HBsAg ELISA
Ensayo inmunoenzimtico (ELISA) para la deteccin del antgeno de superficie del virus de la hepatitis B (HBsAg)
Lnea Inmunologa
Caractersticas del mtodo Ensayo inmunomtrico tipo Sndwich
inmunologa
Sencillez y rapidez operativa Apto para automatizacin
automatizable
Tiras recortables individualmente Reactivos coloreados para control del proceso Solucin lavadora intercambiable con los dems productos de la nueva linea ELISA.
simple y preciso
Excelente sensibilidad, especicidad y precisin 120 minutos de incubacin total Anticuerpos policlonales Anti-HBsAg
reaccin:120
Asistencia Bioqumica WL
www.wiener-lab.com.ar
Producido en Argentina
Lnea Inmunologa
HBsAg ELISA
Producto
Cdigo
Presentacin 96 determinaciones
Ensayo inmunoenzimtico (ELISA) para la deteccin del antgeno de supercie del virus de la hepatitis B (HBsAg)
HBsAg ELISA 1483254
Fundamento del mtodo: HBsAg ELISA es un metodo inmunoenzimatico directo tipo sandwich. Los pocillos de la policubeta estan recubiertos con anticuerpo de cobayo anti-HBs (anti-HBsAg) que actua como anticuerpo de captura. La muestra se incuba en uno de los pocillos. Si la misma contiene HBsAg, este formara un complejo con el anticuerpo unido a la placa. El material no unido se elimina por lavado. En el siguiente paso se agrega el anticuerpo de cabra anti-HBs conjugado con peroxidasa, que se unira con los complejos anticuerpoantigeno formados previamente. El conjugado no unido se remueve por lavado. Posteriormente se agrega una solucion conteniendo tetrametilbencidina y peroxido de hidrogeno. En los casos en que el HBsAg este presente en la muestra, se desarrolla color celeste que vira al amarillo cuando se detiene la reaccion con acido sulfurico. Caractersticas especificas de performance Sensibilidad poblacional Evaluadas 122 muestras con infeccin por HBV conteniendo HBsAg conrmada por diferentes mtodos, la sensibilidad fue 100%. Sensibilidad clnica en paneles de performance En un estudio realizado sobre diferentes paneles comerciales internacionales, se obtuvieron los siguientes resultados:
Tabla 1 Panel PHA105 PHA106M PHA204 PHA205 PHA206 Muestras reactivas 14 12 23 23 23 Muestras detectadas 13 11 22 23 20
ciales internacionales de seroconversin de BBI (USA):
inmunologa automatizable
Tabla 2 Panel PHM917 PHM920 PHM927 PHM928 PHM930 PHM933M PHM934 Nmero de HBsAg muestras ELISA* 3 6 6 7 5 5 6 1 (43) 4 (26) 4 (7) 3 (14) 4 (3) 4 (7) 5 (3) Subtipo
indeterminado
simple y preciso
reaccin:120
Diagrama de reaccin
Muestras y Controles 100L Incubacin: 60 min 37C
ad
indeterminado
ad ad ad ad
Conjugado (1/51) 100L
Lavar 5 ciclos 350L / pocilo / ciclo
Incubacin: 30 min 37C
*Se indica el nmero de muestras reactivas con el ELISA. El nmero entre parntesis indica el nmero de das entre el sangrado inicial y la primera muestra reactiva.
Lavar 5 ciclos 350L/ pocilo / ciclo TMB (1/100) 100L Incubacin: 30 min TA OSCURIDAD
Sensibilidad analtica (Lmite de deteccin inferior) Ha sido calculada con las siguientes preparaciones internacionales: - Second International Standard for HBsAg, subtype adw2, genoptype A. NIBSC cdigo 00/588: Diluido en suero humano negativo para HBsAg y anti-HBs, se detect hasta 0,10 UI/ml. - Estndares para HBsAg subtipos ad y ay provistos por el Paul Erlich Institute (a partir de preparaciones de 100 U/ml y 50000 U/ml, respectivamente): Diluidos en suero bovino se detect hasta la dilucin 0,063 U/ml del subtipo ad y hasta la dilucin 0,12 U/ml del subtipo ay. - Hepatitis B Surface Antigen Sensitivity Panel PHA808, BBI, USA: Se detectaron las muestras 1-8 (hasta 0,06 UI/ml del subtipo ad), y 11-17 (hasta 0,09 UI/ml del subtipo ay). Especificidad poblacional En 685 muestras de sueros y plasmas de diferentes centros de salud: 100 % (IC95%: 99,93-100). En 1134 muestras de plasmas de banco de sangre: 99,82 % (IC95%: 99,54-100). En 1256 muestras de plasma de dos centros de salud: 99,68 % (IC95%: 99,33-100).
Tabla 3 Muestra 1 Muestra 2 Muestra 3 Control Positivo Control Negativo Media de absorbancia 0,277 0,930 1,171 1,880 0,026
Muestra REACTIVA Stopper 100L
Muestra NO REACTIVA
Leer en modo BICROMATICO 450/620-650nm
En 364 individuos propensos a producir reacciones inespeccas (embarazadas, hemodializados y pacientes con enfermedades autoinmunes o infecciones no debidas a HBV): 99,73 % (IC95%: 99,05-100). Precisin Se evalu la precisin de la prueba siguiendo el protocolo EP5-A recomendado por la NCCLS. Los ensayos fueron realizados con muestras de diferentes niveles de reactividad en el HBsAg ELISA y con los controles. Se realizaron 2 ensayos diarios evaluando cada muestra por duplicado y por el transcurso de 20 das.
PHA105, y PHA106M (HBsAg Low Titer Performance Panels, BBI, USA). PHA204, PHA205, y PHA206 (HBsAg Mixed Titer Performance Panels, BBI, USA).
S 0,012 0,031 0,050 0,068 0,002
CV 4,44% 3,32% 4,30% 3,62% 8,53%
S 0,032 0,113 0,117 0,146 0,004
CV 11,44% 12,11% 10,02% 7,79% 16,83%
S: desviacin estndar, CV: coeciente de variacin n= 80
Wiener Laboratorios S.A.I.C Riobamba 2944, S2003GSD Rosario, Argentina Tel.: +54 341 4329191/6 [email protected] - www.wiener-lab.com.ar
Industria Argetina - Cod 2074
Sensibilidad en paneles de seroconversin Los paneles de seroconversin son muestras de plasma recolectadas de un solo donante durante el desarrollo de una infeccin viral y la respuesta inmune subsiguiente. Estos paneles son utilizados para evaluar la precocidad de deteccin de un equipo o metodologa diagnstica en un paciente recientemente infectado. Un reactivo ser ms precoz en su deteccin cuanto menor sea en nmero de extraccin en la que su resultado sea positivo. Se evaluaron los siguientes paneles comer-
Intra-ensayo
Total
