Apellidos: Lara Tineo
Nombres: Yorvi
Escuela: Ing. Agrnoma
Ciclo: IV
Curso: microbiologa aplicada
Tema N3: diferenciacin bioqumica
Pruebas de diferenciacin bioqumica
Introduccin
El metabolismo, es toda la serie de reacciones que ocurren en los seres vivos. Estas reacciones incluyen procesos de obtencin de energa como son: la descomposicin de molculas orgnicas en los quimitrofos (catabolismo) o la captacin de luz para el caso de los fotgrafos, as como de sntesis de material celular a partir de nutrientes esenciales (anabolismo). En el laboratorio, es posible conocer las caractersticas metablicas de los microorganismos, inoculndolos en diferentes medios de cultivo, con sustratos que pueden utilizar como fuente de energa, fuente de carbono y de otros nutrientes esenciales para su crecimiento. La mayora de microorganismos, utilizan la glucosa como fuente de carbono y energa. Al entrar a la clula, la glucosa ser oxidada en forma incompleta (fermentacin) o completa (respiracin) dependiendo de la presencia de oxgeno y de las capacidades enzimticas de los microorganismos.
Objetivo
Que el alumno realice algunas pruebas bioqumicas en medios de cultivo con sustratos especficos que permitirn demostrar actividades metablicas de bacterias y levaduras. Que el estudiante comprenda la importancia de las pruebas bioqumicas para la caracterizacin e identificacin de estos microorganismos.
Materiales
1 Gradilla 1 Probeta de 100 mL. 1 Mechero 1 Asa de siembra 1 tubo con 7 mL de medio TSI (triple azcar hierro) solidificados en forma inclinada 1 tubo con 7 mL medio de citrato de Simmons solidificados en forma inclinada 1 tubo con 7 mL de medio LIA (Agar lisina Hierro) solidificados en forma inclinada
Procedimiento
El profesor proporcionar cultivos puros de Escherichia coli, Enterobacter sp. Bacillus y Vibrio. A cada uno de los equipos, les corresponder tambin un cultivo problema. Todos los tubos y cajas debern etiquetarse e inocularse de acuerdo a las siguientes instrucciones
Desinfectar la mesa con alcohol para el trabajo que vamos a realizar Encender el mechero y colocar el asa hasta el rojo vivo para una buena esterilizacin. Despus destapar una sepa para sacar una pequea muestra. Tapar correctamente la sepa usada para una buena conservacin. Destapar los cultivos para colocar la muestra de la sepa. colocar en el mechero para su uso posteriormente. Realizar estos mismos pasos establecidos para los siguiente cultivos con las sepas. Colocar en la gradilla, para posteriormente llevar a encubar a 35C durante 48 horas. Puedes esperar los resultados que vamos a obtener.
Resultados:
Medio de cultivo Medio Tsi
Crecimiento excelente
Columna vertebral Amarrillo y Negro
INCLINADOS Rojo
Medio de citrato de Simmons
excelente
Amarrillo
Amarrillo
Salmonella
excelente
Amarrillo y
Amarillo
Conclusiones:
Las pruebas bioqumicas convencionales, generalmente determinan la actividad de una va metablica, por reacciones qumicas. A partir de las pruebas bioqumicas de identificacin bacteriana y, los resultados obtenidos, y mediante estndares establecidos, podemos conocer qu bacteria tenemos en una muestra.
Son funciones especficas del metabolismo: Obtencin de energa para los procesos celulares. Conversin de los compuestos nutritivos en precursores de los componentes celulares. Organizacin de esas macromolculas en polmeros. Formacin y degradacin de las biomolculas necesarias para las funciones especializadas de la clula.
Anexos:
BACILLUS
VIBRIO CHOLERAE
ENTEROBACTER
CULTIVOS EN LA GRADILLA PARA SER SOMETIDO EN LA INCUBADORA
ESTERILIZANDO PARA SACAR LA MUESTRA
COLOCANDO LOS CULTIVOS PARA ENCUBAR 2 DAS
