UNIVERSIDAD AUTNOMA METROPOLITANA
UNIDAD IZTAPALAPA
Licenciatura en Qumica, Grupo CF01
Mtra. Mara Del Carmen Nio De Rivera Oyarzabal
Laboratorio de Qumica 1
Garca Flores Arturo
Martnez Fuentes Ana Paulina
Martnez Gonzlez Karla
Cromatografa.
Objetivos generales.
El alumno comprender el principio de la cromatografa y utilizar sus diversas
posibilidades para la purificacin e identificacin de compuestos orgnicos.
Objetivos especficos.
Que el alumno aprenda a clasificar por medio de la Cromatografa a identificar los tipos de
analitos que se encuentran en una muestra a base de las distintas tonalidades que
presentan.
Introduccin.
La cromatografa es la tcnica que permite separar sustancias de diferente color mediante la
distribucin desigual de stas entre 2 fases, un adsorbente y un medio de arrastre. En qumica
orgnica se utilizan 3 tipos de cromatografa: cromatografa en capa fina (ccf), cromatografa en
columna (cc) y cromatografa de gas-lquido (cgl).
Todos los tipos de cromatografa dependen de la distribucin de los componentes de la muestra
entre 2 fases inmiscibles: una fase mvil, llamada tambin activa, que transporta las sustancias
que se separan y que progresa en relacin con la otra, denominada fase estacionaria. La fase
mvil puede ser un lquido o un gas y la estacionaria puede ser un slido o un lquido.
Los parmetros que generan la separacin pueden ser: fenmenos de adsorcin, fenmenos de
reparto, fenmenos de distribucin de masas moleculares y fenmenos de separacin en funcin
de cargas.
Para aplicar cualquier mtodo de cromatografa se deben considerar la estructura qumica, la
polaridad, la solubilidad y la constante dielctrica de la sustancia que se usar.
Los adsorbentes ms comunes de la cromatografa son el gel de slice, el xido de aluminio
(Al
2
O
3
), la celulosa y las poliamidas; mientras los mtodos de revelacin ms comunes son la luz
UV, la introduccin de la placa en vapores de yodo y el roco con una solucin de H
2
O/H
2
SO
4
.
Proceso experimental.
Material Reactivos
1 mortero con pistilo Hexano
1 probeta de 25 ml Cloroformo
1 probeta de 10 ml Benceno
1 vaso de precipitados de 100 ml Acetona
1 vidrio de reloj Acetanilida
1 pipeta Pasteur Etanol
1 esptula Metanol
1 mortero Acetato Etilo
3 matraces Erlenmeyer de 25 ml 8-axiquinolina
6 vasos de precipitados de 50 ml
(a)
(b)
Lavar, pesar 2 gr
y cortar en
trozos pequeos
chile guajillo.
Con la ayuda de
un motero
triturar el chile
hasta dejar en
trozos muy
pequeos.
En 3 vasos de
precipitado de
25ml colocar:
1) Agregar 20 ml
de Hexano.
2) Agregar 10 ml
Hexano y 10ml de
cloroformo.
3) Agregar 12 ml
de acetato de tilo,
7.5 ml de Benceno
y 0.5 ml de
acetona.
En las cromatoplacas
colocar una gota de la
muestra a estudiar.
Sumergir cada placa en
una de las cmaras y
esperar.
En 2 vasos de precipitado de
25 ml colocar:
1) Agregar 20 ml de
cloroformo.
2) Agregar 8. 16 ml de
Acetato de tilo y 2.4 ml de
Hexano.
3) Agregar 16 ml de acetato
de tilo 3 ml de Benceno y 1
ml de Metanol
En las cromatoplacas
colocar una gota de la
muestra a estudiar.
Sumergir cada placa
en una de las cmaras
y esperar.
Observar las diferentes
tonalidades que se
forman en las
cromatoplacas
punteadas y clasificar
los analitos presentes.
Observar las diferentes
tonalidades que se
forman en las
cromatoplacas
punteadas y clasificar
los analitos presentes.
Colocar en un
Matraz Erlenmeyer
el chile guajillo y
agregar 20 ml de
Benceno. Agitar
por 10 min.
Resultados.
Sustancias coloridas:
1. Chile guajillo + 5 ml de benceno con 20 ml de hexano: Se observaron los carotenos
2. Chile guajillo + 5 ml de benceno con 10 ml de hexano + 10 ml de cloroformo: Se
observaron las capsalinas.
3. Chile guajillo + 5 ml de benceno con 12 ml de acetato etilo + 7.5 ml de benceno + 0.5 ml de
acetona: Se observaron los carotenos y las capsalinas.
Sustancias incoloras:
Discusin y resumen.
En la cromatografa de capa fina, un adsorbente est depositado formando una delgada capa
sobre una placa de vidrio, papel de aluminio u otros materiales, por la que ascienden, arrastradas
por un disolvente (eluyente), una o ms sustancias que se pretenden separar o identificar.
Con la ayuda de un capilar de vidrio, una pequea cantidad de muestra se deposita sobre el
adsorbente, muy cerca del extremo inferior de la placa. Una vez depositada la muestra, se
introduce la placa en una cubeta de cromatografa, que contiene en el interior el disolvente con el
que va a desarrollarse el cromatograma. La altura del disolvente en dicho frasco o cubeta debe
ser tal, que ste no toque la zona donde se encuentra la pequea mancha de producto
depositado. La placa se coloca en posicin vertical, ligeramente inclinada.
El disolvente asciende entonces por capilaridad a lo largo de la placa, arrastrando a los
compuestos a diferentes velocidades, segn el grado de adsorcin de stos producindose as su
separacin. Transcurridos unos minutos, cuando el frente del disolvente se encuentra prximo al
extremo de la placa, se saca sta de la cubeta, se deja secar y se examina. Los diversos
compuestos se localizan directamente si son coloreados, o con la ayuda de un indicador o luz
ultravioleta, si son incoloros.
Los compuestos que avanzan a lo largo de la placa se ven atrados por fuerzas electrostticas
sobre la superficie del adsorbente, interaccionando el disolvente con ambos. Esta interaccin
competitiva establece las velocidades relativas con que ascienden por la capa de adsorbente, el
frente de disolvente y un determinado compuesto.
Conclusiones
Es esta prctica logramos conocer y aplicar la cromatografa por capa fina, sus caractersticas y
los factores que influyen en la separacin por cromatografa, para as mismo poder aplicar un
criterio que identifique la pureza de sustancias de acuerdo con la pigmentacin que se presente al
realizar la cromatografa.
Bibliografa.
LIDE, D. R., Handbook of Chemistry & Physics, CRC Press, Florida, 1977.
DURST, H. D., Qumica Orgnica Experimental, Editorial Revert, Barcelona, 2007.
RODRGUEZ Y., J., Curso experimental en Qumica Orgnica, Editorial Sntesis, Madrid, 2008.
