de Langelier, cuando consideran la influencia
de la mayora de los iones presentes en la ecuacin de electroneutralidad y en la fuerza inica, son ms precisos, adems
de ms sencillos de interpretar. La evolucin de la diferencia
que existe entre el valor de los ndices para un sistema sencillo
y un sistema ms complejo permite demostrar a su vez la
influencia de la contaminacin sobre estos ndices.
4. La expresin de pHs en funcin de la fuerza inica y de las
concentraciones de los iones ajenos permite demostrar que el
pHs modificado por la fuerza inica, al contrario del pHs original de Langelier, genera un Is que se puede considerar como
un indicador cuantitativo de la naturaleza agresiva o incrustante de diferentes aguas, permitiendo su comparacin y su
clasificacin.

103

5. Es importante considerar las ecuaciones relacionadas con

H2 CO3 , HCO3 ,CO3 2, Ca 2+ y con los iones ajenos cuando se
requieran estudios finos, donde se necesite conocer los diferentes equilibrios entre especies inorgnicas, en un cuerpo de
agua natural que ha sido contaminado por descargas residuales de origen industrial o agrcola, donde se han incorporado contaminantes orgnicos, o cuando se necesite la determinacin de las especies qumicas (especiacin).
6. En la presa J.A. Alzate, se observaron aguas agresivas en
todos los sitios de la presa, con ms agresividad en el sitio A,
que es el ms contaminado. Comparando lo obtenido en
superficie y en fondo, las aguas superficiales de las zonas E y
F (las de mayor profundidad), demostraron que el CO 2 no
proviene solamente de la atmsfera, sino del sedimento y en
particular de los procesos biolgicos que ocurren en su seno.
7. Por fin, se podra reducir la parte analtica de la determinacin de los ndices de Langelier, empleando una relacin
emprica entre la fuerza inica y la conductividad, disminuyendo tambin los errores analticos que se introducen en los
clculos, cuando se necesite desarrollar tcnicas de tratamiento de aguas residuales de origen industrial, con contaminantes inorgnicos.

Agradecimientos
Este trabajo se realiz con el apoyo del Consejo Nacional de
Ciencia y Tecnologa a travs del proyecto 34154-T.

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Revista de la Sociedad Qumica de Mxico, Vol. 46, Nm. 2 (2002) 105-108

Investigacin

Estudio por dicrosmo circular de la desnaturalizacin trmica

de la subtilisina BPN'. Modelo irreversible de dos estados
Salvador R. Tello-Sols * y Alfonso Arroyo-Reyna
rea de Biofisicoqumica. Departamento de Qumica. Universidad Autnoma Metropolitana-Iztapalapa.
Apartado Postal 55-534, Mxico 09340, D.F., Iztapalapa, Mxico. E-mail: [email protected]
Recibido el 28 de enero del 2002; aceptado el 3 de abril del 2002
Resumen. Se estudi la desnaturalizacin trmica de la subtilisina
BPN por dicrosmo circular. Se observa que el proceso fue fuertemente dependiente de la velocidad de calentamiento, como es de esperarse para un proceso de desplegamiento que se encuentra bajo
control cintico, debido a la presencia de una reaccin irreversible. El
proceso de desnaturalizacin trmica sigue un modelo simple de dos
estados (N D). Se calcul la energa de activacin (E) para la reaccin por diferentes mtodos. El valor de E obtenido fue muy similar
variando de 266 a 339 kJ mol1.
Palabras clave: Subtilisina BPN, desnaturalizacin, dicrosmo circular, irreversibilidad.

Abstract. Thermal denaturation of Subtilisin BPN' was studied by

circular dichroism. It was observed that the process was strongly dependent on the heating rate, as is expected for an unfolding process
kinetically controlled due to presence of an irreversible reaction.
Thermal unfolding process follows a simple two-state mechanism (N
D). The activation energy (E) to this reaction was calculated by
different methods. The obtained values for E were rather than similar
to one another, varying from 266 to 339 kJ mol1.
Keywords: Subtilisin BPN, denaturation, circular dichroism, irreversibility.

Introduccin

Se utiliz rutinariamente agua desionizada en la preparacin de todas las disoluciones y reguladores.

Hoy en da, la desnaturalizacin trmica de protenas es estudiada intensamente. La investigacin de los procesos de
desnaturalizacin puede ayudar a elucidar el mecanismo del
proceso contrario, esto es, el plegamiento de las protenas. El
desplegamiento trmico de muchas protenas globulares
pequeas es altamente cooperativo y sigue un mecanismo de
dos estados, bajo condiciones de equilibrio [1, 2]. La calorimetra diferencial de barrido se ha utilizado ampliamente en
los ltimos 25 aos para el estudio de las transiciones trmicas
en protenas. Esta tcnica da informacin sobre la energa y el
mecanismo del proceso de plegamiento / desplegamiento de
las protenas [2, 3]. El anlisis de los datos calorimtricos
requiere que el proceso de desplegamiento sea reversible.
Cuando hay irreversibilidad en el proceso de desnaturalizacin, esto es, cuando se est bajo control cintico, es necesario
realizar un estudio calorimtrico ms complejo [4-6]. Para algunas protenas que se obtienen en bajas concentraciones,
dichos estudios son prcticamente imposibles de realizar.
En este trabajo empleamos un mtodo alternativo para el
estudio de la desnaturalizacin trmica de una protena, la subtilisina BPN, a pH 7.5. El mtodo consiste en el monitoreo
de la elipticidad, seguida por dicrosmo circular, en funcin de
la velocidad de calentamiento.

Parte experimental
Todos los reactivos utilizados fueron grado analtico (Merck,
Alemania).

Enzima. La subtilisina BPN' se obtuvo de un extracto comercial (EC 3.4.21.62) de Sigma Chemical Co, St. Louis, Mo,
E.U.A.
Purificacin. Un gramo del extracto comercial de subtilisina
fue disuelto en 25 mL de regulador de fosfatos 0.01 M, pH
7.5, filtrado por membrana Millipore y aplicado a una columna de filtracin en gel TSK-HW 50 F (2.5 54 cm) (Merck,
Alemania), acoplada a un sistema de coleccin LKB. La
columna fue equilibrada con regulador de fosfatos 0.01 M, pH
7.5, se colect con un flujo de 1 mL / min. Las fracciones con
actividad proteoltica fueron unidas en una nueva fraccin,
concentradas y recromatografiadas en una columna de filtracin en gel Biosep sec-S2000 (0.78 30.0 cm) (Phenomenex ) acoplada a un sistema cromatogfico lquido de alta resolucin, Varian 9000, utilizando como eluyente regulador de
fosfatos 0.01 M, pH 7.5.
La purificacin final se llev a cabo por intercambio inico en cromatografa lquida de alta resolucin (HPLC). Disoluciones de un mililitro de aproximadamente 1.0 mg de protena / mL fueron inyectadas en una columna de sulfopropilo SP5PW (0.75 7.5 cm) (Bio-Rad, E.U.A.), acoplada a un cromatgrafo Varian 9000. Los componentes proteicos fueron
eludos de la columna con una velocidad de flujo de 0.7 mL /
min empleando un gradiente lineal de KCl (0-1M) en regulador de fosfatos 0.01 M, pH 7.5.

106

Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

Salvador R. Tello-Sols y Alfonso Arroyo-Reyna

Electroforesis en gel de poliacrilamida. Despus de la

purificacin, la homogeneidad de la enzima, se determin por
electroforesis en gel de poliacrilamida [7] tanto en presencia
como en ausencia de dodecilsulfato de sodio (SDS), en un sistema PhastSystem de Pharmacia.
Actividad proteoltica. Durante las etapas de purificacin la
actividad proteoltica fue rutinariamente ensayada a pH 7.5
por una modificacin del mtodo de Anson [7], usando como
sustrato hemoglobina (Sigma) al 2 % (desnaturalizada por
calentamiento), en un regulador de fosfatos 0.01M, pH 7.5, a
una temperatura de 30 C.
Inhibicin de la subtilisina. Para prevenir la autohidrlisis,
durante los estudios de dicrosmo circular, la accin enzimtica de la subtilisina fue inhibida con fluoruro de fenilmetilsulfonilo (PMSF) 10 mM [8].
Concentracin de protena. Durante las diferentes etapas de
purificacin, la concentracin de protena total fue determinada por el mtodo de Lowry. En los estudios de actividad y
dicrosmo circular, la cantidad de protena fue calculada espectrofoto mtricamente a 280 nm, utilizando la absorbencia
especfica, de 11.7 [9].
Dicrosmo circular. Los espectros de dicrosmo circular (DC)
se obtuvieron en un espectropolarmetro Jasco J-715, equipado con un portacelda rectangular con controlador de temperatura tipo Peltier PTC-348WI y agitacin magntica. La temperatura fue medida en el interior de la celda con la sonda externa del sistema Peltier. Los espectros en la regin del UV lejano (190-240 nm), para el estudio del cambio conformacional
en funcin de la temperatura se realizaron en una celda de recorrido ptico de 1.0 cm. La subtilisina fue disuelta en un regulador de fosfatos 0.01 M, pH 7.5 a una concentracin de 20
g / mL. Los espectros de dicrosmo circular son reportados
como elipticidad por residuo medio ()MWR , la cual fue calculada utilizando una masa molecular de 110 por residuo.
La desnaturalizacin trmica se sigui por el cambio en la
elipticidad a 220 nm. El cambio de temperatura en la muestra
(de 25 a 70 C), controlada con el sistema Peltier, se realiz a
velocidad de calentamiento constante. Se seleccionaron velocidades de calentamiento de 0.5 a 5.0 grad / min (con una precisin de 0.02 grad / min). Las elipticidades observadas
fueron transformadas a fraccin de protena desnaturalizada, fD :
fD =

? ?
D ?

(1)

Donde T es la elipticidad de la muestra a la temperatura

T y N y D son las elipticidades del estado nativo y del estado
desnaturalizado, respectivamente. La reversibilidad de la transicin se estudi, tambin, por el cambio en la elipticidad a
220 nm.

Anlisis de datos
Los datos de elipticidad obtenidos a partir del estudio de la
desnaturalizacin trmica fueron analizados asumiendo un
proceso irreversible de dos estados:
?
?
D

(2)

Donde N es el estado nativo, D el estado desnaturalizado

irreversiblemente y k la constante de velocidad de primer orden la cual obedece la ecuacin de Arrhenius.
Snchez-Ruiz et al. [4] han propuesto varios mtodos
para el anlisis de las curvas calorimtricas basados en el mecanismo anterior. Tres de estos mtodos pueden ser adaptados
a los estudios por dicrosmo circular [10, 11].
El primero relaciona la temperatura media de la curva de
transicin (Tm ) del estado nativo al estado desnaturalizado,
con la velocidad de calentamiento, v:
ln

v
AR
E
= ln

Tm2
E RTm

(3)

donde A es el factor pre-exponencial de la ecuacin de Arrhenius. Por lo que, a partir de un grfico del ln v / Tm 2 en funcin
de, se obtendr una lnea recta con pendiente igual a E / R.
El segundo mtodo relaciona la fraccin de protena en el
estado nativo, fN , (fN + fD = 1), como una funcin de la temperatura segn:
1 E 1 1
ln ln =

f n R Tm T

(4)

Por lo que un grfico de ln (ln (1 / fN )) en funcin de 1/T

dar una pendiente m = E / R, a partir de la cual se podr calcular la energa de activacin del proceso, E.
El tercer mtodo relaciona la fraccin de protena en el
estado nativo, fN , la constante de velocidad de la reaccin, k,
en funcin de la temperatura y la velocidad de calentamiento
v:
d ln f N
k
A
E
= = exp

dT
v
v
RT

(5)

entonces, a partir de un grfico del ln k en funcin de 1/T se

obtendr una lnea recta con pendiente igual a E / R.

Resultados y discusin
Los espectros de DC, a pH 7.5, en la regin del ultravioleta
lejano (190-240 nm) para la subtilisina BPN nativa (25 C) y
la subtilisina BPN desnaturalizada (70 C), por efecto del
aumento de la temperatura, se muestran en la Fig. 1. Los cambios observados son atribuibles a la prdida de estructura se-

Estudio por dicrosmo circular de la desnaturalizacin trmica de la subtilisina BPN...

107

cundaria [10-13]. Adems, se observ que no existe reversibilidad en el proceso de desnaturalizacin trmica (Fig. 1).

1.0

Efecto de la velocidad de calentamiento

en la desnaturalizacin trmica de la subtilisina BPN

0.6

fD

La Fig. 2, muestra las curvas de transicin trmica seguidas a

diferentes velocidades de calentamiento, por monitoreo de la
elipticidad a 220 nm. Como se observa en la Fig. 2, la transicin de la desnaturalizacin fue fuertemente dependiente de la
velocidad de calentamiento, como es de esperarse para un proceso de desplegamiento que se encuentra bajo control cintico, debido a la presencia de una reaccin irreversible [1013]. Asmismo, las muestras que fueron calentadas a temperaturas superiores a 70 C (temperatura a la cual la transicin
haba sido completada) no mostraron reversibilidad de la seal
de DC cuando fueron enfriadas a 25 C.
Desde el punto de vista del carcter irreversible de la
desnaturalizacin trmica de la subtilisina BPN, se analizaron
las curvas de transicin en trminos de un modelo irreversible
simple de dos estados:

0.8

0.4

0.2

0.0

320

325

330

335

340

345

Temperatura (K)

Fig. 2. Curvas de transicin trmica en funcin de la velocidad de

calentamiento, para la subtilisina BPN, a pH 7.5. La fraccin de protena desnaturalizada fD, se calcul como se indica en el texto. El proceso se sigui por monitoreo de la elipticidad a 220 nm. Velocidades
de calentamiento: (n) 0.5 grad / min, () 1.0 grad/min, () 2.0 grad /
min, () 4.0 grad / min y (q) 5 grad / min.

?
?
D

Se utiliz la ecuacin 3 para el anlisis de las curvas de

transicin. En la Fig. 3 se muestra el diagrama de ln v / T m2 en
funcin de 1 / Tm , de la pendiente de la lnea recta resultante
(coeficiente de correlacin 0.99), se obtuvo un valor para la
energa de activacin, E = 339 18 kJ / mol. El factor preexponencial de Arrhenius fue de 1.3 10 54 min1 .
En la Fig. 4 se muestra el diagrama de ln (ln (1 / fN)) en
funcin de 1 / T, para la velocidad de calentamiento de 2 grad
/ min, en donde se obtuvo una lnea recta con pendiente m =
E / R, a partir de la cual se calcul el valor de la energa de

activacin, E. Diagramas similares fueron trazados para las

dems velocidades de calentamiento, obtenindose buenas
relaciones lineales (coeficiente de correlacin de 0.99). El
valor promedio de la energa de activacin, 285 3 kJ mol1 .
En la Fig. 5, se presenta el grfico de ln fN en funcin de
la temperatura absoluta, para calcular los valores de la constante de velocidad, k, ecuacin 5, para una velocidad de calentamiento de 5 grad / min. A partir de los diferentes valores de
k calculados, se construy el diagrama de Arrhenius correspondiente (Fig. 6) y se determin la energa de activacin del
proceso de desnaturalizacin (tercer mtodo). Diagramas similares fueron trazados para las dems velocidades de calentamiento, obtenindose buenas relaciones lineales (coeficiente
de correlacin de 0.99). El valor promedio de la energa de
activacin, 266 11 kJ mol1 . Por lo tanto, se observa una
concordancia entre los tres mtodos utilizados para calcular la
energa de activacin, de la desnaturalizacin trmica de la
subtilisina BPN, a pH 7.5.
El valor promedio para la energa de activacin (E = 297
kJ / mol) del desplegamiento trmico de la subtilisina BPN,
determinado en este trabajo, es del mismo orden del valor
promedio reportado para el desplegamiento trmico de enzimas proteolticas de masa molecular semejante a la subtilisina
BPN (27.5 kDa), como son: actinidina (27.5 kDa, E = 217 kJ
/ mol) [12] y bromelana (25.8 kDa, E = 206 kJ / mol) [13].

Conclusin
Fig. 1. Espectros de dicrosmo circular en funcin de la temperatura
de la subtilisina BPN a pH 7.5. () enzima nativa a 25 C, (.-.-)
enzima desnaturalizada a 70 C y (. . .) enzima desnaturalizada, enfriamiento a 25 C.

La desnaturalizacin trmica de la subtilisina BPN a pH 7.5,

est bajo control cintico y sigue un modelo irreversible de
dos estados.

108

Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

Salvador R. Tello-Sols y Alfonso Arroyo-Reyna

1.5

-10.0
1.0

-10.5

0.5

ln k

ln (v/(Tm) )

0.0

-11.0
-0.5

-1.0

-11.5

-1.5

-12.0
-2.0

-12.5
296

-2.5
294

297

298

299

300

301

302

Fig. 3. Diagrama de ln v /
BPN a pH 7.5.

298

300

302

304

306

10 /Tm (1/K)

Tm2

296

10 /T (1/K)

en funcin de 1 / Tm para la subtilisina

Fig. 6. Diagrama de Arrhenius para la curva de transicin correspondiente a una velocidad de calentamiento de 5 grad / min. Las constantes de velocidad fueron calculadas a partir de la ecuacin 5 (Fig. 5).

Referencias
0.5

ln (ln 1/f N)

0.0

-0.5

-1.0

-1.5

-2.0
296

298

300

302

304

306

10 /T (1/K)

Fig. 4. Diagrama de ln (ln 1 / T) en funcin de 1 / T. Velocidad de

calentamiento 2 grad / min.

-1

-2

ln fN

-3

-4

-5

-6

-7
328

330

332

334

336

338

340

342

Temperatura (K)

Fig. 5. Diagrama de ln fN en funcin de la temperatura absoluta, para

calcular las constantes de velocidad segn la ecuacin 5. Velocidad
de calentamiento 5 grad / min.

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Revista de la Sociedad Qumica de Mxico, Vol. 46, Nm. 2 (2002) 109-114

Investigacin

Calores isostricos de adsorcin de CO 2 en zeolitas naturales mexicanas

Rosario Hernndez-Huesca,* Gelacio Aguilar-Armenta
Centro de Investigacin de la Facultad de Ciencias Qumicas, Benemrita Universidad Autnoma de Puebla, Boul. 14 Sur y Av.
San Claudio, Ciudad Universitaria, Puebla 72570, Pue. Mxico. Tel.: (2) 2 29-5500 Ext. 7383; Fax: (2) 2 295-584;
E-mail: [email protected]
Recibido el 7 de diciembre del 2001; aceptado el 2 de mayo del 2002
Resumen. Se estudi la capacidad que presentan las zeolitas naturales mexicanas erionita (ZAPS), mordenita (ZNT) y clinoptilolita
(ZN-19), de adsorber CO2 a t 27 C. La medicin de las isotermas
de adsorcin se realiz en un sistema volumtrico de alto vaco, construido en vidrio Pyrex y equipado con vlvulas libres de grasa. Se estableci que en la erionita, el CO2 se adsorbe en mayores cantidades
que en la mordenita y la clinoptilolita, debido a que la primera posee
una densidad catinica y volumen de microporo mayor que las otras
dos muestras. La muestra ZAPS present el mayor de los calores
isostricos de adsorcin total, debido a que esta muestra puede poseer
una heterogeneidad energtica superficial mayor que las otras muestras. Las muestras ZAPS, ZNT y ZN-19 provienen de yacimientos
ubicados en los estados de Sonora, Tamaulipas y San Luis Potos,
respectivamente.
Palabras clave: Adsorcin, CO2, zeolitas naturales, calor isostrico.

Abstract. In this work, the adsorption equilibrium isotherms of CO2

in Mexican natural zeolites erionite (ZAPS), mordenite (ZNT) and
clinoptilolite (ZN-19) have been measured at t 27 C using a glass
high-vacuum volumetric system, equipped with grease-free valves.
The amount of adsorbed CO2 was greater on ZAPS than on ZNT and
ZN-19 because the cationic density and micropore volume of erionite
are greater than those of mordenite and clinoptilolite. The adsorption
isosteric heat for ZAPS sample was greater than for the other two
zeolites because the higher surface energetic heterogeneity of ZAPS
sample. The ZAPS, ZNT and ZN-19 are samples from deposits of
Sonora, Tamaulipas and San Luis Potos, respectively.
Keywords: Adsorption, CO2, natural zeolites, isosteric heat.

Introduccin

tamao, as como de la distribucin de sitios de adsorcin de

diferente naturaleza qumica (polaridad) dentro de los poros.
La heterogeneidad energtica de un adsorbente peletizado puede incrementarse en presencia de un material aglutinante, aunque el adsorbente sea homogneo energticamente [6].
El modelo de los efectos trmicos que acompaan los ciclos de adsorcin-desorcin requieren un balance de energa
basado en los calores de adsorcin de los componentes individuales de la mezcla. La medicin experimental de estos parmetros es muy difcil [4], por lo cual, los calores de adsorcin
de los gases puros son usualmente obtenidos a partir de las
isotermas de adsorcin mediante la ecuacin de Clapeyron.
Los valores de calores isostricos as obtenidos seran poco
confiables si no se tomaran precauciones extremas para asegurar la reversibilidad y reproducibilidad de las mediciones.
En este trabajo se reportan resultados de un estudio sobre
la capacidad que presentan algunas zeolitas naturales mexicanas de adsorber CO2 a diferentes temperaturas, adems se evalan los calores isostricos de la adsorcin de CO2 , calculados
a partir de las isotermas de adsorcin mediante la ecuacin de
Claussius Clapeyron, con el fin de obtener informacin sobre
las caractersticas energticas de la superficie del adsorbente.
Las muestras de erionita (ZAPS), mordenita (ZNT) y clinoptilolita (ZN-19), provienen de yacimientos ubicados en los
estados de Sonora, Tamaulipas y San Luis Potos, respectivamente.

El estudio energtico del proceso de la adsorcin de un gas, es

una etapa obligada para conocer el comportamiento de un
absorbente en los procesos cclicos de separacin de mezclas
gaseosas. En este sentido, el calor isostrico de adsorcin de
los componentes de una mezcla de gases, es una variable importante para describir el proceso de adsorcin [1] y es la
clave para desarrollar un proceso de separacin de gases, tal
como el proceso de vaivn de presin (PSA) [2, 3]. El proceso
de optimizacin de la unidades de PSA para la separacin de
mezclas de gases se basa en los datos experimentales en el
equilibrio de la cantidad de sustancia adsorbida as como la
selectividad en funcin de la presin, temperatura y composicin [4].
Los calores de adsorcin han sido considerados como un
indicador de la heterogeneidad energtica de un adsorbente en
la adsorcin. Para un adsorbente con superficie energtica mente homognea, el calor isostrico de adsorcin de un gas
puro no depende de la cantidad de adsorbato. Sin embargo, el
calor isostrico de adsorcin disminuye con el incremento de
la cantidad de sustancia adsorbida, cuando el adsorbente es
energticamente heterogneo y puede incrementarse al aumentar la cantidad de adsorbato, cuando existen fuertes interacciones laterales entre las molculas adsorbidas [5].
La heterogeneidad energtica de un adsorbente depende
de la distribucin de micro y mesoporos de diferente forma y

110

Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

3.0

2.0

1.5

(mmol/g)

2.5

1.0

0.5

0.0
0

50

100

150

200

P
(Torr)

Fig. 1. Isotermas de adsorcin de CO2 en (l)ZAPS, (n)ZNT, (t)

ZN-19 y (*) CG a 27 C.

Parte experimental
La adsorcin del CO2 se midi en un sistema volumtrico al
alto vaco, equipado con vlvulas libres de grasa. El vaco previo (1 10 2 Torr) fue creado por una bomba convencional y
el alto vaco (1 10 7 Torr) por una bomba turbomolecular
(Balzers). Las muestras zeolticas fueron activadas in situ a
300 C en un horno no programable, hasta alcanzar presiones
residuales del orden de 104 Torr. Las presiones de los gases
en el sistema volumtrico se midieron digitalmente por un
transductor de presin APR-010 (Balzers) y el alto vaco por
un transductor TPR-017 (Balzers). Las temperaturas de
medicin fueron controladas por un ultratermostato (Haake L)
con una precisin de 0.2 C, excepto la temperatura de 0 C,
la cual fue controlada por un bao de hielo flotante.

Resultados y discusin
Adsorcin de CO2
En este trabajo no se incluyen las isotermas de adsorcin de
CO 2 a 17 C de las tres muestras zeolticas naturales, ya que
stas han sido reportadas en un trabajo anterior [7]. En la Fig.
1 se presentan las isotermas de adsorcin de CO2 a 27 C. Con
fines de comparacin en esta figura se incluye tambin la isoterma de adsorcin en carbn activado CG. Se observa que las
isotermas de adsorcin para las tres muestras zeolticas aumentan bruscamente a bajas presiones de equilibrio, lo cual
podra obedecer a dos factores: a) las molculas de CO2 penetran libremente, es decir, sin dificultades estricas, a travs de
las ventanas de entrada hacia los microporos; y b) el CO 2 interacciona especficamente con determinados centros de adsorcin presentes en la estructura microporosa de las zeolitas.
Al tomar en cuenta que la erionita (ZAPS), mordenita
(ZNT) y clinoptilolita (ZN-19) adsorben molculas con dimetro cintico () no mayor que 4.3, 3.9 y 3.5 respectivamente [8], y que (CO2 ) = 3.3 , es obvio que el proceso de
la adsorcin de este gas no est limitado por el factor estrico.

Rosario Hernndez-Huesca y Gelacio Aguilar Armenta

A diferencia de las isotermas de adsorcin del CO2 en las

zeolitas, la isoterma obtenida en carbn activado CG no presenta el salto brusco en la zona inicial, ni tampoco una zona
de saturacin a bajas presiones de equilibrio.
De lo anterior se deduce que las tres zeolitas naturales presentan una alta capacidad de adsorcin del CO2, aunque considerablemente ms alta para ZAPS, que para las otras dos, conservndose esta propiedad a presiones bajas o grados de cobertura pequeos; se observa, adems, que las capacidades de
adsorcin de ZNT y ZN-19 son muy parecidas, es decir, la
capacidad que presentan las zeolitas de adsorber CO2 , en todo
el intervalo de presiones de equilibrio estudiado, disminuye en
el orden (ZAPS) > (ZNT) (ZN-19). A diferencia de las zeolitas, la superficie del carbn activado es prcticamente no polar,
provocando que su capacidad de adsorber CO2 sea inferior a la
de las zeolitas, especialmente a bajas presiones de equilibrio, a
pesar de que el carbn activado CG tambin es un adsorbente
microporoso y con una superficie especfica y volumen de
microporo superiores a los de las zeolitas (Tabla 1).
El hecho de que la capacidad que presentan las zeolitas de
adsorber CO 2 en todo el intervalo de presiones de equilibrio
estudiado, disminuya en el orden (ZAPS) > (ZNT) (ZN-19),
est relacionado con dos propiedades: 1) nmero de cationes
disponibles por unidad de masa de las zeolitas deshidratadas
(densidad catinica) y 2) volumen lmite de microporo. La
cantidad de CO2 adsorbida a bajas presiones de equilibrio
(pequeos grados de cobertura) es directamente proporcional
a la primera propiedad, mientras que a presiones altas (grandes grados de cobertura) juega un papel determinante el volumen de microporo. La cantidad de cationes, los cuales representan los centros activos especficos para la adsorcin de
las molculas del CO2 , depende de la relacin Si / Al. As, por
ejemplo, para zeolitas naturales se sabe [8] que el valor de la
relacin Si / Al se encuentra entre los siguientes lmites; erionita: 2.9 Si / Al 3.7; mordenita: 4.17 Si / Al 5.0 y
clinoptilolita: 4.25 Si / Al 5.25. Es decir, a presiones bajas
la adsorcin en la erionita (ZAPS) es mayor porque hay
mayor cantidad de Al, y por lo tanto mayor densidad catinica, que en las otras dos muestras. Por otro lado, la semejanza
observada entre las capacidades de adsorcin de la mordenita
y clinoptilolita en todo el intervalo de presin de equilibrio
estudiado, se puede atribuir a que la relacin Si / Al, as como
el volumen de microporo (Tabla 1), de estas zeolitas son muy
semejantes.
Adsorcin irreversible de CO2
Para encontrar la cantidad de CO2 adsorbida irreversiblemente, en las zeolitas vrgenes, es decir, recin activadas
trmicamente al alto vaco, se obtuvo la isoterma de adsorcin
a una temperatura dada e inmediatamente despus, a esa
misma temperatura, el adsorbente se someti a evacuacin
hasta alcanzar una presin residual P < 6 10 4 Torr. Una vez
terminada esta etapa, se realiz nuevamente la medicin de la
isoterma de adsorcin. La diferencia entre la primera (total) y
segunda (reversible) isotermas representa la cantidad de CO2
adsorbido irreversiblemente, es decir, aquella cantidad de

Calores isostricos de adsorcin de CO2 en zeolitas naturales mexicanas

3.0

2.0

1.5

(mmol/g)

2.5

1.0

0.5

0.0
0

50

100

150

200 (Torr)

Fig. 2. Adsorcin total (smbolos llenos) y reversible (smbolos

vacos) de CO2 en () ZAPS, (n) ZNT, () ZN-19 y a 27 C.
40
35
30

(kJ/mol)

adsorbato que no fue posible desorber a la temperatura experimental dada. En la Fig. 2 se observa que las tres muestras presentan una adsorcin irreversible del CO2 . La cantidad relativa
de CO 2 adsorbido irreversiblemente a 50 Torr disminuye en la
secuencia: ZN-19 (17 %) > ZNT (9 %) > ZAPS (5.8 %). Para
P > 50 Torr la proporcin de CO2 adsorbido irreversiblemente
para cada muestra permaneci constante. Se evalu, asimismo, la adsorcin irreversible a una presin de 0.4 Torr, establecindose la secuencia: ZN-19 (31 %) > ZAPS (14 %) >>
ZNT ( 0 %).
Como puede observarse, a presiones bajas (0.4 Torr), la
proporcin de la adsorcin irreversible aumenta para ZN-19 y
ZAPS, pero para ZNT prcticamente desaparece. El hecho de
que la adsorcin irreversible relativamente sea mayor a presiones bajas, es decir, a pequeos grados de cobertura, puede
obedecer a que las molculas de CO2 ocupen los centros de
adsorcin (determinados cationes) ms activos, lo que conduce a que sea ms difcil desorberlas. Esta fuerte interaccin
entre las molculas de CO 2 y los cationes presentes en la
estructura de las zeolitas, es mucho mayor para ZN-19 que para las otras dos muestras.

111

Q iso

Calores Isostricos de la adsorcin total de CO2

La determinacin del calor isostrico de adsorcin se hizo, a
partir de las isotermas de adsorcin a 17 C y 27 C, aplicando
la ecuacin de Claussius-Clapeyron:

25
20
15
10
5

(mmol/g)

2.0

40
35
30
(kJ/mol)

De acuerdo con los resultados obtenidos (Fig. 3), la caracterstica comn de las tres muestras consiste en que el calor
isostrico de adsorcin se incrementa al aumentar la cantidad
de sustancia adsorbida, es decir, existe una fuerte interaccin
adsorbato-adsorbato. En esta figura se observa que para ZN19 y ZNT se obtiene un comportamiento muy similar, en cambio para ZAPS la curva Q iso = f(a) presenta dos mximos. Se
observa tambin, que el aumento de la adsorcin provoca un
incremento del calor isostrico ms marcado para ZNT y ZN19 que para ZAPS. Estos resultados probablemente obedezcan
a que ZAPS puede poseer una heterogeneidad energtica
mayor que las dos primeras, compensndose en mayor grado
para esta muestra los dos factores siguientes: a) heterogeneidad energtica (interacciones adsorbente-adsorbato) que conduce a la disminucin del calor de adsorcin; b) interacciones
adsorbato-adsorbato, que conducen al aumento del calor de
adsorcin.
Por otro lado, el hecho de que el calor isostrico de adsorcin (Fig. 3) en ZN-19 permanezca prcticamente invariable
en la regin de 0.3 a 1.0 mmol / g, probablemente est obedeciendo a la ocupacin, en esa regin, de centros de adsorcin
de bajo potencial de adsorcin; probablemente ya se hayan
ocupado para a < 0.3 mmol / g los centros de adsorcin ms
activos. Este razonamiento puede estar soportado por el hecho
de que precisamente ZN-19 es la que presenta mayor proporcin de adsorcin irreversible. Desafortunadamente, para va-

1.0

Fig. 3. Calores isostricos de la adsorcin total de CO2 a partir de las

isotermas a 17 y 27 C en (l)ZAPS, (o)ZNT y ()ZN-19.

Q iso

H = Qiso = R[(T2T1 ) (T2 T1 )] ln ( P2 P1 )

0.0

25
20
15
10
5

0
0.0

1.0

2.0

3.0

(mmol/g)

Fig. 4. Calores isostricos de la adsorcin total de CO2 a partir de las

isotermas a 0 y 20 C en (l)ZAPS, (o)ZNT y (t)ZN-19.
Tabla 1. Superficie especfica (S, m2 / g) y volumen de microporo
(V0, cm3 / g) de los adsorbentes en estudio. Modelo: Langmuir (N2,
75.5 K).
Muestra

V0

ZAPS
ZNT
ZN-19*
CG

509
325

688

0.1876
0.1186
0.1078
0.2484

* V0 por adsorcin de H2O (T = amb.)

Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

Rosario Hernndez-Huesca y Gelacio Aguilar Armenta

40

40

35

35

30

30

Q iso (kJ/mol)

Q iso

(kJ/mol)

112

25
20
15
10

20
15
10

0
0.0

1.0

2.0

3.0

(mmol/g)

(mmol/gr)
0.0

Fig. 5. Calores isostricos de la adsorcin total (l) y reversible ()

de CO2 en ZAPS a partir de las isotermas a 17 y 27 C.

40

35

35

30

30

20

(kJ/mol)

40

15

25

10

0.5

1.0

1.5

2.0

Fig. 7. Calores isostricos de la adsorcin total (n) y reversible (o)

de CO2 en ZNT a partir de las isotermas a 0 y 20 C.

Q iso

Q iso (kJ/mol)

25

25
20
15
10

0
0.0

0.5

1.0

1.5

(mmol/g)
2.0

0
0.0

0.5

1.0

1.5

(mmol/gr)
2.0

Fig. 6. Calores isostricos de la adsorcin total (t) y reversible ()

de CO2 en ZN-19 a partir de las isotermas a 17 y 27 C.

Fig. 8. Calores isostricos de la adsorcin total (t) y reversible ()

de CO2 en ZN-19 a partir de las isotermas a 0 y 20 C.

lores de a < 0.3 mmol / g, que corresponden a la adsorcin irreversible en las tres muestras y, por lo tanto, donde se debera haber observado una disminucin drstica del calor de adsorcin, este no se pudo evaluar con una exactitud aceptable.
Con el fin de comparar estos resultados, se midieron los
calores isostricos a partir de las isotermas a 0 y 20 C (Fig.
4), observndose un comportamiento muy similar al anterior.
Sin embargo, estas curvas presentan una disminucin inicial
(para valores de a < 0.3) para las tres muestras, debido a las
interacciones adsorbato-adsorbente y, posteriormente, un
incremento a medida que aumenta la cantidad de sustancia
adsorbida y por lo tanto la aparicin de las interacciones
adsorbato-adsorbato.
En la Tabla 2 se presentan los valores de la constante de
Henry, calculados a partir de las isotermas de adsorcin de
CO 2 mediante la ecuacin o isoterma de Henry a bajos grados
de cobertura. Cabe mencionar que la muestra ZN-19 presenta
el mayor valor en la constante de Henry para la adsorcin total
a 0 y 20 C, lo que confirma que es esta muestra la que presenta mayores interacciones adsorbato-adsorbente, tal como se
puso de manifiesto al estudiar la adsorcin irreversible y es
por tanto la que presenta una mayor disminucin en el calor
isostrico de adsorcin a bajas presiones de equilibrio (Fig. 4).

Calores Isostricos de la adsorcin reversible de CO2

El objetivo de este estudio consisti en evaluar la influencia
de la adsorcin irreversible en las propiedades energticas del
proceso de adsorcin. A diferencia de la medicin del calor
isostrico de la adsorcin total, ahora se determina el calor de
adsorcin en las muestras que contenan previamente molculas de CO2 adsorbidas irreversiblemente. Los resultados (Figs.
5 y 6) revelan que la cantidad preadsorbida irreversiblemente
influye en el comportamiento de la curva Q iso = f(a). Es interesante observar de las figuras que los calores isostricos de la
adsorcin reversible, a una determinada cantidad de CO2
adsorbido, adquieren valores ms altos que los de la adsorcin
total (reversible + irreversible). El aumento del calor isostrico de la adsorcin reversible, respecto al de la adsorcin total,
probablemente obedezca a que los cuadrupolos ( O-CC++-O )
de la molcula preadsorbida y el de la molcula que proviene
desde la fase gaseosa se orientan favorablemente entre s,
provocando el surgimiento de fuerzas electrostticas de atraccin, es decir, surgen mayores interacciones adsorbato-adsorbato. Adems, si tenemos en cuenta que la superficie ya est
cubierta por una capa de adsorbato (superficie ms homognea), es muy probable que en este proceso las interacciones
adsorbato-absorbente disminuyan considerablemente, lo cual
puede estar soportado por el hecho de que la constante de
Henry para la adsorcin reversible de CO2 a 17 y 27 C en

Calores isostricos de adsorcin de CO2 en zeolitas naturales mexicanas

113

Tabla 2. Valores de la constantes de Henry para la adsorcin de CO2.

Muestra

0C

ZAPS
ZNT
ZN-19

17C

20C

27C

Total

Rev

Total

Rev

Total

Rev

Total

Rev

0.221
0.354
0.417

0.333
0.399

0.148
0.167
0.174

0.108
0.139
0.149

0.206
0.400
0.490

0.306
0.421

0.137
0.159
0.168

0.127
0.138
0.149

1.8

35

1.6

30
25

Q iso (kJ/mol)

a (mmol/g)

1.4
1.2
1.0
0.8
0.6

20
15
10

0.4
5

0.2
0.0
0

100

200

P
300 (Torr)

0
0.0

0.4

0.8

1.2

(mmol/g)

Fig. 9. Isotermas de adsorcin total (l) y reversible () de CO2 en

CG a 17 C.

Fig. 10. Calores isostricos de la adsorcin total (l) y reversible ()

de CO2 en carbn activado CG a partir de las isotermas a 17 y 27 C.

estas muestras disminuye aproximadamente en un 15 % en

promedio con respecto a la adsorcin total. Estos dos fenmenos, por tanto, conducen a un aumento del calor isostrico
de la adsorcin reversible.
Es interesante observar de la Fig. 5, que el calor isostrico
de la adsorcin reversible en ZAPS prcticamente permanece
constante. Es decir, las molculas adsorbidas irreversiblemente hicieron a la superficie ms homognea energticamente.
En las Figs. 7 y 8 se muestran los resultados obtenidos a 0
y 20 C para la mordenita y clinoptilolita, respectivamente. En
ninguna de las dos muestras se observa la disminucin inicial
del calor isostrico de la adsorcin reversible, como es el caso
de la adsorcin total, debido a que en esta ltima predominan
las interacciones adsorbente-adsorbato, mientras que en la
adsorcin reversible no pueden participar los centros de adsorcin ms activos, ya que stos se encuentran ocupados previamente por las molculas adsorbidas irreversiblemente; este
hecho se pone de manifiesto con la disminucin de los valores
de la constante de Henry para la adsorcin reversible de CO2 a
0 y 20 C en estas muestras, con respecto a la adsorcin total
(Tabla 2).

centros activos para la adsorcin del CO2 . Por otro lado, el

hecho de que el carbn activado CG presente menor capacidad de adsorber CO2 que las zeolitas (Fig. 1), probablemente
obedezca a que la cantidad de los centros activos de adsorcin
por unidad de superficie (concentracin superficial de los centros activos) en el carbn CG sea menor que en las zeolitas.
En la Fig. 10 se presenta el calor isostrico de adsorcin
total y reversible de CO2 en CG en funcin de la cantidad de
sustancia adsorbida. A diferencia de lo observado para las
zeolitas, el calor isostrico de la adsorcin reversible adquiere
valores inferiores a los de la adsorcin total. Es evidente que
la superficie del carbn es ms homognea energticamente
que la de las zeolitas, ya que el calor isostrico de la adsorcin
total en CG no presenta extremos de la funcin Q iso = f(a),
observndose una leve y paulatina disminucin al aumentar la
cantidad de sustancia absorbida. Por otro lado, el hecho de
que los valores de los calores isostricos de la adsorcin reversible sean menores que los de la adsorcin total puede obedecer a que la concentracin superficial de centros de adsorcin es muy baja en comparacin con la de las zeolitas. El
calor isostrico de la adsorcin reversible permanece prcticamente constante al inicio y, al aumentar la cantidad de sustancia adsorbida aparece un aumento por las interacciones adsorbato-adsorbato, pero este aumento no es tan brusco como en el
caso de las zeolitas.

Adsorcin de CO2 en carbn activado CG

En la discusin de la Fig. 1 se compar la capacidad que presenta el carbn activado CG de adsorber CO2 con la de las
zeolitas. El estudio de la adsorcin reversible del CO2 en CG
(Fig. 9) revel que existe una cantidad de adsorcin irreversible proporcionalmente casi igual a la registrada para las
zeolitas. Este hecho experimental puede obedecer a la existencia en la superficie del carbn de centros activos de adsorcin
con los cuales la molcula de CO2 interacciona fuertemente.
Se sabe que en los carbones activados existen grupos superficiales de oxigeno [9], por lo que estos pueden servir como

Conclusiones
Se estableci que el CO2 en la erionita se adsorbe en mayores
cantidades que en la mordenita y la clinoptilolita, debido a que
la primera posee una densidad catinica y volumen de microporo mayor que las otras dos muestras. El hecho de que el car-

114

Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

bn activado CG presente menor capacidad de adsorber CO2

que las zeolitas, probablemente est obedeciendo a que la cantidad de los centros activos de adsorcin por la unidad de
superficie en el carbn CG sea menor que en las zeolitas. La
muestra ZAPS present el mayor de los calores isostricos de
adsorcin total, debido probablemente, a que esta muestra
puede poseer una heterogeneidad energtica mayor que las
otras muestras. Los calores isostricos de la adsorcin reversible en las zeolitas incrementan con respecto a los calores de
la adsorcin total, debido a que en este caso se han reducido
las interacciones adsorbato-adsorbente y por tanto predominan
las interacciones adsorbato-adsorbato.

Rosario Hernndez-Huesca y Gelacio Aguilar Armenta

Referencias
1. Sircar, S.; Mohr, R.; Ristic, C.; Rao, M.B. J. Phys. Chem. B,
1999, 103, 6539-6541.
2. Sircar, S.; Pressure Swing Adsorptions Research Needs in
Industry. In: "Fundamentals of Adsorption, Proceedings of Engineering Foundation Conference held at Sonthofen", Germany;
Mersmann, A. B., et al., Eds., Engineering Foundation: New
York, 1991, 815.
3. Hartzog, D. G.; Sircar, S. Adsorption, 1995, 1, 133.
4. Siperstein, F.; Gorte, R.J.; Myers, A. L. Langmuir, 1999, 15,
1570-1576.
5. Sircar, S.; Rao, M.B., in: Surfaces of Nanoparticles in Porous
Materials, Schwarz, J.A.; Contescu, C., Ed., Marcel and Dekker,
New York, 1999.
6. Cao, D.V.; Sircar, S. Ind. Eng. Chem. Res. 2001, 40, 156.
7. Hernndez-Huesca R.; Daz L.; Aguilar-Armenta G. Separation
and Purification Technology. 1999, 15, 163-173.
8. Breck, D.W., Zeolite Molecular Sieves. Wiley-Interscience Publication. New York, 1974.
9. Molina-Sabio, M.; Muecas-Vidal, M.A.; Rodrguez-Reinoso F.,
in: Characterization of Porous Solids II (1992), p. 329-339.
Procedings of the IUPAC Symposium (COPS II), Alicante,
Spain. Elsevier Science Publishers, 1990.

Revista de la Sociedad Qumica de Mxico, Vol. 46, Nm. 2 (2002) 115-119

Investigacin

Estudio de la composicin qumica del aceite cclico ligero

proveniente de crudos mexicanos
Georgina C. Laredo,* Yolanda Figueroa, Jos Luis Cano, Ma. Teresa Mares y Jess Castillo
Instituto Mexicano del Petrleo. Programa de Tratamiento de Crudo Maya. Eje Central Lzaro Crdenas 152.
Col. San Bartolo Atepehuacan. Mxico 07730, D.F. Tel: 011-(55)-3003 6615; E-mail: [email protected]
Recibido el 21 de enero del 2002; aceptado el 16 de mayo del 2002
Resumen. Con el objetivo de encontrar nuevas aplicaciones y/o formas de procesamiento para el aceite cclico ligero (ACL) que es un
producto de la desintegracin cataltica que usualmente era empleado
como componente de la carga a hidrotratamiento para la produccin
de diesel, se obtuvo la distribucin qumica a lo largo de la curva de
destilacin. Se presenta tambin la distribucin qumica y la caracterizacin completa de seis muestras diferentes de aceite cclico ligero
provenientes de refineras mexicanas. Para lograr este objetivo se
desarroll un nuevo mtodo de anlisis cuantitativo utilizando cromatografa lquida de alta eficiencia (CLAE).
Palabras clave: Diesel, petrleo, aceite cclico ligero (ACL), destilados medios, compuestos aromticos, cromatografa lquida de alta
eficiencia (CLAE).

Abstract. In order to find suitable applications and / or to develop

new methods for processing light cycle oil (LCO), a product of Fluid
Catalytic Cracking, which was formerly used as a feedstock for diesel
fuel production, its chemical compound distribution along the distillation curve was obtained. Additionally, the distribution of chemical
compound for six different light cycle oils from several Mexican
sources and a complete physical and chemical characterization of the
samples were also presented. In order to get a reliable evaluation, a
new quantitative liquid chromatographic (HPLC) method was developed.
Keywords: Diesel, petroleum, light cycle oil (LCO), middle distillates, aromatic, high performance liquid chromatography (HPLC).

Introduccin

ligero en la literatura [4-12]. El contenido de azufre, nitrgeno

y aromticos, as como el ndice y/o el nmero de cetano, son
factores claves para determinar su factibilidad de procesa miento, y por lo tanto, su valor como combustible. El contenido de compuestos de azufre en estas muestras va desde 0.16
hasta 2.91 % en peso. El nitrgeno total y el nitrgeno bsico,
van de 17 y 30 hasta 1260 y 185 ppm respectivamente. El contenido de compuestos aromticos obtenido mediante el mtodo
FIA flucta entre 37 y 74 % (en volumen), aunque Danaher
[5] reporta un aceite cclico ligero con un contenido de 82 %
(en peso) obtenido mediante la tcnica de CLAE. Como consecuencia del alto contenido de compuestos aromticos, el
ndice y/o el nmero de cetano de todas estas muestras es muy
bajo, entre 20 y 29.
Erwin [8] lleva a cabo la caracterizacin por tipo de compuesto presentes en determinado intervalo de destilacin, utilizando para ello espectrometra de ultravioleta (UV) (Fig. 1).
Este estudio lo realiza con el fin de conocer la calidad de la
ignicin y la generacin de partculas de los combustibles
atribuidos a este producto. Como puede verse en esta figura, el
contenido de compuestos monoaromticos va disminuyendo
conforme se incrementa la temperatura de ebullicin, el contenido de compuestos diaromticos presenta un mximo a 282
C y el contenido de compuestos poliaromticos se comienza a
incrementar a partir de los 280 C. El contenido de compuestos saturados se mantiene entre el 40 y el 60 %.

En Mxico, el predominio del crudo Maya (48 % de los 49775

millones de barriles al 1 de Enero de 1996) [1] caracterizado
por tener altas concentraciones de compuestos azufrados, nitrogenados y aromticos, ha incrementado la necesidad de
disponer de mejores tecnologas de procesamiento para la
obtencin de combustibles que cumplan en forma satisfactoria
con las demandas ambientales [2]. De acuerdo con las especificaciones de diciembre de 1999 de la Environmental Protection Agency (EPA), el combustible diesel que pretenda ser
certificado deba tener un contenido de poliaromticos menor
al 11 % en volumen, menos de 350 ppm de azufre en peso y
un nmero de cetano mnimo de 51 [2]. El alto contenido de
compuestos de azufre, nitrgeno y sobre todo de aromticos
del aceite cclico ligero (ACL)[3] ha ocasionado que su empleo como componente para la produccin de diesel en Mxico, se vea restringido, y que, mientras no se implementen
modificaciones en el proceso de hidrotratamiento, la prepa racin de este combustible va de depender mayormente del
procesamiento de gasleo ligero primario, cuyos contenidos
de azufre, nitrgeno y aromticos son mucho ms bajos. Esto
ha trado como consecuencia que la utilidad del aceite cclico
ligero y por lo tanto, potencial econmico como combustible
se haya visto reducido.
Como puede verse en la Tabla 1, es factible encontrar una
buena cantidad de trabajo de caracterizacin de aceite cclico

116

Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

Georgina C. Laredo et al.

70
100%

Distribucin de Compuestos, %p

60

50
40
30
20
10

0
200

220

240

260

280

300

320

340

360

Temperatura T50 %, C

Fig. 1. Composicin Qumica del Aceite Cclico Ligero contra Temperatura de Ebullicin de acuerdo con Erwin [8]. Saturados (u), monoaromticos (n), diaromticos (p), poliaromticos (l).

Entre estos resultados, el nico aceite cclico proveniente

de crudos mexicanos que ha sido caracterizado es el reportado
por Ancheyta y colaboradores [12]. Es necesario un estudio
completo dadas las caractersticas del crudo mexicano, particularmente del crudo maya, y del efecto de estas caractersticas en los productos de la desintegracin cataltica.
El objetivo de este trabajo es presentar el estudio de seis
muestras de aceite cclico ligero derivados de crudos mexicanos. En el caso particular del aceite cclico ligero proveniente de la refinera de Tula, se obtuvo la composicin a lo
largo del intervalo total de destilacin, mediante un fraccionamiento cada 25 C, similar al efectuado por Erwin [8].
Finalmente, para obtener resultados confiables fue necesario el desarrollar una tcnica de anlisis cuantitativo ya que
las tcnicas empleadas para estas caracterizaciones usualmente son ultravioleta UV, espectrometra de masas (EM) y
solo recientemente cromatografa lquida de alta eficiencia
(CLAE).

Parte experimental
Caracterizacin de los aceites cclicos ligeros. En la Tabla 2
se presentan las tcnicas empleadas para la caracterizacin
fsica y qumica de cada una de las muestras.
Obtencin de las fracciones del destilado. El aceite cclico
ligero proveniente de Tula, se someti a destilacin TBP mediante la tcnica ASTM D-2892, que implica un equipo Older
Shaw de 2 pulgadas de dimetro interno y 15 etapas tericas,
separndose las fracciones cada 25 C.
Anlisis cromatogrfico. Las muestras de aceite cclico
ligero estudiadas y las fracciones obtenidas fueron caracterizadas mediante un cromatgrafo de lquidos de alta resolucin
WATERS modelo 600E, con base en un mtodo desarrollado
a partir de modificaciones a las normas ASTM D-2549 e IP391-90. Una cantidad reproducible de muestra seca diluida en
heptano es inyectada a un cromatgrafo de lquidos utilizando
heptano como fase mvil a una velocidad de flujo de 1 mL /

80%

Polares
60%

Poliaromaticos
Diaromaticos

40%

Monoaromaticos
20%

Saturados

0%

Tula

Cd.
Madero

Salina Cruz Cadereyta Salamanca

Minatitln

Fig. 2. Distribucin por tipo de compuestos de muestras de aceite

cclico ligero proveniente de las refineras de PEMEX.

min, previamente desgasificado con helio y una columna de

m-Bondapack-NH 2 de 3.9 300 mm (WATERS, 84040)
como fase estacionaria. Se permite la elucin de los compuestos aromticos hasta la aparicin de fluoranteno. Una vez
detectado este, se invierte el flujo para permitir la salida de los
compuestos polares. La columna esta conectada en serie a un
detector de ultravioleta visible (WATERS modelo 996) ajustado a 254 nm y a un detector de ndice de refraccin (WATERS modelo 410). El anlisis cuantitativo se desarrollo mediante la correlacin de las reas empleando estndares de
compuestos aromticos comerciales.

Resultados y discusin
Muestras de ACL Completas. La caracterizacin completa de
las muestras de aceite cclico ligero provenientes de diferentes
refineras se puede ver en la Tabla 3. El contenido de azufre
en las muestras de aceite cclico ligero de las diferentes refineras estuvo entre el 2.14 y el 3.52 % peso, y en todos los casos es mayor al de los aceites cclicos ligeros reportados en la
literatura [4-12]. El contenido de nitrgeno total y de nitrgeno bsico va desde 445 y 38 para los ms bajos hasta 972 y
230 respectivamente y se encuentra en un rango de valores similar al reportado en la literatura [4-12]. El contenido de aromticos en todas las muestras es de alrededor 70 %, es decir
se encuentran en el lmite superior de los reportados en la literatura [4-12]. En la Fig. 2 se muestra la distribucin completa
por tipo de compuesto. Las muestras de aceite cclico ligero
que provienen de las Refineras de Cadereyta y Cd. Madero
contienen la mayor proporcin de compuestos de tipo
aromtico y los de menor, Tula y Salina Cruz. Esto sin embargo, no es un valor fijo, pues depende de la composicin de la
carga de desintegracin cataltica, del tipo de mezcla de crudos y de la severidad en que sea procesado en cada refinera.
Los componentes ms importantes de todas las muestras estudiadas, son los compuestos de tipo diaromtico. El ndice de
cetano entre 25 y 30 como resultado del alto contenido de
compuestos aromticos.
Dado que durante el hidrotratamiento, un mayor contenido de compuestos de azufre, nitrgeno y aromticos dificul-

Estudio de la composicin qumica del aceite cclico ligero proveniente de crudos mexicanos

117

Tabla 1. Caractersticas fsicas y qumicas de algunos aceites cclicos ligeros.

Propiedad
Gravedad, API
Azufre total, %p
Nitrgeno total, ppmp
Nitrgeno bsico, ppmp
Numero de bromo, g Br2 / 100 g
ndice de cetano
Numero de cetano
Temperatura de anilina, C
ndice de refraccin a 20 C
Anlisis FIA, % v
Parafinas
Olefinas
Aromticos
Aromticos, % p Tcnica
Mono
Di
Tri
Poli
Totales
Destilacin ASTM , D-86
TIE
10
50
90
TFE
1

17.7
1.42
1260
122

18.4
0.246
90

18.1
1.0
803
59

24.5
0.18
59

17.6
0.69

5.6
20

26.3
23.9

Referencia
9
9
20.6
1.51
934
73
8.9

22.5
0.30
420
42
7.9

26.2
1.11
17
30
3.6

25.2

25.2

29.5

1.5366

1.5321

1.5129

31.5
0
68.5
UV1
8.6
25.9
8.7

62.2
0.7
37.1
UV1
8.8
28
1.4

43.2

38.2

158
226
273
322
340

186
232
251
271
285

28.8

26.1

1.525

24.6
1.5558

9.8
1.5537

UV
17.7
29.7
11
2.3
60.7

CLAE
4.0
74.3

24.1
2.0
73.9
CLAE
11.2
49.5
9.5
0.8
71.0

40
0
60
MS
13.4
45.6
0.3

20.9
3.6
75.5
UV1
6.3
28.3
9.1

59.3

43.7

29.5
1.5
69
UV1
8.64
18.25
10.79
1.44
39.1

183
249
281
333
350

205

172
255
294
339
359

235
245
261
292
309

178
247
280
334
365

163
236
289
349
376

3.7
82.0

356

10

11

12

0.17
490

22.7
0.16
643

27.5
2.91
51

MS
21.6
31.6
5.9
0.4
59.5

20.7
36.3
13.6
70.6

53.2

64
206
271
349
467

246
285
322

% p como Carbono

ta el procesamiento, pues requiere de una mayor cantidad de

consumibles (hidrgeno, catalizador, etc.) y el producto
obtenido es de menor calidad [13], los aceites cclicos provenientes de Cd. Madero y de Cadereyta son de una calidad menor, y en consecuencia tienen un menor valor econmico.
Distribucin Qumica del ACL proveniente de Tula. De
acuerdo con la Fig. 3, la composicin qumica para cada una
de las fracciones del aceite cclico ligero contra temperatura
de ebullicin presenta las siguientes caractersticas:
a) El contenido total de compuestos saturados aumenta
conforme aumenta la temperatura de ebullicin.
b) El contenido de compuestos monoaromticos desciende
conforme se incrementa la temperatura de ebullicin.
c) Los compuestos diaromticos presenta una distribucin
con un mximo de concentracin aproximadamente a
288 C.
d) A partir de los 260 C y hasta los 340 C, el contenido
de compuestos poliaromticos se incrementa conforme
aumenta la temperatura de ebullicin y a partir de este
punto se mantienen aproximadamente constantes.
e) El contenido de compuestos polares aumenta conforme
aumenta la temperatura de ebullicin despus de los
262 C.

Las distribuciones encontradas fueron similares a las descritas por Erwin [8].
El conocimiento de la distribucin qumica del aceite cclico ligero permite llevar a cabo modificaciones en el proceso.
Por ejemplo, se sabe que entre los componentes del aceite cclico ligero, los compuestos que suelen ocasionar mayores dificultades en relacin con el envenenamiento del catalizador o la
demanda de una mayor proporcin de consumibles durante el
proceso de hidrotratamiento, son los compuestos poliaromticos
y polares [13]. Entre las tecnologas que podran emplearse para
el aprovechamiento del aceite cclico ligero podra sugerirse la
separacin en dos fracciones: una fraccin ligera (< 290 C) relativamente fcil de hidrotratar, y una fraccin pesada (> 290 C)
que contiene la mayor parte de los compuestos poliaromticos y
polares y que es mas difcil de hidrotratar. Estas fracciones
podran ser procesadas por separado a condiciones de severidad
diferentes y, de acuerdo a sus propiedades finales de contenido
de azufre, nitrgeno, aromticos y nmero de cetano, ser incorporadas como carga a hidrotratamiento junto con el gasleo ligero primario o bien, al producto terminado. Otra opcin interesante sera la de incorporar la fraccin ligera del aceite cclico
ligero en una proporcin especfica como mezcla dentro de la
carga a hidrotratamiento y evaluar la calidad del combustible
producido. Opciones de este tipo han sido propuestas por
Panarello y Moggi [14] para la produccin de diesel con contenido de azufre ultra bajo a partir de gasleo ligero primario.

118

Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

Georgina C. Laredo et al.

Tabla 3. Caractersticas fsicas y qumicas de algunos aceites cclicos ligeros.

Refinera
Propiedad
Peso especfico (20 / 4 C), g / mL
Azufre total, %p
Nitrgeno total, ppmp
Nitrgeno bsico, ppmp
ndice de cetano
T. de inflamacin, C
T. de escurrimiento, C
T. de anilina, C
ndice de refraccin
Color
Aromticos totales, % p
Distribucin de compuestos, % p
Saturados
Monoaromticos
Diaromticos
Poliaromticos
Polares
Totales
Destilacin ASTM D-86
TIE
10
30
50
70
90
TFE

Tula
0.9338
2.98
903
64
30

39.2
1.546
> 16
67.38

Cd. Madero

Salina Cruz

Cadereyta

Salamanca

Minatitln

0.9442
2.93
445
38
25
112
21
14.8
1.5841
L 2.0
74.98

0.9336
2.73
675
38
29
116
6

0.9573
3.52
972
70
25
127
0
24

0.9448
2.90
833
58
29
129
-6
25.4

0.9373
2.14
566
230
30
93
3
34.2

> 16
67.74

L 3.0
74.72

L 2.0
71.69

L 2.0
68.81

32.28
17.59
26.28
10.84
13.01
100

20.1
17.03
53.01
6.52
3.34
100

30.46
15.31
35.35
9.8
9.08
100

20.23
15.21
38.91
15.94
9.71
100

30.01
14.89
32
11.77
11.33
100

27.44
17.33
33.77
12.19
9.27
100

211
263
292
334
341
362
396

226
264
284
297
308
333
362

226
263
286
299
320
347
372

216
259
284
302
327
355
380

206
269
283
298
313
335
363

179
255
285
314
341
368
402

Tabla 2. Mtodos de anlisis fsicos y qumicos.

Propiedad

80

Unidades

Mtodo

g / mL
%p
ppmp
ppmp

ASTM D-70
ASTM D-4294
ASTM D-4629
UOP-313
ASTM D-976
ASTM D-92
ASTM D-97
ASTM D-611
ASTM D-1218
ASTM D-1500
ASTM D-2459
IP-391-1990
ASTM D-86

70
60

Peso especfico, (20/4 C)

Azufre total
Nitrgeno total
Nitrgeno bsico
ndice de cetano
Temperatura de inflamacin
Temperatura de escurrimiento
Temperatura de anilina
ndice de refraccin
Color
Aromticos totales
Distribucin de compuestos
Destilacin

C
C
C

% peso
% peso
C

50
40
30
20
10
0
175

225

275

325

375

425

Temperatura T50 %, C

Fig. 3. Composicin qumica contra temperatura de ebullicin del

aceite cclico ligero proveniente de la refinera de Tula (Mezcla Istmo
/ Maya 60 / 40). Saturados (u), Monoaromticos (n), Diaromticos
(p), Poliaromticos (l), Polares ().

Conclusiones
Se presenta el resultado de la caracterizacin fsica y qumica de seis muestras de aceite cclico ligero provenientes de diferentes
refineras mexicanas, as como la distribucin qumica de uno de ellos. Se encontr que estos aceites cclicos ligeros tienen un
contenido mayor de azufre y de aromticos en comparacin con los reportados en la literatura para este tipo de carga. Esto es
debido a que estos productos provienen del procesamiento de crudos pesados como es el Maya. La distribucin qumica a lo largo
de la curva de destilacin es muy similar a la distribucin qumica reportada para este tipo de destilado. Finalmente, la caracterizacin fsica y qumica de un determinado producto permite planear las condiciones de procesamiento ms eficientes para obtener
el mayor beneficio econmico.

Estudio de la composicin qumica del aceite cclico ligero proveniente de crudos mexicanos

119

Referencias
1. Beck, J. R. Oil & Gas J. 1996, 94 (4-22) 45-46.
2. Richardson, N.; Du Preez, P. Oil & Gas J. 2000, 98 (11-27) 64-65.
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Petr. 1992, 24, 68-76.
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Refin. Assoc. [Techn. Paper] AM-87-58.
5. Danaher, W. J.; Palmer, L.D. Fuel 1988, 67, 1441-1445.
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S.L. 1990, Nat. Petr. Refin. Assoc. [Techn. Paper] AM-90-19.
7. Baron, K.; Miller, R.E.; Tang, A.; Palmer, J. 1992, Nat. Petr.
Refin. Assoc. [Techn. Paper] AM-92-20.
8. Erwin, J. in: 1992 Symposium on Processing and Product
Selectivity of Synthetic Fuels presented before the Division of Fuel
Chemistry. Am. Chem. Soc. Washington DC, August, 1992, 19151923.

9. Suchanek, A. J.; Hamilton, G. 1992, Nat. Petr. Refin. Assoc.

[Techn. Paper] AM-92-19.
10. Shi, Y.L.; Shi, J.W.; Zhang, X.W.; Shi, Y.H.; Li, D.D. 1993, Nat.
Petr. Refin. Assoc. [Techn. Paper] AM-93-56.
11. Corma, A.; Martnez, A.; Martnez-Soria, V. J. Catal. 1997, 169,
480-489.
12. Ancheyta, J.; Rodrguez, S.; Valenzuela, M.A. Energy & Fuels
2001, 15, 675-679.
13. Girgis, M.J.; Gates, B.C. Ind. Eng. Chem. Res. 1991, 30, 20212058.
14. Panarello, F.; Moggi, A. in: 1998 Symposium on Recent Advances in Heteroatom Removal presented before the Division of Fuel
Chemistry Inc. Am. Chem. Soc. Dallas TX, March-April, 1998.

Revista de la Sociedad Qumica de Mxico, Vol. 46, Nm. 2 (2002) 125-130

Investigacin

Acid-base equilibrium studies of 2-(aminomethyl)benzimidazole

in aqueous solution
Araceli Sierra-Zenteno, Carlos A. Galn-Vidal,* Rafael Tapia-Benavides
Universidad Autnoma del Estado de Hidalgo, Centro de Investigaciones Qumicas, Ciudad Universitaria,
Carretera Pachuca-Tulancingo km 4.5, Pachuca 42076, Hidalgo, Mxico. Tel: (52-771) 72000, Ext. 6785;
Fax: (52-771) 72109. E-mail: [email protected]
Recibido el 23 de enero del 2002; aceptado el 27 de mayo del 2002
Abstract. The acid-base equilibrium constants of the 2-(amino methyl)benzimidazole 2AMBZ in aqueous solutions have been determined at 25 C by means of nuclear magnetic resonance spectroscopy (13C NMR), and corroborated by potentiometric and spectrophotometric techniques. pKa values were obtained from experimental data using the computer programs HypNMR, SUPERQUAD
and SQUAD respectively, finding pKa1 = 3.103 0.079, pKa2 =
7.624 0.063 and pKa3 = 12.540 0.038 by NMR at variable ionic
strength. Likewise, it was possible determine the deprotonation mechanism of 2AMBZ.
Keywords: 2-(aminomethyl)benzimidazole, pKa, HypNMR, SUPERQUAD, SQUAD.

Resumen. Las constantes de equilibrio cido-base del 2-(aminometil)

bencimidazol 2AMBZ en solucin acuosa han sido determinadas a 25
C mediante resonancia magntica nuclear (13C RMN), y corroboradas por tcnicas potenciomtricas y espectrofotomtricas. Los valores de pKa fueron obtenidos a partir de los datos experimentales,
usando los programas computacionales HypNMR, SUPERQUAD y
SQUAD respectivamente, encontrando pKa1 = 3.103 0.079, pKa 2 =
7.624 0.063 y pKa3 = 12.540 0.038 por RMN a fuerza inica
variable. Asimismo, fue posible determinar el mecanismo de desprotonacin del 2AMBZ.
Palabras clave: 2-(aminometil)bencimidazol, pKa, HypNMR, SUPERQUAD, SQUAD.

Introduction

Previous works report the first and second pKa of

2AMBZ [19-20]. Only one reference reports the third [18].
In the present work the acidity constants of 2AMBZ were
determined in aqueous solutions at 25 C by potentiometry,
spectrophotometry UV/Vis and for the first time by 13 C NMR
techniques. Computational programs were used to process the
information in order to obtain statistical parameters that allow
evaluating in a better way the quality of the results. From the
studies of 13 C NMR it was possible to establish clearly the deprotonation mechanism. Although the acid-base mechanism
has been reported elsewhere, there are discrepancies between
published mechanisms [18,19].

There is a considerable interest in benzimidazole due to its

known biological activity. It has been used to develop many
pharmaceutical utility drugs such as omeprazole, mebenda zole, astemizole, etc. [1]. Thus, some metallic complexes of
benzimidazoles have been proposed as low-molecular-weight
mimetic models of the active sites in some metalloproteins
[2,3].
Particularly, 2-(aminomethyl)benzimidazole (2AMBZ)
(Fig. 1) has a special relevance. Recently it has been employed
to develop new, interesting antimicrobial, antiparasite and
AIDS antiviruses agents [4-12], as well as useful compounds
for the treatment of cancer, diabetic retinopathy, osteoporosis,
arthritis, etc. [13-17]. Most of these studies have been the subject of diverse patents.
Because of the biological and commercial importance of
2AMBZ, some studies have determined the acidity constants
[18-20] and stability constants for complexes with Cu(II) and
Ni(II) [19-20]. These thermodynamic parameters can be used
to obtain a better understanding of their biological properties,
as well as to optimize synthetic routes.
In these reports graphical methods have been used for
equilibrium constant determination, and they do not describe
clearly the methodology and experimental conditions. Likewise, in some cases comparisons with other techniques do not
appear and it does not allow to evaluate the quality of the
results, and the reported statistic are not well defined.

Experimental
Purification. 2-(Aminomethyl)benzimidazole dihydrochloride
hydrate is commercially available with a 98 % of purity (Aldrich), therefore it was purified by recrystallization from absolute ethanol, as reported elsewhere [19-21], and obtained as a
white crystalline solid. The melting point was determined
using a Bchi B-545 (263 C) [21]. Also, the IR absorption
spectrum was obtained for the recrystallized solid in a TF-IR
2000 Perkin-Elmer spectrophotometer, matching with the one
reported in the FT-IR spectra catalog [22]. Finally, the ele mental analysis EA was obtained in a CHNS / O Analyzer
2400 Perkin Elmer found: C, 40.8 %; H, 5.7 %; N 17.3 %.
Calc. for C8 H11 N3 Cl2 ,H 2 O: C, 40.3 %; H, 5.5 %; N, 17.7 %.

126

Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

Salvador R. Tello-Sols y Alfonso Arroyo-Reyna

The recrystallized 2-(aminomethyl)benzimidazole dihydrochloride hydrate was then used in its purified form for all
experiments.

7
6
5
4

NMR determinations. NMR spectra were recorded in a

JEOL Eclipse 400 MHz spectrometer with an auto tune 5-mm
probe (P-31 to N-15 NMR tunable probe VT) at a constant
temperature of 25 1 C (corroborated with methanol [23]) using TMS as electronic reference. Experimental parameters
for 13C nucleus were as follows: spectral frequency = 100.53
MHz, spectral width = 25.19 KHz (250 ppm), 32 K data
points in the frequency domain, pulse width = 3.17 s (9.5 s
at 90o flip angle), number of scans = 3995. Spectra were acquired using single pulse proton decoupling and coupling
experiments.
Spectra were recorded for solutions of 0.1M 2AMBZ at
pH values between 1.1 and 13.2, with 10 % v/v of D2O for
lock. pH measurements were obtained using a RadiometerCopenhagen PHM 250 pH-meter equipped with a ORION
combined ROSS pH-electrode. Calibration of the electrode
system was performed with Radiometer-Copenhagen IUPAC
standard buffers of pH 4.005, 7.000 and 10.012 0.010
obtained cell efficiency greater than 98 %. The temperature of
the solutions was kept constant to 25 0.01 C with a thermostatable cell holder and a Techne Tempette TE-8D temperature controlled water bath.
The refinement of the equilibrium constants was done
using the HypNMR program [24] from 13 C chemical shifts.
The program refines equilibrium constant values by minimizing the sum of residual squares between calculated ( i calc) and
observed ( iobs) chemical shifts U (eq 1). Wi are the weights
assigned to each observation and ideally should be equal to
the reciprocal of the variance of the measurement.

U = i Wi icalc iobs

(1)

Spectrophotometric determination. Absorbance versus time

studies. In order to demonstrate absorbance on time independence during measurements, absorption spectra for 48 h for 1
10 4 M 2AMBZ solutions at different pH values were recorded. In all cases a maximum variation of 1.5 % was observed over this period, indicating stability of the different acidbase species.

H
N1

2Cl
NH3
2 10

9 3N

Fig. 1. 2-(aminomethyl)benzimidazole dihydrochloride.

Absorbance data were recorded approximately every 0.5

pH units in a UV-Vis Perkin-Elmer Lambda 40 spectrophotometer and pH values were monitored with the same equipment
used in the NMR determinations. Constant temperature was
kept at 25 0.01 C.
The determination of the equilibrium constants was done
using SQUAD [25,26]. This program is analogous to Hyp
NMR, and calculates the best values for the stability constants
of the proposed equilibrium model from absorption spectra by
employing a non-linear least square approach to minimize the
sum of residual square for absorbance U. The program also
calculates absorptivity coefficients for each one of the absorbing species in the range of wavelength and pH studied.
In order to determine the number of absorbing species in
solution, the absorbance matrices were analyzed using TRIANG [27].
Potentiometric determination. pH titrations of 20 mL of
0.001, 0.005, 0.01 and 0.05 M of 2AMBZ solutions were performed under nitrogen atmosphere with carbonate-free solutions of NaOH at a constant temperature of 25 0.01 C. These titrations were done by triplicate at variable and 0.1 M ionic strength NaClO4 .
NaOH solutions were standardized with potassium hydrogen phthalate and these were obtained by dilution of a stock
solution containing 50 % w/v of NaOH low in carbonates, filtered and was kept in a dessicator over ascarite [28].

C4-C7
C5-C6

(a)

C2

C8-C9

C10

(b)

160

Spectrophotometric data. Two aqueous solutions of 2AMBZ

of the same concentration were prepared, one at low pH adjusted with HCl, and other at high pH adjusted with NaOH. The
experiments were carried out in two steps: the basic solution
was added to the acid solution in order to obtain different
pHs until reach neutral pH, and the acid solution was added
to the basic solution in order to obtain different pHs until
reach neutral pH. The study was carried out at concentrations
of 1.5 104 , 1 10 4, 5 10 5 and 2 10 5 M 2AMBZ solutions at variable and 1.0 M ionic strength adjusted with
NaClO4. All experiments were done by triplicate.

150

140

130

120

110

100

90

80

70

60

50

40

30

20

(c)
128.5

128.0

127.5

115.0

114.5

127.0

126.5

126.0

114.0

113.5

113.0

(d)
115.5

13

ppm C

Fig. 2. 13C NMR spectra of 0.1 M 2AMBZ aqueous solutions at 25

C. (a) decoupled experiment, (b), (c) and (d) coupled 13C-1H experiment. Chemical shifts are reference to TMS frecuency.

Estudio por dicrosmo circular de la desnaturalizacin trmica de la subtilisina BPN...

127

14

7
6

12

H
N1

pH = 13.20

5
10

NH3
2

10

9 3N
4

-H

+H
pKa1

N
H

pH = 9.12

NH3

-H pKa2

+H

pH = 5.30

N
0

NH2

+H
-H
pKa3

pH = 1.10

N
-2
170

160

150

140

130

120

110

100

90

80

70

60

50

40

30

13

ppm C

NH2

N
H

Fig. 3. 13C NMR spectra of 0.1M 2AMBZ aqueous solutions at 25 C

at different pHs.

Fig. 4. Schematic representation of deprotonation of 2-(aminomethyl)benzimidazole dihydrochloride.

The titrations were performed using an automatic DL53

Mettler titrator equipped with a combined Ag / AgCl glass
electrode and a borosilicate glass burette of 10 mL.
Acid-base constants were calculated from the experimental data corresponding to the pH titrations with the aid of the
SUPERQUAD program [26,29]. It refines equilibrium constant values by minimizing the weighting sum of residual squares for cell potentials U. The weighting factor Wi is assigned
for each observation as the inverse of the variance which is
calculate from uncertainties of potential and titrant volume
measurements by a standard error propagation formula.

respectively), the greater multiplicity of C5 and C6 is due to

coupling with four hydrogen atoms (H4, H5, H6 and H7)
(Figs. 2c and 2d). By other hand, C2 is only coupled with
hydrogen atoms of methylene; this signal has multiplicity of
three and is easily differentiated of C8 and C9, which have
couplings with three different hydrogen atoms. Finally, the
methylene carbon C10 has a multiplicity of three. The assignement was corroborated with a HMBC experiment and is in
accord with previous reports [30].
The number of signals in all spectra does not change during the procedure of pH variation (Fig. 3), because of symmetry and tautomerism phenomena.
In the diprotonated chemical species 1 (Fig. 4), there is a
plane of symmetry perpendicular to annular system, causing
the equivalence chemical of different aromatic carbons; C5
with C6, C4 with C7 and C8 with C9. On the other hand, in
bencimidazolic species monoprotonated 2 and neutral 3, the
imidazolic ring carries a tautomeric process, the proton is
transferred from N1 to N3 (Fig. 4).
From the chemical shifts of 13C NMR (Fig. 5) it was possible to find the values of the acid-base constants. The results
obtained with the HypNMR program (Tab. 1) have a good statistic and agree with previous reports (Tab. 2).
The 13 C NMR spectra also provide information about the
deprotonation mechanism of 1. Chemical shifts change significantly when the pH is varied and the identification the four
molecular structures during this process was possible. It is
known that the formation of ammonium salts causes protec-

Results and discussion

NMR Study. The molecule of 2AMBZ (Fig. 1) has a set of
three pairs of chemically equivalent carbons, besides C of
methylene group and C-2, consequently only five distinct signal can be observed (Fig. 2a). The assignment of 2AMBZ was
done with an experiment of 13 C NMR spectra coupled with 1 H
(Fig. 2b).
The Figs. 2c and 2d show the coupling patterns of 13 C-1 H
that allow to differentiate the signal of C4-C7 ( = 114.5 ppm)
respect to C5-C6 ( = 127.37 ppm). Furthermore it was possible to discern the resonance frequencies of C2 (d = 143.51
ppm), C8-C9 (d = 131.01 ppm) and C10 (d = 34.543 ppm).
Therefore, the equivalent nucleus of C4 and C7 are only coupled at three hydrogen atoms (H4, H5, H6 and H7, H6, H5

Table 1. HypNMR, SQUAD and SUPERQUAD results for pKa values of 2-(aminomethyl)benzimidazole.
Method
NMR1
Spectrophotometric2
Spectrophotometric2
Potentiometric3
Potentiometric3

[2AMBZ] / M

pKa1

pKa2

pKa 3

var
var
1.0
var
0.1

0.1
2-15 105
2-15 105
1-50 103
1-10 103

95
1032
1032
420
101

3.103 0.079
2.777 0.111
2.982 0.116
2.996 0.006
3.044 0.016

7.624 0.063
7.481 0.073
7.887 0.082
7.569 0.003
7.611 0.008

12.540 0.038
12.593 0.010
12.487 0.015
nd
nd

4.1 102
1.5 102
1.6 102
4.5
5.0

25.1
nd
nd
12.7
22.0

= Ionic strength adjusted with NaClO4; n = number of experimental data; = U / n ; var = ionic strength variable; nd =
not determinated. Uncertainties are the standard deviations. Equilibrium constant units mol L1.
1HypNMR, 2SQUAD, 3SUPERQUAD. I

128

Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

Salvador R. Tello-Sols y Alfonso Arroyo-Reyna

Table 2. pKa values of 2-(aminomethyl)benzimidazole reported at literature.

Method

T (C)

Ionic strength / M

pKa1

pKa2

pKa3

Reference

25
30
27
27
30
30

0.3 (NaClO4)
0.3 (NaClO4)
var
var
0.2 (NaClO4)
0.5 (NaClO4)

3.17 0.03
3.14 0.06
3.1
1.8
3.45 0.02
3.33 0.02

7.83 0.07
7.68 0.05
8.1 0.5
8
7.30 0.02
7.02 0.02

nr
nr
12.8
12
nr
nr

[20]
[20]
[18]
[18]
[19]
[19]

Spectrophotometric
Spectrophotometric
Spectrophotometric
Fluorescence
Potentiometric
Potentiometric

nr = not reported; var = ionic strength variable. Meanings of uncertainties are not reported.

tion phenomena in the carbon atoms bonded at nitrogen atoms

[31]. So, the chemical shifts of carbon nucleus in position
with respect to quaternary nitrogen are shifted to high field
respect to free amine. In our case, we found that when the pH
of 1 increases, the signals of C2, C8, C9 and C10 are shifted
to low field. Although, in Fig. 5 it can be observed that only
the positions C2 and C10 were affected by the successive lost
of protons bonded at nitrogen atoms of the molecule. The
chemical shifts of C8 and C9 are constants between pH 4 and
11. This can be explained if we assume that the first deprotonation site occurs at imidazolic nitrogen producing the monocationic species 2, whereas the second deprotonation site

180

C Chemical shift (ppm)

170

13

(a)

C2
C8-C9
C5-C6
C4-C7

160

150

140

130

120

110
0

10

12

14

occurs in NH3 group. On the other hand it has been reported

that the resonance frequencies of C5 and C6 are affected by
inductive effects produced by imidazolic nitrogens [31] , thus
any deprotonation of these nitrogen atoms will shift the signals of C5 and C6 to low frequencies. The spectra show that
these chemical shifts are constants between 4-11 pH confirming that the second deprotonation site is at NH3 . The proposed
deprotonation mechanism is according to Dash [19], but does
not with Sinha [18].
Spectrophotometric study. Absorption spectra of 2AMBZ
show one isosbestic point at acid solutions and other one at
basic pH range, indicating two chemical species in equilibrium
corresponding to pKa 1 and pKa 3 . At the range of neutral pH it
is difficult observe the isosbestic point, because there are small
changes on absorption spectra [18] due to the tautomeric
process mentioned earlier. From pH-absorbance matrices TRIANG indicated the presence of at least 3 or 4 absorbing species
over the pH interval studied, corresponding with a model of
three pKa (four species).
The equilibrium constants refined by processing absorption spectra using SQUAD are given in Table 1. The values
are comparable to NMR results obtained and previously reported information (Tables 1 and 2). Using spectrophotometric refined values and the absorptivity coefficients calculated
with the program, it was possible the simulation of the spectra
for each concentration and pH with a spreadsheet. Fig. 6

pH
1.6

42

(b)

C10

1.4

41

Absorbance

13C Chemical shift (ppm)

1.2

40
39
38

1.0
0.8
0.6

37
0.4

1.70
6.80
10.80
13.62

36
0.2

35
0.0
240

34
0

10

12

14

pH

Fig. 5. Chemical shifts in 2AMBZ 0.1 M solutions at 25 C against

pH.

250

260

270

280

290

300

(nm)

Fig. 6. Absorption spectra simulated (solid lines) and experimental

(symbols) at different values of pH for a total concentration of
2AMBZ of 1.5 104 M I=var.

Estudio por dicrosmo circular de la desnaturalizacin trmica de la subtilisina BPN...

129

Acknowledgements

This work was financially supported by CONACyT (Mxico)

through project No. J-27920-E. We acknowledge Professor A.
Vacca for the copy of the SUPERQUAD program.

pH

References

2
0.0

0.5

1.0

1.5

2.0

Volume 0.1887M NaOH (mL)

Fig. 7. Simulated (solid lines) and experimental (symbols) potentiometric titration curve for 20 mL of 2AMBZ 0.01M. I=var.

shows overlapped experimental and simulated spectra, as can

be seen that the simulation agrees very well with the experimental results.
Potentiometric study. The Fig. 7 shows a typical titration curve
of 2AMBZ with NaOH solution. By this method it was possible
to determine two constants, because the low concentration of
the NaOH solutions used in the titration do not allow to reach
values of pH as high as the ones required to refine conveniently
the third pKa, which is between 12 and 12.8 [18]. The values
obtained are collected in Table 1 and show good statistical parameters, they are in agreement with the values found with the
others techniques and the values published previously (Tab. 2).
Using the values refined with SUPERQUAD it was possible to simulate the data obtained with a spreadsheet. The simulated and experimental potentiometric curves are shown in
the Fig. 7, the simulation agrees very well with the experimental results.

Conclusions
The pKa values determined for 2AMBZ for a model of three
acid-base equilibriums are clearly explained by NMR, spectrophotometry and potentiometry.
It may be noted that values obtained here are consistent
among the techniques used with a good statistical, and they
are in agreement with values reported in the literature. Likewise, it was confirmed that the value of the third pKa is
12.540 0.038 (NMR). This equilibrium constant has been
reported previously, but without statistical information [18].
From 13 C NMR studies it was possible to determine the
deprotonation mechanism of 2AMBZ. This work is the first
report on the determination of acid-base constants of 2(aminomethyl)benzimidazole by this technique.

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Investigacin

Efecto de la (E)-3-butil-8-estiri1-1-propilxantina sobre la asimetra

motora en rata
Alejandro Muoz-Zurita, Jess Sandoval-Ramrez,* Carmen Parra-Cid y Daniel Limn-Prez de Len
Facultad de Ciencias Qumicas. Benemrita Universidad Autnoma de Puebla. Mxico. Apartado postal 1742,
Puebla 72000, Pue. Mxico. Tel.: 01-222-2295-500 Ext. 7382; Fax: 222-2295-584; E-mail: [email protected]
Recibido el 9 de febrero del 2002; aceptado el 11 junio del 2002
Resumen. Se describe la sntesis de la (E)-3-butil-8-estiri1-1-propilxantina (A15Bu) a partir de 6-aminouracilo (6) y un estudio biolgico con el modelo experimental antiparkinsoniano de conducta de giro, en ratas de cepa Wistar. Al administrar el compuesto A15Bu en
ratas lesionadas con 6-hidroxidopamina (6-OHDA) en la sustancia
nigra pars compacta la asimetra motora se redujo en un 75 %.
Palabras clave: Antagonistas de receptores de adenosina, xantinas,
quimioselectividad, agentes antiparkisonianos, modelo de asimetra
motora.

Abstract. Herein we describe the synthesis of (E)-3-butyl-1-propyl8-styrylxanthine (A15Bu) starting from 6-aminouracil (6) and a biological study with the antiparkinsonian experimental model of rotational behavior using Wistar rats. When the xanthine derivative
A15Bu was administered to rats lesioned with 6-hydroxydopamine
(6-OHDA) at the substantia nigra pars compacta, the asymmetric
motor behavior was reduced by 75 %.
Keywords: Adenosine receptors antagonist, xanthines, chemoselectivity, antiparkinsonian drugs, asymmetric motor model.

Introduccin

cientemente se ha reportado la participacin de los receptores

A 2A en las conductas motoras [7] y se ha encontrado que los
nuevos antagonistas A2A revierten los estados catalpticos inducidos por frmacos antagonistas dopaminrgicos D1 y D2
cuando son aplicados en el caudo-putamen [7]; dicha actividad
tambin se observa cuando disminuye la produccin de dopamina [8]. Esto sugiere que los receptores A2A modulan la activacin de los receptores D2 regulando la transmisin GABArgica estriadopalidal [9]. Otros estudios han demostrado que
el efecto estimulante de los antagonistas A2A , se debe a un bloqueo de los receptores A2A en el estriado [10]. Se sugiere que
los antagonistas adenosinrgicos de tipo A2A tienen efectos
motores y pueden revertir la asimetra motora o el estado hipocintico; inclusive, se ha reportado recientemente que nuevos
antagonistas A2A se encuentran ya en la fase II de experimentacin [11]. Nosotros nos hemos interesado en la sntesis de

La adenosina es una molcula producida en algunos rganos y

tejidos que modula una gran variedad de funciones biolgicas
en el sistema nervioso central (SNC) y perifrico, su efecto se
lleva a cabo a travs de la interaccin con uno o ms de los
cuatro subtipos de receptores que se conocen en la actualidad:
A 1, A2A , A2B y A 3 [1]. Se ha propuesto que los subtipos A1 y
A 2A juegan papeles complementarios en la regulacin de la adenosina [2]. El subtipo A2B se expresa en clulas de tejidos
daados o inflamados y facilita la movilizacin del calcio intracelular [2]. Las funciones del subtipo A3 no se han caracterizado totalmente pero los compuestos que activan o inhiben a
estos receptores son estudiados por su potencial uso teraputico en enfermedades del corazn y el cncer [3].
Las metilxantinas como la teofilina (1) son conocidas desde hace mucho tiempo por sus efectos estimulantes sobre el
SNC debido a su efecto bloqueador de los receptores de adenosina, aunque no son antagonistas selectivos; sin embargo, se
ha reportado que los antagonistas de los receptores adenosinrgicos del subtipo A2A pueden ser tiles como agentes
antiparkinsonianos; no obstante, se desconocen muchos aspectos del papel que desempean en dicho padecimiento [4].
Se ha descubierto un gran nmero de antagonistas A2 muy
selectivos entre los que se incluyen por ejemplo, derivados de
xantinas, adeninas, 1,2,4-triazolo[1,5-a]quinoxalinas y pirazolo[3,4-d]pirimidinas como 2, 3, 4 y 5, respectivamente (Fig. 1).
Los compuestos derivados de la teofilina (1) que contienen en la posicin 1 a grupos lipoflicos como el n-propilo
son reconocidos fcilmente por los receptores de la adenosina
[5]. Adems, se ha descubierto que el sustituyente estirilo con
isomera (E) en la posicin 8 confiere selectividad por los
receptores adenosinrgicos del tipo A2A [6]. Por otra parte, re-

O
H3 C

H
N

CH3

NH

N
O

CH3

CH3

N
CH3

NH2
N

NH
N

N N

N
S

H2N

Figura 1

N
N

132

Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

xantinas como probables antagonistas de receptores de la

adenosina selectivos, con efectos sobre la conducta motora y
por tanto, como agentes antiparkinsonianos que permitan una
nueva teraputica contra esta enfermedad neurodegenerativa.
La sntesis de la molcula modelo se llev a cabo tomando
como base la experiencia lograda en la sntesis de otros derivados xantnicos [12, 13].

Resultados y discusin

Alejandro Muoz-Zurita et al.

O

O
a) HMDS /
(NH 4)2SO4
b) PrI

HN
O

NH 2

N
H

NaNO2
AcOH

N
H

NH 2

O
NH2

C6 H5 CH=CHCO 2H
EDC

N
H

NH2

N
H

La sntesis de la xantina A15Bu funcionalizada en posiciones

1-, 3-, y 8- se llev a cabo a partir del 6-aminouracilo (6) de
acuerdo con el esquema de trabajo mostrado en la Fig. 2 [12].
Para llevar a cabo la alquilacin selectiva de 6 en posicin 3, se forma in situ el derivado trisililado utilizando cantidades prcticamente equimolares de hexametildisilazano
(HMDS) y cantidades catalticas de (NH 4 )2 SO 4 seguido por la
adicin de un equivalente de yoduro de n-propilo. El derivado
alquilado 7 se aisla por precipitacin en agua, con un 92 % de
rendimiento en ausencia de producto dialquilado.
La nitrosacin quimio- y regioselectiva en posicin 5, para obtener el derivado 8 se realiza utilizando nitrito de sodio
en medio cido acuoso. Nosotros hemos encontrado que los
mejores rendimientos (aprox. 80 %) se obtienen cuando la
reaccin se realiza a temperatura ambiente y dichos rendimientos son equiparables o superiores a los reportados en la
literatura [14]. Los derivados nitroso son fcilmente reconocibles por su intenso color naranja y por la banda intensa en el
infrarrojo hacia 1510 cm1 [15].
Para realizar la reduccin del grupo nitroso y obtener el
compuesto 9, se emple el mtodo que utiliza ditionito de
sodio en medio bsico. Dado que la diamina 9 es muy inestable, sta se debe someter de forma inmediata a la prxima
reaccin en ausencia de luz y oxgeno, para evitar la descomposicin. Con lo anterior la diamina 9 se obtiene con un 65 %
de rendimiento.
La obtencin de la amida 10 se efectu haciendo reaccionar el cido trans-cinmico con la diamina 9 y empleando el
clorhidrato de 1-[3-(dimetilamino)propil]-3-etilcarbodiimida
(EDC) como agente acoplante, con rendimientos cuantitativos. Esta es una reaccin totalmente quimioselectiva pues
solamente reacciona el grupo amino unido a la posicin 5.
Los datos espectroscpicos de IR y de RMN de protn
establecen que la doble ligadura del grupo estirilo permanece
inalterada, pues tanto el dato de 971 cm 1 como la constante
de acoplamiento de 15.8 Hz son caractersticas para una doble
ligadura con estereoqumica trans [15, 16].
Sobre la amida 10 se puede realizar una alquilacin quimioselectiva en posicin 1 utilizando un equivalente de bromuro de n-butilo, en presencia de K2C O3 , obtenindose un
rendimiento del 76 %.
Finalmente, la reaccin de ciclizacin para obtener la (E)3-butil-8-estiri1-1-propilxantina se llev a cabo por tratamiento de 11 con una solucin acuosa de KOH, en metanol, a reflujo durante 3 h, con un rendimiento del 69 %.

O
N
Bu Br
K2 CO3

11

NH 2

H
N
O
NH2

10

H
N
O
NH2

N
H

O
N

Na2 S2 O4
NH 4OH

NO

H
N

KOH

12

Figura 2

En la literatura, para caracterizar a compuestos uraclicos

o xantnicos se han utilizado por lo general, los mtodos espectroscpicos de RMN, IR y Masas haciendo caso omiso de
la espectroscopa UV-Vis. En este artculo presentamos los
datos de UV-Vis de los derivados uraclicos 7, 8, 10 y 11 as
como el de la xantina A15Bu que al igual a los obtenidos de
otros derivados en nuestro laboratorio muestran una gran utilidad en la elucidacin de sus estructuras; as, los derivados del
6-aminouracilo con el grupo (E)-estirilcarboxamido unido a la
posicin 5 generan espectros con max promedio de 270 nm,
en tanto que el derivado xantnico A15Bu muestra una absorcin en 342 nm.
Farmacologa
Para llevar a cabo la evaluacin de la xantina A15Bu, se utilizaron ratas macho adultas de la cepa Wistar, provenientes
del Bioterio Claude Bernard de la BUAP, con un peso de 250280 g los cuales fueron mantenidos en cajas de lmina acrlica
las cuales fueron mantenidas bajo las mismas condiciones de
agua y alimento, con un ciclo de luz / oscuridad de 12 12 h,
a una temperatura de 22 C.
La evaluacin de conducta motora se realiz a travs del
Modelo de conducta de giro: a un grupo de animales se les
administr 16 g de 6-OHDA (disueltos en una solucin acuosa de cido ascrbico al 0.1 %) en la sustancia nigra pars
compacta mediante una ciruga estereotxica en las coordenadas: AP = 4.9; L = +2.0; P = 6.5 [17]. Ocho das despus
se evalu la lesin dopaminrgica administrando metanfetamina (8 mg / kg va s.c.). Se consider el nmero de giros
ipsilaterales para cada roedor a partir de la administracin de
metanfetamina 70 min. Solamente 16 animales presentaron
diez o ms giros por min (Fig. 3).

Efecto de la (E)-3-butil-8-estiril-1-propilxantina sobre la asimetra motora en rata

133

Parte experimental

Figura 3

Quince das despus de la lesin, los animales fueron

divididos en el grupo control (n = 8) al cual se le administr
aceite mineral en dimetilsulfxido (DMSO) en una relacin
1:5 y al grupo experimental (n = 8) se le administr el A15Bu
como probable antagonista A2A a una dosis de 1.0 mg / kg va
s.c. Despus de diez minutos a ambos grupos nuevamente se
les realiz la prueba de conducta de giro con metanfetamina
(8.0 mg / kg va s.c.) y se evalu el nmero de giros por 70
min (Fig. 4).
En la Fig. 3 se muestra la evaluacin de la lesin dopaminrgica en la cual se cont el nmero de giros ipsilaterales
entre el minuto 10 al 70 despus de la administracin de la
metanfetamina (8 mg / kg va s.c.) a ambos grupos de ratas. Se
observ un incremento significativo del nmero de giros a
partir del minuto 20 hasta alcanzar un mximo en el nmero
de giros entre el minuto 40 al 70, respecto al grupo control. El
nmero mximo de giros fue de 20.45 0.9 al minuto 40 y de
18.45 1.0 al minuto 60 de la administracin de la metanfetamina. El grupo al que se le administr el vehculo durante los
70 minutos de registro (tringulos, Fig. 3) no present giros
ipsilaterales.
Por lo tanto los siguientes experimentos para evaluar el
posible antagonista se realizaron entre el minuto 40 al 70
despus de la administracin de metanfetamina. Cinco das
despus y bajo las mismas condiciones experimentales, se
administr el derivado de las xantinas A15Bu como probable
antagonista A2A a razn de 1 mg / kg va s.c. al grupo experimental y al grupo control el vehculo. La administracin del
vehculo se hizo diez minutos antes de la administracin de la
metanfetamina (8 mg / kg va s.c.).
Encontramos que hubo una disminucin del nmero de
giros aunque no significativa en el minuto cuarenta (Fig. 3).
Sin embargo, encontramos una diferencia significativa *p <
0.05 del 40 al minuto 70 de experimentacin. El decremento
significativo en el nmero de giros se inici a partir del minuto cincuenta y esta diferencia se mantuvo hasta el minuto 70,
en la cual hubo una disminucin significativa de un 75 %
respecto a su grupo control (Fig. 4).
As, en este estudio mostramos que la asimetra motora
producida por el dao dopaminrgico con 6-OHDA en la sustancia nigra pars compacta (Fig. 4) fue revertida cuando se
aplic el compuesto A15Bu como supuesto antagonista A2A .

Los puntos de fusin fueron determinados por la tcnica de

capilar abierto en un fusimetro Melt-temp usando la escala
de grados centgrados y no fueron corregidos. Los espectros
de infrarrojo se midieron en un espectrofotmetro NICOLETMAGNA FT-IR-750, los datos se expresan en cm1 . Los espectros de UV fueron obtenidos en un equipo BECKMANN
DU-7000 empleando soluciones etanlicas al 98 %; las longitudes de onda se expresan en nm. Los espectros de RMN de
1H y 13C se realizaron en un espectrmetro JEOL eclipse a
400 y 100 MHz, respectivamente, utilizando DMSO-d 6 y
CDCl3 como disolventes y las seales de los protones remanentes de los disolventes deuterados como referencia interna.
Los espectros de masas se determinaron a 70 eV en un espectrmetro Hewlett Packard 5989A, acoplado a un cromatgrafo
de gases Hewlett Packard 5990 serie II; los datos se expresan
en relacin m/z.
6-amino-3-propiluracilo (7). En un matraz de fondo redondo
de 50 mL, provisto de refrigerante para reflujo, se prepara una
suspensin de 5.08 g (40 mmol) de 6-aminouracilo, en 12.65
ml (60 mmol) de HMDS y 0.243 g (1.92 mmol) de (NH4 ) 2
SO 4; la mezcla se calienta bajo atmsfera de argn y agitacin
magntica hasta llegar al reflujo con lo cual se obtiene una
solucin transparente y homognea; despus de 15 minutos se
disminuye la temperatura (40-50 C), se aaden 3.9 mL (40
mmol) de yoduro de n -propilo y el medio de reaccin se
calienta hasta reflujo. La reaccin se monitorea por CCF usando como eluyentes CH2Cl2 : CH 3 OH (9:1) hasta la desaparicin de la materia prima (aprox. 3 h). Se deja enfriar hasta 40
C y se aaden 20 mL de solucin saturada de Na2S 2O 3 (45g /
100 mL) con lo cual se obtiene una suspensin que se agita
durante 30 minutos y a continuacin se agregan lentamente 20
mL de solucin saturada de NaHCO3 . Se filtra al vaco, se
enjuaga con agua fra, benceno y finalmente con ter dietlico.
Rendimiento: 92 %. Polvo blanco amorfo: pf 267-269 C (lit.
275 C [14]); UV (EtOH) max () 261 (3508) nm; IR (KBr)
max 2930, 1741, 1631 cm1; RMN 1H (DMSO-d6 , 400 MHz)
6.32 (2H, b, -NH 2 ), 4.53 (1H, s, H-5), 3.59 (2H, t, -CH2 -N3, J=7.32 Hz), 1.46 (2H, m, -CH2 CH 2C H3 , 7.32 Hz), 0.80,
(3H, t, -CH2CH 2 CH 3 , J=7.32 Hz); RMN 13C (DMSO-d 6 , 100
MHz) 163.67 (C-4), 154.53 (C-2), 151.92 (C-6), 74.66 (C-

Figura 4

134

Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

5), 21.52 (-CH2CH 2 CH3 ), 11.73 (-CH2CH 2 CH3 ); EMIE: m/z

(int. rel.): 169 [M]+ (22), 127 (100).
6-amino-5-nitroso-3-propiluracilo (8). En un matraz de 50
ml equipado con embudo de adicin, barra magntica y atmsfera inerte se disuelve 7 (5 mmol, 0.84 g) en AcOH al 80
%, se comienza a agregar 10 mmol (0.69 g) de NaNO 2 disuelto en 5 mL de agua durante un lapso de 45 minutos. Al caer
las primeras gotas, la solucin cambia de color (de blanquecina a violcea) y conforme se adiciona mas solucin de
NaNO 2 , aparece un sobrenadante naranja o amarillo intenso.
Al finalizar la adicin de la solucin de NaNO2 se deja en
agitacin vigorosa durante 40 minutos ms y se enfra a 0 C
para que el producto precipite. Se filtra al vaco y se enjuaga
con agua fra. Se seca en un desecador al alto vaco. Rendimiento: 79 %. Polvo amarillo amorfo: pf > 300 C; UV
(EtOH) max () 320 (5920) nm; IR (KBr) max 3294, 3185,
1511 cm1; RMN 1 H (DMSO-d6, 400 MHz) 11.37 (1H, b,
N 1 -H), 3.79 (2H, t, -C H 2 -N-3, J=7.32), 1.60 (2H, m, CH 2 CH 2 CH 3 , J=7.32), 0.89 (3H, t, -CH2 CH 2 CH 3 , J=7.32);
RMN 13C (DMSO-d 6 , 100 MHz) 161.84 (C-4), 150.27 (C2), 145.49 (C-6), 140.31 (C-5), 40.23 (-CH 2 -N-3), 21.37 (CH 2CH 2CH 3 ), 11.76 (-CH2 CH 2CH 3).
5,6-diamino-3-propiluracilo (9). En un matraz de 100 mL
provisto con barra de agitacin y canasta de calentamiento, se
prepara una solucin de 10 mmol (1.98 g) de 6-amino-5nitroso-3-propiluracilo (8) en 50 mL de NH 4 OH al 12.5 %
acuoso, la solucin color rojo intenso se calienta hasta que
alcance una temperatura cercana a los 70 C, enseguida se
comienza a agregar el Na 2 S2 O4 (aproximadamente 3 equivalentes, 0.522 g) en pequeas porciones durante un lapso de 10
minutos. La cantidad que se agrega debe ser suficiente para
que la solucin se decolore. Inmediatamente se destila el agua
al vaco hasta que queden aproximadamente 15 mL de agua,
con lo cual se forma un precipitado cremoso, que se filtra rpidamente al vaco y se somete a la prxima reaccin debido a
su inestabilidad ante el ambiente. Rendimiento: 60-65 %.
Agujas cristalinas amarillas, descomponen antes de fundir.
(E)-6-amino-5-estirilcarboxamido-3-propiluracilo (10). En
un matraz de fondo redondo, provisto de barra de agitacin y
atmsfera inerte se prepara una suspensin de 6.5 mmol (1.19
g) de 5,6-diamino-3-propiluracilo (9), 6.5 mmol (1.18 g) de
cido trans-cinmico y 6.5 mmol (1.2 g) de EDC en 60 mL de
solucin al 50 % de CH3 OH y se deja en agitacin constante.
La reaccin se sigue por placa (CH2Cl2 : CH3 OH, 9:1) hasta
que se consuma la materia prima (aprox. 10 h). Se enfra la
suspensin a 0 C y el precipitado formado se filtra al vaco
dentro de la campana de extraccin. El precipitado se enjuaga
con agua fra y despus con CH3 OH helado. Se seca al alto
vaco. Rendimiento: 76.9 %. Polvo blanco amorfo: descompone antes de fundir; UV (EtOH) max () 272 (6670) nm; IR
(KBr) max 3318, 3187, 1648 cm1; RMN 1 H ( DMSO-d6 , 400
MHz): 8.7 (1H, b, NH amida), 7.41 (6H, m, 5 arom. y CH=), 6.85 (1H, d, -CH=, J=16.08), 6.11 (2H, b, -NH2), 3.6

Alejandro Muoz-Zurita et al.

(2H, t, -CH 2-N-3, J= 6.2), 1.5 (2H, m, -CH2 CH2 CH 3, J= 7.32),

0.81 (3H, t, -CH2CH 2 CH 3 , J= 7.32); RMN 13 C (DMSO-d 6 ,
100 MHz): 165.58 (C=O amida), 161.15 (C-4), 150.49 (C6), 150.39 (C-2), 139.44(-CH=), 135.50 (arom.), 130.04
(arom.), 129.55 (arom.), 128.04 (arom.), 122.93 (=CH-),
87.69 (C-5), 40.20 (-CH 2-N-3), 21.50 (-CH2 CH2 CH 3), 11.76
(-CH 2 CH2 CH3 ).
(E)- 6-amino-1-butil-5-estirilcarboxamido-3-propiluracilo
(11). En un matraz de fondo redondo de 50 mL, provisto con
barra de agitacin y atmsfera inerte, se disuelve 1 mmol
(0.314 g) de 10 en 5 mL de DMF, a la solucin se agrega 1
mmol (0.138 g) de K2 CO 3 y posteriormente se aaden 1.5
mmol de CH3 (CH2 ) 3 Br y se deja en agitacin constante; la
reaccin que se va siguiendo por CCF (CH2 Cl2 : CH 3OH, 9:1),
hasta que se consuma el material de partida. Se agregan 8 mL
de agua destilada y se forma un precipitado blanquecino que
se enfra a 0 C y posteriormente se filtra al vaco. Se purifica
al disolverse en 5 mL de DMF y precipitando por la adicin
de 10 mL de agua, se filtra al vaco y se seca adicionando 15
mL de ter dietlico. Rendimiento: 66 %. Polvo blanco amorfo: pf 273-274 C; UV (EtOH) max () 271 (8523) nm; IR
(KBr) max 3319, 1731, 1652 cm 1 ; RMN 1 H (CDCl3 , 400
MHz): 8.14 (1H, b, -NH amida), 7.30 (5H, m, arom.), 6.76 y
7.55 (1H, d, -CH=, J=15.36), 5.82 (2H, b, -NH2 ), 3.78 (4H, m,
-CH 2-N-1 y -CH 2-N-3, J=7.32), 1.58 (4H, m, -CH2CH 2CH 3 , y
-CH2 CH2 CH 2CH 3 , J=7.32), 1.36 (2H, m, -CH2 CH2 CH 2 CH3 ,
J=7.32), 0.91 (3H, t, -CH2 CH 2 CH 3 , J=7.32), 0.88 (3H, t, CH 2C H2 CH 2 CH 3 , J=7.32); RMN 13 C (CDCl 3 , 100 MHz)
165.89 (C=O amida), 160.13 (C-4), 150.06 (C-6), 148.52 (C2), 142.17 (arom.), 134.41 (-CH=), 130.06 (arom.), 129.39
(arom.), 128.90 (arom.), 128.03 (arom.), 119.88 (=CH-),
92.05 (C-5), 43.43 (-C H 2 -N-3), 43.20 (-CH 2 -N-1), 30.11
(-CH 2 C H 2 C H 2 C H 3 ), 21.20 (-CH2 C H 2 C H 3 ), 20.09 (C H 2 CH 2 C H 2 C H 3 ), 13.75 (-CH 2 C H 2 C H 3 ), 11.37 (CH2 CH2 CH 2CH 3).
(E)-3-butil-8-estiri1-1-propilxantina (12). Se solubiliza 1
mmol (0.369 g) de 11 en 4 mL de solucin de KOH al 20 %,
se adicionan 30 mL de metanol, se calienta hasta reflujo durante 3 horas, la reaccin se monitorea por CCF (CH 2 Cl2 :
CH3 OH, 9:1). Cuando se ha consumido la materia prima se
adiciona lentamente HCl conc. hasta que el pH ~3. Se enfra
para precipitar el producto, posteriormente se filtra al vaco y
se adicionan 15 mL de agua fra, finalmente se seca adicionando 15 mL de ter dietlico. Rendimiento 69 %. Polvo blanco amorfo: pf 278-280 C; UV (EtOH) max () 342 (8785)
nm; IR (KBr) max 3388, 1705, 1662, 1642 cm 1; RMN 1 H
(CDCl3 , 400 MHz): 13.20 (1H, b, N-H), 7.36 (5H, m,
arom.), 7.09 y 7.77 (1H, d, -CH=, J= 15.36), 4.19 (2H, t, CH2 -N-3, J=7.32), 4.11 (2H, t, -CH 2 -N-1, J=7.32), 1.80 (4H,
m, 2 -CH 2 CH2 CH3 y -CH2CH 2 CH2 CH3 , J=7.32), 1.43 (2H, m,
-CH2 CH 2 CH 2 C H 3, J=7.32), 0.99 (6H, m, -CH 2 C H 2C H 3 Y
CH2 CH 2 CH 2CH 3 , J=7.32); RMN 13 C (CDCl3 , 100 MHz):
156.00 (C-6), 151.40 (C-2 ), 150.98 (C-8), 149.9 (C-4),
137.03 (=C-), 135.71 (arom.), 129.39 (arom.), 128.98 (arom.),

Efecto de la (E)-3-butil-8-estiril-1-propilxantina sobre la asimetra motora en rata

127.28 (arom.), 115.39 (-C=), 107.37 (C-5), 43.83 (-CH2 -N3), 43.61 (-CH 2 -N-1), 30.16 (-CH2 CH 2 CH 2 C H 3 ), 21.5 (CH 2 CH 2 C H 3 ), 20.11(-CH 2 C H 2 CH 2 CH 3 ), 13.88(-CH 2 C H 2
CH 3 ), 11.51 (CH2 CH 2 CH 2 CH 3 ); EMIE: m/z (int. rel.): 352
[M]+ (100).

Agradecimientos
A.M.-Z. agradece al Consejo Nacional de Ciencia y Tecnologa el apoyo econmico otorgado a travs de la beca crdito
121993.

Bibliografa
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Revista de la Sociedad Qumica de Mxico, Vol. 46, Nm. 2 (2002) 136-139

Investigacin

Evidence for a Strained Cyclic Allene in the Ring Closure Reaction

of Enynylketenes
Mario Fernndez,*1 Alejandro Ramrez,2 Ramn Hernndez,1 Mario Ordez 1
1

Centro de Investigaciones Qumicas, Universidad Autnoma del Estado de Morelos, Av. Universidad 1001.
Chamilpa, Cuernavaca 62210, Morelos, Mxico. Tel/Fax: 01(777) 329-7997; E-mail: [email protected]
2 Facultad de Ciencias, Universidad Autnoma del Estado de Morelos
Recibido el 20 de febrero del 2002, aceptado el 19 de junio del 2002
Abstract. We show in this paper using HF and MP2 ab initio calculations that the ring closure of 5 generates an intermediate best described as the closed-shell cyclic allene 6a, instead of the usually assumed diradical nature reported in the literature. This intermediate then
gives rise to the formation of 7. The closed-shell cyclic allene nature
of the lowest-lying singlet was confirmed using CASSCF calculations.
Keywords: cyclic allene, Hartree-Fock, MP2, CASSCF, benzoquinones.

Resmen. Utilizando clculos HF y MP2 ab initio, demostramos que

la reaccin de ciclizacin de 5 genera un intermediario cuyas caractersticas concuerdan con las de un aleno cclico de capa cerrada 6a
en lugar de la usualmente aceptada naturaleza diradiclica reportada
en la literatura. Este intermediario, posteriormente da lugar a la formacin de las benzoquinonas 7. La naturaleza de aleno cclico de
capa cerrada fue confirmada con clculos CASSCF.
Palabras clave: aleno cclico, Hartree-Fock, MP2, CASSCF, benzoquinonas.

Introduction

our previous results. We present results concerning the lowest

singlet and triplet states since theses multiplicities characterize
the cyclic allene and the diradical species respectively.

Strained cyclic allenes have recieved considerable attention in

the literature regarding their bonding and reactivity [1]. Since
allenes in rings with less than nine members can not adopt
their preferred linear geometry, several structures have been
proposed for singlet 1,2-cyclohexadiene, suggesting that they
could exist as dipolar or diradical species [2].
We have recently reported [3] using Hartree-Fock Self
Consistent Field (HF) and single reference frozen-core second
order Mller-Plesset (MP2) ab initio calculations that the ring
closure of dienyne 1 generates an intermediate that can best be
described as the cyclic allene 2 and not the diradical form 3
(Scheme 1), in agreement with earlier literature reports in which
the cyclic allene 1,2-cyclohexadiene is favored over other
species [4].
In the light of the above result, we decided to analyze the
last step of the original Moores benzoquinone synthesis [5]
(Scheme 2) using ab initio calculations. The main goal of this
study is to characterize the nature of the intermediate obtained
by the ring closure of 5 as the diradical 6, as it has been postulated in the past [6], or the cyclic allene 6a, in analogy with
O
O

OCH3

OCH3
Ph

Ph
CH3 O

CH3O

CH3 O

Scheme 1

CH3 O
or

OTMS

OCH3

TMS

Theoretical calculations
In order to achieve our goal, we performed HF, UHF and MP2
full geometry optimizations using the standard 6-31G** basis
of the Gaussian-94 program [7] on both structures 6 and, 6a
presented in Scheme 2 and on simpler models of these in
which the phenyl group is replaced by a hydrogen atom respectively and referred to as structures 8 and 9. The triplet spe-

CH3 O

. .
O
3

CH3O

O
Ph

Ph

CH3 O

CH3O

OR

OR
5

OCH3
OCH3
Ph

CH3 O

O
Ph

CH3O

Ph

or
CH3 O

TMS

R
O

6a

R = H, allyl, Si(CH 3 )3

Scheme 2

CH3 O

CH3O

CH3 O

Ph

O
R
6

Evidence for a Strained Cyclic Allene in the Ring Closure Reaction of Enynylketenes

O
CH3 O

CH3O

CH3O

CH3O

10

cies were also calculated for the simpler models using unrestricted Hartree-Fock (UHF) and unrestricted Mller-Plesset
(UMP2) calculations.
It must be said that an open-shell singlet state (the counterpart of the lowest triplet state) must also exist and that we
have tried to obtain this state through UHF calculations starting from the triplet state; however even though during the first
few SCF cycles the open-shell state was lower in energy, after
8 iterations the closed-shell singlet state turned out to be
favored. The stability of this closed-shell solution was tested
(including HF instabilities) by using the Stable=Opt option in
the G98 program.
The most important result of these calculations is that the
strained cyclic allene structure 6a corresponds to the ground
state of the intermediate rather than the diradical 6. For structure 8 our UHF calculations predict a triplet ground state
which lies 27.15 kcal / mol below the optimized singlet structure, while at the UMP2 level the singlet is favored as the
ground state by 19.6 kcal / mol. These findings are in agreement with the common observation that the HF description
favors the higher multiplicities but electron correlation effects
are larger for the closed-shell species and thus we expect that
higher level calculations will not modify the present results. It
is important to mention that for structure 9 we did not anticipate a low energy triplet state and in fact, our calculations predict a singlet ground state 18.9 kcal / mol below the triplet at
the UHF level and 81.0 kcal / mol at the UMP2 level. It is interesting to know that correlation effects are crucial to obtain
reliable singlet-triplet energy gaps for these molecules.
We are confident that the conclusions derived for the simpler models 8 and 9 should hold for the actually synthesized
structure 7 derived from intermediate 6 or 6a since we have
performed HF and MP2 optimizations on the singlet states of

O
1

CH3O

CH3O

H
2

CH3O

5
4

10

HF-singlet

MP2-singlet

C2 -C3
C3 -C4
C4 -C5
C5 -C6

C2 -C3
C3 -C4
C4 -C5
C5 -C6

1.33
1.43
1.43
1.34

Bond Distances (A)

1.34
1.35
1.46
1.37

C 1 -C2
C 2 -C3
C 3 -C4
C 4 -C5
C 5 -C6
C 6 -C1

CH3O

H
3

5
4

11

HF-triplet

Scheme 3

CH3O

CH3O

CH3O

CH3 O

Scheme 4

137

1.44
1.35
1.39
1.41
1.38
1.45

MP2-triplet
C2 -C3
C3 -C4
C4 -C5
C5 -C6

1.31
1.44
1.35
1.41

Bond Distances ( A )

Scheme 5

these latter molecules and have found that the presence of the
phenyl group has a very small effect on the geometry (i.e. the
internuclear distances between carbon atoms that define the
cyclic allene structure). This implies that in Scheme 1 the
reaction intermediate is a singlet cyclic allene and there is little chance that the triplet diradical can play a role in the reactivity of these systems. This is contrary to the usual assumptions made for these type of chemical reactions. The existence
of diradical character has been found for structure 8 at the
UHF level for the triplet state by graphically analyzing the
spin density and it corresponds to the chemical drawing
depicted for structure 6 (without the phenyl group) in agreement with chemists conventional wisdom.

Structures
The analysis of the optimized geometries for structures 8 and
9 indicates significant differences depending on the level of
theory used and on the multiplicity of the state considered.
First we discuss the distinctive features of the allene moiety in
the singlet state using the molecular structures 8 and 9 of
Scheme 3. We must stress that the ground state singlet 8
turned out to be as it was confirmed by the previously mentioned CASSCF calculations- the closed-shell cyclic allene
and that the diradical species 9 lie well above the cyclic
allene.
The conventional picture would propose three double
bonds linking atoms C2 -C 3 , C3-C4 and C 5 -C 6 and a single bond
between C 4 -C 5 in the ring. However at the HF level structure 9
is better describes as structure 10 where the bond lengths C3 C4 and C4 -C 5 are intermediate between a single and a double
bond (1.43 ). The previously mentioned conventional picture
is reproduced at the MP2 level as can be seen in structure 8 of
Scheme 4. At both levels of theory we find that the six-membered ring is non-planar, it has a conformation which can be
described as boat with carbon atoms C4 and C1 out of the
plane, the former being significantly more bent.

138

Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

The final feature which we consider worth of mentioning

is the different orientation of the methoxy groups depending
on the level of calculation. At the HF level the methoxy group
linked to carbon C6 lies in the plane of the ring while the
methoxy linked to carbon C 5 is facing downwards. Even
though we used this geometry as starting point for the MP2
optimization, the converged structure has the methoxy linked
to C5 planar and the other methoxy facing upwards. It should
be mentioned here that we did not search for all possible stable conformers for these molecules.
The most striking features for the triplet state of structure
10 (Scheme 3) are that the six-membered ring becomes planar
and the C 3 -C 4 and C 4 -C 5 bond lengths (Scheme 5) change dramatically compared with the singlet state.
At the HF level, structure 10, the C3 -C4 distance is reduced to a value intermediate between a single and a double
bond and a similar change is observed in the C4 -C 5 bond but
to a lesser extent. At the MP2 level, structure 11, the single or
double bond nature of the C3 -C 4 and C 4 -C 5 bonds is the opposite of what was found for the singlet state, i.e., the C3 -C 4
bond is weakened while the C4 -C 5 bond becomes a double
bond. Comparing the quantitative geometrical data of the
structures in Scheme 4 and Scheme 5, we must conclude that
the HF description leads to completely unreliable results for
the cyclic allene (singlet) as well as for the diradical (triplet)
species. Thus electronic correlation effects are crucial in describing these molecular systems
This type of molecules represent a true challenge for
modern quantum chemistry given the competition between
closed and open-shell structures (singlet as well as triplet
states) and their size and stereochemical complexity.
We are presently working on systematic description of
these molecules using a variety of ab initio and DFT methods
in analogy to the work which is currently being done on the
Myers-Saito and Schmittel cyclizations [8], cyclizations
which have also been the subject of several important recent
theoretical studies. However, one of the important differences
with our problem at hand is that the active electrons in these
structures are always found on carbon atoms, while in our intermediate molecule an oxygen atom linked to a six-membered ring is involved.
In the newest and most complete study dealing with the
highly reactive nature of the diradicals involved in the MyersSaito and Schmittel cyclizations the emphasis is therefore put
only on the study of singlet and triplet open-shell species [8c].
However, if the main question is aimed at finding the most
stable structure of these type of molecules, we think that crucial information is missing regarding the energetic position of
the closed-shell singlet structure, which was not envisaged in
that work. In fact, as was shown in a pioneering ab initio work
concerning the 1,2, cyclohexadiene by Schmidt et al. [9], it is
the closed-shell singlet structure the one which is favored over
the singlet open-shell diradical species. However we must
stress that the latter one can actually play a major role in the
reactivity of this molecule.

Mario Fernndez et al.

In order to give further support to our results and conclusions, we have performed state-averaged CASSCF calculations on the two lowest roots for the singlet species, we found
that the lowest root corresponds to the closed -shell species, as
we had already shown. However, in order to obtain a more reliable energy difference between the closed-shell and the singlet diradical, we tried to optimize the orbitals for the second
root aiming at state specific CASSCF calculation for the singlet diradical (using the triplet biradical orbitals as starting
point). Unfortunately this was not possible as convergence
problems were found. Pursuing these calculations further
would be a very time consuming task and is out of the scope
of this work.

Conclusions
Our calculations show that the most stable intermediate in the
Moore benzoquinone synthesis is the cyclic allene 6a and not
the diradical 6. We have confirmed the presence of the diradical as a triplet at 19.6 Kcal / mol above the cyclic allene. We
have also observed very strong changes on the electronic
structure as the molecule passes from singlet to triplet nature,
this being based on the fact that the lowest singlet is not related to the two-open-shell diradical. Finally, there are also
strong effects (structurally and energetically) arising from the
non-dynamical electronic correlation on both, the allene and
the diradical which show the limitation of using single-configuration based methods on these systems.

Acknowledgements
The authors wish to thank CONACyT for providing financial
support for this work through projects 3112P-E9607, 34673-E
and 3446E.

References
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Al-Laham, M. A.; Zakrzewski, V. G.; Ortz, J.V.; Foresman, J. B.;
Cioslowski, J.; Stefanov, B. B.; Nanayakkara , A.; Challacombe,
M.; Peng, C.Y.; Ayala, P.Y.; Chen, W.; Wong, M.W.; Andres,
J.L.; Replogle, E. S.; Gomperts, R.; Martin, R.L.; Fox, D.J.;
Binkley, J. S.; Defrees, D. J.; Baker, J.; Stewart, J. P.; HeadGordon, M.; Gonzlez, C.; Pople, J. A. Gaussian, Inc., Pittsburgh
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139

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Revista de la Sociedad Qumica de Mxico, Vol. 46, Nm. 2 (2002) 140-144

Investigacin

Preparacin, caracterizacin y efecto de la temperatura de fijacin

del pilar en la adsorcin de vapor de agua de una arcilla pilarizada
de aluminio
Socorro Lpez,1 Guillermo Osorio,2 Tzayhr Gallardo1* y Sofa Arellano1
1

Escuela Nacional de Ciencias Biolgicas (ENCB-IPN); Departamento de Biofsica. Plan de Ayala y Carpio s/n, Col. Santo
Toms. Mxico 11340, D.F. Tel. (52) 5729-6000, Ext. 62305; Fax/Tel: (52) 5341-2335; E-mail: [email protected]
2 Departamento de Ingeniera Bioqumica, Escuela Nacional de Ciencias Biolgicas (ENCB-IPN)
Recibido el 8 de febrero del 2002; aceptado el 20 de junio del 2002
Resumen. En este trabajo se prepar una arcilla pilarizada de aluminio (Al-PILC) a partir de una arcilla natural mexicana. Estas
fueron caracterizadas por anlisis qumico, termogravimtrico y
difraccin de rayos X, los cuales dieron evidencia del proceso de pilarizacin. El efecto de la temperatura de fijacin del pilar en la adsorcin de vapor de agua de la Al-PILC se evalu por medio de las
isotermas de adsorcin a 23 C. Las temperaturas de fijacin del pilar
utilizadas fueron 200, 300, 500 y 900 C. Los resultados indicaron
que la mayor adsorcin de vapor de agua se obtuvo a una temperatura
de fijacin de 200 C, diminuyendo con el aumento en la temperatura
de fijacin del pilar. Se aplicaron los modelos de GAB (Guggenheim,
Anderson & Boer) y HJ (Harkins & Jura) a las isotermas de la AlPILC, encontrando que el modelo de GAB se ajusta en todo el intervalo de humedades relativas, por lo que se recomienda su aplicacin
para este tipo de materiales adsorbentes inorgnicos.
Palabras clave: Arcilla pilarizada, adsorcin de vapor de agua, isotermas de sorcin de PILCs, modelos de isotermas.

Abstract. An aluminium pillared clay (Al-PILC) was prepared from

a Mexican natural clay. Both clays were characterized by chemical
analysis, thermogravimetric analysis and X-ray powder diffraction,
giving evidence of the intercalation of the aluminium pillars in the
interlayer space of the clay. The effect of the fixing pillar temperature
(200, 300, 500 and 900 C) on the water vapor adsorption capacity of
the Al-PILC was studied comparing their water vapor adsorption
isotherms at 23 C. The Al-PILC prepared at a fixing pillar temperature of 200 C showed the highest water vapor adsorption capacity.
This capacity decreased as the fixing pillar temperature increased.
The GAB (Guggenheim, Anderson & Boer) and HJ (Harkins & Jura)
isotherm models were applied to the experimental data, obtaining that
the GAB model described them in the whole relative humidity range
and therefore its use is recommended for inorganic adsorbents.
Keywords: Pillared clays, water vapor adsorption capacity, PILCs
sorption isotherms, isotherms models.

Introduccin

que las obtenidas con otros polihidroxicationes. Estas propiedades les confiere un gran atractivo para ser utilizadas como
catalizadores en la industria del petrleo [7]. Dadas las caractersticas de termoestabilidad, tamao de poro y superficie
especfica, las Al-PILC tienen gran potencialidad de ser
empleadas como adsorbentes en otras aplicaciones [8]. Con
base en lo anterior, se plante en el presente trabajo el estudio
de la capacidad de este material de adsorber vapor de agua
para su eventual utilizacin como material desecante. Con este
fin, se prepar y caracteriz una arcilla pilarizada de aluminio
y se estudio su capacidad de adsorcin de vapor de agua a
diferentes temperaturas de fijacin del pilar. Adems, debido a
su naturaleza porosa, se aplicaron los modelos matemticos de
GAB y Harkins & Jura a las isotermas de sorcin para seleccionar aquel que mejor representara el fenmeno.

Las arcillas son hidrosilicatos con estructuras laminares con

tomos ordenados en grupos de planos paralelos y unidos
fuertemente entre s en forma de lminas. Dentro del espacio
interlaminar se encuentran cationes como Ca 2+, Na +, Mg2+ y
K + entre otros, susceptibles al intercambio catinico [1]. Esta
propiedad se puede aprovechar para modificar la naturaleza de
su espacio interlaminar, lo que ha permitido preparar arcillas
pilarizadas o PILC (Pillared Interlayer Clay) [2]. Estos materiales se preparan a partir de arcillas tipo esmectita, modificadas por la intercalacin de polmeros inorgnicos que, por
un tratamiento trmico, forman una galera de pilares entre
las laminillas estructurales de la arcilla. Como resultado se obtiene un material arcilloso poroso de una gran superficie
especfica [3]. El inters por estos materiales ha crecido
enormemente desde su introduccin, habindose preparado
PILCs a partir de polihidroxicationes de Zr, Fe, Ni, Cu, Cr, y
Al [4], [5]. Las PILCs as obtenidas presentan diferentes caractersticas de superficie especfica, tamao de poro y termoestabilidad, dependiendo de la naturaleza del polihidroxicatin intercalado [6]. Las PILCs de aluminio presentan una
notable termoestabilidad y dimetro de poro del mismo orden

Materiales y mtodos
Arcilla original y modificada. La arcilla original utilizada en
este trabajo fue una bentonita proporcionada por la Industria
Inertes y Filtrantes de la Ciudad de Mxico, la cual se tamiz a
travs de una malla No. 65 (dimetro 0.210 mm).

Preparacin, caracterizacin y efecto de la temperatura de fijacin del pilar en la adsorcin...

La arcilla pilarizada de aluminio (Al-PILC) se prepar siguiendo el mtodo de Torkaz y Shabtai [4] que consisti en
poner en contacto una solucin del agente pilarizante con la
arcilla natural en una relacin equivalente a 3 mmoles Al / g
de arcilla, en agitacin constante durante 15 h. Posteriormente
se filtr la arcilla y se lav con agua desionizada hasta prueba
negativa de cloruros. La fijacin del pilar se realiz tratando
las muestras durante 24 h a las temperaturas de 200, 300, 500
y 900 C. El agente pilarizante se prepar adicionando lentamente una solucin de hidrxido de sodio 0.2 N a una solucin 0.2 N de Al(OH)3 .6H2 O hasta obtener un pH de 4.35 que
corresponde a una relacin OH / Al de 1.85. Esta solucin se
mantuvo en reflujo durante 6 h.
Caracterizacin de las arcillas. La caracterizacin de la
arcilla natural y pilarizada se llev a cabo por anlisis qumico, termogravimetra y difraccin de rayos X.
El anlisis qumico se realiz utilizando la tcnica de
fusin con una mezcla de carbonatos de sodio-potasio, determinando la composicin qumica de las arcillas por espectroscopa de absorcin atmica y gravimetra [9].
El anlisis termogravimtrico (TG) y termogravimtrico
diferencial (DTG) de las arcillas se realiz en un Termoanalizador AT Modelo 1090 en el intervalo de temperatura de 25900 C a una velocidad de 10 C / min. Para obtener evidencias de pilarizacin [10], se calcularon, a partir de los termogramas, las prdidas de peso en tres intervalos de temperatura:
a) 25-200, b) 200-500 y c) 500-900 C.
Los difractogramas de rayos X se obtuvieron en un difractmetro Siemmens D-500 con filtro de niquel y radiacin
de Cu K operado a 30 kV y 20 mA. Los valores de la
primera reflexin d(001) determinados mediante la ecuacin
de Bragg fueron utilizados para calcular la distancia interlaminar de las arcillas (d), restando al valor d(001) el espesor de
las lminas de silicato (9.5 ) [11].
Superficie especfica. La evaluacin de la superficie especfica de las arcillas, se llev a cabo analizando por el modelo de
BET las isotermas de N2 obtenidas a 196 C mediante un
analizador automtico C.I. Electronics LTD Mark 2.
Adsorcin de vapor de agua. El estudio de la adsorcin de
vapor de agua se realiz determinando las isotermas de sorcin de las muestras, por el mtodo de la cmara de equilibrio
a humedad relativa (H.R) constante [12]. El mtodo consiste
en colocar una pequea muestra de material en una cmara a
humedad relativa constante, dejando que se logre el equilibrio
y determinando el contenido de humedad adsorbida por
gravimetra. La H.R se control con soluciones de cido
sulfrico a diferentes concentraciones [13] verificndola con
un higrmetro digital Cole Parmer 37950-00. El efecto de la
temperatura de fijacin del pilar sobre la adsorcin de vapor
de agua de la Al-PILC se obtuvo determinando la isoterma de
adsorcin de cada una de las arcillas preparadas a las diferentes temperaturas de fijacin (200, 300, 500 y 900 C).

141

Resultados y discusin
Caracterizacin de la arcilla original y pilarizada (AlPILC). En la Tabla 1 se presentan los resultados del anlisis
qumico en % base seca, de la arcilla original y la arcilla pilarizada de aluminio (Al-PILC), as como la composicin calculada de esta ltima en base a 100 g de arcilla original (SiO2
constante). Estos resultados indican que para una base de SiO2
constante, la cantidad de aluminio en la Al-PILC, aument de
20.1 a 31.8 g (58 % de aumento), mientras que la cantidad de
Fe, Ca, Mg, Na y K disminuyeron, lo que indica que el polihidroxicatin de aluminio se introdujo en el espacio interlaminar a expensas de los cationes intercambiables, lo cual es evidencia del proceso de pilarizacin.
Los termogramas TG y DTG de la arcilla original y pilarizada se presentan en la Fig. 1, dividiendo los termogramas
en tres etapas. Las prdidas de peso correspondientes a cada
etapa, se presentan en la Tabla 2. La prdida de peso obtenido
en la primera etapa (25-200 C) corresponde a la eliminacin
de agua adsorbida entre las lminas para ambas arcillas. Se
observa una mayor prdida de peso para la Al-PILC debido a
la mayor cantidad de agua adsorbida por la presencia de los
OH de los pilares intercalados en el espacio interlaminar. La
prdida de peso en la segunda etapa (200-500 C), est relacionada con la remocin de grupos hidroxilo de los extremos
de las lminas de la arcilla original y de los pilares en el caso
de la Al-PILC, por lo que, en esta ltima, nuevamente la prdida de peso fue mayor que en la arcilla original, debido al
nmero de grupos hidroxilo introducidos en el espacio interlaminar durante la pilarizacion de la arcilla. Finalmente, la
prdida de peso en la tercera etapa (500-900 C) para la arcilla
original, corresponde a la deshidroxilacin estructural interna
de las lminas arcillosas que es caracterizada por el pico
endotrmico en la grfica DTG alrededor de los 660 C. En
esta etapa la Al-PILC present una prdida de peso considerablemente mayor (Tabla 2) que la de la arcilla natural. La
desaparicin del pico endotrmico de la Al-PILC en el DTG,
puede indicar que en esta ltima se establecieron nuevos tipos
de enlaces qumicos entre los pilares y las lminas de la arcilla. El perfil general de las curvas TG y DTG, concuerdan con
lo reportado por Occelli [5] para una arcilla pilarizada de aluminio en comparacin con la bentonita original.
La Fig. 2 muestra los difractogramas obtenidos para la
arcilla natural y para la Al-PILC a una temperatura de fijacin
del pilar de 200 C. En esta figura se puede observar el
desplazamiento del ngulo de la primera reflexin d(001) a
valores menores de 2, ocasionado por la expansin del espacio interlaminar de la arcilla por el proceso de pilarizacin. En
la Tabla 3 se presenta el efecto de la temperatura de fijacin
del pilar sobre la primera reflexin d(001) y la distancia interlaminar d. En esta tabla se puede observar que la distancia
interlaminar en la PILC preparada a una temperatura de
fijacin de 200 C y 300 C, presenta la mxima distancia
interlaminar, mientras que a temperaturas mayores de fijacin
(500-900 C), la distancia interlaminar disminuye, debido a
que se va perdiendo la estructura pilarizada. En virtud de la

142

Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

Socorro Lpez et al.

Tabla 1. Anlisis qumico de la arcilla y AI-PILC.

105

Peso (%)

100

OXIDO

TG

ARCILLA
% en peso

Al-PILC % en peso
base: 100 g Al-PILC

70.3
20.1
2.5
1.8
2.8
2.0
1.0

65.5
29.6
1.5
0.2
1.9
1.0
0.6

95
90
85

II

III

80
0

200

400

600

800

1000

Temperatura (C)
0

200

400

600

800

1000

SiO2
Al 2O3
Fe 2O3
CaO
MgO
Na 2O
K2O

base: 100g
arcilla original
70.3
31.8
1.6
0.2
2.0
1.1
0.6

Tabla 2. Anlisis termogravimtrico. Prdida de peso (%).

-0.02

-dW/dT

-0.04

DTG

MUESTRA

-0.06

ETAPA 1
25-200 C

ETAPA 2
200-500 C

7.214%
10.57%

0.66 %
3.359 %

ETAPA 3
500-900 C

-0.08

Arcilla
Al-PILC

-0.1
-0.12
-0.14

II

0.6825 %
1.86 %

III

-0.16

Temperatura (C)

Fig. 1. Anlisis termogravimtrico (TG) y termogravimtrico diferencial (DTG) de la arcilla natural (-------- ) y la Al-PILC (
).

Tabla 3. Efecto de la temperatura de fijacin del pilar en la distancia

interlaminar de la AI-PILC.
Muestra
Arcilla
PILC 200C
PILC 300C
PILC 500C
PILC 900C

Fig. 2. Difractogramas de rayos X de arcilla natural mexicana y de la

Al-PILC (temperatura de fijacin del pilar 200 C).

destruccin estructural de la muestra, la distancia interlaminar

a 900 C no pudo ser determinada.
Superficie especfica. La Fig. 3 muestra las isotermas de
adsorcin desorcin de N2 de la arcilla natural y Al-PILC
empleadas para obtener la superficie especfica aplicando el
modelo de BET. La superficie especfica obtenida para la
arcilla natural fue de 74.8 m2 / g mientras que para la Al-PILC
fue de 240.3 m2 / g. El aumento de la superficie especfica en
la Al-PILC (equivalente a 321.3 %) es debido a la exposicin
de las regiones internas de la arcilla y de las superficies de los
pilares intercalados [4, 7].

d(001)

14.7
17.7
17.7
16.6
8.19

5.2
8.16
8.16
7.15
------

Adsorcin de vapor de agua. En la Fig. 4 se presentan las

isotermas de adsorcin para vapor de agua de las muestras AlPILCs preparadas a distintas temperaturas de fijacin del
pilar. Se observa de esta figura, que la Al-PILC preparada a la
temperatura de fijacin de 200 C present la mayor capacidad de adsorcin de vapor de agua y que al aumentar la temperatura de fijacin, la capacidad de adsorcin disminuye,
perdindose por completo a la temperatura de fijacin de 900
C. Este efecto es debido a la prdida paulatina de la estructura del pilar en la Al-PILC al ser tratada a temperaturas cada
vez mayores. Si se observan los resultados del espaciamiento
interlaminar y del anlisis termogravimtrico de la Al-PILC
(Tablas 2 y 3), se puede inferir que a temperaturas de fijacin
del pilar por arriba de 200 C, la estructura de los pilares cambia debido al proceso de deshidroxilacin, llegando a la destruccin total de la estructura a la temperatura de 900 C.
Tradicionalmente las isotermas de adsorcin de diversos
materiales adsorbentes, se han analizado utilizando los modelos de adsorcin propuestos por Langmuir y Brunauer Emmett
y Teller BET [16], [17]. Inclusive, las isotermas de adsorcin de nitrogeno de arcillas y arcillas pilarizadas se analizan
con el modelo de BET [15]. Sin embargo, si se observan las
isotermas de adsorcin de vapor de agua para la Al-PILC a las
temperaturas de fijacin de 200-500 C (Fig. 4), estas presentan una forma inusual para slidos microporosos que no se
ajustan a los modelos antes mencionados. Un modelo que ha
resultado ser muy exitoso para describir las isotermas de

Preparacin, caracterizacin y efecto de la temperatura de fijacin del pilar en la adsorcin...

143

0.5

0.4

X
0.3

0.2

0.1

0
0

Fig. 3. Isotermas de adsorcin (A) y de desorcin (B) de nitrgeno,

de la arcilla natural y de la Al-PILC.

adsorcin de vapor de agua de polvos alimenticios que son

descritos principalmente por isotermas del tipo II es la isoterma de Gugenheim-Anderson-Boer (GAB) [18]. Este modelo
cubre el intervalo de H.R de 0.0-0.9 que incluye la zona de
condensacin capilar. Las isotermas de la Fig. 4 se parecen a
aquellas de varios productos alimenticios, por lo que el modelo de GAB se aplic a las isotermas de vapor de agua de estos
materiales arcillosos. Otro modelo aplicable a materiales
porosos en el intervalo de humedades relativas de 0.3-1.0 que
cubre condensacin capilar, es el de Harkins y Jura (HJ) [19],
el cual tambin se aplic a las isotermas de la Fig. 4 para
tratar de describirlas.
La Fig. 5 presenta las isoterma a 23 C de la Al-PILC
(temperatura de fijacin de 200 C) y las correspondientes
isotermas de GAB y HJ, como ejemplo de los resultados
obtenidos con las dems isotermas (300-500 C tempratura de
fijacin del pilar). Esta figura indica que el modelo de GAB
representa adecuadamente la isoterma de adsorcin de la AlPILC en prcticamente todo el intervalo de H.R., mientras que
HJ se desva a valores superiores de 0.8 para la Al-PILC. Como ambos modelos cubre la zona de condensacin capilar, los
resultados mostrados en la Fig. 5 indican que aparentemente a
altos valores de H.R en los slidos estudiados, se presenta
condensacin capilar, lo cual deber ser corroborado en trabajos futuros.

0.25

0.2
200C
300C

0.15

500C
900C

0.1

0.05

0
0

0.2

0.4

0.6

0.8

H.R.

Fig. 4. Efecto de la temperatura de fijacin del pilar en la adsorcin

de vapor de agua de la Al-PILC a 23 C. X-gramos de agua / gramos
de slido seco, H.R.-humedad relativa.

0.2

0.4

0.6

0.8

H.R

Fig. 5. Isotermas de adsorcin de vapor de agua de la Al-PILC: datos

experimentales (); modelo de Harkins y Jura (--------) y modelo de
GAB (
). X-gramos adsorbidos de agua/g de slido seco, H.R. Humedad relativa.

Conclusiones
El anlisis qumico y termogravimtrico, comprobaron la
pilarizacin con el polihidroxicatin de aluminio de la arcilla
natural utilizada. La difraccin de Rayos X permiti comprobar que a consecuencia del proceso de pilarizacin, se present una expansin de la distancia interlaminar, de 5.2 para la
arcilla original a 8.16 para la Al-PILC.
Con el proceso de pilarizacin en la arcilla natural se
logr un incremento del 321.3 % del rea especfica (arcilla
natural: 74.8 m 2 / g; Al-PILC: 240.3 m2 / g).
La adsorcin de vapor de agua en la Al-PILC diminuy al
incrementar la temperatura de fijacin del pilar por arriba de
200 C debido a la deshidroxilacin de los pilares.
Las isotermas experimentales de la Al-PILC se ajustaron
al modelo de GAB en todo el intervalo de H.R. empleado, lo
que hace recomendable su uso no solo en materiales alimenticios como ha sido utilizado sino tambin en materiales adsorbentes inorgnicos.

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144

Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

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Revista de la Sociedad Qumica de Mxico, Vol. 46, Nm. 2 (2002) 145-158

Investigacin

A comparative ab initio Study of the Isomerizations and Hydrolyses

of neutral and anionic M-Pyrophosphate Complexes, with M = Ca, Zn
William J. McCarthy, 1 Ludwik Adamowicz,2 Humberto Saint-Martin3* and Ivn Ortega-Blake3
1

Biotechnology Center, Utah State University, Logan, Utah 84332, U.S.A.

Department of Chemistry, University of Arizona, Tucson, Arizona 85721, U.S.A.
3 Centro de Ciencias Fsicas, Universidad Nacional Autnoma de Mxico, Apartado Postal 48-3, Cuernavaca, Morelos 62251,
Mxico. E-mail: [email protected]
2

Recibido el 15 de febrero del 2002; aceptado el 25 de junio del 2002

Abstract. In this work ab initio calculations were performed on
anhydrous and monohydrated gas-phase calcium and zinc dications
chelated with various anionic pyrophosphate species: H 2P2O72 ,
HP2O73 and P2O74. The cleavage of the M-pyrophosphate into a metaphosphate and an orthophosphate coordinated by the dication was
also investigated. The studied isomerization reactions were [M
HNP2O7](2-N) [HN PO4MPO3](2-N) where N = 0, 1, 2, and M = Ca,
Zn. These reactions were also studied in the presence of one water
molecule and also with a continuum model to mimic the solvation
effects. It was found that the interaction with a water molecule stabilizes the pyrophosphates relative to their metaphosphate isomers.
Moreover, upon interacting with the dianionic complexes, the water
molecule readily breaks and produces a hydroxide anion: H2O + [M
P2O7]2 [HO M HP2O7]2. The latter dianionic complexes resulted virtually isoenergetic with the hydrolyzed [M (HPO4)2]2 complexes. The results were compared to previous data of magnesiumcontaining complexes. This comparative analysis shows that the differences in the structures imposed by the various cations may play an
important role in the allosteric transformations of the substrate, that
ultimately promote the hydrolysis. Though not conclusive, evidence
was found that Zn2+ has a similar oxidizing power on M-pyrophosphates as Mg2+, whereas the oxidizing power of Ca2+ is significantly
lower. Nevertheless, the electronic density on the M-pyrophosphates
and on the M-phosphates turned out to be very similar for the three
cations, and thus the main difference in their biochemical role when
interacting with phosphates stems from their different coordination
properties, that could even lead to the presence of a hydroxide anion
in the first hydration shells of Mg- and Zn-pyrophosphates.
Keywords: Pyrophosphate hydrolysis, metal cations, nucleophilic
substitution, coordination properties, ab initio calculations.

Resumen. En este trabajo se realizaron clculos ab initio de los dicationes calcio y zinc quelados con varias especies aninicas de pirofosfato, en la fase gaseosa, anhidros y monohidratados: H2P2O72,
HP2O73 y P2O74. Tambin se investig la separacin del M-pirofosfato en un metafosfato y un ortofosfato coordinados por el dicatin.
Se estudiaron las reacciones de isomerizacin [M HN P2O7](2-N)
[HNPO4MPO3](2-N) con N = 0, 1, 2, y M = Ca, Zn. Estas reacciones
tambin se estudiaron en presencia de una molcula de agua y tambin con un modelo continuo para simular los efectos de solvatacin.
Se encontr que la interaccin con una molcula de agua estabiliza
los pirofosfatos en relacin a sus ismeros con metafosfatos.
Adems, al interactuar con los complejos dianinicos, la molcula de
agua rpidamente se rompe y produce un anin oxidrilo H2O + [M
P2O7]2 [HO M HP2O7]2. Estos ltimos complejos dianinicos
resultaron virtualmente isoenergticos con los complejos hidrolizados
[M (HPO 4)2]2. Se compararon los resultados con datos previos de
complejos con magnesio. Este anlisis comparativo muestra que las
diferencias en las estructuras impuestas por los diversos cationes
puede jugar un papel importante en las transformaciones alostricas
del sustrato, que finalmente promueven la hidrlisis. Aunque no concluyente, se encontr evidencia de que Zn2+ tiene sobre los M-pirofosfatos un poder oxidativo similar al de Mg2+, en tanto que el poder
oxidativo de Ca 2+ es significativamente menor. Sin embargo, la densidad electrnica en los M-pirofosfatos y en los M-fosfatos result ser
muy similar para los tres cationes, y entonces la diferencia principal
en sus papeles bioqumicos cuando interactan con fosfatos proviene
de sus diferentes propiedades de coordinacin, que incluso podran
llevar a la presencia de un anin oxhidrilo en las primeras capas de
hidratacin de Mg- y Zn-pirofosfatos.
Palabras clave: hidrlisis de pirofosfato, cationes metlicos, sustitucin nucleoflica, propiedades de coordinacin, clculos ab initio.

Introduction

cules. Examples of the latter are the hydrogen bond and the
coordination properties of ions. The relevance of this type of
interaction to the hydrolysis of pyrophosphate was realized
three decades ago, when George et al. [2] proposed that the
free energy of the reaction in solution was due to the difference in hydration energies between reactants and products.
Both experimental [3, 4] and theoretical [5-8] studies have
been performed to obtain estimates of the hydration energies
of pyrophosphate and orthophosphate.
More recent experimental studies [9-13] concluded that
the true substrate for pyrophosphatases is the dianionic complex [Mg P2 O 7] 2- . However, structural data from high reso-

The concepts of supramolecular chemistry [1] are based on the

existence of oligomolecular supermolecules; arrays of components held together by intermolecular forces. These concepts
lead to consider the relevance of non-covalent interactions,
such as the coordination properties of metal cations, in processes of molecular recognition. As it would be expected, examples of this type of chemistry appear in biochemistry; for
instance, in aqueous solution, the forces acting between molecules vary from weak Van der Waals interactions to intermolecular interactions that can hold together assemblies of mole-

146

Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

lution X-ray experiments [14] show the presence of four metal

cations in the active site of the pyrophosphatase from the budding yeast Saccharomyces cerevisiae, leading to propose that
the true substrate is the neutral complex [Mg2 P2 O 7 ]. This
latter species is unlikely to exist in solution under physiological conditions [15], so the question arises of how it can be
formed within the active site. At any rate, the species to be
studied should be the complexes coordinated by a metal cation. Thus, to answer the question of why Nature chose phosphates for biochemical transformations [16], the coordination
properties of the metal cation have to be taken into account.
For instance, the experimental characterization of the membrane-bound pyrophosphatase of Rhodospirillum rubrum
showed that it can utilize zinc complexes as substrates for the
hydrolysis of pyrophosphates, with a slightly smaller efficiency, and a distinctly different concentration dependent kinetics,
than those for magnesium containing complexes, whereas it
cannot utilize calcium complexes for the same purpose [9,
15]. It is also known that the interaction of zinc ions with
CaMgP 2O 7 granules from cells of the snail Helix aspersa facilitates the hydrolysis of pyrophosphate to orthophosphate
[17].
Moreover, the ubiquity of phosphoryl transfer reactions in
biochemistry poses the question of whether or not there is a
general mechanism. The potential transition state structures
range from totally dissociative, with an isolated metaphosphate intermediate, to totally associative, with a pentacoordinated
phosphorus, depending on the electronic distibution. From an
analysis of the changes in charge in the hydrolysis of GTP,
derived from linear free energy relationships [18], it was concluded that the mechanism should be dissociative [19]. In the
case of ATP, the oxygen that bridges the - with the phosphates is expected to be the atom that develops the largest
change of charge upon the transition state [20]. However,
from the locations of the arginines obtained from the crystal
structure of the UMP / CMP kinase from Dictyostelium discoideum [21], it was concluded that during the reaction negative charges are formed at the transferred phosphoryl group,
but not at the phosphate bridging oxygen, and that this is consistent with an associative mechanism. More recent studies
[22, 23] emphasize the importance of hydrogen bonding [22]
and of the stabilization of the charges on the pyrophosphate
oxygens [23] in the formation of the substrate-enzyme complexes, that suggest an associative mechanism with an exploded' transition state where the bond to the pyrophosphate
leaving group is nearly broken and the bond with the incoming nucleophile is barely formed. Thus, qualitatively the mechanism is intermediate between associative and dissociative
[20].
The theoretical attempts to elucidate the mechanism for
the hydrolysis of pyrophosphates started with ab initio calculations of equilibrium structures [5, 24-26], and continued
with the evaluation of electrostatic effects [7, 8], without taking into account metal dications. More recently, Ma et al. [27]
performed ab initio calculations and found that the asymmetry
of the electrostatic interactions induced by Mg 2+ produced the

William J. McCarthy et al.

elongation of one of the bridging P-O bonds with respect to

the other. This allowed them to propose the isomerization [Mg
H 2P 2O 7 ] [H2 PO 4 Mg PO3 ] as an intermediate step of
the hydrolysis. Further studies were done to investigate the
applicability of the same mechanism to anionic complexes
[28, 29]. One of these studies [29] has shown that the Mg2+
cation can stabilize the dianionic complex [HO Mg
HP 2O 7 ]2 .
Another study was made to explore the differences between complexation to calcium instead of magnesium [30],
where the isomerization reaction enthalpies and energies
resulted significantly higher for the calcium-pyrophosphates
than for their magnesium counterparts, due mainly to a large
positive contribution of correlation energy. It has recently
been shown [31] that this effect is spurious because the lack of
adequate d functions in the basis set used in Ref. [30] makes it
incapable of effectively correlating the 3s and 3p electrons.
Thus, the results that depend on correlation energies have to
be revised. Moreover, though the geometries found in Ref.
[30] were obtained from optimizations at the SCF level of theory, it is also worthwhile to revise the conclusion that the
structural differences between the complexes of calcium and
magnesium are dominated by the inherent coordination properties of their ions, and that they determine the differences in
the energies of the isomerization reactions. These results suggest that the metallic ion involved plays quite an important
role and, because of its intimate coordination with the
pyrophosphate, this role must be prevalent in the catalytic site.
Furthermore, it is known that the coordination properties of
metallic ions are substantially different for each case and thus
an analysis of the differences arising among a variety of
pyrophosphate species coordinated to metallic cations can
shed light on the mechanism of hydrolysis. Therefore, in this
work we present a comparative study of anhydrous calciumand zinc-pyrophosphates in their isomerizations to their metaphosphate containing counterparts:
[M HN P2 O7 ](2 N ) [HN PO 4 M PO3 ](2 N )

(1)

where N = 0, 1, 2, and M = Ca, Zn. Then, two approaches are

made to study the effect of the aqueous environment on the
relative stabilities of the structures that were found; first, an
estimate of their solvation free energies by means of the polarizable continuum model of Cossi et al. (PCM [32]), and then
by the interactions of the various complexes with a single
water molecule,
H 2O + [M H NP 2O 7 ](2 N) [H 2 O M H NP2 O 7] (2-N)
H 2O + [HNPO4 M PO 3 ](2 N)
[H 2 O H NPO4 M PO 3] (2 N)
(2)
Finally, the hydrolyses to M-orthophosphates were also
considered:
H2 O + [M H 2P 2O 7 ] [H 2 PO 4 M H 2 PO 4]
H2 O + [M HP2 O7 ] [H 2 PO 4 M HPO 4 ]

A comparative ab initio study of the isomerizations and hydrolyses of neutral and anionic M-pyrophosphate...

H 2O + [M P 2O 7 ]2 [HPO4 M HPO 4] 2

(3)

The recently designed 6-31+G* basis sets [33, 34] for Ca

and Zn permit a refinement of the results previously found for
Ca-phosphates [30], and a direct comparison with the Mgphosphates, with the same accuracy. Thus, we can test the stability of the hydroxy anionic complexes [HO Mg HP 2O 7 ]2,
and look into various possible routes for the hydrolysis of
pyrophosphates that may explain the selectivity of the enzyme
for Mg.

Computational Details
All electronic energies and harmonic vibrational frequencies
were determined with the use of the GAUSSIAN98 [33] suite
of programs. The standard basis set 6-31+G** was used for all
atoms [34-36].
Geometry optimizations were performed with the SCF
method. The order of these stationary-point structures was
subsequently classified with calculated SCF harmonic frequencies from an analytically determined hessian. Unless otherwise stated, all reported equilibrium geometries correspond
to structures in which the hessian eigenvalues are positive.
Single point energy calculations using Mller-Plesset second-order perturbation theory (MP2) were then performed on
the SCF-optimized geometries to evaluate electron correlation
contributions to the electronic energy.
The estimates of the energies EeSCF and EeMP2 of the
isomerizations and of the hydrolyses, as well as of the interactions with water, were computed with the SCF optimized
geometries. The calculation of the enthalpies included a term
Eth 298 that includes the zero-point energy (PE) and the thermal vibrational energy at T = 298.15 K, both computed with a
harmonic approximation [37]:
H = EeSCF + Ee MP2 + Eth298

(4)

Fig. 1. Anhydrous [M HN P2O7](2-N) complexes: structures 1a and 1b

correspond to N = 2; structure 2 to N = 1, and structures 3a and 3b to
N = 0. The staggered 3a is optimal for M = Zn whereas the eclipsed
3b is optimal for M = Ca; both are isoenergetic for M = Mg.

147

The reference state is at P = 0.1 MPa. The vibrational

entropies were also computed with a harmonic approximation
and a canonical partition function, and summed to the translational, the rotational and the electronic entropies according to
standard statistical mechanics relationships [37]. The free
energies were computed as the difference:
G = H T S

(5)

To study the effect of the aqueous environment on the relative stabilities of the structures that were found, we made an
estimate of their solvation free energies by means of the polarizable continuum model of Cossi et al. (PCM [32]).
An analysis of the charges on the dianionic complexes
was made by means of Mullikens population analysis [38]
and of the CHELPG [39] scheme.

Results
In this section, the geometries of the Ca- and Zn-pyrophosphates, and the energies of their isomerizations and hydrolyses
will be compared to their magnesium-containing counterparts.
The data for these latter are taken from Ref. [29].
In the discussion of the structures depicted in Figs. 1-5,
we will refer to the leftmost phosphorus with the three nonbridging oxygens bonded to it and the bridging oxygen as the
orthophosphate moiety, and to the rightmost phosphorus with
its respective three nonbridging oxygens as the metaphosphate
moiety. Also, the abbreviation M-PPi will be used for the
metal-pyrophosphate complexes.
Anhydrous isomerizations
M-pyrophosphates
The stationary geometries found for both Zn H2 P2 O 7 and Ca
H2 P2 O 7 were the staggered configurations 1a and 1b (Fig. 1)
that correspond to those previously found [29] for Mg
H2 P2 O 7. In fact, the complexes with Zn have a very small deviation from their Mg-containing counterparts, whereas the
complexes with Ca have Ca O distances that are consistently
longer than the Mg O distances by ~ 0.4 (Table 1), in full
agreement with the results of Ref. [30].
In the case of Ca, structure 1b has a lower enthalpy (H
= 20.8 kJ / mol) and a lower free energy (G = 25.4 kJ /
mol) than 1a, as it happened [29] with Mg. In the case of Zn
the differences are small enough (H = 1.2 kJ / mol and G
= 3.3 kJ / mol) to consider them isoenergetic. The asymmetry
of the electrostatic interactions induced by the cation produces
in both structures the elongation of one bridging P-O bond
with respect to the other; the size of this effect being the same
for the three cations, Mg, Ca and Zn: r = 0.2 for 1a, and
r = 0.07 for 1b (Table 1).
The equilibrium geometries found for the monoanionic
[M HP2 O7 ] complexes resulted very similar to their magnesium counterpart (structure 2 in Fig. 1). In all cases, the bridg-

148

William J. Mc Carthy et al.

Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

Table 1. Geometrical parameters of M-pyrophosphatesa.

Structure
1a
1b
2
3a
3b
7a
7b
8
9a
9b

Mg

Ca
P-O-P

Zn

Mg

Ca
r(M-O1)

Zn

Mg

Ca
r(O1-P1)

Zn

120.6
125.5
126.9
139.3
130.7
119.5
124.9
126.9
138.6
123.2

121.2
127.7
129.5
154.9
138.8
120.9
127.9
129.0
153.7
126.5

121.5
127.4
128.5
138.5
129.8
120.2
126.4
127.5
139.3
123.7

2.998
3.039
2.856
2.665
2.587
3.038
3.090
2.927
2.744
3.128

3.368
3.431
3.222
2.468
2.781
3.383
3.468
3.282
2.453
3.425

2.968
3.000
2.828
2.678
2.596
3.037
3.066
2.918
2.744
3.130

1.544
1.585
1.606
1.611
1.673
1.544
1.589
1.606
1.597
1.607

1.542
1.589
1.607
1.649
1.667
1.541
1.596
1.597
1.631
1.604

1.544
1.586
1.609
1.612
1.668
1.545
1.590
1.606
1.601
1.605

r(O1-P2)
1a
1b
2
3a
3b
7a
7b
8
9a
9b

1.743
1.660
1.663
1.704
1.673
1.745
1.657
1.663
1.708
1.668

1.748
1.650
1.663
1.712
1.667
1.752
1.640
1.671
1.728
1.674

r(M-O2)
1.741
1.655
1.661
1.694
1.668
1.739
1.651
1.660
1.695
1.670

1.939
2.009
1.878
1.951
2.053
1.943
2.032
1.930
2.000
1.985

r(M-O4)
1a
1b
2
3a
3b
7a
7b
8
9a
9b
a

1.970
1.881
1.963
1.840
2.053
2.017
1.911
1.987
1.844
2.029

2.297
2.207
2.276
2.183
2.341
2.322
2.261
2.294
2.194
2.341

2.283
2.328
2.203
2.317
2.340
2.306
2.343
2.268
2.361
2.315

r(M-O3)
1.948
2.028
1.876
1.978
2.058
1.996
2.077
1.946
2.035
1.992

1.925
2.013
1.924
1.951
2.053
1.965
2.035
1.935
2.000
2.029

2.244
2.336
2.236
2.314
2.340
2.266
2.365
2.253
2.401
2.398

1.927
2.041
1.932
1.978
2.058
1.953
2.060
1.936
2.037
2.171

r(M-O3)
2.008
1.875
2.011
1.834
2.058
2.034
1.907
2.037
1.832
2.045

2.053
2.031
2.024
2.074
2.157
1.900

2.341
2.461
2.407
2.447
2.550
2.201

2.058
2.032
2.026
2.101
2.221
1.886

The P-O-P angle is in degrees and the distances in . The numbering of atoms corresponds to Figs. 1 and 3.

ing P-O bond of the proton free moiety is longer than the
other, 1.66 vs. 1.61 , as a result of the asymmetry of the
electrostatic interactions induced by the cation; the six nonbridging oxygens are in a staggered arrangement as viewed
along an axis connecting the phosphorus atoms; the metal
cation is coordinated to three oxygens. The > P-O-P < angle is
very similar for the three cations, and once again the Ca O
distances are ~ 0.35 longer than for the other two cations
(Table 1).
For the most relevant species in aqueous solution, the
dianionic [M P2 O7 ]2 complexes, two equilibrium geometries
were determined with the SCF level of theory, one staggered
and one eclipsed (3a and 3b, respectively, Fig. 1). Though
both configurations are very similar to their magnesium-containing counterparts, that are practically isoenergetic [28], in
this case Ca2+ clearly favors the eclipsed configuration by G
= 43.3 kJ / mol, in agreement with Ref. [30]; whereas Zn2+
favors the staggered geometry by G = 35.4 kJ / mol. In

fact, the eclipsed configuration of [Zn P 2O 7 ]2 has one imaginary frequency and thus is not a minimum, but a transition
state.
The different relative stabilities of structures 3a and 3b
for the different cations are due to the balance among the
attractive interactions of the cations with the oxygens in the
pyrophosphate, the repulsive interactions of the oxygens and
the strain induced on the structure of the pyrophosphate; thus,
although the arrangement of oxygens in the vicinity of the
cations roughly reproduces their respective coordination properties, there are some deviations due to the two excess electrons: the distances from the cations to the water molecules in
their respective first hydration shells obtained from numerical
simulations [40, 41] for Ca2+ range from 2.38 to 3.13 , for
Mg2+ from 1.93 to 2.66 , and for Zn2+ from 1.82 to 2.74
. In the staggered configuration 3a, each of the three cations
is surrounded by three oxygens; the oxygen closest to the
cation is at a significantly shorter distance for Ca (2.18 ) and

A comparative ab initio study of the isomerizations and hydrolyses of neutral and anionic M-pyrophosphate...

149

Table 2. Geometrical parameters of M-metaphosphates and M-orthophosphates.a

Structure
4
5
6a
6b
6c
10a
10b
11
12a
12b
13
14
15

Mg

Ca
r(M-O1)

Zn

Mg
r(M-O2)

Ca

Zn

Mg
r(M-O3)

Ca

Zn

2.009
1.927
2.039
1.866
1.873
2.030
2.080
1.949
2.112
2.011
2.022
2.088
2.008

2.343
2.250
2.329
2.175
2.181
2.372
2.379
2.261
2.398
2.346
2.360
2.450
2.334

2.014
1.940
2.053
1.876
1.884
2.039

2.001
1.927
2.039
1.866
1.873
2.033
2.080
1.938
2.035
2.018
2.022
2.091
2.008

2.360
2.250
2.329
2.175
2.181
2.372
2.375
2.261
2.331
2.346
2.377
2.451
2.334

2.025
1.940
2.053
1.876
1.884
2.046

2.052
2.119
2.039
1.949
2.218
1.924
2.130
1.970
2.112
2.036
2.022
1.942
2.008

2.400
2.479
2.329
2.332
2.584
2.278
2.481
2.346
2.398
2.376
2.360
2.262
2.334

2.059
2.152
2.069
1.947
2.278
1.920

1.979
2.087
2.032
2.039
2.117
2.013

r(M-O4)
4
5
6a
6c
10a
10b
11
12a
12b
13
14
15
a

2.050
2.119
1.963
2.218
2.020
2.074
2.075
1.968
1.911
2.022
1.942
2.008

1.942
2.028
2.044
2.039
2.120
2.041

1.963
2.087
2.109
2.039
1.955
2.021

r(M-O5)
2.401
2.479
2.346
2.584
2.390
2.418
2.433
2.341
2.200
2.377
2.262
2.334

2.078
2.152
1.961
2.283
2.048
2.140
1.942
1.896
2.039
1.955
2.022

2.057

2.424

2.326

2.607

3.530

Distances in . The numbering of atoms corresponds to Figs. 2, 4 and 5.

Table 3. Energies, enthalpies, entropies and solvation energies of the isomerizations of anhydrous M-pyrophosphates a.
Reaction

Ee SCF

Ee MP2

Eth298

Gsol

M = Ca
1a 4
1b 4
25
3a 3b
3a 6a
3b 6a
3b 6b
3b 6c

41.2
7.3
31.1
47.4
26.0
21.4
66.3
65.3

3.7
17.3
6.5
2.3
7.2
4.9
2.0
7.5

1.8
1.3
2.2
0.5
0.3
0.8
0.6
0.6

46.7
25.9
39.8
49.2
33.5
15.7
63.7
57.2

65.3
49.9
64.8
19.8
87.6
107.4
89.7
65.1

127.1
111.0
148.1
16.3
126.5
110.2
52.9
69.4

31.0
16.3
6.3
39.5
58.2
29.9
62.6

9.6
25.8
4.3
9.0
1.5
2.5
14.8

1.3
1.0
1.9
2.8
0.9
0.3
3.1

41.9
43.1
0.1
27.7
58.8
27.1
44.7

52.6
37.5
59.5
25.7
73.4
67.6
25.3

104.3
112.1
94.7
0.0
137.7
86.9
87.3

M = Zn
1a 4
1b 4
25
3a 3b
3a 6a
3a 6b
3a 6c
a All

energies and enthalpies in kJ / mol. Entropies are in J / (mol K). The last column has the differences in solvation free energies between reactants and products, computed with PCM [32].

150

Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

William J. McCarthy et al.

Poincar condition is not fulfilled [42] and thus the bond

orders cannot be obtained. Nevertheless, the analysis of the
Mulliken charges suggests that Mg and Zn withdraw a significant amount of electronic charge from their surrounding oxygens. A more complete discussion of the charge distribution
will be made in section 3.4.

Fig. 2. Anhydrous putative [HNPO4 M PO3](2-N) intermediates for

the hydrolyses of M-PPi complexes. Structure 4 corresponds to N =
2; structure 5 to N = 1, and structures 6a, 6b and 6c to N = 0. 6a and
6b are isoenergetic for M = Mg, whereas the global minimum for M
= Ca is the former, and for M = Zn, the latter. Structure 6c is isoenergetic to 6b for M = Ca, and to 6a for M = Zn.

for Mg (1.84 ), whereas it remains at hydration distance

from Zn (1.83 ). In the eclipsed configuration 3b, each of
the three cations is surrounded by four oxygens at distances
within their first hydration shells: 2.34 for Ca, 2.05 for
Mg and 2.06 for Zn. In the case of Ca, also the bridging
oxygen is at hydration distance in both configurations: 2.47
in 3a, and 2.78 in 3b, so the total coordination numbers
grow to four and five, respectively. This can explain why the
two structures are stable with Ca, and also their relative stabilities. The fact that the interaction of oxygen with Zn has a
very deep minimum at short distance [41] favors the tighter
coordination of 3a over 3b, because in the former it can overcome the oxygen-oxygen electrostatic repulsion, that the
fourth oxygen makes so strong in 3b as to make it a transition
state. The coordination properties of Mg allow it to stabilize
equally well both structures; though 3b provides a more complete hydration, the oxygen-oxygen repulsion in 3a is more
easily overcome by the interactions with the cation.
As mentioned previously, the two excess electrons make
the difference with respect to simple hydration: as it has been
reported [29], the Mulliken analysis of the charges shows that
there is a significant transfer of charge to the cation; in the
eclipsed configuration the Mulliken charges on Mg and Zn are
very similar, 0.49e and 0.42e, whereas for Ca it is 1.34e, and
in the staggered configuration the values are 0.77e for Mg,
0.61e for Zn and 1.43e for Ca. Though not a definite test,
these results suggest a more marked transfer of charge to Zn, a
very similar effect for Mg, and a less important one for Ca.
The energy gain due to this effect allows the staggered structure 3a to be stable for both Ca and Mg, in spite of a coordination that is tighter than in simple hydration. An analysis of the
effect of this transfer of charge on the bonds would be in
order; unfortunately, because the positions of the ions in the
[M P2 O7 ]2 complexes make ring-like structures, the Hopf-

M-metaphosphate isomers
The anhydrous metaphosphates H2 PO 4 M PO 3 (4, Fig. 2)
are also structurally similar to their magnesium counterpart:
the two hydrogens remain attached to the moiety that becomes
the orthophosphate coordinated to the cation by the two proton-free oxygens; the protons are hydrogen-bonded to the
oxygens of the same moiety. The metaphosphate is also coordinated to the cation by two oxygens so that the metal has four
total ligands in a tetrahedral configuration. As it was the case
for the M-PPi complexes, the most notable differences among
Mg-, Ca- and Zn-phosphates are the oxygen-metal bond distances, that for Zn are slightly longer than for Mg (between
0.05 and 0.10 ) and shorter than for Ca (Table 2). This
corresponds to the difference in the mean radii of their first
hydration shells [40, 41]. Once again, the structural results of
Ref. [30] are reproduced in the present work.
As it was mentioned in the introduction, the previously
reported [30] free energy of the isomerization 1a 4 for Capyrophosphate turned out to be largely positive (G = 106.7
kJ / mol), due to spurious effects in the correlation energy. As
expected [31], a well-balanced basis set produces a different
value (Table 3); the free energy found in the present work
(G = 66.2 kJ / mol) was very similar to that of Mgpyrophosphate (G = 70.4 kJ / mol). The result for the iso-

Fig. 3. Monohydrated [H2 O M HNP 2O 7] (2 N) complexes.

Structures 7a and 7b correspond to N = 2; the latter has a lower energy for the three cations. Structure 8 corresponds to N = 1, and structure 9a to N = 0. The three ions stabilize the hydroxide anion found in
9b, that has a much lower energy than 9a (Tables 5 and 6).

A comparative ab initio study of the isomerizations and hydrolyses of neutral and anionic M-pyrophosphate...

merization of Zn-pyrophosphate was G = 57.6 kJ / mol

(Table 6). The contribution of solvation energies obtained
with the PCM model made a large difference: the free energy
became largely positive for both Ca- and Zn-pyrophosphates,
whereas it remained negative for Mg-pyrophosphate (Tables 3
and 6).
The isomerization 1b 4 yields very similar results to
1a 4, though the estimated effect of the solvent is larger in
the case of Zn-PPi, and smaller in the case of Ca-PPi (Tables
3 and 6).
The isomerization product [HPO4 M PO3 ] is structure
5 (Fig. 2). The behavior of the cation-oxygen distances is the
same as that found for the hydration shells of the metal cations
[40, 41] (Table 2). The calculated free energy of the isomerization 2 5 is largest for the calcium complexes, G =
59.1 kJ / mol, and smallest for the zinc complexes, G =
17.7 kJ / mol (Tables 3 and 6).
Three stationary geometries were found for the dianionic
metaphosphate isomer [PO4 M PO3 ] 2 ; we have found it
convenient [29] to label them by the number of oxygens from
the orthophosphate and from the metaphosphate coordinated
to the cation, so the structures are a 3 1 (6a, Fig. 2), a 2 1
(6b, Fig. 2), and a 2 2 (6c, Fig. 2) configurations. Though 6a
and 6c have four oxygens coordinated to the cation, the Zn O
distances are longer. This results in considerably higher energies compared to the optimal geometry 6b, G = 30 kJ / mol.
Once again, Zn2+ coordination depends more on bringing the
ligands closer than increasing their number in the first shell.

151

The Mulliken charges on Zn show the same oxidizing power

as for the pyrophosphates: 0.99e in 6a, 0.63e in 6b and 0.66e
in 6c. In the case of Ca2+, the 2 1 configuration has an energy similar to the 2 2, both being higher than the 3 1 by
G = 40 kJ / mol, and the Mulliken charges are 1.43e in 6a,
1.51e in 6b and 1.54e in 6c. For Mg2+, the 3 1 geometry is
virtually isoenergetic to 2 1, G = 6.4 kJ / mol, and the
Mulliken charges are 1.00e in the former and 0.83e in the latter. The situation of the metaphosphate isomers is similar to
that for the pyrophosphate complexes: due to their distinctly
different coordination properties, and to their different oxidizing powers, the three cations favor different geometries; thus
Ca2+ favors more ligands in the first shell, Mg2+ makes the
two configurations isoenergetic, and Zn2+ favors the geometry
that has the oxygens of the first shell closer to the cation. This
repeated pattern can be seen in Tables 1 and 2, where a comparison is made of the M O distances between the various
equilibrium geometries found for all the M-pyrophosphates
and the M-phosphates, where M = Ca, Mg, Zn.
The isomerization 3a 6b is predicted to be endothermic for Zn 2+, H = 27 kJ / mol; the change in entropy
accounts for a smaller, but still positive free energy, G = 7
kJ / mol (Tables 3 and 6). In the case of Ca2+, the isomerization 3b 6a is also predicted to be endothermic, H = 16
kJ/mol, but the change in entropy is large enough to yield a
negative free energy, G = 16 kJ / mol. However, the contribution of solvation leads to the same result as for Zn2+, a
largely positive free energy, G aq = 94 kJ / mol, whereas in
the case of Mg 2+ it is this contribution that leads to a negative
free energy of the isomerization 3b 6b [29].
Isomerizations of monohydrated species
The approximation with a continuum model to account for
hydration effects is obviously too restrictive when looking
into a process where one water molecule gets broken.
Therefore in this section the study is extended to explicitly
include that water molecule.

Fig. 4. Monohydrated putative [H2O HN PO4 M PO3](2 N) intermediates for the hydrolyses of the M-PPi complexes. Structures 10a
and 10b correspond to N = 2; the latter was not found for M = Zn.
Structure 11 corresponds to N = 1, and structure 12a to N = 0. Once
again, the three ions stabilize the hydroxide anion in 12b, with a
much lower energy than 12a, but still higher than 9b (Tables 5 and
6).

M-pyrophosphates
The equilibria of structures 1a and 1b with one water molecule produced the stationary configurations 7a and 7b, respectively (Fig. 3). For both cations, the perturbation on the
geometries of the M-pyrophosphates turned out to be rather
small; the difference produced on the bond lengths was of less
than 0.05 , and on the bond angles of less than 1 (Table 1).
In structure 7a, the hydrogens of the water molecule point to a
direction away from the pyrophosphate, whereas in 7b one of
them makes a hydrogen-bond with an oxygen of the
metaphosphate moiety. This feature is more pronounced for
the monoanionic structure 8 (Fig. 2), that results from the
interaction of water with structure 2, and even more for the
dianionic species 9a, but in this case the hydrogen-bond is
made with the orthophosphate moiety. In all cases, the interaction with the water molecule is characterized by a largely negative enthalpy and by a largely negative change in entropy,

152

William J. McCarthy et al.

Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

Table 4. Enthalpies, entropies and free energies of the interactions of M-phosphates with one water molecule a.
Reaction
H
S
G

Gsol

Gaq

M = Ca
1a + H2O 7a
1b + H2O 7b
2 + H2O 8
2 + OH 9bb
3a + H2O 9a
3b + H2O 9bc
4 + H2O 10a
4 + H2O 10b
5 + H2O 11
5 + OH 12bb
6a + H2O 12a
6b + H2O 12bc
M = Zn
1a + H2O 7a
1b + H2O 7b
2 + H2O 8
2 + OH 9bb
3a + H2O 9a
3b + H2O 9bc
4 + H2O 10a
5 + H2O 11
5 + OH 12bb
6b + H2O 12a
6b + H2O 12bc

107.3
117.8
114.7
199.6
135.5
330.0
82.2
90.5
72.2
66.9
130.2
252.7

126.6
135.1
123.7
119.5
140.0
130.3
131.5
116.5
125.0
91.3
176.3
144.8

69.6
77.5
77.8
164.0
93.7
291.2
43.0
55.8
34.9
39.7
77.6
209.5

57.4
80.8
41.3
153.3
100.2
266.4
23.5
47.4
16.5
20.6
136.9
171.7

12.2
3.3
36.5
10.8
6.5
24.8
19.5
8.4
18.4
19.1
59.3
37.8

119.0
137.4
97.3
181.6
100.6
327.3
82.8
72.3
62.0
63.6
207.0

78.3
110.8
131.6
123.7
136.2
125.7
132.8
135.9
105.2
159.0
141.0

95.7
104.4
58.1
144.7
60.0
289.8
43.3
31.8
30.6
16.2
165.0

105.8
66.0
42.9
67.0
100.1
215.0
7.5
8.3
49.1
100.7
90.5

10.1
38.4
15.2
77.7
40.1
74.8
35.8
23.5
79.7
84.5
74.5

All energies and enthalpies are in kJ / mol. Entropies are in J / (mol K).
Interactions of monoanionic Mphosphates with a hydroxide anion.
c In these cases the water molecule releases a proton to the phosphate and the resulting hydroxide remains coordinated by the metal cation. The last two columns
are the differences in solvation free energies between reactants and products, and the free energies in aqueous solution, computed with PCM [32]. The latter was
computed as Gaq = G + Gsol.
b

the latter coming from the restrictions on the motion of the

water molecule; however, all the free energies still turned out
to be largely negative (Table 4).
The optimal configuration of the monohydrated dianionic
M-pyrophosphates is structure 9b, where the water molecule
was hydrolyzed into a proton that binds to one of the oxygens
of the pyrophosphate, and a hydroxide anion, that gets coordinated by the metal cation. The free energies of the reactions
H 2O + [M P 2O 7 ]2 [HO M HP2 O 7] 2 , were even larger
than for the simple interactions of the previous paragraph
(Table 4). The resulting M-pyrophosphates have an intramolecular hydrogen-bond that contributes to the bending of the >
P-O-P < angle by more than 12, relative to their anhydrous
counterparts (Table 1). Both 9a and 9b are staggered configurations, showing that in the eclipsed geometry the pyrophosphate is subject to a strain, that is released when one of its
oxygens coordinated by the cation can be substituted.
Structure 9b can also be viewed as the monoanionic Mpyrophosphate 2 interacting with a hydroxide anion [29]. The
interaction energies computed from 2 + OH 9b for M =
Ca and Mg are very similar, G = 164 kJ / mol vs. G =
162 kJ / mol, whereas for Zn it is somewhat smaller, G =
145 kJ / mol (Table 4).

Hence the inclusion of a water molecule makes no appreciable difference for the neutral and monoanionic species,
whereas for the dianionic cases it readily leads to the water
hydrolysis.
M-metaphosphate isomers
The interaction energies of the neutral M-metaphosphate complexes with one water molecule, 4 + H2O 10a (Fig. 4),
were large and very similar for the three cations, G 44.0
kJ / mol. However, the structure 10b, that turned out to be
more stable for M = Mg and M = Ca, was not found for M =
Zn. It is worth noticing that in 10a the cation coordinates four
oxygens, whereas in 10b it coordinates five oxygens.
In agreement with previous results [29], the interaction
with one water molecule stabilized the M-pyrophosphates
with respect to the M-metaphosphates (Tables 4, 5 and 6).
This effect was enhanced by the solvation free energies. Thus,
the isomerizations from structures 7a and 7b to structures 10a
and 10b were all predicted as non-spontaneous in aqueous
solution, with the exception of 7a 10a in the case of zinc,
whose free energy turned out to be G aq = 0.8 kJ / mol.
The interaction of the monoanionic M-metaphosphate
complexes with one water molecule leads to structure 11 (Fig.

A comparative ab initio study of the isomerizations and hydrolyses of neutral and anionic M-pyrophosphate...

153

Table 5. Energies, enthalpies, entropies and solvation energies of the isomerizations of monohydrated M-pyrophosphates a.
Ee SCF

Ee MP2

Eth298

21.9
22.3
24.9
19.3
2.8
272.8
23.0
96.6

1.5
11.2
6.0
15.8
1.6
31.2
5.5
0.6

1.7
1.5
1.1
2.1
1.6
2.1
0.2
2.9

21.7
9.6
29.8
1.4
2.8
243.7
28.3
93.1

60.4
53.5
75.4
68.5
63.5
10.0
51.4
92.9

93.2
53.7
117.1
77.6
94.3
146.4
127.1
15.5

3.3
25.0
18.4
229.0
62.9
122.0

2.7
13.6
8.2
32.5
5.4
0.0

0.3
0.0
1.6
2.5
4.2
2.3

5.7
11.6
25.0
199.0
64.1
119.7

1.8
15.5
55.3
15.2
44.9
78.0

6.0
53.6
60.1
114.9
87.5
21.4

Reaction

Gsol

M = Ca
7a 10a
7b 10a
7a 10b
7b 10b
8 11
9a 9b
9a 12a
9b 12b
M = Zn
7a 10a
7b 10a
8 11
9a 9b
9a 12a
9b 12b
a All

energies and enthalpies are in kJ / mol. Entropies are in J / (mol K). The last column has the differences in solvation free energies between reactants and
products, computed with PCM [32].

Table 6. Comparison of the isomerizations free energies of Mpyrophosphates a .

Zn

Mg

Gaq
Ca

70.4 66.2 57.6

64.1 40.8 54.3
39.6 59.1 17.7
1.1
6.4
6.9
8.8 16.3
1.5
10.0 39.7
5.2
17.1 52.3
3.9
6.4
6.8
3.1 19.0
4.9 16.1
8.5
213.3 240.7 194.5
12.6 43.6
50.7
82.9
65.4
96.4

18.1
2.5
8.1
12.4
23.2
36.4
22.7
44.9
31.3
22.5
117.5
82.0
83.6

60.9
70.2
89.0
62.8
93.9
53.5
64.8
47.3
58.6
78.2
94.3
83.5
81.0

Reaction
Mg
1a 4
1b 4
25
3a 6b
3b 6a
7a 10a
7a 10b
7b 10a
7b 10b
8 11
9a 9b
9a 12a
9b 12b

G
Ca

Zn
46.7
57.8
77.0
93.8
139.2
0.8
60.4
68.6
79.6
138.2
75.0

a All

energies are in kJ / mol. The free energy in aqueous solution was computed as Gaq = G + Gsol.

4), and in all cases it is weaker than the interaction of the Mpyrophosphates. The interaction with water stabilizes the Mpyrophosphates to such an extent that the isomerization 8
11 becomes endothermic and non-spontaneous for M = Zn
(Tables 4, 5 and 6). The estimates of the solvation free energies produce the same result, the stabilization of M-pyrophosphates.
As it occurred with the anionic M-pyrophosphates, the
interaction of structures 6a and 6b with a water molecule led
to a stationary state with a water molecule, 12a, and a very
stable configuration with a hydroxide anion, 12b (Fig. 4),
even considering the free energies of solvation. The isomerization 9b 12b turned out to be endothermic and non-spon-

Fig. 5. Hydrolyzed M-orthophosphates. Structure 13 corresponds to

the neutral [H2PO4 M H2PO4] complex; structure 14 to the [H2PO4
M HPO4] complex, and structure 15 to the [HPO 4 M HPO4]2
complex. This latter turned out to be isoenergetic to 9b, but when solvation is taken into account the hydrolyses 9b 15 are predicted to
be spontaneous (Table 8).

taneous in all cases, whereas the isomerization 9a 12a

turned out to be exothermic and spontaneous for M = Ca.
However, the free energy of solvation shifted towards nonspontaneity in all cases (Tables 4, 5 and 6).
It is worth noticing the relatively large contribution of the
entropy to the estimates of the isomerization free energies.
The data presented in Tables 3, 4 and 5 were obtained from
standard statistical mechanics [37] applied to the harmonic
frequencies computed from second derivatives of the energies.
Typically, a scaling factor of 0.9 is applied to the theoretical
SCF frequencies [37]. This scaling would affect the thermal
energy Eth298 and the vibrational contribution to the entropy,
that are a small percentage of the total enthalpy and entropy;

154

William J. McCarthy et al.

Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

nevertheless, to assess a quantitative estimate of the accuracy

of our calculations, we computed the vibrational contributions
with scaling factors of 0.9 and 1.1 on the frequencies. The
total effect on the free energies is less than 5 kJ / mol in all
cases. Therefore, the qualitative conclusions for the isomerizations are not modified, exception made of the reaction 9a
12b for Zn2+ , that has a value in the limits of accuracy of this
study, G aq = 4.6 kJ / mol, and thus could be reversible. At
any rate, this is still in agreement with the experimental observation that Zn-pyrophosphate can be used as substrate by
pyrophosphatases.
Hydrolysis reactions

Fig. 6. Schematic comparison of the relative free energies G (in kJ

/ mol, vertical axis) for the stationary states found in this work,
referred to structures 1a, 2 and 3a in each case. From top to bottom,
the neutral, monoanionic and dianionic complexes. From left to right,
M = Ca, M = Mg and M = Zn. The lines drawn as a reference correspond to the reactions in Tables 4, 6 and 8.

The optimal geometry found for the product H2 PO 4 M

H2 PO 4 (structure 13, Fig. 5) has the metal cation aligned with
the phosphorus atoms and coordinating four oxygens, two
from each phosphate, forming two O-M-O orthogonal planes,
quite similar to structure 4. The Zn O distances are only 0.02
longer than the Mg O, whereas the Ca O distances are
0.34 longer. The hydrolysis 7a 13 was predicted to be
both exothermic and spontaneous (Tables 7 and 8), with very
similar free energies for Mg and Zn complexes. The effect of
solvation in Zn-PPi is opposite to Mg-PPi and Ca-PPi, for it
enhances the hydrolysis. The reaction 7b 13 was also predicted to be both exothermic and spontaneous (Tables 7 and
8), with very similar free energies for the three cations. The
effect of solvation is most marked for Zn-pyrophosphate, so
the predicted free energy in aqueous solution is 72 % of the
value for Mg-pyrophosphate.
The optimized geometry of the [H 2 PO 4 M HPO 4 ]
complexes is structure 14 (Fig. 4) and has the same features as
structure 13. The hydrolysis 8 14 reproduces the trend of
the isomerization 2 5, with a largest free energy for calcium and a smallest for Zn, and a most marked effect of hydration on the calcium complexes (Tables 6, 7 and 8).
The fully hydrolyzed dianionic complex resulted in structure 15, where the cation coordinates four oxygens, in a 2 2
arrangement. The predicted free energies of the hydrolyses 9b
15 are rather small (Tables 7 and 8), in the limits of accuracy of the ab initio method employed. Opposite to the isomerizations to a metaphosphate intermediate, the contribution of
solvation leads to negative free energies in all cases.
Analysis of the charge distribution on the dianionic M-PPi
and M-Pi complexes

Fig. 7. Schematic comparison of the relative free energies in aqueous

solution Gaq (in kJ / mol, vertical axis) for the stationary states
found in this work, referred to structures 1a, 2 and 3a in each case.
They were computed as Gaq = G + Gsol , the latter term
obtained with PCM [32]. From top to bottom, the neutral, monoanionic and dianionic complexes. From left to right, M = Ca, M = Mg
and M = Zn. The lines drawn as a reference correspond to the reactions in Tables 4, 6 and 8.

Because all schemes to assign atomic charges are somewhat

arbitrary, we decided to use two different approaches: (1) one
that yields information of the electron density in the vicinity
of each atom, Mullikens population analysis [38], and (2) one
that yields information of the electrostatic potential, the
CHELPG scheme [39]. This latter was preferred over the previously used [29] CHELP [43] because it is less sensitive to
changes in the orientations of the molecules [39]. The values
obtained from CHELPG still depend on the van der Waals

A comparative ab initio study of the isomerizations and hydrolyses of neutral and anionic M-pyrophosphate...
Table 7. Energies, enthalpies, entropies and solvation energies of the
hydrolyses of M-pyrophosphates a.
Reaction

E eSCF Ee MP2 Eth298

Gsol

Table 8. Comparison of the hydrolysis free energies of M-pyrophosphatesa.

Reaction

M = Ca
7a 13
7b 13
8 14
9b 15

137.5
93.3
98.9
18.9

34.3
24.5
36.4
19.8

1.6
1.6
2.0
1.9

101.6
70.4
64.5
2.8

37.6
30.7
39.3
35.7

74.3
34.8
62.3
49.5

7a 13
7b 13
8 14
9b 15

?G

?Gaq

Mg

Ca

Zn

87.1 112.8 84.8

73.2 79.6 72.9
62.7 76.3 53.5
4.4
7.9
6.8

Mg

Ca

Zn

61.0
48.5
40.1
26.4

38.5
44.8
14.0
57.4

94.5
35.0
34.6
41.1

a All

M = Zn
7a 13
7b 13
8 14
9b 15

155

120.1
91.8
76.4
2.9

28.5
17.6
36.4
17.1

0.3
0.6
2.8
0.9

91.9 23.7
74.8 6.3
42.8 35.8
15.1 27.8

9.7
37.9
18.9
47.9

All energies and enthalpies are in kJ / mol. Entropies are in J / (mol K). The
last column has the differences in solvation free energies between reactants
and products, computed with PCM [32].

radii given to the various atoms; in this case they were: 2.00
for P, 1.70 for O and 1.45 for H, as standard Breneman
radii in GAUSSIAN98; whereas for the metal cations they
were taken from Ref. [44]: 1.73 for Mg, 2.00 for Ca, and
1.39 for Zn.
The results are shown in Table 9, where it can be seen
that the cations withdraw a substantial amount of negative
charge, with the oxydizing power in the order Zn Mg > Ca.
In all cases, the Mulliken charge on the bridging oxygen in
both 3a and 3b is large and negative, showing a high electron
density around it; the CHELPG charge is smaller, but still significant, and reflects an anionic electrostatic potential. The
Mulliken charges on the phosphoryl moieties show a lower
electron density, but the CHELPG charges reflect a higher
electrostatic potential, thus making the phosphoryl moieties
susceptible of strong electrostatic interactions, but with a low
probability of chemical bonding. Upon isomerization to 6a,
6b and 6c, the Mulliken negative charge on the bridging oxygen diminishes while the CHELPG charge increases; thus the
electron density is lower, but the anionic field stronger. The
behavior of the monohydrated complexes 9a and 12a shows
the same trend, that remains equal for the complexes with
hydroxide anions 9b and 12b.
Discussion and conclusions
The results presented in the preceeding section show the structural differences imposed by the cations on pyrophosphate,
due to their distinctly different coordination properties, that in
the case of Ca2+ favor a larger amount of ligands in its first
hydration shell, whereas in the case of Zn2+ favor tighter
structures, where the ligands are at shorter distances from the
cation. The properties of Mg2+ allow for both types of coordination, so the Mg-pyrophosphate and Mg-phosphate complexes can adopt the conformations of both zinc-complexes and
calcium-complexes.

energies are in kJ / mol. The free energy in aqueous solution was computed as Gaq = G + Gsol.

Although the hydrolysis of pyrophosphates in living cells

occurs in a specific environment, determined by the catalytic
site of the enzyme [14, 45, 46], theoretical studies of the reactions in vacuo are helpful to discriminate intramolecular
effects from the contributions of various intermolecular interactions. In this case, based on a previous study [30], the differences in coordination properties between ions were proposed as an explanation for the experimental data that the membrane-bound pyrophosphatase of Rhodospirillum rubrum can
utilize zinc complexes as substrates for the hydrolysis of
pyrophosphates, with a slightly smaller efficiency, and a distinct concentration dependent kinetics, than those for magnesium containing complexes, whereas they cannot utilize calcium complexes [9, 15]. The results obtained in the present
work support that proposal.
The structural differences found to occur in the equilibrium geometries of the Zn-pyrophosphate complexes and their
isomerization products, relative to their magnesium-containing counterparts, are mainly due to a more rigid coordination
by Zn2+ . The 2 1 geometry found for the dianioninc complex [PO4 Zn PO 3 ]2 allowed for a more complete study of
the isomerization products of Ca-pyrophosphates and Mgpyrophosphates; the coordination properties of Ca 2+ favor the
3 1 configuration, that has more ligands in the first shell;
Mg2+ makes the 2 1 and the 3 1 configurations virtually
isoenergetic, and Zn2+ favors the 2 1 geometry, that has the
ligands closer to it than in the 3 1 geometry.
The interactions of the complexes with one water molecule are all characterized by a large enthalpy and a large
decrease in entropy (Table 4). This reflects mainly the strong
interaction with the metal cation as well as the restriction
imposed by its coordination properties on the positions attainable by the water molecule. H TS compensatory relationships have also been found in a study of the thermodynamics
of phosphate and pyrophosphate anions binding by polyammonium receptors [22], where hydrogen bonding is found to
be crucial in anion coordination. In agreement with a previous
result [29], the interactions of the dianionic M-pyrophosphate
complexes lead readily to the breaking of the water molecule,
producing very stable [HO M HP 2O 7 ]2 , complexes. This
supports the previously advanced idea that a hydroxide anion
can be stabilized by the metallic cation in the catalytic site.

156

William J. McCarthy et al.

Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

Table 9. Charges on dianionic M-Phosphates a.

Structure

PO3

PO3

3a
Mg
Ca
Zn

Ca
Zn

0.77
1.51
1.43
1.63
0.61
1.33

1.48
0.84
1.64
0.87
1.48
0.85

0.53
1.32
0.89
1.39
0.48
1.24

0.76
1.35
0.90
1.37
0.65
1.24

Ca
Zn

0.49
1.47
1.34
1.61
0.42
1.34

1.35
0.75
1.40
0.77
1.50
0.78

0.57
1.36
0.97
1.42
0.46
1.28

0.57
1.36
0.97
1.42
0.46
1.28

Ca
Zn

1.00
1.43
1.43
1.63
0.99
1.36

1.28
1.19
1.32
1.25
1.28
1.17

0.91
1.38
1.17
1.45
0.88
1.31

H2O

0.66
1.50
1.44
1.64
0.58
1.35

1.47
0.81
1.62
0.86
1.47
0.81

0.62
1.35
0.99
1.38
0.61
1.27

0.74
1.33
0.86
1.36
0.66
1.26

0.17
0.01
0.03
0.04
0.16
0.01

HPO3

0.83
1.30
1.51
1.62
0.63
1.31

1.16
1.16
1.35
1.27
1.08
1.16

0.90
1.33
1.22
1.42
0.88
1.29

1.47
0.79
1.43
0.82
1.46
0.81

1.35
1.28
1.07
1.16

1.22
1.42
0.91
1.29

0.97
0.91
0.68
0.85

0.66
1.32
1.02
1.39
0.66
1.29

1.25
1.16
1.30
1.21
1.27
1.12

0.92
1.39
1.21
1.46
0.93
1.32

0.80
0.88
0.94
0.94
0.80
0.87

HPO3
1.12
1.11
1.27
1.13
1.10
1.10
HPO3
.

0.68
1.43
1.53
1.67
0.64
1.38

1.33
1.71
1.77
1.84
1.31
1.69

0.19
0.63
0.49
0.72
0.21
0.59

0.09
0.03
0.02
0.04
0.01
0.03
HO

0.86
1.51
1.59
1.75
0.81
1.43

0.70
0.83
0.87
0.95
0.67
0.78
H2O

15

1.54
1.61
0.66
1.30

0.06
0.54
0.22
0.60
0.02
0.52

PO3
0.88
1.46
1.43
1.65
0.99
1.34

0.77
0.81
0.94
0.93
0.67
0.86

HO

12b

Mg

Zn

PO3

0.88
1.48
1.54
1.76
0.81
1.40

0.81
0.86
0.94
0.93
0.83
0.88

6c

Ca

PO3

12a

6b
Mg

9b

6a
Mg

9a

3b
Mg

Structure

0.83
0.93
0.95
0.96
0.83
0.94

0.72
0.84
0.88
0.94
0.67
0.80

HPO3
.

1.35
1.72
1.76
1.83
1.33
1.69

a Charges

in e. For each element, the first row shows the charges obtained from Mulliken's population analysis [38], and the second row, those obtained from the
CHELPG scheme [39].

Moreover, the hydroxide anion is stable even taking into

account the solvation energies (Table 4) so the theoretical prediction is that the dissociation of a water molecule should
occur in the aqueous solution. This seems contradictory to
experimental data [47] of aqueous solutions of HP 2O 7 3 at pH
7.0; when either Mg or Zn is added, the change in pH shows
that a proton is released from the complex, that should thus be
converted into [M HP 2 O 7 ] 2 . The theoretical prediction
obtained here and in a previous work [29] leads to conclude
that the proton is released from one water molecule, leaving a
hydroxide anion attached to the complex. The permanence of
such a complex depends on the exchange rate between the

first and the second hydration shells. The results from nuclear
magnetic resonance experiments [48] show that this rate is
slow for both Mg2+ and Zn2+, whereas it is somewhat faster
for Ca2+. It has been shown in numerical simulations [40, 41]
that this is due to the fact that both Mg2+ and Zn2+ have a
depletion layer between their respective first and second hyration shells, where neither oxygens nor hydrogens are present,
this being strict for Mg2+ and a little less so for Zn2+ . On the
other hand, Ca2+ allows hydrogens in the region between its
first and second hydration shells, a situation that would immediately conduce to the transfer of the hydroxide anion to the
bulk, by means of proton exchanges (proton jumps). Thus, the

A comparative ab initio study of the isomerizations and hydrolyses of neutral and anionic M-pyrophosphate...

former two cations should be able to maintain the hydroxide

anion attached more easily than the latter. This would make a
rather important difference because Mg-PPi and Zn-PPi would
carry their nucleophile into the active site of the enzyme,
whereas Ca-PPi would not be able to do the same.
The relative gas-phase free energies of the various stable
configurations found in this work are depicted in the graphs of
Fig. 6. The effect of solvation can be seen in the corresponding graphs of Fig. 7. For the completely anhydrous complexes, the energies of the isomerizations of the Zn-pyrophosphates are somewhat higher than those of the Mg-pyrophosphates, whereas for the Ca-pyrophosphates these energies are
consistently lower (Table 8). Thus, it would seem that the
hydrolysis through a metaphosphate intermediate should be
facilitated by calcium; however, when the solvation energy is
taken into account, the picture changes: Ca-pyrophosphates
become generally more stable with respect to their metaphosphate isomers than Mg- and Zn-pyrophosphates. These results
allow for a reconsideration of the previously proposed dissociative mechanism [29]: the species entering the catalytic site
should have structure 9b. The hydroxide anion would be
attracted by the metallic cation in the catalytic site, and substituted by a water molecule, thus converting the dianionic 9b
into the monoanionic 8. This latter can be anchored in the catalytic site [14] and isomerize to 11. The results in Table 8
show that this reaction should be spontaneous for anhydrous
Ca-PPi and Mg-PPi, and reversible for Zn-PPi; though the
effect of full solvation is to impede these isomerizations in the
three cases (compare Fig. 6 to Fig. 7), it is to be expected [14,
45, 46] that the catalytic site regulates the amount of water
molecules that surround the substrate, thus permitting the variation of the free energies of the isomerizations. It is to be
noted that this mechanism requires the M-PPi complex to
carry its own nucleophile inside the catalytic site; this is possible for fully hydrated Mg-PPi and Zn-PPi, whereas Ca-PPi
would lose the hydroxide anion in the aqueous solution. This
would explain why the hydrolyses of both Mg- and Znpyrophosphates can be catalyzed by the enzyme, whereas the
hydrolysis of Ca-pyrophosphate cannot.
Recent studies [49, 50] on phosphate ester hydrolysis in
aqueous solutions compared the associative vs. the dissociative mechanisms, and showed that the experimental results
can be interpreted in terms of either of them, because the barriers for the associative pathways are similar to those of the
dissociative pathways; thus an enzyme active site could select
either of these mechanisms depending on the particular electrostatic environment. From our analysis of the charges we
found that the three cations, Ca2+ , Mg2+ and Zn2+, produce
very similar electronic distributions on the dianionic complexes and thus would promote similar reaction paths. This is in
agreement with various experimental studies on Rhodospirillum rubrum chromatophores showing that the ATPase
complex can catalyze Ca-ATP hydrolysis [51-53], albeit with
different kinetics than Mg-ATP. Thus, we can confidently
assert that the main difference in the biochemical roles of
Ca2+ , Mg2+ and Zn2+ in their interactions with pyrophosphates

157

stem from their distinctly different coordination properties.

Because the data presented in this work do not consider
the association of the metaphosphate with a nucleophile, they
cannot discriminate how associative or dissociative the mechanism of hydrolysis should be; what they show is the feasibility of a partly dissociative path, and the stabilization of a
hydroxide anion that can act as a nucleophile stronger than a
water molecule, in agreement with the proposal in Ref. [14].
Therefore, in this work we have found evidence of the
relevance of the intermolecular interactions in the energetics
of pyrophosphate hydrolysis. The facts that hydrated Ca2+ is
bigger and has a lower oxidizing power than both Mg2+ and
Zn2+ may also provide an explanation to the observation [15]
that the former cannot activate the hydrolysis of pyrophosphates chelated to tripositive ions by the membrane-bound
pyrophosphatase of Rhodospirillum rubrum whereas the two
latter do. Nevertheless, a recent study [54] of the soluble
Rhodospirillum rubrum F1-ATPase showed that unisite
hydrolysis in presence of Ca 2+ is many-fold higher than with
Mg2+. The previous hypothesis cannot explain this phenomenon as yet. However it is worth noticing that ATP has three
phosphates, thus a different structure, and the active sites of
ATPases are bigger than those of PPi-ases [20]. Further studies are required to clarify this.

Acknowledgments
This research was supported by the NSF, U. S. A.-CONACyT, Mexico, Cooperative Science Program, Grant INT931326, by DGAPA-UNAM, Grant ES-112896 and by
CONACyT, Grant L004-E. H. S.-M. Wishes to thank the
Mexico-U. S. A. Foundation for Science for a fellowship that
allowed him a ten-week stay at U. of A.
Supporting Information Available
Tables listing the cartesian coordinates of all the structures
shown in this paper, referred to their respective PMI frames,
with their SCF//SCF and MP2//SCF energies. This material
can be obtained by request [55] to [email protected].

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The Pacific Northwest Laboratory is a multi-program laboratory
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[email protected].

Revista de la Sociedad Qumica de Mxico, Vol. 46, Nm. 2 (2002) 159-166

Investigacin

Adsorcin de salicilato de sodio en solucin acuosa sobre carbn activado

R. Leyva Ramos*, L. G. Velzquez Vargas, J. Mendoza Barrn y R. M. Guerrero Coronado
Centro de Investigacin y Estudios de Posgrado. FCQ, Universidad Autnoma de San Luis Potos, Av. Dr. M. Nava. No 6,
San Luis Potos 78210, SLP, Mxico. Tel: (444)8262-440; Fax: (444)8262-372; E-mail: [email protected]
Recibido el 1o. de diciembre del 2001; aceptado el 28 de junio del 2002
Resumen. Los datos experimentales de adsorcin del salicilato sobre
carbn activado se interpretaron satisfactoriamente por la isoterma
Prausnitz-Radke. La capacidad de adsorcin aumenta al disminuir el
pH, pero disminuye al aumentar la temperatura y cuando }l carbn se
oxida con HNO3. A pH de 5 y 11, la capacidad aumenta ligeramente
con la adicin de NaCl, pero no a pH de 3. Se concluye que el mecanismo de adsorcin del salicilato es dependiente del pH y de la interaccin entre la molcula del salicilato y la superficie del carbn.
Palabras clave: Adsorcin, salicilato, Prausnitz-Radke, carbn.

Abstract. The experimental adsorption data of salicylate onto activated carbon were interpreted satisfactorily by the Prausnitz-Radke
isotherm. The adsorption capacity increases diminishing the pH, but
decreases increasing the temperature and when the carbon is oxidized
with HNO3. At pH 5 and 11, the capacity increases lightly with the
NaCl addition, but no at pH 3. It is concluded that the adsorption mechanism of salicylate is dependent upon the pH and the interaction
between the salicylate molecule and the carbon surface.
Keywords: Adsorption, salicylate, Prausnitz-Radke, carbon.

Introduccin

lculas disociadas o sin disociarse. Dependiendo del pH de la

solucin, el soluto disociado puede ser atrado o repelido por
interacciones electrostticas entre la superficie del carbn y la
molcula del soluto disociado [5]. Por otro lado, el soluto sin
disociar puede acumularse en la superficie debido a interacciones hidrofbicas entre la molcula del soluto y el solvente o
bien por la afinidad especfica que puede existir entre la
molcula del soluto y los sitios activos del carbn. Por lo
tanto, la adsorcin de un compuesto orgnico sobre carbn activado depende de las interacciones entre la molcula orgnica
y los sitios activos del carbn, es decir los complejos superficiales del oxgeno [6].
El cido saliclico y sus derivados constituyen aproximadamente la mitad del total de medicamentos derivados del
alquitrn de hulla que se producen en los Estados Unidos [2].
Por otro lado, el salicilato presente en las aguas residuales se
debe remover para evitar la contaminacin de ros, lagos y
mantos acuferos. En un estudio anterior [7] se report que el
salicilato se adsorbi sobre carbn activado y la masa adsorbida disminuy drsticamente cuando el pH se increment de 1 a
13; sin embargo, es necesario investigar ms detallada y extensamente la adsorcin de salicilato sobre carbn activado. Esto
permitir saber si el salicilato presente en solucin acuosa se
puede remover mediante la adsorcin sobre carbn activado.
El objetivo del presente trabajo es investigar el efecto de
las interacciones moleculares entre el salicilato y la superficie
del carbn, as como el efecto del pH y de la temperatura sobre
la isoterma de adsorcin. Adems, se estudiar el efecto de la
oxidacin del carbn sobre la capacidad de adsorcin y la reversibilidad de la isoterma de adsorcin, y se elucidar el mecanismo de adsorcin.

La presencia de compuestos orgnicos en aguas subterrneas,

potables y residuales municipales e industriales, representa un
serio peligro para el medio ambiente y, en particular, para la
salud humana. La gran mayora de estos compuestos son txicos, cancergenos y resistentes a la biodegradacin natural
(recalcitrantes)[1]. Las principales fuentes de estos compuestos orgnicos son las descargas industriales y municipales
y los lixiviados de confinamientos de residuos industriales y
municipales. Los compuestos orgnicos txicos ms frecuentemente encontrados son los compuestos fenlicos y el salicilato
es uno de los ms tpicos, ya que tiene aplicaciones muy diversas [2].
Los compuestos orgnicos se pueden eliminar del agua
mediante varios procesos y entre estos destaca la adsorcin
sobre carbn activado, que es la mejor tecnologa disponible
para tratar soluciones acuosas que contienen los compuestos
orgnicos siguientes: solventes aromticos, aromticos polinucleares, aromticos clorados, surfactantes, compuestos fenlicos, pesticidas, herbicidas, aminas aromticas y alifticas de
alto peso molecular y colorantes orgnicos solubles [1].
El carbn activado es el adsorbente ms verstil y eficiente para remover compuestos orgnicos en solucin acuosa.
Su capacidad de adsorcin se debe no solamente a su gran rea
especfica sino tambin a su naturaleza, la cual depende considerablemente del proceso de oxidacin-activacin empleado
para preparar el carbn activado [3, 4]. En solucin acuosa el
carbn activado tiene un comportamiento anfotrico, esto significa que la carga de su superficie depende del pH de la solucin. Este comportamiento es muy importante en la adsorcin
de solutos dbiles, porque stos se pueden adsorber como mo-

160

Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

Metodologa experimental

R. Leyva Ramos et al.

Tabla 1. Propiedades fisicoqumicas del carbn activado PE.
Propiedad

En este estudio se us carbn activado marca Barneby-Sutcliff, denominado comercialmente como PE y fabricado a partir de concha de coco. El carbn activado se trat mediante el
procedimiento siguiente: se lav varias veces con agua destilada, hasta que el agua ya no present polvo de carbn suspendido, luego se sec en una estufa a 383 K durante 24 h y se
guard en un recipiente de plstico cerrado. El carbn se caracteriz fsicamente por medio de un equipo de fisisorcin,
marca Micromeritics, modelo ASAP 2010, y adems, se le determinaron los sitios cidos y bsicos por el mtodo de titulacin cido-base propuesto por Boehm [8].
La determinacin de la carga del carbn activado en solucin acuosa as como la variacin de sta con respecto al pH
se efectu por el mtodo de titulacin potenciomtrica cidobase reportado en la literatura [9,10]. A partir de esta informacin se evalu el punto de carga cero (PCC) del carbn. Ms
detalles sobre la metodologa y los clculos se pueden encontrar en Ruiz Salazar [10].
El carbn se oxid con cido ntrico mediante el procedimiento siguiente: A un vaso de precipitado de 1000 mL se
agregaron 40 g de carbn tratado y se aadieron 200 mL de
una solucin de cido ntrico al 50 % v/v. Luego, se calent
durante 2 h aproximadamente, procurando que la temperatura
no fuese mayor de 323 K, se dej enfriar la solucin a temperatura ambiente ( 20 C) y se dren la solucin cida. El carbn se dej en agua desionizada durante 24 h, y enseguida se
lav varias veces con agua desionizada hasta que el pH del
agua de lavado se mantuvo constante y cercano al pH del agua
desionizada. Posteriormente, se sec en una estufa a 383 K
durante 24 h y se guard en un recpiente cerrado.
Los datos experimentales de la isoterma de adsorcin se
obtuvieron en#un adsorbedor de lote consistente de un matraz
Erlenmeyer de 500 mL, colocado dentro de un bao a temperatura constante. La solucin del adsorbedor se mezcl por
medio de una barra de agitacin recubierta con Tefln, accionada por una placa de agitacin colocada debajo del bao de
temperatura constante. El carbn se coloc en canastillas de
malla de Nylon para evitar que la friccin entre las partculas
y la pared formase polvos finos que interfirieran con el anlisis de la solucin.
La concentracin del salicilato de sodio en solucin acuosa se determin por un mtodo espectrofotomtrico UVVisible. La absorbancia se midi mediante un espectrofotmetro UV-Visible de doble haz, marca Shimadzu, modelo
UV-160, a una longitud de onda de 297 nm. La concentracin
de la muestra se determin preparando previamente una curva
de calibracin, concentracin contra absorbancia, en un intervalo de concentraciones de 1 a 20 mg / L, al mismo pH de la
muestra.
Los datos de las isotermas de adsorcin se obtuvieron en
el adsorbedor de lote, contactando 0.5 o 0.25 g de carbn con
un volumen de 250 o 500 mL de una solucin de salicilato de
sodio de concentracin inicial conocida y pH ajustado previamente. Antes de agregar el carbn se tom una muestra de 10

Carbn sin oxidar

Area especfica, m2 / g
Dimetro promedio
del poro, nm
Concentracin de sitios
cidos, meq / g
Concentracin de sitios
bsicos, meq / g

1055
2

Carbn oxidado
974.9
2

0.20

1.00

0.44

0.14

mL para corroborar la concentracin inicial del salicilato de

sodio en la solucin. El carbn se agreg a la solucin de salicilato y se dejaron en contacto durante 6 o 7 das, tiempo suficiente para alcanzar el equilibrio. En cada periodo de tiempo
el pH de la solucin se midi por medio de un pHmetro y se
ajust a un cierto valor adicionando, segn el caso, solucin
de HCl o NaOH 0.01 M. Se consider que ya se haba alcanzado el equilibrio cuando las concentraciones de dos muestras
consecutivas no varan significativamente. Las concentraciones de las muestras se determinaron mediante el procedimiento indicado, mientras que la cantidad de salicilato adsorbido sobre el carbn se calcul mediante un balance de masa.
La reversibilidad de la adsorcin se investig efectuando
experimentos de desorcin, consistentes en realizar un experimento de adsorcin y, una vez que se alcanz el equilibrio, el
carbn saturado con salicilato de sodio se removi de la solucin y se coloc dentro de un volumen conocido de una solucin sin salicilato de sodio y de pH conocido. Esta etapa se
efectu removiendo la canastilla de Nylon conteniendo el carbn activado saturado y lavando la canastilla con agua destilada
para eliminar la solucin de salicilato atrapada o adherida a las
partculas de carbn dentro de la canastilla. La etapa de lavado
se realiz sumergiendo la canastilla en agua desionizada
durante 10 seg. El carbn y la solucin se dejaron en contacto
durante 5 das, para alcanzar un nuevo equilibrio. En este periodo el pH de la solucin se mantuvo constante, adicionando solucin de HCl o NaOH 0.01 M. La cantidad de salicilato que
permaneci adsorbido se calcul por un balance de masa.
Para evaluar el efecto de la adicin de NaCl en la isoterma de adsorcin se realizaron experimentos de adsorcin a pH
de 3, 5 y 11 agregando NaCl a la solucin para obtener concentraciones de 0.01 y 0.1 M de NaCl.

Resultados y discusin
Caracterizacin fisicoqumica del carbn activado
Las propiedades fisicoqumicas del carbn activado se exhiben en la Tabla 1. Los valores del rea especfica y el dimetro promedio del poro se encuentran dentro del intervalo de
valores reportados en la literatura para los carbones activados
[7, 11]. Como se puede observar en la Tabla 1, el carbn activado contiene aproximadamente el doble de sitios bsicos con
respecto a los sitios cidos.

Adsorcin de salicilato de sodio en solucin acuosa sobre carbn activado

161

Tabla 2. Valores de las constantes de las isotermas de Freundlich y Langmuir.

pH

2
3
3*
3**
5
7
9
9
9
11
11*
11**

T(C)

Freundlich
k
(L 1/n mmol 1 1 / ng1)

% Desv
(%)

K
(L / mmol)

Langmuir
qm
(mmol / g)

% Desv (%)
(%)

2.674
2.523
2.021
2.708
0.907
0.603
0.510
0.515
0.364
0.393
0.217
0.524

6.07
5.37
4.97
6.27
3.75
3.83
3.27
3.74
3.75
3.16
2.22
2.59

2.19
4.16
2.38
3.38
4.02
5.18
2.17
0.94
4.98
5.25
2.43
5.85

55.12
25.54
23.98
312.8
8.333
12.13
15.96
18.79
11.72
14.49
3.397
43.30

2.502
2.459
2.006
1.998
1.024
0.617
0.450
0.476
0.364
0.366
0.261
0.263

8.62
6.79
7.72
8.54
6.96
13.95
8.83
8.80
3.55
19.73
5.04
9.22

25
25
25
25
25
25
25
15
40
25
25
25

* Carbn oxidado con HNO 3

** Etapa de desorcin

Tabla 3. Valores de las constantes de la isoterma de Prausnitz-Radke.

pH

T
(C)

a
(L / g)

b
(L mmol)

% Desv
(%)

25
25
25
25
25
25
25
15
40
25
25
25

666.8
240.1
231.4
9.837 104
30.05
1.857 106
5.578 105
135.1
5.172
66.85
5.726 104
29.82

251.0
95.17
114.1
3.636 104
32.02
3.078 106
1.092 106
263.0
14.12
171.10
2.648 105
67.80

0.861
0.852
0.831
0.841
0.792
0.739
0.693
0.745
0.938
0.705
0.553
0.722

1.33
3.91
1.75
3.40
2.78
5.18
2.17
0.81
3.34
4.38
2.32
2.71

2
3
3*
3**
5
7
9
9
9
11
11*
11**
*Carbn oxidado con HNO3
**Etapa de desorcin.

Como era de esperarse, la superficie del carbn se modific al oxidarlo con cido ntrico. En la Tabla 1 se observa que
la oxidacin del carbn provoc que la concentracin de los
sitios cidos aumente 5 veces y, por el contrario, la de los
sitios bsicos disminuye cerca de 3 veces. Resultados similares han sido reportados para otros carbones [12]. Tambin,
se observa que el rea especfica disminuye ligeramente con
dicha modificacin mientras que el dimetro promedio de los
poros prcticamente se mantiene constante.
Isotermas de adsorcin
Los datos experimentales de las isotermas de adsorcin se
ajustaron con las isotermas de Langmuir, Freundlich y Prausnitz-Radke [13] que se expresan matemticamente como:
q=

qm KC
1 + KC

(1)

q = kC n

(2)

q=

aC
1 + bC

(3)

Las constantes de estas isotermas se evaluaron por un

mtodo de mnimos cuadrados mediante el mtodo de optimizacin de Rosenbrock y quasi-Newton [14]. Los valores de
las constantes de cada isoterma, as como los porcentajes de
desviacin promedio absoluto, se muestran en las Tablas 2 y
3. El porcentaje de desviacin promedio se defini de la manera siguiente:
% Desv =

qcal qexp
1
100 %

N
qexp

(4)

Donde N = nmero de datos experimentales

Se consider que la isoterma que mejor ajust a los datos
es aquella que presenta el menor porcentaje de desviacin
promedio absoluto. Revisando los valores de los porcentajes
de desviacin promedio reportados en las Tablas 2 y 3, se

Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

R. Leyva Ramos et al.

3,0

Moles adsorbidos, mmol/g

2,5
pH=2
pH=3
pH=5
pH=7
pH=9
pH=11

2,0

1,5

1,0

0,5

0,0
0,0

0,2

0,4

0,6

0,8

1,0

1,2

1,4

Concentracin en el equilibrio, mmol/L

Fig. 1. Efecto del pH en la isoterma de adsorcin del salicilato de sodio sobre el carbn activado PE. T = 298 K. Las lneas representan la
isoterma de Prausnitz-Radke.

not que la isoterma de Prausnitz-Radke ajusta mejor los

datos experimentales que las isotermas de Langmuir y
Freundlich. En base a lo anterior se consider que la isoterma
de Prausnitz-Radke interpreta los datos en condiciones diversas de temperatura y pH. Esto se debe a que la isoterma de
Prausnitz-Radke tiene tres parmetros de ajuste, mientras que
las isotermas de Langmuir y Freundlich solamente tienen dos.
Los datos experimentales de las isotermas se muestran en
la Fig. 1, en donde las lneas continuas representan a las isotermas de Prausnitz-Radke. Los datos de las isotermas que se
exhiben en la Fig. 1 no siguen el comportamiento de la isoterma de Langmuir porque la masa de salicilato adsorbido no se
hace asinttica a altas concentraciones, sino contina incrementando cuando se aumenta la concentracin. Por esta razn,
la isoterma de Langmuir no interpreta correctamente los datos
de la isoterma de adsorcin.
Efecto del pH en la isoterma de adsorcin
En la Fig. 1 se muestran las isotermas de adsorcin a una temperatura de 298 K y para valores del pH de la solucin de 2, 3,
5, 7, 9 y 11. En esta figura se observa que a medida que se
aumenta el pH de la solucin, de 2 a 11, la masa de salicilato
adsorbido disminuye consigerablemente. En este intervalo de
pH la mxima capacidad de adsorcin, qm , obtenida por medio
de la isoterma de Langmuir (Tabla 2), disminuye un poco ms
de seis veces. Esto indica que la adsorcin del ion salicilato es
favorecida por la presencia de iones hidrgeno en la solucin.
Un comportamiento similar ha sido reportado para la adsorcin de cidos carboxlicos aromticos sobre carbn activado
[15]. Es importante mencionar que se hicieron experimentos a
pH = 1, pero no se reportaron debido a que se form un precipitado blanco que probablemente sea cido saliclico.
Esta bien documentado que el cido saliclico (H2 Sa) es
un cido dbil con pK1 = 2.97 y pK 2 = 13.40 [16]. Las reacciones de disociacin son las siguientes:
H 2Sa HSa + H
1

HSa

Sa + H

pK1 = 2.97
pK 2 = 13.4

Usando estos valores se prepar el diagrama de especiacin que se muestra en la Fig. 2. En este diagrama se observa que a pH de 2 o menor, la especie predominante es el cido
saliclico sin disociar (H2 Sa); a pH = 3, valor muy cercano a
pK 1 = 2.97, se encuentran presentes las especies H2 Sa y HSa1
en una relacin cercana de 1 / 1; y a pH entre 5 y 11, la
especie predominante es HSa1 . Con base en que el salicilato
se adsorbe sobre el carbn activado en el intervalo de pH entre
2 y 11, entonces el salicilato se adsorbe como cido saliclico
sin disociar y tambin como anin HSa1 .
La masa de salicilato adsorbido a pH de 2 y 3 es mucho
mayor que a pH de 9 y 11. Con base en el diagrama de especiacin, se puede concluir que la especie H2 Sa se adsorbe
mucho ms que la especie HSa1. A pH = 2 la especie H2 Sa
representa 90.3 % molar del salicilato total presente en la
solucin, mientras que a pH = 3 la especie de H2Sa es 48.3 %.
Suponiendo que en este intervalo de valores de pH el salicilato se adsorbe nicamente como H2 Sa, entonces la isoterma
puede expresarse en trminos de los moles de H2 Sa adsorbido
contra la concentracin de H2 Sa. Esta concentracin se estima
por medio del diagrama de especiacin, la concentracin total
del salicilato y el pH de la solucin. La isoterma del H 2Sa calculada de esta forma se exhibe en la Fig. 3.
La caracterstica ms sobresaliente de la Fig. 3 es que los
datos a pH = 2 y pH = 3 se pueden representar por una sola
isoterma de adsorcin, considerando que H2 Sa es la nica
especie que se adsorbe. Por lo anterior, la disminucin de la
cantidad de salicilato adsorbido cuando el pH aumenta de 2 a
3, puede atribuirse a que la fraccin molar o la concentracin
de la especie H 2Sa disminuye al aumentar el pH de la solucin.
La isoterma de adsorcin del H2 Sa se representa por la
isoterma de Prausnitz-Radke siguiente:
q=

495 .5 * CH 2 Sa
0 .863
1 +180 .1* C H 2Sa

(5)

Los parmetros de esta isoterma son cercanos a los valores que se haban calculado a pH = 2 (Tabla 3), sin considerar
alguna especie en particualr. Esto se debe a que pH = 2, la
especie H2 Sa predomina, correspondiendo al 90.3 % molar de
todo el salicilato presente en la solucin.

1,0
0,9
0,8
0,7

Fraccin molar

162

-2

0,6

Sa

-1

0,5

HSa
H2Sa

0,4
0,3
0,2
0,1
0,0

10

11

pH

Fig. 2. Diagrama de especiacin del cido saliclico.

12

13

14

Adsorcin de salicilato de sodio en solucin acuosa sobre carbn activado

163
4,0

2,0
q=

494.5C
1 + 180.1C

0. 863

1,5

1,0

0,5

0,0
0,0

q=

3,5

2,5
Moles adsorbidos, mmol/g

Moles de H2Sa adsorbidos, mmol/g

3,0

pH=2
pH=3
0,2

0,3

0,4

0,5

0,6

0,7

0,8

0,9

Desorcin
2,5

qo

2a
2d

2,0

1,0

Ad
sor
ci
n

1,0

qe

0,4

0,6

0,8

1,0

1,2

1,4

1,6

1,8

2,0

2,2

(7)

En el equilibrio q = q e y C = Ce . La etapa de desorcin

se exhibe en la Fig. 4, que muestra un dato de adsorcin y su
correspondiente para la desorcin, la adsorcin se design con
a y la desorcin con d. La desorcin y adsorcin se realizaron
usando la misma relacin V / m y por lo tanto las lneas rectas
que las representan son paralelas (Fig. 4).
Si la adsorcin es reversible entonces el nuevo equilibrio se
encuentra sobre la isoterma de adsorcin y ste se representa en
la Fig. 4 como qe = qTeo y Ce = C Teo. Los valores de qTeo y
CTeo se pueden calcular resolviendo las ecuaciones siguientes:

Fig. 4. Ilustracin del proceso de adsorcin-desorcin del salicilato

de sodio pH = 3 y T = 298 K.

V
CTeo
+ q0
m

a CTeo
=
)
1 + b (CTeo

qTeo =

(8)

qTeo

(9)

En caso de que la adsorcin no sea reversible, entonces

qe es mayor que qTeo y Ce es menor que C Teo.
Los datos e isotermas que se obtuvieron en la adsorcin y
la desorcin del salicilato se graficaron en las Figs. 5 y 6 para
valores del pH de 3 y 11, respectivamente. En la Fig. 3 se
observa que los datos de desorcin no se encuentran sobre la
isoterma de adsorcin, esto indica que la adsorcin no es
reversible a pH = 3. Por otro lado, los resultados a pH = 11
graficados en la Fig. 6 revelan que la adsorcin es reversible
para Ce 0.011 mmol / L o q e > 0.091 mmol / g porque los
datos de desorcin siguen el mismo comportamiento que la
isoterma de adsorcin; pero no lo es para Ce 0.011 mmol /
L o qe > 0.091 mmol / g porque los datos de desorcin no
corresponden a la isoterma de adsorcin.
El porcentaje de desorcin del salicilato adsorbido se estim por medio de la ecuacin siguiente:
% Desorcin=

q o q e
1 00%
qo q Teo

(10)

Moles adsorbidos, mmol/g

(6)

Esta es la ecuacin de una lnea recta que expresa la

relacin entre q y C durante la adsorcin. Una vez que se
alcanza el equilibrio, entonces q = q e y C = Ce y este punto se
encuentra sobre la isoterma de adsorcin. Esta etapa de adsorcin se ilustra en la Fig. 4.
En la desorcin, la concentracin del salicilato aumenta
de 0 a Ce, mientras que la masa de salicilato adsorbido se
reduce de qo a q e. El termino qo corresponde a la masa de
salicilato que se adsorbi en la etapa de adsorcin (q o = q e).
En este caso, la relacin entre q y C se representa por la
ecuacin lineal siguiente:
V
C + q0
m

0,2

Co

Ce

C Teo

Concentracin en el equilibrio, mmol/L

Reversibilidad de la adsorcin del salicilato

de sodio sobre el carbn activado
La reversibilidad de la adsorcin se investig realizando experimentos de adsorcin-desorcin. En la etapa de adsorcin, el
salicilato se adsorbe sobre el carbn activado al introducir el
carbn en una solucin de salicilato de sodio, mientras que en
la de desorcin el salicilato se desorbe al colocar el carbn
saturado con salicilato en una solucin que no contiene salicilato. El proceso de adsorcin-desorcin se ilustra en la Fig. 4.
Durante la adsorcin, la concentracin del salicilato (C)
disminuye de Co hasta Ce, mientras que la masa de salicilato
adsorbido (q) aumenta de 0 a q e. Realizando un balance del
salicilato, se obtiene la ecuacin siguiente:

q=

2 4 0C
1 + 9 5.1 7C 0. 853

qTeo
1,5

0,0
0,0

Fig. 3. Efecto del pH en la isoterma de adsorcin del H2Sa sobre el

carbn activado PE.

V
V
C + Co
m
m

q=

qe

0,5

Concentracin de H 2 Sa en el equilibrio, mmol/L

q=

Isoterma de la etapa de adsorcin

Isoterma de la etapa de desorcin

3,0

C e

0,1

9. 837 x10 4 C
1 + 3. 636 x10 4 C 0. 841

Concentracin en el equilibrio, mmol/L

Fig. 5. Isotermas de adsorcin del proceso de adsorcin-desorcin T

= 298 K y pH = 3.

164

Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

R. Leyva Ramos et al.

3,0

0,24

q=

0,22

1 + 6 7.8 0C0 .722

2,5

0,18
0,16
0,14

q=

q'e=0.091 mmol/g

Moles adsorbidos, mmol/g

Moles adsorbidos, mmol/g

0,20

2 9.8 2C

6 6.8 5C
1 + 1 7 1.1C 0. 705

0,12
0,10
0,08
0,06
0,04

C'e=0.011 mmol/L

0,00
0,00 0,01 0,02 0,03 0,04 0,05 0,06 0,07 0,08

1,5

pH=3 Carbn sin oxidar

pH=3 Carbn oxidado con HNO
3
pH=11 Carbn sin oxidar
pH=11 Carbn oxidado con HNO
3

1,0

0,5

Isoterma de la etapa de desorcin

Isoterma de la etapa de adsorcin

0,02

2,0

0,09 0,10 0,11 0,12 0,13 0,14 0,15

0,0
0,0

0,1

0,2

0,3

0,4

0,5

0,6

0,7

0,8

0,9

1,0

1,1

1,2

1,3

1,4

Concentracin en el equilibrio, mmol/L

Concentracin en el equilibrio, mmol/L

Fig. 6. Isotermas de adsorcin del proceso adsorcin-desorcinT =

298 K y pH = 11.

Fig. 8. Efecto de la oxidacin del carbn en la isoterma de adsorcin

del salicilato de sodio T = 298 K.

El numerador representa la masa de salicilato que se desorbi mientras que el denominador es la masa de salicilato
que se desorbera si la adsorcin fuera reversible. Es importante aclarar que los porcentajes de desorcin dependen de la
relacin V / m.
El porcentaje de desorcin se puede considerar como un
criterio de reversibilidad. La adsorcin es reversible cuando el
porcentaje de desorcin es igual a 100 % pero no lo es cuando
es menor de 100 %. A pH = 3 los porcentajes de desorcin
varan de 18 % a 84 %, entonces a este pH la adsorcin no es
reversible. A pH = 11 el porcentaje de desorcin es igual a
100 %, cuando la masa de salicilato adsorbido al final del proceso de desorcin, q e, es menor de 0.091 mmol / g; y est en
el intervalo de 75 a 100 % para q e mayor de 0.091 mmol / g.
En otras palabras, la adsorcin es reversible cuando q e es
igual a qTeo, para pH = 11; esta condicin se alcanza cuando la
isoterma de adsorcin y la de desorcin se empalman. Una
posible explicacin de estos resultados es que la adsorcin
puede ocurrir por dos mecanismos, uno que es reversible
(adsorcin fsica) y otro que no lo es (adsorcin qumica). La
adsorcin fsica ocurre exclusivamente para q 0.091 mmol /
g, mientras que la adsorcin fsica y qumica se llevan a cabo
para q > 0.091 mmol / g. Esto implicara que la adsorcin ocurre en dos tipos de sitios activos diferentes.

Efecto de la temperatura sobre la isoterma de adsorcin

El efecto de la temperatura sobre la isoterma de adsorcin se
estudi determinando la isotermas a las temperaturas de 288,
298 y 313 K y pH de 3 y 9. Las isotermas a pH = 9 se exhiben
en la Fig. 7, donde se observa que a medida que se aumenta la
temperatura, la isoterma de adsorcin diminuye. Al incrementar
la temperatura de 288 K a 298 K se provoca una ligera disminucin de la isoterma, pero el aumento de 298 K a 313 K provoca
una disminucin considerable. En promedio, la capacidad de
adsorcin se reduce 5.3 % y 19.1 % cuando la temperatura se
aumenta de 288 a 298 K y de 298 a 313 K, respectivamente.
Estos valores se estimaron comparando las masas mximas de
salicilato adsorbido, qm (Tabla 2). No se muestran los resultados del efecto de la temperatura a pH = 3 porque se observ un
comportamiento muy similar que a pH = 9.
El comportamiento anterior puede explicarse considerando que al aumentar la temperatura las molculas de salicilato
en solucin poseen ms energa, por lo que requieren ms
energa para adsorberse. Por otro lado, la energa vibracional
de las molculas adsorbidas crece cuando se eleva la temperatura, y de esta manera, ms molculas adsorbidas poseen la
suficiente energa para desorberse [7]. Por lo anterior, a mayor
temperatura se adsorbe un menor nmero de molculas de
salicilato.

0,5

Moles adsorbidos, mmol/g

0,4

0,3

0,2

T=15 C
T=25 C
T=40 C

0,1
t

0,0
0,0

0,1

0,2

0,3

0,4

0,5

0,6

0,7

0,8

0,9

Concentracin en el equilibrio, mmol/L

Fig. 7. Efecto de la temperatura en la isoterma de adsorcin del salicilato de sodio sobre el carbn activado PE pH = 9.

Efecto de la oxidacin del carbn en la isoterma de adsorcin

Este efecto se investig determinando la isoterma de adsorcin sobre el carbn sin oxidar y el carbn oxidado con
HNO3. Los resultados se exhiben en la Fig. 8 para pH = 3 y
pH = 11. Para estos valores del pH, la oxidacin del carbn
provoca una disminucin de la capacidad de adsorcin, la cual
es ms pronunciada a pH = 11 que a pH = 3, esto se observa al
comparar los valores de qm para el carbn sin oxidar y para el
oxidado (Tabla 2). Se puede puntualizar que a pH = 3 la masa
mxima de salicilato adsorbido se reduce 18.4 % y a pH = 11,
33.75 %. Por otro lado, la oxidacin del carbn provoca que
los sitios cidos aumenten cinco veces, mientras que los sitios
bsicos disminuyen un poco ms de tres veces. Resultados
similares se han reportado en otros trabajos sobre la oxidacin
del carbn activado con HNO 3 [12].

Adsorcin de salicilato de sodio en solucin acuosa sobre carbn activado

165

2,8

30

2,6
2,4

20

KCl=0.01 M
KCl=0.1 M

pH=3, NaCl=0.0 M
pH=3, NaCl=0.1M
pH=5, NaCl=0.0 M
pH=5, NaCl=0.1 M
pH=11, NaCl=0.0 M
pH=11, NaCl=0.01 M
pH=11, NaCl=0.1 M

1,8
1,6
1,4

10
2

2,0

Carga, mC/m

Moles adsorbidos, mmol/g

2,2

1,2
1,0

-10

0,8
0,6
-20

0,4

PCC=7.13

0,2
0,0
0,0

-30

0,1

0,2

0,3

0,4

0,5

0,6

0,7

0,8

0,9

1,0

1,1

1,2

1,3

1,4

Concentracin en el equilibrio, mmol/L

10

11

12

pH

Fig. 9. Efecto de la adicin de NaCl en la isoterma de adsorcin T =

298 K.

Fig. 10. Distribucin de la carga del carbn sin oxidar contra el pH

de la solucin.

La disminucin de la capacidad de adsorcin con la oxidacin del carbn se puede explicar considerando que la
adsorcin del salicilato de sodio ocurre principalmente en los
sitios bsicos del carbn, entonces la disminucin de la capacidad de adsorcin se puede atribuir a la reduccin del nmero
total de sitios bsicos causada por la oxidacin. Sin embargo,
el porcentaje de reduccin en la capacidad de adsorcin no es
proporcional al porcentaje de disminucin de los sitios bsicos. El carbn es un adsorbente heterogneo y puede tener
varios tipos distintos de sitios bsicos. La concentracin de los
sitios bsicos que se reporta en la Tabla 1 corresponde al total.
El salicilato se puede estar adsorbiendo en un cierto tipo de
sitio bsico y quizs por esta razn la reduccin de la capacidad de adsorcin no es proporcional a la disminucin de la
concentracin total de sitios bsicos.

pacidad de adsorcin. La anterior explicacin fue sugerida por

Cooney y Wijaya [15].

Efecto de la adicin de NaCl en la isoterma de adsorcin

En la Fig. 9 se muestra el efecto de la adicin de NaCl sobre
la isoterma de adsorcin y se nota que la adicin de NaCl no
afecta la capacidad de adsorcin a pH = 3, esto puede atribuirse a que el salicilato se adsorbe como cido saliclico
(H2 Sa) sin disociar, por lo que la adsorcin no se debe a interacciones electrostticas que pudieran ser afectadas por la
presencia de los iones Na+ y Cl . Sin embargo, la adicin de
NaCl afecta considerablemente la adsorcin del salicilato a
pH = 11, provocando un aumento de la capacidad de adsorcin. En la Fig. 9 se nota que aumentando la concentracin de
NaCl de 0.01 a 0.1 M, aumenta la cantidad de salicilato
adsorbido.
Resultados similares se reportan en el caso de la adsorcin de cido benzoico sobre carbn activado, cuando se adiciona NaCl [15]. Este efecto puede explicarse suponiendo que
el salicilato se esta adsorbiendo como anin HSa , pero no por
intercambio inico. En estas condiciones, el anin salicilato
adsorbido hace que la superficie del carbn est cargada negativamente, y por esta razn los aniones salicilato que estn en
solucin son repelidos de la superficie y no se adsorben. Al
agregar cationes Na+ se considera que estos son atrados por la
carga negativa del anin HSa adsorbido, reduciendo la repulsin a los aniones salicilato y de esta manera se aumenta la ca-

Carga superficial del carbn

La distribucin de la carga superficial del carbn con respecto
al pH de la solucin se evalu mediante un mtodo de titulacin. En la Fig. 10 se exhiben los resultados del carbn sin
oxidar. El punto de carga cero (PCC) del carbn es el pH al
cual la carga superficial es neutra; el PCC del carbn PE sin
oxidar es igual 7.13. A pH menores del PCC, la superficie est
cargada positivamente y a pH mayores del PCC, est cargada
negativamente. La distribucin de la carga sobre el carbn
oxidado tambin se determin y se encontr que el PCC del
carbn oxidado es de 3.05. As, la oxidacin del carbn disminuye el PCC porque se formaron ms sitios cidos sobre la
superficie del carbn.
Mecanismo de adsorcin
Con base en la discusin anterior, se puede suponer que la
adsorcin del salicilato de sodio no ocurre por medio de un
mecanismo nico y es funcin de varios tipos de interaccin
entre el soluto y la superficie del carbn, as como del pH de
la solucin.
A pH 3, la superficie est cargada positivamente, por lo
que la especie que se adsorbe solo puede ser H 2 Sa, que es neutra. En estas condiciones, las atracciones electrostticas parecen no influir en la adsorcin. A pH entre 5 y 7 la especie que
se adsorbe es H2 Sa1 y la superficie est cargada positivamente, por lo tanto la atraccin electrosttica entre la superficie y el anin favorece la acumulacin del HSa 1 sobre la
superficie del carbn. La disminucin en la capacidad de
adsorcin al aumentar el pH se puede atribuir a que la carga
tambin disminuye. A pH entre 7 y 11, la superficie esta cargada negativamente y la especie presente es el HSa1, por lo
tanto existe repulsin entre el anin y la superficie. La adsorcin ocurre al vencer esta repulsin electrosttica.

166

Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

R. Leyva Ramos et al.

Conclusiones

Referencias

La isoterma de adsorcin del salicilato sobre el carbn activado PE se ajust mucho mejor mediante la isoterma de Prausnitz-Radke. Esta es muy dependiente del pH; la isoterma disminuye drsticamente cuando el pH aumenta de 3 a 11 y la
mxima adsorcin se obtiene a pH = 2. La isoterma tambin
depende de la temperatura y disminuye con la temperatura.
La oxidacin del carbn activado con HNO3 aumenta la
concentracin de los sitios cidos pero disminuye la concentracin de los sitios bsicos. La capacidad de adsorcin del
carbn se reduce al oxidarlo, porque parte del salicilato se
adsorbe sobre los sitios bsicos.
Los estudios de reversibilidad de la adsorcin del salicilato demostraron que la adsorcin no es reversible a pH = 3,
logrndose porcentajes de desorcin entre 18 y 84 %. A pH =
11 la adsorcin es reversible para q menores de 0.091 mmol /
g, pero no lo es para q mayores de este valor.
Para aquellos valores de pH entre 5 y 11, la adicin de
NaCl causa un aumento de la masa de salicilato adsorbido,
porque los iones Na + interactan con el ion HSa adsorbido
sobre la superficie y, de esta manera, reducen la repulsin
entre los ion HSa adsorbidos y los aniones HSa que estn en
solucin. Sin embargo, a pH = 3, la adicin de NaCl no afecta
la isoterma de adsorcin porque el salicilato est adsorbido
como H 2Sa.
La adsorcin de salicilato ocurre por dos mecanismos,
uno que es reversible y otro que no lo es. Adems, el mecanismo que predomina depende del pH de la solucin.

1. EPA, Granular Activated Carbon Treatment, Engineering

Bulletin, EPA/540/2-91/024, 1991.
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CRC Press, 1995-1996.

Revista de la Sociedad Qumica de Mxico, Vol. 46, Nm. 2 (2002) 167-174

Revisin

Anlisis por inyeccin en flujo: herramienta clave para

la automatizacin analtica
Mara del Pilar Caizares Macas*
Facultad de Qumica, Universidad Nacional Autnoma de Mxico. Ciudad Universitaria, Coyoacn 04510, Mxico, D.F.
Tel: 5622-3786; Fax: 5622-3723. E-mail: [email protected]
Recibido el 30 de mayo del 2001; aceptado el 11 de enero del 2002
Resumen. El anlisis por inyeccin en flujo (FIA, por sus siglas en
ingls: Flow Injection Analysis), en sus diferentes versiones, es una
de las formas ms avanzada que el qumico analtico tiene a su disposicin para manipular disoluciones acuosas o mezclar reactivos y
as, sin intervencin humana, finalmente transportar al lugar de medida los componentes de una o ms reacciones qumicas. En este trabajo se hace una revisin desde el inicio del Anlisis por Inyeccin en
Flujo hasta nuestros das y el futuro que le espera a esta tcnica
analtica que cada vez es ms utilizada en los laboratorios de rutina
de diversas reas (clnica, farmacutica, ambiental y de alimento),
gracias a su gran versatilidad.
Palabras claves: Anlisis por Inyeccin en Flujo, desarrollo del FIA.

Abstract. Flow Injection Analysis (FIA) in its different versions, is

one of the most advanced technique that can be used to manage aqueous solutions or to mix reagents without the human hand by the analytical chemist and so, finally, carry to the measurement place the
compounds of one or more chemical reactions. A revision from the
beginning of the FIA until our days and the expected future for this
analytical technique, which is more and more applied in clinical,
pharmacological, environmental and food routine laboratories because of its good versatility, is made in this paper.
Keywords: Flow injection, development of FIA.

Introduccin

anlisis por inyeccin en flujo. El impacto que esta tcnica

provoc en muchos investigadores result en el desarrollo de
nuevas metodologas por FIA, especialmente en el anlisis de
aguas. Para 1979 se contaba ya con 80 publicaciones y hoy, a
25 aos de los inicios del FIA, el nmero de publicaciones
estimado es de 10,000.

El uso de los mtodos automticos de anlisis va ligado al

concepto de sustitucin de una operacin o medida esttica
realizada manualmente por una operacin y medida continua o
secuencial. Este concepto lo introdujo Skeggs en 1957 [1] al
describir el primer sistema de flujo continuo segmentado
empleando burbujas de aire para dividir el flujo de la muestra
en muchas porciones individuales. Este sistema se utiliz,
principalmente, en laboratorios de anlisis clnicos en la dcada de los 60 cuando salieron al mercado los primeros autoanalizadores semiautomticos. La importancia de estos mtodos
radicaba principalmente en la disminucin de la manipulacin
del analista en el progreso de la reaccin, obteniendo una metodologa que solo poda ser semiautomatizada debido al
poco desarrollo en los programas de computacin capaces de
procesar los datos obtenidos por el instrumento analtico, en
muchos casos, los datos eran recolectados por medio exclusivamente de un graficador de carta.
Entre los mtodos automticos de anlisis se encuentra el
Anlisis por Inyeccin en Flujo (FIA: flow injection analysis)
concepto introducido por Ruzicka y Hansen en el primer
artculo publicado en 1975 [2] aunque en 1970 Nagy, Feher y
Pungor [3] describen el uso de electrodos de grafito para mediciones voltamperomtricas de muestras inyectadas, por
medio de una jeringa hipodrmica, dentro de un portador, sin
segmentar el flujo. Este trabajo es quizs el primer informe acerca de lo que podra ser lo que posteriormente se llamo

Anlisis por inyeccin en flujo

En la dcada de los sesenta el mtodo automtico continuo de
anlisis ms utilizado fue sin duda el anlisis por flujo segmentado (SFA: segmented flow analysis). En esta tcnica las
muestras son aspiradas secuencialmente y entre ellas se sitan
burbujas de aire que separan (segmentan) el flujo establecido,
incluido un ciclo de lavado para evitar contaminacin entre
muestras; las burbujas de aire se eliminan antes de que alcancen la celda de flujo localizada en el detector. El anlisis por
inyeccin en flujo tiene su antecedente en el SFA; pero en
FIA, a diferencia del SFA, el flujo no esta segmentado y la
muestra es inyectada en lugar de aspirada, en el momento de
la deteccin no se alcanza ni el equilibrio fsico ni qumico.
En la Fig. 1 se muestran las configuraciones generales para
FIA y SFA.
En los primeros trabajos de FIA se presupona la existencia de un flujo turbulento para explicar la ausencia de contaminacin mutua de dos muestras inyectadas sucesivamente en
el flujo [2]. En trabajos publicados posteriormente White y sus

168

Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

Mara del Pilar Caizares

A)

FLUJO

transiente cuyo mximo corresponde a la parte del bolo menos

diluida.
Existen dos mecanismos que contribuyen a la dispersin
del bolo de muestra inyectado:

PORTADOR

MUESTRA

PORTADOR

MUESTRA

a) El transporte por conveccin desarrollado en condiciones de

flujo laminar, que origina un perfil parablico donde la velocidad lineal de las molculas en las paredes del tubo es igual
a cero, mientras que las molculas que se encuentran en el
centro del tubo viajan al doble de la velocidad media; y
b) El transporte por difusin debido a la formacin de gradientes de concentracin (horizontales y/o verticales) en
diferentes momentos del transporte por conveccin.

Fig. 1. A) Configuracin bsica para Anlisis por Inyeccin en Flujo;

B) Configuracin bsica para Anlisis por Flujo Segmentado.

colaboradores [4], Stewart [5] y Ruzicka y su grupo [6] demostraron que para sistemas de flujo continuo el nmero de
Reynolds era casi siempre inferior a 2000, por lo que se puede
asegurar que existe un rgimen laminar en el transporte de
materia a travs de los tubos, mientras que para el SFA el
nmero de Reynolds es mayor o igual a 3000, debido al rgimen turbulento que se lleva a cabo.
La existencia de un rgimen de flujo laminar proporciona
importantes ventajas al FIA: a) zona de muestra bien definida,
b) caudales reducidos, y por lo tanto, consumo pequeo de
reactivos y c) alta frecuencia de muestreo, lo que simplifica el
montaje al no ser necesario una presin elevada ni burbujas
separadoras de aire para evitar la contaminacin mutua de
muestras al ser inyectadas sucesivamente.

Dispersin controlada: fundamento del FIA

Las condiciones de trabajo habituales del FIA ocasionan que
el bolo de muestra inyectado no alcance el equilibrio qumico
ni fsico, adems de originar que este se diluya (disperse) en la
disolucin portadora o en el reactivo
El rgimen laminar produce una zona bien definida del
bolo de muestra inyectado producindose un gradiente de concentracin a lo largo de todo el bolo. En la Fig. 2 se muestra la
dispersin que sufre la muestra a lo largo de una configuracin FIA, al ser un sistema continuo se obtiene una seal

Por lo tanto, la forma de una seal FIA (pico) depender

del tiempo en el que el bolo de muestra se encuentra dentro
del sistema. A tiempos demasiado cortos la dispersin es prcticamente cero y no se genera un gradiente de concentracin
en el bolo inyectado; por otra parte, tiempos de estancia largos
ocasionan una dispersin muy acusada originando picos muy
anchos. Debido a esto es necesario establecer cual es el tiempo de residencia ms adecuado, siendo un parmetro difcil de
decidir. Generalmente, la seal ptima es aquella en el que el
transporte por convencin y por difusin influye de la misma
manera, no predominando uno sobre el otro, aunque evidentemente esta decisin depender de la reaccin que se va a llevar a cabo.
Las caractersticas del pico (tiempos de arranque, residencia y ancho de banda y altura o rea del pico) dependen de las
caractersticas hidrodinmicas del sistema FIA, caudal, volumen de inyeccin, longitud del reactor, etc., siendo difcil establecer un modelo terico de la dispersin capaz de predecir

Direccin del
Flujo

Portador

Seal Analtica

MUESTRA

AIRE

LAVADO

AIRE

MUESTRA

AIRE

LAVADO

AIRE

FLUJO

AIRE

B)

Portador

Inyeccin

T
Direccin del
Flujo

T(s)

Fig. 2. Seal obtenida en una configuracin FIA. En la parte superior

se muestra la dispersin que sufre el bolo de muestra en el tubo abierto al pasar a lo largo de la configuracin; h, altura; DT, ancho de
pico.

Anlisis por inyeccin en flujo: herramienta clave para la automatizacin analtica. Una revisin de su historia

el comportamiento de un bolo inyectado en una configuracin

FIA. Generalmente los sistemas FIA tiene ms de un canal por
lo que debe tenerse presente las confluencias (tamao y geometra), la geometra de la celda de flujo, las conexiones, el
volumen de inyeccin, etc.
Diversos autores han discutido la aplicacin de algunos
modelos tericos en las condiciones experimentales del FIA
entre los que destacan el modelo de Taylor que solo es
aplicable a caudales bajos y reactores de gran longitud [7, 8,
9, 10] y el modelo de tanques en serie utilizado por Ruzicka
y Mottola que esta basado en el desarrollo de platos tericos
como en cromatografa lquida. La validez del modelo es
dudosa cuando N (nmero de platos tericos) es pequeo, lo
que ocurre cuando la longitud del reactor no es extremadamente larga, lo que es habitual en FIA.
Es as como el coeficiente de dispersin de Ruzicka es el
parmetro ms adecuado para caracterizar la dispersin en un
sistema FIA y fue propuesto por Ruzicka y sus colaboradores
en 1975 [2]. Se trata de una medida directa de la dilucin que
sufre el trozo de muestra inyectado cuando pasa por el detector. Se define como la relacin matemtica de concentraciones
de la muestra antes (C o) y despus (C) de que haya tenido
lugar el proceso de transporte en una configuracin de FIA, es
decir el inverso del factor de dilucin:
D = Co / C
Este parmetro define el grado de dilucin que ha sufrido
una muestra en diferentes momentos del transporte. A cada
punto del pico FIA le corresponde un coeficiente de dispersin, as en el mximo de la curva D = Co / Cmax.
Como siempre existe una relacin entre la seal analtica
detectada (absorbancia, milivoltios, intensidad de fluorescencia, etc.), el registro de la misma (altura) y la concentracin de
la muestra o de su producto de reaccin (C) el coeficiente de
dispersin puede calcularse a partir de la altura de la seal sin
sufrir dispersin y de la seal registrada en el diagrama; de
esta manera D = Ko h o / K1 h max, donde Ko y K1 son las constantes de proporcionalidad que ordinariamente tienen el
mismo valor ya que a las concentraciones trabajadas no vara
la relacin entre la concentracin y la seal o altura. Por lo
tanto el coeficiente de dispersin es una relacin de alturas: D
= h o / h max.
Desde el punto de vista prctico la dispersin del bolo de
muestra inyectado depender de las condiciones hidrodinmicas del sistema. La dispersin global del sistema puede considerarse como la sumatoria de las dispersiones originadas en
las tres parte del sistema FIA: la dispersin originada tanto
por el volumen de muestra como por los aspectos geomtricos
del sistema de inyeccin, la dispersin por la geometra del
reactor y el caudal establecido y por la dilucin provocada por
la geometra de la celda de flujo. Con este principio se puede
establecer, de manera general, que la altura de la seal FIA
depende principalmente del tiempo de residencia del bolo de
muestra inyectado en el sistema. A mayor tiempo de residencia mayor dispersin, por lo que reactores largos o caudales

169

bajos incrementan la dispersin. Por otra parte, volmenes de

inyeccin pequeos incrementan la dilucin de la muestra disminuyendo la altura del pico FIA.
Cuando ocurre una reaccin qumica, considerar la dispersin como un fenmeno puramente fsico como consecuencia de proceso de conveccin o difusin no es correcto. Los
aspectos cinticos deben ser considerados en FIA ya que la
medicin se realiza en condiciones de no-equilibrio, esta contribucin no es tan significativa en SFA debido a que en este
caso ya se ha alcanzado el equilibrio en el momento de la
medicin.
Una reaccin qumica puede alterar el valor del coeficiente de dispersin en FIA de dos maneras: a) cuando se
mide la propiedad del producto de la reaccin que se produce
en el flujo, que es la situacin habitual; en este caso la contribucin qumica hace que el valor de la dispersin prctica
disminuya por lo tanto cuanto mayor sea la velocidad de reaccin menor es la dispersin. b) Cuando se mide la propiedad
de uno de los componentes de la reaccin que desaparece en
el flujo con el tiempo. En este caso la contribucin qumica
hace aumentar el valor del coeficiente de dispersin. Cuanto
mayor sea la velocidad de reaccin mayor es la dispersin.
Painton y Mottola [11] han considerado este ltimo caso en un
artculo muy interesante donde determinan la contribucin
cintica, debido a la desaparicin del dicromato, de la reaccin entre el dicromato (muestra monitoreada a 352 nm) y el
cido ascrbico (portador) que est fuertemente influenciada
por el pH ya que al disminuir el pH se aumenta la velocidad
de reaccin aumentando la dispersin.

Pasado, presente y futuro del anlisis

por inyeccin en flujo
Para 1975 Ruzicka y Hansen publicaron el primer artculo de
una serie de informes sobre anlisis por inyeccin en flujo. En
este artculo describen los conceptos de los sistemas de flujo
continuo segmentado y no-segmentado y sus diferencias. Para
ejemplificar esas diferencias realizan la determinacin colorimtrica de naranja de metilo, de fosfatos, por el mtodo del
azul de molibdeno, y la determinacin electroqumica de amonio. En todas las determinaciones la frecuencia de muestreo
era superior a las 200 inyecciones por hora con una precisin
entre el 1 y 2 %. En el segundo artculo de esta serie Ruzicka
y Stewart [12] describen los principales parmetros que se
deben optimizar en un sistema FIA: volumen de muestra,
dimetro del tubo, longitud del tubo, etc., ejemplificada por la
determinacin de fsforo en plantas.
Para 1979 Hansen y Ruzicka publicaron un artculo donde
demostraban la confiabilidad del FIA para determinaciones
analticas para tres parmetros diferentes [13]: cloruros, fosfatos y una titulacin de un cido fuerte con una base fuerte. La
determinacin de cloruros se basa en la reaccin con tiocianato
de mercurio liberando tiocinato que reacciona cuantitativamente con Fe(III) formando un complejo color rojo que es proporcional a la concentracin de cloruros en disolucin. La con-

170

Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

Mara del Pilar Caizares

Tabla 1. Determinaciones analticas por FIA en muestras de agua.

Analito
Fe total

Tipo de agua

Deteccin

Concentraciones

Frecuencia de muestreo

Natural

Espectrofotometra

0.1-30 ppm

Pb, Cd, Zn, Cu

Agua de mar

Absorcin atmica

Cu 5-20 g / L
Zn 5-20 g / L
Pb 25-100 g / L
Cd 205-10 g / L

180-250 m / h

16, 19

pH, alcalinidad,
iones totales

Agua potable

Potenciometra
Espectrofotometra

PH 3-11
Alcalinidad 5.0-600 g / mL
Iones totales 0.7-2.8 meq / L
Cl-2.8-27 meq / L Cl-

100-150 m / h

17

Ca y Mg

Agua potable

Espectrofotometra

Ca 2.0-25 g/mL; 25-400 g / mL

Ca y Mg 2.0-280 g / mL

30-35 m / h

18

DQO

Agua residual

Espectrofotometra

0-100 g / mL

Mn

180 m / h

Referencia
15

20, 27

Agua de mar

Quimiluminiscencia

1-10 nM

10 m / h

21

Agua residual
y natural
Agua sinttica

Espectrofotometra

0.1-2.0 g C / mL

45 m / h

22

Espectrofotometra

FeII 0.1-120 g / mL
Fe total 0.2-120 g / mL

40-60 m / h

23

Agua de mar

Espectrofotometra

0.75-4 M

90 m / h

24

Al especiacin

Agua natural

Espectrofotometra

0.1-180 g / L

60 m / h

25

Cl

Agua natural

Espectrofotometra

10-500 g / mL

200 m / h

26

Carbono orgnico
Fe III y Fe II
Fosfatos
y SO4

figuracin es muy sencilla, de un solo canal, obteniendo una

frecuencia de muestreo de aproximadamente 120 / h con una
precisin menor al 2 %. Para la titulacin de un cido fuerte
con una base fuerte, las muestras cidas se inyectan dentro del
sistema de flujo continuo utilizando una cmara de mezclado
para controlar el gradiente de dilucin de las muestras. El portador utilizado es NaOH que contiene azul de bromotimol
como indicador. En este caso no se mide la altura del pico FIA
sino el ancho a una altura fija, generalmente, cuando se realizan titulaciones, el ancho del pico se mide a la mitad de ste.
En otras aplicaciones Krug y su grupo [14], realizaron la
determinacin turbidimtrica de sulfato en muestras acuosas
en un intervalo de concentraciones de 40 a 140 ppm y con una
velocidad de muestreo de 180 / h y precisin de 0.85 %. En
este trabajo se presenta los efectos de la concentracin del
reactivo, el caudal del reactivo y la longitud de los reactores.
Como se puede ver los primeros trabajos realizados por
FIA estuvieron enfocados a contaminantes en agua, debido a
que se trata de una matriz fcil de trabajar y en muchos casos
con pocas interferencias ya que generalmente no se trabajaba
con aguas residuales. En la Tabla 1 se muestran algunas de las
determinaciones que se han realizado por FIA en distintos
tipos de agua.
Para mediados de la dcada de los 80 s las metodologas
FIA ampliaron su campo de trabajo realizando determinaciones simultneas y preconcentraciones en configuraciones
cada vez mas complicadas pero ms eficientes y con una alta
probabilidad de automatizacin. Luque de Castro y su grupo
[28] describen una configuracin en la que un bolo de muestra

queda dentro de un sistema cerrado permitiendo que ste pase

repetidamente a travs de un detector simple (espectrofotmetro) hasta que la muestra se dispersa casi en su totalidad
dentro del portador. La seal obtenida esta dada por una serie
de picos cuyos mximos o mnimos define la curva cintica de
la reaccin que se est llevando a cabo. Por medio de esta
configuracin es posible determinar los parmetros cinticos
de una reaccin as como tambin la posible aplicacin en
mtodos de concentracin o dilucin de muestras.
Este mismo grupo de trabajo [29] desarroll, en 1987, un
mtodo para realizar la determinacin simultnea de pH, alcalinidad y concentracin inica total en agua potable. El pH se
midi por medio de un electrodo combinado de pH insertado
en el flujo portador. La alcalinidad y los iones totales los determinaron por medio de dos titulaciones utilizando naranja de
metilo para la determinacin de alcalinidad y fenolfataleina
para los iones totales, adems para esta ltima determinacin
utilizan una microcolumna catinica.
El uso de resinas y fases estacionarias en configuraciones
FIA ha permitido que los niveles de concentracin de los analitos determinados sean cada vez ms pequeos ampliando el
campo de automatizacin por medio del FIA. Este tipo de
microcolumnas generalmente se han insertado en sistemas
FIA acoplados a detectores de absorcin atmica donde han
tenido un gran desarrollo. Sven Olsen y sus colaboradores
[30] utilizaron una microcolumna de Chelex 100 para preconcentrar en lnea plomo, cadmio y zinc, en muestras de agua de mar, alcanzando concentraciones de 10 ppb para plomo y de 1 ppb para los otros dos. La velocidad de muestreo

Anlisis por inyeccin en flujo: herramienta clave para la automatizacin analtica. Una revisin de su historia

171

Tabla 2. Determinaciones enzimticas por FIA.

Enzima
Alcohol deshidrogenasa
Glucosa oxidasa
Glucosa oxidasa / peroxidasa
-D-glucoronidasa
-lactamasa
Ureasa
-galactosidasa

Parmetro

Referencia

Etanol en suero (inmovilizacin en CPG*)

Glucosa (inmovilizacin en nylon)
Glucosa (co-inmovilizacin en CPG)
cido glucnico, suero
Penicilina (inmovilizacin en CPG)
Hg (II) por inhibicin de la ureasa
Sodio en suero

34
35
36
37
38
39
40

*CPG: Vidrio de poro controlado

fue entre 30 y 60 muestras por hora dependiendo del tiempo

de pre-concentracin requerido. En otro trabajo, Zhaolun Fang
y su grupo [31] realizan el estudio de 122 resinas catinicas
dbiles adems de Chelex 100 y 8-quinolol para la pre-concetracin de Cd, Zn, Pb y Cu, alcanzado niveles de hasta 0.03
g / L para el Zn en 8-Quinolol.
La incorporacin de microcolumnas en los sistemas FIA
llev consigo la incorporacin de reactores enzimticos aumentando la selectividad en muchas de las determinaciones
que se haban estado realizando. La mayora de las investigaciones estn enfocadas a la inmovilizacin de la enzima en
esferas de vidrio de poro controlado utilizada principalmente
por su simplicidad y las buenas propiedades que ofrece el
vidrio como matriz inerte, aunque los grandes avances que ha
tenido la electroqumica ha permitido el desarrollo de sensores
enzimticos con mayor sensibilidad.
Uno de los primeros trabajos en considerar las enzimas
inmovilizadas en configuraciones de flujo no segmentado fue
el realizado por Gorton y Ogren [32] donde inmovilizan glucosa oxidasa y ureasa para la determinacin de glucosa y urea
en sangre y orina. Para la determinacin de ambos parmetros
en este tipo de muestras es necesaria una membrana dializadora situada entre el sistema de inyeccin y el reactor, con objeto de eliminar interferencias de matriz.
Diversos mtodos potenciomtricos para la determinacin
de parmetros clnicos han sido puestos a punto basndose en
el uso de electrodos enzimticos. Uno de los requisitos para
que un sensor enzimtico pueda utilizarse en un sistema de
flujo es que la membrana sea resistente, ya que, adems de
soportar las caractersticas de la corriente, su manipulacin es
constante. Muchos mtodos de inmovilizacin de enzimas
para la construccin de electrodos proporcionaban membranas
frgiles y la integridad mecnica de la membrana portadora de
la enzima se daaba despus de un periodo corto de uso. Mascini y Palleschi [33] realizaron la determinacin potenciomtrica simultnea de glucosa y urea en suero inmovilizando las
nzimas sobre mallas de nylon que se fijan en sensores de oxgeno y amonio obtenindose un buen funcionamiento y resistencia mecnica
Muchas de las investigaciones a lo largo de la dcada de
los 80s estuvieron enfocadas a determinaciones enzimticas
por FIA principalmente con aplicaciones clnicas alcanzando
un gran nmero de publicaciones. En la Tabla 2 se muestran
algunos de estos ejemplos.

Ya para la ltima dcada del siglo XX el desarrollo en

FIA estuvo enfocado principalmente al desarrollo de sensores
qumicos y bioqumicos (que incluye a los sensores enzimticos) el acoplamiento de extracciones en lnea (lquido-lquido, lquido-slido, etc.) y el pre-tratamiento de muestras cn
lnea.
Los sensores en flujo donde se integra la separacin con
la deteccin se basan en el uso de resinas de intercambio o
fases estacionarias como C18 que se empacan en una celda de
flujo localizada en un detector no destructivo (por ejemplo
fotmetro o fluormetro) donde los analitos o los prjductos de
reaccin son inmovilizados temporalmente. Este tipo de sensores implica un gran intervalo de aplicaciones. Por ejemplo,
el Cr(VI) se puede cuantificar reteniendo el producto de su
reaccin con difenilcarbazida en una resina de intercambio
catinico [41]. Otra determinacin donde se retiene el producto de reaccin en una celda fluorimtrica empacada con una
resina aninica, es la reportada por #hen. y sus colaboradores
para la determinacin de canuros donde se utiliza una configuracin de flujo continuo de confluencia de zonas para inyectar simultneamente la muestra y el reactivo piridoxal 5fosfato [42]. Tambin para la determinacin de aluminio [43]
en agua Caizares y Luque de Castro utilizan un sensor en
flujo fluorimtrico donde el aluminio reacciona con la hidrazona del salicilpicolinoilaldehido (SAPH) para formar un
complejo fluorescente que se retiene en C18 que esta empacado en la celda de flujo localizada en el paso ptico del instrumento. Utilizando la misma reaccin pero una configuracin
diferente los mismos autores logran discriminar entre las
diferentes especies de aluminio [44] (aluminio cido reactivo,
aluminio total monomrico, aluminio monomrico no lbil y
lbil) por medio de una modificacin al mtodo Driscoll [45].
Existen otro tipo de sensores en flujo que se basan en la
integracin de la reaccin y la deteccin por la inmovilizacin
de uno o varios reactivos y/o el catalizador (que puede ser una
enzima) en un soporte apropiado. La inmovilizacin de un
reactivo Localizado en la celda de flujo se puede utilizar para
la determinacin de una gran variedad de especies por diferentes principios de deteccin. En un artculo reportado por
Wang se explican algunos ejemplos representativos de este
tipo de inmovilizacin utilizando electrodos con la superficie
modificada e insertados en un sistema de flujo continuo [46].
En uno de estos sistemas, un electrodo de carbono es modificado inmovilizando Fe(III) / Fe(II) que responden ampe-

172

Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

romtricamente a varios oxidos de nitrgeno [47]. Para la

determinacin de polifenoles en aceite de oliva se ha acoplado
una extraccin lquido-lquido en lnea con un sensor localizado en la celda de flujo de un espectrofotmetro. El reactivo de
Folin Cicalteau se inmoviliza en una resina aninica y los
fenoles son extrados, con bicarbonato de sodio, realizando un
cambio iterativo del flujo portador. As los fenoles extrados
reaccionan con el reactivo inmovilizado para formar azul de
molibdeno que tambin permanece retenido y se lee espectrofotomtricamente. En este sensor se logra integrar la reaccin
derivatizadora, la retencin y la deteccin in situ [48].
Tambin se han desarrollado sensores bioqumicos basados en la deteccin directa del potencial de membrana inducido por una enzima inmovilizada que no requiere de la introduccin de una referencia interna [49], o la inmovilizacin de
la enzima ureasa o penicilasa en una membrana selectiva para
el producto de reaccin [50] s como algunos biosensores
potenciomtricos y conductimtricos para la deteccin de pesticidas organofosforados [51]. Algunos de estos biosensores
se basan en la inmovilizacin de una enzima en composites de
grafito con una resina epxica [52] pero pocos de los biosensores electroqumicos estn acoplados a un sistema de flujo
continuo debido a los problemas hidrodinmicos del sistema.
Algunos de los electrodos en flujo se basan en el acoplamiento de un compuesto electroactivo con una gran resistencia
mecnica para soportar el flujo continuo como es el composite
de PVC-grafito [53, 54] y electrodos de grafito modificados
por medio de enzimas inmovilizadas, como el desarrollado
por Yarapolov y su grupo para la determinacin de fenoles
[55] o el biosensor para fosfatos utilizado por Gavalas y
Chaniotakis [56].
Actualmente el Anlisis por inyeccin en flujo esta enfocado al pretratamiento de muestras en lnea para evitar la
mayor manipulacin de las mismas. Varios investigadores han
logrado acoplar estos dos sistemas con gran xito. Karlberg
[57] y su grupo as como el grupo de Zhao-Lung Fang [58]
han combinado el pretratamiento de muestras con tcnicas de
inyeccin en flujo y tcnicas de inyeccin secuencial acopladas a electroforesis capilar.
Dentro del campo de anlisis de alimentos donde el pretratamiento de la muestra suele ser laborioso y por lo tanto
produce errores significativos en la cuantificacin de los analitos, las determinaciones por FIA son una alternativa idnea.
Noguira y su grupo [59] realizaron la determinacin conductimtrica de cloruros en leche utilizando un sistema de inyeccin secuencial y una cmara de dilisis en la configuracin
FIA para eliminar interferencias de protenas y slidos suspendidos. En al anlisis de vinos muchos parmetros se han
automatizado disminuyendo el tiempo de anlisis y de reactivos, por ejemplo: para la determinacin selectiva de dixido
de sulfuro y cido sulfhdrico se ha utilizado una membrana
de separacin para difusin de gases que elimina los pasos de
destilacin y titulacin del mtodo convencional [60]; para la
determinacin electroqumica simultnea de dixido de azufre
y cido ascrbico [61] y en la determinacin de azcares
reductores donde han utilizado un sistema automatizado de

Mara del Pilar Caizares

adiciones estndar y deteccin espectrofotomtrica [62] y un

sistema de inyeccin secuencial con una unidad de dilisis
[63], en ambos mtodos existe una ahorro apreciable de tiempo, entre 11 y 18 muestras por hora, y una precisin del 2 %
aproximadamente.
Dentro del campo farmacutico, Wei Li [64] desarroll un
sistema de anlisis por inyeccin en flujo en la modalidad de
stopped-flow para la determinacin fluorimtrica simultanea
de vitaminas B1, B2 y B6 en complejos vitamnicos realizando
una disolucin de las tabletas slidas en lnea; Almendral [65]
y su grupo de trabajo han realizado una extraccin lquidolquido en lnea de Bi(III) en productos para la gastritis y
lcera duodenal. La determinacin se basa en la formacin un
complejo entre el tetrafeniarsenioso y el tetrayodobismutato
(III), el producto de reaccin se extrae con cloroformo utilizando una cmara de dilisis y se lee a 363 nm.
El anlisis por inyeccin en flujo es una tcnica tan verstil que se ha podido realizar estudios en lnea y en vivo para
la determinacin de calcio en sangre insertando un tubo de
microdilisis en la oreja de un conejo obtenindose una precisin del 3 % [66]. Tambin se ha logrado producir, a nivel
microescala, cido malico a partir de cido fumrico el cual
se aspir a travs de un sistema de flujo continuo donde se
acoplaron reactores enzimticos, con fumarasa y malato
deshidrogenasa inmovilizadas, obtenindose una conversin
de hasta el 95 % y una precisin del 3 % [67].
Otra metodologa bastante interesante debido a la configuracin utilizada es la desarrollada por Danielsson y Valcrcel [68] donde evalan la cantidad de nicotina en rap utilizando membranas lquidas. La muestra slida se pasa directamente, sin ningn pretratamiento, a travs de la unidad de
membrana lquida donde la nicotina pasa de la membrana
(polipropilen-n-undecano) a un receptor cido. Entre cada
muestra la membrana se regenera aadindole n-undecano.
La tendencia de las metodologas por anlisis por inyeccin en flujo es disminuir los pasos de pretratamiento de muestras y miniaturizar las metodologas de forma automatizada para
que los errores de manipulacin sean menores y aumente la precisin de los resultados, ya que es posible llevar a cabo varias
determinaciones de una misma muestra en un tiempo menor de
anlisis lo que conlleva a una gran disminucin de reactivos y
por lo tanto de desechos, claves para mejorar el control de calidad de las mediciones analticas. En un laboratorio de rutina,
muchas veces, no es posible realizar las determinaciones por
triplicado ya que se tienen que analizar muchas muestras y el
costo de anlisis sera muy elevado, lo que hace que el anlisis
por inyeccin en flujo sea la mejor alternativa en una gran cantidad de anlisis. Existen varios trabajos que demuestran la disminucin de tiempo y costos as como la alta precisin en las
determinaciones por FIA. Por ejemplo, se ha realizado la determinacin fluorescente de L-carnitina en preparados farmacuticos obtenindose una precisin del 0.96 % y una reproducibilidad para 144 muestras del 1.47 % [69].
Shiowatana [70] y su grupo disearon un sistema de flujo
donde realizan una extraccin secuencial para la especiacin
de metales en suelos, demostrando que el tiempo de extrac-

Anlisis por inyeccin en flujo: herramienta clave para la automatizacin analtica. Una revisin de su historia

cin utilizando este sistema disminua de sobre manera: de 4 a

5 horas en comparacin con el mtodo convencional que es de
2 a 3 das. En un trabajo realizado por Kolev y sus colaboradores demuestran que se obtiene una precisin adecuada,
entre el 1 y 4 %, en la determinacin amperomtrica de
fenoles en agua utilizando una cmara de pervaporacin para
eliminar la etapa de filtracin o de extraccin en fase slida
que se requiere para los mtodos cromatogficos [71].
En un estudio realizado para la determinacin de nitratos
y nitritos en agua se compar el mtodo convencional [72]
con el mtodo utilizado por FIA en cuanto a tiempo y costos
por determinacin [73]. En ambos mtodos la determinacin
se basa en la reaccin de los nitritos con la sulfanilamida para
formar la sal de diazonio que reacciona con el N-1-naftiletilendiamina para medir un azo compuesto que se lee espectrofotomtricamente a 540 nm. En el caso de los nitratos estos se
reducen a nitritos por medio de una columna de cadmio. El
ahorro que se logr utilizando la metodologa por FIA fue del
85 % por determinacin, con una frecuencia de muestreo de
37 determinaciones por hora contra 5 logradas por el mtodo
convencional.

Conclusiones
La mayora de los programas de investigacin, a nivel mundial, en Qumica Analtica estn enfocados a mejorar la calidad en los resultados analticos. El Anlisis por Inyeccin en
Flujo es una de las tcnicas en la que este objetivo se puede
cumplir y es una de las formas ms sencillas para automatizar
una determinacin.
Dada su trascendencia en la calidad analtica, la automatizacin de las etapas del proceso analtico, que conectan la
muestra con el instrumento, es una de las metas ms importantes de la qumica analtica contempornea. Sin embargo la
automatizacin de estas etapas no es una tarea fcil. Por esta
razn, es que aun continan en uso metodologas manuales en
la gran mayora de los laboratorios analticos de control.
Paralelamente se ha ido demostrando en los ltimos aos,
que para la automatizacin de las etapas preliminares del proceso analtico, las tcnicas continuas, particularmente el
Anlisis por Inyeccin en Flujo, es la forma ms verstil, flexible y de menor costo para realizar una gran cantidad de
operaciones del proceso analtico. Adems de la adicin de la
muestra, dilucin, calentamiento, mezclas, adicin de reactivos (operaciones que igualmente se pueden realizar con analizadores discontinuos en discreto), con FIA se pueden realizar
procesos de dilisis, pervaporacin, destilacin, extraccin
con disolvente y otras separaciones con un alto grado de precisin, exactitud y rapidez.
Tambin es importante destacar que, adems de involucrar costos muchsimo menores que los analizadores discontinuos en discreto, tienen mayor compatibilidad con diferentes
detectores (potenciomtricos, amperomtricos, espectrofotomtricos, AA, fluorescencia, etc).

173

Por lo tanto, se puede afirmar que la altsima relacin eficiencia / costo que proporcionan las tcnicas FIA para realizar
procesos automticos, lo hace altamente rentable y lo sita
como una alternativa idnea para la obtencin de resultados
de gran calidad.

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Mara del Pilar Caizares

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Revista de la Sociedad Qumica de Mxico, Vol. 46, Nm. 2 (2002) 175-179

Comunicacin Tcnica

Optimizacin del mtodo de determinacin de arsnico en aguas potables

por espectrofotometra UV-Vis con dietil ditiocarbamato de plata
F. Prez Moreno,1 F. Prieto Garca,*1 E. Barrado Esteban,2 A. Rojas Hernndez,3 y M. A. Mndez Marzo4
1

Centro de Investigaciones Qumicas. Universidad Autnoma del Estado de Hidalgo. Carretera Pachuca-Tulancingo,
km 4.5. Pachuca 42076, Hidalgo, Mxico. E-mail: [email protected]
2 Departamento de Q. Analtica. Fac. Ciencias. Universidad de Valladolid. Prado de la Magdalena s/n. Valladolid 47005, Espaa
3 rea de Qumica Analtica. Departamento de Qumica. Universidad Autnoma Metropolitana-Iztapalapa. Mxico 09340, D.F.
4 Centro de Investigaciones de Materiales y Metalurgia. Universidad Autnoma del Estado de Hidalgo.
Carretera Pachuca-Tulancingo, km 4.5. Pachuca 42076, Hidalgo, Mxico
Recibido el 1o. de octubre del 2001; aceptado el 18 de febrero del 2002
Resumen. Se lleva a cabo la optimizacin de la actual Norma Oficial
Mexicana NOM-AA-46-1981, que establece el mtodo espectrofotomtrico para la determinacin de arsnico con dietilditiocarbamato
de plata, en aguas naturales, residuales, estuarias y costeras. El lmite
de deteccin establecido en dicho documento (0.10 mgL1) no permite definir valores reales en aguas de pozos a los niveles establecidos por las normativas Nacionales e Internacionales (< 0.050 mgL1).
Optimizando mediante un diseo experimental basado en parmetros
de Taguchi los volmenes de HCl, tiempo de calentamiento, longitud
de onda y volumen de aforo, se consigue disminuir el lmite de deteccin hasta 3.5 veces (0.028 mgL 1), lo que permite obtener valores
analticos comparables con los obtenidos por absorcin atmica (generacin de hidruros).
Palabras clave: Arsnico, cuantificacin, agua, UV-visible, ditiocarbamato de plata.

Abstract. The optimisation of the current NOM-AA-46-1981 is performed. This establishes the spectrophotometric method for the determination of arsenic with silver diethyldithiocarbamate, in natural,
waste, estuary and seawaters. The detection limit (0,10 mgL1), does
not permit to define real values in wall waters in the established levels by the National and International regulations (< 0,050 mgL1).
Optimizing with a Taguchi parameter design, the HCl volumes, time
of heat, wavelength and even volume, we could decrease the detection limit in 3.5 times (until 0.028 mgL1), that could be comparated
with the results obtained by Atomic Absorption (hydride generation).
Keywords: Arsenic, cuantification, water, UV-visible, silver diethylditiocarbamate.

Introduccin

La toxicidad por metales es consecuencia de su no

biodegradabilidad, lo que ocasiona que se acumulen en los
distintos puntos del ciclo ecobiolgico y en los sistemas hidrogeolgicos [10-12]. Compuestos arsenicales producen tras tornos hepticos, neurolgicos, hematolgicos, cardacos y
hasta la muerte [7, 13]. stos son considerados venenos de carcter protoplasmtico que actan principalmente por inhibicin de los sistemas enzimticos; personas intoxicadas de forma crnica pueden presentar diferentes sntomas: anorexia,
diarreas, nuseas, as como problemas en el sistema nervioso y
cutneo [14].
El transporte y movilidad de los iones metlicos que se
puede producir a travs del manto fretico [15], trae como
consecuencia el incremento de las concentraciones de stos en
las aguas subterrneas, sobre todo de aquellos elementos
metlicos que son considerados como txicos o peligrosos y
muestran carcter acumulativo, provocando una contaminacin natural y/o debida a las actividades humanas. Por lo
tanto, es conveniente y se hace obligatorio mantener un buen
control de la calidad del agua, especialmente de aqulla de
calidad potable y que se distribuye a las poblaciones. En su
caso, puede requerirse instalar plantas para el tratamiento y/o

La ciudad de Zimapn, Estado de Hidalgo (Mxico), se encuentra ubicada dentro del distrito minero del mismo nombre,
cuyo contenido de As natural es evidente debido a la presencia
de minerales arsenicales: arsenopirita, FeAsS o FeS 2 .FeAs 2
[1]; Rejalgar, As2 S2 ; Oropimento, As2S 3 ; Loellingita, FeAs 2
y Tennantita, Cu12As4 S13 [2; 3] entre otros. As tambin, las
actividades mineras para la extraccin de Pb, Zn, Cu, Fe, Ag y
Au de los recursos minerales de la zona [1, 4] han trado como
consecuencia un incremento en el contenido de As en las aguas de los pozos de la regin, rebasando los lmites mximos
permitidos por la Normativa Oficial Mexicana [NOM-127SSA1-1996] [5] (valores reales que oscilan desde 0.02 a 1.25
mgL 1 ), por lo que la poblacin que actualmente se estima es
cercana a los 42,000 habitantes [6], estn afectadas por este elemento.
Las concentraciones mximas permisibles para As en
aguas de consumo humano, emitidas por la Norma Oficial
Mexicana [5], Organizacin Mundial de la Salud [7], Estados
Unidos de Amrica [8] y Boletn Oficial del Estado en Espaa
[9], por ejemplo, son coincidentes en el valor de 0.050 mgL1.

176

Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

F. Prez Moreno et al.

Diagrama de Pourbaix de As
1.5
1

H3AsO4

O2 /H2O

H 2AsO4

0.5

H3 AsO3

HAsO 4- 2
H2AsO3 -

E`

AsO4- 3

H 2O/H2

-0.5

As
-1

AsH3

-1.5
-2
0

10

11

12

13

14

pH

Fig. 1. Diagrama de Pourbaix para el arsnico

depuracin, de acuerdo con las caractersticas adecuadas para

resolver las problemticas propias en cada regin que se trate.
Esto ltimo requerira lgicamente que se tomen en consideracin factores econmicos, sociales y polticos, entre otros.
La Organizacin Mundial de la Salud ha realizado investigaciones de calidad de agua y ha llegado a la conclusin de
que 1/10,000 habitantes tiene riesgo de adquirir cncer de piel
debido a la ingestin diaria de agua con concentraciones de
0.002 mgL1 de arsnico [8]. Por consiguiente, el lmite mximo permisible de arsnico para el agua destinada al consumo
humano tiende a reducirse y actualmente en Espaa es de
0.010 mgL1 [16], mientras que en Mxico se ha establecido
en 0.045 mgL1 con una disminucin gradual anual de 0.005
mgL 1 hasta alcanzar el lmite mximo permisible de 0.010
mgL1 [17], entre otros.
El arsnico se encuentra en las aguas de pozos de Zimapn, mayoritariamente como especies de As(V), cuyas especies H2 AsO 4 y HAsO 4 2 son menos txicas que las del
As(III); de acuerdo al potencial y al pH (> 0.350 y > 7) respectivamente, medidos in situ e interpolados en el Diagrama
de Pourbaix de Arsnico, construido aplicando equilibrios generalizados para este elemento [18], en base a los datos de la
tabla de potenciales presentados por Burriel [3], y a las constantes de disociacin de Ringbom [19], para estas especies a
fuerza inica de cero; segn se puede apreciar en la Fig. 1.

Disolucin de
DEDTCP

La determinacin de la concentracin de arsnico en

aguas potables es importante ya que como se mencion anteriormente, es perjudicial para la salud, y en algunos lugares
las aguas potables no cumplen con las normas establecidas.
Por ejemplo, se tiene conocimiento que la presencia de los
altos contenidos de arsnico, en el agua que es suministrada
por los pozos a la poblacin de la ciudad de Zimapn, Hidalgo, rebasan los limites mximos permisibles establecidos por
la Normativa Mexicana; as como decisiones de la Comisin
Nacional del Agua de clausurar ciertos pozos (Pozo Mhi,
cerrado desde 1994).
En este trabajo se estudia la optimizacin de la tcnica
espectrofotomtrica de la normativa mexicana para poder
determinar cuantitativamente el contenido de arsnico con un
lmite de deteccin menor al 0.050 mgL1 , es decir se intenta
disminuir el actual lmite de deteccin.

Parte experimental
Materiales y equipos
Para la realizacin del trabajo se utiliz el esquema de montaje como el que se muestra en la Fig. 2 y que establece la referencia [20]. Se utiliz un espectrofotmetro UV-Vis, marca
Perkin Elmer, modelo Lamda 2S, con celdas de vidrio de 1 cm
de recorrido ptico. Para realizar evaluaciones comparativas
de los resultados, adicionalmente fueron analizadas las misma
muestras y patrones estndares en un espectrofotmetro de
absorcin atmica con generacin de hidruros marca Varian,
modelo 860. Los resultados para obtener las curvas de calibrado fueron procesados mediante el programa CURVEXPER
1.3, y los resultados fueron evaluados por el programa ANOVA, versin 3.2. En todos los casos se utilizaron reactivos
grado analtico de la firma J. T. Baker y agua desionizada.
Procedimientos
Se utiliz el mtodo espectofotomtrico del dietilditiocarbamato de plata (DEDTCP) establecido como normativa para la
determinacin de arsnico en aguas de consumo humano [21].
En este mtodo, el arsnico se reduce a arsina por el zinc en
medio cido [22] segn:
4 Zn(s) + 8 H 3O +(ac) + H 3 AsO 4 (ac)
AsH 3(g) 12 H 2O + 4 Zn +2 (ac)

Filtro de algodn con

Pb(Ac) 2

Muestra
Agitador magntico
Parrilla de
Termoagitacin

Fig. 2. Esquema de instalacin para la determinacin de arsnico en

aguas naturales segn (NOM-AA-46-1981).

(1)

La arsina se pasa a travs de un depurador conteniendo

disolucin de acetato de plomo para la retencin de S2 que
pudiera introducir interferencias en la cuantificacin como
principal interferencia para esta tcnica, y despus a un tubo
absorbente (Fig. 2) que contenga una disolucin de Dietilditiocarbamato de Plata (DEDTCP) en piridina, para la formacin de un complejo rojo soluble, cuya intensidad de color es
proporcional al contenido de arsnico en la muestra [21]:

Optimizacin del mtodo de determinacin de arsnico en aguas potables por espectrofotometra UV-Vis...

H 3 As + 6 AgL + 3 Py 6 Ag + AsL 3 + 3 L + 3 PyH+ (2)

177

3,3
COMPLEJO ARSENICAL
CON DEDTCP

3,0

Siendo L el dietilditiocarbamato y AsL 3 el complejo cuya

absorbancia se mide.
En la Fig. 3, se muestra el espectro visible que se obtuvo
para el complejo coloreado. Como se observa para un rango
comprendido entre 520 y 540 nm, se obtiene la mxima seal
de absorbancia (525 nm como mximo experimental).

2,8
2,6
2,4

2,2

524,97 nm

2,0
1,8
1,6
1,4
1,2

Optimizacin

1,0
0,8

Este mtodo no puede considerarse adecuado para la deteccin de bajas concentraciones de arsnico en aguas de consumo humano, entre otros aspectos, por su lmite de deteccin
(0.10 mgL1), por lo que se ha procedido a optimizar el mismo, con el fin de disminuir el lmite de deteccin a valores inferiores a 0.050 mgL1, por lo que podra ser aplicado en el
control de calidad de las aguas potables. Para ello se ha utilizado un diseo experimental mediante de parmetros de Taguchi [23] que incluye:
1. Variantes a la NOM-AA-46-1981
a) Factor de seal a medir. Absorbancia (mayor es mejor).
b) Factores de control. Se tomaron como factores de control,
las variables que se muestran en la Tabla 1, considerando dos
niveles de aplicacin (mnimo y mximo).
c) Factores de ruido. Tomando en consideracin que la normativa establece que la preparacin del patrn estndar de
arsnico se realice en medio alcalino de NaOH y a partir de
Na 2 HAsO 4 , y la posibilidad de disponer de As4 O 10 , y disolverlo en medio de HNO3 a fin de obtener H3 AsO4 , se decidi trabajar en ambos medios (alcalino y cido), considerando
como factor de ruido (R) el medio de preparacin de los patrones. Igualmente, en la normativa se establece realizar un tratamiento previo de pre-reduccin a los estndares y las muestras, que consiste en adicionar una disolucin de KI en cido
ascrbico y cido clorhdrico, para favorecer la formacin de
la arsina. Con la previsin de que se puedan presentar prdidas del analito por la pre-reduccin, se tom el criterio de no
realizar sta. Teniendo en consideracin que con la adicin de
3.0g de Zn en polvo y no en virutas o granallas (logrando una
mayor superficie de contacto en el medio), se tiene una cantidad suficiente y en exceso de Zn0 que permite garantizar la
reduccin de As(V) a As(III) en medio cido. Se tom por
consiguiente como un segundo factor de ruido este criterio y
ambos se muestran en la Tabla 2.

0,6
0,4
0,2
420

460

500

540

620

580

660

700

740

nm

Fig. 3. Espectro visible del complejo coloreado.

2. Condiciones no variadas (recomendadas por la NOM),

tomados como factores de control constantes
Zn metlico en polvo: 3.0 g
Volumen de Dietilditocarbamato de plata (DEDTCP):
4.0 mL
3. Matriz del diseo experimental
Dado que se tienen 4 factores de control a 2 niveles, puede
utilizarse un diseo del tipo L8 [24]; es decir se requiere de 8
experimentaciones segn la matriz de diseo que se muestra a
continuacin, que a dos niveles de ruido, significan 16 experiencias, segn [23], realizadas por duplicado. La tabla 3
muestra adems los distintos sets de experiencias.

Anlisis y discusin
A partir de la matriz del diseo se realizaron todas las experiencias para la preparacin de las curvas de calibrado. Mediante el tratamiento matemtico correspondiente se concluye
que las condiciones ptimas son las que aparecen en la Tabla
4, que han sido obtenidas del ANOVA que de manera grfica
se observa en la Fig. 4.
Como se puede apreciar, el valor de la longitud de onda
de 525 nm se aproxima al recomendado por la NOM-AA-461981 (535 nm), y los dems parmetros se modifican. En tales
condiciones se realizaron las experiencias confirmatorias y la
curva de calibrado final correspondiente. En todos los casos se

Tabla 1. Variables de control para el diseo experimental de optimizacin.

Factores o variables
de control
Niveles de los factores
Mnimo
Mximo

Longitud de onda
(nm)

Volumen de HCl
conc. a adicionar (mL) B

Tiempo de calentamiento
35 C-45 C (min) C

Volmenes de aforo
de los estndares (mL) D

525
535*

5.0*
10.0

15*
30

25
35* (1)

Nota: Los valores de los niveles sealados (*) son los recomendados por la NOM. La tcnica seala el volumen de 35 mL, como no son disponibles matraces
volumtricos para aforar y ganar en precisin de los resultados, se tom la decisin de volmenes de 25 mL (clase A) para el aforo.

178

Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

F. Prez Moreno et al.

Tabla 2. Factores o variables considerados como Ruido (R).

Factores o variables de Ruido
Niveles de los factores

pre-reduccin

Medio de preparacin de estndares

Sin
Con*

cido (pH = 0.0 con HNO3)

Alcalino (pH = 14.00 con NaOH) *

Mnimo
Mximo

Nota: Los valores de los niveles sealados (*) son los recomendados por la NOM.

Tabla 3. Matriz del diseo experimental.

Experimentos
1
2
3
4
5
6
7
8

Factor A

Factor B

Factor C

Factor D

1
1
1
1
2
2
2
2

1
1
2
2
1
1
2
2

1
1
2
2
2
2
1
1

1
2
1
2
1
2
1
2

Factor Ruido (Pre-reduccin)

Nivel 1 (sin)
Nivel 2 (con)
1
3
5
7
9
11
13
15

2
4
6
8
10
12
14
16

Nota: Esta matriz de diseo es la misma para el segundo factor de ruido (medio cido y alcalino).

encontr que los mejores resultados se logran sin pre-reduccin como factor de ruido, a diferencia de lo que se seala en
la NOM. Se lleg a la curva de calibrado para las condiciones
optimizadas, con una correlacin aceptable r2 = 0.9942 y una
desviacin estndar (s) de 0,0079. La ecuacin de la lnea
recta fue:
A = 0.069 + 0.002[As(III)]
Con ello se logr un lmite de deteccin de 0.028 mgL1,
calculado a partir del valor medio de 20 determinaciones de la
seal de absorbancia con el blanco (Ab ) y su desviacin estndar (sb ):
Am = Ab + ksb, siendo k = 3

Esto significa que se ha logrado optimizar esta tcnica,

para realizar anlisis de arsnico en aguas de consumo humano. Se ha logrado disminuir el lmite de deteccin planteado
por la NOM-AA-46-1981 en aproximadamente 3.5 veces
(desde 0.10 mgL1 a 0.028 mgL1).
En la segunda serie de experimentos (Factor de ruido:
medio cido o medio alcalino en la preparacin del patrn estndar), se encontraron los mismos resultados anteriores, pero
trabajando en medio alcalino, tal y como recomienda la NOM.
En este caso se logra mejorar la correlacin lineal de la curva
de calibrado con respecto a la anterior (r 2 = 0,9978 y una desviacin estndar de 0,0044; disminuyendo el valor del intercepto en el origen. La ecuacin de la lnea recta fue:
A m = 0.055 + 0.002[As(III)]

Tomando entonces la expresin:

Lmite de deteccin = Cm = [Am Ab ] / m
donde: Cm es la concentracin mnima de analito que puede
detectarse para un 95 % como nivel de confianza y m es la
pendiente de la recta [24].

50
49
48
47
46
45
44
43
42
41
A1

A2

B1

B2

C1

C2

D1

D2

Fig. 4. ANOVA. Criterio mayor-mejor. Variable A (longitud de

onda) a nivel 1; Variable B (Volumen de HCl conc. a adicionar) a
nivel 2; Variable C (Tiempo de calentamiento) a nivel 2 y Variable D
(Volumen de aforo de los estndares) a nivel 1.

Para desarrollar de forma confirmatoria las posibilidades

reales de aplicacin de la tcnica modificada, lo cual permite
que pueda ser aplicado este mtodo espectrofotomtrico como
mtodo de rutina en el control de calidad del agua potable a
suministrar a la poblacin de Zimapn, sin grandes costos por
inversiones en equipos de absorcin atmica, se procedi a
analizar muestras tradas del Distribuidor General de aguas de
pozos de Zimapn (salida a los consumidores). Se les realizaron las determinaciones correspondientes por espectroscopa de absorcin atmica con generacin de hidruros (AAGH) por tratarse de una tcnica con un lmite de deteccin de
0.002 mgL1 y por la tcnica establecida por la NOM-AA-461981 con las modificaciones requeridas segn las evaluaciones de optimizacin realizadas.
Asimismo se les realizaron los anlisis a las mismas aguas, luego de haberlas pasado a travs de resinas de intercambio inico, como mtodo en evaluacin para disminuir los
contenidos de las especies arsenicales contenidas en las mis-

Optimizacin del mtodo de determinacin de arsnico en aguas potables por espectrofotometra UV-Vis...

179

Tabla 5. Resultados comparativos de los experimentos confirmatorios.

Anlisis de arsnico
por absorcin atmica con generacin de hidruros (mgL1)
N Anlisis
1
2
3
4
5
Media
Desv. est.
% Desv. estndar
relativa

Anlisis segn NOM-AA-46-1981

modificada, en medio alcalino. (mgL 1)

Agua del distribuidor

Despus de la columna
de intercambio inico

Agua del distribuidor

Despus de la columna
de intercambio inico

0.499
0.493
0.493
0.497
0.496
0.496
0.003
0.526

< 0.002
< 0.002
< 0.002
< 0.002
< 0.002
< 0.002

0.460
0.495
0.513
0.530
0.496
0.499
0.026
5.211

< 0.028
< 0.028
< 0.028
< 0.028
< 0.028
< 0.028

mas. Los anlisis fueron realizados en cinco rplicas y los

resultados son los que se muestran en la siguiente Tabla 5.
Como se aprecia, la comparacin estadsticas de las medias
arrojan similares resultados.
Adems se puede apreciar, tanto por el mtodo de AAGH como por el mtodo propuesto por la NOM-AA-46-1981
con las modificaciones requeridas (trabajando en medio alcalino), que se alcanzan resultados con porcentajes de desviacin
estndar relativa (% DER) muy buenos (< de un 6 %).

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Revista de la Sociedad Qumica de Mxico, Vol. 46, Nm. 2 (2002) 180-184

Comunicacin Tcnica

Formacin de ozono en la Ciudad de Mxico durante una porcin

de primavera e invierno en cmaras de esmog exteriores
Julio Sandoval* y Jos Luis Jaimes
Instituto Mexicano del Petrleo. Eje Central Lzaro Crdenas No. 152, Col. San Bartolo Atepehuacan,
Delegacin Gustavo A. Madero, Mxico 07730, D.F. Tel: 5333-6756; Fax: 5877-988; E-mail: [email protected]
Recibido el 28 de septiembre del 2001; aceptado el 12 de marzo del 2002
Resumen. Se realizaron estudios para determinar el potencial de formacin de ozono del aire de la Ciudad de Mxico en abril y diciembre de 1995 utilizando la metodologa de irradiacin de aire cautivo.
Se captur aire ambiente matutino en un sistema experimental constituido por cmaras de tefln expuestas a la irradiacin solar. La composicin de los hidrocarburos y xidos de nitrgeno, la temperatura y
la irradiacin solar fueron diferentes en los dos meses del ao. Sin
embargo, la formacin de ozono fue similar en abril y en diciembre.
Palabras clave: Ozono, cmaras de esmog, reacciones fotoqumicas.

Abstract. Some studies were carried out to determine the potential of

Mexico City's air on ozone formation in April and December 1995.
The Captive-Air Irradiation methodology (CAI) was employed for it.
Ambient morning air was captured in an experimental system constituted by teflon chambers exposed to solar irradiance. The hydrocarbon and nitrogen oxide concentrations, temperature and solar irradiance were different in both months of the year. However, the ozone
formation was similar in April and December.
Keywords: Ozone, smog chambers, photochemical reactions.

Introduccin

respecto a esta ltima variable existen estudios limitados de

los efectos de la temperatura sobre la formacin de ozono, debido a que en los experimentos de cmaras de esmog exteriores no se puede tener un control de temperatura para hacer un
estudio sistemtico. Sin embargo, trabajando en diferentes estaciones del ao se pueden utilizar las condiciones climatolgicas naturales de radiacin y temperatura para estudiar su
efecto sobre la formacin de ozono.
Por otro lado, los estudios realizados en cmaras de
esmog interiores indican que, aunque los efectos de los compuestos orgnicos voltiles (COVs) sobre la formacin de
ozono pueden ser medidos, estos efectos dependen de las
condiciones ambientales del lugar adonde los COVs son emitidos, y que no necesariamente resultan ser los mismos que se
obtienen en el laboratorio [7]. Uno de los mtodos que se usan
para cuantificar el impacto de los COVs sobre la formacin
de ozono en el laboratorio es la reactividad incremental, la
cual es definida como el cambio de ozono causado por la adicin de una pequea cantidad arbitraria del COV de prueba en
una mezcla de gas representativa del aire dividida por la cantidad de COV de prueba adicionada. Sin embargo, se ha encontrado que esta medida depende en gran manera de la disponibilidad de los xidos de nitrgeno (NO x) que tradicionalmente
se miden por la relacin de COVs / NO x. En general, los
COVs tienen una alta reactividad a bajas relaciones de COVs
/ NO x y son significativamente menores cuando las relaciones
COVs / NOx son altas. Dado que para altas condiciones de
NOx la cantidad de ozono se determina por los niveles de radicales formados por las reacciones de los COVs, y cuando los
NOx son bajos se limita la formacin de ozono. No obstante
que la reactividad incremental determinada en cmaras de
esmog no representa las condiciones ambientales reales, se ha

Debido a las emisiones de precursores, a las condiciones meteorolgicas y a la localizacin geogrfica de la Cuenca de
Mxico, el ozono excede la norma de calidad del aire en la
mayora de los das del ao, acentundose especficamente
durante invierno y primavera [1]. Esto se debe en parte a la
dispersin de los contaminantes por variacin de la velocidad
de los vientos durante las dos estaciones sealadas. El propsito de este trabajo es utilizar una herramienta experimental que
permite determinar la formacin de ozono en aire ambiente
matutino cautivo en una cmara de esmog, en la cual se lleven
a cabo las reacciones fotoqumicas de los hidrocarburos y los
xidos de nitrgeno bajo la influencia de la irradiacin solar
natural para explicar las contingencias en una porcin de las
dos estaciones del ao; y de esta manera complementar los trabajos que han utilizado modelos computacionales para simular
el potencial de formacin de ozono debido a la fotoxidacin
de hidrocarburos y a las condiciones climticas de la ciudad de
Mxico [2, 3]. Lo anterior es con la finalidad de entender con
mayor profundidad las causas que dan origen a la formacin
de ozono bajo las condiciones de la cuenca.
Tomando en cuenta lo anterior y con referencia a los trabajos de cmaras de esmog realizados en la primavera de 1995
en la ciudad de Mxico [4] donde se encontr una ecuacin
emprica que predice al ozono con buena correlacin de la
temperatura mxima promedio del da, dio la pauta para llevar
a cabo trabajos similares bajo condiciones climatolgicas diferentes, como es el caso del invierno del mismo, ao que generalmente presenta estabilidad atmosfrica debido a la baja
velocidad de los vientos, de irradiacin solar y de la temperatura mxima promedio diaria [5]. Carter [6] menciona que con

Formacin de ozono en la Ciudad de Mxico durante una porcin de primavera e invierno...

desarrollado una escala de reactividad incremental denominada mxima reactividad incremental (MRI) para el clculo de
factores ajustados de reactividad (FARs) aplicados a emi siones vehiculares, con la finalidad de determinar su potencial
hacia la formacin de ozono en reas urbanas.
El clculo de los FARs determinados por la MRI no puede ser aplicado con buena prediccin en escenarios que presentan altas relaciones de COVs / NO x como es el caso de la
ciudad de Mxico donde se han encontrado relaciones que
variaron de 12 a 39 ppbC / ppb [8]; ya que esta escala de reactividad se determin para escenarios no limitados de NOx, es
decir, con relaciones de COVs / NOx bajos que propician una
mayor reactividad de los COVs en cmaras de esmog interiores cuyos datos han servido para evaluar los mecansmos que
se utilizan en los modelos atmosfricos que predicen reactividad en reas urbanas [9]. Probablemente la falta de correlacin de las evaluaciones de reactividad incremental en cmaras de esmog interiores y las predichas por los modelos atmosfricos para relaciones de COVs / NOx sea el hecho de no
tener datos de laboratorio que tomen en cuenta el efecto de la
temperatura, ya que sta variable puede influir en los mecanismos que auspician la formacin de ozono en el aire ambiente
de cualquier escenario. Por lo tanto, deben llevarse a cabo
estudios experimentales que consideren de una manera sistemtica el efecto de la temperatura para que la reactividad
incremental usada para determinar los FARs incluya el efecto
de esta variable.
En Mxico no se cuenta con sistemas experimentales para
obtener de datos en la direccin antes mencionada, pero se
puede intentar un acercamiento como el que presenta este trabajo usando cmaras de esmog exteriores para explorar la
posibilidad de dar respuesta al efecto de la temperatura sobre
la formacin de ozono.

Parte experimental
Lugar de monitoreo
Los experimentos se realizaron en las instalaciones del
Instituto Mexicano del Petrleo (IMP) situado sobre la calle
de Azcapotzalco-la Villa entre el eje central Lzaro Crdenas
y la avenida Vallejo. Dos vas con alto trfico vehicular localizadas al norte de la ciudad de Mxico y cerca de la zona industrial Vallejo considerada como una fuente importante de emisin de precursores de ozono.
Experimentos
Para establecer el programa experimental se analiz el comportamiento del ozono y la temperatura a travs de los aos
para los meses de abril y diciembre a partir de los datos de la
red automtica de monitoreo de la Ciudad de Mxico. De
donde se obtuvo la tabla 1 que muestra la estadstica descriptiva mensual de la concentracion promedio de ozono (ppm) y la

181

Tabla 1. Promedios mensuales de concentraciones de ozono y temperatura mxima.

Ao

Abril

1988
1989
1990
1991
1992
1993
1994

0.170
0.152
0.204
0.213
0.181
0.173
0.166

Ozono [ppm]
Diciembre
0.208
0.169
0.226
0.217
0.226
0.231
0.208

Temperatura C
Abril
Diciembre
19.0
16.0
16.2
19.8
17.7
18.3
17.6

13.0
12.5
13.2
13.3
15.7
14.5
15.0

temperatura mximas diarias [10] en las estaciones Tlanepantla, Xalostoc, Merced, Pedregal y Cerro de la Estrella. De
la cual se observa un marcado contraste en las mediciones de
temperatura durante abril y diciembre. En general las temperaturas de abril son mayores en comparacin con diciembre. De
modo que esta variable sirvi de base para el diseo de experimentos el cual consisti en determinar el nmero de das mnimos a experimentar durante abril y diciembre. Los das del
mes de referencia tomado fue de 31 das y para un intervalo
de confianza del 95 % se encontr que mnimo 12 das eran
suficientes para el estudio.
Las pruebas se enfocaron principalmente en la determinacin de la influencia de los precursores de ozono bajo condiciones naturales de irradiancia solar. Para esto se utilizaron
tres cmaras de tefln llenadas con aire ambiente matutino
recolectado cada maana entre las 7.00 y las 8.00 a.m. De las
tres cmaras una de ellas se us como cmara de control y en
las restantes se segui la evolucin de la formacin de ozono.
Sistema experimental
La Fig. A muestra en forma esquemtica el sistema experimental. Las cmaras 1 y 3 indican el conjunto de experimentos a realizar en un da dado, la cmara 2 del centro sirvi
como cmara de control. Este sistema trabaj durante 14 das
en abril y 21 das en diciembre haciendo un total de 70 pruebas con aire ambiente de la ciudad de Mxico. Todas ellas
fueron rplicas, con la finalidad de disponer de informacin
confiable y para asegurar que los problemas presentados
durante la experimentacin no evitaran la interpretacin de los
resultados.
Operacin de las cmaras y mediciones
Las cmaras de aproximadamente 500 litros fueron construidas con pelculas de tefln FEP tipo A de 0.5 mm y selladas
en la orilla mediante calor y presin; y se colocaron a un metro de altura sobre una plataforma de madera. La cmara de
control sirvi para la toma de muestra de HC al inicio y para
medir la temperatura de la cmara por aspersin; las dos cmaras adyacentes sirvieron para determinar el mximo de ozono alcanzado durante el da.

Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

Julio Sandoval y Jos Luis Jaimes

HCNM [ppb]

182

MUESTREADOR DE
HIDROCARBUROS

8000
6000
4000
2000
0
0

10

15

20

25

Das Experimentados
TERMOMETR O

HC Diciembre

VALVULAS
SELECTORAS
AUTOMATICAS

Fig. 1. Concentracin inicial de HCNM. Abril y diciembre 1995.

ANALIZADORES
O3

NOx

COMPRES OR
DE AIRE

BULBO PYREX

BOMBA DE
VACIO

S I S T E M A DE A D Q U I S I C I O N
DE DATOS

Fig. A. Sistema experimental.

Al finalizar el experimento se evacuaban las 3 cmaras y

se llenaban con aire libre de hidrocarburos para dejarlas en
limpieza durante la noche. Al da siguiente se haca una revisin para desechar las cmaras que presentaron fugas y las
que no presentaron problemas se evacuaban. Posteriormente
las tres cmaras eran llenadas con 30 litros de aire limpio y
reevacuadas nuevamente (procedimiento establecido previo al
trabajo experimental para verificar limpieza de las cmaras).
Despus de esta operacin las cmaras eran llenadas con aire
ambiente de la maana y enseguida se tomaba una muestra en
la cmara de control para determinar la composicin inicial de
hidrocarburos. Estas muestras fueron analizadas por cromatografa de gases para conocer la concentracin inicial de hidrocarburos de cada maana.
El monitoreo de los NO x y el O3 se realiz tomando 8
litros aproximadamente de muestra en forma secuencial de las
cmaras 1 y 3 cada hora, desde el inicio hasta el final del
experimento. Esto se hizo utilizando un analizador modelo 42
para NO x equipado con filtro de nylon para remover cido
ntrico y un modelo 49 para el O3 de la marca Thermo Environmental Inc. Los COVs se determinaron en el laboratorio
de qumica de la atmsfera del IMP por cromatografa de
gases basndose en la norma T0-14 expedida por la Agencia
de Proteccin Ambiental de los Estados Unidos. La temperatura se midi cada hora utilizando un termopar de aspiracin
conectado a la cmara de control. El flujo ultravioleta se midi con un radimetro Eppley de luz u.v colocado junto al sistema experimental.

Resultados y discusin
Con la finalidad de comparar los mximos de ozono encontrados durante los das de ambos meses se ordenaron de menor a
mayor valor. Los cuales en general resultaron como consecuencia de la magnitud de las concentraciones iniciales de los

COVS y NO x en el aire ambiente matutino y de la irradiacin

solar que incidi durante las pruebas en cada mes del ao.
Las Figs. 1 y 2 muestran las diferentes concentraciones
iniciales de los hidrocarburos no metnicos (HCNM) y NOx
que resultaron durante los dos experimentos. Estas diferencias
se deben a las condiciones meteorolgicas que prevalecen en
ambos meses del ao. Ya que abril se caracteriza por una alta
dispersin de los contaminantes como consecuencia de una
mayor velocidad de los vientos que imperan en ese mes y
sucede lo contrario en diciembre. De manera que tanto las
concentraciones de los HCNM y de NO x son mayores en
diciembre con respecto al mes de abril.
Por otro lado la relacin de HCNM / NO x en promedio
fue mayor en abril y menor en diciembre. Sin embargo, en
ambos casos se producen cantidades similares de ozono. Cabe
sealar que en los das en que hubo relaciones similares en
ambos meses tambin hubo similitud en la formacin del
mximo de ozono tal como lo muestran las Figs. 3 y 6. Es
importante enfatizar que los experimentos con replicas presentaron una variacin de 4.2 % con respecto al mximo de
ozono de cmara a cmara, una incertidumbre del muestreo de
14.6 y una incertidumbre del anlisis de 12.
En cuanto a la radiacin solar la diferencia se marc con
mayor amplitud. En abril se present en promedio una radiacin alrededor de 40 watts / m2 , mientras que en diciembre
cae hasta aproximadamente 15 watts / m2 , segn la Fig. 5.
Este comportamiento tambin se present con la temperatura,
vase Fig. 6.
De los resultados se puede inferir que la produccin de
ozono resultante en ambas meses del ao es similar an cuando las condiciones meteorolgicas sean diferentes. Esto se
debe en principio a las magnitudes de concentraciones ini-

NOx [ppb]

BULBO PYREX

CO

HC Abril

600
500
400
300
200
100
0
0

10

15

20

25

Das Experimentados
NOx Diciembre

NOx Abril

Fig. 2. Concentracin Inicial de NOx. Abril y diciembre 1995.

Formacin de ozono en la Ciudad de Mxico durante una porcin de primavera e invierno...

183

40

Rad. U.V. W/m2

HCNM/NOx

50
30
20
10
0
0

10

15

20

60
40
20
0
0

25

Das Experimentados
Rel HC/NOx Diciembre

10

15

20

25

Das Experimentados
Rad. U.V. Diciembre

Rel Hc/NOx Abril

Fig. 3. Relacin HCNM / NOx de abril y diciembre 1995.

Rad. U.V.Abril

Fig. 5. Radiacin U.V. Abril y diciembre 1995.

800

40

600

30
T oC.

Max. Ozono [ppb]

1000

400

20

200

10

10

15

20

Ozono Abril

15

20

25

Das Experimentados

Dias Experimentados
Ozono Diciembre

10

Temp. C.
oC. Diciembre

Temp. C.
oC Abril

Fig. 4. Formacin de ozono en abril y diciembre 1995.

Fig. 6. Temperatura (C). Abril y diciembre 1995.

ciales de HCNM y NOx , de radiacin y temperatura que caracterizan en especial a cada mes del ao, lo cual explica la persistencia de las altas concentraciones de ozono independientemente del mes.
En resumen, aunque en diciembre la irradiacin y la temperatura son bajas las altas concentraciones de ozono se dan
por la mayor concentracin inicial de HCNM y NO x, que en
consecuencia dieron relaciones de HCNM / NO x aproximadamente de 15; condicin bajo la cual se tiene una mayor beneficio hacia las reacciones que auspician la formacin de radicales a partir de los contaminantes primarios y en consecuencia la formacin de ozono. Sin embargo, en abril las relaciones de HCNM / NOx fueron mas altas, lo cual llevara a suponer que la formacin de ozono debera de ser ms baja como
consecuencia de tener una atmsfera saturada de hidrocarburos y altamente limitada de NOx, pero la evidencia experimental dice lo contrario. Probablemente la alta formacin de
ozono se explique por la presencia de una mayor radiacin solar en este mes del ao.
Otro punto importante a resaltar es el hecho que se presenta en la Fig. 4, donde prcticamente se juntan los mximos de
ozono de los dos meses comparados, y que tambin resultan
coincidir con sus relaciones respectivas de HCNM / NOx segn
Fig. 3. De manera que la diferencia sobre la formacin de
ozono es la irradiacin solar que incide sobre la temperatura.
Para sustentar los resultados se realiz un anlisis de
regresin mltiple a los datos de abril y diciembre considerando al ozono como variable dependiente, y a la temperatura
mxima del da, los HCNM y NOx iniciales, la relacin

HCNM / NO x y la irradiacin ultravioleta como variables

independientes. La variable que present mayor correlacin
hacia la formacin de ozono en abril fue la temperatura con
coeficiente de correlacin parcial de 0.6 y confiabilidad de
99.5 %, mientras que para diciembre fue la concentracin de
NO x con coeficiente de correlacin parcial de 0.75 y confiabilidad de 99.97 %. Los resultados tambin se sometieron a la
prueba de medios con t de student, estableciendo la hiptesis de investigacin que propone que los dos experimentos
difieren significativamente entre s en cuanto a la influencia
de temperatura y NO x a formar ozono en abril y diciembre.
Para un nivel de confianza de 0.05 y 33 grados de libertad t =
1.697 y en el caso de la temperatura se obtuvo un valor de t =
10.3 y para la concentracin de NO x t = 5.725 confirmando las
conclusiones del trabajo.

Conclusiones
Debido a la influencia de las condiciones meteorolgicas que
incrementan la frecuencia y duracin de inversiones trmicas
por presencia de sistemas anticiclnicos de altura localizados
en los estados del centro del pas, en diciembre las concentraciones iniciales de hidrocarburos y xidos de nitrgeno resultaron ser mayores con respecto al mes de abril. Sin embargo,
hubo coincidencia en la alta formacin de ozono dentro de las
cmaras. Los resultados permiten inferir que la alta formacin
de ozono en abril se debe a la alta irradiacin que en consecuencia provoca una elevacin de la temperatura, condiciones

184

Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

muy caractersticas de este mes. Mientras que en diciembre

las altas concentraciones xidos de nitrgeno pueden ser las
responsables de las altas concentraciones de ozono en la ciudad de Mxico. An cuando, el propano y el butano que son
poco reactivos predominan en la composicin global del aire.
Aunque estos resultados son globales permiten explicar la
persistencia de las altas concentraciones de ozono durante
abril y diciembre en la ciudad de Mxico y crean la necesidad
de llevar a cabo experimentos controlados con la finalidad de
estudiar los efectos de la radiacin y la temperatura para mezclas representativas de aire de la ciudad de Mxico. Pero en
un sistema experimental que utilice bolsas de mayor tamao
para disminuir los efectos de pared y con control de temperatura.

Julio Sandoval y Jos Luis Jaimes

Referencias
1. Martnez, G. Tesis Profesional. Ingeniera Qumica Petrolera.
IPN. ESIQIE. 1996, 77-79.
2. Ruiz-Suarez, J.C. Atmsfera 1989, 2, 47-63.
3. Ruiz-Suarez, L.G.; Mar-Morales, B.E.; Segura, E.H. Proyecto
C0-088. D.D.F.-UNAM. 1995. Informe Final.
4. Sandoval, J.; Marroqun. O.; Jaimes, J.L.; Ziga, V.A.,
Gonzlez, E.; Guzmn, F. Atmsfera 2001, 14, 17-27.
5. Informacin anual de la calidad del aire en la Ciudad de Mxico.
Secretara del Medio Ambiente. Direccin General de Prevencin y Control de la Contaminacin. 1996, 8-9.
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Ozone/Fine Particle Science. 2000, 378-396. EPA / 600 / R-00 /
076.
7. Carter, W. P.L., J. Air & Waste Manage. Assoc. 1994, 44, 881899.
8. Sandoval, J.; Jaimes, J.L.; Ziga, V.A., Marroqun. O.; Ortiz,
R.; Gonzlez, E.; Guzmn, F. Rev. Soc. Qum. Mx. 2000, 44,
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9. Carter, W.P.L. Atmos. Environ. 1991, 25A, 2771-2806.
10. JICA., SEMARNAP., CENICA. Almanaque de datos y tendencias de la calidad del aire en ciudades mexicanas. 2000.

Revista de la Sociedad Qumica de Mxico, Vol. 46, Nm. 2 (2002) 185-188

Comunicacin Tcnica

Bioconversin anaerobia como una alternativa para la remocin

de DQO contenido en aguas residuales del rastro municipal
de la Ciudad de Saltillo, Coahuila, Mxico
Jess Rodrguez,* Gerardo J. Sosa y Yolanda Garza
Departamento de Biotecnologa, Facultad de Qumica, Universidad Autnoma de Coahuila. Blvd. Venustiano Carranza
e Ing. Jos Crdenas V., Col. Repblica. Saltillo, Coahuila 25280, Mxico. Tel: (8) 415-57-52; Fax: (8) 415-95-34;
E-mail: [email protected]
Recibido el 21 de septiembre del 2001; aceptado el 24 de junio del 2002
Resumen. Para la Bioconversin anaerobia de DQO contenido en
aguas residuales del rastro de Saltillo, Mxico, se realiz mediante el
arranque de un reactor UASB-hbrido, empacado con bauxita en la
parte superior. La temperatura del reactor fue controlada a 38 C. La
adaptacin del lodo tuvo una duracin de 10 das y despus se procedi a la alimentacin continua con una carga orgnica inicial de 0.9
hasta 6.5 g D Q O / L /da; el pH se mantuvo entre 7.1 y 8.2. Se midi
la produccin de cidos grasos voltiles y el flujo de biogas. El arranque se realiz en 30 das y la eficiencia del tratamiento fue superior al
80 % cuando la carga orgnica oscilo en el rango de 5-6 g D Q O / L /
da y un tiempo de retencin hidrulica no menor de 2 das.
Palabras clave: bioconversin, anaerobio, reactor UASB-hbrido, aguas residuales de rastro.

Abstract. Start-up of an UASB-hybrid reactor, packed with bauxite

at the top, was made for treatment of slaugterhouse wastewater of
Saltillo, Mxico. The reactor temperature was controlled at 38 C.
Sludge adaptation was made for 10 days; continuous feeding was
then began at organic load rates of 0.9 g COD / L / day. The pH values fluctuated in the range of 7.1-8.2. Production of volatile fatty
acids and the biogas flow were measured. The removal efficiency
was achieved graduating the velocity of feeding and the hydraulic
retention times. For the start-up stage a period of 30 days was needed
and the wastewater treatment efficiency was above 85 %.
Keywords: Bioconversion, anaerobic, UASB-hybrid reactors, wastewater.

Introduccin

la ciudad de Saltillo, Mxico, estn clasificadas dentro del

primer grupo [5, 10, 13, 17].
Este trabajo se realiz en un reactor tipo UASB (Upflow
Anaerobic Sludge Blanket) con un filtro anaerobio interno, los
cuales tienen una eficiencia de remocin de la materia orgnica por arriba del 80 % [4,12]. En ellos la tasa especfica de
produccin de metano se observa como una funcin lineal de
la tasa especfica de consumo de sustrato [3,13].
El propsito del presente trabajo fue la optimizacin de la
remocin del DQO contenido en las aguas residuales de la
industria crnica de Saltillo, Coahuila, Mxico.

Las aguas residuales de los rastros se caracterizan por contener

alta concentracin de protenas, grasas, aceites, slidos suspendidos y otros productos de la industria de la carne, as como pH bsicos. La disposicin efectiva de este tipo de aguas
ha tomado gran importancia debido a los requerimientos normativos tan estrictos considerados para la calidad de los efluentes [1, 2]. Cuando tecnologas como la recuperacin de protenas, el desecado o la utilizacin de los desechos del rastro
para alimentacin animal no son aplicables, el tratamiento
anaerobio puede ser una solucin para la depuracin de las
aguas residuales. El tratamiento anaerobio de la demanda
qumica de oxgeno contenido en las aguas residuales del rastro puede biotransformar por arriba del 80 % de la materia
orgnica [2-4]. Los reactores anaerobios que han tenido el
mayor xito en el tratamiento de aguas residuales son aquellos
que usan un flujo ascendente con lodo granular [5-]. Este tipos
de reactores pueden soportar altas cargas orgnicas alcanzando
eficiencias de remocin desde un 70 a un 95 %, dependiendo
de la composicin del agua residual [10, 11]. La mayora de
los reactores que han sido usados a escala industrial han tratado efluentes con concentraciones altas de carga orgnica, los
cuales presentan una DQO mayor de 2000 mg / L. Los efluentes de la industria alimentaria pueden clasificarse en dos
tipos: aquellos mayores de 2000 mg / L y aquellos menores de
1000 mg / L [10]. Las aguas residuales del rastro municipal de

Materiales y mtodos
Todos los experimentos de esta investigacin se realizaron utilizando un reactor tipo UASB-hbrido. El reactor fue construido de material acrlico con un volumen de trabajo de 13.5 L,
1.70 m de altura y 10.5 cm de dimetro interno, provisto con
una chaqueta para calentamiento. Se adapt una plataforma a
una altura de 1.5 m para colocar el material de bauxita, soporte
utilizado para la inmovilizacin de las clulas. El inculo fue
previamente incubado utilizando agua residual del rastro diluida y a una temperatura de 38 C durante 30 das; durante este
tiempo el reactor funcion en estado intermitente. Posteriormente, el reactor fue cargado con agua residual y durante dos
das se mantuvo en reflujo a una velocidad de 500 mL / min.

186

Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

Jess Rodrguez et al.

Tabla 1. Comparacin de la composicin del agua residual del rastro

municipal de Saltillo en el influente y efluente del reactor UASB.
Parmetro

Entrada

Salida

DQO (g / L)
pH (H+ )
Sulfatos (mg / L)
Fosfatos (mg / L)
SSV (mg / L)
SST (mg / L)
AGV (ac. actico) (mg / L)
Alcalinidad del CaCO3 (mg / L)
Grasa y aceite (mg / L)
Nitrgeno (Kjeldahl) (g / L)
Nitratos (mg / L)

13
8
900
417
3120
5820
5867
588
256
531
396

2
8.2
409
78
355
466
0.3
448
162
500
310

para facilitar la formacin de grnulos. La alimentacin continua del reactor fue iniciada a una tasa de 0.9 g de DQO / L /
da y un pH mantenido en un rango de entre 7.1 y 8.2. El
recipiente que contena agua residual fue agitado continuamente para evitar la sedimentacin de la materia orgnica. La
produccin de cidos grasos voltiles (AGV) fue evaluada
midiendo la alcalinidad [9]. La temperatura de operacin del
reactor fue mantenida a 37 C. Las caractersticas evaluadas
del agua residual en la entrada y salida del reactor se muestran
en la Tabla 1.
El anlisis del agua residual fue realizado de acuerdo con
los mtodos estndar [14]. Los valores obtenidos en este trabajo fueron logrados con un mnimo de tres muestras por semana durante 80 das.
Aguas residuales del rastro municipal de Saltillo, Coahuila, Mxico. Se utilizaron aguas residuales provenientes directamente del proceso de matanza del rastro de Saltillo Coahuila. Este tipo de agua residual posee una alta alcalinidad as
como un elevado contenido de materia orgnica. El volumen
de desechos de este proceso varia entre 85 y 120 m3 / da. En
la Tabla 1 se muestran las caractersticas definidas para este
tipo de agua.
Inculo. El lodo utilizado fue obtenido de un proceso de
tratamiento de aguas residuales generadas por la industria
lctea. La concentracin y la actividad especfica de este lodo
fueron de 10-15 g SSV / L y 0.02-0.03 g CH4-DQO / g SSV /
da, respectivamente (SSV, slidos suspendidos voltiles). El
inculo usado para el arranque fue aadido al reactor hasta el
30 % de su volumen.
Anlisis. El anlisis de los cidos grasos voltiles, metanol,
metano y bixido de carbono fue realizado tres veces por semana utilizando cromatografa de gases, segn lo descrito por
Varfolomeev et al. [15] y Kalyuzhnyi et al. [16]. El flujo de
gas fue medido con un detector electrnico de flujo tipo compacto DENEB CDF-402, diseado especficamente para cuantificar la produccin de metano y bixido de carbono. El volumen de metano producido diariamente fue medido por despla-

Fig. 1a. Comparacin de la carga orgnica (CO) y eficiencia en funcin del tiempo.

zamiento de un lquido, despus de remover el CO2 por absorcin en solucin de hidrxido de sodio. La demanda qumica
de oxgeno (DQO) fue medida tres veces por semana usando
el mtodo colorimtrico [17].

Resultados y discusin
Es importante enfatizar que la eficiencia de un proceso anaerobio est relacionada con el arranque del reactor, de acuerdo
con las recomendaciones de Lettinga y Hushoff [5,17].
Durante los primeros cinco das del proceso se aliment el
reactor con cargas orgnicas de 0.3-1.0 g DQO /L/ da (Fig.
1a). Durante este tiempo, la eficiencia de tratamiento no
super el 30 %. Al incrementar la tasa de alimentacin de la
carga orgnica se observ un increment lineal en la eficiencia del tratamiento (ET) a partir del dcimo da. Sobre el da
20, el reactor alcanz el 65 % de eficiencia de tratamiento, la
cul disminuy a partir del da 70 por la prdida de la capacidad buffer del influente debido a un exceso en la produccin
de cidos grasos voltiles (AGV), que trajo como consecuencia la disminucin del pH, de 7.8 a 6.2 (Fig. 1a y Fig. 1b). La
capacidad buffer del influente se aprecia en la misma Figura
1b; adems la ligera diferencia entre el pH interno y el pH
externo, esta relacionada con la concentracin de iones hidrgeno, que en la fase interna, donde se encuentran los grnulos,
su concentracin es mayor y para el caso del pH externo
ocurre una dilucin de la concentracin de los ines hidrgeno, el pH del efluente y de influente fueron 7.2 y 8.2 respectivamente.

Fig. 1b. Comportamiento de pH en funcin del tiempo.

Bioconversin anaerobia como una alternativa para la remocin de DQO contenido en aguas residuales...

187

Fig. 1c. Medicin del tiempo de retencin hidrulico (TRH).

Fig. 2a. Medicin del DQO del influente y efluente vs. eficiencia en
funcin del tiempo.

Fig. 1d. Medicin de los AGVs por medio de la alcalinidad.

Fig. 2b. Medicin de la carga orgnica (CO) vs. produccin de biogas.

El tiempo de retencin hidrulica en el curso del tratamiento anaerobio se disminuy gradualmente hasta 1.5 das;
en este tiempo se observ el inicio de la acidificacin del reactor (Fig. 1c). La ET disminuy abruptamente hasta 55 %. El
valor de a (coeficiente de alcalinidad) fluctu en un intervalo
de 0.63-0.90 durante los primeros 60 das de operacin (Fig.
1d). Los valores de la tasa de carga orgnica investigados no
excedieron de 6.5 g DQO /L /da (Fig.1a). En este punto, la
eficiencia de tratamiento alcanz un valor mximo de 85%
(Fig. 1a). Esto se logr manteniendo una concentracin de cidos grasos voltiles menor de 0.05 g /L (Fig. 2a). Se encontr
que el etanol, el acetato, el propionto y el butirato eran los
principales constituyentes del efluente.
El estudio microscpico de la apariencia de las muestras
de lodo tomadas del reactor en el da quince mostraron la formacin de grnulos pequeos con un tamao promedio de
0.8-1.0 mm de dimetro.
La alta eficiencia del tratamiento y el exitoso arranque del
reactor estuvieron relacionados con la adaptacin y el origen
del inculo, puesto que ste provena del tratamiento del agua
residual con alto contenido de suero de queso [8]. El tiempo
de retencin hidrulica al cual se obtuvo el 85 % de eficiencia
de remocin fue menor de los 5 das considerados en la literatura [18]. Durante los 70 das de operacin del reactor no se
observ formacin de espuma, flotacin de lodos, acidificacin del reactor (el pH del efluente fluctu en un intervalo
entre 8.0-8.4, Fig. 1b) o limitacin por nutrientes, indicando
esto el desarrollo de una comunidad microbiana balanceada
dentro del reactor [19]. Despus de 20 das de operacin se
observ agregados granulares de lodo de 1 a 2 mm de dimetro y la acumulacin de agregados blancos distribuidos en el
lecho del lodo; aparentemente, su presencia no influy en la
ET del reactor.

En los procesos de granulacin durante el arranque de un

reactor UASB-hbrido existen muchos factores involucrados
[20, 21, 22, 23]; entre los cuales podemos considerar la presin originada por la concentracin de hidrgeno; la remocin
de materia finamente dispersa del inculo, la presin que se
origin a partir de la velocidad superficial del flujo ascendente
y de la velocidad de produccin de gas, lo que permiti que
durante los primeros veinte das de lograra un 75 % de la eficiencia de tratamiento alcanzada a los 70 das de trabajo.
Despus de este tiempo se observ flotacin y dispersin del
lodo, lo que condujo a la disminucin brusca de la produccin
de gas (Fig. 2b).
Otra razn que pudo haber influido en una granulacin
exitosa puede estar relacionada con la baja produccin de
acetato en el reactor, la cual permaneci por debajo de 0.325
mg / L durante el periodo de arranque (Tabla 1). Sayed et al.
[24] reportaron, utilizando un efluente similar y un reactor
UASB, un proceso de metanizacin a partir del DQO removido en el intervalo de 45 a 75 % con cargas orgnicas similares
y tiempos de retencin hidrulica de entre 20 y 40 horas.
Polprasert et al. [6] reportaron metanizacin del DQO removido en el intervalo de 44 a 78 %, trabajando con efluentes de
rastro de menor concentracin y tiempo de retencin hidrulica de entre 25 y 26 horas. Se sabe que una baja concentracin
de acetato promueve predominantemente el crecimiento de
Methanotrix en lugar de Methanosarcina, lo que trae consigo
la formacin de buenos grnulos [16]. Es importante enfatizar
que para mantener una operacin estable del reactor se deben
satisfacer dos condiciones: el lecho de lodos se debe mantener
bien mezclado y se debe mantener la eficiencia de operacin
en el nivel ms alto. El lavado de lodos generalmente no era
muy apreciable a una velocidad de alimentacin orgnica ligeramente superior a 6.5 g DQO / L / da.

188

Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

Conclusiones
El proceso de arranque del reactor, as como la adaptacin y
reactivacin del inculo se realizaron con xito. La granulacin se obtuvo rpidamente debido al intervalo de velocidades
aplicadas durante los dos das de reflujo y probablemente al
hecho de que el inculo fue tomado de un reactor que estuvo
trabajando con aguas residuales de suero de queso. Durante la
investigacin del proceso UASB-hbrido no se present el
fenmeno de formacin de espuma y flotacin de lodos
debido al buen funcionamiento del bioreactor, combinado con
la presencia de un filtro y soporte de bauxita colocado en la
parte superior del reactor. La cantidad de biogs producida fue
un indicativo del buen funcionamiento del bioreactor, alcanzando a ser sta superior a los 1400 mL/h cuando la carga
orgnica oscil entre los 5 y 6 g de DQO /L /da, y su contenido de metano fue superior al 80 %.
En el da 71 se increment la carga orgnica a 6.5 g de
DQO / L / da y despus de 24 horas se observ una disminucin del pH a 6.8 y un aumento en la produccin de cido grasos voltiles hasta 0.077 g / L, reducindose la eficiencia de
remocin. Por esta razn, es necesario mantener la carga
orgnica en 6.0 g de DQO / L / da y un tiempo de retencin
hidrulica no menor de dos das.

Referencias
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2. Mawson, A.J. Biores. Technol. 1994, 47, 195-203.
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6. Lettinga, G.; Hulshoff, L. W. In: International course on anaerobic wastewater treatment. Netherlands. 1992.

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Revista de la Sociedad Qumica de Mxico, Vol. 46, Nm. 2 (2002) 189-192

Historia y Desarrollo de la Qumica en Mxico

Minera e inquisicin en la Nueva Espaa del siglo XVIII; el caso Morel

Liliana Schifter Aceves, Patricia Elena Aceves Pastrana* y Alba Dolores Morales Cosme
Universidad Autnoma Metropolitana, Unidad Xochimilco, Calzada del Hueso 1100, Col. Villa Quietud. Mxico 04960, D.F.
E-mail: [email protected]
Recibido el 20 de marzo del 2002; aceptado el 3 de mayo del 2002
Resumen. El presente trabajo pretende ilustrar la relacin existente
entre la qumica y la minera durante el siglo XVIII novohispano a
partir de las actividades del francs Esteban Morel, personaje relevante en la historia de la ciencia de la Nueva Espaa por su papel
como introductor de la inoculacin de la viruela en las colonias espaolas. Tambin pretende esclarecer las circunstancias de su misterioso suicidio en una crcel secreta de la Inquisicin y su relacin con
las actividades mineras que llevaba a cabo en el distrito de Real del
Monte en Hidalgo.
Palabras clave: Minera, inquisicin, Esteban Morel, Nueva Espaa.

Abstract. In the present work it is intended to highlight the intense

relationship between chemistry and minnig that took course during
the XVIII century in New Spain as related to the frenchman Esteban
Morel. This fellow was extremely important in the scientific platform
of the New Spain because of his role as the first physician who practiced the inoculation of smallpox in the spanish colonies. Furthermore, it is suggested that his misterious suicide while imprisoned in the
Inquisition was a consequence of his mininng activities in the state of
Hidalgo, Mexico.
Keywords: Minning, inquisition, Esteban Morel, New Spain.

Introduccin

ms explotadas por los espaoles desde mediados del siglo

XVI, cuando se puso en boga el innovador e ingenioso mtodo
de amalgamacin de la plata con mercurio y sal comn desarrollado por Bartolom de Medina, conocido como el mtodo
de patio [1]. Una de las minas ms famosas y codiciadas de
Real del Monte era la mina de Morn, que durante 1792 y hasta 1794, fue propiedad de Morel. Su encarcelamiento por la
Inquisicin en 1794 con el consecuente embargo de todos sus
bienes la mina de Morn incluida despierta numerosas
interrogantes acerca de la relevancia de la mina y los medios
utilizados por los novohispanos de la poca para hacerse de su
posesin. Asimismo, este episodio ilustra algunos aspectos de
los intereses, formas de trabajo y relaciones sostenidas por la
comunidad de profesionales vinculados con la qumica, la minera y la medicina en la Nueva Espaa.

La relacin entre la qumica y la minera siempre ha sido cercana y cordial adems de fructfera. Esto es especialmente
cierto para el siglo XVIII, cuando la explotacin de plata a
partir de su amalgamacin con mercurio floreci en toda la
Hispanoamrica colonial. Adems de estar vinculada a la metalurgia y la mineraloga, la qumica era una actividad unida a
la prctica de mdicos y farmacuticos, quienes la utilizaban
como herramienta para averiguar las propiedades curativas de
las plantas y de otros recursos teraputicos de origen animal y
mineral.
Modernizar el estudio de la materia mdica fue el objetivo
de la ctedra de botnica instituida en territorio virreinal en
1788. Impartida por el farmacutico Vicente Cervantes, la ctedra fue un espacio para la difusin y aplicacin de los sistemas
de Linneo y Lavoisier; sin embargo, la instruccin formal de la
qumica se estableci por primera vez en 1797, en el Real
Colegio de Minera, inaugurado cuatro aos antes. Que los
mdicos, los farmacuticos y los mineros mantuvieran estrechas relaciones se ilustra a travs de las actividades realizadas
por el mdico Esteban Morel en Real del Monte, Hidalgo.
Introductor de la inoculacin de la viruela en estos territorios
en 1779, Morel encontrara en Real del Monte un escenario
para desarrollar sus inquietudes en el campo minero y revelar
sus amplias relaciones con la comunidad cientfica local.
Si bien es cierto que la posesin de minas de plata durante
este perodo era sinnimo de abundancia y riqueza, tambin lo
es que eran objeto de silenciosas envidias y fieras disputas.
Uno de los distritos ms ricos y prsperos durante ese periodo
fue precisamente Real del Monte. Esta zona fue una de las

Mtodos y tcnicas
Como todo trabajo historiogrfico, la metodologa consisti en
la revisin, seleccin e interpretacin de fuentes primarias
recopiladas en diferentes archivos de la Ciudad de Mxico. Estos fondos documentales son: El Archivo General de la Nacin,
el Archivo Histrico de la Ciudad de Mxico y el Archivo His trico del Palacio de Minera.
El trabajo sigue los lineamientos de la historia social de
las ciencias, que nos permite entender el ejercicio cientfico
como una praxis sealada por el contexto en el que tiene lugar.
Desde esta perspectiva, el caso del doctor Morel permite
reconocer la existencia de una comunidad de profesionales al
tanto de las teoras cientficas en boga, e interesada en su in-

190

Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

tercambio y discusin. Al mismo tiempo es posible acercarnos

a sus formas de organizacin y vinculacin profesional y personal, aspectos que revelan la existencia de una infraestructura
local conformada por instituciones, publicaciones, conocimientos terico-prcticos a partir de la cual se hace posible
la adquisicin, adaptacin, rechazo o puesta en prctica de
nuevos saberes.

Resultados
Esteban Morel naci en Auberre, dicesis de Marsella en
1744. Durante su adolescencia curs estudios de gramtica y
filosofa en Marsella para despus encaminar sus intereses
hacia la medicina. Tras concluir su educacin bsica, Morel se
enlist como estudiante de medicina en las Universidades de
Aix en Provence y Montpellier; de esta ltima obtuvo el ttulo
de mdico en 1764 [2].
Durante sus aos de estudiante tuvo la oportunidad de asistir a las ctedras de notables cientficos de la poca, tal es el
caso de Henri Haguenot (1687-1775), el cual imparta cursos
de ciruga y farmacia en la ilustre Universidad de Montpellier.
Haguenot fue miembro fundador de la Real Academia de
Ciencias de Montpellier, una de las ms notables del siglo
XVIII. Tambin fue alumno de la ctedra de Franois De
Sauvages (1706-1767), un mdico egresado de Montpellier
que se hizo clebre tras el xito con el que fue recibido su trabajo desarrollado en colaboracin con el ilustrsimo Hermannus Boerhaave y que consisti en la elaboracin de un nuevo
sistema de clasificacin de las enfermedades basndose nicamente en la observacin de los sntomas. De Sauvages tambin fue miembro de la Real Academia de Ciencias de Montpellier y en 1752 recibi un reconocimiento Real por su distinguida labor.
Las ctedras de anatoma y fisiologa, las curs bajo la
tutela de Franois De Lamure (1717-1787), cuyos trabajos
sobre la dinmica del movimiento cerebral le valieron su publicacin en la Real Academia de Ciencias de Pars en 1752.
No podemos dejar de mencionar la ctedra de PaulJoseph Barthez (1734 -1806) que fue colaborador de La
Enciclopedia en la cual public varios trabajos sobre el vitalismo, ni la ctedra de qumica impartida por Gabriel-Franois
Venel (1723-1775), que al igual que Barthez tambin public
numerosos artculos de qumica, farmacia y fisiologa en La
Enciclopedia.
De lo anterior se intuye que la formacin de Esteban
Morel en las reas de la medicina, la farmacia y la qumica fue
slida y abundante.
Luego de finalizar los cursos correspondientes y en sus
propias palabras, como es costumbre de los mdicos de la
Europa, de no pasar a una libre propia prctica sin haber
seguido y estudiado con observacin la de los grandes mdicos [3], Morel llev a cabo varias estancias en diferentes hospitales bajo la tutela de varios mdicos especializados en
diversas reas; gracias a esta experiencia puso en prctica su
sentido de la observacin para aprender lo ms posible acerca

Liliana Schifter Aceves et al.

de las enfermedades y los remedios que deban aplicarse para
su cura. Una vez concluida esta etapa de estudiante y aprendiz, Morel pas a la aplicacin de los conocimientos recin
adquiridos y poco despus comenzara un largo xodo que
durara el resto de su vida.
Apenas un ao despus de haberse recibido, Morel abandon su pas con destino a la isla de Guadalupe bajo autntica
comisin del Rey de Francia, para ejercer el servicio de mdico en los hospitales militares de aquella provincia. El trabajo
implicado en el ejercicio de sus obligaciones requera de todo
su esfuerzo, el joven mdico tena que visitar hasta trescientos
enfermos diariamente, disponiendo para esta tarea nicamente
de una hora u hora y media. El resto del tiempo que pasaba en
el hospital, lo empleaba en la distribucin de alimentos y
medicamentos para todos los pacientes, as como para realizar
las operaciones quirrgicas que hicieran falta en el orden que
mejor conviniese a los enfermos.
Durante su estancia en el Caribe, Morel ejerci su profesin
en otras islas pertenecientes a la corona francesa, tal es el caso
de La Martinica y La Margarita. Posteriormente estuvo en
Venezuela y despus en Cuba y Nueva Orleans antes de establecerse en la capital de la Nueva Espaa en 1778, previas escalas
en Guanajuato y Real de Catorce, lo que le permiti familiarizarse con dos de los distritos mineros ms ricos del pas [4].
Aunque aparentemente nunca ejerci su profesin de
manera formal en ninguna institucin novohispana, Morel fue
una figura presente en el mbito cientfico colonial. Su slida
preparacin le impuls a llevar a cabo diversos trabajos durante su estancia en nuestro pas; muchos de ellos realizados en la
rebotica de sus amigos farmacuticos y en especial en el establecimiento de Antonio Arbide, encargado de la botica del
Hospital General de San Andrs, uno de los nosocomios ms
importantes de la ciudad.
Entre los trabajos desarrollados por Morel se pueden citar
los siguientes:
Ensayos sobre la composicin de la sal sedativa y el
jabn mineral
Introduccin del mtodo para la elaboracin de ether
vitrilico
Estudios fisicoqumicos de aguas minerales
de la Ciudad de Mxico y sus alrededores
Estudio de las propiedades del pulque
Introduccin del mtodo de La Garaye para
la preparacin de la sal esencial de quina
Sin embargo, la mayor aportacin de Morel a la poblacin
novohispana y a la medicina colonial, fue la introduccin de la
inoculacin de la viruela en 1779. Acerca de este tema, el borlado de Montpellier public un largo y detallado trabajo en el
cual discute las ventajas de implementar este mtodo en la
Nueva Espaa para proteger a la poblacin contra las terribles
epidemias de viruela que azotaban nuestro territorio con una
frecuencia aterradora. El ttulo del trabajo era: Disertacin
sobre la utilidad de la inoculacin y hasta donde se sabe fue el
primero en la Nueva Espaa acerca de este tema [5].

Minera e Inquisicin en la Nueva Espaa del siglo XVIII; el caso Morel

La medicina y la farmacia, no fueron las nicas reas de

inters de este inquieto galeno, tambin tuvo una tormentosa e
intensa relacin con la minera novohispana a travs de una
mina situada en el distrito de Real del Monte en Hidalgo; la
Mina de Morn.
La relacin de Morel con la Mina se remonta al ao de
1789, cuando era el apoderado (o encargado de los procesos
legales) del entonces dueo de la mina, don Anselmo Montero.
Los documentos consultados indican que en ese entonces tena
que hacerle frente a las acusaciones de Joseph Manuel Valcarce, quien alegaba que la mina estaba abandonada y el sueldo
de los obreros era miserable. Esta acusacin era muy grave, ya
que segn las nuevas ordenanzas para la direccin, rgimen y
gobierno de la minera en la Nueva Espaa, vigentes desde
1783, si alguien poda demostrar que una mina estaba abandonada y presentaba una propuesta interesante para su explotacin, la mina pasaba a ser de su propiedad. Sin embargo, este
no era el caso, ya que Valcarce se retir de la contienda a principios de 1790 y la mina sigui en posesin de Montero [6]. Un
ao ms tarde, Montero cedi la mitad de la mina a su apoderado, y en 1792, debido a su regreso a su natal Espaa, le vendi
a Morel la mitad restante por trescientos pesos, mismos que
recibi de contado el 17 de abril de 1792. Al ao siguiente el
nuevo propietario habra de enfrentar nuevas acusaciones, esta
vez por parte de Joseph Belio, un hombre importante en el
panorama minero en Mxico ya que era diputado territorial de
Minera de la jurisdiccin de Pachuca y adems era dueo de
algunas minas en El Chico, Hidalgo, donde adems diriga un
importante proyecto para desaguar algunos terrenos circundantes de la zona los cuales sospechaba eran ricos en oro y
plata. Esto implicaba que era un hombre muy rico, ya que en
ese entonces los proyectos hidrulicos de acondicionamiento y
desage de minas eran extremadamente costosos [7]. A diferencia de Valcarce, Belio esgrimi una estrategia diferente.
Present una denuncia ante el Real Tribunal de Minera en la
que argumentaba que de acuerdo a las ordenanzas ya mencionadas, Morel no poda ser dueo de minas en la Nueva
Espaa dado su carcter de extranjero. Morel se defendi presentando ante el Tribunal una Real Orden fechada el 27 de noviembre de 1791, a travs de la cual el Rey de Espaa, Carlos
IV, le permita desempear su profesin en nuestro pas y como
tal era un extranjero tolerado. El Tribunal fall a su favor; aunque el expediente de la disputa permaneci abierto.
Aparentemente, una vez ms, Morel haba logrado defender su mina; sin embargo su victoria no fue muy larga. El 5 de
septiembre de 1794, fue encarcelado por la Inquisicin y sus
bienes fueron embargados, entre ellos la mina. Deba responder
a los cargos de hereja, desobediencia a las leyes de Dios, lectura y posesin de libros prohibidos y divulgacin de noticias
acerca de la Revolucin Francesa.
Es significativa la coincidencia cronolgica entre el litigio
por la posesin de la mina y el juicio promovido en su contra
por la Inquisicin y que condujo a su arresto.
Las acusaciones, los acusadores, algunos documentos y el
registro del juicio de Morel, se encuentran reunidos en un expediente inquisitorial resguardado en el Archivo General de la

191

Nacin. Este documento largo y rico en datos, fechas, nombres y lugares, nos evoca incontables imgenes. Sus lneas dan
vida a Morel, nos revelan sus expresiones, creencias, costumbres e incluso sus amoros y su temperamento. Tambin
incluye las opiniones de calificadores y consultores a lo largo
del proceso y algunos papeles que se encontraron en posesin
de Morel al ser arrestado. Por ltimo, contiene el testimonio
del mismo Morel recogido en las audiencias a las que fue sometido.
De su lectura se desprenden escenas de la vida cotidiana
tanto del mdico como de la gente que frecuentaba, nos permite introducirnos en la intimidad de sus casas, carruajes, boticas y negocios, adems de que revela la identidad de los que
formaron el ncleo amistoso que Morel cultiv en nuestro
pas. El mdico francs y sus contertulios se reunan peridicamente para intercambiar libros, opiniones y discutir las teoras sobre la materia, la naturaleza espiritual o material del alma, el origen del mundo, as como los ltimos acontecimientos polticos.
Algunos de estos personajes eran bastante clebres en la
esfera cientfica de la Nueva Espaa del siglo XVIII, tal es el
caso de Fausto De Elhuyar, destacado qumico descubridor
del tungsteno, que adems tuvo bajo su encargo la supervisin
de las minas de la Nueva Espaa y la evaluacin del posible
establecimiento en ellas de nuevas tcnicas para optimizar la
extraccin de metales. Eventualmente, De Elhuyar llegara a
ser director del Tribunal y del Colegio de Minera; en este ltimo tuvo a bien el inaugurar la primera ctedra de qumica
impartida por l mismo en 1796 [8]. Entre los tertulianos de
Morel, tambin podemos contar a Francisco Xavier Sarra,
autor junto con Fausto De Elhuyar, del Suplemento al Ensayo
de metalurgia (1791) cuya importancia radica en que fue el
primer texto en castellano que explic de manera sistemtica
la teora de Lavoisier y sus colaboradores; y Vicente Cervantes, miembro de la Real Expedicin Botnica de la Nueva
Espaa, fundador del Jardn Botnico de la Nueva Espaa y
primer traductor al castellano del Tratado elemental de
Chimica de Lavoisier [9].
Durante su estancia en la crcel, de septiembre de 1794
hasta febrero de 1795, Morel fue sometido a varias audiencias
en las cuales fue interrogado acerca de sus actividades y creencias. En las sesiones Morel admiti haber vivido en amasiato
con una mujer a la que haca pasar por su recamarera, haber
transcrito algunos extractos de cartas que tenan que ver con la
Revolucin Francesa para hacerlos circular entre sus conocidos
y haber estado en contacto durante su estancia en su pas natal
con los libros de Montesquieu, Rosseau y Buffon; todos ellos
autores prohibidos por la Inquisicin en ese entonces. Sin embargo, se declaraba inocente de los cargos de hereja y falta de
observancia a las leyes de Dios. Esto no impidi el que le presentaran una acusacin por escrito que contaba con ms de
ciento treinta captulos diferentes. La audiencia en la que esto
tuvo lugar habra de ser la ltima.
El domingo 15 de febrero de 1795, los custodios lo encontraron encerrado en su cuarto y baado en su propia sangre; tena una herida profunda y larga en el lado izquierdo del

192

Liliana Schifter Aceves et al.

Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

cuello provocada por unas pequeas tijeras que en ese entonces se utilizaban para recortarse la barba. Estaba vivo, sin
embargo, antes de brindarle atencin mdica, sus captores,
siempre ms preocupados por el bienestar del alma que el del
cuerpo, intentaron convencerlo de que se confesase, a lo que
l se neg. No obstante, tres sacerdotes se dieron a la tarea de
disuadirlo durante una hora. Finalmente, y despus de haber
logrado su cometido, llamaron al mdico, pero por lo profundo de la herida y la cantidad de sangre que haba perdido no
lograron salvarlo y muri a las 10:30 de la maana.
El 19 de junio de 1795, el Santo Oficio orden que se fijara una tabla en la Iglesia Metropolitana en la que figurara su
nombre, patria y delito, para perpetua memoria de sus pecados
[10].
As concluy la vida del introductor de una prctica que
habra de convertirse en la mayor aliada de la medicina novohispana en la guerra contra la viruela y que se estima, salv
numerosas vidas en la ltima dcada del siglo XVIII mexicano.
Su vida, a diferencia de la de sus amigos y compaeros de
tertulia habra de terminar de manera trgica y violenta. Los
dems tertulianos nunca fueron convocados ante el Tribunal,
si bien eran importantes figuras en la plataforma social,
econmica, cientfica y educativa de nuestro pas, eso no impeda el que fueran personajes bastante inquietos y que se reunieran a menudo con personas que varias veces resultaron
encarceladas por el Santo Oficio. Habr de suponerse entonces, que la cuestin de la nacionalidad era un factor con un
peso especfico importante para esta organizacin.
Adems de ser francs, recordemos que Morel era dueo
de la Mina de Morn en Real del Monte, una de las minas ms
codiciadas debido a su riqueza en el contenido de plata fundamentalmente. Ya mencionamos anteriormente que cuando
Morel fue encarcelado, estaba en curso un juicio en el que Joseph Belio buscaba quedarse con la mina; a raz de su arresto,
Morel perdi la propiedad de la misma, y una vez que todos
sus bienes fueron embargados, la mina qued a merced del
mejor postor. Al ao siguiente de la muerte de Morel, el que
aparece como propietario de la mina de Morn es precisamente Joseph Belio, quien la tendra en su haber hasta 1799,
cuando la mina volvera a ser motivo de numerosos pleitos y
denuncias [11]. Vale la pena mencionar que poco tiempo
despus el yacimiento sera propiedad de Andrs Manuel del
Ro, profesor del Real Seminario de Minera. Adems de ser
el descubridor no reconocido del Vanadio, del Ro fue el inventor de una mquina de columna de agua o sistema de sifn,
primer proyecto tecnolgicos aplicado en Amrica para el desage de yacimientos mineros, utilizada inicialmente en la
mina del Morn [12].
Se mantiene an la interrogante acerca de la importancia
que tuvo esta mina en el desenlace de esta historia.

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Pachuca S.A, Mxico, 1987, 121-130.
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el siglo XVIII mexicano: el caso de Esteban Morel (1744-1795),
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Revista de la Sociedad Qumica de Mxico, Vol. 46, Nm. 2 (2002) 193-195

Obituario

Francisco Giral Gonzlez: un verdadero maestro

Andoni Garritz
Facultad de Qumica de la Universidad Nacional Autnoma de Mxico. Ciudad Universitaria, Circuito Escolar. Mxico 04510,
D.F. Tel.: (55) 5622-3439

El pasado mes de enero perdimos a un verdadero maestro. Falleci Francisco Giral Gonzlez, alguien a quien, ya lo creo,
mucho nos esforzaremos por emular, pero nunca lograremos
sustituir. Dice Jaime Kravzov [1] que posea don Francisco
esa cualidad que es sntesis de generosidad, sabidura y amplitud de criterio, capaz de contagiar en quienes le rodean la
pasin por el conocimiento, que hace que esos otros se interesen por el camino del saber, dndole continuidad a su bsqueda de una aplicacin ms humana de la ciencia. Nada, un
verdadero maestro.
Recuerdo cuando don Francisco nos deca, una y mil veces, que Alfonso X, nuestro rey sabio, hizo la primera y mejor
definicin de lo que debe ser una Universidad como ayuntamiento de maestros y escolares hecho con voluntad y con
entendimiento de aprender los saberes, slo que, aada el
doctor Giral, desde la plataforma de las ciencias experimentales modernas, yo le agregara los haceres a los saberes, o
dejara bien claro que el saber incluye el saber hacer.
As, en pocas palabras, nunca perdon a Alfonso X el Sabio
no haber hecho explcito que la Universidad pretende el aprendizaje de los haceres y los saberes, ambos al mismo tiempo,
ambos iguales en importancia, ambos indispensables. Estaba
de acuerdo con Bernardo Houssay, premio Nobel argentino
por sus logros en la experimentacin fisiolgica y bioqumica,
cuando deca: el desprecio al trabajo manual es una tradicin que nos viene desde la poca colonial.
Deca don Paco como amablemente nos permita a los
jvenes dirigirnos a l No se puede hacer ciencia experimental, y muy particularmente, no se puede hacer qumica, sin una
buena dosis de trabajo manual, de esos haceres que omiti la
definicin de Las Partidas. Como qumico experimental, puedo
proclamar muy alto el inmenso placer que he sentido siempre
que he tenido que realizar una muy buena experimentacin, al
comprobar la suprema actividad humana que significa realizar
algo nuevo con las manos dirigidas por la propia mente [2].
*Semblanza publicada en la revista Educacin Qumica 2002, 13, 74-76.

El doctor Giral vio nacer su inters cientfico en las reboticas familiares, primero con el recuerdo de su abuelo, Francisco Gonzlez Serrano, y posteriormente con el ejemplo de su
padre, Jos Giral Pereira, a quien considera como su maestro
de la vida, maestro de vocacin y maestro de profesin,
ambos fundamentales en su desarrollo personal y en su irrenunciable propsito de considerar a la farmacia, sobre todo,
como un servicio sanitario, y un apoyo sustancial para el quehacer de la medicina.
Adems de los ejemplos familiares, el perfil cientfico del
doctor Giral se deline gracias a maestros como don Miguel
Cataln, quien en el bachillerato lo inici en la qumica y la
fsica; don Enrique Moles, profesor de Qumica Inorgnica, y
don Antonio Madinaveitia, director de su tesis profesional y
posteriormente Director fundador del Instituto de Qumica en
1941, en Mxico, donde ambos lograron sus aspiraciones de
vivir en la libertad y en el ambiente propicio para sus investigaciones.
Obtuvo los doctorados en Farmacia y en Ciencias Qumicas por la Universidad Central de Madrid, en la que su padre
lleg a fungir como Rector. Complet su formacin cientfica
durante un posgrado que curs en Heidelberg, Alemania. All
lleg por consejo del clebre maestro Richard Willstter,
Premio Nobel de qumica en 1913, quien lo haba recomendado con su ms joven discpulo, Richard Kuhn, premio Nobel
posteriormente en 1939. Con Kuhn public varios trabajos, de
1933 a 1935, en revistas cientficas alemanas y espaolas. Esta
etapa de su vida acadmica fue sin lugar a dudas decisiva para
su carrera como investigador.
En febrero de 1936 gan por oposicin la ctedra de qumica orgnica aplicada a la farmacia de la Universidad de
Santiago de Compostela. Debido a su clara filiacin republicana, fue destituido por razones polticas en noviembre de ese
mismo ao por la Junta de Burgos. Se desempe en diversas
actividades qumico industriales al servicio del gobierno de la
Repblica Espaola y tras la derrota de ste por las fuerzas
falangistas, fue internado en un campo de concentracin en

194

Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 46, Nm. 2 (2002)

Andoni Garritz

Francisco Giral Gonzlez: un verdadero maestro

Francia, en donde fue invitado por don Salvador Zubirn para

viajar a Mxico. As lleg a Mxico el joven catedrtico, como parte del exilio espaol, gracias a la generosa iniciativa solidaria del gobierno del general Lzaro Crdenas.
Como hombre de ciencia y profesor universitario, en Mxico dirigi unas 200 tesis de licenciatura, maestra y doctorado, es autor de alrededor de un centenar de artculos cientficos basados en trabajos de investigacin experimental, publicados en revistas especializadas, nacionales y extranjeras,
sobre temas como fitoqumica, esteroides, medicamentos
antipaldicos, vitaminas, qumica de grasas animales y vegetales, qumica de insectos, entre otros. Public, adicionalmente, unos 200 artculos y folletos de difusin, discusin y
divulgacin sobre la enseanza de la qumica, productos naturales, alimentos e historia de la qumica y la farmacia. Es asmismo, autor de ms de una docena de libros y traductor de
textos que, por su importancia, se han convertido en clsicos.
Como todo gran maestro, nos dej una plyade de alumnos, como Yoloxchitl Bustamante, ngela Sotelo, Lydia Rodrguez-Hahn, Ofelia Espejo, Alfredo Bttenkleper, Ana Luisa Anaya, Silvia del Amo, Mara Teresa Reguero, Marisela
Plascencia, Pedro Castaeda y Juan Senosiain, entre otros mexicanos, y entre los extranjeros al chileno Mario Silva, al cubano Francisco Coll, y a los colombianos Jairo Calle y Rosabel Segura. Porqu no mencionar que tambin ayud a forjar a
sus hijos, Jos, Adela y Carmen como profesionales destacados de la ingeniera qumica, l, y la farmacia, ellas. Una de
las ltimas tesis que dirigi, quizs la ltima, fue la de ngela
Lpez Giral, su nieta, quien recibi su influencia para realizar
un doctorado en qumica orgnica-productos naturales.
Son innumerables las distinciones que recibi durante su
desempeo acadmico y profesional. Destacan entre ellas el
nombramiento como profesor emrito de la UNAM; los doctorados honoris causa por las Universidades Nacional de Mxico,
La Habana, Lima, Caracas y Sao Paulo; los premios nacionales
Leopoldo Ro de la Loza en ciencias farmacuticas, Andrs
Manuel del Ro de la Sociedad Qumica de Mxico, y Martn
de la Cruz del sector salud; las membresas correspondientes
de la Academia de Ciencias Farmacuticas de Mxico, de la
Academia de Ciencias Exactas Fsicas y Naturales de la
Repblica Argentina, de la Sociedad Qumica del Per y de la
Asociacin de Qumica y Farmacia del Uruguay. Asmismo, se
desempe como asesor de la Organizacin de las Naciones
Unidas para la Educacin, la Ciencia y la Cultura (UNESCO) y
de la Organizacin Mundial de la Salud (OMS).
El doctor Giral, maestro extraordinario, humanista de
excepcin y universitario por vocacin, promovi y realiz
con impecable coordinacin los distintos aspectos de la misin universitaria, que son las tres caractersticas de la actitud
del hombre ante el conocimiento universal: la adquisicin (investigacin), la transmisin (enseanza) y la aplicacin (utilizacin) de ese conocimiento.
En 1980, a su regreso a Salamanca donde, despus de la
muerte de Francisco Franco, retoma por un corto tiempo su
ctedra del departamento de qumica orgnica en la Facultad
de Farmacia, Giral se refiere al papel de los universitarios

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frente a los retos de un pas: como universitario del exilio

pienso hoy que un Estado moderno, una nacin de vanguardia
aunque ya no alcance la posicin de soberana del mundo
es hoy el fruto de la iluminacin y la direccin de sus graduados de estudios superiores, sustancialmente los titulados universitarios, no slo en su aspecto docente como formador de
profesionales sino tambin y ante todo en su aspecto rector del pensamiento libre, del juicio crtico poltico-social y de
la investigacin cientfica. Soy partidario de aceptar la responsabilidad ante la nacin entera del desarrollo del pas y pienso
que los universitarios debiramos asumir el compromiso de
defender y mantener la calidad, la intensidad y la continuidad
de la vida universitaria como la mejor forma de contribuir al
progreso espiritual y material de Espaa, independientemente
de su organizacin poltica y de su tendencia social.
Otra frase notable de don Francisco Giral llama la atencin porque no expresa resentimiento alguno por haber perdido la guerra y su trabajo en su pas natal, quizs porque logr
cumplir con su tarea de universitario cabal en otro pas,
Mxico: Acaso, en aquella aurora de esperanzas que empezaba a brillar en 1936 se nubl el alba de un nuevo siglo de oro
espaol. Los universitarios del exilio no deseamos reclamar
nada con violencia material ni con violencia espiritual, seguiremos clamando con esclarecida dialctica, sin agresiones,
con tolerancia recproca, por la firmeza de nuestras ideas en
torno a la formacin de mejores universitarios, de mejores
ciudadanos dotados de voluntades firmes, inteligencias claras
y corazones nobles [3].
Y cerramos como iniciamos, con palabras de Jaime Kravzov [1]: Sus alumnos reconocemos que el doctor Giral,
adems de sus enseanzas farmacuticas, nos supo inculcar el
amor a la ciencia, el compromiso con la verdad, una tica inquebrantable frente a nuestra disciplina y el deber ineludible de
luchar por un mundo ms justo para todos. El maestro Giral
ya no est con nosotros, ahora acompaa en nuestro recuerdo a
su querida esposa, colega de profesin, testigo entusiasta de su
presencia internacional, colaboradora lcida y desinteresada en
su proyecto de vida, doa Petra Barns. Descansen en paz.

Referencias
1. Kravzov, J., Francisco Giral Gonzlez. En Nuestros Maestros,
tomo I, pgs. 97-100, Edicin de la UNAM, Mxico, 1996.
2. Giral, F. Teora y prctica de la enseanza de la qumica, en Seminario de teora de la ciencia, Miguel A. Quintanilla (editor), Ediciones Universidad de Salamanca, pgs. 177-201, Salamanca, 1982.
3. Giral, F. Comentarios qumico-farmacuticos a la historia espaola en Amrica, Ediciones Universidad de Salamanca, Salamanca,
1980, 101 pgs.