Biotecnologa

CUESTIONARIO
1. DIFERENCIAS ENTRE PROCESOS BIOTECNOLOGICOS Y QUIMICOS

PROCESO BIOTECNOLOGICO PROCESO QUIMICO
Bajo consumo energtico; es decir, se
requiere muy poca energa para realizar
procesos de cultivos.
Contaminan el medio ambiente.
(daos generales al medio ambiente agua,
suelo, aire, etc)
Facilidad de acceso a materias primas Pueden generan productos secundarios
txicos para quienes los manipulan
Mejora en la nutricin. Se puede llegar a
introducir vitaminas19 y protenas
adicionales en alimentos as como reducir
los alergenos y toxinas naturales
Difcil de eliminar residuos no utilizados
Produccin de alimentos de mejor calidad,
en forma ms eficiente y segura para la
salud y el medio ambiente

Aumenta los rendimientos de produccin,
disminuyendo los costos y aumenta la
seguridad de las cosechas

Produce una menor erosin del suelo y el
agua, menor contaminacin de la capa
fretica (es la primer capa de agua
subterrnea que se encuentra al realizar
una perforacin y la ms susceptible a la
contaminacin antrpica), mejora de la
calidad del agua y de la biodiversidad,
disminucin del uso de combustible, entre
otros.


2. QU ES MEDIO SELECTIVO?
Son medios utilizados para favorecer el crecimiento de ciertas bacterias contenidas en una
poblacin polimicrobiana. El fundamento de estos medios consiste en facilitar nutricionalmente el
crecimiento de una poblacin microbiana especfica, adems suprimen el desarrollo de aquellos
microorganismos que no son de inters.

3. QU ES INOCULO?
Es una cantidad suficiente y representativa de la bacteria problema. Debe partir de un cultivo puro
con una concentracin adecuada.

4. QU ES MEDIO DIFERENCIAL?
Se utilizan para poner en evidencia caractersticas bioqumicas que ayuden a diferenciar gneros o
especies. La adicin de un azcar fermentable o un sustrato metabolizable se utilizan para este fin.
El medio MacConkey es un medio diferencial porque permite distinguir los grmenes que
fermentan la lactosa de aquellos que no lo hacen.
Contienen sustancias qumicas o indicadores que permiten identificar con facilidad algunos
gneros o especies bacterianas por el aspecto caracterstico de las colonias y su capacidad
bioqumica.
5. QU ES UN MEDIO NUTRITIVO?
Usado normalmente como rutina para todo tipo de bacteria. Es muy til porque permanece slido
incluso a relativas altas temperaturas.
Contiene normalmente (p/v):
0.5 % de peptona
0.3 % de extracto de carne/extracto de levadura
1.5 % de agar
0.5 % de cloruro de sodio
Agua destilada
pH casi neutro (6,8) a 25 C.

6. DIFERENCIA ENTRE GRAM (+) Y GRAM (-)
Bacterias Gram positivas Son bacterias que se tien de azul oscuro o violeta por la tincin de
Gram: de aqu el nombre de "Gram-positivas" o tambin "grampositivas".
Esta caracterstica est ntimamente ligada a la estructura de la envoltura celular por lo que refleja
un tipo natural de organizacin bacteriana. Son uno de los principales grupos de bacterias, y
cuando se tratan como taxn se utiliza tambin el nombre de Posibacteria.
Caractersticas presentes en una bacteria Gram-positiva:
Membrana citoplasmtica.
Capa gruesa de peptidoglicano.
cidos teicoicos y lipoteicoicos, que sirven como agentes quelantes y en ciertos tipos de
adherencia.
Polisacridos de la cpsula.

Bacterias Gram negativas Son aquellas bacterias que no se tien de azul oscuro o violeta por la
tincin de Gram: de ah el nombre de "Gram-negativas" o tambin "gramnegativas".
Esta caracterstica est ntimamente ligada a la estructura de la envoltura celular, por lo que
refleja un tipo natural de organizacin bacteriana. Son uno de los principales grupos de bacterias y
cuando se tratan como taxn se utiliza tambin el nombre de Negibacteria.
Caractersticas presentes en una bacteria Gram-negativa:
La envoltura celular de las bacterias Gram-negativas est compuesta por una membrana
citoplasmtica (membrana interna), una pared celular delgada de peptidoglicano, que rodea a la
anterior, y una membrana externa que recubre la pared celular de estas bacterias. Entre la
membrana citoplasmtica interna y la membrana externa se localiza el espacio periplsmico
relleno de una sustancia denominada periplasma, la cual contiene enzimas importantes para la
nutricin en estas bacterias.

7. DIFERENCIA ENTRE MACROSCOPIA Y MICROSCOPIA


Microscpico: Todo aquello que no se
puede ver a simple vista y que para
poder verlo es necesario aumentar la
forma de verlo mediante un
microscopio. Segn esta definicin un
cuerpo es microscpico cuando solo es
posible verlo mediante un microscopio.
Macroscpico: Todo aquello que se
puede ver a simple vista. Para que un
cuerpo sea macroscpico es necesario
que tenga unas dimensiones mnimas
visibles por el ojo humano
Agrupaciones microscpicas solo por
microscopa y corresponde a lo que
realmente se entiende por agrupacin
bacteriana, es decir las tendencia que
representan los distintos tipos
bacterianos para asociarse entre s
formando pequeos grupos de 2 o ms
bacterias
Las agrupaciones macroscpicas son
visibles a simple vista y corresponden a
su crecimiento en un punto en un medio
de cultivo slido para formar colonias
que sern distintas y caractersticas para
cada tipo bacteriano.
8. DIFERENCIA ENTRE ORGANISMOS AUTOTROFOS YHETEROTROFOS

Auttrofos: Carbono inorgnico cuya Fuente nica de carbon es el CO
2

Hetertrofos: Carbono orgnico cuya Fuente de carbon es material orgnica.

9. DESCRIBIR LS TECNICA DE TINCION GRAM
Recoger muestras.
Hacer el extendido con un palillo de madera.
Dejar secar a temperatura ambiente o fijarlas utilizando un mechero.
Fijar la muestra con metanol durante un minuto o al calor (flameado 3 veces aprox.)
Agregar azul violeta (cristal violeta o violeta de genciana) y esperar 1 minuto. Todas las
clulas gram positivas se tien de color azul-prpura.
Enjuagar con agua.
Agregar lugol y esperar entre 1 minuto.
Enjuagar con agua.
Agregar alcohol acetona y esperar 30 segundos o 5 segn la concentracin del reactivo
(parte crtica de la coloracin).
Enjuagar con agua.
Tincin de contraste agregando safranina o fucsina bsica y esperar 1 minuto. Este tinte
dejar de color rosado-rojizo las bacterias Gram negativas.

10. INTERVALO DE TEMPERATURA DE CRECIMIENTO DE LAS BACTERIAS
PSICRFILAS: CRECEN DE 0-20 C
MESFILAS: CRECEN DE 25-40 C
TERMFILAS FACULTATIVAS: CRECEN DE 25-55 C
TERMFILAS: CRECEN A TEMP >A 50 C


BACTERIAS

SACCHAROMYCES CEREVICIAE
Hongo unicelular
Aerobia facultativa
Requiere oxgeno para su multiplicacin
Crece en presencia de etanol
Su temperatura optima de 25-30C
Fermenta y asimila glucosa, galactosa, maltosa y rafinosa
No fermenta ni asimila lactosa
Fuente de carbono: azucares
En presencia de oxgeno: aceptor final CO
2

Sin presencia de oxgeno: genera OH (fermentacin).

Procedimiento para aisalar levaduras
Colocar por duplicado en cajas Petri 1 ml de la muestra lquida directa o de la dilucin
primaria, utilizando para tal propsito una pipeta estril.
Repetir el procedimiento tantas veces como diluciones decimales se requiera sembrar,
utilizando una pipeta estril diferente para cada dilucin.

Verter de 15 a 20 ml de agar papa dextrosa acidificado, fundido y mantenido a 45 1 C
en un bao de agua. El tiempo transcurrido entre la preparacin de la dilucin primaria y
el momento en que es vertido el medio de cultivo, no debe exceder de 20 minutos.

Mezclar cuidadosamente el medio con seis movimientos de derecha a izquierda, seis en
el sentido de las manecillas del reloj, seis en el sentido contrario y seis de atrs para
adelante, sobre una superficie lisa. Permitir que la mezcla se solidifique dejando las cajas
Petri reposar sobre una superficie horizontal fra.
Preparar una caja control con 15 ml de medio, para verificar la esterilidad.

Invertir las cajas y colocarlas en la incubadora a 25 1C.
Contar las colonias de cada placa despus de 3, 4 y 5 das de incubacin. Despus de 5
das, seleccionar aquellas placas que contengan entre 10 y 150 colonias. Si alguna parte
de la caja muestra crecimiento extendido de mohos o si es difcil contar colonias bien
aisladas, considerar los conteos de 4 das de incubacin y an de 3 das. En este caso,
informar el periodo de incubacin de 3 o 4 das en los resultados del anlisis.
Si es necesario, cuando la morfologa colonial no sea suficiente, examinar
microscpicamente para distinguir las colonias de levaduras y mohos de las bacterias.

El Agar Papa Dextrosa pues es un medio utilizado para el cultivo de hongos y levaduras a
partir de muestras de alimentos, derivados de leche y productos cosmticos.
El Agar papa dextrosa puede ser suplementado con antibiticos o cidos para inhibir el
crecimiento bacteriano.
Algunos procedimientos sealan bajar el pH del medio a 3.5 0.1 con cido tartrico al
10%, para inhibir el crecimiento bacteriano.



SALMONELLA
Bacilos
Gram negativos
anaerobios facultativos
Familia Enterobacteriaceae.
Tamao entre 0,3 a 1 um x 1,0 a 6,0 um.
Tienen flagelos pertricos
Metabolismo fermentativo.
Producen cido y a menudo gas durante la fermentacin de la glucosa u otros hidratos de
Carbono (no lactosa). Se multiplican bien en medios ordinarios. Las colonias son al cabo
de 18 a 24 horas de 2 a 3 um de dimetro
Entre otras caractersticas bioqumicas se cuentan reduccin de nitratos a nitritos, utilizan
citrato como nica fuente de Carbono, producen H
2
S y son ureasas negativas.
Para que su crecimiento sea ptimo, Salmonella necesita de un pH entre 6,6 y 8,2, las
temperaturas ms bajas a las que se ha sealado su existencia de crecimiento son de 5,3
a 6,2 C, son incapaces de tolerar elevadas concentraciones de sal. Salmonella es
destruida a las temperaturas de pasteurizacin de la leche
Estos microorganismos que se hallan ampliamente distribuidos en la naturaleza, se
encuentran en el tracto gastrointestinal de los mamferos domsticos y salvajes, los
reptiles, las aves y los insectos. Se trata de comensales eficaces y tambin patgenos
que producen un espectro de enfermedades en el hombre y los animales.
El aislamiento de Salmonella se realiza por el mtodo convencional de la Food and Drug
Administration.
Bsicamente, se pesan 25 g de cada muestra de alimento y se inoculan en 225 ml de los
medios de pre-enriquecimiento, caldo infusin cerebro corazn, los cuales se incuban a
37C durante 24 horas; a partir de estos, se inocula 1ml de cada muestra en 9 ml de caldo
Rappaport, posteriormente se subcultivan en agar SS, se incuban a 37C por 24 horas,
las colonias sospechosas de Salmonella se identifican con pruebas bioqumicas
convencionales. Las colonias son traslucidas





S. aureus
El S. aureus es un coco inmvil, de 0.8 a 1 micrmetro de dimetro, que se divide en tres
planos para formar grupos de clulas irregulares semejantes a racimos de uvas. Es un
microorganismo grampositivo
Su metabolismo es oxidativo/fermentativo y puede metabolizar una gran variedad de
carbohidratos en condiciones aerbicas, con la subsecuente liberacin de cido,
principalmente cido actico con pequeas cantidades de bixido de carbono; en
condiciones anaerobias, el producto principal de la fermentacin es el cido lctico.
Son capaces de fermentar la glucosa sin produccin de gases y producen acetil metil
carbinol. Son capaces de crecer en presencia de un 40% de bilis.
Su temperatura ptima de crecimiento va de 35 a 40 C y el pH ptimo oscila entre 7,0 y
7,5. Soportan tasas elevadas de cloruro sdico, hasta un 15%.
Se pueden aisar en medios selectivos como agar baird Parker y manitol salado.





salmonella
fuente de
energia
(quimica)
quimiotrofa
fuente de carbono
(ompuestos organicos)
quimioheterotrofa
aceptor final de
electrones
No O2
Fermentativa
acido y gas
Cop.
inorganicos
reduce nitratos
a nitritos
PROCEDIMIENTO
1. Aislamiento selectivo.
1. Pesar 10.0 g de muestra.
3. Adicionar 90.0 mL de agua peptonada estril al 0.1% y homogeneizar.
5. Realizar diluciones decimales hasta 10
-4
(el nmero de diluciones est en

funcin de la
procedencia de la muestra) en tubos conteniendo cada tubo 9.0 mL del mismo diluyente.

6. Transferir 0.1 mL de las diluciones 10
-1
, 10-
2
, 10
-3
y 10
-4
a cajas de Petri con agar
BairParker.
7. Extender el volumen inoculado a cada una de las cajas de Petri con una varilla de vidrio
estril, en forma de L, iniciando a partir de la mayor dilucin (Mtodo de inoculacin por
extensin en superficie).
8. Mantener las placas en su posicin hasta que el inculo sea absorbido por el agar,
entre 5 y 10 minutos aprox.
9. Invertir las placas e incubar a 35 1 C. durante 45 a 48 h.
10. Despus de incubar, observar las colonias caractersticas de este microorganismo en
el agar Baird Parker (BP). stas se presentan como: colonias negras, circulares,
brillantes, convexas, lisas con dimetro de 1 a 2 mm, muestran una zona circular opaca y
un halo claro alrededor de la colonia.




S. aureus
fuente de energia
(quimica)
quimitrofa
fuente de carbono
(ompuestos organicos)
quimioheterotrofa
aceptor final de
electrones
O2
carbohidratos
produce acido
acetico y CO2
No O2
Fermentativa
glucosa
acido lactico, acetil
metil carbinol
E. COLI
Enterobacteria que se encuentra generalmente en los intestinos animales, y por ende en las aguas
negras, pero se lo puede encontrar en todos lados, dado que es un organismo ubicuo
Es un bacilo que reacciona negativamente a la tincin de Gram (gramnegativo), es anaerobio
facultativo, mvil por flagelos peritricos (que rodean su cuerpo), no forma esporas, es capaz de
fermentar la glucosa y la lactosa
CARACTERSTICAS COLONIALES:
Las colonias de E. Coli en agar E.M.B. (eosina y azul de metileno)tienen 2 a 4 mm de dimetro, un
centro grande de color oscuro e incluso negro, y tienen brillo verde metlico cuando se observan
con luz refleja.
En agar MacConkey las colonias son rojas con halo turbio.








E. Coli
fuente de
energia
(quimica)
quimitrofa
fuente de carbono
(ompuestos
organicos)
quimioheterotrofa
aceptor final de
electrones
No O2
Fermentativa
glucosa y
lactosa
acido lactico,
CO2
Reduce
nitratos a
nitritos
Acetobacter
Acetobacter es un gnero de bacterias del cido actico caracterizado por su habilidad de
convertir el alcohol (etanol) en cido actico en presencia de aire. Grupo de bacilos gran negativos
mviles y aerbias estrictas que realizan oxidacin incompleta de alcoholes. Toleran una alta
acidez, la mayora de las cepas pueden crecer a pH inferior a 5.
Al microscopio se presentan como clulas cilndricas, parejas cortas y gruesas, alineadas en
cadenas.
Pueden distinguirse a estas bacterias en un laboratorio por el crecimiento de colonias en un medio
que contenga 7 % de etanol y suficiente carbonato de calcio para hacer al medio parcialmente
opaco. Cuando las colonias forman suficiente actico del etanol, el carbonato clcico (CaCO3)
alrededor de ellas se disuelve, formando una zona clara muy apreciable.






Acetobacter
fuente de
energia
(quimica)
quimitrof
a
fuente de carbono
(Compuestos
organicos)
quimioheterotrof
a
aceptor final
de electrones
O2
Oxida
OH
Acido
Acetico
PREPARACIN
DE LA MUESTRA
Primero se mezcla leche en polvo y agua esterilizada para obtener leche fluida y por otro lado se prepara el jarabe
mezclado azcar y agua.
Tanto la leche como el jarabe se pasteurizan para eliminar las bateras nocivas que se encuentran presentes en
ella, en este proceso se pasteurizacin los azucares que se encuentran en la leche se caramelizan, dando como
resultado el oscurecimiento de estos azucares, este proceso es el que le da al producto el color beige tan
caracterstico.
BIOREACCIN
La leche y el jarabe de azcar ya pasteurizada se mezcla y se trasporta a un tanque llamado tanque de
fermentacin, en este tanque la leche azucarada, se pone a una temperatura adecuada para llevar a cabo el
proceso de fermentacin, la temperatura ptima es de 35C y el pH de 6.5 para obtener la mxima produccin de
biomasa de LcS.
PURIFICASIN
Por otro lado en la plata de Yakult se fabrica el frasco que ya conocemos. Este est elaborado de un plstico
conocido como poliestireno, este plstico es seguro para contener el producto.
Cada frasco se llena con Yakult se tapa con una cubierta de aluminio termoadherente, estos frascos se va a la
mquina empacadora donde se preparan los paquetes de 3,5 y 50 frascos.
El producto se fra en el almacn a 7C, en cada etapa del proceso de produccin el laboratorio de Yakult realiza
anlisis para garantizar que el productos completo cumpla con los estndares de calidad.

BIOPROCESOS
PROCESO DE PRODUCCIN YAKULT



PROCESO DE PRODUCCIN YOGURTH



PREPARACIN
DE LA MUESTRA
Centrfuga: Elimina impurezas insolubles en la leche.
Pasteurizacin: Elimina microorganismos patogenos, principalmente Coxiella Burnetti, Brucella
Abortus, Escherichia Coli, Mycobacterium Tuberculosis, Salmonella Enterica, entre otras.
Inyeccin: Se inyectan dos bacterias lacticas conocidas como :
Steptococcus Termofilica.
Lactobacilo Bulgaris.
BIOREACCIN
Los cultivos de steptococus termoflica y el lactobacilo bulgaris, que crecen en un ambiente controlado son
injertados dentro de la leche esterilizada y luego pasan a los tanques de fermentacin (2,500 litros) donde
son fermentados a una temperatura de 40C por 30 horas, en donde se nutren de lactosa y la transforman
en cido lctico. Al coagular las protenas de la leche en pequesimos copos, el lquido se transforma en
crema.
PURIFICASIN
Para el tratamiento del producto y que no contenga bacterias vivas:
Se realiza la termizacin de las Bacterias lcticas Enseguida el enfriamiento y el envasado. Listo para su
distribucin.
La termizacin destruye las bacterias del yogurt por lo que se evita una postacidificacin. De esta manera
puede guardarse el producto a temperatura ambiente.

BIBLIOGRAFA:
XIX Muestra estudiantil, trabajos acadmicos de estudiantes y tesistas de la
carrera de Qumico Bilogo 29 y 30 de Noviembre de 2012.
[Link]
M. ngeles Sanromn, Diego Moldes, Mara A. Longo, Marta M Pazos. UNA
NUEVA HERRAMIENTA PARA LA ENSEANZA DE LA INGENIERA DE
PROCESOS: ARTCULOS CIENTFICOS. Xornada de Innovacin Educativa
2011.
[Link]
[Link]
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[Link]
B3n+de+las+Bacterias&source=bl&ots=en3PtDXFfP&sig=1RSyvPCcGm2sbzBoE1MUH9lghvY&hl=es
-419&sa=X&ei=GTFyU8X5H4v5oAS2-
YCYBA&ved=0CEMQ6AEwBQ#v=onepage&q=termizaci%C3%B3n%20de%20las%20Bacterias&f=fal
se
[Link]
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