EPIDERMIS DE CEBOLLA
OBJETIVO
Observar clulas vegetales describiendo las estructuras visibles al microscopio ptico.
MATERIAL
Microscopio
Portas
Pinzas finas
Tijeras finas
MATERIAL DE ESTUDIO
Una cebolla
PREPARACIN
1. De la parte cncava de una de las hojas carnosas del bulbo de la cebolla
y con la ayuda de un bistur y una pinza fina, separar una pequea
porcin de epidermis, procurando no arrancar el tejido subyacente, de tal
forma que la parte desprendida tenga el aspecto de una fina pelcula
traslcida.
2. Llevar el trozo desprendido y situarlo en el portaobjetos.
3. observar al microscopio, primero a pequeo aumento y luego a un
aumento mayor.
OBSERVACIN AL MICROSCOPIO
Se utilizarn primero los aumentos pequeos con el fin de centrar la
preparacin y determinar la zona mejor para la visualizacin. Cambiar
despus a un aumento mayor. (x40 y x100)
Las clulas de la epidermis de las hojas internas del bulbo de la cebolla, son
de forma alargada y bastante grandes. La membrana celular de celulosa se
destaca muy claramente.
A continuacin coloca la epidermis de la cebolla que previamente se ha
teido con azul de metileno.
Vuelve a realizar la observacin al microscopio (x40 y x100)
Si observas detenidamente puedes observar:
La membrana celular de celulosa se destaca muy clara teida por el
colorante. Los ncleos son grandes y muy visibles. En el citoplasma se
distinguen algunas vacuolas grandes dbilmente coloreadas.
Preparacin de colorantes
1. Acido-Alcohol: (decolorante para tincin Ziehl-Neelsen)
o cido clorhdrico concentrado ..........................................................3 ml
o Etanol 95% ....................................................................................97 ml
2. Azul de metileno: Colorante de contraste para tincin de flagelos.
o Azul de metileno................................................................................1 g
o Agua destilada...............................................................................100 ml
3. Azul de metileno de Loeffler: Tinciones simples.
o Solucin de hidrxido potsico al 1%.................................................1 ml
o Azul de metileno, sol. saturada en etanol al 95%...............................30 ml
o Agua destilada...............................................................................100 ml
4. Colorante para esporas:
o Solucin acuosa saturada de verde malaquita
5. Colorante para flagelos de Leifson:
o Solucin A
Fucsina bsica .........................................................................1,2 g
Etanol 95%.............................................................................100 ml
o Solucin B
cido tnico................................................................................3 g
Agua destilada.........................................................................100 ml
o Solucin C
Cloruro sdico..........................................................................1,5 g
Agua destilada.........................................................................100 ml
Para preparar la solucin de uso, se mezclan cantidades iguales de las
soluciones A, B y C y se guarda en frasco cerrado hermticamente en
la nevera donde es estable durante varias semanas.
6. Cristal violeta: Para tincin Gram y tincin simple.
o Cristal violeta (violeta de genciana)....................................................0,5 g
o Agua destilada.................................................................................100 ml
7. Eosina: Para observacin de clulas sanguneas.
o Eosina...............................................................................................0,3 g
o cido actico glacial......................................................................0,025 ml
o Agua destilada...................................................................................100 ml
8. Fucsina diluida: Para tincin Gram y tincin simple.
o Fucsina fenicada de Ziehl-Neelsen......................................................10 ml
o Agua destilada.................................................................................100 ml
9. Fucsina fenicada de Ziehl-Neelsen: Para tincin cido-alcohol resistente.
o Fucsina bsica......................................................................................1 g
o Etanol 95%........................................................................................10 ml
o Fenol 5% en solucin acuosa............................................................100 ml
10. Hematoxilina: Para observacin de clulas sanguneas.
o Hematoxilina.........................................................................................2 g
o Agua destilada......................................................................................1 l
11. Lactofenol: Para preparaciones microscpicas en fresco de mohos.
o cido lctico.....................................................................................100 ml
o Fenol................................................................................................100 g
o Glicerol.............................................................................................200 ml
o Agua.................................................................................................100 ml
12. Lactofenol al Azul Algodn: Para preparaciones en fresco y tinciones de mohos.
o Solucin de azul algodn
Sol. saturada de azul algodn (azul anilina soluble)......................10
ml
Glicerol.....................................................................................10 ml
Agua.........................................................................................80 ml
Mezclar esta solucin con lactofenol a partes iguales
13. Lugol: Solucin de yodo para tincin Gram.
o Yodo...................................................................................................1 g
o Yoduro potsico..................................................................................2 g
o Agua destilada.................................................................................300 ml
14. Orcena A: Tincin de cromosomas.
o Orcena................................................................................................2 g
o cido actico.....................................................................................45,8 ml
o cido clorhdrico 1 mol/l......................................................................8,3 ml
o Agua..................................................................................................45,8 ml
15. Orcena B: Tincin de cromosomas.
o Orcena................................................................................................2 g
o cido actico.....................................................................................55 ml
o Agua..................................................................................................55 ml
16. Safranina: Colorante de contraste para tincin Gram (preferible a la fucsina) y
esporas.
o Safranina.........................................................................................0,25 g
o Agua destilada..................................................................................100 m
17. Sudn III: Tincin especfica de grasas.
o Alcohol etlico...................................................................................100 ml
o Sudn III...................................................................................hasta
saturacin
18. Verde de metilo actico: Igual composicin que la eosina (num. 7)
