ANLISIS INSTRUMENTALES

TEMARIO
I.- Colorimetra y 1.1.- Instrumentacin y absorcin ultravioleta y visible
Espectrofotometra 1.2.- Leyes fundamentales de la fotometra
1.3.- Aplicacin de las leyes fotomtricas al anlisis cuantitativo
II.- Fluorescencia de 2.1.- Unidades instrumentales
Rayos X 2.2.- Principio del anlisis por fluorescencia de rayos X
2.3.- Aplicaciones analticas
III.- Absorcin Atmica3.1.- Principios tericos
3.2.- Instrumentacin
3.3.- Mtodos de evaluacin
IV.- Espectroscopia de 4.1.- Origen de los espectros
Emisin 4.2.- Mtodos de excitacin
4.3.- Instrumentacin
4.4.- Anlisis cualitativos y cuantitativos
V.- Espectroscopia de 5.1.- Principios tericos
Masas 5.2.- Componentes del espectrmetro de masas
5.3.- Espectrmetro de masas
5.4.- Aplicacin
VI.- Anlisis Trmico 6.1.- Anlisis trmico diferencial y calometra de exploracin
6.2.- Anlisis termogravimtrico
6.3.- Instrumentacin
6.4.- Anlisis termomecnico
6.5.- Otras aplicaciones
VII.- Cromatografa 7.1.- Separacin cromatogrfica
7.2.- Cromatgrafos
7.3.- Aplicaciones
VIII.- Gasometra y 8.1.- Anlisis de gases por absorcin
Determinacin en N
2
, 8.2.- Determinadores de carbono y azufre
H
2
, O
2
C y S 8.3.- Determinacin de nitrgeno, hidrgeno y oxgeno
IX.- Introduccin a los 9.1.- pH y potenciometra
Mtodos Electrmetricos 9.2.- Conductimetra
de Anlisis 9.3.- Amperometra y voltametra
BIBLIOGRAFA
1.- Willard- Merrit et all, Mtodos Instrumentales de Anlisis, Edit. CECSA
2.- Skoog-West, Anlisis Instrumental, Edit. Mc Graw Hill
3.- Silverstein-Bassler , Spectrometric Identification of Organic Compounds
4.- Moore-Dalrymple , Experimental Methods in Organic Chemistry
5.- Pecson-Shields, Modern Methods of Chemical Analysis, Edit. Wiley and Sons
6.- Cullity, X-Ray Diffraction, Edit. Wiley and Sons
7.- Mc Nair-Bonelli, Varian Aerograph, Basic Gas Chromatography, Consolidated Printers
QUMICA ANALTICA
UNIDADES DE APRENDIZAJE
UNIDAD I COLORIMETRA Y ESPECTROFOTOMETRA
OBJETIVO EDUCACIONAL ACTIVIDADES DE
APRENDIZAJE
Comprender las bases tericas de la colorimetra y
espectrometra as como sus limitaciones y aplicaciones
Analizar cmo se deben llevar a
cabo las titulaciones
fotomtricas as como las curvas
de titulacin
Discutir los tipos de
instrumentos de reflectancia
Entender las caractersticas
estructurales de estos aparatos
Analizar las desviaciones con
respecto a la ley de Beer
Conocer los parmetros
instrumentales que afectan a la
exactitud fotomtrica, asd como
la precisin y los errores
relativos a la concentracin
Discutir los tipos de disolventes
y la longitud de onda analtica
que se precisan en cada caso
dependiendo de la muestra que
se va a analizar
UNIDAD II
FLUORESCENCIA DE RAYOS X
OBJETIVO EDUCACIONAL ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE
Conocer los principios para la produccin de
fluorescencia de rayos X, las unidades instrumentales
y las aplicaciones de esta tcnica
Analizar cmo se producen los rayos X y cul es
su principio
Conocer el proceso de excitacin de los espectros
caractersticos por bombardeo con electrones
Conocer cmo se deben preparar las muestras para
poder ser analizadas por este mtodo
Investigar las longitudes de onda que deben
utilizarse en cada uno de los elementos que se va a
analizar
UNIDAD III ABSORCIN ATMICA
OBJETIVO EDUCACIONAL ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE
Comprender el principio de la espectrometra de
emisin de flama y de absorcin atmica, conocer las
partes fsicas de los equipos y los mtodos de
interpretacin de los resultados
Comprender en que consiste la nebulizacin y las
desventajas de la atomizacin en flamas
Conocer qu tipos de quemadores se utilizan, cmo
funcionan los reguladores de presin y los
medidores de flujo
Investigar qu tipos de interferencias se pueden
presentar y cules son las causas para evitarlas y
as tener un mejor funcionamiento del aparato
UNIDAD IV ESPECTROSCOPA DE EMISIN
OBJETIVO EDUCACIONAL ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE
Comprender los fundamentos en los cuales se basan
los espectrmetros de emisin, as como sus
aplicaciones y limitaciones
Discutir en qu consiste el arco de corriente
directa, arco de corriente alterna, microondas,
fuentes de emisin de plasma, plasma de argn,
acoplado inductivamente, plasma de argn de
corriente directa. Chapa de alto voltaje y corriente
alterna
Discutir cmo funciona un rayo lsser y cmo se
descompone un haz de luz
Estudiar la longitud de onda de los diferentes
elementos para su mejor deteccin por ste mtodo
Comprender el funcionamiento de los
espectrmetros de rejilla cncava, de rejilla plana y
de rejilla de escalera prisma
Discutir cmo funcionan los materiales
fotogrficos en los espectrmetros
Analizar la variedad de fuentes que pueden
seleccionarse para los requerimientos analticos
UNIDAD V ESPECTROMETRA DE MASAS
OBJETIVO EDUCACIONAL ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE
Conocer los principios fundamentales de la
espectrometra de masas y sus aplicaciones, as como
las partes que constituyen un espectrmetro de masas
Conocer las teoras atmicas as como la
configuracin electrnica de los elementos que se
desean analizar
Analizar las caractersticas de los compuestos
incluyendo las modificaciones ismeras
Discutir los diferentes diseos de espectrmetro y
saber cules se prestan en la resolucin de
determinados problemas analticos
Conocer qu elementos se pueden analizar en
modelos especficos de este aparato
Conocer cmo es el sistema de alimentacin de la
muestra, las fuentes de ionizacin, las diferentes
formas de ionizacin y los sistemas colectores de
iones
Conocer en qu forma se procesan los datos para
obtener el resultado del anlisis
Discutir en qu estado fsico y grado de fuerza
debe prepararse la muestra para emplearla en el
anlisis cuantitativo
Investigar los tipos de interferencia que se pueden
presentar en este tipo de aparatos
UNIDAD VI ANLISIS TRMICO
OBJETIVO EDUCACIONAL ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE
Comprender los fundamentos, aplicaciones y Explicar la influencia de la temperatura de los
limitaciones de los mtodos de anlisis trmico diferentes elementos que se desean analizar
Explicar la relacin del anlisis trmico con la
calorimetra de exploracin diferencial combinada
con anlisis termomecnicos y modelos de
difraccin de rayos X
Investigar en qu consiste el anlisis gravimtrico
y en qu casos se puede utilizar este mtodo
Analizar y conocer los tipos de aparatos que se
pueden utilizar, cmo estn conformados y saber
para qu sirve cada componente del aparato
Discutir en qu consisten las mediciones de
penetracin
Discutir en qu consiste la volumetra
termomtrica, determinacin de la estequiometra
de una reaccin y la determinacin de las
cantidades termodinmicas AG, AH y AS
UNIDAD VII CROMATOGRAFA
OBJETIVO EDUCACIONAL ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE
Comprender los principios qumicos y fsicos de la
cromatografa, conocer los diferentes tipos de cromatografa y
analizar los resultados obtenidos
Conocer en qu consiste la cromatografa por columna y cul
es la fase mvil para este tipo de aparatos
Conocer cmo funcionan los cromatgrafos y para qu
elementos se pueden utilizar cada uno de los cromatgrafos,
por ejemplo, el detector fotomtrico de flama, el detector de
captura de electrones, detector de helio, el detector de
fotoionizacin, etc
Discutir cmo podemos aplicar la cromatografa en el anlisis
cuantitativo y en qu elementos
UNIDAD VIII GASOMETRA Y DETERMINACIN EN NITRGENO, OXGENO, CARBN, AZUFRE
OBJETIVO EDUCACIONAL ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE
Comprender los fundamentos tericos y de operacin de los
diferentes mtodos de anlisis de gases as como su aplicacin y
limitaciones
Discutir el funcionamiento y las partes de qu consta un
cromatogrfo y cmo se prepara la muestra para su anlisis
Analizar los diferentes equipos de anlisis de gases, sus
aplicaciones y preparacin de muestras
UNIDAD IX INTRODUCCIN A LOS MTODOS ELECTROMTRICOS DE ANLISIS
OBJETIVO EDUCACIONAL ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE
Conocer y discriminar los fundamentos del uso de los mtodos
electromtricos para el anlisis qumico, su utilidad y limitaciones
Comprender en qu consiste el potencial de hidrgeno y cmo
puede servir de base para el mtodo potenciomtrico
Discutir cmo se prepara la muestra para este tipo de aparatos
y cmo se preparan las soluciones patrn
Conocer y discutir para qu nos sirve cada uno de estos
mtodos y cules son los principios generales de cada uno de
ellos
ESPECTROMETRA DE
ULTRAVIOLETA Y RADIACIN
VISIBLE-INSTRUMENTACIN
Se debe disponer de una fuente de radiacin, con requisitos propios para cada regin espectral.
Todos los espectrofotmetros poseen alguna forma de descriminar entre las diferentes
frecuencias de radiacin mediante el uso de filtros, prismas o redes de difraccin. Los mtodos
no dispersivos, como los de transformada de Fourier, no se utilizan en las regiones visible y
ultravioleta, aunque actualmente existen algunos instrumentos accesibles para estas regiones.
Puesto que los mtodos de transformada de Fourier son ampliamente utilizados para la regin
infrarroja.
La muestra absorbe una porcin de la radiacin incidente; el resto de ella es transmitida hasta un
detector, en donde se transforma en una seal elctrica y se visualiza, generalmente despus de
ser amplificada, en un medidor, un registrador en papel o algn otro tipo de dispositivo de
lectura.
FUENTES DE RADIACIN
Las fuentes de radiacin para la espectrofotometra de absorcin poseen dos condiciones
bsicas. Primeramente deben proporcionar la suficiente energa radiante a lo largo de toda la
regin de longitudes de onda en la que se medir la absorcin. Y segundo, deben mantener una
intensidad constante por encima del intervalo de tiempo durante el que se realicen las medidas.
Si la intensidad es baja en la regin donde se determina la absorcin, el intervalo de longitudes
de onda que pasa a travs de la muestra, debe ser relativamente amplio, a fin de obtener el
rendimiento necesario de energa. Esta amplia variedad de longitudes de onda puede producir
errores en las mediciones de absortividad. Generalmente, en las regiones ultravioleta y visible
del espectro, la intensidad de las fuentes no constituye un problema. Pero para consideraciones
de diseo, se debe recordar que la densidad de flujo radiacional (en J/cm
2
) vara con el cuadrado
de la distancia desde la fuente para hace; no colimados y no enfocados.
Las fuentes lser no son utilizadas en instrumentos comerciales para cubrir estas regiones ya
que son costosas y cualquiera de ellas, aun las fuentes de tinte ajustable, cubren solamente un
intervalo limitado de longitudes de onda.
Lmparas de descarga de Hidrgeno o de Deuterio
Los trabajos en las regiones de ultravioleta se realizan principalmente con lmparas de descarga
de hidrgeno o de deuterio operadas a bajas presiones y bajo voltaje. Los ctodos calientes
realizan la funcin esencial de mantener la descarga, la cual tiene una caracterstica negativa de
temperatura en funcin de resistencia, de modo que se requiere una fuente de corriente regulada
para su operacin. Uno de los aspectos vitales de estas lmparas se encuentra en el claro entre el
ctodo y el nodo, el cual reduce la descarga a una ruta estrecha. Normalmente el nodo se
dispone cerca de la salida de la fuente, con lo que se crea una intensa bola de radiado cerca de
0.6-1.5 mm del lado catdico de la salida. El uso de deuterio en vez de hidrgeno aumenta
ligeramente el tamao de sta bola radiante pero intensifica el brillo, o sea luminancia (en
candelas por unidad de rea) de tres a cinco veces.
Lmparas de Filamento Incandescente
Las mediciones arriba de 350 nm hasta el infrarrojo generalmente se realizan con lmparas de
filamento incandescente que dan un espectro continuo en todo e intervalo. En esas lmparas se
calienta un filamento de alambre, generalmente de tungsteno, hasta la incandescencia por medio
de corriente elctrica. El filamento se encuentra en un bulbo de vidrio hermticamente sellado al
vaco o con gas inerte. Los filamento generalmente se enrollan para aumentar su emisividad,
eficacia y luminancia media. Las lmparas incandescentes son unidades robustas, de bajo costo
y lo suficientemente brillantes para casi todos los trabajos de absorcin en las regiones visible y
del ultravioleta cercanos.
Las lmparas de tungsteno y halgeno representan una clase especial de lmparas
incandescentes que contienen yodo aadido a los gases normales de relleno.
La distribucin espectral de un filamento incandescente es, bsicamente, la de un radiador de
cuerpo negro. De aqu que mediciones muy lejanas de la longitud de onda de pico sean
susceptibles a los efectos de la luz difusa debido a la gran intensidad de la radiacin de otra
longitud de onda. La lmpara de tungsteno emite mucha de su energa en el infrarrojo cercano,
con un mximo en 1000 nm, y cae rpidamente en la regin ultravioleta a 1/100 de ese valor, a
300 nm. Slo 15% de la energa radiante cae en la regin visible cuando se utiliza una lmpara a
la temperatura de color aparente (o sea aquella a la cual la radiacin obtenida es igual a la de un
cuerpo negro perfecto) de 2850 K). A menudo se inserta un filtro endotrmico o un espejo
dicroico fro (un divisor de haz de interferencia de multicapas que transmite radiaciones de
longitudes de onda grandes y refleja las radiaciones de longitudes de onda cortas) entre la
lmpara y el portamuestra para eliminar la radiacin infrarroja sin disminuir notablemente la
energa radiante de menor longitud de onda. Las cubiertas de vidrio absorben fuertemente por
debajo de 350 nm. Las lmparas incandescentes son fuentes muy importantes para aplicaciones
espectromtricas debido a su excelente estabilidad, ms que debido a su radiancia espectral.
Estabilidad de las fuentes
Se requiere una gran estabilidad a corto plazo en las fuentes incandescentes o de descarga para
los espectrofotmetros de un solo haz. La intensidad de la radiacin de una fuente incandescente
o de descarga es proporcional al voltaje de la lmpara elevado a una potencia superior a la
unidad (de tres o cuatro para las lmparas incandescentes). A fin de estabilizar la corriente
fotoelctrica dentro de 0.2%, que representa la precisin espectrofotomtrica asequible, el
voltaje de las fuentes para las lmparas incandescentes se debe regular dentro de unos cuantos
miles de volts. La estabilidad de la fuente se logra utilizando transformadores de voltaje
constante y reguladores de potencial electrnicos.
Colocando un segundo detector en la ruta ptica y muestreando una porcin de la energa
radiante, puede utilizarse la seal observada para corregir la salida de la lmpara. Esto se logra
retroalimentando la seal a una fuente de energa programable y as aumentar o disminuir la
corriente de salida, como se requiera. De esta forma se pueden reducir las ondulaciones pticas
hasta 0.1 % de pico a pico en un plazo corto. Este orden de estabilidad resulta imposible de
lograr cuando se utilizan lmparas de descarga de gas o de arco.
Formas de Operacin por Modulacin o Pulsacin
Con el uso de ciclos de retroalimentacin es posible modular o pulsar las fuentes de potencia de
las lmparas. La modulacin con una fuente de voltaje externo permite programar el sistema de
la lmpara para que siga una funcin senoidal, cuadrtica o de rampa dentro de los lmites
establecidos para los parmetros de operacin de las diferentes lmparas. Utilizando la
retroalimentacin ptica y la modulacin externa, es posible obtener muy poca distorsin en la
seal ptica. Puesto que la fuente se ha incorporado a la ruta de retroalimentacin total, se podr
compensar cualquier no linealidad en las caractersticas d la lmpara. Estos niveles tan bajos de
distorsin son casi imposibles de lograr si se utilizan obturadores mecnicos {choppers) debido
a los requisitos exactos en la forma de apertura del obturador o cortador con respecto a la
geometra del haz.
A diferencia de la modulacin, la operacin pulsante consiste en aumentar las condiciones de
operacin de una lmpara por arriba de sus condiciones normales. La corriente base se establece
inicialmente en un valor bajo y, durante el pulso, esta corriente se incrementa rpidamente por
encima de las condiciones normales de operacin de la lmpara, con lo que resulta una salida
ptica muchas veces superior a la alcanzable en condiciones normales. El mayor incremento se
observa en la regin del ultravioleta, mientras que en el infrarrojo su efecto es el menor. La
duracin mnima del pulso es de 300 pis; el pulso mximo puede ser de varios segundos o
mayor, dependiendo del tipo de lmpara utilizada. Como consecuencia, ambos mtodos de
modulacin o de pulsacin conducen a una disminucin en la vida o duracin de las lmparas.
SELECCIN DE LA LONGITUD DE ONDA
Los mtodos espectrofotomtricos generalmente requieren el aislamiento de bandas discretas de
radiacin. La ley de Beer, que es la base de todos los trabajos cuantitativos, presume el uso de
radiaciones monocromticas. Adicionalmente, en el modo de operacin de emisin, se deber
seleccionar la razn de seales ms favorables entre el fondo y las lneas de emisin analticas.
Para aislar una banda estrecha de longitudes de onda, se utilizan filtros, monocromadores o
ambos. En la actualidad, algunos mtodos no dispersivos, particularmente los de tranformadas
de Fourier, estn cobrando importancia. Como ya antes se mencion, esos mtodos se utilizan
comnmente en otras regiones del espectro, en especial en el infrarrojo.
Filtros
Los filtros proporcionan alto rendimiento de radiacin, con una eficiencia aproximada de 50% a
80%. El montaje de los instrumentos de filtro es relativamente fcil para, quiz, hasta cinco
longitudes de onda. El paso de banda, o sea el intervalo total de longitudes de onda transmitidas
cuando se utilizan filtros de interferencia, puede ser igual al que se obtiene con montajes de
redes de 0.25 m.
Filtros de absorcin
En estos filtros los efectos se derivan de las interacciones totales de la radiacin con el material.
Algunos tipos se basan en dispersiones selectivas y en otros predomina la absorcin
verdaderamente inica. La transmisin de radiacin es una funcin que decrece uniformemente
con el espesor y se describe por la ley exponencial de la absorcin.
Los filtros de absorcin se fabrican en una gran variedad de materiales base como: gelati na,
vidrio, lquidos y materiales plsticos. Los filtros de vidrio son ampliamente utilizados en los
equipos automticos de anlisis qumico y en colorimetra. Los de tipo dispersivo dependen de
los cristales de dispersin que se forman dentro de la masa de vidrio, mediante tratamientos
reductivos y trmicos. Las longitudes de onda ms cortas se dispersan y absor ben en el material,
mientras que las longitudes de onda mayores resultan inafectadas. Los otros filtros del tipo de
absorcin alcanzan su efectividad a travs de la absorcin de bandas especficas de radiacin
mediante iones o molculas contenidas en disoluciones verdaderas. Los filtros de corte y los de
corte agudo son ampliamente utilizados como filtros de bloqueo para suprimir algunas rdenes
espectrales indeseables, que resultan de los filtros de interferencia o de las redes de difraccin.
Unos filtros de corte agudo permiten el paso de longitudes de onda grandes, o sea las series roja
y amarilla. Otros filtros son para longitudes de onda grandes y permiten el paso de las series
azul y verde. Los filtros de absorcin de vidrio combinados se construyen con dos filtros de
corte agudo. La separacin espectral entre el 50% de los puntos de corte y de corte agudo en la
curva de transmitancia contra longitud de onda, vara de 20 a 70 nm. Este intervalo de
longitudes de onda transmitidas por el filtro, se conoce como anchura de banda o la amplitud
total.
Existe una gran variedad de filtros de plstico, de corte agudo y del tipo de anchura de banda
intermedia, y se pueden obtener introduciendo colorantes directamente en la masa o por
tratamiento superficial con colorantes sobre una base clara de polmero. Los filtros de tipo de
corte, a diferencia de su contrapartes en vidrio, no exhiben fluorescencia en la regin visible del
espectro.
Filtros de interferencia
Como su nombre lo indica, estos filtros se basan en el fenmeno de interferencia ptica. Un
filtro simple de interficie doble (tipo Fabry-Perot) consiste en una pelcula espaciadora
dielctrica insertada entre dos pelculas paralelas de metal parcialmente reflejante, generalmente
plata. El espesor de la pelcula dielctrica es controlado para tener solamente una, dos o tres
medias ondas y se denominan como filtros de primero, segundo o tercer orden, respectivamente.
Una parte de la radiacin normal incidente llega al filtro (haz 1) y pasa a travs (haz 2), mientras
que otra parte (haz 3) es reflejada desde la superficie B hasta la superficie A. Otra porcin de
esta radiacin nuevamente es reflejada desde la superficie A, pasando por la superficie
dielctrica y sale del filtro como haz 4, que resulta paralelo (y coincidente) con el haz 2. De esta
manera, la distancia recorrida por el haz 4 es mayor que la correspondiente al haz 2 en el doble
del producto del espesor dielctrico y de su ndice de refraccin. Cuando el espesor de la capa b
es la mitad de la longitud de onda de la radiacin a transmitir dentro del ndice de refraccin y
del medio dielctrico, los haces 2 y 4 se encontrarn en fase y se interferirn constructivamente.
La expresin para las longitudes de onda centrales en las que ocurrir el refuerzo total es:
En donde m es el nmero de orden. Puesto que para otras diferencias en las trayectorias slo
ocurre un refuerzo parcial, el filtro transmite nicamente una banda de energa radiante. Aun
ms, el ngulo de incidencia de la radiacin debe ser de 90. Cualquier desplazamiento de la
fase de reflexin ser ignorado. Para este tipo de filtros, la anchura de banda es de 10-15 nm, o
sea el ancho total a la mitad del mximo (FWHM) y la transmisin mxima generalmente
alcanza el 40%.
La transmisin de bandas no deseadas se puede eliminar usando los filtros apropiados de corte o
de corte agudo, como los que se incluyen en una de las cubiertas de vidrio protectoras. Un filtro
de bloqueo excelente es uno de interferencia cuyo primer orden se ajusta a la banda deseada,
cuando se utilizan las longitudes de onda centrales de rdenes mayores del filtro primario. Las
bandas de segundo y tercer orden son ms estrechas, y muchos filtros de interferencia se
disponen para transmitir slo una de ellas. Sin embargo, a medida que se incrementa el orden
del filtro, el paso de banda y la anchura de sta se acortan. La transmisin de radiacin en los
filtros del tipo Fabry-Perot es de 10 a 100 veces superior a las obtenidas con monocromadores
con anchura de banda equivalente. La longitud de onda del centro de la banda, o sea la longitud
de onda nominal, vara con la temperatura del filtro y con el ngulo de incidencia de la
radiacin por filtrar. La transmisin de la banda se desplaza a mayores longitudes de onda,
cuando se aumenta la temperatura en la mayora de los filtros. En el espectro visible, este
desplazamiento es aproximadamente 0.01 nm/C. Al aumentar el ngulo de incidencia, la
longitud de onda del centro de la banda se desplaza hacia longitudes de onda ms cortas.
Un filtro de cua consiste en una pieza cuneiforme de material dielctrico depositada entre un
par de capas metlicas semirreflejantes, con lo que se obtiene una interferencia de transmisin
continuamente variable. En cada punto a lo largo del filtro se transmite una longitud de onda
diferente debido a los cambios de espesor. Las diferentes longitudes de onda se seleccionan
moviendo la cua con respecto a una rendija fija, o moviendo la rendija a lo largo del filtro.
Tambin se puede construir un filtro de cua circular y utilizarse para barrer continuamente las
diferentes longitudes de onda y hacerlas pasar a travs del conjunto de la rendija.
Al reemplazar las pelculas metlicas por pilas de pelculas totalmente dielctricas, como se
hace en los filtros de multicapas, se logra un funcionamiento altamente mejorado. Puesto que la
absorcin en las capas dielctricas es casi nula, se produce una considerable variedad de
anchuras de banda, manteniendo una alta transmisin a la vez que un bajo fondo. La pila
reflejante de pelculas es comprimida entre capas alternas de pelculas con alto y bajo ndice de
refraccin, cada una con un espesor ptico de un cuarto de onda. Cuando un tren de ondas choca
contra ese recubrimiento ptico, el haz se divide en cada interficie pelicular en una serie de
componentes reflejados y transmitidos. A medida que las longitudes de onda se alejan de la
banda central, en cualquier direccin, rpidamente las capas dielctricas dejan de considerarse
con un espesor de un cuarto de la longitud de onda deseada y ocurre transmisin general. Esas
"alas" de transmisin deben eliminarse por encima de la regin espectral cubierta por el
detector, utilizando filtros de bloqueo auxiliar insertados separadamente en el filtro o, ms
directamente, como substrato de la multicapa.
Se han desarrollado diseos de capas extremadamente complejos, que contienen de 5 a 25
capas, y actualmente se desarrollan filtros de este tipo con anchuras de banda inferiores a 0.1
nm para regiones particulares de longitud de onda (generalmente es de 1 a 5 nm) y con una
transmisin de fondo interior a 10-
6
. Es comn el uso de filtros totalmente bloqueados con
transmisiones de 80%, y la transmisin de 55-60% de la radiacin incidente se considera como
estndar. Los filtros de interferencia de multicapas pueden obtenerse sobre la regin de
longitudes de onda que vara desde 180 nm en el ultravioleta hasta 35 m en el infrarrojo.
Pueden resultar problemas graves si la radiacin incidente es altamente convergente o
divergente. Primero, la longitud de onda que se transmite en cualquier punto del filtro
obviamente es funcin del ngulo de incidencia de la radiacin, y se observa tanto el
ensanchamiento de la anchura de banda y la disminucin de la transmisin del pico. Segundo,
no obstante que slo se considera el ndice efectivo, en realidad las capas de alto y bajo ndice
de refraccin desplazan la radiacin independientemente y un desacuerdo en el espesor efectivo
de las capas ocasiona consecuentes efectos perjudiciales.
Un tipo de filtro de interferencia para paso de ondas largas (tambin llamado dicroico) se ha
diseado para transmitir longitudes de onda superiores a la longitud de onda de corte deseada.
Es costumbre referirse a la longitud de corte como aquella a la que el filtro alcanza 5% de la
transmisin absoluta. Las propiedades de inters primordial para el usuario consisten en la
inclinacin de ascenso desde la regin de baja transmisin hasta la de alta transmisin, el valor
de transmisin en el paso de banda y la transmisin de fondo. Generalmente los filtros de paso
de ondas largas exhiben una pendiente inferior al 5 %, aunque se pueden lograr pendientes ms
acentuadas a costa de la transmisin uniforme en el paso de banda. La transmisin del paso de
banda generalmente no es llana y presenta oscilaciones debido a las bandas de reflexin
secundarias. La mayor longitud de onda que trasmite el filtro se encuentra gobernada por la
absorcin inherente al material del substrato escogido y, en muchos casos, los materiales de las
pelculas son no absorbentes dentro de un intervalo muy amplio de longitudes de onda. La
transmisin de fondo generalmente es de 10
-3
o inferior.
Monocromadores
Un monocromador consiste, en general, de (1) una rendija de entrada que proporciona una
imagen ptica estrecha de la fuente de radiacin, (2) un colimador que hace paralela la radiacin
procedente de la rendija de entrada, (3) una red o prisma para dispersar la radiacin incidente,
(4) otro colimador para reformar las imgenes de la rendija de entrada sobre la rendija de salida
y (5) una rendija de salida para aislar la banda espectral deseada, bloqueando toda la radiacin
dispersada excepto la del intervalo deseado. Despus de considerar cada uno de estos elementos,
se presentarn algunos montajes pticos tpicos.
La funcin primordial de un monocromador es proporcionar un haz de energa radiante con una longitud
de onda nominal y una anchura de banda dada. La salida espectral de cualquier monocromador usado con
una fuente de radiacin continua, independientemente de su distancia focal y anchura de rendijas, consiste
en una gama de longitudes de onda con un valor promedio de longitud que se presenta en el indicador del
monocromador. La funcin secundaria de un monocromador consiste en el ajuste del rendimiento de
energa. El flujo lumnico que emerge de la rendija de salida puede variarse ajustando el ancho de la
rendija. Sin embargo, puesto que tal dimensin tambin controla la anchura de banda espectral, una
rendija excesivamente amplia, con anchuras de bandas espectrales consecuentemente grandes, producir
desviaciones respecto a la ley de Beer . Por lo contrario, los anchos de rendija excesivamente pequeos
provocan rendimientos de baja energa, afectando la sensibilidad analtica como resultado de la
degradacin de la razn seal-ruido, la cual es provocada por los altos voltajes aplicados a los dnodos del
fotomulti-plicador y que se requieren para detectar seales dbiles.
Los requisitos bsicos de un monocromador son: simplicidad de diseo, resolucin, gama
espectral, pureza de la radiacin de salida y dispersin. La seleccin de las fuentes de radiacin
as como de los detectores se correlacionan muy cercanamente.
Se utilizan espejos o lentes para colectar radiacin procedente de una fuente y dirigirla a la
rendija de entrada del monocromador. Cuando la fuente se sita en uno de los focos del espejo y
la rendija de entrada en el otro, la radiacin colectada segn un gran ngulo slido quedar
enfocada sobre la rendija.
Funcionamiento del Monocromador
El funcionamiento de un monocromador comprende tres factores correlacionados: resolucin,
poder de captacin de luz y pureza de la radiacin de salida. La resolucin depende de la
dispersin y perfeccin en la formacin de la imagen, mientras que la pureza est determinada
principalmente por la cantidad de radiacin dispersada. Se requiere una gran dispersin y un
alto poder resolutivo en un monocromador, para medir con precisin las lneas discretas en los
espectros de emisin o las bandas de absorcin ntidas, mientras que las bandas de emisin o la
aparicin de bandas anchas de absorcin se mostrarn en aquellos instrumentos que posean
dispersin media.
Dispersin.
Se define como la distribucin de longitudes de onda en el espacio, o sea la separacin de una
mezcla de longitudes de onda en sus monocomponentes. Esto se logra en un monocromador por
medio de un prisma (fenmeno de refraccin) o con una rejilla (fenmeno de difraccin). La
dispersin recproca lineal, D-
1
, se define como la gama de longitudes de onda por distancia
unitaria en el plano focal del monocromador.
Las dimensiones se dan en nanometros por milmetro. La relacin entre la dispersin angular, el
intervalo angular d sobre el que se distribuye una d correspondiente, y la dispersin lineal
est dada por:
Resolucin
La resolucin, o el poder de resolucin, de un monocromador, es su aptitud para distinguir
como entidades separadas aspectos espectrales adyacentes, como las bandas de absorcin o las
lneas de emisin. La resolucin est determinada por el tamao y las caractersticas dispersivas
de la rejilla o el prisma, el diseo ptico que contiene a este dispositivo dispersor y el ancho de
la rendija del monocromador. En los espectrofotmetros registradores, la resolucin tambin es
funcin del sistema de registro y de la velocidad de barrido.
En donde I es la longitud de onda promedio entre las dos lneas resueltas, d es la diferencia de
longitudes de onda entre las lneas y w es el ancho efectivo de la apertura. Haciendo a un lado la
definicin, cul es el criterio que permite decir que dos lneas espectrales adyacentes han sido
resueltas?. Generalmente se prefiere un valle que se extienda hasta la seal de fondo (la lnea
base) entre dos lneas de emisin discretas, sin establecer nada relativo a las intensidades de las
lneas; esto es, que las bases de las funciones de rendija de dichas lneas podrn tocarse pero no
sobreponerse. En este caso, la resolucin ser la misma que la anchura de la base de una funcin
de rendija. La resolucin de un monocromador generalmente es inferior al valor terico debido
a las aberraciones pticas, imperfecciones, efectos de difraccin y otros efectos destructivos.
Los efectos de las anchuras de banda espectrales sobre las formas de banda observadas. Las
resoluciones muy deficientes disminuyen las alturas de los picos con el aumento de las anchuras
de banda correspondientes. La separacin de las dos bandas se encuentra menos definida y
aparecen incertidumbres debido a los aumentos en las alturas de los picos, como dependencia de
los cambios menores en los anchos de las rendijas. Por otra parte, con demasiada resolucin,
aparece demasiado ruido innecesario sobrepuesto a las seales, sin que resulte evidente un
aumento en las alturas de los picos o la separacin de las dos bandas. Obviamente, existe una
anchura de banda espectral ptima. Cuando sta es un dcimo del ancho de banda natural o
verdadero del pico, las desviaciones de la altura verdadera del pico resultan inferiores a 0.5%.
El sistema ptico de un monocromador produce una curvatura inherente en la imagen de la
rendija que resulta evidente cuando la altura de la misma excede de unos 3 mm. En los
instrumentos de precisin, la prdida de resolucin por agrandamiento de las rendijas, algunas
veces se disminuye dndole a la rendija de entrada un radio de curvatura, opuesto al que se
produce pticamente.
Poder de captacin de radiacin
Cuando se trata de anchuras de banda muy estrechas, se pueden resolver algunas seales
espectrales muy cercanas. Ser necesario que una cantidad suficiente de radiacin llegue al
detector para que se pueda distinguir la seal por encima del fondo. El poder de captacin de
radiacin de un instrumento resulta crtico en este caso. El llamado nmero f, o velocidad de un
espectrmetro, es una medida de la capacidad del espejo colimador para captar o colectar la
radiacin que procede de la rendija de entrada y se expresa por:
En donde f
c
y d
c
representan la distancia focal y el dimetro del espejo colimador, respec-
tivamente. Cuanto menor sea el nmero, tanto mayor ser la capacidad de coleccin o captacin
de radiacin del instrumento.
Rendijas
En la espectrofotometra prctica, el mdulo del monocromador no es capaz de aislar una sola
longitud de onda de radiacin del espectro continuo emitido por la fuente. Por lo contrario, es
una banda definida de radiacin la que pasa por el monocromador.

Esta banda finita procede de
las distribuciones de las rendijas. La entrada o apertura de un monocromador es una rendija
larga y estrecha cuyo ancho es generalmente ajustable. Las rendijas mayores de 3 mm pueden
tener lados curvos pero, por simplicidad, hablaremos del rectngulo brillante de radiacin
formado por la rendija de entrada cuando es iluminada por la fuente. Dentro del monocromador,
los rayos divergen desde la rendija de entrada e iluminan el espejo colimador, el cual los hace
paralelos y los enfoca sobre el elemento dispersante. Despus del colimador, el haz de rayos
paralelos es una versin ampliada de la rendija de entrada. Este rectngulo de radiacin debe
ser lo suficientemente grande para iluminar el lado completo del prisma, o toda la longitud de la
rejilla de difraccin. Posteriormente, la unidad dispersante separa la radiacin policromtica
incidente en una red de rectngulos monocromticos, cada uno de los cuales sale de la unidad
dispersante a un ngulo ligeramente distinto, sin excluir la sobreposicin de ellos. El haz
disperso es interceptado por un segundo espejo colimador similar al primero (o puede tratarse
de un segmento del primero), el cual se utiliza para enfocar y reducir cada rectngulo a una
imagen de la rendija de entrada, esas imgenes finales caen en un plano llamado plano focal, en
el que se localiza una rendija estacionaria de salida. La distancia entre el segundo colimador y la
rendija de salida se conoce como distancia focal del monocromador.
Dos espejos de 45 permiten que tanto la entrada como la salida se encuentren alineadas. Al
eliminar uno o ambos espejos, pueden lograrse configuraciones de entrada y salida paralelas o
en ngulo recto. Suponiendo que la radiacin es de intensidad igual a travs de la imagen, se
puede utilizar el anlisis de Buc y Stearns y de Hogness y cols. para la dependencia de la
intensidad en la rendija de salida, a un valor de longitud de onda establecido, cuando se utilizan
distribuciones simtricas de rendijas
Por lo general, las rendijas se caracterizan nicamente por su amplitud. La anchura de banda
espectral se puede definir rigurosamente, como el intervalo de longitudes de onda de la
radiacin que sale de la rendija de salida de un monocromador, entre los lmites establecidos a la
mitad del nivel de potencia radiante, entre la seal de fondo continuo y el pico de una banda de
absorcin, que posea una anchura intrnseca despreciable. En forma ms simple, la anchura de
banda espectral es la diferencia en los valores de longitud de onda entre los puntos en donde la
transmitancia alcanza la mitad del mximo, o la anchura de banda que contiene 75% de la
energa radiante que sale del monocromador. La regin espectral aislada (a lo largo de la lnea
base), o paso de banda, ser la suma de la amplitud de la imagen y la de la rendija de salida,
expresada en unidades de longitud de onda. El paso de banda o la regin espectral aislada,
corresponde a la distancia del punto 1 al 5.
Distribucin
La anchura de banda se puede expresar en trminos de la abertura o amplitud de las rendijas, W,
y la dispersin lineal recproca del monocromador.
Anchura de banda = W D
1

El paso de banda, , de lafuncin de rendijas esta dado por:
= 2 W D
1
El seleccionar una anchura de rendijas constituye, bsicamente, un compromiso entre la
intensidad de la radiacin y la resolucin. Para el barrido de espectros moleculares, el ancho de
rendijas debe ajustarse de modo que la anchura de banda espectral corresponda a un dcimo de
la anchura de banda natural de la porcin espectral a registrar. Para el caso de espectros
atmicos de lneas, las lneas registradas son realmente funciones de rendija (curvas de
intensidad contra frecuencia para la radiacin que sale de la rendija de salida) cuyo ancho medio
es igual a una anchura de banda espectral. De modo que el escoger una amplitud de rendijas
depender de la separacin de las lneas espectrales o del aislamiento o separacin, de la lnea
analtica deseada, del resto de las lneas adyacentes.
Espejos y lentes
Dentro de un monocromador, la colimacin y los enfoques necesarios se logran utilizando
espejos de superficie frontal. Al no usar lentes, se eliminan las aberraciones cromticas. La
aberracin cromtica se refiere a las diferentes distancias focales para radiacin de diferentes
longitudes de onda.
Cuando la radiacin pasa de un medio a otro con distinto ndice de refraccin, una parte de
aqulla es reflejada en la superficie de frontera. Esta prdida, para la incidencia normal de un
haz en un medio puramente dielctrico, se puede expresar como:
Puesto que, por lo general, el primer medio es aire (1 = 1), la prdida resulta ser una funcin
directa y nica del ndice del substrato. La prdida en materiales de alto ndice, como los que se
utilizan en la regin infrarroja, es ms severa y puede conducir a una atenuacin extrema en
sistemas de multicomponentes. Aun para vidrio de bajo ndice, la prdida total puede resultar
grave si se utilizan varios componentes pticos en la ruta. Al examinar un espectrofotmetro
tpico, se revelan muchas interficies vidrio aire entre los espejos y las ventanas. En cada
interficie vidrio a aire, existe una prdida por reflexin de 4% (
2
= 1.52 para el vidrio).
La reflexin desde la superficie de un vidrio puede modificarse aplicando un dielctrico o un
recubrimiento de pelculas metlicas delgadas. En muchos casos resulta suficiente utilizar una
sola capa cuyo espesor ptico sea igual a un cuarto del valor de la longitud de onda de la
radiacin de inters. La reflectancia normal cuando un haz incide sobre esos recubrimientos con
espesor de un cuarto de onda est dada por:
En donde
f
es el ndice de refraccin de la pelcula,a ,es el del medio que lo rodea y
g
es el
ndice del substrato. La aplicacin de recubrimientos antirreflej antes a cada una de las
superficies de vidrio utilizados en las rutas pticas, reduce la reflectancia a 0.2% aproxi -
madamente para cada superficie.
Los prismas como Dispositivos Dispersores
El efecto de un prisma depende de la refraccin de la radiacin producida por el material del
prisma. El poder dispersivo depende de la variacin del ndice de refraccin con la longitud de
onda. A fin de minimizar el astigmatismo del prisma y lograr una mejor definicin, se debe
iluminar con una radiacin paralela, con la rendija dispuesta en forma tambin paralela al borde
del prisma, y deber pasar a travs del prisma en forma simtrica, de modo que los haces
incidente y emergente formen ngulos iguales con las caras; de esta forma el prisma presentar
una desviacin mnima. La imagen de la rendija de entrada se proyecta sobre la de salida como
una serie de imgenes distribuidas unas despus de otras, ya que las radiaciones de menor
longitud de onda sufrirn mayores desviaciones que las correspondientes a mayor longitud de
onda. La escala de longitudes de onda que se obtiene tendr caractersticas no lineales. Para un
monocromador con un prisma de cuarzo y una distancia focal de 600 nm, se tienen los
siguientes valores para la dispersin recproca lineal: 0.6 nm/mm a 230.0 nm; 1.04 nm/mm a
270.0 nm; 1.56 nm/mm a 310.0 nm; 2.9 nm/mm a 370.0 nm; 5.4 nm/mm a 450 nm, y 12.0
nm/mm a 600.0 nm. El vidrio flint presenta una dispersin tres veces mejor que el cuarzo o la
slice fundida, y constituye el material de seleccin para las regiones de infrarrojo cercano y
visible del espectro. El cuarzo o la slice fundida son los materiales requeridos para los trabajos
en la regin ultravioleta.
En donde t es el ancho de la base del prisma. El poder de resolucin est limitado por la anchura
de la base del prisma as como por el poder dispersivo del material, d/d. Este ltimo trmino
no es un valor constante del prisma ya que se incrementa desde longitudes de onda grandes
hasta longitudes de onda ms cortas. Se requiere el conocimiento del ndice de refraccin del
material dispersante y su intensidad de variacin con respecto a la longitud de onda, o sea la
dispersin lineal con respecto a la longitud de onda. El proveedor de cada instrumento debe
proporcionar una grfica que presente la informacin anterior.
Uno de los diseos de monocromadores ms ampliamente utilizados es el montaje de Littrow.
Las ventajas particulares de este montaje son un alto grado de dispersin logrado en una
distribucin compacta, un solo espejo colimador que sirve para colimar el haz de entrada y
enfocar el haz disperso, y la ausencia de doble refraccin si se utiliza un material anisotrpico
como el cuarzo. Los prismas son muy utilizados actualmente en sistemas monocromadores
dobles, particularmente en los de tipo prisma-rejilla, en donde el prisma acta, como selector de
orden y como dispositivo dispersor en el primer monocromador.
El montaje de Littrow comprende tambin variantes de diseo: un prisma de 30 respaldado por
una superficie reflejante, un prisma de 60 y un espejo Littrow separado, y una red de difraccin
plana, las cuales sern discutidas en la siguiente seccin. La fuente ilumina un espejo
condensador el cual enfoca el haz reflejado, sobre el plano de la rendija de entrada del
monocromador. La imagen de esta rendija es colimada por un espejo parablico y dirigida hacia
el dispositivo dispersor. El haz refractado o difractado regresa al mismo espejo colimador, pero
a una altura diferente, y es enfocado luego hacia la rendija de salida, la cual selecciona una parte
del espectro dispersado para transmitirla a travs de la muestra y hasta el detector. Las partes
superiores o inferiores de las mismas rendijas se utilizan como rendijas de entrada y de salida,
con lo que se logra una correspondencia perfecta entre los anchos de rendija. El sistema de
rendijas se puede ajustar contiguamente o mantenerlo en una posicin fija. En la disposicin de
30, el prisma se hace girar mediante, un montaje conectado al sistema gua de longitudes de
onda. En la de 60, el espejo (plano) de Littrow que se encuentra detrs del prisma, refleja el haz
y lo regresa nuevamente a travs del citado prisma, con lo que se duplica la dispersin. El
espejo se mueve un pequeo ngulo, para obtener as las diferentes longitudes de onda en la
rendija de salida.
Uso de redes o rejillas como dispositivos de dispersin
En esencia, una rejilla o red consiste en un gran nmero de rendijas equidistantes que reflejan o
transmiten radiacin. nicamente a ciertos ngulos definidos la radiacin, a un valor de
longitud de onda dada, se encontrar en fase: A cualquier otro ngulo, las ondas procedentes de
las rendijas se interferirn destructivamente.
Virtualmente, todas las rejillas (o redes) son del tipo de reflexin. Una rejilla de difraccin usual
consiste en un gran nmero de estras paralelas y equidistantes, que se marcan con una
herramienta rayadora de diamante, sobre una superficie perfectamente pulida. La calidad de la
rejilla est muy relacionada con el grado de precisin con que se controlan la rectitud, el
paralelismo y la equidistancia de las rayas o estras. La forma de stas, la determina el fin al que
se destinar la rejilla. Esta forma debe mantenerse constante desde la primera hasta la ltima
estra, dentro de distancias requeridas de rayado que varan de 10 a 25 cm. El rayado de una
rejilla maestra es un proceso lento y arduo que requiere experiencia, habilidad y gran paciencia.
La destreza para producir varias rplicas a partir de una rejilla maestra, ha hecho posible que las
rejillas de difraccin se encuentren disponibles [Link] proceso para duplicar una rejilla
maestra implica: (1) aplicar una pelcula de agente desmoldante sobre la superficie de la rejilla
maestra, (2) depositar al vaco una capa de aluminio y (3) unir una base de vidrio o de cuarzo a
la capa de aluminio con un cemento epxico. Despus de un intervalo de tiempo apropiado, se
separa o desmoldea la rplica o duplicado.
Cada estra de la rejilla posee una cara amplia que se expone a la radiacin incidente. Esta es
difractada en cada estra (esto es, dispersada) segn un gran nmero de ngulos. En ciertos
valores de ngulo ocurre un refuerzo, o interferencia constructiva, como lo establece la siguiente
frmula
b(sen i sen r) = m
En donde b, la constante de la rejilla, representa la distancia entre 2 estras adyacentes, i es el
ngulo de incidencia, r es el ngulo de difraccin y m designa al orden. El signo positivo se
aplica en la frmula cuando los haces incidentes y difractados se encuentran en el mismo lado
de una red normal. El nmero de estras vara desde 20 estras/mm utilizadas en el infrarrojo
lejano, hasta 3600 estras/mm o ms para las regiones visible y ultravioleta.
La frmula de la red o rejilla muestra que la energa incidente se difracta en varios rdenes La
particin de la energa en esos rdenes depender de la forma de las estras. Las rejillas
modernas poseen un perfil de ranura orientada (con sesgo especial de fulgencia) y, como
consecuencia, pueden concentrar la mayor parte de la energa incidente en un solo orden. El
ngulo de la estra es controlado de modo que disperse, o concentre, la mxima energa en la
regin (angular) de longitudes de onda que se pretende utilizar. Aproximadamente la eficiencia
se agudiza en la direccin y a la longitud de onda en donde el ngulo de difraccin es igual al
ngulo de reflexin especular desde la cara de la estra difractante. Este ngulo se denomina
ngulo de orientacin fulgente y la longitud de onda a la que ocurre, longitud de onda de la
orientacin fulgente. La mayora de las redes se utilizan en el primer orden ya que se tiene una
eficiencia alta por encima de una gama muy amplia. La porcin de la radiacin incidente que
slo es reflejada especularmente por la rejilla o red, forma el orden cero de la imagen directa.

En un montaje de tipo Littrow, el ngulo de incidencia es igual al ngulo de difraccin. Cuando
esto ocurre, lo que resulta muy comn, la ecuacin de la red se simplifica a:
m= 2b sen i
El intervalo de longitudes de onda tiles de un monocromador de red lo determina, esen-
cialmente, el hecho de que la eficiencia, expresada como la relacin de la radiacin reflejada a
la radiacin incidente, caiga en cualquier lado de la longitud de onda de brillo. La mxima
eficiencia en la longitud de onda de orientacin fulgente es inferior a 70%. La intensidad cae a
la mitad de la intensidad mxima en la longitud de onda mencionada, cuando el ngulo de
difraccin es casi la mitad del ngulo de orientacin en la regin de longitudes de onda cortas o
casi tres veces el ngulo de orientacin fulgente en el lado de longitudes de onda grandes. Esto
es equivalente al intervalo del primer orden, que se extiende desde los dos tercios hasta el doble
de la longitud de onda de brillo.
El paso de banda se encuentra limitado por la densidad de las estras, la distancia focal y la
anchura de las rendijas. Por ejemplo, un montaje de 0.25 m, con una red de 1200 estras/mm y
rendijas de 1.0 mm produce un paso de banda de, aproximadamente, 4 nm. El paso de banda se
puede mejorar limitando los anchos de las rendijas de entrada y de salida, pero sacrificando el
rendimiento de la radiacin de salida. Por otra parte, una rejilla plana hologrfica (ver ms
adelante) de 2400 estras/mm, puede mejorar el paso de banda hasta 2 nm sin cambio en el
rendimiento o en la radiacin dispersa.
En los monocromadores de rejilla el nivel de ruido (radiacin indeseable) posee dos nom-
bres y orgenes diferentes: fantasmas y radiacin parsita. Los fantasmas estn relacionados con
los errores peridicos en la posicin de las estras que resultan, ya sea del tornillo de la mquina
de rayado o de las vibraciones peridicas que se originaron fuera de la mqui na durante el
proceso de rayado. La radiacin parsita resulta de los errores no peridicos debidos a los
espaciamientos de las estras o a las imperfecciones en la planicie de las superfi cies reflejantes
de las estras. Sin embargo, el nivel de la radiacin parsita en un monocromador de red,
generalmente es inferior al de un fotmetro de filtro. Las redes estriadas o las rejillas
hologrficas planas pueden requerirse en donde se necesita cumplir condiciones ms estrictas.
De forma que un monocromador de red posee una dispersin casi constante a lo largo del
espectro y, consecuentemente, una escala lineal para las longitudes de onda. Este aspecto es una
de las ventajas ms importantes de las redes o rejillas sobre los prismas.
Cuando el orden m se considera fijo, se obtiene una gran dispersin con el uso de redes con un
gran nmero de estras por milmetro.
Es claro que para una longitud de onda dada, la dispersin ser funcin, nicamente de la
tangente de r. Los cambios en el espaciamiento y en el nmero de estras no tienen efecto en la
resolucin y en la dispersin cuando una red se utiliza a un ngulo dado.
Las rejillas de escalera (o Echelle, escalera en francs) son redes que poseen muy pocas
estras por milmetro (tpicamente 80 estras/mm), pero que se utilizan en un orden muy alto -
por ejemplo, en el 75o. orden. Redes con tan pocas lneas y utilizadas con ordenes tan altos
poseen sobreposiciones agudas de rdenes espectrales. Se utiliza otro tipo de red o prisma que
dispersa en ngulo recto con la escalera para dispersar la radiacin antes de que caiga sobre la
echelle, con lo que se obtiene un espectro en dos dimensiones. En un monocromador de rejilla o
red, la apertura efectiva simplemente es el espesor de una estra particular, b, multiplicado por el
nmero total de estras o rayas, N, y por cos r; es decir, bN cos r. Considerando que es pequeo
el ngulo entre los rayos incidentes y difractados, la resolucin terica de cualquier red es
descrita por cualquiera de las siguientes frmulas:
En donde r es el ngulo entre el rayo difractado y la normal a la red y W es la anchura del
rayado de la red. Ambas ecuaciones son correctas y equivalentes; la segunda se escribi para el
modo de operacin autocolimante (Littrow). La ecuacin implica que para un orden dado, m, la
resolucin aumenta con el nmero de lneas o rayas de la rejilla. La ecuacin claramente
establece que para una red de anchura W y a una longitud de onda dada, la resolucin es funcin
del seno del ngulo de difraccin. En las redes ordinarias este ltimo es de 10 a 15, pero
muchas redes de escalera operan a 63.
La regin rayada de una red debe ser lo suficientemente grande para interceptar toda la
radiacin incidente, aun cuando se encuentre girada en su posicin angular extrema. Cualquier
disminucin en esta rea reduce la radiacin til del espectro, desperdicia lo que pierde la red y
aumenta la radiacin parsita.
Como ya se estableci, la manufactura de una red maestra es un proceso largo, tedioso y de alto
costo. En los ltimos aos se ha desarrollado un proceso de produccin de redes por medios
fotogrficos y utilizando lseres o lseres. Las rejillas as obtenidas se conocen como redes
hologrficas.
Para obtener dichas redes, se utilizan dos haces de radiacin lser monocromtica que producen
marcas de interferencia sobre un material fotosensible, que ha sido depositado sobre vidrio
ptico puro. El vidrio puede ser plano o cncavo. La porcin de la resina expuesta a los haces
de lser que se interfirieron constructivamente, es lavada, con lo que se produce una estructura
estriada en relieve. La red posteriormente se recubre con una capa reflectora apropiada, y se
puede utilizar de la misma forma que una red comn. Debido a que las redes hologrficas son
los registros de un fenmeno ptico, no presentan fantasmas en absoluto y dan menores niveles
de radiacin parsita que las redes ordinarias. Se puede producir redes hologrficas hasta con
6000 estras/mm en un espacio de 600 x 400 mm. Al cambiar las longitudes de onda de los
haces de lser, se obtienen diferentes espaciamientos entre las estras; el factor limitante es la
disponibilidad de lseres de diferentes longitudes de onda. Cuando se utilizan con haces
paralelos de radiacin incidente, no existen aberraciones. Aun con configuraciones de haces no
paralelos, algunas veces se puede eliminar las aberraciones.
Una red hologrfica cncava, cuando se ilumina a travs de una rendija de entrada, crea por
rotacin, una imagen perfecta o casi perfecta sobre una rendija fija de salida. La rejilla de
difraccin cncava constituye, en s, un monocromador. No se requieren otros componentes
pticos, con lo que se eliminan todos los dems elementos y la necesidad de alinear esos
componentes con respecto a la red. Comparada con las rejillas de rayado planas, la eficiencia de
una red hologrfica generalmente es inferior, pero su rendimiento es muy uniforme a lo largo
del espectro.
Se han construido sistemas de alto rendimiento que incorporan redes hologrficas con aperturas
de f/5 a f/l y pasos de banda de 0.4-4 nm, en configuraciones fsicas ms pequeas que muchos
sistemas de red de 0.25 m. Todas las dimensiones y geometras se obtienen mediante
computadoras en la manufactura de las redes y se proporcionan al cliente. No obstante que la
red se puede utilizar en un montaje rotatorio, el montaje ms simple para aquellas aplicaciones
que implican un nmero finito de longitudes de onda, es el espectrogrfico, en donde la red se
mantiene fija y el fotodetector se coloca en el plano de la rendija de salida para cada longitud de
onda de inters. Lo anterior produce un sistema ptico sin partes mviles, capaz de detectar una
o varias longitudes de onda simultneamente. Este tipo de montajes se encontrarn en la
descripcin de instrumentos espectrogrficos y en instrumentos para el monitoreo de efluentes
en cromatografa de lquidos.
Sistemas monocromadores con rejillas o redes. Los sistemas de redes ms utilizados general -
mente involucran alguna variante de las configuraciones de los monocromadores de Ebert o de
Littrow. No obstante que pueden sintonizarse continuamente, estn diseados para transmitir
una sola longitud de onda a la vez. Por lo que son menos tiles con sistemas de deteccin de
multicanal, ya que generalmente tienen efecto de vieta (vignette) esto es, hay desvanecimiento
en el fondo y no producen contornos bien definidos de la imagen. Este efecto disminuye las
intensidades de las longitudes de onda laterales, debido a que los medios pticos no son lo
suficientemente grandes para evitar la prdida de radiacin en los bordes. Un aumento en el
nmero f/ reduce el vieteo. La prdida de radiacin por tal efecto no est completamente fuera
de la imagen; en vez de ello, reaparece como radiacin parsita, limitando las caractersticas de
funcionamiento seal/ruido del espectrmetro.
Montaje de Ebert. Los aspectos pticos del montaje de tipo Ebert se presentan. Las rendijas de
entrada y salida se encuentran en el mismo lado de la red. Utiliza un solo espejo esfrico
cncavo como colimador y de enfoque. La radiacin que penetra al monocromador llega al lado
izquierdo del espejo y es colimada y reflejada hacia la rejilla o red. La radiacin difractada por
la red viaja hacia la mitad derecha del mismo espejo y es enfocada en la rendija de salida.
Normalmente al utilizar espejos fuera de eje se introducen efectos de astigmatismo en la
imagen. Dicho astigmatismo resulta cuando las lneas verticales de un objeto se enfocan en un
punto diferente de las lneas horizontales. El astigmatismo de la primera reflexin del espejo en
el montaje de Ebert es casi completamente compensado por la reflexin de la mitad opuesta del
espejo y durante la segunda reflexin. Puesto que los haces de entrada y difractado utilizan
porciones diferentes del espejo, no se producen dispersiones en la ruta ptica desde el espejo. El
diseo de Ebert ofrece una unidad de gran apertura en un tamao relativamente pequeo. La
longitud de onda se selecciona simplemente pivoteando la red en su eje vertical.
El diseo Fastie-Ebert se utiliza comnmente en espectrofotmetros pequeos. Ofrece gran
apertura, es compacto, generalmente con f/3 a f/5, y produce poco o ningn astigmatismo.
Montaje Czerny- Turner. En el montaje de lado a lado de Czerny-Turner, dos espejos cncavos
reemplazan el espejo grande del montaje de Ebert. Todas las ventajas del Ebert tambin
persisten en ste. El diseo de Czerny-Turner posee baja apertura, generalmente y puede ser
ms difcil de alinear. Se utiliza generalmente en sistemas de ms costo por sus mejores
caractersticas de radiacin parsita y de resolucin.
Montaje de rejilla de Littrow. La configuracin de Littrovv requiere un solo espejo para enfocar
y colimar. Se utiliza generalmente en espectrofotmetros pequeo. En esta configuracin
autocolimante, el eje de la red es paralelo y en el plano de las estras. An ms, el eje de
rotacin se interseca con la radiacin en ngulo recto. Como resultado, los ngulos de
incidencia y de difraccin estn en el mismo lado de la normal de la red y son casi iguales, de
modo que la ecuacin de rejilla resulta m = 2b sen . Este montaje asegura gran eficiencia de
red, buena alta pureza espectral, aberraciones pequeas y un tamao reducido.
En el montaje de Littrow, la fuente ilumina un solo espejo en su porcin superior. El haz es
colimado y dirigido hacia la red en donde el haz se dispersa. El haz difractado regresa a la
porcin inferior del mismo espejo, en donde se enfoca hacia la rendija de salida. Las porciones
superior e inferior del mismo conjunto de la rendija se utilizan como rendijas de entrada y de
salida, por lo que aportan correspondencia perfecta en las anchuras de rendija, las cuales pueden
estar fijas o variarse continuamente.
Otros montajes de rejilla. Se han utilizado muchos otros montajes para monocromadores de red.
Entre estos se encuentran el de Seya-Namioka, el de Wadsworth, el de Eagle y el montaje
circular de Rowland
Doble Monocromacin
Un monocromador doble consiste en dos sistemas dispersores utilizados en serie. La rendija til
simplemente es la de salida del primer monocromador y la de entrada del segundo. Ambas guas
de longitud de onda deben corresponder perfectamente. En algunos monocromadores dobles se
utilizan diferentes elementos dispersivos en cada mitad; por lo general, el primer es un prisma y
el segundo una red. El prisma de cuarzo acta como un seleccionador de orden que presenta un
orden nico al segundo monocromador de rejilla o red. La geometra de muestreo es un doble
haz.
Al utilizar dos monocromadores idnticos en forma sucesiva o secuencial, la dispersin y la
resolucin aproximadamente se duplican y la radiacin parsita se reduce sensiblemente. Por
ejemplo, si la intensidad de la radiacin parsita en cada monocromador es 0.1% de la del haz
primario, situacin usual en las regiones de ultravioleta y visible, entonces la doble
monocromacin la reducir a 0.00,01% (o sea el 0.1% de 0.1%). En la regin del infrarrojo
cercano, la reduccin de la radiacin parsita es inferior, cerca del 0.1% del total. Por supuesto,
el factor de transmisin en un monocromador doble es casi la mitad del de cualquier otro
monocromador. Si se desea, el incremento en la resolucin puede cambiarse por una ganancia
en el rendimiento de energa. Por ejemplo, al abrir las rendijas al doble de la abertura necesaria,
si se estuviera utilizando un solo monocromador puede asegurarse una resolucin comparable a
la de un solo dispositivo y, al mismo tiempo, cuadruplicar la energa en la rendija de salida del
segundo monocromador.
Tambin es posible obtener el efecto de la doble monocromacin haciendo pasar la radiacin
dos veces por el mismo elemento dispersor.
CELDAS Y DISPOSITIVOS DE MUESTREO
Para el trabajo ms preciso, las celdas (o cubetas) que contienen las soluciones de la muestra y
de la referencia debern tener sus ventanas perfectamente paralelas y perpendiculares al haz de
radiacin. Las celdas cilndricas algunas veces se utilizan en instrumentos de bajo costo pero, en
estos casos, se debe cuidar la posicin de stas a fin de lograr una buena reproducibilidad. Las
celdas utilizadas en espectrofotometra ultravioleta-visible, por lo general tienen 1 cm de
espesor, aunque se puede utilizar celdas desde 0.1 o menos hasta 10 cm o ms. Tambin se
encuentran disponibles comercialmente insertos transparentes que permiten acortar los
espesores de celdas de 1 cm hasta 0.1 cm. En la regin del infrarrojo, los espesores de las celdas
son mucho ms pequeos, desde 0.1 mm a 1 mm, debido a que la mayora de los disolventes
absorben apreciablemente en el infrarrojo.
Las celdas deben construirse con materiales que no absorban la radiacin en la regin de inters.
La slice fundida o el cuarzo es transparente desde 190 nm en la regin del ultravioleta hasta
cerca de 3 a 4 m en la regin infrarroja. Los vidrios de borosilicato pueden utilizarse desde 350
nm hasta 2-3 m. Existen celdas de material plstico, de bajo costo, que se utilizan en la regin
visible.
Para obtener buenos datos de absorbancia, las celdas debern manejarse por pares y se pueden
obtener, como tales, de los fabricantes pero siempre es mejor verificar el par analizando
muestras idnticas en cada celda y reservar una para la solucin de la muestra y la otra para el
disolvente solo. Las celdas deben limpiarse escrupulosamente antes y despus de ser utilizadas.
Se recomienda el uso de cido ntrico o de agua regia para su limpieza. Las soluciones de
dicromato no debern utilizarse debido a su tendencia a ser absorbidas por el vidrio. Despus de
su limpieza, las celdas debern enjuagarse completamente y secarse evitando el uso de estufas
de secaso o de flama, ya que puede existir variacin en el espesor de las mismas. Las caras de
las celdas nunca deben tocarse con los dedos cuando se manejan ya que las huellas digitales, los
residuos de grasa y la pelusa pueden provocar cambios notables en la transmitancia de la celda.
Se encuentran disponibles comercialmente varios cambiadores automticos de muestras para ser
utilizados cuando se investiga un gran nmero de ellas. Consulte la informacin de los
fabricantes para ver la descripcin de los cambiadores de muestras y de los dispositi vos de
muestreo automtico.
Fibras pticas
Los haces de fibras pticas estn constituidos por numerosas fibras de vidrio o de material
plstico fundido en sus extremos. Una sola fibra transmite la radiacin y un haz de stas puede
transmitir tanto radiacin como imgenes. Las fibras pticas transmiten la radiacin por
reflexin interna total. La reflexin total ocurre cuando un rayo, al viajar por un medio
transparente interacta con una interficie formada por otro medio de menor ndice de refraccin,
suponiendo que el ngulo de incidencia es mayor que un valor crtico conocido como ngulo
crtico. Este ngulo se define por un rayo que es refractado paralelamente a la interficie. Por lo
tanto, una fibra ptica debe consistir en un cuerpo central de alto ndice de refraccin rodeado
por una cubierta de menor ndice.
La radiacin colectada, dentro de un cono limitado por los ngulos de aceptacin en un
extremo de la fibra, sale por el otro extremo con el mismo ngulo. La amplitud de ese cono,
tambin conocida como apertura numrica (NA de numerical aperture) est dada por
NA =
3
Sen
w
= (
1
2
-
2
2
)
1/2
En donde
1
, es el ndice de refraccin del material que constituye el centro de la fibra,
2
, es el
ndice de la cubierta o envolvente,
3
es el ndice del medio que la rodea y
w
es el ngulo
medio de aceptacin mxima.
En las fibras se escogen los dos vidrios no slo para obtener la apertura numrica requeri da,
sino con puntos de fusin y coeficientes de dilatacin compatibles. Algunas fibras tpicas
poseen un ndice en el material central de 1.64 y una cubierta con un ndice de 1.53, con lo que
se obtiene una apertura numrica de 0.54, que equivale a un ngulo total de 66. Los dimetros
tpicos varan desde 10 hasta 150m. En las fibras plsticas, el corazn es de polimetacrilato de
metilo ( = 1.49) rodeado por una cubierta transparente de otro polmero con un ndice de 1.39.
Los dimetros interiores de estas fibras varan de 0.01 hasta 1.0 mm.
Las fibras pticas son tiles cuando el material a investigar no puede colocarse en una celda
estndar, por ejemplo, cuando se requiere medir la absorbancia de una solucin que fluye. El
haz incidente se puede llevar hacia la solucin mediante fibras pticas y el haz transmitido
puede regresar al espectrofotmetro con el uso de otro haz de fibras pticas. Algunas veces se
utilizan tales fibras para conducir la radiacin, despus de la dispersin, e incidir sobre uno de
los elementos de un dispositivo lineal de diodos.
DETECTORES
Un detector es un transductor que convierte la radiacin electromagntica en un flujo de
electrones y, posteriormente, en una corriente o voltaje en el circuito de lectura. En muchos
casos, la fotocorriente requiere amplificacin, particularmente cuando se miden bajos niveles de
energa radiante. Existen detectores de un solo elemento como los fotodiodos de estado slido,
los tubos fotoemisores y los tubos fotomultiplicadores y otros detectores de elementos
mltiples, como los detectores con configuracin de estado slido. Las caractersticas ms
importantes para cualquier tipo de detector son: sensibilidad espectral, respuesta a la longitud de
onda, ganancia y tiempo de respuesta.
Tubos Fotoemisores
Los tubos fotoemisores al vaco son combinaciones simples de fotoctodo-nodo alojados en
una cubierta al vaco. El fototubo de vaco de un solo paso contiene un ctodo sensible a la
radiacin, con forma de medio cilindro metlico recubierto en su superficie receptora por una
capa de material sensible a la radiacin (generalmente un metal alcalino), y un nodo con forma
de alambre dispuesto en el eje del cilindro o como un alambre de configuracin rectangular que
enmarca el ctodo.
El fotoctodo opera segn el principio de que se emiten electrones desde algunos materiales en
proporcin directa al nmero de fotones que inciden en su superficie.
Para una eficiencia ptima, la superficie del fotoctodo debe tener el mximo coeficiente de
absorcin posible para la radiacin incidente. El material que recubre la superficie tambin
deber tener baja funcin de trabajo con objeto de extender su cobertura espectral hacia
mayores longitudes de onda. Un detector fotoemisivo no puede responder a la radiacin cuyos
fotones posean energa inferior a la funcin de trabajo, puesto que sta ltima representa la
energa necesaria para liberar un electrn desde la superficie del material.
El fotoctodo de transmisin para un tubo fotomultiplicador), el cual es superior desde el punto
de vista de la ptica electrnica, puede ser al mismo tiempo lo suficientemente grueso para
absorber la mayor parte de la radiacin incidente, y lo suficientemente delgado para permitir
que lo atraviesen los fotoelectrones generados, manteniendo una energa tal que supere la
barrera de la funcin de trabajo en la interficie del vaco.

En forma similar, en el fotoctodo opaco o de reflexin, los fotones que son profundamente
absorbidos en el material, generan fotoelectrones que no se pueden retener en la superficie y
escapan.
La sensibilidad espectral para algunos tipos de materiales de fotoctodos. El parmetro de
eficiencia cuntica (QE, de quantum efficiency} catdica mostrado en la ilustracin, representa
el nmero promedio de fotoelectrones emitidos por el fotoctodo, dividido entre el nmero de
fotones incidentes. Existen esencialmente 11 composiciones qumicas en los fotoctodos, que se
ofrecen en formas semitransparentes u opacas, y que producen respuestas diferentes. Cualquier
tipo fsico puede combinarse con cerca de 10 materiales de ventanas, para obtener la mayora de
los dispositivos comerciales. Las composiciones de ctodos ms sensibles son las de tipo
bialcalino (K-Cs-Sb), el cual produce respuestas de millones de amperes por watt de intervalo.
La respuesta roja se logra con el tipo Ag-O-Cs, que es utilizable hasta 1.1 m. Para alcanzar el
extremo ultravioleta del espectro puede obtenerse una respuesta excelente al acoplar,
virtualmente, cualquier tipo de ctodo con una ventana transparente apropiada. Los ctodos de
Cs-Te, del tipo pantalla solar (es decir, insensible a la radiacin en las regiones del visible y del
ultravioleta cercano del espectro), opera desde 120 hasta 350 nm.
Una respuesta plana se logra con las series de Ga-As; esta composicin genera un tubo
utilizable desde 200 hasta 940 nm, con una variacin en la respuesta
absorcin del material de la cubierta. El lmite de corta longitud de onda es cerca de 350 nm
cuando se utiliza una cubierta de vidrio o de 200 nm si se utiliza slice. De esta manera, la
respuesta espectral es funcin de la composicin del ctodo y del material utilizado en la
cubierta.
Cuando un tubo fotoemisivo opera en la oscuridad, todava existir un flujo de corriente. Esta
corriente se atribuye a emisin termoinica, emisin de campo, fuga hmica y a la emisin
producida por la radiactividad natural del
40
K presente en la cubierta de vidrio. Los tubos
fotoemisivos limitan su sensibilidad por esta corriente de oscuridad y por los bajos niveles de
corriente producidos por niveles bajos de radiacin. No obstante que es posible amplificar
corrientes tan pequeas como de 10 pA, existe mucha dificultad para amplificar corrientes
menores, las cuales pueden llegar a ser inferiores a la fuga hmica a travs de la cubierta de
vidrio que desva la resistencia de carga. La constante de tiempo del circuito amplificador (el
tiempo requerido para alcanzar \/e de su respuesta final) puede resultar lo suficientemente
grande para degradar el tiempo de respuesta efectivo del detector.
La fuente primaria de ruido en los detectores fotoemisivos, a temperatura ambiente,
generalmente es el ruido de descarga. Este ruido es causado por la naturaleza fundamentalmente
discontinua de la radiacin y de la corriente elctrica. Los fotones llegan al ctodo en forma
aleatoria, no obstante que la intensidad total de la radiacin es constante.
Por lo tanto, los fotoelectrones emitidos por el ctodo llegan al nodo aleatoriamente y, sin
embargo, la rapidez a largo plazo de los pulsos fotoelectrnicos en el nodo es constante y
proporcional a la potencia radiante. Los electrones termoinicos emitidos desde el ctodo
tambin ocurren en forma aleatoria.
Para lograr una precisin de 1 % o mejor, se requiere una curva de calibracin para superar la
ligera falta de linealidad en la dependencia de la fotocorriente sobre la iluminacin, a menos que
se pueda utilizar convenientemente un mtodo de ajuste a cero. La ganancia, por supuesto, es
unitaria. La constante de tiempo es de casi de 150 ps. Los tubos fotoemisi vos se utilizan
principalmente para auxiliar a las fuentes de baja velocidad de repeticin y alta intensidad.
Tubos Fotomultiplicadores
Los fototubos multiplicadores de electrones, o tubos fotomultiplicadores (PMT, de photo-
multiplier tube) como se les llama comnmente, son una combinacin de un ctodo fotoemisivo
y una cadena interna de dnodos multiplicadores de electrones. Los dos diseos ms populares,
el de caja circular y el de configuracin en lnea. La radiacin incidente expulsa fotoelectrones
del ctodo. Estos fotoelectrones son enfocados por un campo electrosttico y acelerados hacia
un electrodo curvo, que corresponde al primer dnodo, el cual est recubierto con un compuesto
(BeO, GaP o CsSb) que expulse varios electrones como resultado del impacto de un electrn de
alta energa. La forma redondeada de los dnodos hace converger a los electrones en una sola
dimensin, mientras que el campo formado en los bordes o cerca de los extremos de los
dnodos, los hace converger en una segunda dimensin. Repitiendo este proceso multiplicador
electrnico a lo largo de una serie de dnodos sucesivos que se mantienen a altos voltajes, se
produce una corriente de avalancha que finalmente arriba al nodo. De esta forma se logra la
amplificacin de la corriente interna, produciendo la llamada ganancia. La seal de salida del
tubo puede, por supuesto, amplificarse posteriormente. Para evitar el deterioro de las superficies
de los dnodos por efecto de calentamiento localizado y para prevenir la fatiga del tubo, la
corriente del nodo debe mantenerse por debajo de 1 mA. Esto requiere que el voltaje entre el
dnodo final y el nodo sea inferior o igual a 50 V. El tiempo de respuesta en tubos con
superficies dindicas de GaP es de aproximadamente 0.5 ns, mientras que con otros materiales
este tiempo cae entre 1 y 2 ns.
Una cadena de resistores divide el voltaje de operacin de forma que la diferencia de potencial
entre dnodos adyacentes sea de 75-100 V. El potencial entre electrodos ms importante en un
fotomultiplicador es el voltaje entre el ctodo y el primer dnodo, el cual se debe mantener
siempre en el valor recomendado por el fabricante del tubo. Esto se puede lograr utilizando un
diodo de voltaje constante (diodo Zener) en vez de la resistencia divisora entre el ctodo y el
primer dnodo.
Idealmente, la ganancia total G de un tubo fotomultiplicador que posee n pasos y un factor f
de emisin secundaria en cada paso es G = (f)". El valor exacto de f depende tanto de la
naturaleza del material emisor secundario del dnodo como del potencial elctrico impuesto. En
los materiales utilizados en dnodos antiguos, el valor de/vara de 3 a 10. Con los recubrimientos
de GaP se alcanza fcilmente 50, de modo que el nmero total de dnodos se puede reducir y
alcanzar todava una ganancia alta. Como resultado de la gran amplificacin interna, los tubos
fotomultiplicadores slo se pueden usar a bajos niveles de potencia, entre 10
-14
y 10
-4
lmenes
(Un lumen es el flujo lumnico por estereoradin que emana de una fuente puntual con una
intensidad de 1 candela. Una candela es la intensidad luminosa de 1 /60 de un centmetro
cuadrado del rea proyectada de un cuerpo negro en el punto de solidificacin del platino. Un
lumen equivale aproximadamente a 0.00147 W). Una de las mayores ventajas de los tubos
fotomultiplicadores es la capacidad que poseen de cambiar la sensibilidad en un intervalo muy
amplio, simplemente cambiando el voltaje de alimentacin.
Puesto que la corriente de oscuridad tambin produce una corriente amplificada en la salida, ello
establece un lmite inferior en la potencia radiante que puede detectarse directamente. La
corriente de oscuridad trmica se minimiza enfriando el tubo fotomultiplicador. Debido a que la
corriente de oscuridad representa un componente muy estable, se puede compensar
automticamente mediante un arreglo de potencimetros de ajuste a cero o bien restarse
directamente de la seal de salida.
Fotodiodos
Los fotodiodos operan segn un principio completamente distinto al de los detectores ante-
riormente descritos. La construccin de un diodo de silicio plano con unin p-n. El proceso
comienza con un material de silicio que posee resistividad intrnseca muy alta, posteriormente
se realizan difusiones p y n muy superficiales en las caras superior e inferior respectivamente y
la superficie superior se protege con un recubrimiento de SiO,. Se forman contactos metlicos
en las superficies superior e inferior para permitir las conexiones elctricas. Las regiones p
difusas determinan la unin y el rea pticamente activa. Un fotn debe llegar al rea activa (o
intrnseca) para producir flujo de corriente en el circuito externo.
Una unin semiconductora p-n posee una polarizacin inversa, de modo que no existe flujo de
corriente. Cuando un fotn interacta con el diodo, los electrones son llevados hasta la banda de
conduccin en donde pueden actuar como portadores de cargas. De esta manera, la corriente
generada es proporcional a la potencia radiante incidente. La mayora de estos dispositivos
detectan nicamente radiacin visible y en el infrarrojo cercano. La responsividad de los diodos
es de 250-500 mA/W en el espectro visible. Esto es, por lo menos, un orden de magnitud
superior que los tubos fotoemisivos al vaco, pero muchos rdenes de magnitud menos que los
tubos fotomultiplicadores, los cuales poseen ganancias tan altas como se ha indicado
previamente. La fotocorriente de salida es lineal hasta 10 dcadas en funcin del nivel de
iluminacin.
En general, la velocidad del fotodiodo est limitada por la constante de tiempo formada entre la
impedancia de entrada del amplificador y la capacitancia en derivacin intrnseca de 2-5 pF.
Para mantener la capacitancia lo ms baja posible, se utilizan dispositivos extremadamente
pequeos y la seal ptica se acopla a los dispositivos por medio de lentes o fibras pticas. Los
tiempos de ascenso varan poco menos de 1 ns hasta ms de 10 s. Muchos fotodiodos
pequeos se pueden ensamblar en disposiciones lineales o bidimensionales, en los cuales cada
diodo capta una seal en forma simultnea. Un capacitor pequeo se acopla a cada diodo y se
carga hasta un nivel dado antes de que ocurra la iluminacin en el diodo. Al iluminarlo la carga
produce escape en el capacitor. Despus de que se obtienen las seales, se barre cada elemento
del arreglo, se registra la prdida de carga y se recarga el capacitor. De esta forma se obtienen
datos en una y aun en dos dimensiones. Por ejemplo, se puede situar cada diodo de modo que
obtenga la intensidad de un intervalo estrecho de longitudes de onda de un espectro disperso o
la intensidad de la luz procedente de una imagen dibimensional. Los sistemas de estado slido
tienen una estabilidad excelente, existe muy poca dispersin de la carga de un diodo a otro
adyacente, lo que constituye un factor importante cuando se tienen diferencias marcadas en
intensidad.
Los dispositivos de fotodiodos lineales se encuentran disponibles comercialmente y contienen
desde 128 hasta 4096 elementos en cada arreglo.
MDULOS DE LECTURA
En los instrumentos ms simples se producen seales de corriente directa (CD) que se
amplifcan mediante amplificador de CD v se repipiran en medidores analgicos (de lectura).
Registradores, voltmetros digitales o en monitores de sistemas de computacin. Los ampli-
ficadores de alta ganancia estn sujetos a errores de deriva (drift) y a errores de desplazamiento,
sin embargo, la presencia de ruido de baja frecuencia (l/f) en la seal restringe severamente el
grado en que se puede mejorar la relacin seal-ruido por medio de filtros simples de paso bajo.
Por esas razones, es a menudo deseable modular la seal y transformarla en una frecuencia de
corriente alterna (CA) lo suficientemente alta que impida los problemas de deriva y los
problemas de ruido l/f. Despus de la amplificacin, realizada en un amplificador de CA, la
seal se convierte a CD por medio de un desmodulador o rectificador, ya que todos los
dispositivos de registro comnmente utilizados requieren seales de CD. La corriente
generalmente se convierte en un voltaje antes de ser visualizada o registrada.
La modulacin se realiza usualmente interrumpiendo en forma pulsante el haz de radiacin que
llega al detector mediante un disco de sector rotatorio o modulando el haz de radiacin como ya
antes se describi. Si se utiliza un obturador o trozador {chopper), se puede ubicar en varios
lugares del sistema ptico, dependiendo de la aplicacin.
INSTRUMENTOS PARA LA FOTOMETRA DE
ABSORCIN
Histricamente se han utilizado monocromadores de barrido con detectores de un solo canal en
sistemas sencillos o en complicadas disposiciones de doble haz para realizar medidas de
absorbancia en la gama espectral de 190 a 800 nm. Estos sistemas espectromtricos se utilizan a
menudo con el clculo analgico de transmitancia y absorbancia. Tambin se pueden acoplar a
microprocesadores para simplificar la reduccin de datos. Actualmente, una nueva generacin
de instrumentos que incorporan los avances ms recientes en la tecnologa de detectores de
multicanal, redes hologrficas cncavas y microcomputadoras est apareciendo con capacidades
antes inasequibles.
Consiste simplemente de una fuente, un sistema de enfoque ptico, un portamuestras, un
dispositivo aislador de longitud de onda y un detector con su amplificador y sistema de registro.
Desde el punto de vista de ingeniera es deseable que este tipo de sistemas esten limitados por el
detector; o sea, que el factor limitante debe ser el ruido generado por el detector. Cual quier cosa
que se realice para aumentar los niveles de seal en el detector es, por consiguiente, deseable.
La medida del funcionamiento se define, por lo general como la precisin o la exactitud
fotomtrica.
En trminos de su construccin se puede reconocer la diferencia entre las rutas de radiacin de
simple y de doble haz, y si el mdulo del fotmetro est diseado para lectura directa o si utiliza
un circuito de balance. Algunos aspectos especiales incluyen doble cremacin y sistemas de
longitudes de onda duales. En la seleccin final de un instrumento se deben considerar los
conceptos de costo inicial, costo de mantenimiento, flexibilidad de operacin, caractersticas de
resolucin, intervalo de longitudes de onda, precisin y, quiz, la disponibilidad de equipo
auxiliar para desarrollar otras reas de aplicacin. Algunos diseos de instrumentos se han
concentrado en desarrollar medidas secuenciales rpida y automticamente con el uso de
accesorios de muestreo rpidos. Los accesorios son capaces de llenar y evacuar rpidamente las
celdas portamuestra haciendo posible el anlisis de muchas muestras por hora segn una base
rutinaria. Se dispone de espectrofotmetros para realizar anlisis de velocidades de reaccin o
para analizar varios ingredientes simultneamente en una solucin. Muchas de las ventajas
actuales de los espectrofotmetros son resultado directo de la capacidad de los
microprocesadores utilizados en la automatizacin de instrumentos. Por ejemplo, existen
instrumentos comerciales completamente digitalizados y acoplados a calculadoras estadsticas
programables que realizan la adquisicin de datos sin intervencin del analista, los almacenan,
calculan espectros de primera y segunda derivada, localizan la posicin del pico e integran su
rea.
Los instrumentos para fotometra de absorcin se pueden clasificar como espectrofotmetros (si
incluyen un monocromador en su diseo) o como fotmetros de filtro. Los espectrofotmetros
dispersivos resultan costosos pero ofrecen la ventaja de tener una seleccin continua de la
longitud de onda. Su limitacin estriba en el rendimiento de radiacin, la dispersin de la luz y
su tamao. Un monocromador es un dispositivo ineficiente para transferir energa ptica, por lo
que la prdida de energa en estos intrumentos es considerable. Por ejemplo, si la anchura de
una rendija de salida es de 0.1 mm con altura de 10 mm, la apertura resultante para el detector
es del orden de 10
-6
mm
2
. Para detectar una pequea cantidad de energa que llegue al detector,
se requiere un tubo fotomultiplicador. El ruido del tubo degrada la relacin de seal a ruido y
establece demandas severas sobre los sistemas amplificadores y de registro, cuando se ha de
obtener una muy alta precisin.
Los fotmetros de filtro ofrecen una ventaja econmica sobre los instrumentos dispersivos,
adems de incrementar la luminosidad, particularmente cuando se utilizan filtros del tipo de
interferencia. Por supuesto, los filtros se pueden obtener para todos los intervalos de longitud de
onda que se desee. Si un anlisis requiere una medicin a una longitud de onda para la que no
existe un filtro especfico, se debe aceptar una sensibilidad inferior a la mxima utilizado otro
filtro semejante. En estos equipos generalmente se obtiene una mayor relacin de seal a ruido
que con un monocromador. Se utilizan detectores menos sensibles puesto que los niveles de
radiacin son superiores. En algunos anlisis rutinarios o repetitivos, la estabilidad de los filtros
ofrece algunas ventajas. Es posible seleccionar un filtro presionando simplemente un botn ya
que no existe peligro en los ajustes correctos de las longitudes de onda. A pesar de estas
ventajas, los intrumentos dispersivos modernos tienen muchas otras y resultan ms verstiles
que los fotmetros de filtro, los cuales actualmente, ya no se encuentran con tanta facilidad en
los laboratorios analticos.
Instrumentos de un solo haz
El tipo ms simple de espectrmetro de absorcin se basa en la operacin con un solo haz, en el
cual la muestra se examina para determinar la cantidad de radiacin absorbida a una longitud de
onda dada. Los resultados se comparan contra los de una referencia (generalmente contra los del
disolvente solo) que se obtiene en una determinacin separada. Los cambios en la intensidad de
la fuente y en la sensibilidad del detector contra la longitud de onda son los factores limitantes
en los intrumentos de un solo haz cuando se realizan medidas, por comparacin, a un solo valor
de longitud de onda. Estos intrumentos se utilizan bsicamente para la determinacin
cuantitativa de un solo componente cuando s analiza un gran nmero de muestras similares. Al
utilizar estos intrumentos de un solo haz, se deber conocer con anticipacin el valor mximo de
absorcin para el analito y establecer la longitud de onda correspondiente a este valor. El
material de referencia (prueba en blanco del disolvente solo) se coloca en el trayecto de la
radiacin y el intrumento se ajusta a 0% en transmitancia con el obturador bloqueando por
completo la radiacin hacia el detector y, al retirar el obturador, el valor de transmitancia se
deber ajusfar hasta 100%. Una vez realizados esos ajustes, se posiciona la muestra en la
trayectoria del haz y se lee el valor de transmitancia.
La concentracin se determina utilizando una curva de calibracin o mediante clculos
algebraicos. Dependiendo del instrumento utilizado, la lectura se puede realizar por observacin
directa de la deflexin en un medidor analgico, al establecer una escala de "balance nulo",
mediante el trazo en un registrador o en una impresin de valores digitales. El requisito obvio de
los instrumentos de un solo haz es el alto grado de estabilidad, tanto en la fuente como en el
detector ya que cualquier fluctuacin produce errores en la comparacin de las dos lecturas, la
de la muestra y la del disolvente. En el trabajo rutinario, en donde los errores de 1% resultan
insignificantes, la estabilidad del instrumento no constituye un factor limitante.
Fotmetros de Filtro
Se puede disear un fotmetro de absorcin, de bajo costo e incapaz de realizar barridos de
longitudes de onda, con un juego de filtros de absorcin. Estos instrumentos resultan adecuados
en muchos mtodos, especialmente para aquellos sistemas que presentan bandas de absorcin
anchas. Al tener un alto rendimiento de energa proporcionado por el filtro y una gran apertura
(a menudo de l/f), resulta innecesario el uso de amplificadores de seal. Los fotmetros de
filtro se operan como los espectrofotmetros de un solo haz.
Espectrofotmetros
La versin moderna de un espectrofotmetro de un solo haz se presenta en la Fig. Una fraccin
pequea de la energa proveniente de la fuente es separada mediante un divisor de haz y
utilizada como haz de comparacin para compensar cualquier variacin en la salida de la
lmpara, fluctuaciones en el voltaje de lnea e inestabilidades electrnicas. Se utilizan dos
fuentes de radiacin: una lmpara de halgeno de cuarzo para el intervalo visible y una lmpara
de deuterio para el ultravioleta. El medio dispersivo consiste en una red hologrfica Bausch &
Lomb. El detector es un tubo fotomultiplicador que cubre la mayor parte de la regin
ultravioleta-visible, adems de un sensor de estado slido de silicio que se utiliza para la regin
roja del espectro.
El equipo Spectronic 1001 posee un intervalo de 190 a 950 nm y una anchura de banda espectral
de 2 nm. Contiene dos microprocesadores interconstruidos, uno para cubrir las funciones
principales del instrumento y otro para controlar el monocromador. Los resultados se presentan
como registros alfanumricos en el instrumento, en una impresora opcional o en una
computadora optativa acoplada al equipo, y pueden presentarse como valores de transmitancia,
absorbancia o de concentracin (despus de una calibracin con estndares). La
microcomputadora permite realizar operaciones como: relaciones de absorbancia, clculos
estadsticos y determinaciones a diferentes longitudes de onda para la misma muestra. Se
encuentran disponibles muchos accesorios, como soportes para varias celdas de muestras, para
celda

semimicro de flujo, celdas con control termosttico o de control por temperatura, celda

de
paso largo, acoplamientos (interfaces) para registradores en tira de papel, para computadoras y
para equipos de muestreo automtico.
Instrumentos de Doble Haz
En los instrumentos de doble haz la radiacin monocromtica se divide en dos componente' con
potencias radiantes similares. Un haz pasa a travs de la muestra, y el otro a travs de la
solucin de referencia o del blanco. Sin embargo, la potencia radiante en el haz de referencia
vara con la energa de la fuente, la transmisin del monocromador, la transmisin a travs del
material de referencia y la respuesta del detector, factores que varan tam bien con la longitud de
onda. Si la salida del haz de referencia se puede mantener constante entonces la transmitancia
de la muestra puede registrarse directamente como la salida de haz de la misma. Existen varias
formas de mantener la salida del haz de referencia constante (1) crear un ciclo de control para
regular la sensibilidad del fotodetector a travs del voltaje de los dnodos, (2) controlar el ancho
de la rendija del monocromador mediante servomotores y guas mecnicas de rendijas, y (3)
instalar una cua ptica en la trayectoria de le radiacin para aumentar o disminuir
automticamente la cantidad de radiacin que llegan al detector.
El control automtico de ganancia es la opcin ms econmica de las tres anteriores ya que
involucra nicamente un circuito de control electrnico sin componentes mecnicos Cuando se
utiliza un monocromador de red permite mantener un ancho de rendija constante y, por
consiguiente, un poder de resolucin constante durante el barrido. Sin embargo el nivel de ruido
del fotodetector vara con la ganancia y no permanece constante durante dicho barrido.
El control automtico de rendijas es mucho ms costoso, ya que implica el uso de complicadas
guas de rendijas mecnicas. Y, aunque la ganancia y el nivel de ruido permanecen constantes, al
variar las anchuras de rendijas, se vara consecuentemente la resolucin.
Los sistemas de cua ptica poseen una utilidad intermedia. Se requieren sistemas mecnicos de
guas menos complicados que los de las rendijas. La ganancia del fotodetector as como la
resolucin, permanecen constantes durante el barrido.
Con excepcin del sistema de cua ptica, que se utiliza en los procedimientos de "cero ptico"
que se describirn posteriormente, no es necesario controlar la potencia del haz que pasa por la
solucin de referencia en la operacin de doble haz verdadero. Durante esta operacin, el
espectro de absorcin es corregido automticamente en cuanto a la res puesta del instrumento
como funcin de la longitud de onda, midiendo continuamente la relacin de P/Po. Puesto que
la inestabilidad de la fuente as como las variaciones de amplificador afectan a ambos haces en
forma similar, sus efectos se deben cancelar. La absorcin debida al disolvente se resta
automticamente si se le coloca en el haz de referenca. Otro beneficio lo constituye la
potencialidad de obtener la absorbancia diferencial de dos muestras colocadas en cada haz, lo
cual reduce el manejo manual de datos. En este tipo de determinaciones slo es posible registrar
diferencias espectrales en las muestras.
Espectrofotmetros de barrido de Doble Haz
Los espectrofotmetros de este tipo presentan un cambio continuo en funcin de la longitud de
onda. Uno de los haces se destina, permanentemente, a la solucin de referencia o al objetivo o
blanco, y el otro a la muestra. A medida que se barre el intervalo de longitudes de onda, se
realiza una comparacin automtica de las transmitancias de la muestra y de la referencia. La
relacin de los valores de la muestra a los de la referencia, despus de convertirlos a valores de
absorbancia si se desea, es graficada en un registrador como funcin de la longitud de onda. La
operacin automtica elimina muchos ajustes manuales que consumen tiempo, especialmente en
los anlisis cualitativos donde se deben trazar curvas complejas a lo largo de una amplia gama
espectral.
En el dispositivo ptico denominado de doble haz en tiempo, el haz de radiacin de la fuente,
visible o ultravioleta (A) entra al monocromador de red en la configuracin Czerny-Turner a
travs de la rendija de entrada (C). Los filtros de banda ancha contenidos en el rotor (B) se
posicionan automticamente a los valores de longitudes de onda requeridos para reducir la
cantidad de radiacin parsita y eliminar los rdenes indeseables de la red de difraccin. La
rejilla consiste realmente en dos redes adosadas cuya rotacin permite posicionar la regin a
investigar.


El haz pasa por las rendijas intermedias (D1, y D2) y regresa a la red para una segunda
dispersin. El haz ptico que emerge a travs de la rendija (E) se dirige, alternativamente, hacia
las celdas de la muestra y de la referencia (G1 y G2) por accin de un espejo de sectores
rotatorio (espejo obturador) (F) y los espejos de esquina. La parte abierta del sector deja pasar el
haz directamente hacia una trayectoria, mientras que la parte reflejante del espejo lo enva por
una segunda trayectoria. Esta es la base de la designacin de doble haz en tiempo. Cada haz
consiste en un pulso de radiacin que es separado, en el tiempo, por un intervalo oscuro;
posteriormente se dirige hacia el tubo multiplicador (H) para deteccin en las regiones de
ultravioleta-visible o hacia el detector de sulfuro de plomo (I) para la regin del infrarrojo
cercano, segn un procedimiento en tiempo compartido.
El espectrofotmetro Vanan UV-Vis-NIR (Ratio Recording/Scanning Double-Beam) (para
registro y barrido de doble haz), tiene una gama de longitudes de onda de 185 hasta 3152 nm,
diez velocidades de barrido que varan de 0.01 hasta 10 nm/s y anchuras de banda espectrales
desde 0.07 a 3.6 nm para el intervalo ultravioleta-visible, y de 0.16 hasta 14.4 nm para la regin
del infrarrojo cercano. Los detectores, las fuentes y las redes se controlan automticamente.
Incluye una impresora digital de 18 caracteres. Los microprocesadores interconstruidos
permiten seleccionar los formatos de salida, la calibracin automtica de cero, la reduccin de
datos, el tratamiento estadstico de estos, las rutinas de clculo de concentraciones con grficas
lineales o no lineales, las determinaciones cinticas y muchas otras alternativas. Se encuentran
disponibles muchos accesorios como: celdas termostticas, programadores automticos de cinco
celdas, adaptadores para microceldas y un accesorio para reflectancia.
En el procedimiento de cero ptico, los dos haces separados (entrecortados) (chopped) caen en
un solo detector. Si sus intensidades son idnticas, el amplificador presentar una seal de salida
de DC. Cualquier diferencia entre las intensidades de los haces producir una seal de AC con
la frecuencia del obturador. La seal desbalanceada se amplifica posteriormente y sirve para
dirigir el atenuador ptico hacia dentro o hacia afuera del haz de referencia. La fraccin del
espacio abierto que da el atenuador al haz de referencia, comparado con el espacio que da
cuando la muestra de referencia se encuentra en ambos haces, corresponde al porcentaje de
transmitancia de la muestra. Un enlace entre el servomotor que acciona al atenuador y la
plumita del registrador permite obtener el grfico de la transmitancia.
Espectrofotmetro de Doble Longitud de Onda
La espectrofotometra de doble longitud de onda se refiere a la investigacin fotomtrica de un
material, cuando pasa radiacin de dos longitudes de onda diferente a travs de la misma
muestra, antes de llegar al detector. La muestra se dispone cerca del detector para compensar
cualquier turbidez o dispersin que ocurra. La radiacin proveniente de la fuente entra a un
monocromador del tipo Czerny-Turner por la rendija 5, para formar una imagen de la mascarilla
sobre las redes
La espectrofotometra de doble longitud de onda aporta informacin de dos longitudes de onda
por unidad de tiempo. Con todos los dems factores constantes, los resultados obtenidos deben
ser ms tiles que los
obtenidos por una determinacin de absorbancia de doble haz. Este es
Espectrofotmetro de ptica Inversa y Configuracin de Diodo
En la tcnica de ptica inversa todas las longitudes de onda pasan a travs de la muestra. En el
equipo HP 8450A que se muestra en la Fig., el haz de radiacin procedente de las lmparas de
ultravioleta o visible es dirigido por una de las cinco posiciones del espejo director de haz,
regresa mediante un juego de espejos de esquina hacia otra seccin del espejo director de haz y
luego es proyectado a la entrada del monocromador.
Un
servomecanismo de precisin controla la posicin del director de haz, con una precisin mayor
que 3 segundos de arco, y puede interrumpirse de una posicin de una muestra a otra en menos
de 146 ms. Pueden utilizarse desde 2 hasta las 5 posiciones de la celda. La microcomputadora
registra las posiciones que se han utilizado y controla consecuentemente al director de haz. El
haz que penetra por la rendija del monocromador es centrado sobre la rendija de 0.06 mm por
medio de una retroalimentacin provocada por la luz reflejada por cada borde de la rendija,
hacia dos fotodiodos que reciben los reflejos luminosos de cada borde.
A la radiacin que pasa a travs de la rendija la dispersan dos redes hologrficas sobre un
substrato, dando dos espectros independientes que se enfocan en dos arreglos de fotodiodos, uno
para la regin visible y otro para el ultravioleta. Cada configuracin de diodos cuenta con 211
(de los cuales slo se utilizan 201) cubriendo los intervalos de 200-400 nm en el ultravioleta y
400-800 nm en el visible; cada diodo cubre 1 nm en el intervalo de ultravioleta y 2 nm en el
visible. Durante el procedimiento de encendido de la lmpara, la ganancia de cada diodo se fija
en uno de 16 valores, de modo que la salida del convertidor analgico a digital no exceda de
15/16 del intervalo total cuando convierta la seal del diodo a un valor digital para su medicin
y almacenamiento.
El instrumento hace pasar radiacin por las celdas de la muestra y de la referencia dos veces en
cada perodo de medicin de un segundo y tambin determina la corriente de oscuri dad de cada
detector, por lo menos, una vez por segundo. Para compensar cualquier irregularidad en las
celdas de las muestras, todas las celdas deben llenarse con un disolvente y realizar una medida
de balance. Posteriormente, el instrumento registrar y almacenar el espectro de balance para
utilizarlo en la correccin de medidas subsecuentes. La absorbancia se calcula como sigue:
En donde S y R representan las potencias radiantes que llegan al detector despus de haber
pasado por las soluciones de muestra y de referencia, respectivamente; D es el valor de corriente
de oscuridad y B es la correccin de balance. La microcomputadora permite almacenar hasta 7
espectros completos o 12 espectros parciales de sustancias estndar y un anli sis problema que
contenga hasta 12 componentes, permitiendo la adicin de cada espectro.
ESPECTROMETRA DE MASAS MOLECULAR
Es la de mayor aplicacin, es capaz de dar informacin acerca de:
De la composicin elemental de las muestras
De la estructura de las molculas orgnicas e inorgnicas
De la composicin cualitativa y cuantitativa de mezclas complejas
De la estructura y composicin de superficies slidas
De las relaciones isotpicas de tomos en las muestras
FUENTES DE IONES
El punto de arranque de un anlisis de espectrometra de masas es la formacin de iones del analito en
forma gaseosa y la proyeccin para el proceso de ionizacin. El aspecto de los espectros de masas para
distintas especies moleculares, dependen en gran medida del mtodo utilizado para la formacin de los
iones. Y existen dos categoras principales, fuentes de fase gaseosa y fuentes de desercin.
Las fuentes de iones se clasifican a menudo en fuentes duras o fuentes blancas. Las fuentes duras es
cuando existe un estado de energa altamente excitado de las molculas. Y las fuentes blandas cuando
existe poca fragmentacin.
FUENTE POR IMPACTO DE ELECTRONES
En la fuente de iones de impacto de electrones sencilla, los electrones son emitidos por un filamento
caliente de Wolframio o de Renio y se aceleran mediante un potencial de aproximadamente 70 v que se
aplica entre el filamento y el nodo. La ionizacin por impacto de electrones no es muy eficaz, y slo
alrededor de uan molcula entre un milln experimenta la reaccin primaria, donde M representa la
molcula de analito y M
+
, es su ion molecular.
M + e
-
M
+
+ 2e
-
FUENTES Y ESPECTROS DE IONIZACIN QUMICA
Los tomos gaseosos de la muestra se ionizan al colisionar con los iones producidos al bombardear con
electrones un exceso de gas reactivo. Normalmente se usan iones positivos, aunque la ionizacin qumica
de iones negativos, se usa ocasionalmente en aquellos analitos que contienen tomos muy
electronegativos, es el segundo de los procedimientos ms usados.
FUENTES DE IONIZACIN POR CAMPO
Aqu los iones se forman bajo la influencia de un campo elctrico lelevado (10
8

v
/cm) esos campos se
producen al aplicar elevados potenciales (10-20 kv) a emisores especialmente construidos, que estan
formados poor numerosas puntas finas cuyos dimetros son menores de un micrometro. A menudo estos
emisores, adquieren la forma de un hilo de Wolframio en el cual se ha formado filamentos microscopicos
de carbono por pirlisis de benzonitrilo.
El resultado de este tratamiento es la aparicin de centenares de microagujas de carbn que emergen
desde la superficie del hilo. El campo elctrico se concentra en las agujas emisoras y la ionizacin se
produce por un mecanismo de efecto tnel de mecnica cuntica en el que los electrones de analito son
extrados por las microagujas del nodo.
FUENTES DE DESORCIN POR CAMPO
En este tipo de fuentes se usa un emisor con mltiples puntas. El electrodo se coloca sobre una sonda que
puede retirarse del compartimiento de la muestra y recubrirse con una disolucin de la muestra. Despus
de reinsertar la sonda en el compartimiento de la muestra, la ionizacin se produce por la aplicacin de un
potencial elevado a este electrodo.
DESORCIN IONIZACIN POR LSER ASISTIDO POR UNA MATRIZ
Este mtodo permite obtener informacin sobre los pesos moleculares exactos de biopolmeros polares en
un intervalo de masas moleculares donde se mezcla una disolucin acuosa-alcohlica de la muestra con
un gran exceso de una sustancia matriz que adsorbe la radiacin. La disolucin resultante se evapora a la
superficie de una sonda metlica que se usa para la introduccin de la muestra. La muestra slida se
expone a la accin de un haz de lser pulsante, provocando la sublimacin del analito a iones que son
introducidos en un espectrmetro de tiempo de vuelo para el anlisis de masas.
IONIZACIN POR ELECTRONEBULIZACIN
Usado para el anlisis de biomoleculas con pesos moleculares iguales o mayores a 100 000 daltons. Se
realiza en condiciones atmosfricas de presin y temperatura. La disolucin de la muestra se bombea a
travs de una aguja capilar de acero inoxidable a un flujo de microlitros por minuto. La aguja se mantiene
a un potencial de varios microvoltios y la niebla de finas gotitas cargadas resultante pasa a travs de un
capilar de desolvatacin donde se produce la evaporacin del disolvente y de las molculas del analito
donde estas adquieren la carga. Debido a que las gotitas se vuelven ms pequeas por la evaporacin del
disolvente su densidad de carga aumenta producindose la desercin de los iones en la atmosfera gaseosa.
FUENTES DE BOMBARDEO CON TOMOS RPIDOS
Con este tipo de fuentes, las muestras en un estado condensado, a menudo en una matriz de una
disolucin de glicerol, se ionizan por bombardeo con tomos de Xenn o Argn a varios KeV. Tanto los
iones positivos como negativos del analito son expulsados de la superficie de la muestra por un proceso
de desercin. La matriz lquida ayuda a disminuir la energa de la red la cual debe vencerse para que se
resorba un ion de la fase condensada y proporcione una manera de evitar el calentamiento producido por
el bombardeo.
Los mtodos de ionizacin descritos requieren que los agentes de ionizacin acten sobre muestras
gaseosas. Tales mtodos no son aplicables a muestras no voltiles o trmicamente inestables. Los mtodos
de desercin prescinden de la volatilizacin y de la posterior ionizacin de la molcula del analito. En su
lugar se suministra energa a la muestra slida o lquida del analito de diversas maneras, de modo que se
provoca la formacin directa de iones gaseosos.
SISTEMAS DE ENTRADA
La finalidad del sistema de entrada es permitir la introduccin de una muestra representativa en la fuente
de iones con la mnima prdida de vaco y pueden ser:
SISTEMAS INDIRECTOS DE ENTRADA
La muestra se volatiliza externamente y se introduce en la regin de ionizacin que esta a baja presin.
ENTRADAS CROMATOGRAFICAS Y DE ELECTROFORESIS CAPILAR
Los espectrmetros de masas regularmente estn acoplados a sistemas de cromatografa de gases o de
lquidos de alta eficiencia o columnas de electroforesis capilar que permiten la separacin y
determinacin de los componentes de mezclas complejas. El acoplamiento de una columna
cromatogrfica o de elctroforesis capilar a un espectrmetro de masas requiere la utilizacin de sistemas
de entrada especiales.
ANALIZADORES DE TRAMPA DE IONES
Es un dispositivo en el que los aniones o cationes gaseosos pueden formarse y quedar confinados durante
largos perodos de tiempo por la accin de campos elctricos o magnticos. Consta de un electrodo anular
y un par de electrones colectores. Al electrodo anular se le aplica un potencial de radiofrecuencia variable
mientras que los dos electrodos colectores estn conectados a tierra. Los iones con un valor de m/z
adecuado circulan en una rbita estable dentro de la cavidad que est rodeada por el anillo. Cuando se
incrementa el potencial de radiofrecuencia, las rbitas de los iones ms pesados llegan a estabilizarse,
mientras que las de los iones ms ligeros se desestabilizan, producindose su colisin con la pared del
electrodo anular.
Cuando este dispositivo funciona como un espectrmetro de masas, una rfaga de iones del analito
procedente de una fuente de impacto de electrones o de ionizacin qumica penetra a travs de una rejilla
en el electrodo colector superior. Se realiza entonces un barrido del potencial de radiofrecuencia y los
iones son atrapados; cuando se desestabilizan, abandonan la cavidad del elecrodo anular a travs de una
abertura en el electrodo colector inferior. Los iones emitidos pasan seguidamente al detector.
DETECTORES Y TRANFORMADORES DE SEAL
Son los aparatos que nos ayudan y nos dan la medicin de los valores que nos proporciona la lecturas de
las muestras, existen diferentes mtodos para realizar esta funcin, algunos de ellos son:
Instrumentos de transformada de Fourier
Espectrmetros de masas computarizados
APLICACIONES DE LA ESPECTROMETRA DE MASAS MOLCULAR
Identificacin de compuestos puros
Anlisis de mezclas por mtodos espectrales de masas acoplados
Determinacin cuantitativa de especies moleculares
Identificacin de compuestos por comparacin de espectros
ESPECTROSCOPIA RAMAN
En 1928 el fsico hind C.V. RAMAN descubri que la longitud de onda de una pequea fraccin de la
radiacin dispersada por ciertas molculas, difiere de la del haz incidente y adems que los
desplazamientos de la longitud de onda dependen de la estructura qumica de las molculas responsables
de la dispersin. Esta teora demuestra que el fenmeno esta relacionado con el mismo tipo de cambio
vibracionales cuantizadas que se producen en la absorcin infrarroja. Por lo tanto la diferencia de la
longitud de onda entre la radiacin de onda incidente y la dispersada corresponden a las longitudes de
onda de la regin del infrarrojo medio. A pesar que el espectro de infrarrojo y el espectro de dispersin
RAMAN suelen parecerse mucho una ventaja importante del espectro de RAMAN, se debe al hecho de
que el agua no produce interferencias y por lo tanto es posible obtener los espectros RAMAN de
disoluciones acuosas; adems se pueden usar cubetas de vidrio o de cuarzo.
TEORA DE LA ESPECTROSCOPIA RAMAN
Los espectros RAMAN se obtienen al irradiar una muestra con una fuente lser de radiacin
monocromtica visible o infrarrojo. Durante la irradiacin, se registra el espectro de la radiacin
dispersada un cierto ngulo (90
o
) con un espectrmetro. Las lneas RAMAN son el 0.001 por 100 de la
intensidad de la fuente y en consecuencia su deteccin y medida resulta ms difcil que la del infrarrojo.
EXCITACIN DE LOS ESPECTROS RAMAN
En los espectros RAMAN hay tres tipos de radiaciones emitidas: Dispersin Stokes, Dispersin anti-
Stokes y Dispersin Rayleigh.
Las primeras se encuentran a unos nmeros de onda inferiores al de las radiaciones Rayleigh mientras que
los picos anti-Stokes aparecen a nmeros de onda superiores a las del pico Rayleigh. La dispersin
Rayleigh tiene una longitud de onda igual al de la fuente de excitacin por lo tanto es ms intensa que las
otras, las lneas anti-Stokes son apreciablemente menos intensas que las lneas Stokes, por esta razn solo
se suele usar la parte Stokes del espectro. Adems en la abscisa se indica la frecuencia en cm
-1
. La
fluorescencia puede interferir en la observacin del desplazamiento Stokes, pero no en el anti-Stokes, por
ello las muestras fluorescentes este tipo de seales pueden ser ms tiles a pesar de su menor intensidad.
La magnitud de los desplazamientos RAMAN es independiente de la longitud de onda de excitacin, de
este modo se puede ver que no importa que la excitacin se realice con un lser de Criptn o de
Helio/Nen o un lser Nd.
INTENSIDAD DE LOS PICOS RAMAN NORMALES
La intensidad de potencia de un pico RAMAN normal depende de la forma compleja de la polarizabilidad
de la molcula, de la intensidad de la fuente y de la concentracin del grupo activo. En ausencia de
absorcin, la potencia de la emisin RAMAN aumenta con la cuarta potencia de la frecuencia de la
fuente; sin embargo pocas veces se puede aprovechar esta ventaja debido a que la probabilidad de la
radiacin ultravioleta origine una descomposicin.
Por lo general las intensidades RAMAN son directamente proporcionales a la concentracin de la especie
activa. LA espectroscopia RAMAN se parece ms a la Fluorescencia que a la Absorcin, donde la
relacin entre la intensidad y la concentracin es logartmica.
INSTRUMENTACIN
Los instrumentos para la espectroscopia RAMAN constan de tres componentes, una fuente lser, un
sistema de iluminacin de la muestra y un espectrmetro adecuado.
Las fuentes utilizadas son casi siempre lseres debido a su alta intensidad, necesaria para producir
dispersin lo suficientemente intensa para poderse medir con una relacin seal ruido razonable.
TIPO DE FUENTE LONGITUD DE ONDA (nm)
Ion Argn 488 514.5
Ion Criptn 530.9 647.1
Helio/Nen 632.8
Lser de diodos 782 830
Nd/YAG 1.064
La manipulacin de las muestras puede usarse el vidrio de las ventanas, lentes y otros componentes
pticos. En consecuencia se pueden examinar muestras muy pequeas ya que la fuente lser se puede
enfocar con facilidad sobre una zona pequea. Muchas veces el recipiente para la muestra es un capilar de
vidrio de un mm de dimetro externo y unos 5 cm de largo (muestras lquidas). Para muestras slidas se
llena una fina cavidad con una muestras finamente pulverizada. Para las muestras gaseosas se utilizan las
cubetas de pasos mltiples.
ESPECTROMETROS RAMAN
La mayora de los espectros RAMAN que se comercializan son instrumentos de transformada de Fourier
con detectores de Germanio enfriados o instrumentos multicanal con dispositivos de acoplamiento de
carga. Estos detectores a diferencia de los tubos fotomultiplicadores son sensibles a la radiacin
producida por los lseres de diodo los cuales provocan la excitacin RAMAN de muchos compuestos sin
generar una fluorescencia apreciable.
APLICACIONES DE LA ESPECTROSCOPIA RAMAN
La espectroscopia RAMAN se ha utilizado en el anlisis cualitativo y cuantitativo de sistemas
inorgnicos, orgnicos y biolgicos.
APLICACIONES CUANTITATIVAS
Los espectros RAMAN muestran menos picos que los espectros de infrarrojo. As es menos probables el
solapamiento de los picos en las mezclas, y las medidas cuantitativas son ms sencillas.
Es posible realizar anlisis cuantitativos de muestras muy pequeas, debido a que los haces lser se
pueden enfocar con mucha precisin. Para estos anlisis se utilizan los instrumentos nominados
microsondas de lser.
OTROS TIPOS DE ESPECTROSCOPIA RAMAN
Con el desarrollo de los lseres sintonizables, a principio de los 70 s se desarrollaron varios mtodos
nuevos de espectroscopia RAMAN.
Espectroscopia RAMAN de resonancia
Espectroscopia RAMAN de superficie aumentada
Espectroscopia RAMAn no lineal.
DEFINICION DE pH
Srensen en 1909, propuso el trmino de pH, el cul defini como el cologaritmo decimal (menos
logaritmo decimal), de la concentracin de los iones hidronio:
expresin que nos permite un manejo ms sencillo de esta variable. Esta concentracin , un promedio de
la actividad de los iones hidronio, la actividad, es una definicin mas adecuada de pH
sin embargo, emplearemos para el clculo de pH, la primera expresin.
ESCALA DE pH
Para su establecimiento, se toman como base disoluciones de cidos y bases fuertes, con
concentraciones de 1M. como mximo. El rango de variacin de la concentracin de iones hidronio en
disolucin alcanza 10
14
unidades a temperatura ambiente. Con la definicin de pH dada anteriormente, la
escala toma valores desde cero (cido fuerte 1M) hasta 14 (base fuerte 1M); donde el punto medio es 7,
que representa soluciones con un pH neutro (ni cidas ni bsicas).

CONSTANTES DE REACCION ACIDEZ, DE BASICIDAD
Para calcular la 1 de estas constantes, es necesario partir del equilibrio establecido en una reaccin
cido-base cualquiera:
donde HA es un cido cualquiera y A
-
es su base conjugada; B es una base cualquiera y HB
+
es su cido
conjugado, considere que hacia los productos es el sentido A de la reaccin y hacia los reactivos el
sentido B. Recordando nuestro concepto de equilibrio qumico, concluimos que la expresin de equilibrio
para el sistema anterior es:
es decir, la constante de equilibrio, es la razn de la constante de acidez del sistema A (KaA) entre la
constante de acidez del sistema B (KaB):
La constante de reaccin o de equilibrio, es una medida de que tanto ocurre la reaccin, si sta es igual a
1, significa que hay un 50 % de reactivos y un 50 % de productos presentes en la solucin; s presenta un
valor menor de 1, quiere decir, que la reaccin no se esta llevando a cabo, porque hay mas reactivos que
productos en la disolucin; y si sta es mayor que 1, concluimos que, la reaccin es total, ocurre de
manera expontanea y decimos que es una reaccin cuantitativa (Keq mayor o igual a 10
3
p% es mayor o
igual a 99%).
Partiendo de la reaccin de disociacin de un cido cualquiera:
la expresin de la constate de equilibrio es:
en disoluciones diluidas de cidos, el agua se encuentra en concentracin mayor que las especies en
disolucin, por lo tanto la concentracin de esta permanece constante y se puede incorporar en la
constante de equilibrio, obtenindose as una nueva constante llamada constante de acidez:
La constante de acidez es una medida de la fuerza del cido, los cidos fuertes no tienen constante de
acidez pues estos se disocian totalmente en agua, y los cidos e fuerza media o dbil lo hacen de manera
parcial. Los valores de dichas constantes son muy pequeos por lo que normalmente se expresan como
el cologaritmo de la constante de acidez (Ka):
Partamos ahora de la reaccin de hidrlisis para una base cualquiera:
la expresin de la constante de equilibrio es:
pero al igual que en la constante de acidez la concentracin del agua es constante, la cual se incorpora
en la constante de equilibrio, obtenindose as, la constante de basicidad:
La constante de basicidad, al igual que en los cidos, es una mediada de la fuerza de la base, y las bases
fuertes no tienen constante de basicidad, pues stas se hidrolizan totalmente en agua, y las bases de
fuerza media o dbil lo hacen de manera parcial. Los valores de dichas constantes son muy pequeos por
lo que normalmente se expresan como el menos logaritmo de la constante de basicidad (Kb):
La Ka y la Kb guardan la siguiente relacin:
efectuando la operacin:
simplificando:
Recuerde que, los cidos HA y HB
+
, as como las bases A
-
y B, son hipotticos, por lo tanto, pueden
dividirse.
De lo anterior deducimos que: el producto de las constantes de acidez y basicidad, es igual al producto
ionico del agua:
y que s a esta expresin le aplicamos el cologaritmo base 10, obtenemos el pK del agua:
Finalmente, si se tiene una reaccin cido-base cualquiera, para que esta sea factible es necesario que
haya una diferencia significativa entre las constantes de acidez de las especies involucradas. De manera
general, un cido reaccionar con toda base que se encuentre a su derecha en la escala de pH para
formar el cido y la base conjugada correspondiente:
A continuacin, presentamos unas tablas que muestran las constantes de acidez y basicidad para algunos
cidos y bases:
Constantes de acidez para algunos cidos a 25
o
C.
NOMBRE FORMULA Ka1 Ka2 Ka3 Ka4
Actico CH3COOH 10
-4.75

Alanina CH3CH(NH2)CO2H 10
-2.35
10
-9.89

Arsnico H3AsO4 10
-2.22
10
-7
10
-11.52

Arsenioso H3AsO3 10
-9.22
10
-13.52

Benzoico C6H5COOH 10
-4.20

Brico H3BO3 10
-9.20

Carbnico H2CO3 10
-6.34
10
-10.32

Cloroactico CLCH2COOH 10
-2.82

Ctrico HOOC(OH)C(CH2COOH) 10
-3.13
10
-4.77
10
-6.40

Etilendiamino tetrac... (CO2H)2NCH2CH2N(CO2H) 2 10
-2.00
10
-2.66
10
-6.16
10
-10.26
Frmico HCOOH 10
-3.75

Glicina H2NCH2COOH 10
-2.35

Cinahdrico HCN 10
-9.14

Fluorhdrico HF 10
-3.17

Sulfihdrico H2S 10
-7.04

Hipocloroso HOCL 10
-7.96

Ydico HIO3 10
-0.70

Lctico CH3CHOHCOOH 10
-3.85

Maleico Cis-HOOCCH:CHCOOH 10
-1.82
10
-6.50

Mlico HOOCCHOHCH2COOH 10
-3.40
10
-5.05

Nitroso HNO2 10
-3.30

Oxlico HOOCCOOH 10
-1.19
10
-4.21

Fenol C6H5OH 10
-9.96

Fosfrico H3PO4 10
-1.96
10
-7.12
10
-12.32

Fosforoso H3PO3 10
-1.30
10
-6.58

o-Ftlico C6H4(COOH)2 10
-2.92
10
-5.41

Pcrico (NO2)3C6H5OH 10
-0.38

Propanoico CH3CH2COOH 10
-4.89

Saliclico C6H4(OH)COOH 10
-2.96

Sulfmico NH2SO3H 10
-1.00
Sulfrico H2SO4 >>1
Sulfuroso H2SO3 10
-1.89
10
-5.30

Tricloroactico Cl3CCOOH 10
-0.89

Constantes de basicidad para algunas bases a 25
o
C
NOMBRE FORMULA Kb1 Kb2
Amoniaco NH3 10
-4.76

Anilina C6H5NH2 10
-9.40

1-Butilamina CH3(CH2)2CH2NH2 10
-3.39

Dietilamina (CH3CH2)2NH 10
-3.07

Dimetilamina (CH3)2NH 10
-3.23

Etanolamina HOC2H4NH2 10
-4.49

Etilamina CH3CH2NH 10
-3.37

Etilndiamina NH2C2H4NH2 10
-4.07
10
-7.15
Glicina HOOCCH2NH2 10
-11.64

Hidrazina H2NNH2 10
-5.89

Hidroxilamina HONH2 10
-8.04

Metilamina CH3NH2 10
-3.32

Piperidina C5H11N 10
-2.89

Piridina C5H5N 10
-8.77

Trietilamina (CH3CH2)3N 10
-3.27

Trimetilamina (CH3)3N 10
-4.20

tris-(hidroximetil)-aminoetano (HOCH2)3CNH2 10
-5.92

LEY DE DILUCIN DE OSTWALD
Nos permite determinar el grado de disociacin o de hidrlisis de un cido o de una base
respectivamente, s se conoce la constante de acidez o de basicidad segn sea el caso y la concentracin
inicial del mismo.
De acuerdo con las concentraciones dadas en el equilibrio para las reacciones de disociacin y de
hidrlisis siguientes:


anteriormente se menciono, que las constantes de acidez y basicidad, son una medida de la fuerza del
cido o la base en cuestin, en realidad es una medida de que tanto ocurren dichas reacciones, por lo
tanto, podemos substituir las concentraciones en el equilibrio dentro de la constante de acidez o basicidad
segn sea el caso, obtenemos la siguiente ecuacin:
simplificando:
se puede resolver la ecuacin de segundo grado resultante al sustituir los valores de la constante y la
concentracin inicial en ambos casos, o bien utilizar la igualdad y efectuar la operacin constante entre
concentracin inicial. Finalmente los cidos y las bases se clasifican segn su fuerza de acuerdo a la
siguiente tabla:
Tipo de cido o base Ka/C0 Kb/C0 alfa (%)
FUERTE >=8.1 >=90
DEBIL <=10
-2
<=10
FUERTE 10
-2
< K/C0 < 8.1 10 < alfa (%)< 90
ECUACIONES PARA EL CLCULO DE pH
Partiendo del equilibrio ms simple (cido dbil), cuya base conjugada ser una sal de sodio:
se obtiene su constante de equilibrio:
donde HA es igual a CA y A
-
es igual a CB, y despejando los protones obtenemos:
balanceando la masa, tenemos:
y balanceando cargas, tenemos:
finalmente, se substituyen las ecuaciones anteriores en la constante de equilibrio una vez despejados los
protones, obtenemos la ecuacin general para calcular el pH:
A partir de esta ecuacin, se obtienen las ecuaciones para calcular el pH de cidos o bases fuertes,
dbiles o de fuerza media, tomando en cuenta la ley de dilucin de Ostwald, as como, determinar si la
concentracin de iones H3O
+
o de iones OH
-
, es o no despreciable. Dichas ecuaciones son las siguientes:
para una cido fuerte,
cido de fuerza media:
cido dbil:
base fuerte:
base de fuerza media:
base dbil:
para calcular el pH de la mezcla de un cido con su base conjugada:
para la mezcla de un cido y base de diferente par:
Experimentalmente, es posible saber si nuestra sustancia es un cido o una base empleando algn
indicador cido-base; y una vez entendido el equilibrio cido-base en medio acuoso, podemos
comprender lo que sucede en medio no acuoso.
Los indicadores cido - base son usados para determinar el punto final de la titulacin de manera visual
mediante cambios de color. Los indicadores empleados en las titulaciones cido - base son cidos o
bases dbiles orgnicos. El color se debe a que ste se encuentra ionizado y el cambio de color se debe
a la forma no ionizada.
Para lo cul puede escribirse la ecuacin de Henderson - Hasselbach:
El indicador cambia de color en un rango de pH determinado, cundo ambas formas del indicador son
coloridas slo se observa el color cuya concentracin es mayor, esto es en una relacin 10 : 1.
Basndose en estos datos puede calcularse el rango de pH necesario para pasar de un color a otro, para
el color de la forma ms ionizada la ecuacin es:
para el color de la forma ionizada:
Por lo tanto, el pH de un color a otro vara de pka +1, esto significa un cambio de pH de dos unidades y el
rango de transicin de casi todos los indicadores es de dos unidades de pH. En un punto intermedio de la
concentracin de la forma ionizada y no ionizada del indicador el pH es igual al pka. Tomando en cuenta
lo anterior podemos elegir el indicador adecuado para nuestra valoracin. A continuacin presentamos
una tabla de indicadores comunes:
NOMBRE VIRE(pH)
COLOR
ACIDO
COLO
BASICO
pKa
H
2
O
pKa
MeOH
pKa
EtOH
pKa
DMFA
pKa
DMSO
Violeta de Metilo 0.5 - 1.5 amarillo azul 1
Amarillo de Metilo 1.2 - 4.0 rojo amarillo 3.3 3.3 3.1
Azul de Bromofenol 3.0 - 4.6 amarillo azul 3.8 8.9 9.5
Naranja de Metilo 3.1 - 4.4 rojo anaranjado 3.5 3.8 3.4
Verde de
Bromocresol
3.8 - 5.4 amarillo azul 4.7 9.8 10.6 8.7 7.3
Rojo de Metilo 4.2 - 6.0 rojo amarillo 5.0 9.0 10.5
Rojo de Clorofenol 4.8 - 6.4 amarillo rojo 6.0
p- nitrofenol
5.6 - 7.6

incolora amarillo 6.6
Azul de Bromotimol 6.0 - 7.6 amarillo azul 7.1
Rojo Fenol
6.4 - 8.0

amarillo rojo 7.8 12.8 13.5 13.7
Rojo Cresol
7.8 - 8.8

amarillo rojo 8.1
Azul de Timol
8.0 - 9.6

amarillo azul 8.9
fenoftalena
8.0 - 9.8

incoloro rojo 9.3 15.3 16.3
Timoftaleina
9.3 - 10.5

incoloro azul 9.9
Amarillo deAlizarina 10.0 - 12.0 amarillo violeta 11.1
Prpura de m- cresol 1.2 - 1.8 rojo amarillo 1.5
DMSO = Dimetilsulfxido DMFA = Dimetilfoarmamida EtOH = Etanol o Alcohol Etilico MeOH = Metanol o
Alcohol Metilico


Una valoracin cido - base en sistema no acuoso, se realiza principalmente, porque es mas
cuantitativa en un disolvente no acuoso y el sistema mejora la cuantitatividad notablemente, o con la
finalidad de mejorar la solubilidad de las especies reaccionantes sin afectar la cuantitatividad de la
reaccin.
CLASIFICACIN DE LOS DISOLVENTES
En teora, los disolventes pueden clasificarse en tres grupos segn su acidez o basicidad, y tambin por
su constante dielectrica.
Segn su acidez o basicidad se clasifican en:
a. Anfiprticos, aquellos que poseen propiedades tanto cidas como bsicas, por ejemplo: agua,
etanol y metanol. Estos son disolventes ionizables. Siendo posible una reaccin de autoprotlisis.
b. Aprticos, aquellos que no tienen un grado de acidez ni de basicidad apreciable, llamados
disolventes inertes, por ejemplo: benceno y tetracloruro de carbono.
c. Protognicos o donadores de protones, como pueden ser: el cido actico, cido frmico,
anhidrido actico, etc.
d. Protoflicos o aceptores de protones (amoniaco liquido, piridina, etilendiamina, etc.
Finalmente, existen disolventes que tienden a ser protognicos o protoflicos, pero que al igual que los
disolventes anfiprticos, dan lugar a reacciones de autoprotlisis.
Segn su constante dielectrica, tenemos los que tienen una constante dielectrica mayor que 20 y los que
tienen una constante dielectrica menor que 20.
DISOLVENTE
CONSTANTE DIELECTRICA ( )
pKHS
Agua =1 14.0
Metanol
20
16.9
Etanol
20
19.5
Dimetilformamida 18.0
Acido Actico
20
14.5
Dimetilsulfxido
20
30.0
TEORA DE LAS VALORACIONES CIDO-BASE EN MEDIO NO ACUOSO
Como ya se mencion, los disolventes anfiprticos sufren reacciones de autoprotlisis de acuerdo con los
siguientes equilibrios:
ejemplo a)
cuya constante de autoprotlisis es:
ejemplo b)
cuya constante de autoprotlisis es:
La constante de autoprotlisis, es una medida de que tanto ocurre la reaccin. De manera general, la
reaccin de autoprotlisis puede ser representada como:
donde HS es la molcula del disolvente, H2S
+
el cido conjugado de la molcula del disolvente (in lionio)
y S
-
la base conjugada del disolvente (in liato); de manera que su constante de autoprotlisis es:
su valor depende de la capacidad del disolvente para aceptar o donar protones as como de su constante
dielectrica.
Al disolver un cido HA en un disolvente anfiprtico HS, este ltimo se comporta como base aceptando un
protn de acuerdo con el siguiente equilibrio:
de este equilibrio, podemos deducir la constante de cidez para el cido HA en el disolvente HS:
siendo est es un medida cuantitativa de la fuerza del cido en dicho disolvente; a mayor constante de
acidez, mayor fuerza del cido en el disolvente.
Por otro lado, la disolucin de una base en un disolvente anfiprtico, da lugar a una reaccin de protlisis:
dicho equilibrio nos conduce a una constante de basicidad, la cual expresa cuantitativamente la fuerza de
la base A
-
en un disolvente HS:
de igual manera, mientras mayor sea la constante, ms fuerte ser la base en dicho disolvente.
Finalmente, el producto de la constante de acidez y de la constante de basicidad para un mismo
disolvente, da lugar a la constante de autoprotlisis del disolvente:
esta ecuacin, realciona la fuerza de un cido con su base conjugada. La cual puede ser expresada de la
siguiente manera:
o tambin como:
Ahora que conocemos cuales son los disolventes no acuosos y como se clasifican, veremos a
continuacin como se comportan los cidos y las base en dichos disolventes.
DEFINICIN DE pH EN SISTEMAS NO ACUOSOS
En un disolvente anfiprotico el pH se define como el cologaritmo de la actividad del protn solvatado:
dado que la fuerza ionica de disoluciones de cidos o bases es pequea, entonces el coeficiente de
actividad tiende a la unidad, por lo tanto, la concentracin del protn solvatado es igual a la actividad, por
lo cual, el pH en sistemas no acuosos se define como el menos logaritmo de la concentracin del protn
solvatado:
ESCALA DE pH
Su magnitud, depende de la expresin logaritmica de la constante de autoprotlisis del disolvente en
cuestin, es decir, de su pKHS. Por lo que la escala va de cero hasta el pKHS del disolvente. Esto se debe a
que si sacamos el pH de una disolucin del cido mas fuerte en contenida en la misma (H2S
+
), cuya
concentracin es 1 M,
partiendo del equilibrio:
el pH se calcula con la siguiente ecuacin:
como estamos considerando una concentracin 1 M de cido fuerte, entonces, el pH, es igual a cero; y al
sacar el pH de una disolucin de la base mas fuerte contenida en esta (S
-
), cuya concentracin es 1 M,
partiendo del equilibrio:
el pH de la disolucin es:
como:
sacando el cologaritmo, tenemos que, el pH es igual al pK del disolvente.
Longitud de la escala de pH de algunos disolventes no acuosos
DISOLVENTE LONGITUD DE LA ESCALA DE pH
Agua 0 - 14.0 unidades de pH
Metanol 0 - 16.9 unidades de pH
Etanol 0 - 19.5 unidades de pH
Dimetilformamida 0 - 18.0 unidades de pH
Acido Actico 0 - 14.5 unidades de pH
Dimetilsulfxido 0 - 30.0 unidades de pH
ECUACIONES DE pH EN SISTEMAS NO ACUOSOS
Las ecuaciones de pH para sistemas no acuosos, tiene una deduccin particular para cada disolvente,
muy similar a las ecuaciones de pH en medio acuoso. Pero, para fines prcticos no se llevaran a cabo.
Usamos las mismas ecuaciones de pH para sistemas acuosos y empleamos el menos logaritmo de la
constante de autoprotolisis (pKHS) del disolvente, se llega a la ecuacin de pH. En las ecuaciones de pH
para medio acuoso, sustituimos el pK del agua por el pKHS del disolvente. As por ejemplo, tenemos que la
ecuacin para el calculo de un cido fuerte en disolucin acuosa es:
tomando en cuenta el equilibrio para un cido fuerte:
la ecuacin para un cido fuerte en solucin no acuosa es:
y para una base debil en disolucin acuosa es:
donde:
entonces, la ecuacin para una base debil en solucin no acuosa es:

TABLA DE CONCENTRACIONES
Una tabla de concentraciones, es una herramienta que nos auxilia al momento de calculas los cambios en
la composicin de una disolucin as como la concentracin de las especies qumicas en disolucin
durante la titulacin, permitiendo conocer variables como pH o potencial de la disolucin.
Es recomendable construirla usando como base una concentracin inicial del reactivo por titular C0 y la
adicin del reactivo titulante en una cantidad hipottica, donde habra una cantidad mnima de este, la
cual no modifica de manera apreciable las condiciones iniciales de nuestro sistema.
Posteriormente, calculamos un punto antes del punto de equivalencia, el punto de equivalencia y dos
puntos despus del punto de equivalencia; basandonos en la estequiometria de la reaccin.
Dichas concentraciones hipotticas basadas en la estequiometria de la reaccin se denotan como x y, se
deducen a partir de la reaccin balanceada. A continuacin, se da una tabla modelo.
Tabla de concentraciones para una reaccin cuantitativa en cualquier proporcin
etapa aA + bB cC dD
inicial
x 0
C0
agregado xC0
A.P.E.
0 x
C0(1 x)
0
xC0
xC0
P.E.
x
C0
C 0
C0
C0
D.P.E.
x
0
C0(x )
C0
C0
La elaboracin de la tabla de concentraciones, es necesario para realizar el estudio terico, mismo que se
explica en la siguiente pgina.
CUANTITATIVIDAD
Una reaccin se considera 100% cuantitativa cuando el reactivo por titular reacciona totalmente con una
cantidad qumicamente equivalente del reactivo titulante. La cuantitatividad en el punto de equivalencia,
se define como el porcentaje de la cantidad inicial del reactivo titulado que ha reaccionado hasta el punto
de equivalencia. Cabe sealar que no hay reacciones 100% cuantitativas, sino, reacciones cuantitativas;
consideradas como estas, aquellas con una cuantitatividad mayor o igual al 99% en el punto de
equivalencia, ya que siempre queda un remanente despreciable sin reaccionar, y estas son las que nos
interesan para valoraciones analticas. Mas adelante se muestra como se realiza el clculo de
cuantitatividad a partir de la tabla de concentraciones que es una manera general para realizarlo, pues
existe una forma particular para este clculo dependiendo de la fuerza del cido o de la base en cuestin.
ESTUDIOS TEORICOS
Un estudio terico, se realiza con la finalidad de conocer aspectos importantes acerca de nuestro sistema
en cuestin, como pueden ser: el indicador a usar, el punto de equivalencia terico, el medio a usar, entre
otras. Y no es otra cosa que, una aproximacin a las condiciones reales de operacin de nuestro sistema.
El estudio terico, esta conformado por una curva de valoracin terica, la cual nos indica el punto de
equivalencia de la reaccin, el rango de vire del indicador que se vaya a emplear y, por otro lado nos
ayuda a hacer una correcta seleccin del indicador, as como, decirnos si es o no factible una valoracin.
La cuantitatividad de la reaccin en el punto de equivalencia, se calcula a partir de la tabla de
concentraciones, para ello, se debe tomar en cuenta el equilibrio que se establece en el punto de
equivalencia, el cual se sustituye en la constante de equilibrio de la reaccin, con la finalidad de despejar
epsilon; considerese el siguiente equilibrio en disolucin:
si las concentraciones en el equilibrio son:


la constante de equilibrio de la reaccin es:
sustituyendo en esta las concentraciones en el equilibrio tenemos:
despejando epsilon:
finalmente:
La curva terica, se realiza a partir de la tabla de concentraciones, el pKa de las especies reaccionates y
las ecuaciones de pH; y el indicador se selecciona a partir del intervalo de pH en el que vire el indicador,
dicho intervalo, se determina de acuerdo con un limite de error, que es fijado, tomando en cuenta la
cuantitatividad de la reaccin en el punto de equivalencia (usando submltiplos de uno), este intervalo se
calcula tomando en cuenta los equilibrios qumicos establecidos antes y despus del punto de
equivalencia, usando las ecuaciones de pH empleadas en estos clculos de acuerdo con la siguiente
ecuacin:
Una vez calculado el intervalo de pH en el que virara el indicador, entonces se procede a la seleccin del
mismo, de acuerdo con los siguientes criterios:
a. S, nuestro sistema va de un pH cido a un bsico, entonces nos interesa lo que suceda con el
indicador en su forma bsica; y si el pH va en sentido contrario, nos interesa lo que le suceda al
indicador en su forma bsica.
b. Que el cambio de color de la forma bsico a la forma cida, o viceversa sea apreciable, es decir,
de colores claros a obscuros y no de colores claros a otros claros o de colores obscuros a obscuros.
c. El pH en el cual vira el indicador a cualquiera de sus dos formas, debe estar dentro del intervalo
de pH en el cual debe virar el indicador calculado anteriormente, y mejor aun debe ser lo ms cercano
posible al pH en el punto de equivalencia.
d. Finalmente, tomaremos en cuenta, la facilidad de preparacin asi como su disponibilidad en el
laboratorio.
Por otro lado, tenemos 4 casos posibles de valoraciones cido-base:

Acido fuerte-base fuerte
Acido dbil-base fuerte
Base fuerte-cido fuerte
Base dbil-cido fuerte
RECUERDA QUE: para emplear correctamente las ecuaciones de pH, es necesario calcular la fuerza del
cido o la base en cuestin, empleando la ley de Ostwald; que por facilidad y rapidez cuando se trate de
un cido o base de fuerza media, podemos hacer una aproximacin de estos a cidos o bases de fuerza
dbil, empleando las ecuaciones de pH para un cido o base de fuerza dbil, y que para calcular el valor
de la constante de reaccin, debes partir de la expresin de tu constante de acidez.
Despus del estudio terico, sigue la parte experimental, dentro de est, como ya se haba mencionado,
nos interesa el punto final de la titualcin, mismo que podemos encontrar con el empleo de un indicador
visual o de un potenciomtro, s empleamos este ltimo, es necesario saber con exactitud en que
momento de la titulacin se alcanzo este; en la siguiente pgina, se muestran los mtodos empleados
para ello.

Como ya se menciono anteriormente, al realizar una valoracin buscamos el punto de equivalencia, pero
usualmente, encontramos el punto final de esta, sobre todo si se emplea un indicador visual. Nosotros
podemos encontrar un punto de equivalencia experimental (que coincidira con el punto final y quizs muy
prximo al punto de equivalencia reportado en el estudio terico), si realizamos una titulacin
potenciomtrica, pues estas son ms sensibles que las titulaciones volumtricas cuando se emplea un
indicador visual. En esta se estara detectando de manera directa el cambio de potencial de hidrogeno
(pH) con cada adicin de reactivo titulante de manera cuantitativa (potenciometro) y no de manera
cualitativa (indicador visual).
MEDICION DEL pH
La medicin del pH, se realiza empleando un potenciometro, el cual indica los cambios en el potencial de
la solucin a travs de dos electrodos, uno indicador y otro de referencia, cuya respuesta a los cambios
se registran en un voltmetro. El electrodo de referencia, tiene un potencial estable, el cual no cambia; y el
electrodo indicador responde al ion hidrogeno. Se han inventado muchos electrodos sensibles al pH, el
que se usa de manera corriente es el electrodo de membrana de vidrio, pues este funciona a travs de
una reaccin de intercambio ionico, por lo cual no esta sujeto a la accin de agentes reductores u
oxidantes, y su respuesta al medio es mas rapida. Esta constituido de la siguiente manera: es un bulbo de
paredes finas, hecho de un vidrio especial sensible a la actividad del ion hidrogeno, dicho bulbo es unido
al fondo de un tubo de vidrio ordinario; dicho tubo contiene una solucin acuosa diluida de cido
clorhdrico, con concentracin 0.1 F; en este medio esta sumergido un alambre de plata revestido de una
capa de cloruro de plata, el alambre de plata se prolonga hacia arriba, por el tubo lleno de resina, lo cual
promueve el contacto elctrico con el circuito externo.
TITULACION POTENCIOMETRICA
En esta, no se utiliza un indicador para detectar el punto final, sino se emplea un potenciometro. Para
realizarla, primero se tiene que calibrar el equipo a dos puntos; una vez calibrado, se procede a medir el
pH inicial del reactivo por titular, se toma la lectura y, se aade entre 1 y 0.5 ml del reactivo titulante con
una bureta, despus de agitado se toma nuevamente la lectura de pH, se repite esta ltima operacin
tantas veces sea necesario hasta que despus de una adicin de reactivo titulante haya un cambio muy
marcado en el pH de la solucin, se continua la operacin hasta que el cambio sea casi tan imperceptible
como al inicio de la valoracin. Finalmente, se procede a realizar la grfica de pH=f(ml de reactivo titulante
agregado); y posteriormente se calcula el punto final de la titualcin.
DETERMINACION DEL PUNTO FINAL
Para la determinacin del punto final, existen los mtodos matemticos y los mtodos grficos. En los
primeros tenemos el mtodo del primera derivada y el de la segunda derivada; y en los segundos, el
mtodo de las tangentes.
METODO DE LA 1 DERIVADA. En vez de graficar pH=f(ml), se grfica el cambio de potencial (pH), al
variar el volumen (D pH/D V) contra el volumen, obtenindose as una curva cuyo mximo, corresponder
al punto final y coincidir con el punto de equivalencia.
METODO DE LA 2 DERIVADA. Matemticamente, la segunda derivada de una curva de titulacin pasa
por cero en el punto de equivalencia. Para ello, se grfica la diferencia entre valores sucesivos de D pH, y
D V
2
es la diferencia entre dos volmenes asociados con cada D pH, es decir, graficar D
2
pH/D V
2
contra
el volumen; una porcin de la curva se interceptara con el cero, este punto indicar el punto final de la
valoracin.

La siguiente tabla indica las operaciones necesarias para encontrar el punto de equivalencia por el
mtodo de la 1
a
y de la 2
a
derivada.
Clculos m todode la 1
a
derivada Clculos m todo de la 2
a
derivada
VOL
(ml)
pH
E V E V
2
VA pHA
pH pH
EA
V V
VA
A
E E
E1
V V
V1
2
1
VB pHB
pH pH
EB
V V
VB
B
E E
E2
V V
V2
2
2
VC pHC
pH pH
EC
V V
VC
C
E E
E3
V V
V3
2
3
VD pHD
pH pH
ED
V V
VD
D
E E
E4
V V
V4
2
4
VE pHE
pH pH
EE
V V
VE
E
E E
E5
V V
V5
2
5
VF pHF
pH pH
EF
V V
VF
F
E E
E6
V V
V6
2
6
VG pHG
pH pH
EG
V V
VG
G
E E
E7
V V
V7
2
7

METODO DE LAS TANGENTES. Se emplea la grfica pH=f(ml), en dicha curva se trazan dos tangente
(lnea que pasa sobre un punto de la curva) paralelas sobre los puntos de inflexin; se mide la distancia
que hay entre las dos paralelas y se divide entre dos; finalmente se traza otra lnea paralela que pase por
el punto medio y el punto donde se cruce esta con nuestra grfica, corresponder al punto final de la
valoracin.
Finalmente, mostramos algunos ejemplos reales donde se aplican este tipo de valoraciones.
LIDOCAINA
La lidocana, es un anestsico, su valoracin se realiza mediante una titulacin por retroceso cido-base
en medio acuoso. La tcnica, es la siguiente:
Disolver 500 mg de la muestra de lidocana en 40 ml de una solucin 0.1 N. de cido sulfrico. Agregar 2
gotas de una mezcla de 3 partes de SI de verde de bromocresol y 1 parte de SI de rojo de metilo y,
valorar el exceso de cido con una solucin 0.1 N. de hidrxido de sodio. Cada ml de solucin 0.1 N. de
cido sulfrico consumido, es equivalente a 23.43 mg de lidocana.
ACIDO NALIDIXICO
Es una materia prima utilizada en la sntesis de algunos frmacos, su valoracin se realiza con una
titulacin cido-base en medio no acuoso (dimetilformamida). La tcnica, es la siguiente:
Disolver 250 mg de la muestra en 30 ml de dimetilformamida, agregue SI de timolftaleina, titular con
solucin 0.1 N. de metxido de litio, utilizando un agitador magntico y tomar las precauciones necesarias
para evitar la absorcin de dixido de carbono de la atmsfera. Cada ml de solucin 0.1 N. de metxido
de litio, es equivalente a 23.22 mg de cido nalidxico.
PRCTICA No. 1
PROCEDIMIENTOS DE TOMA Y PRESERVACIN DE MUESTRAS AMBIENTALES
La confiabilidad del resultado de cualquier prueba
inicia con la confiabilidad en el muestreo
1. OBJETIVOS.
1.1. Conocer los aspectos ms importantes de un programa de muestreo.
1.2. Conocer las fuentes de informacin tcnica sobre procedimientos de
muestreo.
2. INTRODUCCIN.
El muestreo ambiental constituye una actividad cuyo objetivo es colectar una porcin
de material (muestra) que sea representativa de un universo y, asegurar en la mayor
medida posible que la calidad de la muestra al llegar al laboratorio de prueba, sea
igual al momento de su colecta. A partir de la composicin y/o comportamiento de la
muestra, ser posible inferir la composicin y/o comportamiento del universo en
estudio (1,2).
No obstante existe una gran diversidad de mtodos tcnicos y cientficos de muestreo
ambiental (3,4,5), o de cualquier otro tipo, muy pocos manuales de laboratorio dedican
un tiempo para explicar la importancia que el muestreo -e inclusive un Programa de
muestreo- representa en la confiabilidad de resultados -desde el punto de vista
representatividad- (1,2).
El diseo de un programa de muestreo inicia con la definicin de los objetivos del
estudio a realizar; por ejemplo:
Caracterizacin de fuente puntual
Estudio de reconocimiento / inspeccin
Estudio intensivo
Monitoreo (estacin de monitoreo o red de monitoreo)
Estudios especiales
En base a los objetivos del estudio, el programa continua y finaliza la aplicacin de los
siguientes conceptos:
Identificacin del sito: Mapa que identifique los puntos de muestreo
Matriz ambiental: Agua superficial, agua subterrnea, agua potable, agua residual,
suelo, sedimento, aire, etc.
Tipo de muestra: Simple o compuesta
Nmero muestras
Duracin del estudio
Frecuencia de muestreo: Diario, mensual, anual, etc.
Tipo de toma de muestra: Manual o automtica
Parmetros a determinar, que incluya referencias de los mtodos de muestreo:
recipiente, preservar, consideraciones especiales para toma de muestra o lavado del
material de muestreo.
Mediciones de campo
Control de calidad: Cadena de custodia, blanco de campo, duplicados, separacin
de muestra
Seguridad e higiene
Al definir el tipo y alcance de proyecto a realizar, es recomendable que los mtodos y
procedimientos de muestreo sean congruentes tanto con el tipo de estudio
-investigacin, control ambiental, docencia-, como los lineamientos normativos del
organismo o dependencia a quien se presentar el estudio local, regional, interno-.
La presente prctica tiene como finalidad el conocer aspectos generales tcnicos
relacionados a procedimientos de muestreo, as como efectuar prcticamente la
colecta y preservacin de muestras de agua residual y sedimentos para posterior
anlisis. No obstante los fines son de docencia, los procedimientos son en los cuales
se fundamentan en la normatividad aplicable a la localidad: Normas Oficiales
Mexicanas, procedimientos de la Agencia de Proteccin del Medio Ambiente, Mtodos
Estndares de para Aguas y Aguas Residuales.
3. MATERIALES Y REACTIVOS.
Referencias bibliogrfica
4. PROCEDIMIENTO.
4.1. En base a las prcticas contenidas en el presente manual, se efectuarn los
siguientes anlisis a muestras de agua, aire, y suelo:
Agua Acidez, alcalinidad, conductividad, slidos totales,
dureza, oxgeno disuelto, coliformes totales, metales.
Aire Metales
Sedimentos Metales
realice una bsqueda de los procedimientos de muestreo simple y preservacin para
cada uno de los parmetros contenidos en la seccin agua de la tabla anterior. Realice
su bsqueda segn lo establecido por las NOMs (Normas Oficiales Mexicanas), la
EPA (Environmental Protection Angency), as como los SM (Mtodos Estndares para
Anlisis de Agua y Agua Residual). Presente sus resultados en forma de tabla
comparativa (ver seccin de resultados).
5. RESULTADOS.
5.1. Complete la siguiente tabla 1, de Procedimientos oficiales aplicables en Mxico,
para colecta y preservacin de muestras instantneas de agua
Parmetro Nombre y nmero del procedimiento
NOMs EPA SM
Acidez
Alcalinidad
Conductividad
Slidos totales
Dureza
Oxgeno disuelto
Coliformes totales
Metales
5.2. Complemente la siguiente tabla comparativa de los procedimientos oficiales
aplicables en Mxico, para colecta y preservacin de muestras instantneas de agua.
Parmetro Tipo de
recipiente
Mtodo de
preservacin
Tiempo mximo
de preservaci
Observaciones
generales al
procedimiento
de muestreo
NOM EPA SM NOM EPA SM NOM EPA SM NOM
Acidez
Alcalinidad
Conductividad
Slidos
totales

Dureza
Oxgeno
disuelto

Coliformes
totales

Metales
PRCTICA No. 2
ACIDEZ Y ALCALINIDAD DE MUESTRAS DE AGUA.
1. OBJETIVOS.
El alumno determinar la acidez y alcalinidad de muestras de agua mediante la
aplicacin del mtodo de titulomtrico.
2. INTRODUCCIN.
Mientras que el pH es una medida de la desviacin que tiene una muestra acuosa
respecto al valor neutro de 7.0 (1), y determina su carcter cido / bsico en el
fundamento de que representa el nmero de iones hidrgeno presentes:
pH = - log10 [ H
+
] , donde [ H
+
] es la concentracin de iones
hidrgeno en solucin (2);
los trminos acidez y alcalinidad determinan la capacidad de dicha muestra de agua
para neutralizar iones hidroxilo e hidrgeno, respectivamente (2). As, se puede decir
que los trminos cido y bsico son propiedades intrnsecas de la material, mientras
que acidez y alcalinidad son propiedades extensivas (2,3,4).
La mayora de las aguas naturales, domsticas e industriales residuales poseen un pH
neutro, debido a la accin amortiguadora del equilibrio dixido de carbono-in
bicarbonato (CO2 - HCO3
-
) en el que entra el gas CO2 presente en el aire:
y, en menor proporcin, CO2 producido por oxidacin biolgica de material orgnico
presente en el agua (4).
2.1. Acidez.
Un exceso de dixido de carbono
disuelto es la principal causa de
acidez de aguas naturales (1,4). Tambin se han detectado cuerpos de agua natural
contaminados con valores altos de acidez como resultado de cada de lluvia cida,
lixiviaciones de residuos de minas, y la oxidacin bacteriana de azufre y sus sales,


o bien hidrlisis de sales de cidos fuertes:

La acidez toma importancia en el campo del suministro de agua, debido a que
incrementa el carcter corrosivo del agua, as como la capacidad de disolucin de
metales presentes o en contacto con el agua (1,4). La acidez causada por la presencia
de dixido de carbono puede ser solucionada por aireacin y/o neutralizacin con
carbonato de sodio o hidrxido de sodio; la acidez causada por la presencia de cidos
minerales se soluciona neutralizacin (4).
Existen varios procedimientos oficiales para medir la acidez de una muestra acuosa:
Norma Mexicana, NMX-AA-036-1980. Agua-Determinacin de acidez total y
alcalinidad total.
Standard Methods Examination of Water and Wastewater, 2310 Method.
Acidity.
Methods for Chemical Analysis of Water and Wastewater, 305.1 Method.
Acidity, Titrimetric.
Todos stos mtodos se basan en la titulacin de la muestra con hidrxido de sodio,
utilizando fenoftalena como indicador del punto de equilibrio (mtodo titulomtrico) o
con medicin de pH (potenciomtrico). En cualquiera de los casos; la acidez se
expresa como miligramos de carbonato de calcio presentes en cada litro, mg CaCO3/L,
y las reacciones involucradas son:
El procedimiento considerado en el presente manual corresponde al mtodo
titulomtrico, utilizando indicador de fenoftalena el cual pemite cuantificar a un pH de
8.3 la acidez debido a cidos minerales y cidos dbiles.
2.2. Alcalinidad.
La alcalinidad de un agua natural es mayormente causada por la presencia de bases
dbiles -por ejemplo carbonatos, bicarbonatos, boratos, y fosfatos-; y en menor
proporcin por bases fuertes -hidrxidos de sodio y potasio-. As, la alcalinidad de
una muestra de agua representa el total de todas estas especies presentes en ella, y
se expresa como miligramos de carbonato de calcio presentes en cada litro, mg
CaCO3/L (1,4).
En ocasiones, las aguas subterrneas y las aguas dulces presentan una ligera
alcalinidad debido a la presencia de minerales conteniendo iones carbonato:



Bajo ciertas condiciones especiales donde existe crecimiento de algas, el agua natural
presenta altos valores de alcalinidad debido a la presencia, por orden jerrquico, de:
hidrxidos, carbonatos, y bicarbonatos. En aguas anxicas la alcalinidad se debe a
sales de cidos dbiles actico, propinico, sulfhdrico, hmico- (4).
Debido a que la alcalinidad se genera por la presencia de sales de cidos dbiles y
bases de cidos fuertes, stos actan como neutralizadores de la adicin de cidos.
As, la alcalinidad proporciona al agua una capacidad de resistencia a la lluvia cida,
(debido a su capacidad de neutralizacin). A diferencia de la acidez, la alcalinidad en
aguas potables le adicionan un sabor desagradable (1,4).
Existen varios procedimientos oficiales para medir la acidez de una muestra acuosa:
Norma Mexicana, NMX-AA-036-1980. Agua-Determinacin de acidez total y
alcalinidad total.
Standard Methods Examination of Water and Wastewater, 2320 Method.
Acidity.
Methods for Chemical Analysis of Water and Wastewater, 310.1 Method.
Alkalinity, Titrimetric (pH= 4.5).
Todos stos mtodos se basan en la titulacin de la muestra con cido clorhdrico o
sulfrico, utilizando verde de bromocresol como indicador del punto de equilibrio
(mtodo titulomtrico) o con medicin de pH (potenciomtrico). En cualquiera de los
casos; la alcalinidad se expresa como miligramos de carbonato de calcio presentes en
cada litro, mg CaCO3/L. El procedimiento considerado en el presente manual
corresponde al mtodo titulomtrico
3. MATERIALES Y REACTIVOS.
3.1. Materiales
Vidrio: Equipo:
2 Vidrios de reloj
3 Vasos de precipitados de 100 mL
4 Matraces volumtricos de 1 L
1 Balanza analtica
1 Estufa (110-120
o
C)
2 Matraces volumtricos de 100 ml
1 Probeta de 20 mL
1 Probeta de 50 mL
1 Probeta de 250 mL
1 Matraz erlenmeyer de 125 mL
9 Matraces erlenmeyer de 250 ml
1 Pipeta volumtrica de 20 mL
1 Pipeta volumtrica de 10 mL
72 Buretas de vidrio de 50 mL
1 pH-metro Miscelneos:
1 Agitador magntico
1 Botella de polietileno de1L, con
tapa de rosca
3.2. Reactivos
3.2.1. Acidez.
Indicador de fenoftalena (solucin)
Agua desionizada libre de dixido de carbono.- Hervir por 15 minutos 2 L de agua
desioizada, y permitir enfriar a temperatura ambiente evitando el contacto con aire.
Solucin biftalato de potasio 0.02N (1 L).- Pesar en un vaso de precipitados 4.085 g de
biftalato de potasio grado estndar primario, previamente secado por dos horas en
estufa a 110-120
o
C y permitido enfriar en desecador, y transferir cuantitativamente con
agua libre de dixido de carbono a un matraz volumtrico de 1 L. Aforar con agua libre
de dixido de carbono y calcule la normalidad de la solucin de biftalato de potasio:
g biftalato de potasio
N =(PE biftalato de potasio) (V solucin)
donde PE biftalato de potasio = 204.23 g/eq
Solucin estndar de hidrxido de sodio 0.02N (1 L).- Pesar en un vaso de
precipitados 40 g de hidrxido de sodio, transferir cuantitativamente con agua libre de
dixido de carbono a un matraz volumtrico de 1000 mL, y afore hasta la marca con
ste tipo de agua. Esta solucin tiene una concentracin de aproximadamente 1 N.
Transfiera con probeta 20 mL de la solucin de NaOH 0.1 N a un matraz volumtrico
de 1 L, y afore con agua desionizada. Estandarice la solucin contra una solucin de
biftalato de potasio: pipetee 10 mL de la solucin de biftalato a un matraz erlenmeyer
de 125 mL, agregue 20 mL de agua libre de dixido de carbono, 5 gotas de
fenoftaleina, y titule con la solucin de hidrxido de sodio hasta el vire de la solucin a
tonalidad rosa. Calcule la normalidad de la solucin de hidrxido de sodio:
( mL biftalato de potasio ) ( N biftalato de potasio N NaOH = ( ml NaOH )

3.2.2. Alcalinidad.
Indicador verde de bromocresol (solucin)
Solucin carbonato de sodio 0.05N (1 L).- Pesar en un vaso de precipitados 2.5 g de
carbonato de sodio grado estndar primario, previamente secado por cuatro horas en
estufa a 250
o
C y permitido enfriar en desecador, y transferir cuantitativamente con
agua desionizada a un matraz volumtrico de 1 L. Aforar con agua desionizada y
calcule la normalidad de la solucin de carbonato de sodio:
g carbonato de sodio
N(PE carbonato de sodio) (V solucin)
donde PE carbonato de sodio = 53.00 g/eq
Solucin estndar de cido clorhdrico 0.02N (1 L).- Transferir 8.3 mL de cido
clorhdrico concentrado grado reactivo a un matraz volumtrico de 1000 mL, y afore
con agua desionizada. Esta solucin tiene una concentracin de aproximadamente 0.1
N. Transfiera con probeta 200 mL de la solucin de HCl 0.1 N a un matraz volumtrico
de 1 L, y afore con agua desionizada. Estandarice la solucin contra una solucin de
carbonato de sodio: pipetee 10 mL de la solucin de carbonato a un matraz
erlenmeyer de 250 mL, agregue 40 mL de agua desionizada, agregue 5 gotas de
verde de bromocresol, y titule con la solucin de cido clorhdrico hasta el vire de la
solucin de azul a verde. Calcule la normalidad terica y real de la solucin de cido:
mL Carbonato de sodio ) ( N carbonato ed sodio )
N terica HCl =( ml HCl )
(g Carbonato de sodio en la solucin 0.05N) ( mL Carbonato de sodio )
N real HCl = ( 53.00 ) ( ml HCl )
4. CONSIDERACIONES ESPECIALES.
4.1. Seguridad e higiene. Utilizar bata, lentes de seguridad, y zapato cubierto. Evitar
contacto con las soluciones de cidos y bases, ya que pueden causar irritacin y/o
quemaduras. En caso de haber contacto, enjuagar con abundante agua.
4.2. Muestreo. Debido a que el dixido de carbono es la principal causa de acidez de
un agua natural:
el tiempo transcurrido entre la colecta y anlisis de la muestra de agua
NO debe ser mayor a 24 horas
el recipiente de muestreo debe ser llenado hasta rebosamiento, y
cerrado con una tapa de rosca (para impedir el contacto con el aire) (2).
4.3. Lavado de materiales. Lavar con detergente libre de fosfatos, enjuagar con agua
corriente, y cinco lavados con pequeas porciones de agua desionizada.
5. PROCEDIMIENTO.
5.1. Acidez.
1. Obtenga el valor de pH de la muestra obtenida, mediante un pH-metro.
2. Enjuague 5 veces la bureta de 50 mL con la solucin de hidrxido de sodio. Llene la
bureta con solucin de NaOH, cuidando de que no queden burbujas de aire atrapadas
en la bureta, y que el menisco de la solucin quede en la lnea de 0 mL de la escala de
la bureta.
3. Transfiera, con una probeta, 100 mL de la muestra de agua potable a un matraz
erlenmeyer de 250 mL, agregue 5 gotas de fenoftaleina, y titule con la solucin de
hidrxido de sodio hasta el vire de la solucin a tonalidad rosa.
4. Efecte la titulacin de la muestra por triplicado, y as como la titulacin de un
blanco (100 ml de agua libre de dixido de carbono).
5.2. Alcalinidad.
1. Obtenga el valor de pH de la muestra obtenida, mediante un pH-metro.
2. Enjuague 5 veces la bureta de 50 mL con la solucin de cido clorhdrico. Llene la
bureta con solucin de HCl, cuidando de que no queden burbujas de aire atrapadas en
la bureta, y que el menisco de la solucin quede en la lnea de 0 mL de la escala de la
bureta.
3. Transfiera, con una probeta, 100 mL de la muestra de agua potable a un matraz
erlenmeyer de 250 mL, agregue 5 gotas de verde de bromocresol, y titule con la
solucin de cido clorhdrico hasta el vire de la solucin de azul a verde.
4. Efecte la titulacin de la muestra por triplicado, y as como la titulacin de un
blanco (100 ml de agua desionizada).
6. DISPOSICIN DE RESIDUOS DE LABORATORIO.
Todas las soluciones pueden ser vertidas al dren.
7. RESULTADOS.
7.1. Acidez.
mL de NaOH consumido
Muestra, lectura 1
Muestra, lectura 2
Muestra, lectura 3
Blanco

7.2. Alcalinidad.
mL de HCl consumidos
Muestra, lectura 1
Muestra, lectura 2
Muestra, lectura 3
Blanco
8. CLCULOS
1. Determine los valores de acidez y de alcalinidad (como CaCO3) para cada una de
los anlisis efectuados:
( mL NaOH titulante - mL NaOH titulante) ( N Solucin NaOH ) ( 50,000)
consumidos consumidos
por la muestra por blanco
Acidez (como CaCO3) =
( mL muestra de agua )
( mL HCl titulante - mL HCl titulante) ( N Solucin HCl ) ( 50,000) consumidos
consumidos
por la muestra por blanco
Alcalinidad (como CaCO3) = ( mL muestra de agua )
PRCTICA No. 3
COMPUESTOS INICOS EN MUESTRAS DE AGUA

1. OBJETIVOS.
El alumno realizar tres anlisis qumicos a muestras de agua, indicativos de la presencia de
compuestos inicos: conductividad elctrica, slidos totales,y dureza.
El alumno determinar la conductividad elctrica de una muestra acuosa mediante el mtodo
conductivmetro.
El alumno determinar la concentracin de slidos disueltos totales en una muestra acuosa
mediante la aplicacin de un mtodo gravimtrico.
El alumno determinar la dureza de una muestra acuosa mediante la aplicacin de un mtodo
titulomtrico o volumtrico.
El alumno se familiarizar con procedimientos elementales de laboratorio: uso de balanza
analtica.
El alumno aplicar los conceptos de control analtico porcentaje de exactitud y porcentaje de
recuperacin.

2. INTRODUCCIN.
2.1. Slidos totales.
La mayor parte de los contaminantes de aguas son slidos, disueltos o suspendidos. En un
concepto general, los slidos se definen como la materia que permanece como residuo
despus de someter a evaporacin una muestra de agua a una temperatura de 105 C. El
trmino slido involucra 10 determinaciones que representan un anlisis completo del
contenido de residuos de una muestra de agua:
1. ST.-Slidos Totales
2. STV.-Slidos Totales
Voltiles
3. STF.-Slidos Totales Fijos
4. SST.-Slidos Suspendidos
Totales
5. SSV.-Slidos Suspendidos
Voltiles
6. SSF.-Slidos Suspendidos
Fijos
7. SDT.-Slidos Disueltos
Totales
8. SDV.-Slidos Disueltos
Voltiles
9. SDF.-Slidos Disueltos
Fijos
10. SSed.-Slidos
Sedimentables
De las primeras 9 determinaciones, las indicadas en los incisos 1, 2, 4 y 5, se llevan a cabo por
procedimientos gravimtricos sencillos y los restantes ( 3, 6, 7, 8 y 9) se calculan por diferencia
entre una y otra de las ya determinadas.
En la presente prctica se efectuar la determinacin de slidos totales de una muestra, es
decir la suma de los slidos suspendidos totales y slidos disueltos, en base a la norma
mexicana NMX-AA-034-1993-SCFI
El agua de mar contiene sales en concentraciones de 35,000 mg/L. En general se considera un
agua salada cuando los slidos disueltos se encuentran por encima de los 3,000 mg/L, y un
agua dulce si su contenido es menor a los 500 mg/L.
2.2. Conductividad.
La conductividad de una muestra de agua representa una medida de su capacidad para
transmitir una corriente elctrica. Cualquier sistema acuoso conteniendo iones, tendr la
capacidad de conducir la corriente elctrica. En un campo magntico de corriente directa, los
iones positivos (cationes) se mueven hacia el electrodo negativo, mientras que los iones
negativos (aniones) lo hacen hacia el electrodo positivo.
La mayora de los cidos, bases, y sales inorgnicas son buenos conductores debido a que al
disolverse en agua se disocian en iones; las molculas orgnicas como los azcares y el
etanol- no se disocian en iones al encontrarse en solucin acuosa, y por tanto sus soluciones
tienen una baja o nula conductividad.
La unidad internacional de medicin de la resistencia elctrica es el ohm y la de la
conductividad el milimho. Un milimho (mmho) equivale a mil micromhos (mhos). Las
soluciones acuosas pueden presentar variaciones de conductividad elctrica, principalmente
debido al intercambio de dixido de carbono atmosfrico y iones amonio, o una posible
actividad biolgica. Un agua recin purificada tiene una conductividad entre 0.5 - 2 mhos, y
entre 2 -4 despus de varias semanas de almacenamiento. Un agua de buena calidad presenta
valores de conductividad entre 50 y 500 mhos; valores por encima de ste rango
corresponden a aguas mineralizadas.
En la presente prctica, la conductividad elctrica de una muestra de agua se determinar en
base a la norma mexicana NMX-AA-093-1993-SCFI, titulada Anlisis de agua.- Determinacin
de la conductividad elctrica.
2.3. Dureza total.
La dureza de una muestra de agua se atribuye a su contenido de iones disueltos,
principalmente Ca
2+
, Mg
2+
, y en menor proporcin Fe
2+
. Adems de modificar la propiedad de
sabor del agua, el Fe
2+
puede ser fcilmente oxidado a compuestos insolubles de Fe
3+
de
coloracin caf-rojizo tpicamente presente como manchas en ropas y tuberas.
En el caso del calcio, ste in es el responsable de las incrustaciones en calderas, como
resultado de la formacin de carbonato de calcio slido al calentarse en agua. El carbonato de
calcio se incrusta en las tuberas y paredes de la caldera, disminuyendo la capacidad de
calentamiento, y por tanto incrementa el consumo de combustibles, puede generar daos al
elemento de calentamiento, e inclusive explosin.
Anteriormente la dureza se determinaba mediante la prueba de jabn, la cual se basa en
contabilizar la cantidad de solucin estndar de jabn a ser adicionados a una muestra de agua
para que despus de agitar formara una cantidad determinada de espumacin. Actualmente la
determinacin se hace por titulacin del exceso de un agente secuestrante aadido a la
muestra, cido etilendiaminactico (EDTA), utilizando como indicador. La norma mexicana de
descreibe la metodologa de dureza total es la NMX-AA-072-1999-SCFI, Anlisis de agua.-
Determinacin de dureza total en aguas naturales y residuales.
3. MATERIALES Y REACTIVOS.
3.1. Materiales y equipo
3.1.2. Slidos totales.
Vidrio:
4 Crisoles de 60 mL
1 Probeta de 50 mL
1 Desecador
Equipo:
1 Balanza analtica, 0.0000 g
1 Estufa a temperatura 105
o
C
1 Parrilla de calentamiento
Miscelneos:
1 Guante resistente a temperatura caliente
3.1.2. Conductividad.
Vidrio:
2 Vasos de precipitados de 250 mL
Equipo:
1 Conductivmetro con compensador de temperatura y electrodo
1 Parrilla con agitacin magntica
Miscelneos:
1 Agitador magntico
3.1.3. Dureza total.
Vidrio:
1 Probeta de 50 mL
6 Matraces erlenmeyer de 125 mL
1 Bureta de vidrio de 50 mL
1 Pipeta de 1 mL
Equipo:
Conductivmetro con electrodo (110-120
o
C)
Parrilla de agitacin magntica (opcional)
Miscelneos:
2 Agitadores magnticos
1 Soporte universal
1 Pinzas para soporte universal
[Link]. Todos los reactivos deben ser gradoanaltico.
3.2.1. Slidos totales.
Estndar de slidos totales, 500 mg/L
3.2.2. Conductividad elctrica
Solucin estndar de conductividad, 1000 mg/L como NaCl (1990 + 20 S/cm).
3.2.3. Dureza total.
Indicador eriocromo negro T (solucin) Solucin buffer, pH= 10
Solucin estndar de EDTA 0.01 M Solucin estndar de calcio (1000 mg/L)
ESPECTROFOTMETRO
DE INFRARROJO FT-IR
Descripcin
Se trata de un equipo analtico,
totalmente controlado por ordenador, que
permite registrar el espectro infrarrojo
de muestras slidas y lquidas con el fin de
obtener informacin acerca de su
composicin qumica. Es un aparato
monohaz dotado de un interfermetro de
Michelson y un convertidor analgico- digital de 20 bits que le confiere una alta sensibilidad. El
aparato est formado por una bancada modular, una fuente IR, un divisor de haz de Ge/KBr, un
lser de HeNe para autoalineacin, un detector DTGS/KBr y un compartimiento de muestras.
Tambin dispone de una fuente de purga libre de agua y CO2 as como de diversos accesorios
para la preparacin y medida de muestras (clulas de lquidos, troquel para pastillas de KBr,
clula de espesor variable, etc.). Tambin dispone de diversos programas especficos bajo
entorno Windows para la asignacin de bandas de absorcin y cuantificacin de las mismas.
Caractersticas tcnicas
Modelo: NICOLET Magna-IR System 550
Rango: 7400 a 350 cm-1 (ptica de Kbr)
Resolucin: mejor que 0,5 cm-1
Velocidad de barrido: 2,5 a 50 kHz
Precisin: 0,01 cm-1 a 2000 cm-1 y < 0,1% en transmitancia.
Relacin Seal/Ruido: 5000:1 con resolucin de 4 cm-1
Aplicaciones
Este equipo se emplea para la determinacin cualitativa y cuantitativa de los componentes de
los betunes modificados con polmeros. Tambien es de utilidad en el estudio del envejecimiento
de los ligantes bituminosos.
CROMATGRAFO DE CAPA FINA CON DETECTOR DE IONIZACIN
DE LLAMA (TLC/FID)
Descripcin
El equipo consiste bsicamente en un detector de ionizacin a la llama, totalmente
controlado por ordenador, que detecta las separaciones obtenidas en una
cromatografa de capa fina convencional sobre pequeos cilindros de cuarzo recubiertos de gel
de slice. Tambin dispone de un generador de hidrgeno, de diversos accesorios para la
inyeccin manual o automtica de la muestra y su posterior elucin (soportes, tanques de
disolvente, estufa de secado, lmpara UV, etc), as como de programas especficos para el
tratamiento de datos cromatogrficos.
Caractersticas tcnicas
Modelo: IATROSCAN MK-V
N de muestras simultneas: 10
Velocidades de barrido: 25 a 60 s
Aplicaciones
El equipo se utiliza para el anlisis qumico de los betunes asflticos, obteniendo de una manera
rpida la proporcin de las distintas fracciones que componen un betn (asfaltenos, resinas,
aromticos y saturados). Estos resultados son especialmente interesantes en el estudio del
envejecimiento de los ligantes bituminosos.
[Volver atrs]
CROMATGRAFO DE LQUIDOS (HPLC Y GPC)
Descripcin
Se trata de un equipo analtico que permite separar, identificar y cuantificar los componentes
presentes en mezclas complejas. La tcnica se basa en inyectar una pequea cantidad de la
muestra en disolucin en un flujo a presin de un lquido (la fase mvil) que pasa a travs de las
partculas slidas (la fase estacionaria) empaquetadas dentro de las columnas. En ellas se
produce la separacin de los componentes por su distinta capacidad de adsorcin (HPLC) o por
su tamao molecular (GPC). Distintos detectores (de absorcin UV, de ndice de refraccin, etc)
se emplean a la salida de las columnas para identificar y cuantificar los componentes.
Caractersticas tcnicas
Modelo: WATERS
Bombas: 2 Waters mod. 510 , de doble mbolo con capacidad de realizar gradientes
Inyector: Waters mod. U6K de volumen variable.
Columnas GPC: Ultrastyragel 102 - 105 A
Columnas HPLC: Slice, Amino, ...
Detector UV: Waters mod. 441 de longitud de onda fija (254 nm o 360 nm)
Detector RI: Waters mod. 410
Software: Waters Millenium para Windows 3.1x
Aplicaciones
Fraccionamiento de betunes asflticos mediante columnas de HPLC. Identificacin y
cuantificacin de betunes modificados con polmeros mediante el empleo de columnas de GPC.
Evaluacin del envejecimiento de ligantes bituminosos.
PRACTICA 16
Absorcin atmica y emisin
en flama
DETERMINACIN DEL CONTENIDO SALES EN BEBIDAS
COMERCIALES.
1. Realiza las curvas de calibracin para litio, sodio, potasio y
calcio, con el respectivo anlisis estadstico (emisin vs
concentracin)
2. Con los datos de emisin de litio, sodio, potasio y calcio en las
bebidas comerciales, determina el contenido de cada uno de
ellos y compara con los que se informan en la bebida.
Indispensable presentar los clculos en cada caso.
3. Explica el procedimiento que realizaste y los clculos de las
soluciones estndar de LiCl que se prepararon(incluye todas
las diluciones)
4. Describe las diferencias instrumentales entre un
espectrofotmetro de emisin y uno de absorcin. Asocia la
diferencia al fenmeno que ocurre en cada caso para
fundamentar la determinacin.

DETERMINACIN POR ADICIONES ESTNDAR DEL CONTENIDO DE
COBRE
EN UNA MUESTRA PROBLEMA EMPLEANDO ESPECTROSCOPIA DE
ABSORCIN ATMICA.
5. Determina la grfica de absorbancia contra concentracin de
estndar de Cu
2+
y realiza el anlisis estadstico
correspondiente.
6. Determina la concentracin de cobre en la disolucin de la
muestra problemas y con base en esta calcula el porcentaje
de cobre en la muestra problema (alambre), presentando los
clculos necesarios para llegar a este valor.
7. Explica el procedimiento que realizaste y los clculos de las
soluciones estndar de CuNO
3
5H
2
O que se prepararon
(incluye todas las diluciones)
8. Explica cul es la especie qumica responsable de la absorcin
en este mtodo y como es el proceso que explica la formacin
de la misma.
9. Si una disolucin contienen una mezcla de Fe
2+
y Fe
3+
en
concentraciones desconocidas, puede sta tcnica aplicarse
para determinar las concentraciones de cada una de las
especies qumicas?. Explica tu respuesta.
10. Comenta brevemente sobre las ventajas y desventajas de las
tcnicas empleadas y concluye.

La espectroscopia estudia la absorcin de radiacin electromagntica, como resultado de su
interaccin con la materia. Incluye tcnicas modernas como la de Rayos X, Ultravioleta
(UV), Visible (V), Infrarroja (IR), Resonancia Magntica Nuclear (RMN), Absorcin
Atmica (AA), y Fluorescencia Atmica.
Las investigaciones sobre la utilidad de la regin infrarroja del espectro
electromagntico, fueron iniciadas por el astrnomo Sir William Herschel, en 1800.
Entre los aos 1930 y 40, H.W. Thompson y G.B.B.M. Sutherland en Inglaterra, y J.
Lecomte en Francia, aplicaron est tcnica a la elucidacin de estructuras moleculares.
Los avances instrumentales permitieron que en 1988 se introdujeran los
Espectrofotmetros con transformadas de Fourier, que vinieron a revolucionar la
espectroscopia en el infrarrojo.
Las aplicaciones de la espectroscopia incluyen una gran variedad de reas de inters
para los profesionales de la qumica. La enseanza, discusin y aplicacin de estos
conocimientos, requiere de la capacidad de integracin de diversos contenidos terico
prcticos adquiridos. El contar con materiales didcticos modernos como apoyo, que
permitan al estudiante interactuar con estos conocimientos y su aplicacin, que resulta
de gran utilidad en el aprendizaje de las tcnicas de espectroscopia y la interpretacin
de sus resultados.
El presente programa interactivo en computadora, fortalece la descripcin de los
eventos causados por la absorcin de radiacin electromagntica en el infrarrojo,
incorporando imgenes y animaciones. Su objetivo es presentar la informacin de
forma variada y atractiva, motivando al estudiante a incursionar en el tema,
convirtiendo el estudio de la espectroscopia, en un elemento altamente favorable y en
una actividad atractiva y verstDescripcin del Curso
Objetivos Generales:
El objetivo principal de este curso es el de introducir al estudiante en el amplio campo de las
tcnicas instrumentales de anlisis, de tal manera que pueda desarrollar un caracter crtico a la
hora de juzgar la exactitud y precisin de los datos experimentales. La disciplina en el estudio y
la responsabilidad en el trabajo de laboratorio asociado al curso, darn al estudiante los medio
necesarios para perfilar estos juicios.
Objetivos Especficos:
Al trmino del curso, el estudiante ser capaz de:
Utilizar eficientemente las diversas tcnicas instrumentales de anlisis.
Integrar sus conocimientos de qumica analtica con los adquiridos en este curso.
Establecer una adecuada metodologa para el desarrollo de un anlisis qumico
completo.
Aplicar los criterio necesario para interpretar correctamente los resultados
experimentales obtenidos mediante el uso de mtodos fisicoqumicos de anlisis.
Contenido Sinttico:
1. Conceptos y Leyes de la Espectroscopa
2. Mtodos y Aplicaciones de la Espectrofotometra
3. Espectroscopa de Emisin
4. Espectroscopa Infrarroja
5. Espectroscopa Atmica
6. Cromatografa: Principios Generales
7. Mtodos Cromatogrficos
Contenido Detallado:
1. Conceptos y Leyes de la Espectroscopa.
a. Clasificacin de los mtodos espectroscpicos.
b. Propiedades de la radiacin electromagntica.
c. La absorcin y emisin de radiacin electromagntica.
d. Leyes fundamentales de la espectrofotometra
e. Instrumentacin para la medida de la absorbancia de radiacin.
2. Mtodos y Aplicaciones de la Espectrofotometra.
a. Introduccin.
b. Aspectos fundamentales de los mtodos espectrofotomtricos.
i. Formacin de especies absorbentes.
ii. Medicin de muestras estndares.
iii. Instrumentacin para la medida de la absorbancia de radiacin.
c. Tcnicas para determinaciones espectrofotomtricas.
i. Compuestos orgnicos.
ii. Compuestos inorgnicos.
iii. Determinacin de la estructura.
iv. Efecto del pH.
v. Determinacin simultnea de multicomponentes.
vi. Titulaciones espectrofotomtricas.
vii. Determinacin espectrofotomtrica de constantes fsicas
Mtodo de variaciones contnuas.
Mtodo de la relacin molar.
Mtodo de la relacin de pendientes.
1. Espectrofotometra de Emisin.
a. El fenmeno de luminiscencia.
b. Fluorescencia.
c. Relacin entre la intensidad de fotoluminiscencia y la concentracin.
d. Instrumentacin y aplicaciones.
e. El fenmeno de apagamiento y sus aplicaciones.
3. Espectroscopa Infrarroja.
f. La absorcin de radiacin infrarroja.
g. Correlaciones estructurales.
h. Sistemas de medicin.
i. Aplicaciones de la espectroscopa infrarroja.
j. Absorcin de grupos funcionales comunes
k. Instrumentacin.
4. Espectroscopa Atmica.
l. Bases fisicoqumicas.
m. Mtodos basados en la atomizacin de una flama.
n. El proceso de atomizacin (nebulizacin) en la flama.
o. Flamas qumicas.
p. Espectroscopa de absorcin atmica.
q. Instrumentacin.
r. Mtodos analticos.
5. Cromatografa: Principios Generales.
s. Clasificacin de los mtodos cromatogrficos.
t. Naturaleza de las fuerzas de particin.
u. Comportamiento cromatogrfico de los solutos.
v. Eficiencia de columna y resolucin.
w. Procesos de columna y ensanchamiento de bandas.
x. Tiempo de anlisis y resolucin.
y. Anlisis cuantitativo.
6. Mtodos Cromatogrficos.
z. Cromatografa gas-lquido.
i. Aparatos.
ii. Soportes y fases lquidas.
iii. Optimizacin de condiciones experimentales
aa. Cromatografa lquida de alta resolucin.
bb. Aparatos.
i. Cromatografa de particin de alta resolucin.
ii. Cromatografa de absorcin de alta resolucin.
iii. Cromatagrafa de exclusin de alta resolucin.
cc. Comparacin de la HPLC con la CGL.
Mtodo de Enseanza
El curso se desarrollar mediante la exposicin oral de los temas por parte del profesor, y la participacin
de los estudiantes en la discusin promovida en clase. El curso es complementado por algunas
experiencias de ctedra, en las cuales se llevar a cabo la descripcin de los diferentes dispositivos que
constituyen un instrumento analtico especfico. El planteamiento y resolucin de problemas, como
trabajo extraclase de los estudiantes, ser parte indispensable de este curso.
Cromatografa
La palabra Cromatografa significa Escribir en Colores ya que cuando fue
desarrollada los componentes separados eran colorantes. Los componentes de una
mezcla pueden presentar una diferente tendencia a permanecer en cualquiera de las
fases involucradas. Mientras ms veces los componentes viajen de una fase a la otra
(particin) se obtendr una mejor separacin.
Las tcnicas cromatogrficas se basan en la aplicacin de la mezcla en un punto (Punto
de Inyeccin o Aplicacin) seguido de la influencia de la fase mvil. Para ver un
Esquema del proceso cromatogrfico seleccione aqu.
Clasificacin de la Cromatografa
Cromatografa en Columna:
En este caso se utilizan columnas de vidrio rellenas de Almina (Al2O3), Slica u Oxido
de Magnesio.
Cromatografa en Capa Fina.
En este caso se utiliza una placa de vidrio recubierta con fase estacionaria
(generalmente del tipo descrito en la Cromatografa en Columna con algunas variantes)
manteniendo un pequeo espesor constante a lo largo de la placa. Esta se coloca en una
cuba cromatogrfica, la cual debe encontrarse saturada con el eluente (Fase Mvil
lquida). El eluente ascender por la placa y arrastrar los componentes a lo largo de
sta produciendo manchas de los componentes. Si los componentes no son
coloreados se requerirn tcnicas de revelado (Adicin de Ninhidrina a aminas, Acido
sulfrico para carbonizar compuestos orgnicos, etc) o visores ultravioleta.
Cromatografa en Papel
El proceso es bsicamente el mismo, solo que se usan tiras de papel cromatogrfico en
la cuba cromatogrfica.
Cromatografa de Lquidos de Alta Eficiencia (HPLC)
Es parecida a la Cromatografa en Columna, slo que se aplica el
flujo a presin (entre 1500 a 2200 psi), el tamao de partcula es entre
3 y 10 micras, la longitud de la columna es entre 5 y 25 cm y requiere
de equipo sofisticado. Para ver el Diagrama seleccione aqu.
Fase Normal
La Fase Mvil es No-Polar (Hexano, Tetracloruro de Carbono,
Benceno, etc) y la Fase Estacionaria es Polar (Generalmente Slica).
Fase Inversa.
La Fase Mvil es Polar (Agua, Soluciones Amortiguadoras de pH,
Acetonitrilo, Metanol, etc.) y la Fase Estacionaria es No-Polar
(Generalmente Slica injertada con cadenas de grupos orgnicos de 8
y 18 tomos de Carbn (C8 y C18).
Intercambio Inico
La Fase Estacionaria es una resina de Intercambio Inico y tiene la
propiedad de separar especies ionizadas (Cationes o Aniones). La
Fase Mvil es generalmente una Solucin Amoriguadora de pH.
Exclusin
La Fase Estacionaria est constituda de partculas altamente porosas
que permiten la separacin de los componentes en funcin del tamao
de las molculas. A la Fase Estacionaria se le llama tambin Malla
Molecular. El Cromatograma obtenido representa la distribucin de
Pesos Moleculares.
Cromatografa de Gases (CG)
La Fase Mvil es un Gas (llamado Gas Portador o Acarreador) y la Fase Estacionaria
puede ser un slido (Cromatografa Gas-Slido) o una Pelcula de lquido de alto punto
de ebullicin (Generalmente Polietiln-Glicol o Silicn) recubriendo un slido inerte
(Cromatografa Gas-Lquido). Para ver el diagrama de un Cromatgrafo de Gases (CG)
seleccione aqu.
Los compuestos que se pueden separar por cromatografa de gases deben ser Voltiles y
Trmicamente Estables.
Seleccione aqu para ver una ilustracin en donde se visualizan los tipos de
Cromatografa ms comunes.
Historia
El botnico ruso Mikhail Tswett estableci las ventajas de la cromatografa y fu el primero en utilizar
este trmino. Es recordado como el Padre de la Cromatografa.
Ismailov y Scraiber utilizaron lminas de vidrio para colocar capas muy delgadas de almina y luego
aplicaron extractos vegetales, dando as la primera forma de Cromatografa de Capa Fina. Egon Stanl
(1956) di el nombre de Cromatografa de Capa Fina. Estandariz los procedimientos, equipos y
adsorbentes dando un auge a la tcnica simple, a bajo costo y eficiente.
Proceso de Adsorcin
La muestra aplicada en la capa es adsorbida en la superficie del material por la accin de fuerzas
electrostticas (fuerzas de Van der Waals, puentes de Hidrgeno, efectos inductivos, etc). Luego, cuando
la capa es expuesta a un flujo por accin capilar, se inicia una competencia de enlaces entre los sitios
activos del adsorbente y la substancia con el solvente.
Adsorbentes
Los adsorbentes ms utilizados en la Cromatografa de Capa Fina son:
Silica gel (se utiliza en el 80% de las separaciones)
xido de Aluminio Almina (cida, neutra bsica)
Tierra Silcea Kieselguhr
Celulosa (Nativa o micro-cristalina)
Poliamidas
Estos adsorbentes deber tener las siguientes caractersticas:
Tamao de Partcula
o Volmen de Poro
o Dimetro de Poro
o rea Superficial
Homogeneidad
Pureza
Preparacin de la Placa Cromatogrfica
Se usan como soporte del adsorbente lminas de: Vidrio, Plstico Metlicos (ej: Aluminio)
Los tamaos de la placa para TLC convencional son : 20 x 20; 10 x 20 y 5 x 2
Hay placas que contienen un indicadorr de Fluorescencia : F254 F366. El nmero que apararece como
subndice nos indica la longitud de onda de excitacin del indicador utilizado.
Aplicacin de la muestra
La muestra se aplica en la placa segn el objetivo: Analtico Preparativa en:
Banda
Punto Mancha
Desarrollo de la Placa
Es un proceso mediante el cual son tranportados a travs de la fase estacionaria por la fase mvil.
Eleccin del Solvente
Cmaras para Desarrollo
Existen varios tipos de cmaras:
Normal
Doble Compartimiento
Sandwich
Horizontal
Vario KS
U
Deteccin Visualizacin
Si la muestra (mancha) no es coloreada se requiere de mtodos que nos permitan visualizar el(los)
componente(s) presentes. Tambin se conoce este procedimiento como Revelado.
Estos mtodos son:
Qumicos (por inmersin o rociado). Se obtienen derivados coloreados o fluorescentes
Fsicos (pticos). Generalmente se utiliza radiacin UV
Evaluacin de un Cromatograma de Capa Fina
Anlisis Cualitativo
Medida de Rf
Comparacin Visual de Color/Intensidad
Propiedades UV/IR/MS/NMR
Anlisis Cuantitativo
Semi-cuantitativo
o Comparacin visual del dimetro y la intensidad del color de la mancha contra una
serie de manchas patrones de concentracin conocida
Cuantitativo
o Indirecta
o Directa
Densitometra
Medida de Transmisin. Medida de luz transmitida a travs de la
substancia.
Medida de Emisin. Medida de luz reflejada desde la substancia
Espectrofotometra
Fluorescencia
Fluorescencia con "quenching"
Cromatografa
Keulemans ha definido la cromatografa como un mtodo fsico de separacin en el cual los componentes
a separar se distribuyen entre dos fases, una de las cuales constituye la fase estacionaria, de gran rea
superficial, y la otra es un fluido (fase mvil) que pasa a travs o a lo largo de la fase estacionaria.
La fase estacionaria puede ser un slido o un lquido dispuesto sobre un slido que acta como soporte,
de gran rea superficial. La fase mvil es un fluido (puede ser gas, lquido o fluido supercrtico) que se
usa como portador de la mezcla.
En la cromatografa ocurren dos fenmenos muy importantes y que son prcticamente los rectores del
proceso de separacin: la adsorcin y la absorcin.
La adsorcin es la retencin de una especie qumica en los sitios activos de la superficie de un slido,
quedando delimitado el fenmeno a la superficie que separa las fases o superficie interfacial.
Esta retencin superficial puede ser fsica o qumica. La adsorcin depende de la naturaleza de la
substancia adsorbida, de la temperatura, de la naturaleza y estado de subdivisin del adsorbente, y de la
concentracin.
La absorcin es la retencin de una especie qumica por parte de una masa y depende de la tendencia que
tiene sta a formar mezcla o reaccionar qumicamente con la misma.
Existen muchas maneras de clasificar los mtodos cromatogrficos.
Segn, Giddings, se puede clasificar la Cromatografa por sus variantes:
Fase Mvil (puede ser gaseosa, lquida fluido supercrtico)
Fase Estacionaria
Mecanismo de Retencin (tipos de equilibrios implicados en la transferencia de los solutos entre
las fases).
Forma de Contacto entre las fases (columna superficie plana)
Dimensionalidad
Escala Fsica
Gradientes
Teoras del proceso Cromatogrfico
El proceso cromatogrfico, aparentemente simple en prctica, es en realidad una compleja unin de
fenmenos tales como hidrodinmica, cintica, termodinmica, qumica de superficie y difusin.
Hasta la fecha se han propuesto muchas teoras, que incluyen complejos modelos matemticos para poder
explicar el comportamiento de los solutos en las columnas cromatogrficas. Las ms estudiadas son: La
Teora de los Platos Tericos (Martin y Synge), la Teora Cintica (Van Deemter, Zuiderweg, Klinkenberg
y Sjenitzer) y la Teora Desarrollada (Golay) para Columnas Capilares.
Segn la Teora de los Platos, una columna cromatogrfica est constituda por una serie de platos que
contiene una fase estacionaria. Supone que el volmen de fase estacionaria en cada plato es constante;
que el volmen de fase mvil es constante de plato a plato; que en cada plato las dos fases estn en
equilibrio, y que el valor del Coeficiente de Distribucin es constante e independiente de la concentracin
del soluto.
La principal desventaja de la Teora de los Platos Tericos es la falta de conexin entre la eficiencia de la
columna cromatogrfica, el tamao de la partcula, la difusin, la velocidad de flujo y la temperatura. La
otra desventaja es que utiliza un modelo basado en muchas suposiciones.
La Ecuacin que rige esta teora es:
N = 16(tr/w)
2

La Teora Cintica considera el proceso cromatogrfico en funcin de los factores cinticos que
intevienen en l.
Siendo estos factores:
Las mltiples trayectorias (diferentes rutas) que toma un soluto durante su movimiento
(migracin) a travs del empaque de la columna, provocando variaciones en la velocidad del
flujo.
La Difusin Axial o Longitudinal del soluto en la fase mvil.
La cintica de la resistencia a la transferencia de masa entre las fases mvil y estacionaria.
La Ecuacin de Van Deemter,
HETP H = A + B/u + Cu
donde u= L(cm)/ traire(seg)
Columna
Es el lugar donde ocurre la separacin. Se dice que es el corazn de un cromatgrafo.
Los materiales con los cuales generalmente se pueden elaborar las columnas son: cobre, aluminio, acero
inoxidable, vidrio tefln.
El relleno puede ser un slido, un lquido recubriendo un slido.
Podemos clasificar las columnas segn el propsito del proceso cromtografico:
Empacadas
o Analtica
o Preparativas
Capilares
o W.C.O.T. (Wall Coated Open Tubular)
o S.C.O.T. (Support Coated Open Tubular)
Factores que Afectan la Eficiencia de una Columna
Longitud de la Columna
Dimetro de la Columna (1/4", 1/8", 1/16" de dimetro externo)
Tamao de las partculas del relleno
Naturaleza de las fases
Cantidad de fase estacionaria
Temperatura de la columna
Velocidad del gas portador
Cantidad de muestra inyectada
Material del cual est elaborada la columna
Enrollado de la columna
Soporte
La funcin bsica del soporte es la de "mantener" (sostener, retener) la fase estacionaria. Idealmente
debera ser un material inerte que "mantiene" la fase estacionaria sobre su superficie como una pelcula
delgada.
La mayora de los soportes cromatogrficos est hecha de diatomita. Qumicamente es casi todo slice,
con algunas impurezas. Tambin se conoce como Tierras Diatomceas Kiselguhr (palabra alemana).
Domina el campo de los soportes debido a su estructura, superficie y disponibilidad.
Hay que tener en cuenta dos cosas a la hora de escoger un soporte:
La Estructura, Caractersticas Fsicas (contribuye a la eficiencia de la columna
cromatogrfica):
o Tamao de partcula
o Dimetro del poro
o Densidad
o rea Superficial
y
la Qumica de Superficie Caractersticas Superficiales (gobierna la participacin del soporte en
los resultados de la separacin).
o Grupos silanoles activos
o Iones metlicos
Adems de las caractersticas anteriores, la seleccin del soporte va a depender tambin de:
la naturaleza de la muestra
la naturaleza de la Fase Lquida
el uso que se le va a dar a la columna:
o General
o Especfico
Precio
Podemos resumir que un buen soporte debe reunir las siguientes caractersticas:
Elevada Superficie por unidad de volmen
Estabilidad Trmica
Dureza mecnica suficiente para que pueda resistir los procedimientos de revestimientos y
relleno
Inactividad qumica o de adsorcin
Baja resistencia al paso de la fase mvil
La eliminacin reduccin de los sitios activos de adsorcin (tambin conocido como Desactivacin de
la Supeficie) de un soporte cromatogrfico puede efectuarse de varias maneras:
Remocin por lavado con cido (NAW AW)
Eliminacin Remocin por reaccin del Grupo Silanol
Saturacin de la superficie con una fase lquida
Impregnando recubriendo con material slido inerte
Fase Estacionaria Lquida
Al hablar de fase estacionaria lquida entramos en contacto con dos palabras trminos: Polaridad y
Selectividad.
Las fases lquidas podemos clasificarlas segn sus polaridades cromatogrficas, nos valemos de unas
constantes que determinan dicha polaridad. Existen dos sistemas:
Constante de Rohrchneider
Constante de McReynolds
Existen muchas discusiones sobre este tema para poder definir y describir el parmetro polaridad en
cromatografa, podemos decir que la polaridad de una fase estacionaria lquida se refiere a las
interacciones intermoleculares que involucra dipolos permanentes.
Selectividad es definida como las diferentes atracciones intermoleculares
Varias cualidades ha de reunir un lquido para servir como fase estacionaria:
Viscosidad
Tensin Superficial
Tensin de Vapor
Selectividad respecto a los componentes de la fase mvil
Reversibilidad del Reparto
Estabilidad Trmica
Gas Portador
El gas portador cumple bsicamente dos propsitos: Transportar los componentes de la muestra, y crear
una matriz adecuada para el detector.
Un gas portador debe reunir ciertas condiciones:
Debe ser inerte para evitar interacciones (tanto con la muestra como con la fase estacionaria)
Debe ser capaz de minimizar la difusin gaseosa
Fcilmente disponible y puro
Econmico
Adecuado al detector a utilizar
Detectores
Un detector es un dispositivo para revelar la presencia de las sustancias eludas a la salida de la columna
cromatogrfica. Podemos expresar que el detector son los "ojos" de un cromatgrafo.
El Detector es un dispositivo capaz de convertir una propiedad fsica, no medible directamente, en una
seal elaborable y ofrecernos informacin sobre la naturaleza y magnitud de la propiedad fsica.
En cromatografa un detector funciona comparando una propiedad fsica entre el gas portador puro y el
mismo gas portador llevando cada uno de los componentes que previamente se han separado en la
columna, esta accin se traduce en una seal tipo elctrica, que posteriormente se amplificar mediante un
registrador grfico integrador permitiendo indicar el momento que salen de la columna los
componentes.
Clasificacin de los detectores
Estos pueden ser clasificados:
Detectores segn su Grado de Selectividad :
o Universales. Responde a la mayora de los solutos que pasan por l.
o Especficos Selectivos. Exhibe una gran respuesta a un grupo particular de
substancias con un mnimo de respuesta a otras.
Detectores Destructivos y No destructivos. Esta clasificacin, obviamente, es en referencia a si
la muestra es destruda o no.
Detectores segn su Modo de Respuesta:
o Dependientes del Flujo Msico. Producen una seal que es proporcional a la cantidad
de soluto que pasa a travs de l en la unidad de tiempo pero es independiente del
volmen de gas portador requerido para la elucin.
o Dependiente de la Concentracin. Dan una seal proporcional a la cantidad de soluto
por unidad de volmen de gas portador que pasa a travs de l.
Detectores segn el proceso de deteccin Ionizacin, ptico-espectroscpico, Electroqumico,
etc.
Caractersticas de los Detectores
Sensibilidad. Medida de la efectividad de un detector para convertir la muestra en una seal
elctrica medible.
Linealidad. Rango de masa concentracin de muestra sobre el cual el detector mantiene una
sensibilidad constante sin una desviacin arbitraria. El significado prctico de la linealidad del
detector es el que le indica al analista la concentracin para la cual el detector es confiable. Hay
dos lmites en la curva de linealidad:
o El lmite de concentracin inferior, que es dado por el lmite de deteccin y,
o El lmite Superior, definido por un porcentaje de desviacin arbitrario de la curva de
linealidad, normalmente se toma un 5% de desviscin.
Rango Dinmico [Link] sobre el cual la sensibilidad del detector es constante.
Ruido. Es cuantificado por el promedio de la amplitud pico-pico de la seal. El significado de
conocer el nivel de ruido de un detector es un factor determinante en la determinacin de la
cantidad mnima detectable y el lmite inferior del rango lineal.
Lmite de Deteccin. Est definido como la mnima cantidad de substancia que puede producir
una seal que sea el doble del nivel de ruido.
Corriente de Fondo. Seal constante de salida generada por el proceso en el que un detector est
operativo sin que alguna substancia pasa a travs de l. Esta seal es muy importante, ya que
permite diagnosticar el buen o mal funcionamiento del detector.
Detectores ms usados en Cromatografa de Gases
Detector de Conductividad Trmica. Mide la conductividad trmica del gas portador, ocasionada
por la presencia de substancias eludas.
Detector de Ionizacin a la Llama. Basado en la medida de las variaciones de la corriente de
ionizacin en una llama oxgeno-hidrgeno debido a la presencia de substancias eludas.
Detector de Captura Electrnica. Basado en la electronegatividad de las substancias eludas, y
su habilidad para formar iones negativos por captura de electrones.
Detector de Fotometra a la Llama. Basada en la medida de la intensidad de la emisin
molecular de la fluorescencia de heterotomos en las molculas orgnicas.
Detector de Ionizacin de Llama Alcalina
Detector de Espectrometra de Masas
Cromatograma y su Interpretacin
Los siguientes trminos son los utilizados en un cromatograma tpico y recomendados por la IUPAC:
Line Base
Pico Cromatogrfico
Base del Pico
rea del Pico
Altura del Pico
Ancho del Pico
Ancho del Pico a la mitad de la Altura
Medida de la Altura rea de Pico
Altura del Pico: Medida que se efectua, para cada pico de inters, desde la lnea base hasta el
mximo del pico.
Los errores de malas mediciones se pueden atribuir a:
o Insuficiente Resolucin
o Variaciones en la lnea base
o Picos extremadamente pequeos
Las desviaciones en la lnea base se pueden compensar por interpolacin de sta entre el prinpio
y el final del pico.
rea del Pico.
Existen varias tcnicas para la determinacin del rea de un Pico Cromatogrfico:
o Integracin Manual
Mtodos Geomtricos
Triangulacin: En esta tcnica se trazan lneas tangentes a cada lado
del pico. La altura se mide desde la lnea base hasta la interseccin de
las dos tangentes. El ancho se mide tomando la interseccin de las
dos lneas tangentes con la lnea base. Luego se utiliza la frmula
A=1/2*Altura del Pico* Base del Pico. Las limitaciones de esta
tcnica estan en el trazado de las lneas tangentes, un pequeo error al
trazar las tangentes puede afectar la medida de la altura.
Altura por ancho a la mitad de la Altura:
Mtodos Mecnicos
Planimtricos
Corte y Pesada: Esta tcnica requiere recortar el pico del
cromatograma, luego pesarlo en una balanza analtica. El recorte y
pesada depende mucho de la habilidad del operdor. Pueden
introducirse errores por cambios en la humedad del papel, la grasa de
las manos del operador, homogeneidad del papel. Generalmente se
recomienda utilizar una fotocopia del cromatograma para no destruir
el original.
o Integracin Automtica
Electromecnica
Electrnica
Anlisis Cualitativo
Los procedimientos para identificacin de los picos cromatogrficos podemos dividirlos en dos
categoras:
Identificacin Cromatogrfica
o Por Datos de Retencin
o Por Serie Homlogas (Indices de Retencin de Kovacs)
Identificacin No Cromatogrfica
o Anlisis Clsicos
o Identificacin por:
Adicin de Estndar
Formacin de Derivados
Sustraccin de un Componente
o Identificacin con Tcnicas Auxiliares: UV, IR, MS, RMN
Anlisis Cuantitativo
Existen varios mtodos para cuantificar un pico cromatogrfico:
Normalizacin de rea
Normalizacin de rea con Factores de Respuesta
Estandarizacin Externa
Estandarizacin Interna
Qu es la Electroforesis Capilar ?
Es una poderosa tcnica analtica moderna para la separacin de pequeas y grandes
molculas. Su alta eficiencia en la separacin, tiempo rpido de anlisis, posibilidades
de automatizacin y compatibilidad con pequeas cantidades de muestras.
Control del Flujo Electroosmtico
Campo electectrico
pH del Buffer (pH bajo, disminuye el EOF y pH alta, aumenta el EOF)
Fuerza Inica o concentracin del buffer (Al aumentar la concentracin del
Buffer, disminuye el Potencial Zeta y EOF).
Temperatura (Cambia la viscoisidad)
Modificadores orgnicos (Cambian el Potencial Zeta y la Viscosidad)
Surfactantes
Cubrimientos covalentes
Polmeros hidroflicos neutros
Buffers-Aditivos
Seleccin del Buffer. La sensivilidad de EOF al pH requiere el uso de un buffer que
pueda mantener un pH constante. Los sistemas efectivos de buffer tienen un rango de
dos unidades de pH aproximadamente centradas alrededor del valor de pKa.
Un Buffer para uso de CZE debe poseer las siguientes caracterticas:
Buena capacidad de amortiguacin en el rango seleccionado
Baja absorbancia a la longituid de onda de deteccin
Baja movilidad, para minimizar la generacin de corriente
Tipos de Buffers:
Qumicos
Citrato, rangos de pH ( 2,08 - 5,74 )
Acetato, rangos de pH ( 3,76 - 5,76 )
Fosfato, rangos de pH ( 1,14 - 3,14 // 6,20 - 8,20 )
Borato, rangos de pH ( 8,14 - 10,14)
Biolgicos
MES
ACES
PIPES
BES
HEPES
EPPS
Tricina
Bicina
Tris
TAPS
Que es la colorimetra?
La colorimetra tiene como fin definir de forma matemtica y grfica los colores
percibidos, y permitir clculos sobre ellos. Pero la percepcin de los colores es un
proceso fisiolgico y difiere de una persona a otra. A fin de poder unir con xito la
percepcin fisiolgica y un sistema matemtico riguroso, no podrn tenerse en cuenta
desviaciones individuales del ojo humano.
A este respecto, la CIE (Comisin Internacional de la Iluminacin) ha fijado las
propiedades fisiolgicas del ojo humano, despus de una serie de medidas sobre un
determinado numero de personas. De ello ha resultado la "curva de sensibilidad espectral"
del observador medio. Esta curva, que es vlida para un ojo adaptado a luminancias
elevadas, representa el valor medio de las evaluaciones efectuadas, dando por supuesto que
las personas que presentaban efectos importantes, tales como el daltonismo, etc. fueron
descartadas.
Que es un colormetro?
El colormetro es un dispositivo destinado a comparar las luminancias y/o los colores.
Esta constituido esencialmente por dos superficies de proyeccin dispuestas segn un
determinado ngulo, sobre las cuales se proyectan los elementos a comparar.
Existen muchos tipos diferentes cuyos principios de funcionamiento simplificados se
representan en la siguiente figura:
El ngulo entre las dos superficies (pantallas) sirve para obtener una separacin neta entre
los colores a comparar. La luz a examinar se proyecta sobre una de las superficies,
mientras que la otra sirve de plano de proyeccin a tres proyectores que suministran los
iluminantes rojo, verde y azul.
Por la primera ley de Grassmann sabemos que se pueden imitar todos los colores con una
mezcla aditiva de rojo, verde y azul. Es pues posible por medio del colormetro imitar el
color proyectado sobre la superficie derecha.
LA ESPECTROSCOPA DE ABSORCIN ATMICA UNA TCNICA TIL EN EL
ANLISIS QUMICO ELEMENTAL DE ARTEFACTOS ARQUEOLGICOS
Marina Snchez Nava
IIA, UNAM. Laboratorio de Qumica y Conservacin Arqueolgica
En el anlisis qumico de artefactos arqueolgicos es comn el uso de diversas tcnicas
analticas que nos ayudan a determinar la composicin qumica del material que lo forma, los
elementos qumicos presentes en mayor cantidad, los minoritarios y los elementos trazas. Esta
informacin es de gran utilidad para los arquelogos.
Una de las tcnicas empleadas para este fin es la Espectroscopia de Absorcin Atmica, con
esta tcnica analtica podemos realizar un anlisis qumico elemental de algunos artefactos
arqueolgicos determinando particularmente los elementos metlicos a travs de la tabla
peridica.
La espectroscopia de absorcin atmica se basa en la absorcin de luz por los tomos de un
elemento a cuantificar en una muestra, cuando se hace incidir en ella un haz de luz emitido por
una lmpara con una rigurosa longitud de onda definida, la cual corresponde a la longitud de
onda de emisin caracterstica del elemento particular escogido para el anlisis. La extensin a
la cual la luz es absorbida provee una estimacin de la concentracin del elemento en la
muestra, la cual debe estar en solucin. Por lo cual requiere un tratamiento previo, para que
sea atomizada en una flama, la intensidad del rayo de luz emergente, despus de la absorcin
por la muestra, es medido para determinar su absorcin. Una lmpara diferente se requiere
para cada longitud de onda caracterstica de tal forma que el anlisis de cada elemento
necesita una medicin por separado.
Procedimiento experimental

Las muestras para el anlisis varan en peso de 10 mg. a 1g. dependiendo de las
concentraciones de los elementos a analizar, pueden ser tomadas primeramente en una
solucin. Normalmente se utiliza agua regia para metales, mientras que en el caso de
materiales no metlicos las muestras en polvo pueden ser disueltas en una mezcla de cido
fluorhdrico y cido perclrico. Unos pocos mililitros de esta solucin son aspirados para formar
un fino spray, el cual es entonces llevado hasta la flama adecuada (p.e. aire/acetileno, xido
nitroso/acetileno), donde la solucin es eficazmente atomizada. Para el anlisis cuantitativo, se
realiza una calibracin con soluciones conteniendo cantidades conocidas de los elementos a
analizar, es necesario que entre stas haya una relacin lineal y entre la concentracin y la
absorbancia (A).
Ventajas y limitaciones

El rango de concentracin ptimo para un elemento determinado en la solucin usando
espectroscopia de absorcin atmica es tpicamente 1-10 ppm (1 g/ml de sol.). La
concentracin lmite para el anlisis depender principalmente de la cantidad de muestra
disponible.
El anlisis por medio de esta tcnica tiende a ser ms preciso y exacto que usando
espectroscopia de emisin ptica. Sin embargo, tiene la desventaja de que debe analizarse
cada elemento por separado aumentando el tiempo del anlisis, por otra parte en el anlisis de
muestras no metlicas debe hacerse una disolucin de las mismas en cido fluorhdrico y
perclrico lo cual no siempre es fcil de realizar.
Sin embargo, la aplicacin de la espectroscopia de absorcin atmica es ampliamente utilizada
en el estudio de artefactos arqueolgicos. En el anlisis de materiales metlicos no ferrosos
(aleaciones de cobre), lo cual puede ayudar al entendimiento del desarrollo de la metalurgia del
cobre y bronce y de tcnicas de fundicin en pocas pasadas. Tambin puede utilizarse para el
anlisis elemental de artefactos de pedernal. El anlisis qumico elemental de artefactos de
cermicas tiene gran utilidad ya que puede ayudar a:
Conocer fuente y origen de las arcillas.
Determinar los orgenes de objetos de cermica que fueron adquiridos a travs de comercio, lo
cual implica conocer las tendencias econmicas y polticas.
Encontrar diferencias qumicas entre objetos originales y copias de los objetos
Es de gran ayuda en el soporte de conceptos tericos concernientes a la difusin de
caractersticas o rasgos artsticos y culturales.
El uso de la tcnica de absorcin atmica hace posible determinar elementos que se
encuentran en los suelos en cantidades de ppm (1 g/g de muestra) que por otros mtodos
analticos no podran determinarse. Este mtodo de anlisis se aplica para la caracterizacin de
suelos. Con este mtodo se puede determinar los siguientes elementos en suelos. Sodio (Na),
Manganeso (Mn), Cromo (Cr), Fierro (Fe), Cobre (Cu), Estroncio (Sr), Magnesio (Mg), Nquel
(Ni), Potasio (K), Aluminio (Al), Zinc (Zn), Litio (Li), Rutenio (Ru). Se puede realizar la
identificacin de las diversas piedras, determinacin de elementos traza de la cantera y
muestras de material de construccin, usando espectroscopia de absorcin atmica.
En Mxico esta tcnica ha sido ampliamente utilizada por el Ing. Luis Torres Montes del IIA de
la UNAM. Este reconocido investigador la ha utilizado en varias ocasiones para el anlisis de
cermica maya para el estudio de los elementos mayoritarios, minoritarios y elementos traza,
determinando Fierro, Calcio, Magnesio, Potasio, Cobalto, Cromo, Cobre, Manganeso, Zinc,
Plata, Oro, Nquel con el objetivo de determinar la procedencia de la cermica en cuestin (1).
Para anlisis elemental de instrumentos metlicos de origen arqueolgico, por ejemplo el caso
de un instrumento metlico encontrado en Tonanitla D.F. en el cual se determinaron elementos
como Cobre, Plata, Plomo Manganeso, Zinc, Bismuto, Mercurio, Nquel, Estroncio, Antimonio,
Fierro, Molibdeno, Platino y Cromo (2).
Sin embargo, cabe mencionar que como todas las tcnicas analticas no debe utilizarse de
manera aislada sino de manera complementaria ya que junto con el empleo de otras tcnicas
nos conducir a resultados completos y satisfactorios en la caracterizacin qumica de un
artefacto arqueolgico.
La espectroscopa
Buena parte del estudio de los astros se ha hecho mediante la observacin de la posicin, forma y
movimiento de los objetos celestes. El descubrimiento de nuevos planetas y lunas, de nebulosas y de
galaxias fue hecho observando directamente estos objetos. Hoy en da la observacin "a ojo" e incluso la
fotografa juegan un papel secundario en astronoma; en su lugar, dispositivos optoelectrnicos (como los
chips "CCD" que se encuentran en algunas cmaras de video) registran imgenes de todo tipo de objetos,
las cuales son posteriormente procesadas por computadora para lograr una mayor sensitividad. Gracias a
estas tcnicas, telescopios de dos metros, como el del observatorio Guillermo Haro en Cananea, pueden
ver objetos mas de un milln de veces mas dbiles que el umbral de ojo humano. Sin embargo, esta no es
la nica forma de observar el cielo. Desde finales del siglo pasado los cientficos emplean otra poderosa
forma de estudiar los astros: la espectroscopa. La espectroscopa fue fundamental en dar el paso de la
astronoma a la astrofsica.
El primer antecedente de esta tcnica se di en el siglo XVII cuando Newton descubri que la luz blanca
al pasar por un prisma de vidrio se descompone en luz con los colores del arcoiris. La secuencia va del
violeta, al azul, al verde, amarillo, anaranjado y rojo. La combinacin de luz de estos colores da como
resultado luz blanca. La luz proveniente del Sol est compuesta de luz de todos estos colores, aunque con
predominancia de la luz amarilla (el color de luz que nuestros ojos detectan con mayor eficiencia). La
franja de luz de colores que se obtiene al separar la luz del Sol en sus distintos colores, se denomina
"espectro solar". En 1814 Joseph Fraunhofer not que el espectro solar est lleno de un gran nmero de
rayas oscuras, como si faltaran algunos colores. Por otro lado se saba que la luz de algunos tipos de
llamas producen lneas brillantes. En particular lmparas de vapor de sodio producen un tipo de luz
amarillo cuyo espectro est formado no por una sucesin de colores, sino por dos lneas delgadas que se
encuentran en la regin del espectro correspondiente al color amarillo. Fraunhofer not que las lneas
oscuras del espectro del Sol coinciden con las lneas brillantes de los espectros de algunos tipos de
lmparas, como las de sodio por ejemplo. Fraunhofer muri poco despus, a los 39 aos de edad. Sin
embargo su descubrimiento no pas desapercibido y muchos cientficos ya se encontraban trabajando en
la misma direccin.
En 1860 Bunsen y Kirchhoff haban mostrado que distintas substancias producen distintas lneas en el
espectro. Bunsen identific dos nuevos elementos qumicos, el cesio y el rubidio, a partir de observar sus
espectros caractersticos. Por otro lado, Kirchhoff descubri que as como el gas caliente da lugar a lneas
brillantes en el espectro, el gas fro enfrente de una fuente de luz da lneas oscuras. Una primera
conclusin era la presencia de sodio en el Sol; pero lo mas notable del hallazgo de Kirchhoff era que daba
pie a la identificacin de TODOS los elementos presentes en el Sol. Increblemente las lneas oscuras del
espectro solar permitan lo que pareca inalcanzable: conocer la composicin qumica de los astros.
Obtener el espectro del Sol es muchsimo mas sencillo que obtener el de una estrella. En 1863 Huggins
intent sin xito fotografar el espectro de Sirio; nueve aos despus, Henry Draper obtuvo el primer
espectro estelar, el de la estrella Vega, marcado por cuatro lneas brillantes. Huggins no haba cejado en su
esfuerzo y en 1875 logr desarrollar una nueva tcnica fotogrfica que rpidamente le permiti adquirir
espectros de buena calidad, los cuales incluan lneas de luz ultravioleta, tipo de luz a la cual nuestros ojos
no son sensibles, pero igualmente valiosa que la luz visible desde el punto de vista cientfico. Esta tcnica
mostr la presencia de hidrgeno en un gran nmero de estrellas, dando los primeros indicios de la gran
importancia de este elemento en el Universo. Por la misma poca Norman Lockyer identific un nuevo
elemento en el Sol, el helio, el cual no fue hallado en la Tierra hasta 1895. El helio es, despus del
hidrgeno, el elemento mas abundante del Universo. Entre ambos constituyen el 99% de la materia
(barinica) del Universo.
El estudio de los espectros de estrellas y dems objetos del firmamento es una rama fundamental de la
astrofsica, a tal punto que los espectrgrafos son instrumentos indispensables en todos los observatorios
astronmicos profesionales. El estudio de los espectros nos aportan tres tipos de informacin: - primero,
nos permite identificar los distintos elementos presentes en los astros; - segundo, al comparar cuanta luz
llega en distintas lneas y en distintas regiones del espectro, es posible determinar las condiciones fsicas
de la estrella, principalmente su temperatura y su densidad; - tercero, nos proporcionan importantes
indicios acerca del movimiento del objeto bajo estudio y de sus componentes. Esto se debe al llamado
efecto Doppler, el cual indica que las lneas de cada elemento cambian de posicin al moverse la fuente
de luz, yendo hacia la parte azul del espectro cuando el objeto se mueve hacia el observador, y hacia el
rojo cuando el objeto se aleja del observador. Los movimiento internos de componentes de un objeto,
como por ejemplo estrellas en una galaxia, dan lugar a lneas mas anchas de lo normal. El estudio de la
forma de las lneas en los espectros de distintos objetos es un campo de intensa actividad en la astrofsica
moderna.
La informacin que proporcionan los espectros es mucho mas rica que la que las imgenes directas de los
astros pueden proporcionarnos. Los espectros nos ensean acerca de la qumica, las condiciones fsicas y
la dinmica de los astros. Sin duda mucho mas de lo que Fraunhofer sospech. Su descubrimiento de las
lneas oscuras en el espectro del Sol di lugar al desarrollo de la espectroscopa, y al inicio de la
astrofsica.
Resonancia. Espectroscopa de enlaces conjugados.

OBJETIVO.
Objetivo didctico.
Observar la relacin entre la resonancia de dobles enlaces conjugados y las propiedades espectrales (en el visible) de
las molculas orgnicas. Comprender la utilidad de la espectrofotometra para identificar molculas con grupos
cromforos.
Objetivo experimental.
Determinar el espectro de absorcin en el visible de alcanos y compuestos con dobles enlaces conjugados para
compararlos entre s y relacionarlos con su estructura electrnica.
INTRODUCCION.
La energa requerida para excitar los electrones fuertemente enlazados, como en los hidrocarburos saturados, corresponde a
la luz ultravioleta (UV) lejana de alta energa, de longitudes de onda () menores de 100 nm.
En cambio, los alquenos poliinsaturados con enlaces alternados o conjugados absorben luz en la porcin UV cercana y/o
visible (VIS) del espectro electromagntico. Estas bandas se producen debido a la absorcin de la energa de los fotones de
ms larga por los electrones moleculares de valencia, que se excitan y son promovidos a orbitales moleculares vacos de
mayor energa. La alternancia de los enlaces en un polieno facilita que los electrones de los orbitales p de todos los carbonos
sp
2
adyacentes puedan aparearse. Esto provoca que cada par de electrones p no se pueda ubicar fijo entre slo un par de
carbonos sp
2
, por lo que se dice que estn deslocalizados. Ya que todos los electrones p pueden encontrarse en orbitales a lo
largo de toda la serie de enlaces conjugados de la molcula, dichos electrones poseen la misma energa, por lo que han entrado
en resonancia.
Los alquenos simples o monoinsaturados absorben luz en de 180 a 200 nm (E 160 kcal/mol), mientras que la
conjugacin de insaturaciones adicionales desplaza la absorcin mxima a ms largas. Por ejemplo, el 1,3-butadieno
presenta una mx a 217 nm. Esta disminucin en la energa de absorcin de los dienos conjugados se debe a la promocin de
un electrn de un orbital ocupado, de ms energa hasta otro orbital * (excitado) desocupado de menor energa.
Por lo tanto, la absorcin de un hidrocarburo por arriba de 200 nm en la regin UV sugiere resonancia por la presencia de un
sistema conjugado de electrones. Conforme aumenta el sistema de enlaces conjugados, o grupo cromforo de una molcula,
mx, la resonancia y la magnitud de la absorcin de luz (A) tambin se incrementan, llegando incluso a tener color y a absorber
en VIS. Por ejemplo, la vitamina A posee cinco enlaces conjugados y es amarilla, mientras que el -caroteno, con once
conjugaciones, es rojo oscuro.
La forma que presenta el espectro de absorcin electromagntica UV/VIS de una substancia qumica se origina por la relacin
de A y las longitudes de onda del intervalo en el que ocurre la absorcin de luz por los electrones moleculares, y est
regulado por la ecuacin de Lambert y Beer:
A

c l
donde A

es la absorbencia de la muestra en cada longitud de onda ,

es el coeficiente de absorcin o extincin de luz por la

muestra a cada , c es la concentracin de la muestra y l es la longitud del recorrido de la luz (en cm) a travs de la muestra.
MATERIALES Y EQUIPOS.
Artculo Cantidad OK
Agitador de vidrio de 5 mm 1 ___
Agitador magntico " x 5/16" 1 ___
Agitador magntico 1" x 3/8" 1 ___
Bistur 1 ___
Botella lavadora con agua destilada 1 ___
Botella lavadora con etanol 1 ___
Celdas de vidrio de 5 ml 3 ___
Embudo de talle largo 1 ___
Fotocolormetro 1 ___
Gradilla 1 ___
Mano para mortero 1 ___
Mortero 1 ___
Papel filtro No. 4 1 ___
Parrilla magntica 1 ___
Pipeta Pasteur con bulbo 1 ___
Pipetas serolgicas de 1 ml 3 ___
Pipetas serolgicas de 10 ml 3 ___
Probeta de 50 ml 1 ___
Tubos de ensaye de 15 ml 3 ___
Vasos de precipitado de 50 ml 4 ___
REACTIVOS Y SUSTANCIAS.
Etanol absoluto.
Vitamina A (todo-trans retinol),
una cpsula de 50,000 UI. 328.5 g/mol. 1 milln de UI equivalen a 0.344 g.
-caroteno (provitamina A), una cpsula de 15 mg. PM = 536.9 g/mol.
PROCEDIMIENTO.
Proteccin OK
Anteojos de policarbonato o monogogles ___
Guantes de nitrilo para solventes orgnicos ___
Ropa de algodn ___
Maneje los vapores orgnicos en campana para vapores ___
No respire los vapores ___
Bao de ojos disponible ___
Regadera de seguridad disponible ___
Extinguidor de polvo qumico o CO2 (Tipo ABC) ___
Lave abundantemente despus de usar los reactivos ___
No vea directamente la lmpara del fotocolormetro ___
Tenga ubicado o a la vista el equipo de extincin de fuego ___
Experimento OK
Experimento.
1. Revise que las llaves de gas estn cerradas.
2. Revise que las llaves de gas estn cerradas.
3. Revise que las llaves de agua estn cerradas.
4. Revise que las llaves de aire comprimido estn cerradas.
5. Revise que los contactos elctricos estn libres.
6. Revise que los interruptores elctricos del laboratorio estn encendidos.
7. Revise que la luz del laboratorio est encendida.
8. Revise que los extractores de aire estn encendidos.
9. Revise que el etanol absoluto est en la campana.
10. Revise que la cpsula de vitamina A est sobre la mesa.
11. Revise que la cpsula de -caroteno est sobre la mesa.
12. Arme el soporte universal.
13. Coloque el anillo de hierro en el soporte universal.
14. Colquese los guantes de nitrilo.
15. Lave el material de vidrio con agua corriente y detergente.
16. Enjuague el material con agua destilada.
17. Seque el material con franela o con papel absorbente.
18. Seque los guantes de nitrilo con franela o con papel absorbente.
19. Colquese los monoggles.
20. Conecte el fotocolormetro.
21. Con la perilla izquierda encienda el fotocolormetro (B&L Spectronic 20).
Soluciones.
22. Conecte la parrilla magntica.
23. Tome un vaso de precipitados de 50 ml.
24. Etiquete el vaso de 50 ml con el nombre vitamina A.
25. Tome un mortero.
26. Coloque una cpsula de vitamina A en el mortero.
27. Tome un bistur.
28. Con en bistur corte la cpsula de vitamina A en el mortero.
29. Limpie el bistur.
30. Encienda la campana de extraccin.
31. Coloque una probeta graduada de 50 ml dentro de la campana.
32. Destape el frasco de etanol absoluto.
33. Dentro de la campana mida 10 ml de etanol con la probeta.
34. Tape el frasco de etanol absoluto.
35. Vierta los 10 ml de etanol en el mortero.
36. Con el agitador de vidrio comprima la cpsula de vitamina A.
37. Vierta la solucin de vitamina A/etanol en el vaso de 50 ml.
38. Coloque el vaso vitamina A sobre la parrilla magntica.
39. Introduzca el agitador magntico en el vaso vitamina A.
40. Coloque la probeta graduada de 50 ml dentro de la campana.
41. Destape el frasco de etanol absoluto.
42. Dentro de la campana mida 15 ml de etanol con la probeta.
43. Tape el frasco de etanol absoluto.
44. Apague la campana de extraccin.
45. Agregue los 15 ml de agua destilada al vaso vitamina A.
46. Agite vigorosamente durante 5 min. para disolver la vitamina A.
47. Retire el vaso vitamina A de la parrilla magntica.
48. Con el esptula retire el agitador magntico del vaso vitamina A.
49. Enjuague y seque el esptula y el agitador magntico.
50. Tome un vaso de precipitados de 50 ml.
51. Etiquete el vaso de 50 ml con el nombre -caroteno.
52. Tome un mortero.
53. Coloque una cpsula de -caroteno en el mortero.
54. Encienda la campana de extraccin.
55. Coloque una probeta graduada de 50 ml dentro de la campana.
56. Destape el frasco de etanol absoluto.
57. Dentro de la campana mida 10 ml de etanol con la probeta.
58. Tape el frasco de etanol absoluto.
59. Vierta los 10 ml de etanol en el mortero.
60. Con la mano del mortero comprima la cpsula de -caroteno.
61. Vierta la solucin de -caroteno/etanol en el vaso de 50 ml.
62. Coloque el vaso -caroteno sobre la parrilla magntica.
63. Introduzca el agitador magntico en el vaso -caroteno.
64. Coloque la probeta graduada de 50 ml dentro de la campana.
65. Destape el frasco de etanol absoluto.
66. Dentro de la campana mida 15 ml de etanol con la probeta.
67. Tape el frasco de etanol absoluto.
68. Agregue los 15 ml de agua destilada al vaso -caroteno.
69. Agite vigorosamente durante 5 min. para disolver el -caroteno.
70. Desconecte la parrilla magntica.
71. Retire el vaso -caroteno de la parrilla magntica.
72. Con el esptula retire el agitador magntico del vaso -caroteno.
73. Enjuague y seque el esptula y el agitador magntico.
74. Tome un embudo de talle largo.
75. Coloque el embudo de talle largo en el anillo de hierro.
76. Tome un papel filtro.
77. Pliegue el papel filtro.
78. Coloque el papel filtro en el embudo de talle largo.
79. Tome un vaso de precipitados de 50 ml.
80. Etiquete este vaso de 50 ml con el nombre -caroteno.
81. Coloque el vaso de precipitados de 50 ml bajo el embudo de talle largo.
82. Filtre la solucin del vaso -caroteno a travs del embudo de talle largo.
83. Tome un vaso de precipitados de 50 ml.
84. Etiquete el vaso de 50 ml con el nombre etanol absoluto.
85. Coloque una probeta graduada de 50 ml dentro de la campana.
86. Destape el frasco de etanol absoluto.
87. Dentro de la campana mida 10 ml de etanol con la probeta.
88. Tape el frasco de etanol absoluto.
89. Apague la campana de extraccin.
90. Vierta los 10 ml de etanol en el vaso etanol absoluto.
Calibracin del fotocolormetro.
91. Coloque el monocromador en de 350 nm, desplazando de menos a ms.
92. Tome una celda de colorimetra.
93. Coloque 5 ml de solucin blanco (etanol absoluto) en una celda.
94. Abra la cmara del fotocolormetro.
95. Limpie la celda con papel higinico o con una franela limpia.
96. Introduzca la celda en la cmara del fotocolormetro.
97. Alinie las marcas de la celda y la cmara.
98. Cierre la cmara del fotocolormetro.
99. Ajuste a 100 % de Transmitancia 0.0 de A

con la perilla derecha.

[Link] la cmara del fotocolormetro.
[Link] la celda en la cmara del fotocolormetro.
[Link] la celda en la gradilla.
[Link] la cmara del fotocolormetro.
[Link] a 0 % de Transmitancia de A

con la perilla izquierda.

Determinacin del Espectro.
[Link] 5 ml de solucin de vitamina A en una celda.
106.Coloque5 ml de solucin de -caroteno en otra.
[Link] y registre la A

de cada muestra, de 350 nm a 550 nm, cada 10 nm.

[Link] a 0.0 de A

con el blanco en cada longitud de onda diferente.

Eplogo del experimento.
[Link] el fotocolormetro.
110. Desconecte el fotocolormetro.
111. Lave las celdas con etanol absoluto.
112. Enjuague las celdas con agua.
113. Deseche los residuos (ver Forma de desechar).
114. Lave y enjuague el material.
115. Seque el material con papel o con franela.
116. Revise que no haya reactivos en la campana.
117. Apague la campana de extraccin.
118. Revise que no haya reactivos sobre la mesa.
119. Retrese el equipo de proteccin personal.
[Link] el equipo de proteccin personal.
[Link] el soporte universal.
[Link] que la mesa est limpia y seca.
[Link] que las llaves de gas estn cerradas.
[Link] que las llaves de agua estn cerradas.
[Link] que las llaves de aire comprimido estn cerradas.
[Link] que los contactos elctricos estn libres.
[Link] que los extractores de aire estn apagados.
[Link] que los interruptores elctricos del laboratorio estn apagados.
[Link] que la luz del laboratorio est apagada.
Forma de desechar.
Queme los residuos orgnicos en un incinerador con filtro y trampa.
DISCUSION.
Se elabora una grfica de contra A con cada una de las muestras estudiadas.
Se elabora una grfica de contra con cada una de las muestras estudiadas.
Se comparan los valores de en mx de las muestras estudiadas con los publicados en la literatura y se correlacionan
con la estructura de electrones conjugados.
Identifique los cromforos presentes en las molculas en estudio y mx.
Relacione mx y mn con el color absorbido y transmitido por las molculas estudiadas.
Compare los parmetros espectroscpicos de las molculas estudiadas con hidrocarburos saturados y
monoinsaturados de pesos moleculares equivalentes.
Verifique la pureza de los reactivos utilizados en la experiencia y considrela para la preparacin de las soluciones
correspondientes.
Tabla 6.1. Propiedades de algunos compuestos insaturados y poliinsaturados.
Nombre PM g/mol g/ml Tfus C Teb C
1-hexeno 84.16 0.67 -140 63
1-hepteno 98.19 0.70 -119 94
1-octeno 112.22 0.72 -102 121
1-deceno 140.27 0.74 -66
1-dodeceno 168.33 0.76 -32 208
n-pentadecano 212.42 0.77 9 271
1-pentadecanol 228.42 41-44
Vitamina A todo-trans retinol 286.46 1.04
Acetato de vitamina A 328.5
1000000 UI = 0.344 g
-caroteno (provitamina A) 536.89 183
455/340 nm = > 15/M cm
Referencias.
Reusch, W.H. 1979. Qumica Orgnica. McGraw-Hill, Mxico.
The Merk Catalogue. Merk KgaA, Darmstadt, BRD. 1996.
The Merk Index. 12
th
ed. Merk KgaA, Darmstadt, BRD. 1996.

El efecto de la interaccin de la radiacin electromagntica con la materia es uno de los medios
ms poderosos para obtenerse informaciones sobre su estructura microscpica. Estos efectos
estan normalmente lejos de ser simples y un anlisis ms minucioso de la naturaleza de est
interaccin, depende del conocimiento de los fundamentos de la mecnica cuntica. Sin
embargo, algunos aspectos semi-cuantitativos tambin permiten el uso de est herramienta en
el da a da, en trabajos envolviendo el anlisis y la identificacin de sustancias. En esta
seccin sern tratados aspectos diferentes relacionados al uso de la radiacin
electromagntica como sonda del universo microscpico. En estudios cuantitativos
involucrando absorcin de radiacin, se necesita una medida experimental que pueda
caracterizar la cantidad de radiacin electromagntica absorvida por una muestra. Esta
cantidad corresponde a lo que se llama potencia radiante, osea, la cantidad de energia
caracterstica de la radiacin por unidad de tiempo. La unidad de potencia es el Watt, y su
magnitud puede variar con la direccin. As, se hace conveniente definir la potencia radiante
como funcin de un plano perpendicular a la direccin del flujo de la radiacin (Figura 1).
Experimentalmente, la radiacin absorvida por una muestra es determinada comparndose la
potencia radiante del haz transmitido en la ausencia de especies absorventes, con la potencia
radiante transmitida en la presencia de estas espcies.
Aunque las medidas experimentales sean realizadas en funcin de la potencia radiante,
usualmente encontramos en la bibliografia informaciones sobre la intensidad de la radiacin.
Estas dos cantidades no corresponden a la misma cosa, pero estn relacionadas entre s. La
Intensidad de radiacin, I, es definida como la razn entre la potencia radiante y el ngulo
slido de incidencia. Cuando el rea iluminada, el ngulo slido y el volumen de la especie
absorvente son pequeos, tal como es el caso de las medidas con fines analticos, la potencia
de la radiacin puede ser tomada como la intensidad.
Cuando un haz de radiacin monocromtica, con intensidad Io, incide sobre una cubeta
conteniendo una solucin, vrios fenmenos pueden ocurrir. El efecto ms significativo ocurre
cuando parte de la radiacin es absorvida por el medio que est siendo analizado. Sin
embargo, este no es el nico efecto que puede ser observado. Parte de la radiacin incidente
puede ser reflejada, dependiendo de la especie absorvente o de las diferencias entre el ndice
de refraccin del medio donde la radiacin se propaga e del medio que est sendo analizado
(inclusive por las paredes de la cubeta), al mismo tiempo que otra parte podr simplemente ser
dispersada, en el caso de que el medio no sea transparente y homogeneo. En consecuencia, la
intensidad del haz que es medida despus de atravesar la muestra (intensidad transmitida, I t)
ser menor que la intensidad inicial, Io. Sin embargo, un aspecto sumamente importante, es
que todos estos efectos asociados con la intensidad de radiacin (Figura 2), estn relacionados
entre s por una expresin linear descrita por la equacin:
Io = Ir + Ie + Ia + It eq. 1
Io = Intensidad del haz incidente,
Ir = Intensidad del haz reflejado, resultado de las diferencias del ndice de refraccin entre la
especie absorvente y el ambiente,
Id = Intensidad del haz dispersado, resultado de un medio no homogeneo (suspensin) y/o de
flutuaciones trmicas,
Ia = Intensidade del haz absorvido por el medio
It = Intensidad del haz transmitido.
En medidas analticas convencionales, el efecto de reflexin de la radiacin eletromagntica, Ir,
puede ser minimizado con el uso de medidas relativas y de cubetas con paredes homogneas
con poca espesura y de caras paralelas. En otras palabras, se preparan dos cubetas, una
conteniendo la muestra que se desea analizar y otra conteniendo todos los componentes de la
cubeta anterior, menos la sustancia de inters. La medida de la intensidad del haz transmitido a
travs de la segunda cubeta servir de referencia para calibrar el instrumento, antes de la
medida de la intensidad transmitida a travs de la cubeta conteniendo el material de inters.
Este procedimiento es empleado para descontar los posibles efectos de reflexin observados
en el experimento. De esta forma se puede deducir la necesidad del uso de cubetas
practicamente idnticas, con paredes de poca espesura y con caras paralelas. El procedimento
general para calibracin del espectrofotmetro es de fcil ejecucin.
Gran parte de los procedimientos involucrando absorcin de luz, son realizados con soluciones
homogneas y transparentes, de tal modo que la intensidad de la radiacin dispersada, Id,
puede ser considerada despreciable. De esta forma, trabajndose con soluciones homogneas,
puede considerarse que la intensidad de la radiacin incidente est siendo utilizada en dos
procesos descritos por la ecuacin:
Io = Ia + It eq. 2
Las intensidades incidente (Io) y transmitida (It ) pueden ser medidas directamente. Por lo tanto,
la parte absorvida (Ia) puede ser determinada como la diferencia entre Io e It.
Algunas tcnicas analticas, tales como la turbidimetria y la nefelometria, utilizan la propriedad
que presentan determinadas soluciones no homogneas de dispersar la luz. Para tales
procedimentos, la intensidad del haz disperso ser el factor determinante para aplicaciones
analticas. En este texto, particularmente, no sern discutidos los elementos relacionados con
la dispersin de luz, apenas aquellos relacionados a las soluciones homogneas.
Cuando se piensa en evaluar las propiedades de soluciones en funcin de la intensidad de
haces de luz, imagnase inicialmente que este es el tipo de informacin que est
intrnsicamente asociado a utilizacin de luz elctrica o de instrumentos especiales. Sin
embargo, al buscarse el origen de los estudios de absorcin de luz por soluciones,
sorprendentemente se encuentra que estos estudios son anteriores al descubrimiento de la luz
elctrica. Eran utilizadas luz solar o luz emitida por llama.
Entre las primeras investigaciones sobre la relacin existente entre las intensidades de
radiacin incidente y transmitida, se destacan los experimentos de Pierre Bouguer (1729) y de
Johann Heindrich Lambert (1760). Estos dos cientficos efectuaron observaciones
independientes y verificaron que las propiedades asociadas al proceso de absorcin de luz
pueden ser enunciadas en trminos de dos leyes fundamentales:
La intensidad de luz (monocromtica) transmitida por un cuerpo homogeneo es proporcional a
la intensidad de luz incidente. Es decir: It = k Io.
La intensidad de luz (monocromtica)
transmitida disminuye exponencialmente con el aumento de la espesura de la capa del cuerpo
homogeneo.
La Figura 3 muestra claramente la existencia de este fenmeno, en la rutina del laboratorio, con
el uso de luz solar.
Esta ley es representada por la ecuacin 3 y puede ser deducida matematicamente de varias
formas:
eq. 3
onde: e es la base del logaritmo natural y k' el coeficiente de absorcin. Considerndose la
siguiente propiedad matemtica asociada a la potenciacin:
eq. 4
donde , se puede convertir el trmino en , convirtiendo a la ecuacin 3 en:
eq. 5
En 1852, August Beer estudi la influencia de la concentracin de soluciones coloridas sobre la
transmisin de luz. La conclusin a la que lleg fue que el valor de a' para una determinada
sustancia es proporcional a su concentracin, es decir:
donde, c es la concentracin y a absortividad
( constante independiente de la concentracin).
La ley de Beer es anloga a la ley de Bouguer - Lambert. Mientras que Bouguer y Lambert
estudiaron la variacin en la absorcin de un haz de luz, en funcin de la variacin de la
espesura de la camada absorvente, Beer hizo el mismo estudio en lo que se refiere a la
concentracin de la solucin, manteniendo la espesura constante. En ambos casos, el
resultado es el mismo pus, ya que al variar la concentracin, o variar la espesura de la
solucin a ser atravesada por la luz, esencialmente aumentamos o disminuimos el nmero de
partculas que interacionan con la radiacin.
Combinndose las ecuaciones 4 y 5, se obtiene la ley bsica da espectrofotometria, osea la
Ley Bouguer - Lambert - Beer, ms conocida como la Ley de Beer:

eq. 6
S la concentracin c estuviera expresada en mol por litro y la espesura de la especie
absorvente (en este caso el camino ptico de la cubeta, b) en centmetros, la constante
toma el nombre de absortividad molar, y el
smbolo normalmente empleado para esta cantidad pasa a ser (psilon). La absortividad, ,
es la ms usada cuando no se conoce la naturaleza del material absorvente (y por lo tanto su
masa molar), siendo la concentracin expresada en gramos por litro. La absortividad molar (e)
es preferible cuando se desea comparar cuantitativamente la absorcin de vrias sustancias.
Para una misma espesura de material absorvente (camino ptico), cuanto mayor el valor de e
mayor la sensibilidad del mtodo. De este modo, se puede escribir la ecuacin 6 como:
eq. 7
La absortividad molar, , depende de la sustancia, de la longitud de onda utilizada, de la
temperatura y del solvente. Analizndose la ecuacin 7, se nota que cuanto mayor el valor de ,
mayor ser el nivel de absorcin observado y ms sensible el mtodo espectrofotomtrico. Esta
es la razn por la cual, idealmente, se busca trabajar con una radiacin monocromtica,
siempre que sea posible, correspondiente al mximo de absorcin de la especie a ser
determinada.
Rearreglando la ecuacin 7 se obtiene:
eq. 8
La relacin It / Io se llama transmitancia y es representada por el smbolo T. As:
eq. 9
Se nota por la ecuacin 9 que la relacin entre T y c no es linear, lo que tiende a dificultar la
comparacin entre diferentes transmitancias y las concentraciones asociadas a ellas. Sin
embargo, aplicando logaritmos a la ecuacin 8 ( 9), se obtiene:
eq. 10
La relacin log10 (Io / It) es llamada de absorvncia por muchos autores de idioma portugus,
pero varios otros prefieren la derivacin del ingls, absorbncia (absorvancia en espaol). Por
razones de uso, este texto utilizar esta ltima alternativa. As, la Ley de Beer puede ser
representada como en la Figura 4 y enunciada simplemente como:
A = b c eq. 11
o en el caso de no utilizarse la concentracin en mol por litro:
A = b c eq. 12
Se nota claramente en la ecuacin 12, la relacin lineal entre la absorvancia, A, y la
concentracin c. Por lo tanto, mantenindose el camino ptico constante, se puede determinar
la concentracin de una especie en solucin, a travs de la medida de la absorvancia. En la
prctica, es construida una curva de calibracin (absorvancia versus concentracin), de la
especie de inters y la concentracin de la muestra es determinada a travs de esta.
Para realizarse un anlisis espectrofotomtrico es tambin necesario conocer el espectro de
absorcin de la muestra que se quiere determinar. Esto es hecho para definirse cual es la
longitud de onda de la radiacin incidente, que causar la absorcin mxima de la especie a
ser determinada y as obtener la mejor sensibilidad en su cuantificacin. El espectro de
absorcin es obtenido variando la longitud de onda de la radiacin que incide sobre la muestra
y medindose la cantidad de radiacin absorvida en un espectrofotmetro.
Una otra caracterstica particular de la ley de Beer es la sumatoria de las absorvancias. En
muchos casos, es posible determinar simultneamente dos o ms especies diferentes
presentes en una muestra, utilizndose esta misma ley. Teoricamente, esto puede ser realizado
desde que no ocurra ninguna interaccin entre las especies y que el espectro de absorcin
observado por la mezcla sea la suma de los espectros individuales que serian obtenidos en el
caso de que slo una de las especies estuviese presente en la solucin y bajo las mismas
condiciones experimentales. En la prctica, estas condiciones ideales no ocurren, pero sin
embargo es posible la determinacin de especies qumicas en una mezcla. En este caso, para
cada longitud de onda, la absorvancia total debida a las especies presentes en la solucin
puede ser expresada como la suma de las absorvancias de cada una de ellas,
Para el caso particular de dos sustancias,
donde A1 e A2 son los valores de absorvancia medidas a dos longitudes de onda diferentes,
1 e 2, y los ndices 1 y 2 representan las dos sustancias diferentes.
Como vimos previamente, la interaccin de micro-ondas con molculas que poseen momento
dipolar permanente generan alteraciones detectables en el comportamiento rotacional de esas
molculas y a travs de estas alteraciones podemos determinar los parmetros que definen la
geometria molecular. Si empezamos a disminuir la longitud de onda de la radiacin
electromagntica, alcanzaremos la regin conocida como regin del infrarrojo. Este tipo de
radiacin cuando interacciona con molculas produce alteraciones en el comportamiento
vibracional y rotacional de la misma y con esta perturbacin podemos obtener alguna
informacin sobre la geometria molecular.
El esquema de la instrumentacin sigue las mismas lineas ya discutidas anteriormente. Algunas
sofisticaciones instrumentales dividen los espectrofometros infrarrojos en aparatos con: a) haz
simple, b) haz duplo, c) transformada de Fourier y d) laser. Siendo que la precisin en las
medidas aumenta en la misma secuencia de la presentacin, llegando a variar de 20 cm
-1
en
los aparatos menos precisos hasta 3x10
-3
cm
-1
en los de altsima precisin hasta el presente
momento.
Las fuentes de radiacin deben presentar comportamiento prximo al del cuerpo negro.
Normalmente se utiliza filamento de tungstenio, carburo de silcio, aleacin de nquel-cromo,
lmparas de mercurio y ms recientemente lasers. Algunas de esas fuentes operan ms
eficientemente en determinadas regiones del espectro infrarrojo.
Las muestras pueden ser slidas, lquidas o gaseosas. Para las muestras slidas se
acostumbra prepararlas en la forma de pelculas o utilizando la tcnica de evaporacin o
pastillas.
El sistema de deteccin consiste en cualquier instrumento que es sensible a las alteraciones de
calor. Se usa termopares, detectores neumticos o piroelctricos (por ejemplo, trisulfato de
glicina) o todava los efectos ptico-acsticos.
Con la obtencin del espectro se empieza la fase de interpretacin del mismo y posterior
esfuerzo de inferir o obtener la geometria de la molcula en estudio. Como el espectro en la
regin del infrarrojo corresponde a aquel obtenido por alteraciones en el comportamiento
vibracional podemos imaginar, a groso modo, que los tomos en una molcula son esferas
rgidas unidas por pequeos resortes que obedecen la ley de Hooke. Esta ley dice que la
fuerza de recuperacin a la posicin de equilibrio de un sistema oscilante es directamente
proporcional al desplazamiento del punto de equilibrio, es decir:
Ec. (31)
La constante k es una medida de la resistencia al movimiento oscilatorio. Un sistema que se
comporta de esta manera es denominado de oscilador harmnico y puede mostrarse que la
frecuencia de sus oscilaciones es dada por la expresin:
Ec. (32)
donde m es la masa del cuerpo que est movindose. Para una molcula diatmica se
substituye m por el valor de la masa reducida, m1m2/(m1+m2).
Por intermedio de la mecnica cuntica podemos mostrar que los movimientos vibracionales
tambin son cuantizados y el clculo de energia para el oscilador harmnico muestra que:
Ec. (33)
siendo n un nmero entero que puede ser cero o cualquier valor entero, 0, 1, 2, 3,... Tambin se
observa que las transiciones vibracionales permitidas para el oscilador harmnico son aquellas
en que n= 1. Las Bandas que obedecen a
esta regla de seleccin son llamadas de bandas fundamentales.
Sin embargo, sabemos que ninguna molcula presenta perfectamente el comportamiento
harmnico. Frecuentemente nos encontramos con comportamientos que presentan
desviaciones respecto a este tipo de oscilador. En este caso, decimos que estamos en la
presencia de un oscilador anarmnico. Para este caso, las reglas de seleccin permiten el
aparecimiento de transiciones donde: n= 1,
2, 3,... Las transiciones con
n 2 son normalmente llamadas de sobretonos
y presentan frecuencias que son 2, 3 o n
vezes ms grandes que las frecuencias fundamentales. Estos comentarios muestran de una
cierta manera cual es la naturaleza fsica de los espectros en la regin del infrarrojo, pero no
nos dice como podemos obtener informaciones sobre la geometria molecular.
El procedimiento cualitativo para obterse tal informacin consiste en imaginar todos los posibles
arreglos de los tomos en la molcula. Se clasifican cada una de las posibles estructuras segn
su grupo puntual derivado por la teoria de grupo. A travs de esta caracterizacin podemos
identificar cuantos y de que tipo son los grados de libertad y cuantas bandas en el infrarrojo
tendrn posibilidad de ser observadas. Se obtiene experimentalmente el espectro vibracional
de la molcula y se busca identificar las bandas fundamentales, los sobretonos y de las bandas
de combinacin y tambin se cuentan cuantas son las fundamentales. Comparndose con
aquellas previstas por la teora de grupo, tendremos informaciones de como debe ser la
distribucin de los tomos en la molcula.
El gran problema experimental seria la metodologia para hacerse la atribucin de las bandas.
No existe ningn criterio riguroso para efetuarse tal medida. Esta etapa es realizada a travs de
las comparaciones entre los espectros de varias molculas, efectuando comparaciones con
molculas isotopicamente sustituidas o tambin comparndose con espectros obtenidos a
travs del mtodo Raman. Tambin, podemos crear un campo de fuerza para intentar
reproducir las frecuencias vibracionales a travs de mtodos matemticos. Dentro de estos
mtodos es posible ajustarse las constantes de fuerza para diferentes tipos de enlace qumico
y con estas constantes pueden calcularse los parmetros geomtricos, como ocurre en los
mtodos muy conocidos como mecnica molecular.
Resumidamente podemos decir que la atribucin de bandas vibracionales es de cierto modo
realizado de una manera muy vaga y la necesidad de un mtodo sistemtico para resolver este
problema seria una herramienta muy bien recibida por los investigadores interesados en
estructuras moleculares. Podramos defraudarnos con la tcnica del infrarrojo que no nos
proporciona datos cuantitativos para la geometria molecular, pero un anlisis ms meticuloso
del espectro infrarrojo nos dar informaciones que nos sern tiles.
La mejor resolucin de las bandas de un compuesto gaseoso en la regin del infrarrojo nos
muestra que est es compuesta de una serie de bandas pequeas como las de la Figura 18.
Estas bandas pequeas muestran que los movimientos vibracionales son normalmente
acompaados por cambios en los estados rotacionales y, como ya vimos, con informacin de
las transiciones rotacionales podemos evaluar las constantes rotacionales y por consiguiente
los parmetros que determinan la geometria molecular.
Podramos preguntar: cul seria la ventaja de obtener informaciones rotacionales del espectro
infrarrojo, si podemos obtener informaciones precisas de los espectros de micro-ondas?.
Debemos recordar que los espectros rotacionales son obtenidos solamente para molculas que
poseen momento dipolar permanente. Por consiguiente, las molculas como el metano (CH4) o
el gas carbnico (CO2) no mostrarian ninguna absorcin o emisin en la regin de micro-ondas,
lo que nos imposibilitaria determinar las geometrias respectivas cuantitativamente. En la regin
del infrarrojo, lo que se observa es que las bandas espectrales aparecen como consecuencia
de alteraciones en el momento dipolar molecular. Sin embargo, las molculas que no poseen
momento dipolar permanente al ejecutar ciertos movimientos vibracionales adquieren un cierto
momento dipolar que consigue imprimir alteraciones en el movimiento rotacional de la
molcula.
Para el movimiento rotacional, las reglas de seleccin j=0,
1 continan siendo vlidas. Normalmente
estas transiciones reciben nombres especiales en la regin del infrarrojo: -1 es llamada de
ramo P y se encuentra en frecuencias ms grandes, +1 es llamada de ramo R que se
encuentra en la regin de frecuencias ms pequeas y el ramo Q que aparece como un pico
agudo entre los ramos P y R. La Figura 18 exibe el ejemplo de los ramos R y P y la Figura 19
las transiciones rotacionales entre dos niveles vibracionales. Las diferencias en las alturas de
los picos rotacionales son consecuencia de las diferentes poblaciones en cada nivel rotacional.
El anlisis en esta etapa sigue los mismos moldes desarrollados en el tema de micro-ondas.
Considerando que las alteraciones en el movimiento vibracional alterarn los parmetros
geomtricos, debemos buscar corregir los valores de las constantes rotacionales de tal manera
que se obtengan valores para estas constantes que se encuentren prximos de las vibraciones
del estado fundamental.

Fuente de Corriente Constante de Alto Voltaje para El Laboratorio de Qumica
M. Grajales*; A. Ortiz; E. Caicedo**
Los experimentos de valoraciones coulombimtricas y determinacin de nmeros de
transferencia, por los mtodos de Hittorf y frontera mvil, son realizados en los laboratorios del
Departamento de Qumica de la Universidad del Valle usando una fuente de corriente
constante. El clsico experimento de determinacin de nmeros de transferencia por el
mtodo de Hittorf ha sido descrito ampliamente en la literatura (1 y 4).
En los laboratorios de fisicoqumica de la Universidad del Valle se determina el nmero de
transferencia del ion cobre en una solucin de sulfato de cobre 0.05 M, usando electrodos de
cobre. El experimento acerca de la determinacin de nmeros de transferencia por el mtodo
de frontera mvil ha sido descrito en numerosos textos (1, 4 y 6), y en l usualmente se
determina el nmero de transferencia del ion H + en HCl 0.3 M, usando electrodos de cobre o
cadmio. En los experimentos de valoraciones coulombimtricas se utiliza la fuente de corriente
constante como una bureta de electrones, y usualmente se valora tiosulfato con yodo
electrogenerado, bases fuertes con cido electrogenerado, cidos fuertes con base
electrogenerada, el cido acetilsaliclico de una pastilla de aspirina con base electrogenerada y
sulfato de hidrazina con bromo electrogenerado (7 y 8). Aunque estos experimentos son
ampliamente conocidos, la mayor dificultad que han encontrado nuestras Universidades,en el
montaje de estas prcticas docentes, es la adquisicin de la fuente de corriente (5.00 - 10.00
mA) de alto voltaje (> 90 V), necesaria en estos casos. En este sentido profesores de varias
universidades nos han solicitado que publiquemos el diseo de la fuente de corriente que
hemos venido usando en la Universidad del Valle. Este artculo tiene como finalidad divulgar
este circuito, el cual es tan simple que puede ser montado por estudiantes de qumica con
algunos conocimientos de electrnica.
Una fuente ideal de corriente constante genera una corriente constante, independiente del valor
de la resistencia de carga. Aunque muchos textos describen la construccin de fuentes para
realizar los experimentos mencionados, en la mayora de los casos estas fuentes no son
verdaderas fuentes de corrientes, necesitndose coulombmetros qumicos o electrnicos (9)
con los subsiguientes problemas de tiempo y costos, especialmente cuando se trata de
experimentos que deben ser ejecutados por muchos grupos de laboratorio. La integracin de la
curva corriente tiempo para el clculo de la carga tambin es dispendiosa, y los precios
comerciales de coulombmetros electrnicos (2000 dlares) y fuentes de corrientes de alto
voltaje dinmico .
(>$500 dlares) son prohibitivos. La experiencia nos ha mostrado que la mejor alternativa en
estos experimentos acadmicos es el uso de una fuente de corriente con base en un transistor;
debido a que la corriente se conserva constante ( a 0.01 mA ), el simple producto de la
corriente por el tiempo es la carga, y de esta manera estaramos haciendo coulombimetra a
corriente constante. En los experimentos de Hittorf y valoraciones coulombimtricas, nosotros
usamos una corriente entre 8.00 y 12.00 mA. y los experimentos de frontera mvil los hacemos
con corrientes entre 4.00 y 6.00 mA. En estos casos, y con las celdas y electrodos usuales en
un laboratorio de qumica, la fuente de corriente debe tener un voltaje mximo del orden de los
90 voltios.
DISEO DEL SISTEMA
La Fig.1 describe la fuente de corriente de 10 mA. Como puede observarse, se ha rectificado el
voltaje de la red y no se ha utilizado transformador. La rectificacin se ha realizado con cuatro
diodos 1N40007. La resistencia de 200 ohmios en serie con el condensador de 2x330 F tiene
como objeto la proteccin de los diodos durante el encendido del sistema. La diferencia de
potencial entre los puntos A y B es regulada con un diodo zener de alto voltaje. R L es la
resistencia de carga (la celda electroqumica). En el diseo fue usado el transistor ECG 285
(2N5879), el cual fue montado en un disipador de calor. Cualquier transistor con una disipacin
de potencia por encima de 2W y con un V CBO por encima de 120 V podra ser usado. Incluso
podra usarse un transistor NPN, siempre y cuando el Zener, R L y R E se coloquen en la
posicin correcta.
La corriente a travs de la carga, I C , viene dada por: I C = [ (V Z - 0.6 ) / R E ] + I B En donde
V Z es el voltaje del diodo zener (ZD13 ), R E es la resistencia del emisor ( 1200 ohmios en la
Fig. 1), I B es la corriente de base. De esta manera, si V Z y R E se mantienen constantes, la
corriente de carga ser constante. Puede verse tambin que los terminales de la carga pueden
colocarse en corto (R L igual a cero) sin problemas para la fuente . Puede calcularse el valor
aproximado de la corriente del emisor, I E , (definida como la corriente a travs de la resistencia
del emisor) mediante la expresin: I E = ( V Z - 0.6 ) / R E La corriente del colector (corriente a
travs de la carga) es aproximadamente igual a la corriente del emisor, I E . Como puede ser
visto, basta con cambiar la resistencia R E para modificar el valor de la salida de la fuente de
corriente constante. Debe observarse especial cuidado con este tipo de fuente. Una corriente
de 10.0 mA a travs del cuerpo humano puede ser mortal.
RESULTADOS Y CONCLUSIONES
Con las especificaciones dadas, la fuente de corriente de la Fig. 1 present 10.05 mA en corto
(carga cero) y 10.00 mA con una resistencia de carga de 8 K, siendo el porcentaje de
regulacin de corriente del 0.5%; valor este suficientemente bueno en cualquier experimento
docente en qumica analtica y fisicoqumica. Con celdas de Hittorf comerciales de tres
compartimientos con solucin 0.05 M de sulfato de cobre, la regulacin fue mejor que 0.5%.
La fuente de corriente descrita es de bajo costo y por su sencillez puede ser construida por
estudiantes con elementos del mercado local. Tiene la ventaja de no requerir transformador. Su
precisin es suficientemente buena para cualquier experimento docente en coulombimetra a
corriente constante. Alternativamente, su construccin puede ser solicitada a la Facultad de
Ciencia de la Universidad del Valle.
Equipo de Fluorescencia de Rayos X para medicin de espesor y composicin de
recubrimientos metlicos en forma no destructiva. El diseo de la cmara de medicin permite
trabajar sobre piezas grandes, a la vez que con una cmara de video se visualiza la zona de
medicin; el monitor dispone de una grilla graduada para ubicar el punto de medicin. Las
determinaciones son muy rpidas y el software incorporado provee un anlisis estadsticos de
los resultados.
TCNICAS DE MEDICIN DE RECUBRIMIENTOS METLICOS
La calidad de un recubrimiento metlico est definido por su espesor, porosidad, adhesin y
resistencia a las condiciones de servicio a las que ser expuesto, entre otras.
En particular, el recubrimiento de cinc tendr una relacin directa con la resistencia a la
corrosin de tornillos; el recubrimiento de oro, con la durabilidad de una joya y los
recubrimientos de cobre, plata u oro estn relacionados con las caractersticas elctricas y de
resistencia al desgaste y la corrosin en circuitos impresos.
El Centro de Investigacin y Desarrollo sobre Electrodeposicin y Procesos Superficiales
(CIEPS), del Instituto Nacional de Tecnologa Industrial (INTI), ha adquirido recientemente un
equipo de fluorescencia de Rayos X, especialmente diseado para medir espesor y
composicin de recubrimientos metlicos, en forma no destructiva y con mnimos
requerimientos dimensionales.
En el presente artculo se realiza una resea de los mtodos de medicin de espesores de
recubrimientos metlicos y se hace referencia en especial al mtodo de medicin de espesor y
anlisis de recubrimiento por fluorescencia de rayos X.
Existen dos mtodos de medicin directa del espesor del electrodepsito: examen
microscpico de una seccin transversal (ASTM B487 ISO 1463) y medicin electrnica de
interferencia de doble haz tambin conocida como interferometra (ASTM B588 ISO 3868).
Este ltimo mtodo, mucho ms preciso y sofisticado que el anterior se utiliza especialmente
para la calibracin de patrones de espesor y para investigacin.
Todos los otros mtodos, se basan en el aprovechamiento de las diferencias en propiedades
fsicas y qumicas (elctricas, magnticas, qumicas o irradiacin con rayos X o radiacin beta)
entre el recubrimiento y el sustrato.
Una caracterstica comn en todos estos mtodos es que las diferentes propiedades deben
calibrarse contra muestras patrones de espesor conocido, o sea que la exactitud de la medicin
depende de la confiabilidad de los patrones. Adems los patrones calibrados son provistos en
general por los fabricantes de equipos de medicin. Si bien, luego en este artculo haremos una
descripcin ms pormenorizada, cabe mencionar que el CIEPS (Centro de Investigacin de
electrodeposicin y de recubrimientos superficiales del INTI), dispone desde hace alrededor de
dos meses con un equipo de fluorescencia de rayos X de ltima generacin.
Mtodos magnticos ( ASTM B 499 B 530 / ISO 2178 2361)
Estos mtodos son muy populares debido a que son ensayos de tipo no destructivo. Los
instrumentos son relativamente econmicos, pueden utilizarse como ensayos "pasa no pasa"
cuando se requiere un muestreo de 100% y pueden adaptarse a mediciones muy localizadas.
Estos mtodos, se aplican para sustrato magntico y recubrimiento no magntico, y para
metales con distinto grado de susceptibilidad magntica, como por ejemplo de nquel
electrodepositado sobre acero.
Los instrumentos deben calibrarse con frecuencia, al menos una vez al da con patrones de
espesor conocido, ya sea lminas o muestras recubiertas.
Las lminas son ventajosas para la calibracin de superficies curvas. Para evitar errores debe
asegurarse un ntimo contacto entre la lmina y el sustrato.
Las lminas deben reemplazarse peridicamente ya que pueden deteriorarse por el uso. El
cero del instrumento debe ajustarse con un material idntico, en composicin y caractersticas
superficiales, al sustrato de la muestra a medir. Si la superficie de la muestra es curva, la
calibracin debe realizarse sobre una muestra patrn de curvatura similar. El efecto de
curvatura es mayor cuanto menor sea el radio de la misma. Para evitar los efectos de borde las
mediciones no deben realizarse en las cercanas de los bordes o discontinuidades sino a unos
20 mm aproximadamente.
Si se emplean como patrones muestras recubiertas, debe asegurarse que el metal base del
patrn tenga propiedades magnticas similares al metal base de la muestra (es importante
comparar las lecturas en ambos materiales sin recubrir).
Mtodo coulombimtrico (ASTM B504 ISO 2177)
Esta tcnica se basa en el fundamento de la electroqumica: la ley de Faraday, que establece
una relacin entre el pasaje de cierta carga elctrica medida en coulombios y la
electrodeposicin o disolucin andica de una masa determinada de metal. Si un metal, se
disuelve andicamente en una solucin apropiada con un 100% de eficiencia, el peso de metal
disuelto puede calcularse fcilmente a partir del tiempo transcurrido, la corriente aplicada, el
rea y la densidad del electrodepsito.
En los instrumentos comerciales, el espesor se calcula automticamente, quedando el rea
definida por un orificio en la parte inferior de una pequea cubeta, que se fija sobre la superficie
metlica. La muestra constituye el nodo de la celda electroqumica formada, en cuyo interior
se colocan la solucin y el contraelectrodo. Cuando a travs del sistema se produzca el pasaje
de una corriente constante, el voltaje no variar mientras el recubrimiento se disuelve
electroqumicamente. Cuando ste se termin de disolver y queda expuesto el metal base, se
producir un cambio brusco de voltaje que marcar el punto final.
Este mtodo no puede aplicarse a todos los metales ya que para algunos no existe la solucin
adecuada, capaz de disolver electroqumicamente el recubrimiento sin atacar al metal base.
El mtodo es destructivo ya que al final del ensayo queda sobre la superficie un rea circular de
metal base al descubierto.
Al igual que el resto de los mtodos, ste debe ser calibrado peridicamente mediante el uso
de patrones de espesor conocido.
El rango operativo de esta tcnica se encuentra entre 0,7 m y 50 m (rango prctico entre 2
m y 35 m). El cromo es una excepcin pudiendo medirse desde 0,075 micrones.
La coulombimetra es til para medir el espesor de cada capa en recubrimientos multicapa.
Basta con cambiar el tipo de solucin en la celda una vez alcanzado el punto final en cada una
de las etapas. El error del mtodo es del 10%.
Mtodo de fluorescencia de rayos X.
El mtodo de medida del espesor de recubrimiento con este equipo se basa en la interaccin
del sustrato y el recubrimiento con la radiacin incidente (rayos X) de suficiente energa, para
producir emisin secundaria caracterstica de los elementos que componen el recubrimiento y
el sustrato. Esta energa caracterstica es la fluorescencia de rayos X.
Es un equipo muy verstil, que debido al diseo de su recinto de medida, permite desde la
medicin de un tornillo hasta una placa de circuito impreso,
El rea mnima de medicin es de 0.1 mm x 0,1 mm y se pueden determinar espesores en el
rango de entre 0,1 m y 100 m, dependiendo del tipo de recubrimiento, en forma no
destructiva, en una dos, o tres capas electrodepositadas. Otra capacidad del equipo es la de
analizar la composicin de los recubrimientos presentes.
A continuacin se detallan algunos de los sistemas de recubrimiento que pueden ser medidos:
Oro /Nquel/ Latn
Oro /Nquel /Cobre/ Latn
Cinc/ Hierro
Cinc-nquel/ Hierro
Nquel/ Cobre
Plata/ Cobre
Plata/ Nquel/ Cobre
Cromo/ Nquel/ Cobre
Oro/ Nquel/ Cobre/ Cinc
Cromo/ Nquel/ Cobre/ ABS
Estao-plomo/ Cobre
Nquel qumico/ Cobre
Oro-cadmio-cobre/ Nquel
Etctera.
Asimismo es posible medir espesor y composicin en aleaciones binarias: (Ej.: Estao-plomo,
Latn, Paladio-nquel, Plata-cobre, Cobre-estao) o ternarias (Ej.: Oro-plata-cobre, Oro-paladio-
cobre, Cobre-cinc-plomo y Estao-paladio-plata).
SEA1210 - Multianalizador electroqumico
SEA1210 es un instrumento diseado para cubrir un amplio abanico de necesidades tanto en control
de calidad, como en investigacin bsica y aplicada y en proyectos docentes avanzados en las reas de
electroqumica y electroanlisis.
El equipo se controla desde un programa en entorno Windows con estructura uniforme, muy intuitiva,
pensada para que el tiempo de aprendizaje sea mnimo.
En cualquier momento el usuario dispone de una completa ayuda en lnea de rpido acceso y sensible
al contexto.
Se dispone de una completa coleccin de tcnicas (14) polarogrficas, voltamtricas, amperomtricas,
etc. Adems se ha incluido un verstil programa de barrido arbitrario que permite la configuracin de
experiencias complejas.
La pantalla de adquisicin de datos es uniforme para la mayor parte de las tcnicas. Desde ella el
usuario tiene control directo sobre la ejecucin de la medida y dispone de un cursor con visor
asociado para la lectura directa de intensidades, potenciales y tiempos.
En el caso de la utilizacin de SEA1210 como detector amperomtrico (HPLC, FIA, etc...), la pantalla
de adquisicin se adapta a las caractersticas de la tcnica.
Los datos adquiridos son facilmente exportables hacia plataformas de tratamiento de datos mediante
ficheros ASCII o a travs del portapapeles (Clipboard) de Windows.
Si lo desea puede obtener una versin de demostracin del programa de control para su evaluacin.
Caractersticas principales.
Medidas electroqumicas en base a multiples tcnicas:
Polarografa: TAST, Pulso Normal, Pulso diferencial
Voltametra: Cclica de Barrido Escalonado (Staircase), Pulso Diferencial, Doble
Pulso diferencial y Onda cuadrada.
Cronometra: Amperometra, Amperometra de pulsos, Cronoamperometra y Curvas
i/t.
Redisolucin(Stripping): Pulso Diferencial y Onda cuadrada.
Barridos definibles (Pulsos y rampas)
Sensibilidades en el intervalo de 30nA hasta 5mA a Fondo de Escala.
Rango de potenciales aplicables +/-4V.
Barridos de potencial continuos (cclico) o en ciclo nico (monobarrido) en voltametra.
Amplitudes de pulso seleccionables en un amplio intervalo.
Visualizador de todos los parmetros operacionales (Velocidad y amplitud de barrido, potencial
inicial, tiempos de goteo, amplitud de pulso, etc...).
Tres filtros seleccionables.
Conexin a ordenador para adquisicin de datos y control de experiencias (panel posterior).
Incluye cables de conexin y celda falsa resistiva de 100KOhm.
Cabina robusta con pies abatibles antideslizantes, color gris tcnico.
Dimensiones (excluyendo pies) 155x80x200mm (AnchoxAltoxFondo).
Peso Aprox. 0.5kg.
Programa de control en entorno Windows de facil manejo y aprendizaje.
Accesorios de agitacin y golpeador para polarografa.
Tarjeta de adquisicin de 12 bits (8 canales A/D, 2 canales D/A, 16 canales digitales E/S y
terminales de alimentacin).
Aplicacin de mtodos electroqumicos de anlisis en el campo
microbiolgico: una revisin
[Link]
Introduccin
Las tcnicas clsicas del anlisis microbiolgico comprenden varios pasos que no pueden ser
evitados: a) el aislamiento de la(s) cepa(s) a partir de una muestra, b) la identificacin de la(s)
misma(s); y si es necesario, c) el recuento del nmero de unidades formadoras de colonias (ufc)
por unidad de muestra. Estos mtodos necesitan largos tiempos para ser completados. Por otro
lado, los operadores deben ser lo suficientemente experimentados como para inocular
correctamente la muestra en medios de cultivo adecuados, reaislar las colonias que interesan,
efectuar e interpretar los diferentes tests de identificacin, y proceder al recuento de las ufc por
unidad de muestra (cuando fuese necesario).
En otros casos particulares (procesos fermen-tativos industriales, por ejemplo) sera de vital
importancia determinar la evolucin de la biomasa, en tiempo real si fuese posible.
Muchos mtodos microbiolgicos rpidos, alternativos a los procedimientos clsicos, han sido
estudiados, ya sea para la identificacin como para el recuento (7, 10). Las tcnicas
instrumentales han sido identificadas como una posibilidad para disminuir los tiempos de
deteccin de los resultados, a travs:
a) del seguimiento de la concentracin de metabolitos caractersticos, de cambios en el
medio o de la respiracin celular (poten- cial redox, concentracin de in hidrgeno,
etc.);
b) de la determinacin de componentes celulares como cidos nucleicos (15) o enzimas
(27);
c) del recuento directo de las clulas microbianas utilizando analizadores electrnicos
de partculas (12);
d) del recuento indirecto de las clulas micro-bianas a travs de mtodos como los
cristales piezoelctricos (20), la resonancia plasmnica de superficie (6) o el espejo
resonante (29).
Un sensor o transductor es un dispositivo instrumental que transforma una seal fsica o qumica
(proveniente de su interaccin con el analito presente en una muestra) en una seal elctrica.
Esta seal elctrica, apropiadamente tratada por los circuitos electrnicos del sistema, arroja un
valor, que ser proporcional a la concentracin del analito en la muestra.
Las caractersticas ideales de un sensor para determinaciones microbiolgicas han sido
enumeradas en la siguiente manera (10): reproducible, exacto, sensible, que tenga amplios
rangos dinmicos de calibracin, fcil de calibrar y utilizar, que produzca resultados en tiempo
real, porttil, robusto, que sea econmico desde el punto de vista instrumental, esterilizable, que
no requiera pre-tratamiento de la muestra, que no sufra interferencias por parte de la matriz de la
muestra, que no sea necesario agregar reactivo, que detecte microorganismos viables, que el
operador necesite un entrenamiento mnimo, con amplia aplicabilidad, con capacidad para ser
insertado on-line en los procesos que monitoree.
Hasta la fecha, de todas maneras, no se ha encontrado un mtodo que sea aplicable a cualquier
tipo de muestra que se quiera analizar, debido en parte a la variedad de ambientes en que se
presentan las muestras, a las caractersticas intrnsecas de los diferentes microorganismos y a la
complejidad que representa un anlisis microbiolgico.
Por otro lado, la naturaleza conservativa de muchos laboratorios ha hecho que la aceptacin de
diferentes sistemas automatizados para el anlisis microbiolgico haya sido baja (26).
Mtodos electroqumicos de anlisis
A continuacin, posteriores a una breve introduccin sobre los fundamentos de las tcnicas
utilizadas, se detallan los ms importantes resultados obtenidos en la deteccin y enumeracin de
microorganismos usando la electroqumica como herramienta de medicin.
La posibilidad de aplicar los mtodos electroqumicos de anlisis en el campo de la
microbiologa rpida para investigar la presencia y concentracin de microorganismos ha sido
ampliamente investigada.
Una buena cantidad de caractersticas hace que el instrumental electroqumico de anlisis sea
apetecible para determinaciones de este tipo: costo relativamente bajo respecto a los dems
dispositivos analticos, robustez, lmites de deteccin relativamente bajos, posibilidad de ser
miniaturizados, posibilidad de ser fcilmente transportados para efectuar medidas en campo,
simplicidad de uso.
Los mtodos utilizados han sido la potencio-metra, la voltametra y la amperometra.
Potenciometra
Las potenciometra es el ms simple de todos estos mtodos. Se basa en la medida del potencial
electroqumico de celda, que es investigado por medio de dos electrodos (uno de referencia y
uno indicador) a travs de los cuales puede fluir una corriente muy pequea (10-11 - 10-15
Ampre) de manera que en el electrodo se mantenga un equilibrio termodinmico local (2). Esto
se logra con la ayuda de un circuito de elevada resistencia. Los electrodos indicadores usados
son electrodos in-selectivo, de los cuales el ms conocido es el de vidrio para medicin de la
actividad del in hidrgeno (que tiene un rango lineal de trabajo de varios rdenes de
concentracin). Los lmites de deteccin varan dependiendo del tipo de electrodo indicador que
se use, siendo de alrededor de 10-5 M.
Pioneros en la deteccin microbiolgica electroqumica fueron los trabajos de Wilkins y col (30)
en la segunda mitad de la dcada del 70. El crecimiento del nmero de E. coli en un medio de
cultivo lquido fue seguido a travs de un sistema constituido por un electrodo de trabajo de
platino y un electrodo de referencia de calomel. La curva de potencial sigui un perodo inicial
(perodo lag), en el que la seal electroqumica se mantuvo constante y, posteriormente, un
perodo de veloz aumento del potencial. La duracin del perodo lag fue inversamente
proporcional (en manera logartmica) a la concentracin inicial de E. coli. La aparicin de la
seal potenciomtrica creciente (que pone el punto final al perodo lag o de latencia) se debe a
que la concentracin celular en la muestra alcanza un nivel suficiente como para ser detectada.
Esta concentracin umbral fue de aproximadamente 107 ufc/ml. Con estos mtodos
rudimentarios fueron detectadas 106 ufc/ml y 10 ufc/ml en 1 y 7 h, respectivamente (31). La
generacin de la seal fue atribuida a la acidificacin del medio. Posteriormente, fue introducido
el uso de membranas de filtracin para concentrar el material celular presente en la muestra y fue
utilizado un sistema de dos electrodos de platino. Los tiempos de deteccin no mejoraron con
esta variante, detectndose 105 y 10 ufc/ml de E. coli en 4 y 8 h, respectivamente (30).
Aos ms tarde, Karube & Suzuki propusieron un mtodo en el que a la medida potenciomtrica
se acoplaba una preseleccin inmunolgica de la cepa en estudio (13). Este paso de preseleccin
aseguraba una deteccin selectiva, que en el mtodo de Wilkins y col no estaba asegurada. Los
anticuerpos anti-Candida albicans fueron inmobilizados directamente sobre una membrana
plstica. El potencial electroqumico a travs de la membrana cambiaba segn se uniera un
mayor o menor nmero de microorganismos a su superficie. El cambio de potencial en la
superficie de la membrana era debido a la carga negativa superficial de las clulas de levadura.
Este mtodo aport velocidad a la medida, detectndose 104 - 5x105 clulas/ml en un ensayo de
5 min. La desventaja de esta tcnica, sin embargo, era que no brindaba informacin sobre la
vitalidad celular.
Si bien otros sistemas potenciomtricos han sido puestos a punto (por ejemplo, deteccin rpida
de microorganismos catalasa positivos usando un electrodo de fluoruro, con un lmite de
deteccin de 10 clulas/ml (3)), la potenciometra no ha sido ms utilizada para detecciones
microbio-lgicas rpidas.
La amperometra, con su posibilidad de detectar procesos redox en curso a travs de la medicin
de muy bajas concentraciones de molculas biolgicas (NAD, FAD, citocromos, por ejemplo) a
travs de mediadores electroqumicos, reemplaz a la potenciometra en este campo.
Voltametra
La voltametra es una tcnica en la cual se aplica, entre dos electrodos, un potencial que va
variando en el tiempo a una velocidad constante. Las diferentes variaciones de la tcnica
voltamtrica prevn experimentos efectuados en soluciones estticas o dinmicas, con electrodos
fijos o mviles, con variacin de potencial en forma de rampa continua, de escalones, de ondas o
de pulsos. Cualquiera sea la variante aplicada, el resultado final, en el que se grafica potencial en
el eje de abscisas y corriente en el eje de ordenadas y es conocido como voltamograma, dar la
informacin en forma de picos o escalones de corriente. Al igual que en un polarograma, las
informaciones brindadas por el voltamograma son dos: potencial al que se produce un pico o
escaln, y altura del pico o escaln. El primer parmetro est relacionado con la identidad de la
sustancia (y se identifica con su potencial redox). El segundo, con su concentracin (8).
En lo que respecta al tiempo de anlisis, un voltamograma es efectuado, generalmente, en pocos
segundos.
Matsunaga y Namba (16, 17) aplicaron la voltametra cclica a soluciones de levaduras, bacterias
gram-negativas y bacterias gram-positivas. Encontraron picos de oxidacin a +740, +700 y +680
mV respectivamente, sugiriendo que este mtodo puede servir para la identificacin del
microorganismo en estudio. Las alturas de los picos para las soluciones de Saccharomyces
cerevisiae estuvieron directamente relacionadas a la concentracin celular en el rango 106 - 108
clulas/ml.
Nakamura y col (21) aplicaron esta misma tcnica a la investigacin de infecciones bacterianas
en orina. Para eso, prepararon muestras modelo de orina infectada a partir de orina esterilizada
por filtracin a la cual se le agreg concentraciones conocidas de E. coli cultivada en laboratorio.
El artculo no cita la aplicacin del mtodo a muestras reales. La altura de los picos de corriente
encontrados a +700 mV fue proporcional a la concentracin bacteriana en el rango 5x102 -
5x105 clulas/ml. La susceptibilidad a varios antibi-ticos (no nombrados en el artculo) fue
determinada a travs del ensayo CIM convencional. Estos resultados fueron comparados con lo
que los autores llamaron CIM electroqumica (midiendo el grado de inhibicin del desarrollo
bacteriano a travs de la voltametra). Si bien el artculo no reporta nmeros, los autores afirman
haber encontrado una buena correspondencia entre los resultados de los dos mtodos.
Amperometra
La amperometra es una tcnica en la que el pasaje de una corriente es medido a travs de un
circuito formado por dos o tres electrodos. La celda convencional consta de dos electrodos, uno
de referencia y uno de trabajo. En estas celdas, el electrodo de referencia suministra una
informacin constante: un potencial de referencia, respecto al que es aplicado un potencial al
electrodo de trabajo. Debido al potencial aplicado sobre el electrodo de trabajo, las especies
electroactivas presentes en solucin sern capaces de oxidarse o reducirse en su superficie
(dependiendo de su propio potencial standard y de la naturaleza de la superficie), generando de
esta manera una corriente, debida al pasaje de electrones a travs del circuito. La magnitud de la
corriente es una medida de la concentracin de las especies electroactivas.
El pasaje de corriente a travs del electrodo de referencia puede provocar un cambio en la
concentracin de las especies que lo forman. De esta manera, el potencial del electrodo de
referencia puede cambiar. Por lo tanto han sido ideadas celdas con un tercer electrodo: el
electrodo auxiliar. Este es un electrodo inerte, en general construido con un metal, como platino
o el menos costoso acero inoxidable. La corriente que en un sistema de dos electrodos pasara,
para cerrar el circuito, por el electrodo de referencia, en este sistema de tres electrodos circula a
travs del electrodo auxiliar, producindose sobre el mismo una semireaccin (generalmente, la
oxidacin o reduccin del agua) que contrabalancea la que se produce en el electrodo de trabajo.
La funcin del electrodo de referencia, ubicado en el interior de la celda, es slo la de controlar
el potencial aplicado sobre el electrodo de trabajo, sin participar de la reaccin. De esta manera
se mantiene fijo el potencial del electrodo de referencia y se controla el potencial aplicado al
electrodo de trabajo (14).
Los primeros trabajos de deteccin de poblaciones microbianas usando la amperometra se
efectuaron hacia 1979. Matsunaga y col (18) detectaron la oxidacin de clulas de S. cerevisiae y
L. fermentum en la superficie de electrodos de trabajo de platino. El dispositivo estaba
compuesto por un sistema de dos pares de electrodos. Cada par estaba constituido por un
electrodo de referencia de perxido de plata y un electrodo de trabajo de platino. Uno de los
electrodos de trabajo estaba cubierto por una membrana de dilisis, impidiendo de esta manera
su contacto con las clulas de la muestra. Slo las sustancias dializables podan contactar este
electrodo. As, la seal generada sobre este electrodo daba una medida de la corriente debida a
los productos en solucin. Sobre el otro par de electrodos, cuyo electrodo de platino estaba en
contacto con las clulas microbianas, se produca una corriente debida a las sustancias
dializables y a las clulas. La seal debida a las clulas se obtena como la diferencia de estas
dos medidas. Relaciones lineales se obtuvieron entre la corriente y las concentraciones de ambos
microorganismos en el rango de concentracin que va desde 107 a 108 ufc/ml a juzgar por los
grficos presentados en el artculo. No es citado tampoco el potencial aplicado a los electrodos.
El tiempo de trabajo para obtener el resultado de una muestra fue de 15 min.
El mismo grupo de investigadores aplic un sistema similar al seguimiento de B. subtilis en un
fermentador (19). En este caso los electrodos de referencia de perxido de plata de cada par
fueron sustituidos por electrodos de referencia de calomel. Esto permiti la esterilizacin del
sistema (ya que los electrodos de perxido de plata eran inestables ante la esterilizacin). El
potencial aplicado fue de +200 mV en los dos sistemas. El resultado final fue obtenido en 5 min
para cada muestra y el rango de trabajo parece haber sido 108 y 109 ufc/ml.
A partir de ese punto, nuevas estrategias fueron adoptadas para medicin amperomtrica de
concentraciones microbianas. Ya que la trasferen-cia de electrones desde molculas biolgicas
hacia diferentes tipos de electrodos es, muchas veces, un proceso heterogneo lento, se recurri a
la interaccin de los microorganismos con sustancias llamadas mediadores electroqumicos. Los
mediadores son pequeas molculas o iones, orgnicos o inorgnicos, capaces de interactuar ya
sea con las molculas biolgicas como con los electrodos, haciendo las veces de transportador de
electrones (5). Para finales de los 80, la interaccin de una gran cantidad de mediadores con
muchos tipos de microorganismos haba sido estudiada (1). Ikeda y col (11) han estudiado
recientemente el comportamiento de clulas bacterianas intactas hacia mediadores electro-
qumicos. El anlisis de los resultados revel que las clulas intactas se comportaban como
enzimas del tipo de las oxidorreductasas cuya cintica sigue una ecuacin del tipo Michaelis-
Menten.
No todos los mediadores electroqumicos pueden interactuar con todos los microorganismos. Un
amplio estudio de estas reacciones diferenciales (abarcando un amplio espectro de mediadores y
microorganismos) podra ser la base para la confeccin de protocolos de identificacin.
Este principio de trasferencia de electrones desde los microorganismos hacia los electrodos fue
utilizado en 1982 por Nishikawa y col (22). Fueron usadas membranas de filtracin y un
mediador electroqumico (2,6-dicloroindofenol) para la medida de la actividad respiratoria de las
clulas. Concentraciones de 104 - 106 ufc E. coli/ml fueron detectadas en cuestin de pocos
minutos. Posteriormente, Turner y colaboradores demostraron la utilidad de otros mediadores
electroqumi-cos como el etosulfato de fenazina (28) o el ion ferricianuro (24) para la medicin
de la actividad respiratoria en E. coli, y por lo tanto, de su concentracin. En este segundo
trabajo fue demostrada la interaccin del ferricianuro con los citocromos de la cadena
respiratoria de E. coli como asimismo cul es el nivel al que este mediador interacta con la
cadena citocrmica.
Mediciones en sistemas de anlisis por inyeccin en flujo (FIA) fueron puestas a punto por Ding
& Schmidt (4) y por Hitchens y col (9). Ding y Schmidt estudiaron dos cepas bacterianas y una
levadura (P. aeruginosa, E. coli y Beauveria bassiana) usando ferricianuro como mediador y un
tiempo de medicin de 4 minutos. P. aeruginosa no mostr una correlacin lineal entre su
concentracin y la seal electroqumica obtenida; E. coli pudo ser medida en el rango 4,7x106 -
2,4x109 ufc/ml. Las curvas de B. bassiana fueron expresadas en peso seco y no en ufc/ml.
Hitchens y col (9) probaron que es posible relacionar las concentraciones de ufc con la corriente
generada por E. coli y Salmonella typhimurium, usando ferricianuro como mediador. El artculo
estudia los parmetros de la reaccin y de la medicin en el sistema FIA, pero no hace presente
el rango de concentraciones que se pueden medir.
Los ltimos avances en este campo fueron canalizados hacia la puesta a punto de un instrumental
capaz de detectar la presencia de poblaciones microbianas en muestras lquidas. Rossetti y
colaboradores desarrollaron un sistema que une la filtracin de la muestra con membranas con
poros de 0,45 mm, una cmara de reaccin conteniendo el mediador o-benzoquinona y una celda
amperomtrica flow-through para la evaluacin de la cantidad de mediador que ha sido
reducido por los microorganismos (25). La investigacin llev a la fabricacin y
comercializacin del instrumental MIDAS PRO que, segn sus creadores, es capaz de evaluar
concentraciones celulares de entre 104 y 108 ufc/ml en 5 min. Sin embargo, la determinacin no
es selectiva: segn el folleto informativo, bacterias, levaduras o hongos filamentosos pueden dar
una respuesta a travs del mediador.
En los laboratorios de las Universidades de Florencia (Italia) y Cranfield (Inglaterra) se han
ensayado nuevos procedimientos, complementando la preseleccin inmunolgica de la cepa en
estudio con la deteccin de su actividad respiratoria a travs de medidas amperomtricas (23). El
paso de preseleccin fue efectuado con micropartculas superparamagnticas derivati-zadas con
anticuerpos. El mediador usado para la deteccin de la actividad respiratoria, una mezcla de
ferricianuro y 2,6-diclorofenolindofenol. El lmite de deteccin fue de 105 ufc/ml, con un tiempo
de anlisis de 2 h.
En la actualidad se ha comenzado a estudiar un nuevo mtodo para la deteccin rpida y
selectiva de bacterias coliformes fecales, a travs de medidas amperomtricas. El desarrollo de la
enzima intracelular b-galactosidasa fue usado como parmetro marcador, detectndose 1,0
ufc/ml y 2,0x103 ufc/ml en 10 y 6,6 h, respectivamente (datos no publicados del autor).
Conclusiones
Las tcnicas instrumentales de anlisis pueden perfilarse, y son utilizadas en la actualidad en
unos pocos sistemas disponibles en el comercio, como una solucin para la realizacin de
anlisis microbiolgicos rpidos. La velocidad en la respuesta se debe a la alta sensibilidad de
algunos instrumentos, lo que permite detectar respuestas provenientes del ensayo en tiempos
acortados respecto a los clsicos. Muchas tcnicas instrumentales, ms all de las
electroqumicas aqu presentadas, han sido probadas para este fin. La comercializacin de
ChemScan (Chemu-nex, Maison Alfort, France), un instrumental que acopla la tecnologa laser
con diferentes tipos de reactivos bioqumicos para la deteccin de clulas viables o no viables,
de cepas particulares (a travs de anticuerpos marcados) ha sido el ltimo adelanto en el campo.
Nuevas tecnologas a estudiar deben unir la simplicidad de manejo a bajos costos de reactivos e
instrumental, y la obtencin de resultados confiables. El campo electroqumico no ha sido
estudiado an en profundidad; y la presencia de enzimas especficas, metabolitos y vas metab-
licas particulares no han sido explotados en la medida en que pueden serlo. ste es un camino
que debe an ser explorado y para el que se pueden prever importantes aplicaciones, desde el
recuento veloz del nmero de microorganismos hasta su identificacin y la realizacin de
pruebas veloces de susceptibilidad a los antimicrobianos.
El costo decididamente inferior del instrumental potenciomtrico respecto al instrumental
PRCTICA 8
Determinacin de la pureza de un reactivo (sal de plomo), mediante valoracin
Amperomtrica con AEDT, con electrodo de gota de mercurio.
OBJETIVOS:
Se pretende que el alumno se familiarice con las tcnicas voltamperomtricas, as como con el uso del
electrodo indicador de mercurio. Por otra parte, se aplicarn esos conocimientos a la determinacin de la
riqueza en Pb
2+
de un reactivo qumico por valoracin amperomtrica.
INTRODUCCIN:
VALORACIONES AMPEROMTRICAS, GENERALIDADES:
El trmino amperometra se refiere a la medicin de la corriente elctrica. Una valoracin amperomtrica
consiste en la determinacin o en la representacin de la variacin que sufre la corriente elctrica que
pasa por un electrodo a lo largo de la reaccin qumica de valoracin, cuando en la disolucin es
introducido un reactivo, de forma volumtrica o culombimtricamente. Por esto una valoracin
amperomtrica necesita de dos tipos fundamentales de reacciones:
La reaccin qumica propiamente dicha que constituye la base de la valoracin
Las reacciones electroqumicas, indicadoras de la variacin de la concentracin de la sustancia
electroactiva o no electroactiva, que tienen lugar en el medio de reaccin.
La representacin de los datos en una valoracin amperomtrica a ambos lados del punto de equivalencia
viene dada por dos lneas rectas de diferente pendiente, el punto final se determina por la interseccin de
sus prolongaciones. Las curvas tpicas de valoracin amperomtrica tienen las siguientes formas:


La curva a, representa una valoracin amperomtrica en la que el analito (electroactivo) reacciona en el
electrodo mientras que el reactivo valorante no lo hace.
La curva b, representa una valoracin en la que el analito no reacciona en el electrodo y el agente
valorante si.
Y por ltimo la curva c, representa una valoracin en la que tanto el reactivo valorante como el analito
reaccionan en el electrodo.
Dentro de las valoraciones amperomtricas podemos encontrarnos con dos tipos principales de
valoraciones:
1. Valoraciones amperomtricas con un electrodo indicador mantenido a un potencial constante
respecto a un electrodo de referencia.
2. Valoraciones amperomtricas con dos electrodos indicadores entre los que se aplica una
diferencia de potencial constante.
En la prctica que nos ocupa, vamos a desarrollar una valoracin amperomtrica con un electrodo
indicador de mercurio, ms concretamente con un electrodo de gota de mercurio y un electrodo de
referencia Ag/AgCl/KCl 3M. El electrodo indicador consiste en un tubo capilar de dimensiones muy
pequeas a travs del cual sale el mercurio gota a gota, procedente de un depsito con un pistn
neumtico, el cual, permite un control riguroso sobre el tamao y forma de la gota. Este electrodo,
permite obtener una elevada reproducibilidad de la corriente en funcin del potencial, debido a la
renovacin continua de la superficie de la gota.
La mayora de las reacciones seguidas en un electrodo de gota de mercurio son de reduccin, debido
principalmente, a la facilidad con que este tipo de electrodos sufre oxidacin, lo que limita su utilizacin
como nodo. Tambin produce lo que se conoce con el nombre de mximos de corriente, los cuales
pueden eliminarse o reducirse en su intensidad con la adicin de agentes tensioactivos o gelatinas.
NOTA: No debe olvidarse la elevada toxicidad del mercurio y su ligera volatilidad a temperatura
ambiente, por lo cual debemos ser estrictamente rigurosos y cuidadosos en su manejo.

La evolucin de la corriente al modificar el potencial sobre un electrodo de gotas de mercurio, se conoce
con el nombre de polarograma. Estos polarogramas tienen en general una forma sigmoidal como la que
se muestra en la figura, siempre que se realice la medida en rgimen esttico (sin agitacin de la
disolucin).

La figura muestra un polarograma para un analito M
n+
en presencia de un electrolito soporte (onda a) y
una segunda curva en ausencia de analito (onda b). La onda polarogrfica (a) se debe a la reaccin:
donde M(Hg) no es nada ms que el metal en estado elemental disuelto en la superficie del electrodo de
Hg
0
, constituyendo lo que se conoce como amalgama. El cambio brusco de la intensidad al final del
polarograma se debe (en ambos casos, ondas a y b) a la reduccin de los iones hidrgeno (H
+
) para dar
lugar a hidrgeno (H2), reduccin del disolvente en el electrodo de Hg
0
. En la onda b, se observa una
ligera corriente, conocida como corriente residual que aparece en ausencia de especie electroactiva, como
el metal M
n+
. Tambin puede observarse en la onda a, que existe una corriente lmite, definida por la
velocidad a la que el analito llega a la superficie del electrodo.
La razn de que la corriente lmite en polarografa se conozca con el nombre de corriente lmite de
difusin, se debe a que en rgimen esttico la sustancia nicamente llega al electrodo por difusin (el
soluto y especialmente la sustancia electroactiva consumida o producida en el electrodo, difunde desde
zonas de elevada concentracin, seno de la disolucin, a zonas de menor concentracin, superficie del
electrodo). Esta corriente lmite de difusin es directamente proporcional a la concentracin de analito. Se
puede deducir una ecuacin que controla el valor de la corriente de difusin, teniendo en cuenta la
velocidad con la que crece la gota de mercurio. Esta velocidad a su vez est directamente relacionada con
el tiempo de vida de la gota, t, [s] y con la velocidad del flujo de mercurio a travs del capilar, m, [mg/s].
Todas estas variables vienen expresadas en la ecuacin de Ilkovic:
donde la corriente, i, est en Amperios y la concentracin, C, en mmol/l.

FUNDAMENTO TERICO DE LAS VALORACIONES AMPEROMTRICAS DE
PLOMO CON AEDT.
El primer trabajo a realizar, ser registrar los correspondientes polarogramas de la disolucin a valorar,
que nicamente contiene Pb
2+
, y posteriormente los polarogramas correspondientes a cada una de las
adiciones del agente valorante, AEDT. De esta forma y a la vista de los polarogramas, podremos elegir el
potencial ms adecuado para realizar el seguimiento de la valoracin amperomtrica, construirnos la
correspondiente curva de valoracin, corriente lmite de difusin v.s. cantidad de reactivo, AEDT, aadido
y por ltimo determinar el punto final de la valoracin.
Veamos desde el punto de vista terico como ser esta evolucin. El plomo se reduce sobre un electrodo
de Hg
0
, segn la reaccin:
consideremos tambin la reaccin general de formacin de complejos
y supongamos ahora que inicialmente existe en disolucin nicamente la especie oxidada Pb
2+
, y
posteriormente se realizan adiciones de agente valorante y
4-
. La evolucin de las ondas polarogrficas ser
la siguiente:

Veamos cada una de las ondas por separado:
X=0: Unicamente tenemos Pb
2+
en disolucin, por lo que tendremos una onda donde se observa
la evolucin que experimenta la corriente lmite de difusin de la especie Pb
2+
, proporcional a la
concentracin de Pb
2+
en disolucin y la posterior reduccin del disolvente: H
+
H2.
X=0.5: Se observa la disminucin de la corriente lmite de difusin de la especie Pb
2+
, puesto
que parte ha reaccionado con el AEDT aadido, para formarse el complejo Pby
2-
. Este complejo
es electroactivo, pero ms difcil de reducir, como consecuencia de ello aparece una nueva onda
polarogrfica cuya corriente lmite de difusin es proporcional a la cantidad de complejo
formado.
X=1.0. En este momento se ha adicionado la cantidad estequiomtrica de AEDT que reacciona
con todo el Pb
2+
presente en la disolucin. Como consecuencia de ello, desaparecer la onda
polarogrfica debida al Pb
2+
y nicamente tendremos la correspondiente onda de la reduccin del
complejo Pby
2-
.
X>1.0. Para adiciones de agente valorante superiores a la cantidad estequiomtrica, aparecer
una nueva onda de oxidacin, no la veremos en el laboratorio, debida al exceso de AEDT en
disolucin. Este exceso de agente valorante llega por difusin al electrodo y facilita la oxidacin
del mismo, formndose el correspondiente complejo Hgy
2-
. Esta onda andica tendr una
corriente lmite de difusin proporcional a la concentracin en exceso de agente valorante,
AEDT.
Una vez registrados los correspondientes polarogramas, y conocidos los potenciales a los que se podra
realizar la valoracin amperomtrica, (potencial de un valor al que se detectara la evolucin de la
corriente de difusin del Pb
2+
), se construira la correspondiente curva de valoracin amperomtrica
corriente lmite v.s. ml de reactivo aadido.
Si fijsemos un potencial, E1, en el electrodo indicador, tendremos una curva de valoracin lineal, donde
se observara una disminucin en la corriente lmite de difusin, hasta alcanzar el punto final, donde se
medira nicamente la corriente residual y la curva de valoracin tendra el aspecto de la figura siguiente:

Si fijsemos un valor de potencial, E2, obtendramos una curva de valoracin lineal donde inicialmente
registraramos corriente residual, hasta alcanzar el punto final tras el cual la corriente aumentara con el
aumento de la concentracin de AEDT en exceso, y la figura de la curva sera la presentada en la
siguiente figura (no se estudiar en el laboratorio).

En todas las representaciones grficas de las curvas de valoracin amperomtrica, se observa una
curvatura en la zona cercana al punto de equivalencia cuyo radio ser tanto mayor cuanto ms inestable
sea el complejo formado. Es principalmente en el punto de equivalencia donde los complejos son menos
estables, ya que en disolucin no existir exceso de catin metlico ni de agente acomplejante, que por
efecto de ion comn retrograde el correspondiente equilibrio en disolucin hacia la izquierda, por eso, en
los puntos ms alejados del de equivalencia, la especie Pby
2-
no est prcticamente disociada, puesto que
antes del punto de equivalencia existir exceso de Pb
2+
y despus del mismo tendremos exceso de y
4-
. De
esta razn se deriva que en las valoraciones amperomtricas es ms interesante tomar puntos antes y
despus de alcanzado el punto de equivalencia y trazar despus la prolongacin de estas lneas hasta su
punto de corte, indicando el punto final de la valoracin.
BIBLIOGRAFA:
Anlisis Instrumental, 4 Edi., D.A. Skoog and J.J. Leary, Ed.: McGraw-Hill (1993)
Anlisis Qumico Cuantitativo D.H. Harris, Ed.: Grupo Editorial Iberoamrica (1992)
Fundamentos de Qumica Analtica, 4 Edi., Skoog, West and Holler, Ed.:Revert S.A. (1997)
REACTIVOS:
Disolucin de AEDT sal disdica 0.0100M. Preparada a partir del reactivo slido previamente
secado a 110 C en estufa durante 1 hora.
Disolucin de gelatina al 0.1%
Electrolito soporte. Preparada disolviendo 20 g de nitrato potsico y 8.2 g de acetato sdico en
aproximadamente 500 ml de agua destilada, tras lo cual, se adicionan 20 ml de cido actico
glacial (99.9% y d:1.0499 g/cc) y se diluye a un volumen final de 1 litro.
Disolucin de nitrato de plomo 0.002 M. Se pesan exactamente entre 0.16 y 0.18 gramos de
Pb(NO3)2 y se disuelven y enrasan a 250 ml en un matraz volumtrico con agua destilada.
Disolucin de limpieza. cido ntrico 1:10.
MATERIAL Y APARATOS:
Polargrafo Metrohm. Polarecord 626
663VA Stand de mercurio Metrohm
Clula polarogrfica
Electrodo auxiliar de carbn vitreo.
Electrodo de referencia, Ag/AgCl/KCl 3M
Electrodo indicador, Hg
0

Vasos de precipitados de 50 (2), 100 y 1000 ml
Matraces volumtricos de 250 y 1000 ml
Pipetas de 25 ml (2).
Probeta de 1000 ml.
Tubo graduado de 15 ml.
Pipeta graduada de 2 ml o micropipeta de 200-1000 l
PROCEDIMIENTO:
Se ajustan en el polargrafo las correspondientes variables instrumentales para el registro de los
polarogramas en cada una de las adiciones durante la valoracin. Dichas variables instrumentales son las
siguientes:
Tcnica: DCTast
Potencial inicial: -0.1 V
Potencial final: -1.6V
Velocidad de barrido: 100 mV/cm
Tiempo de goteo: 1 s
Sensibilidad: 20 nA/mm
I comp: 0.60
Velocidad de carta: 100 mV/cm
Damp: 2
Una vez fijadas las variables, se toma la clula polarogrfica y se lava perfectamente con agua, ntrico de
limpieza y agua destilada. Tras esto se coloca en el stand que contiene los electrodos y se ponen en ella:
25.0 ml de la disolucin que contiene el ion Pb
2+
, 25 ml de electrolito soporte y 2 ml de gelatina, como
supresor de mximos.
Se cierra el stand, introduciendo los electrodos en la disolucin y se hace burbujear nitrgeno por ella
durante, al menos, 5 minutos. Tras este tiempo, se corta el paso de nitrgeno y se registra el polarograma
inicial, correspondiente a la reduccin del Pb
2+
en el electrodo de Hg
0
y formacin de la correspondiente
amalgama.
Sin sacar los electrodos de la disolucin y sin abrir de forma total el stand, se realizarn adiciones
sucesivas del agente valorante, AEDT, de la siguiente forma: 4 adiciones de 0.5 ml cada una y otras 4
adiciones cada una de 2.0 ml. Esto se realizara de la siguiente forma.
Se adiciona sobre la disolucin la correspondiente cantidad de agente valorante, tras lo cual se hace pasar
nitrgeno durante 2 minutos. Se corta el paso de nitrgeno y se realiza la medida. Una vez finalizada la
misma, se vuelve a realizar una nueva adicin y as sucesivamente.
Cuando se finalicen todas las adiciones, y a la vista de todos los polarogramas registrados, se elegir un
potencial adecuado para el seguimiento de la valoracin amperomtrica. Se deber representar en papel
milimetrado la evolucin de la corriente de difusin frente al volumen de reactivo valorante adicionado.
Repetir la valoracin dos veces. En la segunda valoracin se ajustar el barrido de potenciales entre -0.1 y
-0.9 V.
RESULTADOS Y CLCULOS:
Representacin de la curva de valoracin al potencial elegido, razonando el porqu de la
eleccin de dicho potencial.
Clculo del punto final de la valoracin.
Conocido exactamente el peso de Pb(NO3)2 tomados, calcular la riqueza en plomo del reactivo
qumico analizado.
DISCUSIN Y PREGUNTAS:
Dar una explicacin razonada de la utilizacin del electrolito soporte, cuya composicin contiene
cido actico, acetato sdico y nitrato potsico.
Calcular el pH de la disolucin de electrolito soporte utilizada en la prctica.
A que se debe que utilicemos gelatina en esta valoracin.

NOTA: En cada una de las medidas de intensidad debe tenerse en cuenta el denominado efecto de
correccin. Este efecto se debe a que nosotros modificamos en cada adicin el volumen final de la
disolucin presente en la clula polarogrfica con lo cual las correspondientes corrientes lmites de
difusin se vern modificadas. Dicho factor de correccin afectar a la intensidad de la siguiente forma:

4. CONSIDERACIONES ESPECIALES.
4.1. Seguridad e higiene. Utilizar bata, lentes de seguridad, y zapato cubierto.
4.2. Muestreo. Efectuar muestreo segn lineamientos de las normas mexicanas NMX-AA-003-
1980 y NMX-AA-014-19 para muestreo de aguas residuales, naturales y de proceso. Son
consideraciones importantes de observar:
el recipiente debe ser de plstico, ser llenado hasta rebosamiento, y cerrado con
una tapa de rosca (para impedir el contacto con el aire), y mantenido en refrigeracin a
4
o
C.
medir temperatura del agua durante el muestreo; Se genera un 2% de
incremento de la conductividad por cada grado Celsius sobre los 25
o
C de referencia;
en el caso del anlisis de conductividad elctrica, el tiempo transcurrido entre la
colecta y anlisis de la muestra de agua NO debe ser mayor a 24 horas; slidos totales a
7 das; y dureza 7 das;
4.3. Lavado de materiales. Lavar con detergente libre de fosfatos, enjuagar con agua corriente,
y cinco lavados con pequeas porciones de agua desionizada.

5. PROCEDIMIENTO.
5.1. Slidos totales. Una muestra por alumno
5.2. Conductividad. Una determinacin por alumno.
5.3. Dureza total y clcica. Analizar muestra por duplicado cada alumno, y un estndar por
equipo.
6. DISPOSICIN DE RESIDUOS DE LABORATORIO.
Todas las soluciones pueden ser vertidas al dren.
7. RESULTADOS.
7.1. Slidos totales.
7.2. Conductividad elctrica.
7.3 Dureza total
[Link]
8.1. Slidos totales. Los clculos se harn considerando promedios, cuando se hayan realizado
repeticiones de anlisis por equipo.
Determinar la concentraciones experimentales de slidos totales en la muestra (ST Muestra), y en el
estndar (ST estndar, exp), segn aplicacin de la siguiente frmula:
Para determinar la exactitud del anlisis (su destreza analtica en funcin de conocer qu tan prximo se
encuentra su valor experimental respecto al terico), utilice la concentracin de slidos totales presentes
en la muestra de estndar (ST estndar) y la concentracin determinada por su equipo ( ST estndar,
exp.):
8.2. Conductividad elctrica. La lectura directa que proporciona el conductivmetro es el resultado.
nicamente asegurarse de efectuar las conversiones necesarias para reportar en las unidades solicitadas
por el organismo regulador.
8.3. Dureza total. Los clculos se harn considerando promedios, cuando se hayan realizado repeticiones
de anlisis por equipo.
Determinar las durezas totales experimentales, como carbonato de calcio, de la muestra (DT muestra), el
estndar (DT estndar, exp.), y de la adicin de estndar (DTad. estndar), segn la siguiente frmula:
DT (como CaCO3) (mg/L) = (V EDTA promedio muestra) X FEDTA X 20
DTad. estndar (como CaCO3)(mg/L)=(VEDTA promedio -VEDTA promedio ad.) X FEDTA X 20muestra estndar)
DT estndar, exp. (como CaCO3) (mg/L) = = (V EDTA estndar ) X FEDTA X 20
donde
FEDTA = 0.01 / M EDTA
Para determinar los porcentajes de exactitud (su destreza analtica en funcin de conocer qu tan prximo
se encuentra su valor experimental respecto al terico) y recuperacin del anlisis (su destreza analtica en
funcin de conocer qu tanto pierde por efecto de manipulacin y/o complejidad de la muestra), utilice la
concentracin de dureza total presente en la muestra (DT), en la muestra de estndar (DT estndar, exp.), y
en el estndar adicionado (DTad. estndar):
PRCTICA No. 4
DETERMINACIN DEL OXGENO DISUELTO Y TASA DE ABSORCIN DE
OXGENO DE MUESTRAS DE AGUA
1. OBJETIVOS.
1. El alumno realizar, y comparar, la determinacin de oxgeno disuelto a una
muestra de agua, mediante el mtodo potenciomtrico y oxmetro.
2. El alumno obtendr las curvas descriptivas de la tasa de absorcin de oxgeno
para dos muestras de agua con diferente contenido de slidos
2. INTRODUCCIN.
Todos los organismos vivos dependen de una u otra forma del oxgeno para mantener los
procesos metablicos que producen la energa para su crecimiento y reproduccin. Si bien es
cierto que para el hombre es importante mantener en niveles apropiados la cantidad de
oxgeno presente en el aire, tambin le es importante que se mantenga el equilibrio agua-aire
en sistemas acuticos.
Todos los gases presentan cierta solubilidad en agua. En el caso del oxgeno y el nitrgeno
los principales constituyentes del aire- su solubilidad es baja; y dado que no reaccionan con el
agua, su solubilidad es directamente proporcional a sus presiones parciales, inversamente
proporcional a la temperatura (Figura 4.1) e inversamente proporcional a la concentracin de
slidos presentes (Tabla 4.1).
La solubilidad del oxgeno, a una atmsfera de presin, en aguas dulces se encuentra en el
rango de los 14.6 mg/L a 0
o
C y 7 mg/L a 35
o
C . Y debido a que las tasas de oxidacin biolgica
incrementan con la temperatura, esto implica que la demanda de oxgeno incremente mientras
sucede al mismo tiempo una disminucin de la solubilidad del oxgeno. As, las condiciones
ms crticas por deficiencia de oxgeno se presentan en temporadas de verano, llegando a
concentraciones de oxgeno del orden de los 8 mg/L.. El agua de mar contiene sales en
concentraciones de 35,000 mg/L. En general se considera un agua salada cuando los slidos
disueltos se encuentran por encima de los 3,000 mg/L, y un agua dulce si su contenido es
menor a los 500 mg/L.
La prueba de laboratorio oxgeno disuelto (OD) permite conocer la concentracin de oxgeno libre
presente en una muestra de agua, y por tanto disponible para ser dispuesto por los diferentes organismos
vivos en sus procesos metablicos. El OD determina el tipo de procesos biolgicos que sucedern en el
sistema: aerobios o anaerobios; por lo que la prueba es til para:
monitorear las condiciones aerobias de cuerpos receptores de aguas contaminadas, as como en
aguas residuales e industriales tratadas;
monitorear las condiciones aerobias necesarias de cuerpos de agua en los que se requiere
mantener permanentemente condiciones saludables para la reproduccin de sistema vivos;
indicar el grado de contaminacin de un agua (indirectamente a travs de la prueba de DBO, la
cual se basa en el OD);
obtener tasa de oxidacin bioqumica (inferencia indirecta); y
mantener un control de la corrosin del fierro y el acero, especialmente en sistemas de
distribucin de agua y en calderas;
mantener un contro de la capacidad de purificacin de las aguas naturales, as como las
necesidades de tratamiento de remosin de contaminantes de aguas contaminadas antes de ser
descargadas a cuerpos de agua natural;
en procesos biolgicos gobierna la tasa de absorcin del oxgeno por el sistema acuoso, y por
tanto los costos de aereacin.
Existen dos mtodos para la determinacin de OD en muestras acuosas: el mtodo Wrinkler, y el mtodo
potenciomtrico (Oxmetro). En la presente prctica se efectuar la determinacin de oxgeno disuelto de
muestras acuosas en base a la norma mexicana NMX-AA-012-1980, Aguas.- Determinacin de oxgeno
disuelto, por oxmetro. As mismo, se desarrollar un procedimiento par determinar la tasa de absorcin
de oxgeno en dos muestras de agua con diferente contenido de slidos.
[Link] Y REACTIVOS.
3.1. Materiales.
Vidrio: Equipo:
3XX Botellas Wrinkler de 300 mL
XX Pipetas graduadas de 5 mL
XX Pipetas graduadas de 10 mL
1 Desecador
1 Incubadora, 20
o
C
1 Oxmetro
Miscelneos:
1 Propipeta
3.2. Reactivos. Todos los reactivos deben ser grado analtico. El agua a utilizar es destilada.
Solucin de sulfato manganoso (xxx M) Solucin indicadora de almidn
Solucin lcali-yoduro-nitruro Solucin de fluoruro de potasio
Solucin patrn de tiosulfato de sodio (1.0 N)
Solucin valorada de tiosulfato de sodio (0.025 N)
4. CONSIDERACIONES ESPECIALES.
4.1. Seguridad e higiene. Utilizar bata, lentes de seguridad, y zapato cubierto.
4.2. Muestreo. Efectuar muestreo segn lineamientos de las normas mexicanas NMX-AA-003-1980 para
muestreo de aguas residuales, naturales y de proceso. Son consideraciones importantes de observar:
los recipientes de muestreo son botellas Wrinkler, llenadas hasta rebosamiento, y mantenidas en
refrigeracin a 4
o
C por un perodo no mayor a XX hrs antes de de ser analizadas.
la muestra no debe estar en contacto con el aire, agitada, o expuesta a que uno de stos factores
se presente;
las muestras se toman evitando la formacin de burbujas de aire en la botella al tomar la
muestra, para lo cual se sumerge totalmente la botella a contra corriente y tapndola
inmediatamente despus de tomada la muestra.
4.3. Lavado de materiales. Lavar con detergente libre de fosfatos, enjuagar con agua corriente, y cinco
lavados con pequeas porciones de agua destilada.
5. PROCEDIMIENTO.
5.1. Oxmetro. Una determinacin por alumno.
1. Asegurarse de que la muestra y la solucin de calibracin se encuentren a temperatura ambiente.
2. Calibrar oxmetro segn instrucciones del fabricante, y efectuar medicin de oxgeno disuelto de la
muestra.
5.2. Mtodo Wrinkler. Analizar muestra por duplicado cada alumno, y un estndar. En el mismo frasco
en el que recolect la muestra, proceder de la siguiente manera:
1. Agregar 2 mL sulfato manganoso y 2 mL del reactivo lcali-yoduro-nitruro. Ambas adiciones se deben
hacer por debajo de la superficie del lquido.
2. Colocar el tapn, con cuidad para evitar burbujas dentro del frasco, y agitar por inversin varias veces
el frasco (aproximadamente por espacio de 20 seg). Espere a que se sedimente el precipitado hasta
aproximadamente dos tercios de la altura del frasco.
3. Destapar el frasco y agregar 2 ml de cido sulfrico concentrado, dejando que ste escurra por el cuello
del frasco. Tapa y agitar hasta homogenizacin.
4. Dejar reposar 5 minutos, tomar 100 mL y transferir a un matraz erlenmeyer de 125 mL y titular con la
solucin de tiosulfato de sodio 0.025 N (previamente colocada en la bureta de 50 mL) hasta un vire de
color amarillo paja.
5. Adicionar 1 a 2 ml de solucin indicadora de almidn (se produce un color azul) y continuar titulacin
hasta la primer desaparicin del color azul.
6. DISPOSICIN DE RESIDUOS DE LABORATORIO.
Todas las soluciones pueden ser vertidas al dren.
7. RESULTADOS.
7.1. Oxmetro.
Conductividad (S/cm)
Muestra, lectura 1(CE-M1)
Muestra, lectura 2 (CE-M2)
Muestra, lectura 3 (CE-M3)
Muestra, lectura 4 (CE-M4)
7.2. Mtodo Wrinkler.
mL de EDTA consumidos
Muestra, lectura 1(V-M1)
Muestra, lectura 2 (V-M2)
Muestra, lectura 3 (V-M3)
Muestra, lectura 4 (V-M4)
Ad. de estndar (V-ad. Est.)
Estndar (V-Est.)
8. CLCULOS
8.1. Oxmetro. La lectura directa que proporciona el oxmetro es el resultado. nicamente asegurarse de
efectuar las conversiones necesarias para reportar en las unidades solicitadas por el organismo regulador.
8.2. Mtodo Wrinkler. Los clculos se harn considerando promedios, cuando se hayan realizado
repeticiones de anlisis por equipo.
Determinar la dureza total de la muestra, como carbonato de calcio (CaCO3), del estndar, y de la adicin
de estndar, segn las siguientes frmulas:
DT (como CaCO3) (mg/L) = (V-M1 + V-M2 + V-M3 + V-M4) X MEDTA X 20
4
DTad. estndar (como CaCO3) (mg/L) = (V-M promedio - V-ad. Est.) X MEDTA X 20
DT estndar, exp. (como CaCO3) (mg/L) = V-Est. X MEDTA X 20
Para determinar los porcentajes de exactitud (su destreza analtica en funcin de conocer qu tan prximo
se encuentra su valor experimental respecto al terico) y recuperacin del anlisis (su destreza analtica en
funcin de conocer qu tanto pierde por efecto de manipulacin y/o complejidad de la muestra), utilice la
concentracin de dureza total presente en la muestra (DT), en la muestra de estndar (DT estndar, exp.), y
en el estndar adicionado (DTad. estndar):
DT estndar, exp. % Exactitud = X100
DT estndar
(DTad. estndar - DT) % Recuperacin = X 100
DT estndar
PRCTICA No. 6
DETERGENTES EN MUESTRAS ACUOSAS

1. OBJETIVOS.
1.1. Conocer y aplicar tcnica de separacin extraccin.
1.2. Realizar prueba contenido de detergents a una muestra de agua residual.
2. INTRODUCCIN.
A mediados del siglo XX los detergentes comenzaron a ser usados como productos limpiadores
en sustitucin de los jabones comunes y pronto su demanda se multiplic al grado que en la actualidad
una gran variedad de ellos son los agentes de limpieza ms populares tanto en uso domstico como
industriales.
Los detergentes estn constituidos de compuestos orgnicos con propiedades tensoactivas en
solucin acuosa, por lo que tambin se les conoce como tensoactivos o surfactantes. En general, una
molcula de un surfactante contiene una cadena polar aliftica que es hidroflica y una parte aromtica
que es hidrofbica. El surfactante representa de 20 a 30 % en la composicin del detergente y el resto son
aditivos como tripolifosfato de sodio, silicato de sodio y blanqueadores pticos.
El grado de descomposicin biolgica de los detergentes depende de la estructura qumica de
estos, esto es, de su configuracin molecular.
Los ms comunes son el sulfonato de alquil benceno (ABS) que presenta una cadena aliftica
muy ramificada y el sulfonato de alquilo lineal (LAS) en el que la cadena aliftica es lineal.
Las ramificaciones de la cadena aliftica cusan un retardo muy marcado en su degradacin, que
aun persiste despus de un tratamiento biolgico normal. En efluentes de plantas de tratamiento de lodos
activados se observa un 50 % de degradacin del ABS y 90 % del LAS, con relacin al influente, lo que
repercute en problemas cuando estos efluentes de bajo porcentaje de degradacin se mezclan con
cualquier cuerpo receptor.
Son muchas las dificultades causadas por un alto contenido de los detergentes en aguas y aguas
residuales, en primer lugar es indeseable la formacin de espuma en los ros desde el punto de vista
esttico y a su vez la toxicidad de los surfactantes que contienen representan un serio peligro a la flora y
fauna acutica; sin dejar de pensar que esta agua al ser utilizadas para irrigacin contaminen los suelos y
por lo consiguiente los cultivos. La formacin de espuma en las corrientes dificulta la transferencia del
oxgeno atmosfrico en el agua, lo que tambin ocurre en las unidades de aereacin de plantas de
tratamiento. Los detergentes contienen un elevado porcentaje de fosfatos los cuales son nutrientes, que
estando presentes en un cuerpo de agua contribuyen a una superpoblacin de la flora acutica, que al
morir, por accin degradativa de los microorganismos ocasionan una mayor demanda de oxgeno
perjudicial para los peces y para el propio cuerpo de agua; este fenmeno se conoce como eutroficacin.
Mtodos de Anlisis
En los Estados Unidos Mexicanos el surfactante ms ampliamente utilizado es el
sulfonato de alquil benceno ABS, por lo que es utilizado para estandarizar los siguientes
mtodos analticos:
1. Mtodo colorimtrico del Azul de Metileno.
2. Mtodo infrarrojo.
Mtodo de aplicacin.- El mtodo colorimtrico de Azul de Metileno es relativamente sencillo y
preciso, es aplicable en un rango de concentracin de 0.1 a 2 ppm de ABS. Mayores
concentraciones pueden determinarse por dilucin de la muestra en agua.
El mtodo require de la elaboracin de una curva de calibracin.
Fundamento.- El mtodo se basa en la formacin de una sal, cuando el azul de metileno
reacciona con los surfactantes (ABS, otros sulfonatos y steres sulfatados). La sal es soluble en
cloroformo y la intensidad del color es proporcional a su concentracin. La intensidad es
medida espectrofotomtricamente.
Campo de Aplicacin.- El mtodo es aplicable para aguas naturales y residuales, y como se ha
dicho anteriormente en rango de concentracin de 0.1 a 2 ppm de ABS.
Interferencias.- En la determinacin de detergentes en aguas, las interferencias positivas son
ms comunes que las negativas. Dentro de las interferencias positivas se tiene que los sulfatos
orgnicos, sulfonatos, carboxilatos y fenoles forman complejos con el azul de metileno, lo
mismo que los cianatos, cloruros, nitratos y tiocianatos inorgnicos que forman pares de iones.
Compuestos orgnicos, especialmente aminas causan bajos resultados.
3. MATERIALES Y REACTIVOS.
3.1. Materiales
Pipetas Graduadas de 10 ml.
Probeta de 10 ml.
Probeta de 50 ml.
Probeta de 100 ml.
Material comn de laboratorio.
Matraces erlenmeyer de 250 ml.
Embudos para filtracin.
Embudos de separacin de 500 ml con llave de tefln.
Matraces aforados de 100 ml.
Fibra de vidrio.
Papel filtro Whatman (nmero 4 o 40).
Cronmetro.
Espectrofotmetro para longitud de onda de 652 nm.
Celdas para espectrofotmtro.
Nota: Todo el material de vidrio empleado es esta determinacin debe lavarse con mezcla
crmica.
3.2. Reactivos
Agua destilada
Solucin indicadora de fenolftaleina
Solucin de NaOH 1 N
Solucin de H
2
SO
4
1 N
Cloroformo calidad ACS
Solucin de Azul de metileno
Solucin de lavado
Suspensin de hidrxido de aluminio
4. PROCEDIMIENTO.
4.1. El procedimiento requiere que la muestra se encuentre libre de color y de turbiedad; lo cual se logra
adicionando 25 ml de suspensin de hidrxido de aluminio y aproximadamente 150 ml. de muestra y
filtrando a travs de papel filtro.
4.2. En un embudo de separacin tomar 100 ml. de muestra o parte alcuota aforada a 100 ml. con agua
destilada. Correr un testigo de agua destilada.
4.3. Adicionar unas gotas de fenolftaleina para estimar si la muestra est cida (incolora) o alcalina (color
rosa). Neutralizar a pH de 7 con NaOH o H2SO4 1N.
4.4. Extraer con 25 ml de la solucin de azul de Metileno y 10 ml de cloroformo (cuidado con la presin
generada).
4.5. Transferir la capa de cloroformo a un segundo embudo de separacin.
4.6. Repetir esta operacin de extraccin dos veces ms, cada una con 10 ml de cloroformo.
4.7. Adicionar 50 ml de solucin de lavado al segundo embudo de separacin (el que contiene los 3
extractos de cloroformo), agitar vigorosamente por 30 segundos, dejar escapar el gas, para luego separar
las fases (Nuevamente, cuidado con la presin generada).
4.8. Transferir la capa de cloroformo a un matraz aforado de 100 ml filtrando a travs de un embudo de tallo
largo que contenga lana de vidrio.
4.9. Repetir la extraccin de la solucin de lavado dos veces ms, usando 10 ml de cloroformo en cada
ocasin.
4.10. Diluir con cloroformo hasta la marca del matraz de 100 ml y agitar bien.
4.11. Leer absorbancia de la a 652 nm contra un testigo de cloroformo.
5. RESULTADOS.
5.1. Compile sus resultados de absorbancia en una tabla.
5.2. Realice clculos para obtener los miligramos de detergentes en la muestra
Calcular las ppm de ABS con la siguiente ecuacin.
ppm (ABS) = A x 1000
V1
En donde:
A.- mg. De ABS leidos en la curva de calibracin.
V1.-Volumen de muestra.
1000.- Factor de conversin.
Reglas de solubilidad
1. Todos los nitratos y acetatos son solubles.
2. Todas las sales del grupo 1 y amonio son solubles.
3. Todos los sulfatos son solubles, excepto los de estroncio, bario y plomo. Los de plata y calcio
son poco solubles.
4. Todos los cloruros, bromuros y yoduros son solubles, excepto los de plata y plomo, as como el
bromuro y el yoduro de mercurio (II).
5. Todos los carbonatos, silicatos, sulfitos y fosfatos son insolubles, excepto los del grupo 1 y
amonio.
6. Todos los sulfuros son insolubles, excepto los de los grupos 1 y 2 y amonio.
7. Todos los hidrxidos son insolubles, excepto los del grupo 1, amonio y bario. Los de calcio y
estroncio son poco solubles.
Algunas sales dignas de mencin
El yoduro de plata es de color amarillo claro.
El cloruro de plata es de un color blanco muy ligeramente violceo, y se puede disolver si se
agrega amoniaco. El yoduro de plata no se redisuelve.
El bromuro de plata tiene un color entre el del cloruro y el del yoduro, y es poco soluble en
amoniaco.
El yoduro de plomo es de color amarillo intenso, similar al del cromato de plomo. Ambos son
insolubles.
Las sales de cobre son generalmente azules. El color azul se intensifica si se agrega amoniaco,
debido a la formacin del complejo Cu(NH3)4
2+
.
Muchos de los sulfuros insolubles son negros. Excepciones: zinc (blanco), manganeso (rosa).
Los hidrxidos insolubles suelen tener aspecto gelatinoso. Los hidrxidos de zinc y aluminio se
vuelven solubles en medio fuertemente bsico (es decir, con exceso de hidrxidos).
El hidrxido frrico es caf rojizo.
El tiocianato frrico es de color rojo sangre, por lo que el tiocianato de potasio (KSCN) se utiliza
para detectar Fe(III).
El ferrocianuro frrico es de color azul de Prusia, por lo que el ferrocianuro de potasio
(K4[Fe(CN)6]) se utiliza para detectar Fe(III). El ferricianuro (K3[Fe(CN)6]) da el mismo
producto con el hierro(II), debido a que el ferricianuro se reduce a ferrocianuro oxidando el
Fe(II) a Fe(III).
El anin permanganato es de color violeta intenso.
El anin dicromato es de color naranja. El cromato es amarillo.
ELECTROQUMICA
Se ocupa de la relacin entre las reacciones de xido-reduccin, en las
que tiene lugar la transferencia de electrones y la produccin y uso de la
corriente elctrica. ----- Divisin: electrlisis (celdas electrolticas) y
celdas electroqumicas (celdas galvnicas). --- Electrolitos: soluciones
acuosas que conducen la electricidad. ----- No electrolitos: soluciones
que no son descompuestas por la electricidad, no conducen la corriente
elctrica. ---- Celdas voltaicas o galvnicas: son dispositivos utilizados
para transformar la energa qumica en elctrica, a la cual se le llama
voltaica en honor de su descubridor. ----- Una pila voltaica consta de dos
electrodos que se sumergen en las soluciones de sus iones, de tal modo
que las soluciones estn en contacto y debido a la reaccin sobre uno de
los electrodos, se produce una diferencia de potencial entre las dos
placas, es decir, se produce una corriente elctrica. Ejemplo: de celda
galvnica: entre hierro y cobre. -----
HIDRLISIS Y LEYES DE FARADAY
Consiste en la descomposicin de una sustancia por el paso de la
corriente elctrica. En un proceso electroltico ocurre una transformacin
de energa elctrica en energa qumica. Los iones positivos o cationes se
dirigen al electrodo negativo (ctodo), al que proporcionan electrones
(reduccin), y los ionesnegativos se dirigen al polo positivo (nodo), al
que ceden electrones (oxidacin). ----- LEYES DE FARADAY 1. Ley:
la cantidad de una sustancia liberada o depositada en un electrodo es
proporcional a la cantidad de electricidad que pasa por un electrolito. ---
m = eQ ( masa = equivalente electroqumico x la cantidad de
electricidad (coulombs). ----- 2. Ley las masas de distintos elementos
liberados en los electrodos por una misma cantidad de electricidad son
directamente proporcionales a sus equivalentes qumicos. ----- Esta ley
se comprueba conectando en serie varias cubas electrolticas. Su
expresin matemtica es : m1/peso equivalente 1 = m2/peso equivalente
2.
IV. LA QUMICA HACIA LA CONQUISTA DEL SOL
(ELECTROQUMICA Y
FOTOELECTROQUMICA)
CELDAS ELECTROQUMICAS FUNDAMENTOS
EN EL CAPTULO ANTERIOR se han descrito algunas de las principales caractersticas de los
semiconductores. Se ver ahora el funcionamiento de estos materiales en celdas
electroqumicas, por lo que resulta necesaria una breve revisin de los conceptos bsicos de la
electroqumica.
Recientes descubrimientos arqueolgicos han llevado a los cientficos a postular que ciertos
procedimientos electroqumicos ya eran conocidos hace ms de 2 mil aos. Sin embargo, los
inicios de la electroqumica como ciencia formal se sitan en los ltimos aos del siglo XVIII.
En 1786, Luigi Galvani descubri una interesante relacin entre las contracciones musculares de
un anca de rana y ciertos impulsos que se obtenan al hacer contacto dos metales diferentes.
Posteriormente, en 1796. Alessandro Volta estableci que, al formar uniones con diferentes
metales, se generaba un potencial elctrico que originaba las contracciones observadas por
Galvani. De los nombres de estos cientficos han surgido dos de los trminos ms conocidos en
electroqumica: "voltaje", para designar el potencial de un sistema elctrico, y "celda galvnica"
para nombrar los dispositivos que transforman energa qumica en energa elctrica, como son,
por ejemplo las pilas que se utilizan a diario en radios, linternas, etctera.
Una celda galvnica comn est constituida bsicamente por dos piezas metlicas, llamadas
electrodos, y una solucin que contiene iones, denominada electrlito. Los electrolitos son
generalmente lquidos, pero algunas celdas de gran importancia tecnolgica utilizan electrlitos
slidos o en forma de pasta.
El aspecto fundamental de una celda galvnica, como el de cualquier sistema electroqumico, es
la transferencia de carga elctrica entre materiales con diferentes caractersticas: por un lado, los
electrones metlicos, donde los portadores de carga son nicamente los electrones (conduccin
electrnica) y, por otro lado, el electrlito, donde la conduccin se establece con base en iones
negativos (aniones) y de iones positivos (cationes) (conduccin inica). Las reacciones
qumicas que ocurren en las interfases1 electrodo/electrlito generan el flujo de corriente
elctrica que proporciona la celda. Por ejemplo, una celda galvnica constituida por dos
compartimientos -semiceldas-, como se muestra en la figura 35, acta de la siguiente forma:

tomos neutros Mg0 del electrodo de magnesio liberan electrones y pasan a la solucin como
iones Mg2
+

Mg
0
2e

= Mg
2+

Los electrones generados pasan a travs de la conexin exterior al electrodo de cadmio, fluyen
hacia la interfase y ah reaccionan con los iones Cd2+ presentes en la solucin:
Cd
2+
+2e

= Cd
0

El movimiento interno de iones -a travs del puente salino- ayuda a mantener la
electroneutralidad completando el circuito. El puente salino es un medio inico de baja
resistividad que permite el paso de los iones pero evita que las soluciones se mezclen
directamente. Esta celda permite el aprovechamiento de la energa qumica en forma de trabajo
elctrico, ya que mantiene unidos a los electrodos mediante una resistencia externa por la que
fluyen los electrones. Es este flujo electrnico el que proporciona la energa para que un aparato
funcione.
Cuando los electrodos se hallan en contacto directo (corto circuito), no se obtiene trabajo til;
por el contrario, slo se malgastan los materiales. Este fenmeno constituye lo que conocemos
como corrosin, que tantas prdidas econmicas y materiales ocasiona en todo el mundo. Un
caso muy conocido es la degradacin del hierro para formar un polvo pardo rojizo, que es el
xido de hierro (Fe2 O3). La reaccin global es
4Fe + 3O
2
+ 2
x
H
2
O 2Fe
2
O3 (H2O)
x

La humedad del aire es suficiente para actuar como electrlito. Si se tiene la presencia de sales,
como ocurre en las zonas cercanas al mar; la corrosin se acelera notablemente.
El solo hecho de poner en contacto un metal con una solucin de sus propios iones genera un
potencial elctrico bien establecido. Esto se debe, como se vio en el captulo anterior; a la
formacin de una interfase o frontera donde se encuentran dos medios de diferente estructura
qumica. Cada pareja in metlico/metal constituye un par redox. Este trmino se aplica en
general a cualquier par de sustancias relacionadas por un proceso de xido-reduccin, como
Cu
2+
/Cu
0
H
+
/H
2
, C1
2
/Cl

Por convencin, se asigna un valor de 0 de potencial al proceso que ocurre en un electrodo de
hidrgeno:
FIGURA 36.
FIGURA 37.

2 H
+
+ 2e

H2 E
0
= 0.00 Volts
Todas las dems reacciones tienen un cierto valor de potencial referido a este cero convencional.
As se puede formar una tabla de potenciales:

E0 (volts)
Mg
2+
+ 2e
-
Mg
0
-2.375
Al
3+
+ 3e
-
A1
0
-1.67
Zn
2+
+ 2e
-
Zn
0
-0.763
Cd
2+
+ 2e
-
Cd
0
-0.40
2 H
+
+ 2e
-
H2 0.0
Cu
2+
+ 2e
-
Cu
0
+0.346
C12 + 2e
-
2C1
-
+1.358
Estos valores de potencial son los obtenidos experimentalmente cuando los elementos son
puros, la concentracin de las soluciones es 1 mol por litro y la presin de los gases es 1
atmsfera a 25C. En estas condiciones se utiliza el smbolo E0 y se denomina potencial de
electrodo estndar.
Una de las celdas galvnicas ms conocidas es la llamada celda Daniel (figura 37). Consta de
dos semiceldas separadas por un vidrio poroso o puente salino. En una de ellas se coloca un
electrodo de cobre y una solucin 1 molar de sulfato de cobre, mientras que en la otra se coloca
un electrodo de zinc en una solucin 1 molar de sulfato de zinc. Al unir los electrodos mediante
un medidor potencial, se determina que la celda genera un potencial mximo de 1.1 volts,
denominado fuerza electromotriz (fem).
Este valor puede ser calculado con base en las reacciones qumicas que tienen lugar en la celda
y el potencial estndar asociado a estas reacciones. En este caso, los pares son Cu
2+
/Cu
0
y
Zn
2+
/Zn
0
.
Un potencial ms positivo indica una mayor tendencia de las especies a ganar electrones, esto
es, a reducirse. En cambio, a medida que un potencial es ms negativo (o menos positivo) se
tiene una mayor tendencia a la oxidacin, o sea a la prdida de electrones. De acuerdo a lo
anterior, se puede afirmar que las reacciones en la celda Daniel seran:
Cu
2+
+ 2e
-
Cu
0

Zn
0
- 2e
-
Zn
2+

La fem de una celda se calcula mediante la relacin: fem = Potencial ms positivo Potencial
ms negativo, sin cambiar nunca los valores reportados en la tabla a menos que las condiciones
de concentracin, presin o temperatura sean diferentes a las estndar.
Por definicin, se llama ctodo al electrodo donde ocurre la reduccin, y nodo a aquel donde se
lleva a cabo la oxidacin. Por lo tanto, la relacin tambin puede escribirse como
fem = Potencial del ctodo - Potencial del nodo que, para la celda Daniel, resulta ser
fem = + 0.346V- (-0.763V) = 1.109V
Es muy importante notar que, si bien los valores de potencial estndar descritos en la tabla
corresponden a las reacciones de reduccin, estos valores no cambian de signo si el proceso que
ocurre en la semicelda es una oxidacin. Por esto, el valor de -0.763 V se mantiene en el caso
del zinc y se hace la resta algebraica para obtener la fuerza electromotriz.
La celda Daniel no se puede recargar; esto es, no es posible recuperar las sustancias qumicas
que han reaccionado mediante la aplicacin de un potencial externo en sentido contrario. Si se
utiliza una fuente de poder para inyectar electrones al electrodo de zinc con la idea de obtener la
reduccin de los iones Zn
2+
a zinc metlico, la reaccin que se obtiene es la formacin de
hidrgeno a partir de los protones del agua. Esto se debe a que el potencial estndar del par
Zn
2+
/ Zn
0
es ms negativo que el del par H
+
/ H
2
y, por lo tanto, este ltimo es el que tiene
mayor tendencia a reducirse. Por otra parte, la relacin de potenciales debe servir nicamente
como primer punto a considerar y no como una prediccin definitiva de las reacciones por
ocurrir. En ocasiones, no son nicamente los valores de potencial, sino la rapidez de la reaccin
lo que realmente determina la factibilidad de un proceso.
A los sistemas en que se aplica externamente un potencial elctrico con el objeto de generar
reacciones qumicas de xido-reduccin, se les conoce como celdas electrolticas. Uno de los
procesos ms conocidos es la electrodepositacin de metales como core, nquel o zinc sobre
diferentes sustratos metalicos.
En el ctodo los iones se reducen y, en condiciones adecuadas, empiezan a formar un
recubrimiento bastante herencia, como en el caso del croen los automviles. Una tcnica de
purificacin del cobre es el electrorrefinado. Se utilizan nodos de un cobre impuro (cobre
blister) y ctodos de cobre de gran pureza (99.96%) en una solucin cida de sulfato de cobre.
Al aplicarse el potencial externo, el nodo de blister se disuelve mediante la reaccin de
oxidacin:
Cu
0
2e
-
Cu
2+

al mismo tiempo que las impurezas pasan a la solucin para posteriormente sedimentarse en el
fondo de la celda. En los ctodos ocurre la reaccin de reduccin.
Cu
2+
+ 2e
-
Cu
0

obtenindose un depsito de cobre de alta pureza. Las impurezas forman los que se llaman
lodos andicos.
En general, los procesos electroqumicos pueden separarse en dos grupos:
a) Procesos en que los electrodos no sufren ningn cambio.
Los materiales que se introducen al electrlito sirven nicamente como intermediarios para que
en su superficie se realice la transferencia de carga y se oxiden o se reduzcan las especies
presentes en el electrlito. Por ejemplo, la descomposicin del agua se puede lograr aplicando
un potencial superior a 1.3 volts entre dos electrodos de platino. En este proceso, denominado
electrlisis, se observa la formacin de hidrgeno en el ctodo, mientras que en el nodo se
desprende oxgeno. Sin embargo, las piezas de platino no sufren ninguna alteracin.
b) Procesos en que los electrodos participan activamente.
Pertenecen a este grupo los casos en que el nodo se disuelve en forma intencional, como en el
electrorrefinado del cobre, o se oxida deliberadamente, como en el caso del aluminio para la
obtencin de aluminio anodizado que tanta aplicacin tiene en la construccin.
Desafortunadamente, en muchos casos los electrodos reaccionan cuando no estn supuestos a
hacerlo, esto es, se oxidan, se contaminan o se disuelven, disminuyendo drsticamente la vida
til de los materiales y ocasionando grandes prdidas econmicas.
En general, los diferentes materiales que se utilizan como electrodos pueden ser utilizados sin
problema dentro de ciertos intervalos de potencial elctrico aplicado. Por ejemplo, un electrodo
de mercurio es muy utilizado para reacciones de reduccin en medios acuosos, porque inhibe la
electrlisis del agua y permite as el estudio de muchas sustancias; pero es prcticamente intil
como nodo, esto es para procesos de oxidacin, ya que, a potenciales positivos, es el propio
mercurio el que se oxida. Por otra parte, los electrodos de platino son muy utilizados en el
laboratorio, pues permiten trabajar en zonas ms o menos amplias de potencial sin verse ellos
afectados. Esto es importante, porque en cualquier experimento electroqumico de que se trate
es indispensable saber si la corriente que se observa se debe a procesos de xido-reduccin de
las especies en solucin, o bien a procesos de los propios electrodos.
Sera una sorpresa desagradable encontrar que despus de algunas horas de experimentacin,
nuestros electrodos se hubieran disuelto.
LA TRANSFERENCIA DE CARGA EN AMBOS SENTIDOS
Si no se rebasa su potencial caracterstico de oxidacin, en general un metal puede ser utilizado
ya sea como ctodo o como nodo. Esto es, la estructura electrnica del metal permite tanto el
flujo de carga del electrodo al electrlito (reduccin) como del electrlito hacia el electrodo
(oxidacin de las especies en solucin). La transferencia de carga se obtiene igualmente en
ambos sentidos. Esto no ocurre cuando se sustituye el electrodo metlico por un semiconductor.
Debe recordarse que en la unin semiconductor-electrlito, se produce el doblamiento de
bandas en el semiconductor que representa la barrera de potencial de Schottky. Al igual que en
las uniones p-n descritas en el captulo anterior; esta barrera permite el flujo de carga de un
sentido, pero lo impide en el otro. Por ejemplo, un material tipo n al cual se aplica un potencial
negativo puede suministrar electrones a especies oxidadas, reducindolas y, por lo tanto,
actuando como ctodo. Sin embargo, si a este material se aplica un potencial positivo con la
idea de utilizarlo como nodo, la barrera de potencial impide el flujo de carga.
De esta manera, en una celda electroqumica que contiene un electrodo semiconductor se
observar un proceso de rectificacin semejante al de las uniones p-n. Si el semiconductor es
tipo n, los procesos de reduccin sern posibles, mientras que los de oxidacin se vern
obstaculizados. Si el semiconductor es tipo p, se facilitarn las reacciones de oxidacin, pero las
de reduccin se dificultarn.
En la descripcin anterior se ha considerado que el electrodo semiconductor se encuentra en
condiciones de oscuridad. Qu suceder si se ilumina el electrodo?
FOTOELECTROQUMICA
Al iluminarse el electrodo semiconductor; si la energa de los fotones es suficiente para generar
pares electrnhueco, surge la posibilidad de observar reacciones fotoelectroqumicas.
Se estableci anteriormente que la unin semiconductor-electrlito suele generar una regin de
carga espacial empobrecida de portadores mayoritarios. Esto significa que, en un material tipo
n, los portadores cercanos a la interfase resultan ser los huecos, mientras que para el tipo p son
los electrones.
Al formarse los pares electrn-hueco en un semiconductor tipo n, el doblamiento de las bandas
ocasiona que los electrones se alejen de las especies en solucin, lo cual impide reacciones de
reduccin. Por otra parte, los huecos cercanos a la interfase pueden reaccionar con las especies
inicas y generar as procesos de oxidacin. Se concluye algo muy interesante: un
semiconductor tipo n, que en condiciones de oscuridad acta prioritariamente como ctodo, bajo
una iluminacin adecuada favorecer procesos de oxidacin, o sea, actuar como fotonodo. Por
las mismas razones, un semiconductor tipo p actuar como fotoctodo, ya que sern los huecos
los que se alejen de la interfase, mientras que los electrones quedarn disponibles para
reacciones de reduccin. Puede verse que en fotoelectroquimica son, curiosamente, los
portadores minoritarios los que juegan el papel principal.
En las celdas electrolticas convencionales descritas anteriormente, las reacciones qumicas se
obtienen al aplicar un potencial elctrico externamente. As, la energa suministrada como
trabajo elctrico se transforma en energa qumica acumulada en los productos de reaccin.
En una celda fotoelectroquimica, es la energa proporcionada en forma de luz la que genera las
reacciones qumicas. Una celda fotoelectroquimica resulta, as, una especie de "hoja artificial"
que, como las hojas de las plantas, utiliza la luz para promover reacciones qumicas.
LA FOTOSNTESIS ARTIFICIAL
Como se vio en el capitulo II, la fotosntesis ocurre en las plantas verdes -especficamente en los
cloroplastos- y puede resumirse por la ecuacin:
luz azul y roja
Uno de los puntos ms importantes de recordar es que el oxgeno generado proviene de la
descomposicin del H2O y no del CO2 como se crea originalmente.
En el captulo III, como antecedente al estudio de las bandas de energa, se present el modelo
de excitacin electrnica que origina el color de los objetos. As, la clorofila resulta ser de color
verde porque absorbe selectivamente las radiaciones caracterstica, del azul y del rojo en el
espectro visible. De esta manera, puede establecerse que el comportamiento de la clorofila es
anlogo al de un material semiconductor que absorbe determinadas energas en funcin de la
magnitud de la banda prohibida.
Hasta hace algunos aos, la gran mayora de los estudios en semiconductores se realizaban con
materiales inorgnicos puros, como el silicio o el germanio y, ms recientemente, con
compuestos como el TiO2 o el CdTe. Sin embargo, la investigacin de muchos pigmentos o
colorantes, ente ellos la clorofila, ha demostrado que suelen poseer propiedades
semiconductoras. De esta manera se ha incrementado en gran forma el estudio de los
semiconductores orgnicos. En la figura 38 se muestran:
(a) Molcula de ftalocianina de magnesio
(b) Molcula de clorofila
Figura 38.
Con base en los conceptos anteriores, desde la dcada de los setenta, y dentro del marco de la
bsqueda de nuevas fuentes de energa, muchos cientficos se han dedicado a la construccin de
sistemas artificiales de fotosntesis, donde generalmente se substituye el pigmento natural por
otros colorantes de estructura semejante pero ms fciles de obtener en el laboratorio, o bien,
por semiconductores inorgnicos. Uno de los objetivos principales es lograr una fotosntesis
"abitica", o sea, no asociada a un ser vivo y, por lo tanto, menos limitada en condiciones de
presin, temperatura o concentracin.
Tratar de simular en el laboratorio todas las reacciones que ocurren naturalmente en las plantas
durante la fotosntesis es evidentemente, una tarea muy difcil, sobre todo si se recuerda que no
todos los pasos qumicos de esta reaccin han sido claramente establecidos. Hasta ahora, lo
nico que ha sido posible construir es un sistema que al iluminarse genera la
fotodescomposicin del agua para obtener hidrgeno y oxgeno:
H2O H2 + O2
En 1981 se fabric un "cloroplasto artificial" donde ocurre esta reaccin al iluminarse una
solucin acuosa de compuestos orgnicos muy similares a la clorofila natural que
contienen magnesio. Por supuesto, este dispositivo es miles de veces ms grande que el
prodigioso cloroplasto natural y, con seguridad, mucho ms costoso. Sin embargo, representa el
afn del hombre por desentraar los secretos de la naturaleza en una primera alternativa que
suele ser la imitacin.
Al igual que en los ltimos aos las gigantescas calculadoras se han reducido al tamao de una
tarjeta de presentacin gracias al uso de los circuitos impresos a base de microcomponentes, se
piensa que es posible obtener "micro-cloroplastos". Para esto, al igual que en la electrnica, es
necesario recurrir a los materiales semiconductores
Los "micro-cloroplastos artificiales" de que tenemos noticia hasta la fecha son en realidad
pequesimas partculas de un material semiconductor dispersadas en un medio acuoso. Estas
partculas son previamente recubiertas en forma parcial con platino, de forma que en la
superficie de la partcula ocurren tanto la reaccin de oxidacin como la de reduccin (ver
captulo II). Esto equivale a tener una microcelda electroltica donde ctodo y nodo estn
contenidos en la misma partcula semiconductora.
El recubrimiento parcial de partculas semiconductoras con elementos metlicos es, por s
mismo, un proceso de gran importancia tecnolgica, ya que se utiliza en la preparacin de
catalizadores, sustancias que ayudan a acelerar muchas reacciones qumicas tanto en el
laboratorio como en la industria. Tambin las reacciones que intervienen en la impresin y
revelado de rollos fotogrficos guardan estrecha relacin con los procesos fotoqumicos en
partculas semiconductoras. Sin embargo, el rea de mayor futuro es la posible sntesis de
sustancias qumicas tiles como el hidrgeno y el amoniaco (NH3) a partir de materiales baratos
y abundantes como el agua o el nitrgeno (N2). Hasta la fecha, los sistemas fabricados funcionan
con muy baja eficiencia de conversin de energa luminosa a energa qumica. Esto ha hecho
pensar a los cientficos que, para algunas reacciones como la descomposicin del agua, tal vez
resulte conveniente disear procesos que, en lugar de buscar una transformacin directa de
fotn por cada electrn, se asemejen ms a los mecanismos utilizados por las plantas verdes, los
que involucran la absorcin de dos fotones de menor energa por cada electrn generado.
Existe una teora muy interesante que propone que fotorreacciones en partculas
semiconductoras -xido de zinc, por ejemplo- pudieron ser de gran importancia en la evolucin
de la vida sobre la Tierra. Se ha demostrado que la irradiacin con luz solar de una mezcla que
contiene amoniaco, metano (CH4), agua y polvo de TiO2 platinizado y dispersado, genera
aminocidos, que son los componentes bsicos de las protenas. Las condiciones del
experimento simulan en gran medida las existentes en nuestro planeta hace cientos de miles de
aos.
SISTEMAS FOTOELECTROQUMICOS
La diferencia bsica entre un sistema fotoelectroquimico y uno fotoqumico como los descritos
en la seccin anterior es, precisamente, la presencia de un flujo de carga elctrica a travs de un
conductor externo que une las zonas andica y catdica, separadas fisicamente. Este es el
mismo criterio que permite distinguir un proceso quimico de uno electroqumico, ya que este
ltimo siempre conlleva una transferencia de carga elctrica a travs de una interfase electrodo-
electrlito. Si en el diseo de una celda electroqumica convencional se sustituye uno o los dos
electrodos metlicos por electrodos semiconductores, se pueden obtener celdas
fotoelectroqumicas, ya sean de tipo galvnico o de tipo electroltico:
a) Una celda fotoelectroquimica de tipo galvnico es aquella diseada para transformar
directamente la energa luminosa en energa elctrica. A diferencia de una pila galvnica normal
en la que los reactivos se consumen, en estos sistemas se busca que las reacciones que suceden
en el ctodo y en el nodo sean iguales pero en sentido contrario. Esto es, una sustancia O que
se reduce en el ctodo, transformndose en una especie reducida R, se regenera en el nodo,
donde se lleva a cabo la oxidacin de R para dar O. Dado que no hay cambio qumico neto de
las especies presentes, esta celda permite que la energa luminosa absorbida por el
semiconductor sea utilizada directamente como trabajo elctrico. Por este motivo, estas celdas
son llamadas autorregeneradas. Tambin, por su clara semejanza con una celda fotovoltaica
tradicional, son conocidas como "fotovoltaicas de unin lquida". En general, el trmino "unin
lquida" identifica la presencia de interfases electrlito/electrlito, lo que identifica a los
sistemas fotoelectroquimicos y los distingue de los sistemas en estado slido, como los
construidos a base de silicio.
Ser posible construir una pila galvnica comn que sea autorregenerada? No, ya que esto
implicara la obtencin ilimitada de energa elctrica a partir de un sistema qumico invariante:
una fuente inagotable que desafortunadamente es solo un sueo, una violacin al principio de
conservacin de la energa.
En teora, una celda fotoelectroquimica autorregenerada parece ser el medio ideal de aprovechar
la energa solar. Desafortunadamente esta idea, al llevarse a la prctica, ha puesto en evidencia
una gran serie de obstculos que hasta el momento han impedido una fabricacin a gran escala.
Estas dificultades sern comentadas en detalle ms adelante.
Otro tipo de sistemas llamados fotogalvnicos, en vez de utilizar electrodos semiconductores
como contadores de la energa solar, emplean sustancias coloridas disueltas en el electrlito. En
general, se requieren dos pares redox -A/B y Y/Z por ejemplo- donde A es un colorante que
puede absorber la radiacin solar (Por esta razn tiene color!) y pasar a un estado excitado A*
Las reacciones en una celda fotogalvnica tpica son:
Absorcin de energa luminosa:
luz
A A* Reaccin de xido-reduccin en la solucin electroltica
A* + Z B + Y
donde A* se oxida para formar 13, mientras que Z se reduce para formar el compuesto Y
En los electrodos las reacciones son:
Regeneracin de la sustancia A en el ctodo:
B + e
-
A
Regeneracin de la sustancia Z en el nodo: s
Y - e
-
Z
Ctodo y nodo estn unidos externamente por un conducto, de tal forma que es posible obtener
un flujo de carga y, por tanto, un trabajo elctrico.
Si la reaccin:
A + Z B + Y
ocurriera espontneamente en condiciones de oscuridad, se tendra una celda galvnica comn.
El fundamento de la celda fotogalvnica es que se requiere la energa luminosa para promover
la excitacin:
A A*
y es esta especie A* la que puede reaccionar con Z. Ya que, finalmente, los compuestos se
regeneran, se tiene una transformacin directa de energa solar a energa elctrica sin cambio
neto. Estos sistemas tambin presentan dificultades, especialmente por una lenta degradacin de
las especies qumicas y por reacciones secundarias que son difciles de evitar.
b) En las celdas fotoelectroqumicas de tipo electroltico, el objetivo principal no es obtener
corriente elctrica sin cambio qumico sino, al contrario, utilizar la energa solar para
precisamente promover reacciones qumicas.
Es una tendencia natural que compuestos con gran contenido energtico reaccionen entre s para
generar especies de menor energa, y por esto ms estables. La diferencia de energa es liberada
hacia los alrededores, generalmente en forma de calor; por lo que estos procesos se denominan
exotrmicos. En cambio, los procesos endotrmicos son aquellos que requieren un suministro de
energa para llevarse a cabo. La energa queda entonces contenida como energa qumica en las
sustancias producidas. Si la energa proporcionada al sistema es de origen solar se tiene que:


Sustancias de bajo
contenido energtico
(reactivos)
+
energa
solar
=
sustancias de alto
contenido
energtico
As, la ventaja de un sistema de este tipo es que no slo se logra la transformacin de la energa
solar sino que tambin queda almacenada en los productos obtenidos.
Uno de los procesos ms estudiados, como ya se mencion anteriormente, es la descomposicin
de un material abundante como el agua para obtener combustibles como el hidrgeno, de gran
utilidad. Esta reaccin puede obtenerse utilizando nicamente energa solar o tambin mediante
una combinacin de iluminacin con potencial aplicado externamente. Este ltimo tipo de
procesos se denomina fotoasistido, ya que la energa luminosa slo contribuye parcialmente a la
generacin de productos.
Las primeras celdas fotoelectroqumicas diseadas para la reaccin:
H2O + 2fotones ------------- O2 + H2
estn constituidas por un electrodo semiconductor de TiO2 (dixido de titanio) tipo n, un
electrodo de platino (Pt) y una solucin acuosa de sulfato de sodio (Na2 SO4). Las semiceldas se
unen por un vidrio poroso que hace las mismas funciones que un puente salino.
Al ser iluminado, el semiconductor tipo n acta como fotonodo y se llevan a cabo dos
reacciones:
1) Formacin de dos pares electrn-hueco
n-TiO2 + 2 fotones ----------- 2 electrones (e
-
) + 2 huecos (p
+
)
2) Oxidacin del agua:
2p
+
+ H2O ------------ O2 + 2protones(H+)
En el electrodo de platino ocurre la reduccin de los protones, liberndose hidrgeno:
2 e
-
+ 2 H
+
----------- H2
El sulfato de sodio presente en la solucin no interviene en la reaccin y sirve tan slo para
disminuir la resistencia de la celda al paso de cargas.
El siguiente paso en el diseo de estas celdas fue sustituir el ctodo de platino por un
semiconductor tipo p que acte como fotoctodo y aproveche tambin la energa luminosa
proporcionada al sistema. El material elegido fue el fsforo de galio (p-GaP). M iluminar
ambos electrodos, en el n-TiO2 se desprende oxgeno y en el p-Gap se genera hidrgeno. El
funcionamiento de esta celda depende de que la solucin acuosa contenga un cido o un lcali.
Esto se debe a que la concentracin de protones (H
+
), mucho mayor cuando se utiliza un cido,
influye sobre los potenciales a los que se produce la reduccin del protn para formar
hidrgeno. Por otra parte, la eficiencia de conversin y el tiempo de vida til de la celda
dependen del tipo de electrlito utilizado. Por ejempo, el comportamiento del p-GaP se
deteriora con el tiempo de funcionamiento si se emplean electrlitos de cido sulfrico (H2 SO4)
mientras que, por el contrario, las soluciones de cido clorhdrico (HCl) mejoran
paulatinamente la fotorrespuesta del material. Esto es indicio de posibles reacciones en la
superficie del semiconductor; donde ste participa activamente. Estas reacciones suelen ser
perjudiciales, pues alteran la constitucin qumica de los electrodos hacindolos -en muchas
ocasiones- inservibles.
ESTABILIDAD DE LAS CELDAS FOTOELECTROQUMICAS
Como se ha mencionado anteriormente, suele suceder que al tratar de pasar de un diseo terico
a una construccin real de la celda fotoelectroquimica surjan diversos obstculos.
Uno de los principales es la marcada tendencia de muchos materiales semiconductores a
reaccionar con el electrlito, especialmente en condiciones de iluminacin en las que se generan
los pares electrn-hueco (e
-
/p
+
). Algunos ejemplos de estas reacciones son:
Reacciones de reduccin por electrones
CdS + 2e

+ H2O Cd + S
2

(H2O)
ZnO + 2e

+ H2O Zn + 2OH

Cu2O + 2e

+ H2O 2Cu + 2OH

Reacciones de oxidacin por huecos
CdS + 2p
+
+ H2O Cd2+ (H2O) + S
ZnO + 2p
+
+ H2O Zn2+ (H2O) + O2
GaAs + 6p
+
+ 2 H2O Ga3 + (H2O) + AsO
-
2(H20) + 4H + (H20)
donde el smbolo (H2O) indica que las especies estn disueltas en agua. Al igual que para las
reacciones de xidoreduccin que se estudiaron anteriormente, a estas reacciones se puede
asignar un valor de potencial estndar. Esto permite hacer prediccin de reacciones en forma
semejante a la utilizada en celdas electroqumicas convencionales.
ESCALA ABSOLUTA Y ESCALA CONVENCIONAL
Para estudiar las posibles reacciones entre un electrodo semiconductor y un cierto electrlito, se
requiere poder ubicar ambos sistemas dentro de un marco nico de referencia. En este caso,
resulta necesario contar con una sola escala de energas.
Dentro de la fisica del estado slido, el cero de potencial se asigna para el electrn libre en el
vaco. Por otra parte, ya se ha mencionado que en electroqumica el cero de potencial
corresponde al par redox H
+
/H2. Para relacionar la escala absoluta de la fsica con la
convencional referida al electrodo de hidrgeno, se utiliza la siguiente regla:

Potencial en escala
absoluta
= (Potencial en escala convencional
+4.5 V)
Los potenciales de algunos pares redox, en la escala absoluta seran:

Mg
2
+ / Mg
0
-2.125V
H
+
/H
2
-4.50V
Cu
2
+ / Cu0 -4.846V
Si se recuerda que la tendencia natural de los electrones es "bajar" hacia niveles de menor
energa, se deduce que los pares con menor potencial en escala absoluta son los que ms
fcilmente se reducen. Un electrn en el nivel del Mg
0
tendr una fuerte tendencia a pasar al
nivel del Cu
0
, por lo que, si estos materiales se utilizan en una celda electroqumica, la reaccin
esperada ser que el magnesio acte como nodo y el cobre como ctodo.
Concuerda esta afirmacin con lo establecido con base en los potenciales de electrodo
estndar?
La relacin entre escalas es tambin de gran utilidad para la electroqumica con materiales
semiconductores, ya que permite establecer la posicin de las bandas de energa respecto a los
diferentes pares redox.
La energa asociada al proceso en que un electrn se trae del vaco (energa = cero> y se
incorpora a un tomo A
A + e
-
A
-

es, por definicin, la afinidad electrnica (x) del elemento A. En el caso de semiconductores se
considera que este electrn se incorpora a la banda de conduccin. Por esto, el nivel inferior de
esta banda (Ec) se coloca por debajo del cero absoluto, una cantidad igual a . Si se conoce el
intervalo o "ancho" de la banda prohibida (Eg), resulta entonces sencillo situar el nivel superior
de la banda de valencia (Ev) ya que
Ec = Ev = Eg
Por ejemplo, para el xido de zinc (ZnO) la afinidad electrnica es 3.9 eV y el ancho de banda
prohibida es 3.2 eV. Por lo tanto, Ec y Ev estan, en la escala absoluta, a -3.9 eV y -7.1 eV
respectivamente.
Con estos datos y la transformacin a esta escala de los potenciales "redox" de varios sistemas,
se puede construir un diagrama como el siguiente:

0.0 nivel de vaco
-
3.0
Ec (ZnO) Potencial de reaccin
-
4.0
- - - ZnO + 2H
+
+ 2e
-
Zn + H2O (a)

-
5.0

-4.5 - - -2 H
+ 2e-
H2
(0.0 convencional)
(b)
-
6.0


- - - ZnO + 2 H
+
Zn
+
(H2O) + O
2

(c)
-
7.0
Ev (ZnO)

- - -H2O + 2 H
+
2 H
+(
H2O) + O
2
(d)
-
8.0

Se establece, as, una relacin directa entre los niveles de energa del semiconductor; los
potenciales de reacciones del semiconductor con el electrlito y los de reacciones del propio
electrlito. Recurdese que los huecos (h
+
) tienden a "subir" y los electrones (e
-
) a "bajar".
Del diagrama anterior se pueden extraer varios datos: El potencial de descomposicin por
huecos del ZnO (reaccin c) es ms positivo que el potencial asociado a la oxidacin del agua
(reaccin d). Esto significa que la reaccin de descomposicin est ms favorecida y, por tanto,
el material ser inestable en estas condiciones. Recurdese que los huecos (h
+
) tienden a ocupar
el nivel alto posible.
Por otra parte, el potencial de reduccin del H
+
es ms negativo que el potencial asociado a la
reduccin del ZnO (reaccin a). Esto indica que el proceso de reduccin ms favorecido es el
de obtencin de hidrgeno y difcilmente se observar un deterioro en el semiconductor.
Se concluye, por tanto, que el ZnO podr ser utilizado sin problemas para reacciones de
reduccin, pero sera inestable para procesos de oxidacin cuando el electrlito sea acuoso y no
contenga otros pares redox. Experimentalmente se ha comprobado que en ZnO, tipo n, debido a
defectos estequiomtricos, al ser iluminado y actuar como fotonodo, genera muy poco oxgeno
y se detenora rpidamente. A este fenmeno se le llama fotocorrosin.
En el prrafo anterior se indic que las conclusiones seran vlidas, en principio, si el electrlito
no contena otros pares redox. A qu se debe esto?. Se debe a que la presencia de un par redox,
cuyo potencial estndar quedara por encima del potencial de descomposicin andica del ZnO
(reaccin c), se convertira automticamente en el sistema favorecido para la oxidacin. De
hecho, esta idea ha sido utilizada ampliamente para buscar sustancias que "protejan" al
semiconductor. Ya se ha mencionado que la prediccin de posibles reacciones con base en un
anlisis comparativo de los potenciales, es nicamente una primera gua. En muchos casos, si
bien una determinada reaccin parece ser la ms favorecida de acuerdo con los potenciales,
resulta que se lleva a cabo en forma muy lenta y no es, por lo tanto, observable
experimentalmente. Uno de los ejemplos ms conocidos de esta situacin es la reduccin del in
Cr
3
+
, cuando se utiliza un electrodo de mercurio inmerso en una solucin acuosa acidulada que
contiene los iones Cr3+. El potencial redox para la reaccin:
Cr
3+
+ e
-
Cr
2
+

tiene un valor de -0.41 V respecto al par de referencia H+/H2. Ya que la solucin es acidulada
se tiene la posibilidad reaccin de reduccin de los protones:
2 H+ + 2 e
-
H2
Esta ltima reaccin debe ser la ms favorecida en un proceso de reduccin, ya que su potencial
(0.0) es ms positivo que el potencial del par Cr
3
+
/Cr
2
+
. No obstante, experimentalmente no se
observa la formacin de hidrgeno (H2) y lo que se obtiene es el in Cr
2
+
. Esto se debe a que la
reduccin de los protones es un proceso muy lento en la superficie de un electrodo de mercurio.
Dicha lentitud hace posible la aparicin de otras reacciones menos "favorecidas" desde el punto
de vista energtico, como es el caso de la reduccin el Cr
3
+
.
Este fenmeno tambin se observa en algunas reacciones que no son electroqumicas. Por
ejemplo, la reaccin de formacin de agua a partir de hidrgeno y oxgeno:
H2 + O2 H2O
es un proceso en el que se libera energa y que, por este motivo, debera ocurrir
espontneamente en la naturaleza. En realidad, esta reaccin es tan extremadamente lenta en
condiciones naturales que para todo fin prctico es como si no ocurriera. Se requiere
proporcionar al sistema una gran cantidad de energa inicial (llamada energa de activacin) para
que la formacin de agua ocurra a una velocidad apreciable.
En el caso de los semiconductores, afortunadamente muchos procesos de descomposicin
tambin son muy lentos. Esto permite el uso de estos materiales, aun en stuaciones en que el
anlisis de potenciales indica inestabilidad.
Cuando no se cuenta con un par de redox que se oxide fcilmente, existen otras alternativas para
evitar la fotocorrosin de los electrodos.
MODIFICACIN DE ELECTRODOS
As como en ocasiones se evita la corrosin de los metales cubrindolos con pinturas
anticorrosivas, la fotocorrosin se puede disminuir depositando una capa polimrca sobre la
superficie del electrodo. Los polmeros son materiales constituidos por largas cadenas de
molculas. Algunos ejemplos muy conocidos son los plsticos, el poliuretano y el polietileno.
El silicio, de tanta utilidad en las celdas fotovoltaicas de estado slido, no puede ser empleado
en una celda fotoelectroqumica. Al contacto con el electrlito acuoso, el silicio reacciona
formando un xido aislante y esa capa de xido impide la transferencia de electrones e inutiliza
el sistema. El problema se presenta aun cuando en vez de agua se utiliza algn otro disolvente
orgnico, ya que las pequeas trazas de agua presentes como impurezas son suficientes para
oxidar el semiconductor. Si se recubre el electrodo de Si con una pelcula polimrica, sta
funciona como un impermeabilizante que evita el paso del agua hacia la superficie, y la
corrosin disminuye notablemente. Sin embargo, esta pelcula protectora debe ser tambin
conductora, pues de otra forma impedir el flujo de electrones y el electrodo ser intil.
Generalmente, los polmeros tienen baja conductividad, por lo que ha sido necesario buscar
otros materiales con buenas caractersticas de conduccin. Uno de los ms utilizados es el
polipirrol. Esta sustancia resulta de la oxidacin de muchas molculas de pirrol:

(1 molcula
de pirrol)
las cuales se unen entre s para formar cadenas de gran longitud. La oxidacin se puede hacer
electroqumicamente de tal forma que el silicio, actuando como nodo, se recubre del polmero.
La cantidad de polipirrol formada y, por lo tanto, el espesor de la pelcula, se pueden controlar
fcilmente mediante el tiempo de aplicacin del potencial.
De acuerdo a la energa asociada a la radiacin solar; el mximo aprovechamiento se logra con
semiconductores cuya banda prohibida sea aproximadamente 1.6 eV. Desafortunadamente, los
materiales con bandas prohibidas menores a 2 eV presentan problemas de estabilidad. Este
hecho ha motivado que muchos estudios se realicen con semiconductores como el ZnO (Eg =
3.2 eV) o el TiO2 (Eg = 3.2 eV). Sin embargo, la fuerte desventaja de estos materiales es que la
formacin de los pares electrnhueco requiere fotones de alta energa, cuya longitud de onda se
localiza ms en la regin ultravioleta del espectro que en la visible. La eficiencia de conversin
resulta as muy baja, ya que gran parte de la radiacin ultravioleta es retenida en las capas
superiores de la atmsfera. Una estrategia para superar estas dificultades consiste en recubrir el
semiconductor con una pelcula delgada de algn colorante. Esta sustancia, que obviamente
absorbe radiacin del espectro visible, flinciona como un escaln de energa. Los electrones
suministrados a la banda de conduccin provendrn de la excitacin del colorante y no de la
formacin de un par electrn-hueco en la banda de valencia. El proceso es anlogo al que ocurre
en los semiconductores impurificados con especies donadoras.
La obtencin de una celda fotoelectroquimica de alta eficiencia, bajo costo y larga vida til es
todava la meta por alcanzar de muchos investigadores, tanto en industrias como en
instituciones de educacin superior. En el siguiente captulo se incluye una revisin de los
ltimos adelantos logrados en fotoelectroquimica, se presenta el desarrollo de esta ciencia y se
analiza su participacin dentro de las alternativas de bsqueda de nuevas fuentes de energa.

NOTAS
1 Interfase: frontera entre regiones homogneas llamadas fases.
IV. LA CORROSIN INDUCIDA POR
CONTAMINACIN DEL AGUA
LAS aguas naturales son medios complejos, en evolucin permanente, que se pueden
considerar en una primera aproximacin como disoluciones de diferentes especies qumicas en
agua. Las especies ms abundantes son los iones, cationes como Ca+, Mg+, Na+, Fe+, etc., y
iones como HCO-3, CO
2
3; SO
2
4 Cl-, etc., as como gases, O2, CO2, etc. y a veces H2S.
La agresividad de un agua depende de su capacidad para conducir la corriente elctrica. Un agua
poco conductora ocasionar que la actividad de las pilas de corrosin que se puedan formar en
la misma sea pequea, ya que el circuito elctrico que se cierra a travs de ella presenta una
resistencia elctrica elevada. En el agua de mar; cuya conductividad es muy alta por la gran
cantidad de iones presentes, la actividad de los procesos de corrosin es tan alta, que en lapsos
muy cortos se pueden originar fenmenos muy graves.
Un agua dulce y una de mar constituyen casos extremos, y entre ambos existen una gran
variedad de aguas cuya agresividad frente a los metales vara en funcin de su composicin y
factores como la concentracin de oxgeno disuelto, pH, temperatura, concentracin de cloruros
y sulfatos, agitacin y velocidad del medio, etctera.
El agua de mar se caracteriza por la gran estabilidad de sus propiedades fisicoqumicas, y sobre
todo por su salinidad, que vara entre 30 y 37%. Por salinidad se entiende la cantidad de sales
anhidras contenidas en 1 kg de agua de mar, lo cual puede determinarse evaporando 1 kg de esta
agua de mar y pesando el residuo seco.
De manera aproximada, una composicin qumica "tipo" de un agua de mar se presenta en el
cuadro IV.1.
CUADRO IV. 1. Composicin qumica del agua de mar.

Compuesto
Concentracin,
gramos/litro
Cloruro de sodio, NaCl 27.0
Cloruro de magnesio, MgCl
2
3.2
Sulfato de magnesio, MgSO
4
1.6
Sulfato de calcio, CaSO
4
1.3
Sulfato de potasio, K
2
SO
4
0.8
Cloruro de potasio, KCI 0.5
Carbonato de Calcio, CaCO
3
0.1
Varios (bromuros, fosfatos) 0.5
Total 35.0
El agua de mar, en la proximidad de las costas, puertos y lagunas costeras puede estar muy
contaminada. En el cuadro IV.2 se presentan algunos resultados obtenidos de la agresividad de
las aguas de diferentes puertos frente a diferentes metales. Destacan como las aguas ms
agresivas las del puerto de Barcelona, debido a su fuerte contaminacin.
CUADRO IV.2. Penetracin media del ataque, en m/ao, al cabo de dos aos de
inmersin en aguas de diferentes puntos geogrficos.

Lugar de inmersin Acero Zinc Cobre
Barcelona, Espaa 0.43 0.053 0.052
La Rochelle, Francia 0.18 0.070 0.030
Portsmouth, Inglaterra 0.17 0.057 0.037
Miami, EUA 0.25 0.059 0.050
Drobak, Noruega 0.11 0.029 0.018
Hay que sealar que la velocidad media de corrosin en un agua de mar no contaminada es de
0.12 m/ao.
As, la contaminacin desempea un papel determinante en la agresividad de una determinada
agua frente a los metales de uso ms comn. Tanto es as, que una posible indicacin del grado
de contaminacin de un agua de mar puede llegar a establecerse por su velocidad de corrosin.
No se trata aqu de enlistar los diferentes contaminantes que pueden estar presentes en un agua
de mar ni su origen, sino tan slo de hacer notar que a la natural agresividad de la misma puede
sumarse el efecto de dichos contaminantes. Por su especial importancia e incidencia pueden
citarse entre stos a los iones nitrato, NO-3 provenientes, por ejemplo, de los abonos qumicos
nitrogenados, que por su naturaleza oxidante depolarizan la reaccin catdica de reduccin del
oxgeno, acelerando el proceso de corrosin. Asimismo, la presencia de fosfatos, provenientes
de los detergentes, ha dado lugar a la proliferacin de algas, muy especialmente en lagunas
costeras, las cuales consumen gran parte del oxgeno disuelto presente en el agua, haciendo que
el medio se vuelva anaerobio, con la consiguiente putrefaccin de estas lagunas, que agravan los
problemas de corrosin en el fondo de mares y lagunas por la posibilidad de crecimiento de
bacterias sulfato-reductoras. El acero y el acero galvanizado son especialmente atacados en
estas condiciones, ocasionndose problemas en todas aquellas estructuras sumergidas que no
estn suficientemente protegidas (por ejemplo, con proteccin catdica). Si bien la corrosin
microbiolgica o bacteriana no es un problema nuevo en los fondos marinos, su incidencia en la
falla de muchos sistemas sumergidos ha ido en aumento en los ltimos aos, al crecer la
contaminacin en las zonas aledaas a las costas.
En lo que se refiere a los problemas en otro tipo de aguas naturales, las redes de distribucin de
agua potable comprenden tuberas, vlvulas, medidores, bombas, etc. Los materiales ms
utilizados son: concreto, hierro, acero, cobre, PVC, etc. La accin del agua sobre algunos
metales como el hierro puede provocar problemas de corrosin. Asimismo, el equilibrio calco-
carbnico del agua proporciona a sta propiedades agresivas o incrustantes que se reflejan en las
tuberas de las redes de distribucin, efectos que pueden sumarse a los motivados por procesos
microbianos.
Muy a menudo la incidencia de la corrosin se refleja en su vertiente econmica: inutilizacin
de tuberas, vlvulas, bombas e incluso captaciones subterrneas. Pases como Dinamarca y
Suecia han calculado un costo anual de entre 5 250 000 y 5 650 000 dlares por habitante por
problemas de corrosin en 1983. Por otra parte, la calidad del agua puede cambiar en relacin
con la finalidad a que es destinada (puede tener mal gusto, slidos en suspensin, color, etc.), a
causa de alteraciones de las caractersticas organolpticas de la misma, y existe incluso el riesgo
de pasar en forma de solucin, dependiendo de las caractersticas de las tuberas, metales
pesados que pueden ser txicos (Cd, Pb, etc.). Por esta razn, en muchos pases no se autoriza
actualmente la instalacin de tuberas de Pb.
Como puede verse, las formas de corrosin pueden ser muy diversas. El problema es complejo
porque los factores motivadores son muy diversos. Entre los ms importantes se encuentran las
condiciones del flujo, la composicin de los ductos y las caractersticas biolgicas y
fisicoqumicas del agua. Cabe sealar que la presencia en el agua de determinadas floras
bacterianas (bacterias sulfato-reductoras y ferrobacterias) incide directamente en el aumento de
la corrosin del sistema. Las caractersticas qumicas del agua pueden favorecer ms la
presencia de esta flora bacteriana que acelerar el fenmeno. As, por ejemplo, el mecanismo de
los procesos de corrosin del hierro por procedimientos qumico-biolgicos puede explicarse y
entenderse con ayuda del esquema presentado en la figura IV.I.
FIGURA IV. 1 Mecanismo qumico biolgico en los procesos de corrosin del hierro en
medio acuoso.
En relacin con las caractersticas fisicoqumicas del agua, cabe enumerar las siguientes:
temperatura, pH, sales disueltas, oxgeno y bixido de carbono disueltos, y prcticamente todos
los cationes y aniones que intervienen en la composicin mineralgica normal del agua:
cloruros, bicarbonatos, carbonatos, sulfatos, sodio, calcio, magnesio, etctera.
Las sales corrosivas ms importantes son los cloruros, Cl-. Muchas aguas subterrneas
contienen cloruros provenientes de procesos de contaminacin (infiltracin de aguas
superficiales provenientes de actividades mineras, de tiraderos industriales y de fenmenos de
intrusin marina, fundamentalmente), y las aguas superficiales estn cada vez ms
contaminadas por deposiciones antropognicas. Concentraciones de cloruros superiores a 100
mg/1 en aguas de dureza mediana pueden causar problemas de corrosin, crecientes en forma
exponencial, de tal manera que concentraciones de iones cloruro de 1 g/1 provocan rpidamente
la destruccin por corrosin de metales como el hierro y el acero inoxidable.
Asimismo, la presencia de sales disueltas modifica la estructura de las posibles incrustaciones
existentes, volvindolas porosas y heterogneas, de tal forma que no constituyen una proteccin
de las superficies metlicas. Tambin se pueden formar zonas de aireacin diferencial, al
absorberse el oxgeno presente en el agua.
En cuanto a los sulfatos, en principio son poco corrosivos, aunque intervienen en el ciclo del
azufre, S (vase la figura IV.1), y en sistemas anxicos pueden contribuir a la formacin de
cido sulfhdrico, H2S compuesto muy agresivo que provoca problemas de corrosin muy
serios. El poder corrosivo de los sulfatos, SO
2
4 aumenta al asociarse a los Cl-, especialmente en
aguas blandas, de baja alcalinidad y que no estn saturadas con CaCO3. La presencia de Ca2+
en el agua, asociada al equilibrio calco-carbnico puede contribuir; en aguas incrustantes, a
proteger el sistema frente a la corrosin.
El tradicional axioma de que un agua incrustante no es corrosiva debe manejarse con cuidado.
La presencia de un agua estable o sobresaturada en relacin al CaCO3, aun cuando es una
condicin satisfactoria para la prevencin de la corrosin, es un remedio que tiene muchas
limitaciones.
En la formacin de una pelcula protectora sobre el metal no slo hay que tomar en cuenta los
datos tpicos que se renen para deducir el pH de saturacin del CaCO3, aunque algunas veces
stos pueden dar una idea bastante aproximada.
En las aguas potables existen o pueden existir muchas especies qumicas que afectan de muy
distinto modo la corrosin de los metales. As, mientras una cierta dureza clcica y una
alcalinidad suficiente favorecen la formacin de una capa protectora de CaCO3, la presencia de
ciertas sales disueltas: Cl, SO
2
4 y NO3-, en concentraciones que sobrepasen un cierto umbral,
puede cambiar radicalmente las caractersticas de dicha capa protectora, lo cual ocasiona un
mayor ataque al metal base. Los iones agresivos interfieren en el depsito de la capa protectora,
y es conocido el efecto detrimental de los iones cloruro en la corrosin de los metales.
En cuanto a las especies contaminantes que pueden estar presentes en el agua y que ayudan en
el proceso de corrosin, hay que citar de nuevo a los iones nitrato. El exceso de nitratos es
determinante para la clasificacin de agua como no potable, por la incidencia que tienen dichos
aniones sobre la poblacin, especialmente la infantil, ya que se pueden combinar con la
hemoglobina de la sangre.
La contaminacin por nitratos es especialmente significativa en las comunidades rurales, donde
los pozos de captacin de agua, la mayora de las veces artesanales y de poca profundidad,
facilitan una contaminacin bacteriolgica y qumica de nitratos. Se ha encontrado que existe
una relacin directa entre la concentracin de nitratos y las prcticas agrcolas, ya que las
concentraciones mximas se han obtenido en pocas en que se aplica una mayor cantidad de
abono (abonos qumicos nitrogenados o nitrato de sodio directamente). El problema se agudiza
en las aguas de abastecimiento, en las cuales la poca profundidad de los niveles freticos y la
permeabilidad de los materiales prximos a la superficie hacen que su vulnerabilidad a dicha
contaminacin sea muy acentuada.
La concentracin mxima permitida de nitratos en un agua, para que sea potable, es de 50 mg/1.
As, en las redes de distribucin de agua potable en las cuales se mantenga un buen control de la
potabilidad de la misma, no se presentan problemas de corrosin graves.
CORROSIN BACTERIANA
Desde hace mucho tiempo se conoce el papel que desempean las bacterias en los procesos de
corrosin metlica. Los primeros trabajos en este campo se deben a Von Wolzogen-Kuhr, que en
1923 puso en evidencia el mecanismo electroqumico del ataque del hierro por los
microorganismos sulforreductores.
Los microorganismos constituyen un vasto mundo de seres unicelulares extendidos por toda la
biosfera, y desempean un importante papel en la naturaleza. Gran nmero de ellos, en el suelo
o en el agua, descomponen activamente la materia orgnica y los minerales, participando as en
los ciclos naturales del carbono, nitrgeno y azufre.
Durante los procesos biolgicos se forman numerosos productos. Hay productos finales de
combustin: CO2 y H2O, por ejemplo; gases, como hidrgeno, nitrgeno y oxgeno; sustancias,
como el amoniaco, agua oxigenada, azufre, etc. productos cidos o alcalinos. Todos estos
productos se acumulan en el medio, modificando de forma continua su composicin.
Ciertas bacterias son capaces de efectuar su sntesis a partir del agua, del anhdrido carbnico
(CO2) y de algunas sales minerales; stas son las bacterias auttrofas. Se consideran como
bacterias hetertrofas las especies incapaces de efectuar por s mismas la sntesis de todos sus
factores de crecimiento.
La corrosin microbiana puede definirse como un proceso metablico bacteriano que origina o
acelera la destruccin de los metales.
Los microorganismos influyen sobre los procesos de corrosin a travs de mecanismos que les
permiten adquirir la energa necesaria para las actividades vitales. Esta energa puede adquirirse
a travs de tres medios:
a) Respiracin aerobia, que consiste en la eliminacin progresiva de hidrgeno de los sustratos
orgnicos. El hidrgeno es oxidado por el oxgeno del aire.
b) Respiracin anaerobia, en la cual el sustrato orgnico es tambin oxidado por eliminacin de
hidrgeno, y ste reduce los compuestos inorgnicos.
c) Fermentacin, proceso anaerobio en el cual el sustrato orgnico no es completamente
oxidado.
Al igual que la corrosin, los procesos metablicos se basan en la transferencia de iones
hidrgeno o de electrones. La actividad de los microorganismos corresponde a valores de pH
del medio que son tambin muy favorables a la corrosin.
Los microorganismos que desempean un papel en la corrosin pueden clasificarse de dos
maneras: desde los puntos de vista fisiolgico y los taxonmico. Se piensa, generalmente, que la
corrosin de los metales se debe a las bacterias anaerobias, por ejemplo, el desulfovibrio. Sin
embargo, existen diversos tipos de bacterias que hay que tener muy en cuenta desde el punto de
vista de la corrosin, como las bacterias del hierro, thiobacterias, y las bacterias aerobias que
producen cido sulfhdrico.
El potencial de oxidacin de las bacterias se puede medir, y la intensidad de la oxidacin se
caracteriza por la prdida de electrones. No hay dificultad en medir estas ganancias o prdidas
de electrones con la ayuda de un potencimetro, utilizando un electrodo de platino como punto
cero y un electrodo de referencia, por ejemplo, uno de calomelanos (mercurio/cloruro
mercurioso).
Cuando una sustancia puede ceder electrones a un electrodo inerte y la sustancia oxidada puede
recibir electrones de este electrodo, se dice que es una sustancia electroactiva.
Los cultivos microbianos son casi siempre sistemas fuertemente reductores. La actividad
metablica de las bacterias, resultante de su crecimiento y de su nutricin, slo es posible
gracias a la energa suministrada por la oxidacin de los elementos nutritivos que ocasionan
condiciones de reduccin en el medio.
Las bacterias aerobias reducen los medios hasta un cierto nivel, que en general es moderado,
aunque en algunos casos se llega a niveles altos. Las anaerobias presentes se aprovechan de
estas nuevas condiciones y proliferan a su vez.
As, los fenmenos de xido-reduccin desempean un papel muy importante en los procesos
biolgicos. Existen sustancias ms fcilmente oxidables que otras. Esto puede determinarse
midiendo la fuerza electromotriz o la diferencia de potencial generada por la corriente de
electrones, obligndolos a pasar por un hilo conductor. Es lo que se conoce como potencial
redox del medio. Este potencial se relaciona con el pH, la temperatura y la relacin existente
entre la concentracin de sustancia oxidada y reducida. Las condiciones de oxidacin
corresponden a un potencial elevado; las de reduccin, a una disminucin del potencial.
Las bacterias ms comunes se desarrollan a potenciales prximos o inferiores a 0 y pH
comprendidos entre 6 y 9, zonas favorables a la corrosin. Esto quiere decir que si en un medio
donde hay bacterias que existen en todas partes en la naturaleza los aportes nutritivos de
origen orgnico son suficientes, las bacterias entran rpidamente en actividad, multiplicndose y
metabolizando diferentes sustancias. Estos procesos ocasionan, de forma automtica, la
disminucin del potencial redox, originando las condiciones electroqumicas favorables a la
corrosin. Si estas condiciones existan ya, por l
Los microorganismos no pueden desarrollarse ms que en determinadas condiciones de pH.
Para cada grupo microbiano existen pH lmites y un pH ptimo. En general, los medios neutros
convienen a las bacterias hetertrofas que pueblan los medios naturales. Los lmites de
crecimiento de estas bacterias oscilan entre los pH de 5.5 a 8.5 o 9. Ciertas especies, como el
Thiobacillus, se cultivan a pH muy bajos, de entre 1.8 y 2.
La corrosin anaerobia se considera posible en valores de pH comprendidos entre 5.5 y 8.5, en
cuyo caso el valor del potencial redox permite establecer la siguiente clasificacin de suelos
debida a Starkey y Wright.
CUADRO IV.3 Potencial edox y corrosin anaerobia en suelos con contenido de sulfatos
(SO2-4-) apreciable.

Potencial
redox, mV
Riesgo de
corrosin
anaerobia
<100 Severo
100-200 Moderado
200-400 Ligero
>400 Nulo
Hablando en trminos generales, cualquier suelo con un contenido apreciable de sulfatos y con
un potencial redox de +200 mV a menor est, probablemente, en camino de convertirse en
anaerobio y debe considerarse peligroso.
CORROSIN ANAEROBIA
La corrosin anaerobia, originada por el desulfovibrio, se observ por primera vez en el suelo
de los Pases Bajos, en 1923, donde se comprob la aptitud de estas bacterias para corroer el
hierro y el acero, formndose sulfuro ferroso como producto de la corrosin.
Para comprender la forma en que estos organismos intervienen en los mecanismos de corrosin,
debemos recordar los procesos bsicos de la corrosin electroqumica. Para que exista
corrosin, para que se pueda formar la clsica "herrumbre", constituida por hidrxido frrico,
deben estar presentes tres elementos: hierro metlico, humedad y oxgeno.
La corrosin del hierro o el acero en presencia de oxgeno es un proceso electroqumico. El
lugar donde el metal sufre la corrosin, donde el hierro pasa del estado metlico al inico, y
despus al de solucin, se llama nodo. La reaccin andica puede escribirse de la manera
siguiente:
Fe Fe2+ + 2e-
Los dos electrones liberados en el proceso andico se desplazan, a travs de la masa metlica, al
ctodo o zona catdica. En sta, los dos electrones son captados por los iones H+ presentes en la
solucin (electrolito), que pasan a hidrgeno atmico (H), el cual es liberado como molculas
de hidrgeno gas (H2). La reaccin catdica se puede escribir de la siguiente forma:
2H+ + 2 H H2
Esta simple exposicin nos sirve para ilustrar la naturaleza electroqumica de los procesos de
corrosin. En el nodo tienen lugar las reacciones de oxidacin o deselectronacin, mientras que
en el ctodo tienen lugar las de reduccin o electronacin.
En el caso de una pila de corrosin sencilla existe una interaccin entre los productos originados
por las reacciones andicas y catdicas. El hidrxido ferroso, Fe(OH)2, es un resultado de los
iones ferrosos, Fe
2
+, formados en el nodo y los iones hidrxilo, OH-, formados en el ctodo; la
carga negativa de los iones hidrxilo dar lugar a que estos iones migren en la solucin hacia las
reas andicas, en las cuales hay un exceso de carga positiva, debido a la presencia de los iones
ferrosos formados. El hidrxido ferroso se forma cuando ambos iones con carga opuesta se
encuentran, reaccionan y se precipita el correspondiente hidrxido. La reaccin es la siguiente:
Fe2+ + 2 OH- Fe(OH)2
Este hidrxido ferroso se oxida a hidrxido frrico, Fe (OH)3, la conocida herrumbre, por el
oxgeno disuelto en el agua (electrolito):
4Fe(OH)2 + O2 + 2 H2O 4 Fe(Oh)3
La figura IV.2 ilustra, de forma esquemtica, este proceso.
Figura IV. 2. Diagrama que muestra la formacin de hidrxido ferroso e hidxico frrico
(herrumbre) por el proceso de corrosin.
Aunque el desulfovibrio causa la corrosin del hierro y del acero en ausencia de aire, queda
patente, con lo indicado anteriormente, que el oxgeno es necesario en los procesos
electroqumicos de corrosin, en los cuales se produce el hidrxido ferroso y el hidrxido
frrico como productos resultantes. Veamos la relacin existente entre los dos mecanismos de
corrosin, el de oxidacin y el bacteriano.
De acuerdo con la teora electroqumica de la corrosin, para que sta pueda tener lugar es
necesaria la existencia de un nodo, un ctodo y un electrolito (medio agresivo). En la figura
IV.3 puede comprobarse que de la reaccin en las reas catdicas resulta la formacin de
hidrgeno molecular; H2, sobre la superficie del ctodo. En soluciones neutras, como las de
cloruro de sodio, la formacin de hidrgeno y su evolucin como hidrgeno gaseoso son muy
lentas. ste puede ser el origen de la formacin de burbujas de hidrgeno sobre la superficie
catdica. Cuando esto sucede, esta pelcula de burbujas de hidrgeno formada sobre el ctodo
puede ocasionar tal disminucin de la velocidad de corrosin, que puede llegar a detenerla
completamente. Este fenmeno se conoce con el nombre de polarizacin catdica. La
polarizacin catdica por burbujas de hidrgeno se presenta esquemficamente en la figura IV.3.
Figura IV.3. Esquema representativo de la polarizacin local de un ctodo por una capa de
burbujas de hidrgeno.
El oxgeno disuelto en el electrolito neutro reacciona con el hidrgeno acumulado para formar
agua, H2O; de esta forma el proceso de corrosin contina. En este proceso, el oxgeno acta
como un despolarizante catdico.
El desulfavibrio, al igual que el oxgeno disuelto, acta como despolarizante catdico; de esta
forma el proceso de corrosin contina. La figura IV.4 presenta, en forma esquemtica, la
corrosin bacteriana del hierro y del acero por el desulfovibrio.
Figura IV. 4. Esquema representativo de la corrosin bacteriana del hierro por el
desulfovibrio, de la cual se obtiene, como producto de corrosin, el fulfuroso ferros (Fes).
reaccin global: L4fe + SO42- + 4 H2O ---feS + 3Fe (OH)2 + 2OH-.
La teora electroqumica de la corrosin bacteriana del acero por el desulfovibrio fue publicada
por primera vez en 1934, por Von Wolzogen-Kuhr. Sin embargo, esta bacteria se asoci con la
corrosin y deterioro de las tuberas enterradas en Holanda mucho antes, en 1923.
Aunque el mecanismo electroqumico de la corrosin bacteriana ha sido probado y aceptado,
investigaciones posteriores han puesto de manifiesto que no es el nico mecanismo a travs del
cual el desulfovibrio ataca al hierro y al acero. El mecanismo ectroqumico de corrosin dispone
de varias especies de desulfovibrio, las cuales producen la enzima hidrogenasa.
Recordemos que las sustancias que aceleran las reacciones qumicas, sin que se consuman en el
proceso, se llaman catalizadores; los catalizadores que estn formados por clulas vivas de
animales y plantas reciben el nombre de enzimas.
La hidrogenasa es una sustancia orgnica que cataliza la oxidacin del hidrgeno (es decir
cataliza la transferencia de electrones), activando, por tanto, la despolarizacin catdica:
2H2 + O2 2H2O + energa
Durante algn tiempo se lleg a pensar que slo estas especies de desulfovibrio, las que
producan la enzima, causaban la corrosin del hierro y del acero. Sin embargo, actualmente se
sabe que tanto en las especies que producen hidrogenasa como en aquellas que no la producen
la velocidad de corrosin es lineal y aproximadamente igual. Esto se debe a que la pelcula
parcialmente protectora de sulfuro ferroso no se forma sobre la superficie del metal. La
velocidad de corrosin depende de la naturaleza y comportamiento de la pelcula sulfurosa
formada sobre la superficie del metal.
Con una pelcula parcialmente protectora, formada sobre la superficie del metal, la velocidad de
corrosin originada por la hidrogenasa positiva fue mucho mayor que la originada por la
hidrogenasa negativa.
La accin corrosiva de la hidrogenasa negativa permite suponer que la corrosin ocurre como
resultado del cido actico formado en la interfase metal/sulfuro ferroso.
Es evidente tambin que hay corrosin por el simple ataque del sulfuro de hidrgeno generado
por estos organismos sobre el hierro y el acero, dando lugar as a la formacin y precipitacin de
sulfuro ferroso negro. Los iones sulfuro que as se forman actan, por otro lado, como
despolarizantes andicos, al reaccionar con los iones ferrosos para formar el sulfuro ferroso.
CORRROSIN AEROBIA
Al igual que las bacterias anaerobias, las aerobias pueden ser tambin el origen de fuertes
corrosiones. Por un lado, ocasionan la formacin de cido sulfrico y, por otro, forman sobre el
metal precipitados que, al quedar adheridos en forma aislada, originan procesos de aireacin
diferencial y, por lo tanto, de formacin de picaduras.
Estas bacterias estn representadas por las bacterias ferruginosas y los thiobacillus.
Bacterias ferruginosas. Estas bacterias estn muy extendidas en la naturaleza; se las encuentra,
a veces, en gran abundancia en aguas que contienen sales ferrosas disueltas. Van siempre
asociadas a depsitos de hidrxido frrico.
Existen dos tipos de bacterias ferruginosas: las unicelulares y las pluricelulares. Las verdaderas
bacterias ferruginosas son aerobias y, en principio, auttrofas. Se caracterizan por acumular
hidrxido frrico alrededor de sus clulas, lo que origina que en sus proximidades aparezcan
zonas manchadas con el conocido color de la herrumbre. La ms conocida es la Gallionella. La
clsica reaccin de su metabolismo es la siguiente:
4 Fe (HCO3)2 + 2 H2O + O2 4 Fe (OH)3 + 8 Co2 + energa
Estas bacterias son el origen de la formacin de incrustaciones sobre la superficie metlica y,
por lo tanto, de procesos de aireacin diferencial que desembocan en la formacin de picaduras.
Thiobacillus. Las bacterias Thiobacillaceae son aerobias auttrofas, y se caracterizan por crear
en el medio donde se multiplican una reaccin fuertemente cida. Su pH ptimo de crecimiento
se sita entre 3 y 4, y se pueden incluso cultivar a pH 0.2-0.6.
Todos los metales susceptibles al ataque por cido sulfrico diluido (10%) sufrirn una fuerte
corrosin en presencia de estas bacterias. Estas bacterias son el origen de formacin de pH muy
bajos, concretamente de formacin de H2SO4. En suelos que contengan sulfuros (piritas) pueden
ocasionar fuertes corrosiones en cualquier estructura que pueda estar bajo sus efectos.
Los representantes ms conocidos de este grupo son:Thiobacillus thiooxidans, Thiobacillus
thioparus, Thiobacillus denintrificans, Thiobacillus ferrooxydans, etctera.
Por ltimo, cabe sealar que el medio marino, de pH prximos a 7.5-8, es siempre favorable al
crecimiento microbiano. Desde el momento en que las partculas cargadas de microbios se
depositan en la superficie de los metales para constituir la pelcula microbiana (lo cual puede
suceder en pocas horas), las bacterias entran en actividad y provocan la disminucin del
potencial redox. Las condiciones de corrosin se realizan in situ y el deterioro del metal aparece
en unos das.
A modo de conclusin de todo lo anterior, es importante sealar que si no existen las
condiciones para que haya corrosin en un determinado medio, las bacterias pueden crearlas, a
condicin (para las hetertrofas) de que exista en el medio materia orgnica. Cuanto mayor sea
la cantidad de materia orgnica contenida en un electrolito, mayores sern los grmenes y
mayor y ms intensa la actividad bioqumica, y por lo tanto, la corrosin.
Las aguas de muchos puertos, lagunas y zonas costeras, fuertemente contaminadas por los
desechos de las ciudades, son origen de graves problemas en las instalaciones portuarias,
elctricas, etc., que se encuentran en ellas.
Todo ello justifica plenamente los esfuerzos que realizan numerosos investigadores en todo el
mundo para estudiar y conocer mejor el mecanismo de desarrollo de estos organismos, con el
fin de tratar de combatirlos y reducir, en lo posible, las grandes prdidas que ocasionan.
BIBLIOGRAFA
Existe abundante informacin relacionada con el tema de la corrosin atmosfrica. Algunos
libros que pueden ayudar al lector a profundizar en el tema son:
5. Felu y M. Morcillo, Corrosin y proteccin de los metales en lo atmsfera, Ediciones
Bellaterra, Barcelona, 1982.
W.H. Ailor, "Atmospheric Corrosion", John Wiley and Sons, Nueva York, 1986.
"Corrosin in Natural Environments", ASTM, STP 558, Filadelfia, 1974.
"Metal Corrosin in the Atmosphere", ASTM, STP 435, Filadelfia, 1968.
Para todos aquellos lectores que despus de leer el libro sientan la inquietud de montar su propia
estacin de corrosin atmosfrica, o decidan evaluar la agresividad potencial de una
determinada atmsfera, pueden recibir asesora en las siguientes direcciones:
Doctor Luis S. Hernndez, Instituto de Metalurga, Av. Dr. Manuel Nava Nm. 5, Universidad
Autnoma de San Luis Potos, SLP.
DoctorJorge Uruchurtu, Instituto de Investigaciones Elctricas, Palmira, Cuernavaca, Morelos.
Doctor J. Genesc, Facultad de Qumica, Universidad Nacional Autnoma de Mxico, Ciudad
Universitaria, 04510 Mxico, D.F.
La coordinacin en Mxico del proyecto "Mapa Iberoamericano de Corrosin Atmosfrica"
(MICAT) se encuentra en el IlE y en la Facultad de Qumica de la UNAM.
POTASIO Mtodo por Fotometra de Flama
1.- Generalidades
El potasio es el sptimo elemento en orden de abundancia en la corteza terreste, aunque su presencia en
las aguas naturales rara vez ocurre en concentraciones mayores de 20 mg/l .
Concentraciones ms altas de potasio del orden de 100 mg/l se encuentran en algunas salmueras.
1.1.- Almacenaje de la muestra
Las muestras para anlisis del potasio se deben almacenar en frascos de polietileno o polipropileno.
No deben ser guardadas en recipientes de vidrio suave, ya que existe la posibilidad de contaminacin con
los elementos que forman el vidrio.
1.2.- Campo de aplicacin
Este mtodo de anlisis es aplicable a muestras que contengan potasio dentro de los intervalos de
concentracin siguiente:
De 0 a 1, 0-10 y de 0-100 mg/l. Para cada uno de los intervalos de deber elaborar una curva de
calibracin estandar.
2.- Principios
En el anlisis de potasio por fotometra de flama, la muestra es atomizada.
Los tomos de potasio son excitados en la flama a un nivel de energa mayor, al regresar a su estado
fundamental emiten energa en forma de luz de una longitud de onda de 768 nm que es especfica para el
anlisis de este elemento.
La luz pasa a travs de un filtro o un monocromador, que selecciona la longitud de onda de la luz emitida
por los tomos del potasio.
La luz pasa a un detector de tipo fototubo integrado al sistema de lectura que puede ser digital o
analgico.
La intensidad de la luz emitida y la respuesta elctrica del detector, son directamente proporcionales a la
concentracin del potasio.

2.1.- Interferencias
Las partculas que contiene la muestra pueden tapar el mechero, por lo que se recomienda filtrar esta
antes de su anlisis. El sodio y el calcio pueden causar interferencias si se encuentran en mayor cantidad
que el potasio, 5:1 en el caso del sodio y 10:1 en el caso del calcio.
Para minimizar el problema de las interferencias, se recomiendan las siguientes acciones:
1. Diluir las muestras, para analizarlas en un rango bajo de potasio
2. Utilizar la tcnica de las adiciones estandar o de estandar interno
3. Adicin de cantidades iguales de los cationes que interfieren a los estndares de calibracin.
4. Utilizar agua destilada y desionizada, del tipo II espec. ASTM D 1193-91
3.- AparatosEspectrofotmetro de flama, ya sea de lectura directa o de estandar interno.
4.- Material
1 Matraz volumtrico de 1000 ml
6 matraces volumtricos de 100 ml.
1 Cpsula de porcelana
Pipetas volumtricas de 10 ml, 5 ml y de 1 ml.
Bureta de precisin de 25 ml
Para evitar la contaminacin por potasio, todo el material de vidrio deber ser lavado con una solucin
diluida de cido ntrico 1:25 y enjuagada varias veces con agua destilada.
4.1.- Reactivos
Solucin patrn de K
+

Disolver 0.9533 gr. de KCl secado a 140o C. durante 2 horas y aforar a 500 ml. Con agua destilada.
Esta solucin contine 0.1 mg de K
+
por cada ml.
5.- Estandarizacin
Se prepara una serie de diluciones de la solucin patrn con agua destilada, de acuerdo a la siguiente
tabla:
ppm K+ 0 2 4 6 8 10
ml sol. patrn 0 2 4 6 8 10
Aforar a ml 100 100 100 100 100 100

6.- Procedimiento
Coloque el fotmetro de flama apartado de la luz del sol o fuentes de luz indirecta, evite corrientes de aire,
polvo humos y contaminacin por jabones, detergentes, sudor y material mal enjuagado.
Considerando las diferencias entre marcas y modelos de los fotmetros de flama comerciales, sera
imposible formular instrucciones detalladas para el manejo y operacin.
Se recomienda leer cuidadosamente el instructivo de operacin y mantenimiento del equipo en uso.
Los parametros que generalmente se deben considerar son los siguientes:
* Escoger la fotocelda, la longitud de onda y la ranura adecuada.
* La sensibilidad requerida para el anlisis.
* Las presiones adecuadas de combustible , aire u oxgeno.
* El procedimiento de encendido, calentamiento, correccin de la seal de fondo de la flama.
* Lavado del quemador. Introduccin , quemado de la muestra y medida de la emisin.
* Limpieza del quemador y Apagado del equipo.
Se dan alguna recomendaciones para la operacin del fotmetro de flama en uso en los laboratorios de la
UAM Reynosa-Aztln, que servirn como guia:
Encendido del Fotmetro de flama:
Conectar a la corriente elctrica 110 volts.
Abrir el tanque de gas LP, regular la presin a 5 lb/in2 y encender la flama
Abrir el tanque del oxgeno y regular la presin de salida a 15 lb/in2
Apagado del Flammetro:
Cerrar el tanque de oxgeno y la vlvula
Cerrar el tanque de gas y la vlvula de salida.
NOTA: La secuencia de encendido y apagado, se deber seguir estrictamente en el orden anotado para
evitar posibles explosiones.
Curva de calibracin:
Preparar una curva de calibracin con los siguientes puntos : 0, 2, 4, 6, 8, y 10 ppm de K
+

Ajustar el 0 % de lectura con agua destilada y los botones de Blanc.
Ajustar a 100 % de lectura con la solucin de 10 ppm de K
+
con los botones de la sensibilidad (fine and
coarse) .
Ya calibrada a 0 y 100 % de lectura, leer las soluciones restantes.
Graficar el % Lectura contra las ppm de K
+


Anlisis de una muestra:
Calibrar el flammetro a 0 % lectura con agua destilada.
Calibrar el flammetro a 100 % lectura con la solucion de 10 ppp de K
+

Introducir la muestra o su dilucin y leer el % de lectura.
Determinar las partes por milln de K
+
con la ayuda de la curva de calibracin.
7.- Clculos:
Determine los meq/lt de K
+
( miliequivalentes por litro ) de acuerdo a la siguiente frmula:
meq/lt K
+
= ( ppm )*( FD ) / peso equiv del K
+

ppm: ppm de la muestra de la curva de calibracin
FD : Factor de dilucin
Peso equiv. del K+ = 39.10
8.- Precisin:
Este mtodo tiene un error relativo de 2.3 % tal como se determin en un estudio interlaboratorios.
9.- Bibliografa:
American Society for testing and Materials. Annual book of Standards 1994
Determinacin de potasio en agua. Metodo ASTM D 2791-93
Standard methods for the examinatin of water and waste water publicado por la APHA.
Determinacin de Potasio en agua Mtodo 3500-K-D 1995

Determinacin de Color escala Pt-Co

Generalidades Material Clculos Pregunta 1
Principios Estandarizacin Precisin Pregunta 2
Aparatos Procedimiento Bibliografa -
1.- Generalidades
Usualmente cuando se examina el agua, las primeras propiedades que se suelen considerar son las
siguientes: color, sabor y olor, caractersticas inherentes a ella.
Considerando la primera de ellas, el color: el agua de uso domstico e industrial tiene como parmetro de
aceptacin la de ser incolora, pero en la actualidad, gran cantidad del agua disponible
se encuentra colorida y se tiene el problema de que no puede ser utilizada
hasta que no se le trata removiendo dicha coloracin.
Las aguas superficiales pueden estar coloridas debido a la presencia de iones
metlicos naturales ( hierro y manganeso ), humus, materia orgnica y
contaminantes domsticos e industriales como en el caso de las industrias de
papel, curtido y textil; esta ultima causa coloracin por medio de los desechos
de teido los cuales imparten colores en una amplia variedad y son fcilmente
reconocidos y rastreados.
El color que en el agua produce la materia suspendida y disuelta, se le
denomina "Color aparente", una vez eliminado el material suspendido, el
color remanente se le conoce como "Color verdadero" siendo este ltimo el
se mide en esta determinacin.

1.1.- Almacenaje de la muestra
La muestra debe ser recolectada en envases de plstico y debe almacenarse en
el refrigerador.
El anlisis debe de llevarse a cabo en un lapso no mayor de 24 hrs.
1.2.- Campo de aplicacin
Este mtodo es aplicable a la totalidad de las muestras de agua potable.
Aguas contaminadas con ciertos desechos industriales, pueden producir
colores poco usuales, que no pueden ser igualados por las soluciones de
comparacin utilizadas en este mtodo.
Esta determinacin es muy importante en agua de abastecimiento domstico
por razones de higiene y salud.
Para aguas industriales, la importancia es por razones econmicas. Ya que
existen gran cantidad de industrias en cuyos procesos requieren agua
perfectamente limpia y clara, por lo que, las aguas con color necesitan un
tratamiento especial para su eliminacin.
Se recomienda que para las aguas de uso dmestico no excedan de 20
unidades de color en la escala platino cobalto.
2.- Principios
Para la determinacin de color en el agua existen dos mtodos:
Por comparacin visual de la muestra con soluciones coloridas de
concentraciones conocidas o discos de cristal de color calibrados previamente
con las soluciones anteriores. La unidad para medicin del color que se usa
como estandar, es el color que produce 1 mg/l de Platino en la forma de
cloroplatinato. La relacin de cobalto a platino, se puede variar para igualar el
matiz. La proporcin Pt-Co que se utiliza en este mtodo es normalmente la
adecuada para la mayora de las muestras.
El color puede cambiar con el pH de la muestra, por lo que es necesario, que
al medir el color, se reporte tambien el pH de la muestra.
En caso necesario la muestra se centrifuga para eliminar la turbidez. La
comparacin se realiza con las soluciones que tengan colores de 5, 10, y hasta
70 unidades contenidas en tubos nessler.
Existe tambien el mtodo espectrofotomtrico, el cual se usa principalemente
en aguas industriales contaminadas que tienen colores poco usuales, y que no
pueden ser igualados por este mtodo.
( Standard methods for the examinatin of water and waste water publicado
por la APHA.
Mtodo 206/9-85. Mtodo espectrofotomtrico para determinar color en el
agua 1985)

2.1.- Interferencias
La causa principal de interferencias en el color del agua es la turbiedad, la
cul produce un color aparente ms alto que el color verdadero.
Para eliminar la turbidez, se recomienda la centrifugacin, la filtracin no se
debe usar, ya que puede eliminar algo del color verdadero adems de la
turbidez.
3.- Aparatos
Este mtodo no requiere de aparatos especiales.

4.- Material
1 gradilla para tubos nessler
14 tubos nessler forma alta, de 50 ml
1 matraz volumtrico de 1 litro
4.1.- Reactivos
Solucin patrn de 500 unidades de color.
Se disuelven 1.246 g de cloroplatinato de potasio K
2
PtCl
6
( equivalente a 500
mg de platino metlico )
y 1 gr de cloruro cobaltoso hexahidratado CoCl
2
.6 H
2
0 (equivalente a
aproximadamente 250 mg de cobalto matlico ) en 100 ml de HCl
concentrado, aforar a 1000 ml con agua destilada, esta solucin tiene un color
estandar de 500 unidades Pt-Co.

5.- Estandarizacin
En tubos Nessler prepare soluciones patrn de color de 5 a 70 unidades de
color con ayuda de la siguiente tabla. Proteja las soluciones contra la
evaporacin y de los vapores de amonaco, pues su absorcin aumenta el
color.
PREPARACION DE SOLUCIONES PATRON
DE COLOR
ml de solucin de 500 unidades diluida a
50 ml con agua destilada
Color en unidades de platino-cobalto
0.5 5
1.0 10
1.5 15
2.0 20
2.5 25
3.0 30
3.5 35
4.0 40
4.5 45
5.0 50
5.5 55
6.0 60
6.5 65
7.0 70

6.- Procedimiento
Se centrifuga el agua si es necesario y posteriormente se observa el color de la
muestra, llenando un tubo nessler hasta la marca de 50.0 ml y se procede a
comparar con la serie de estandares contenidos en tubos nessler del mismo
tamao.
Se debern ver los tubos, verticalmente hacia abajo. Se ilumina la parte
inferior de los tubos, reflejando la luz por medio de una superficie blanca o
especular.
Si el color de la muestra excede de 70 unidades, diluya la muestra con agua
destilada en proporciones conocidas, hasta que su valor se encuentre en el
mbito de las soluciones patrn.
Al final multiplicar por el factor de dilucin correspondiente.

7.- Clculos
Calcule las unidades de color utilizando la siguiente fmula:

Unidades de color =
A x 50
V
Anote tambin el valor del pH del agua.
Dnde:
A = unidades de color de la muestra diluda.
V = ml de muestra tomados para la dilucin.
Anote los resultados de color en nmeros enteros de acuerdo a la siguiente
tabla:


Unidades de
color
Redondear al valor
mas cercano a
1 a 50 1
51 a 100 5
101 a 250 10
251 a 500
50

8.- Precisin:
No se cuenta con informacin de la precisin de este mtodo
9.- Bibliografa:
Standard methods for the examinatin of water and waste water publicado por
la APHA. 1995
Mtodo para Determinacin del color del agua 2120-B


Generalidades Material y reactivos Clculos Pregunta 1
Principios Estandarizacin Precisin Pregunta 2
Aparatos Procedimiento Bibliografa -

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Determinacin de SLICE

Generalidades Material Clculos Pregunta 1
Principios Estandarizacin Precisin Pregunta 2
Aparatos Procedimiento Bibliografa Pregunta 3
1.- Generalidades
El slicio es el segundo elemento ms abundante del planeta y se encuentra en
la mayora de las aguas.
Es el constituyente comn de las rocas gneas, el cuarzo y la arena.
La slice existe normalmente como oxido (como Si0
2
en la arena y como
silicato Si0
3
=
). Puede estar en forma insoluble, soluble y coloidal.
Muchas aguas naturales continenen menos de 10 mg/l de slice, algunas
pueden llegar a contener hasta 80 mg/l. Las aguas volcnicas la contienen
abundancia.
El anlisis de la slice en el agua de alimentacin de las calderas de alta
presin, es de gran importancia para evitar la formacin de depsitos duros de
slice en los tubos de las calderas y en las aspas de las turbinas de vapor.
Es importante conocer el contenido de la slice en aguas de uso industrial y
aguas de desecho.
Los anlisis de la slice, tambin proporcionan un mtodo sensitivo para el
control de la operacin los desmineralizadores de agua, ya que la slice es una
de las primeras impurezas que salen a travs de una unidad agotada.
Se puede eliminar la slice del agua por intercambio inico, destilacin,
tratamientos con cal, carbonato y magnesio.
En ocasiones es usado para formar capas protectoras internas en las tuberas
para inhibir la corrosin .
No tiene efectos txicos conocidos.
1.1.- Almacenaje de la muestra
Las muestras deben ser tomadas y almacenadas en recipientes de
polipropileno o polietileno de alta densidad, no se deben usar frascos de vidrio
ya que este esta formado por un alto porcentaje de slice que puede
contaminar la muestra, especialmente a altas temperaturas y pH elevado.
1.2.- Campo de aplicacin
Este mtodo determina unicamente la slice soluble en el intervalo de 0.5
a 20 mg/l.
Se pueden analizar concentraciones mayores, diluyendo proporcionalmente la
muestra.
Para la determinacin de slice total, se efecta antes del anlisis una digestin
alcalina y posteriormente se contina con el mtodo propuesto.
La silice total, tambin se determina por mtodo gravimtrico.
2.- Principios
La determinacin se basa en la espectrofotometra de absorcin en la regin
visible.
Su relacin cuantitativa se basa en la ley de Lambert y Beer que indica, que
la absorcin de la radiacin es proporcional a la concentracin de la slice
presente.
La slice y los fosfatos reaccionan con el in molibdato en solucin cida
( pH= 1.2 a 1.5 ), formando un complejo de color amarillo de silicomolibdato
y fosfomolibdato. Se adiciona cido oxlico para destruir el fosfomolibdato.
El silicomolibdato permanece sin cambio.
Se adiciona un agente reductor (sulfito de sodio) , que reduce el
silicomolibdato a un complejo color azl que obedece la ley de Lamber y
Beer,
La intensidad del color azl se mide a 650 nanometros por medio de un
espectrofotmetro.
2.1.- Interferencias
Causan interferencia los fosfatos, la turbidez y el color de ciertos iones ( Cu,
Fe, Cr0
4
=, taninos.) .
El material y los reactivos contaminados pueden aumentar la cantidad de la
slice a la muestra por analizar. La turbidez y el color en caso de estar
presentes, se pueden eliminar tratando la muestra con carbn activado.
Evtese el uso de material de vidrio corriente y use reactivos analticos de la
ms alta pureza . Es recomendable guardar todos los reactivos en frascos de
plstico.
3.- Aparatos
Cualquier espectrofotmetro que pueda usarse a una longitud de onda de 650
nanometros, con celdas de de 1 cm ( Spectronic-20).
Fabricantes
4.- Material
7 matraces volumtricos de 100 ml
1 matraz volumtrico de 1 litro
2 matraces volumtricos 500 ml
1 matraz volumtrico de 250 ml
7 matraces erlenmeyer de 125 ml
Celdas para espectrofotmetro de 1 cm

4.1.- Reactivos
1.- Solucin Patrn de 50 ppm de Slice ( Si0
2
)
Disolver 0.2367 g de Na
2
Si0
3
.9H
2
0 en agua destilada y aforar a un litro.
Mzclese bin y guardese en frasco de plstico.
2.- Solucin de Molibdato de Amonio al 10%
Disolver 50 gr. de Heptamolibdato de amonio tetrahidratado en agua destilada
y aforar a 500 ml. El reactivo se disuelve con lentitud necesitando agitacin y
un poco de calentamiento suave para ayudar a la disolucin. Guardese en
frasco de plstico.
3.- Solucin de HCl 10%
Disolver 50 ml de HCl con. (d=1.19 gr/ml) en 450 ml de agua
[Link] en frasco de plstico.
4.- Solucin de cido oxlico al 10 %
Disolver 100 g de cido oxlico ( C
2
H
2
O
4
.2H
2
O ) en agua destilada y aforar a
1 litro.
5.- Solucin se Sulfito de Sodio
Disolver 170 gr. de Na
2
SO
3
en agua destilada y aforar a 1 litro

5.- Estandarizacin
Construya una curva de calibracin con los siguientes puntos: 0, 2.5, 5, 10,
15 y 20 ppm de Si0
2
.
Esta curva se prepara diluyendo en un matraz volumtrico de 100 ml la
cantidad de ml de la solucin patrn de 50 ppm de slice que se anotan en la
tabla y aforando con agua destilada a la marca de 100 ml
Posteriormente se aaden los reactivos a cada uno de los matraces como se
menciona en el anlisis de la muestra, para desarrollar la reaccin de color. Se
llena la celda del espectrofotmetro y se anota la lectura de la Absorbancia
obtenida para cada estandar.

PPM Si0
2
ml de Solucin Patrn Aforar a 100 ml Abs.
0 0 " 0
2.5 5 " -
5 10 " -
10 20 " -
15 30 " -
20 40 " -

Graficar la Absorbancia obtenida contra las ppm de Si0
2
.
6.- Procedimiento
A.- BLANCO.-
Preparar un blanco con agua destilada y reactivos, ajustar a 0 de
Absorbancia.
B.- MUESTRA.-
Colocar 50 ml de muestra en un matraz erlenmeyer de 125 ml.
Agregar 5 ml de HCl al 10 %.
Aadr 5 ml de Molibdato de amonio al 10 %.
Se agita y se deja reposar 5 min.
Se aaden 2 ml de la solucin de cido oxlico al 10 %
Se agita y se deja reposar 2 min.
Agregar 10 ml de sulfito de sodio (Na
2
SO
3
)
Se agita y se deja reposar 2 min.
Leer el % de Trasmitancia en una longuitud de onda de 650 nm
7.- Clculos :
Determinar las ppm de Si0
2
por medio de la curva de calibracin, despus
determinar por medio de la frmula los me/l .

me/l Si0
2
= (ppm) (FD)
peq. de Si0
2

Donde :
peq. del SiO2 = 15.02 g
FD = Factor de dilucin
8.- Precisin:
El error relativo de este mtodo, de acuerdo a resultados interlaboratorios
analizando muestras sintticas, es de 3 %
9.- Bibliografa:
American Society for testing and Materials. Annual book of Standards 1994
Determinacin de slice soluble en agua Metodo ASTM D859/88
Standard methods for the examinatin of water and waste water publicado por
la APHA.
Determinacin de slice por el mtodo del molibdosilicato Mtodo 4500 Si-E,
1995

Generalidades Material Clculos Pregunta 1
Principios Estandarizacin Precisin Pregunta 2
Aparatos Procedimiento Bibliografa Pregunta 3

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This is a brief introduction to the field of Raman microscopy.
Raman microscopy is a very specialized optical microscopy. As in any optical microscopy its
spatial resolution is close to the micron.
In Raman microscopy the sample is illuminated with monochromatic light (a laser) and the light
scattered by the material is analyzed by a conventional optical microscope coupled to a Raman
spectrometer or a very sophisticated filter.
Most of the scattered light has the same frequency or color as the laser, but a very tiny amount
experiences a frequency shift, which is characteristic of the chemical bonds or molecules present
in the material. This inelastic scattering of light is called the Raman effect after C. V. Raman,
who discovered it. The analysis of the scattered frequencies (Raman spectroscopy) gives
information on the material chemical composition, state, aggregation, and even factors like
stress, orientation, or temperature to cite some.
Raman spectroscopy became a useful technique with the introduction of lasers as a convenient
monochromatic light source. It has become widely available only after the introduction of
holographic filters to reject the light scattered without frequency change.
In Raman microscopy the Raman frequency shift is analyzed at different points in the sample.
Raman microscopy can resolve parts with different chemical composition in a sample, and,
together with infrared microscopy, is sometimes referred as chemical imaging. It has been
applied to the study of thin films, coatings, microelectronic integrated circuits, mineral
inclusions, pigments in art works, identification of narcotics and plastic explosives, biological
tissues, and others.
Examples
The following figures illustrate the application of Raman microscopy to chemical imaging in
materials science. The data were obtained at the Raman Microscopy Laboratory of the Materials
Science Institute of Madrid (CSIC) in collaboration with other centers.
Bibliography
See, for example, G. Turrell and J. Corset, eds., Raman Microscopy. Developments and
Applications (Academic Press, London, 1996).
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Last updated 10 August 2001
Copyright 1996-2001 Fernando Agull-Rueda
Mirando hacia el futuro:
El espectrmetro
Raman busca mejorar
los exmenes de tinta
Leslie Hawke, Director de Desarrollo
Comercial, seala las ventajas del Foram 635
a Michael Moore del cuerpo de polica de
Dublin, en la Reunin Conjunta de las
Conferencias Europeas para la Polica y
Expertos Gubernamentales en Escritura y
Documentos (Joint Meeting of the European
Conferences for Police and Government
Handwriting and Documents Experts)
celebrada en el Tulliallan Castle en Escocia.
Una nueva y excitante adicin a la gama de instrumentos Foster + Freeman va a
ofrecer a los analizadores de documentos un mtodo directo, verstil y rentable para
examinar tintas.
Se ha ideado un espectrmetro simplificado de sobremesa para comprobar la
autenticidad de documentos midiendo y comparando los espectros Raman de las
tintas presentes."Se trata de una opcin de bajo costo y fcil de utilizar capaz de ser
operada sin necesidad de conocimientos tcnicos especialistas," explica el codirector
Gerente, Bob Freeman."El invento representa una innovacin considerable. La
espectroscopia Raman en s es una tcnica analtica relativamente nueva y no ha sido
desarrollada para uso en exmenes de documentos cuestionados. Ahora estamos
ofreciendo una tcnica que posee un alto poder de discriminacin, ideal para detectar
documentos alterados o falsos."
Bob Freeman comentaba que, debido a las complicaciones en la preparacin de la
muestra y al coste de la instrumentacin, las tcnicas convencionales para
caracterizacin y comparacin de materiales (absorcin de infrarrojos o
espectroscopia FTIR) no se utilizaban para el examen forense rutinario de
documentos.
"El espectrmetro ofrece a los examinadores de documentos una herramienta simple
capaz de detectar diferencias significativas entre los espectros Raman de las tintas,"
coment.
Fueron esta facilidad de uso y rentabilidad las que dieron forma al diseo."Este
instrumento en particular tendra poco valor si ofreciera una resolucin muy alta o unos
datos cuantitativos extremadamente precisos a lo largo de un amplio rango espectral"
dijo Bob Freeman.
"Como regla general, al comparar documentos, el examinador necesita ver diferencias
significativas si se pretende afirmar que existe una falsificacin.
Unas diferencias muy pequeas a menudo pueden atribuirse a causas 'naturales' -
variaciones en edad o condiciones de almacenamiento, variabilidad en densidad de la
tinta o contaminacin, las cuales tendran muy poca o ninguna importancia. La
reduccin en especificacin ha permitido a Foster + Freeman reducir de manera
importante el coste del instrumento."
Simon Clement, Ingeniero de Desarrollo aadi que el diseo del espectrmetro se
estaba optimizando para examinar tintas que puedan plantear dificultades tcnicas
especiales.
"Varias innovaciones tcnicas conseguirn estos objetivos y superarn las dificultades
presentadas por la naturaleza del tema", afirm.
Bob Freeman coment: "El espectrmetro es una valiosa adicin a nuestra gama de
productos para examinar documentos y es totalmente complementario con nuestros
instrumentos actuales."
Un efecto Raman se produce cuando la luz choca contra una sustancia, pierde o gana
pequeas cantidades de energa por la interaccin con las molculas del material y es
reflejada con una longitud de onda diferente. El conjunto de nuevas longitudes de onda
emitido constituye el espectro Raman. Los pequeos cambios en longitud de onda
estn relacionados con los niveles de energa vibracional del material y son altamente
caractersticos de su constitucin qumica. Los espectros pueden ofrecer unas buenas
"huellas dactilares" del material.
Preliminary FORAM 685 information

Foster and Freeman Limited. 25 Swan Lane, Evesham, Worcestershire,
WR11 4PE, UK
Telephone +44 (0)1386 41061 Fax: +44 (0)1386 765351 Email:
sales@[Link]

VENTAJAS DE RAMAN SOBRE OTRAS TECNICAS
La tcnica Micro-Raman puede ser usada en aplicaciones tales como: procesamiento de
alimentos, tratamiento de celulosa y fabricacin de plsticos, entre otros.
La tcnica Micro-Raman tiene la ventaja de la simplicidad de preparacin de muestras a
inspeccionar comparadas con otras tcnicas de caracterizacin. Micro-Raman no tiene
competidor : con esta tcnica se puede analizar la composicin qumica de compuestos
orgnicos e inorgnicos sin destruir las muestras y sin preparacin especial. Se pueden analizar
slidos y lquidos de igual manera.
-Tcnicas de caracterizacin como difraccin de rayos-x ( XRD ) solo permiten determinar la
composicin de cristales y aleaciones inorgnicas muy bien ordenados ( a nivel atmico ).
Compuestos orgnicos slidos y ordenados se pueden caracterizar tambin.
-Espectroscopa de fotoelectrones ( XPS ) permite solo la identificacin de compuestos slidos
superficiales y necesita de ultra vaco.
-Espectroscopa de infrarojo ( FTIR ) permite analizar composicin qumica de slidos
orgnicos e inorgnicos pero requiere la preparacin de muestras muy delgadas para que sean
transparentes al IR.
-Fluorescencia de rayos-X permite solo un analisis por elemento de slidos, requiere de vaco y
proteccin para el operario
( debido a los rayos-x ).
Todas estas tcnicas mencionadas aqu tienen un valor de equipos similar o superior a
Espectroscopa Micro-Raman y esta ltima tiene las ventajas ya mencionadas.
Aplicaciones de Micro-Raman a Industria
Aparatos Electronicos-Semiconductores Esta tcnica es por excelencia usada en la
fabricacin de diamante sinttico ya que no hay otra tcnica capaz de identificarlo. Como es una
tcnica que posee una resolucin espacial de 1 m es ideal para determinar contaminacin de
contactos elctricos en circuitos impresos. Se usa tambien para determinar la composicin de
cermicas aisladoras usadas como diversos componentes de circuitos impresos.
Espectro Raman de Silicio tipo n
Industria Petroqumica La espectroscopa Raman fue introducida en esta industria hace mas
de 20 aos para resolver problemas de control de calidad en polmeros y emulsiones. Tambin
ayuda a resolver problemas de desactivacin de catalizadores o su contaminacin.
Espectro Raman de un pedazo de plato plstico de espuma

Aplicaciones Biomdicas El uso de la tcnica se ha destacado en el estudio de protenas y
estructuras polippticas en su estado fisiolgico natural. Variaciones de esta tcnica han sido
exitosamente usadas en la determinacin de colesterol, lpidos, inmunoglobulina, oligosacridos
y otras molculas biolgicamente activas.
Medio Ambiente La espectroscopa Raman ha sido usada para analizar compuestos orgnicos
o inorgnicos en suelos y aguas. Determinar su contaminacin por complejos metlicos, fenoles,
cidos poliorgnicos e hidrocarbones.
Espectro Raman de polvo de titanato de bario
Industria de Alimentos Esta tcnica se ha usado en la industria de alimentos (6) para
determinar la presencia de macro-componentes tales como protenas, lpidos, carbohidratos y
agua.
Espectro Raman de una fibra de servilleta de papel ( tpica de celulosa)

Si Ud. encuentra alguno de estos ejemplos similares a un problema especfico
de su actividad acdemica o industrial, llame al Prof. Alejandro Cabrera y disctalo
por telfono. Podemos realizar analisis gratis hasta probar que le son de utilidad!
Prof. Alejandro L. Cabrera
fono: 686-4478
secret.: 686-4499



Valladolid, 16-11-00


El profesor Fernando Rull estudia
el Patrimonio de Castilla y Len
mediante espectroscopa Raman
Esta tcnica, no destructiva, permite analizar
todo tipo de materiales, desde las piedras de
un monumento o un meteorito, hasta
pigmentos utilizados en miniaturas o
materiales biolgicos tiles para la Medicina
Fernando Rull: "El reto de la investigacin de
cualquier pas es ser capaces de desarrollar
tecnologa propia"
La Universidad de Valladolid presenta hoy un proyecto de investigacin
realizado por un equipo de cientficos de Mineraloga y Cristalografa, dirigidos
por el profesor Fernando Rull e integrados en el Departamento de Fsica de la
Materia Condensada de la Facultad de Ciencias.
Este proyecto, financiado por la Junta de Castilla y Len y la Comisin
Interministerial de Ciencia y Tecnologa, se comenz hace dos aos y medio, y
ha consistido en realizar un anlisis muy detallado de los materiales del
patrimonio de Castilla y Len. Concretamente, se han analizado los materiales
del Convento de La Peregrina, de Sahagn, las iglesias romnicas del Norte de
Palencia y la ermita de San Baudelio, de Soria.
La primera vez en el mundo que se estudia un Beato (cdice
miniado del siglo X) utilizando la espectroscopa Raman
La ltima fase de este proyecto de investigacin se est desarrollando en la
biblioteca histrica de la Universidad de Valladolid, situada en el Palacio de
Santa Cruz, y en ella se estn analizando diversos libros antiguos, de los
ejemplares incunables y raros que esta biblioteca posee: desde libros de ciencias
naturales con valiosas ilustraciones de elementos vegetales, hasta cantorales
litrgicos procedentes de iglesias, monasterios y conventos medievales.
De entre todos los libros que se estn estudiando, cabe destacar el Dioscrides
y, sobre todo, el ejemplar ms valioso de la Biblioteca Histrica, el Beato de
Valcabado, cdice miniado del siglo X, en el que se estn analizando a escala
microscpica la composicin de los pigmentos utilizados en las miniaturas con
las que se ilustr el Apocalipsis de San Juan. En este sentido, es de sealar que
es la primera vez en el mundo que un Beato se estudia con este tipo de
tecnologa.
La importancia de utilizar equipos "en miniatura" y
adaptados a las necesidades del entorno en que se encuentran
los materiales
Las ventajas de la espectroscopa Raman para estudiar todo tipo de materiales
son muy conocidas por cualquier investigador. Es una tcnica valiossima,
puesto que a su gran precisin aade el hecho de no ser destructiva, es decir, de
no daar los materiales que estudia. Se trata de combinar un microscopio con
un lser y as poder observar las vibraciones atmico-moleculares de cualquier
sustancia. En este sentido, la espectroscopa Raman se puede utilizar en un
amplsimo abanico de campos cientficos y tecnolgicos: desde la industria
(analizar todo tipo de materiales, desde el acero de la siderurgia hasta los
semiconductores utilizados en los dispositivos microelectrnicos) hasta la
arqueologa, pasando por la Medicina. En toda esta variedad de campos, el
equipo del profesor Rull ha estudiado muy diversos materiales, participando en
equipos internacionales de primer orden. As., en 1995, y en colaboracin con
una universidad britnica, analiz un fragmento de la piel del "hombre de los
Alpes", restos humanos de gran antigedad cuyo descubrimiento tuvo un gran
impacto en la comunidad cientfica relacionada con la Arqueologa y la
Antropologa.
Sin embargo, los equipos de espectroscopa Raman utilizados hasta ahora
tenan una cierta limitacin, su gran tamao, que les impeda ser tiles en el
estudio de determinados materiales. Por ejemplo, al estudiar la piedra de un
monumento histrico artstico, se poda extraer una muestra milimtrica y
desplazarla hasta el laboratorio para analizarla. Sin embargo, en los libros de
esta Biblioteca Histrica extraer cualquier muestra, por pequesima que fuera,
de cualquier libro, sera completamente inadmisible.
Para salvar este obstculo, este equipo de investigadores se puso a trabajar en el
desarrollo de tecnologa propia. "ste es el principal reto de la investigacin
cientfica en cualquier pas, ser capaces de desarrollar tecnologa propia y no
depender siempre de tecnologa extranjera, que encarece mucho la actividad
cientfica".
Concretamente, para este proyecto el equipo dirigido por Fernando Rull ha
logrado unas fibras pticas entre diez y veinte veces ms finas que las que se
pueden encontrar en el mercado. Con estas fibras de hasta siete micras de
espesor, logran un lser de bajsima potencia que garantiza que no se daarn
en absoluto los materiales analizados. Asimismo, se ha incorporado al equipo
de espectroscopa una cmara que permite analizar los libros grandes que no se
podran introducir en el portamuestras del microscopio.
En cuanto al equipo que estn utilizando, est cedido por una de las empresas
ms importantes del mundo en este terreno, la Kaiser Optical Systems. Esta
cesin ha sido posible gracias a la participacin de este grupo del profesor Rull
en equipos internacionales que estn desarrollando otros proyectos con esta
empresa.
ESPECTROSCOPIA
Se aplica Energa a una muestra, con ello se provocan perturbaciones que estudiamos. Las
diferentes tcnicas emplean diferente Energa y provocan diferentes perturbaciones.
Ley de Planck:
AE = hv
h: constante de Planck.
Hay dos tipos de espectroscopia:
- Absorcin: Se mide la energa que absorbe la muestra para efectuar cambios en su
estructura, la energa absorbida est directamente relacionada con las modificaciones
efectuadas.
- Emisin: Se mide la energa emitida por una muestra al pasar sta a un estado de
menor contenido energtico.
ESPECTROSCOPIA DE MASAS
1. Consiste en aportar la energa suficiente para fragmentar e ionizar las molculas, despus se
aceleran los fragmentos a gran velocidad, en funcin de
su masa se separan en el espacio y llegan por separado a un detector de masa.
2. Se utiliza un haz de electrones para romper las molculas. Normalmente se aplica una diferencia de
potencial de 70 eV.
3. En la cmara de ionizacin se trabaja a presiones muy bajas, de 10
-7
mmHg, las reacciones que se
dan son intramoleculares.
4. Puede ocurrir que algunas molculas no se rompan, que slo pierdan un
electrn, se forma un radical positivo, llegan enteras al detector y dan lugar al
PICO MOLECULAR. No todos los compuestos dan pico molecular.
Despus del Pico Molecular (M
+
) pueden aparecer otros picos (M
+
+ 1; M
+
+
2), son debidos a la existencia de istopos.
5. El espectro de Masas recoge todos los fragmentos y da una serie de picos en funcin de su relacin
masa / carga (m/c m/z).
6. En ordenadas aparece la abundancia relativa. Los fragmentos son ms abundantes cuanto ms
estables son.
El PICO BASE es el ms representativo del espectro, es el ms abundante de todos, el
espectrmetro le da una abundancia de 100%. Corresponde con el fragmento ms estable.
ESPECTROSCOPIA DE INFRARROJO
1. Se trata de una tcnica de espectroscopa de absorcin. (E = hv).
2. IR>UV EIR<EUV v=l/ (cm
-1
) v=4000-670 cm
-1
3. Modificaciones que se producen en la molcula: movimentos de los enlaces (tensiones,
vibraciones, alargamientos, modificacin de ngulos, rotaciones...). Para cada movimiento o tipo
de enlace se requiere una energa muy concreta.
4. Cada molcula orgnica tiene un espectro de IR caracterstico, sirve para identificar el
compuesto, es como su huella dactilar.
Tambin proporciona informacin sobre grupos funcionales que existen en la molcula.
5. TRANSMITANCIA (T)= I/I0 %T = I/I0 x 100
Absorcin nula (I = I0):T=1. Absorcin total (I=0): T=0.
Transmitancia: valores entre 0 y 1.
6. La intensidad de la absorcin depende de:
la repeticin de un grupo concreto
la polaridad del enlace; el ms polarizado da mayor intensidad en la absorcin (p. ej. C=O;
C-O...)
f: absorcin fuerte; m: absorcin media; d: absorcin dbil.
7. El espectro se puede hacer con muestras gaseosas, lquidas o slidas.
Lquido o aceite: se extiende la muestra sobre una pastilla de NaCl (transparente a la luz IR)
Slido: Se mezcla con KBr (transparente a la luz IR) y se hace una pastilla por presin sobre
la mezcla en polvo para que se compacte.
8. Los movimientos que se producen se pueden agrupar:
De TENSION (se modifica la longitud del enlace tambin llamados vibraciones de
alargamiento y elongacin.)
* Simple (slo afecta a un enlace).
* Complejo (movimientos coordinados de ms de dos

tomos):
a) Simtrico (los dos enlaces tienen la misma direccin de alargamiento, se
acercan o se alejan a la vez).
b) Asimtrico (los dos enlaces tienen distinta direccin en la tensin,
mientras uno se acorta, el otro se estira y viceversa). Por ejemplo, las dos
bandas de absorcin caractersticas de los enlaces C-O para el grupo
ster, no son debidas a la existencia de dos enlaces, sino por movimientos
de tensin complejos (simtricos y asimtricos).
De FLEXION (modificaciones en el ngulo del enlace), pueden ser en el plano o fuera del
plano.
*En el plano:
a) Flexin de Tijera: Los enlaces se acercan y se alejan se modifica el
ngulo y .
b) Balanceo: Los enlaces se mueven al mismo lado, se modifica el
ngulo .
*Fuera del plano:
a) Abanico: Los dos enlaces salen o entran del plano a la vez.
b) Vibraciones de Torsin: Uno entra y otro sale del plano.
9. Sobretonos. (Flecos aromticos) Pequeas absorciones caractersticas del anillo aromtico que
se obserban de 1700 a 2000 cm
-1
.
ESPECTROSCOPIA ULTRAVIOLETA-VISIBLE (U.V.-VISIBLE)
1. Es una tcnica de espectroscopa de absorcin.
2. Longitudes de onda que se utilizan: 750-200 nm. (situadas en la zona del ultravioleta visible).
3. Se producen transiciones de electrones desde niveles energticos bajos a niveles ms altos.
Transiciones entre un orbital enlazante o un par de electrones libres y otro orbital incompleto
antienlazante.
4. Se miden absorciones por encima de 200 nm., que corresponden a las transiciones: n *
*
n *
(en molculas con insaturaciones o tomos con pares de electrones libres).
5. En el espectro de U.V. normalmente slo se aprecian 2-3 grandes bandas.
6. Las bandas son anchas porque los electrones pueden tener muchos niveles energticos
dependiendo del entorno (vibraciones y/o rotaciones), de manera que lo que se suele representar
como un nivel energtico en realidad son muchos subniveles y son posibles todas las transiciones. El
espectmetro recoge todas estas pequeas variaciones de absorcin y da una banda ancha. No se
da el valor del intervalo sino de la mxima.
7. TRANSMITANCIA (T) = I/I0 ABSORBANCIA (A) = log 1/ T = log I/I0
8. El U.V. se utiliza como sistema de deteccin de compuestos orgnicos en procesos
cromatogrficos. Para ello se pasa por el espectmetro de U.V. la disolucin que sale del
cromatgrafo, en el momento que sale prducto se detecta la absorcin que ste produce.
ESPECTROSCOPIA DE RESONANCIA MAGNETICO NUCLEAR
DE PROTON (RMN
1
H)
1. Radiacin electromgntica: en la zona de las ondas de radio.
2. Momento angular (j): es funcin del nmero cuntico SPIN(I), que depende del nmero de
protones y neutrones del ncleo.
3. Los nucleosde H absorben porque tienen nmero cuntico de Spin distinto de 0, otros ncleos
tambin absorben, todos los que tengan un nmero cuntico igual a n /2 siendo n un nmero
entero, por ejemplo
13
C,
31
P.
4. El ncleo de un tomo de H es en realidad la unidad de carga positiva que est en continuo
movimiento, es un nucleo con spin. Se comporta como si la carga girase sobre s misma a alta
velocidad generando un campo magntico.
5. Si colocamos el compuesto en presencia de un campo magntico exterior puede ocurrir que
cada H oriente su propio campo magntico a favor o en contra del campo exterior, estas dos
situaciones tienen distinto contenido energtico. Esta diferencia en el contenido energtico
depende de la intensidad de campo exterior.
Se puede suministrar la energa suficiente para que el nucleo de H pase al estado energtico
superior, se invierte as el spin del H
+
6. Para realizar el espectro se coloca la muestra en un campo magntico constante y se aporta
energa suficiente para invertir el spin de los protones mediante irradiacin electromagntica
variable.
Se puede ir modificando la v de la radiacin que se suministra manteniendo constante la
Intensidad del campo magntico (H
0
) donde se coloca la muestra o viceversa (modificar la H
0
manteniendo constante la v del campo donde se coloca la muestra). Esto ltimo es lo que se
suele hacer.
7. E = hv E (para provocar el cambio) = k H
0
.
8. En una molcula orgnica hay distintos tipos de H segn el entorno, cada H ve el campo
externo segn los alrededores que soporta. Se habla de apantallamiento desapantallamiento
de los grupos que rodean al H. Es debido a que los electrones tambin generan pequeos
campos magnticos (campo inducido) que se pueden sumar (desprotegen el H,
desapantallamiento) o no al campo exterior (protegen el H, apantallamiento). Esto significa que
cada tipo de H, en funcin de su entorno, va a absorber a distinto campo.
9. Las uniones del carbono (sobre el que estn los Hidrgenos) a N, O, C=O, Aromtico,...
(grupos electroatrayentes) desplazan las seales de los Hidrgenos a campo bajo (nmero de
alto).
10. Se utiliza tetrametilsilano (TMS) como referencia para colocar el punto cero del campo, el Si es
menos electronegativo que el C, los H del TMS estn claramente protegidos (apantallados), el
resto de las molculas tienen los H menos protegidos y salen a campo ms bajo, a ms alta.
11. El corrimiento Qumico se mide en ciclos / seg. (Herz). Para que sean independientes de la
intensidad del campo aplicado se expresan en (ppm).
H (campo magntico local) = H
0
(1-). = constante de apantallamiento.
= Q (incremento del desplazamiento qumico)/v x 10
6
(: entre 0 y 12).
= desplazamiento qumico en Hertz 10
6
/ frecuencia del aparato 10
6
12. El rea bajo los picos de las seales es proporcional al nmero de H que ha generado la seal, el
espectofotmetro da una curva de integracin, cuya altura es proporcional al rea.
13. Enantimeros: son compuestos distintos pero los H salen iguales en la RMN, se llaman Protones
ENANTIOTOPICOS.
Diastermeros: son compuestos distintos, los H son distintos y salen como seales distintas en
RMN, aunque muy parecidas, se llaman Protones DIASTEROTOPICOS.
14. La presencia de otros H en los alrededores influye por la presencia de los campos
magnticos de dichos H. Las seales se desdoblan en funcin del nmero de H de los
alrededores (MULTIPLICIDAD).
15. El pequeo corrimiento qumico que hay entre los distintos picos de una seal mltiple se llama
constante de acoplamiento (J) y es el mismo para las seales acopladas entre s. La J
depende de la distancia que hay entre los H acoplados y del ngulo diedro que forman los
planos correspondientes. No depende del campo externo aplicado (Ho), ni de la v del aparato.
16. Las seales mltiples no son simtricas, estn "mirando" hacia la seal con la que estn
acopladas.
17. Si se irradia sobre la muestra la E necesaria para invertir el spn de un
determinado tipo de H se simplifica la seal de esos H y tambin la de los H acoplados con
ellos, se simplifica el espectro, esta tcnica se llama de Doble Resonancia.
18. Los hidrgenos unidos O y N (alcohol, cido, amna, amida) salen
generalmente como seales anchas, son facilmente intercambiables por deuterio (D) con
lo que desaparecen del espectro cuando este se realiza en D2O (agua deuterada).
RMN DE
13
C
1. Slo un 1,1% de los C son
13
C, el resto es
12
C. La posibilidad de que dos
13
C estn en la misma
molcula es baja, y menos an en posiciones contiguas por lo que no se acoplan entre s. Aunque
s pueden acoplarse con los R sustituidos sobre el C, este acoplamiento puede verse o no a
voluntad. Este acoplamiento es similar al de RMN de
1
H, si un carbono tiene 3 R sustituidos sobre
l aparece como cuadruplete, si tiene 2 como triplete, si tiene 1 como doblete y si no tiene ninguno
como singlete.
2. Los corrimientos qumicos en el
13
C estn entre 0 y 220 ppm.
3. Sale una seal por cada tipo de C, es un espectro ms sencillo que el de protn.
APLICACIN DE LA ESPECTROSCOPA
DE ABSORCIN MOLECULAR UV-VIS
1. Especies absorbentes
2. Aplicaciones de las medidas de absorcin al anlisis cualitativo y al anlisis cuantitativo.
3. Espectroscopia fotoacstica.
1. Especies absorbentes
La absorcin de radiacin ultravioleta o visible por una especie atmica o molecular M se puede
considerar que es un proceso en dos etapas, la primera de las cuales implica una excitacin electrnica
como muestra la ecuacin
M + h M*
El producto de la reaccin entre M y el fotn es una especie electrnicamente excitada que se
representa por M*. El tiempo de vida de la especie excitada es breve (de 10
-8
a 10
-9
s) su existencia
acaba por alguno de los diversos procesos de relajacin. Hay varias formas de volver al estado
fundamental:
- Disipa energa en forma de calor.
- Emite algn tipo de radiacin(puede ser de la misma frecuencia)
La cantidad de energa trmica desprendida por relajacin es por lo general no detectable.
La disolucin queda prcticamente inalterada por el paso de la radiacin. Cuando vuelve al
estado fundamental emitiendo radiacin tienen fenmenos de fluorescencia o fosforescencia. Son una
forma de emisin en que la excitacin se ha dado por radiacin electromagntica. Cuando la excitacin se
da por calentamiento electrotrmico, emite radiacin y se habla de emisin.
En las producciones de absorcin medimos radiacin que proviene de la fuente y al ser
absorbida en parte por la especie a analizar puede potenciar y medimos la diferencia de potencia con
que incidir.
En emisin se mide lo que emite la propia sustancia. Son tcnicas diferentes. Segn la
naturaleza de la especie, son los electrones que forman el enlace los excitados a nivel de energa
mayores y los responsables de que se absorba radiacin en una longitud de onda determinada. Con
establecer una relacin entre la especie y longitud de onda que presente una sustancia puede
identificarla, se hace con fines cualitativos. La espectroscopia de absorcin molecular es por tanto valiosa
para identificar grupos funcionales de una molcula. Sin embargo, son ms importantes las aplicaciones
de espectroscopia de absorcin de ultravioleta y visible para la determinacin cuantitativa de compuestos
que contienen grupos absorbentes.
En las transiciones electrnicas pueden estar implicados diferentes electrones. Esos pueden ser:
1. Electrones , y n
2. Electrones d y f
3. Electrones de transferencia de carga (complejos metlicos fundamentalmente)
Electrones , y n
Fundamentalmente molculas e iones orgnicos. Tambin hay aniones inorgnicos que
corresponden a este tipo de absorcin.
Las energas de excitacin estn asociadas a los electrones que formen enlaces sencillos. Las
energas de enlaces sencillos son mayores y las transiciones estn restringidas a la radiacin UV de
vaco.
En el enlace sencillo la diferencia de energa es bastante grande y la longitud de onda que
absorbe son pequeas: UV de vaco (UV muy lejano) los componentes de la atmsfera son capaces de
absorberla < 185 nm. La absorcin de UV-Vis de longitud de onda larga se restringe a un nmero
limitado de grupos funcionales, llamados cromforos, que contienen los electrones de valencia con
energas de excitacin relativamente bajas.
Los espectros electrnicos de molculas orgnicas que contienen cromforos son normalmente
complejos, ya que la superposicin de transiciones vibracionales sobre las transiciones electrnicas da
lugar a una combinacin compleja de lneas solapadas; el resultado es una banda ancha de absorcin
que a menudo parece continua (hay energas de trnsitos de electrones y energas de vibracin de las
molculas. Salen bandas de absorcin). Es prcticamente imposible un anlisis terico detallado. Tiene
ms utilidad un anlisis cuantitativo.
Tipos de electrones absorbentes: electrones de orbitales enlazantes y electrones orbitales no
enlazantes.
Los primeros son aquellos que participan directamente en la formacin del enlace entre tomos
y que estn adems asociados a ms de un tomo. Los segundos son los electrones de no enlazantes o
externos que no participan y que estn localizados alrededor de tomos como el oxgeno, los halgenos,
el azufre y el nitrgeno.
Dentro de los enlazantes, por la teora de orbitales moleculares, cuando se superponen dos
orbitales se forma enlace y llamamos a esos electrones de enlace, electrones . Tenemos un orbital
enlazante de baja energa y otro * de mayor energa.
Figura 8.1 No hay posibilidad de encerrar entre los dos ncleos, es el caso antienlazante. El
doble enlace en una molcula orgnica contiene dos tipos de orbitales moleculares; un orbital
sigma correspondiente a un par de electrones enlazantes y un orbital molecular pi
asociado al otro par. Los orbitales pi se forman por la superposicin paralela de orbitales
atmicos p. Hay dos posibilidades de energas, una enlazante de menor energa y otra
antienlazantes con una distribucin electrnica distinta de mayor energa.
Adems de estos electrones muchos compuestos orgnicos contienen electrones no enlazantes.
Estos electrones que no participan se designan con el smbolo n.
La figura 8.3 es un diagrama energtico en el cual tenemos los niveles de energa. El ms bajo
, , n, *, *.
Hay distintos tipos de transicin:
a) *
Son las de mayor energa. Este tipo de transicin se corresponde con enlaces sencillos (enlaces se
encuentra en el ultravioleta vaco, requiere gran cantidad de energa, longitud de onda pequea.
Ejemplo: CH4 : 135 nm, CH3CH3 :135 nm. No los puedo detectar por espectroscopia molecular
(aqu no se puede utilizar la absorcin molecular).
b) n*
Se utilizan poco en absorcin molecular. Participa los electrones no enlazantes se da en molculas
con heterotomos de gran electronegatividad. Tabla 8.1, se requiere menos energa que en la anterior
y puede producirse la transicin por radiacin entre 150-250. Nos movemos a longitudes de ondas
un poco ms altas y algunas especies las vamos a poder medir.
El agua absorbe a 167 nm y no interfiere para nada a medidas de disoluciones acuosas. Un hecho
curioso es que si combinamos un complejo..... disolvente a otro, hay un desplazamiento de los picos a
ms cortas para la interaccin que puede haber entre el disolvente y la especie a determinar, como
*
*
*
*

n
n
solvatacin de iones por el disolvente. La solvatacin de los electrones n hace que se desplacen las
longitudes de onda (pocas decenas de nm). As pues, se desplazar a longitudes de ondas menores
cuando aumente la polaridad del disolvente.
c) n* y *
La mayora de las aplicaciones de esta espectroscopa se basan en este tipo de transiciones debido a que
las energas requeridas para ellas nos dan picos dentreo de la zona 200-700 nm. Ambas transiciones
requieren la presencia de dobles o triples enlaces, es decir, de orbitales . A estos grupos con enlaces
insaturados se le aplica el trmino cromforo.
Diferencia entre estas dos transiciones:
n* sigue bajas en cambio * posee muy altas. Las determinaciones basadas en ellas son
ms sensibles y nos dan limites de deteccin ms bajos.
Estudiemos el efecto que tiene el disolvente sobre estos dos tipos de transiciones:
n* Si cambiamos el disolvente por otro ms polar observamos un desplazamiento de los picos hacia
longitudes de ondas ms cortas, es decir nos a cercamos al AZUL.
* Ocurre lo contrario. Ahora el desplazamiento es hacia el ROJO o hacia longitudes de onda ms
largas cuando el disolvente sea ms polar.
La explicacin sera pensar que en n* el responsable en general es el electrn n, as el
solvatamiento de estos electrones n disminuyen su energa y esto ser ms acusado en disolventes
que formen puentes de hidrgeno(efecto que predomina). Sin embargo * esta basada en las
fuerzas atractivas entre disolvente y absorbente, ambos estados energticos disminuyen, pero ms el
excitado. Por eso hay un desplazamiento hacia el rojo.
Cromforos orgnicos
Fig 8.2 Se determina grupos funcionales, no se cumple estrictamente sirve como gua, porque
puede haber desplazamientos segn el disolvente, y segn el resto de la molcula(su estructura).
Efecto de la conjugacin de cromforos
Hay mayor deslocalizacin de los electrones, orbitales moleculares y se pueden asignar a ms
tomos. Tiende a rebajar el nivel de *, tiene un carcter antienlazante menor. Los mximos de absorcin
se desplazan a longitudes de onda mayor.
Fig 8.3 Diagrama de energa. Pasamos de un enlace doble enlace a dos, y se hace el doble,
las capacidades de absorcin son aditivas. Si los dos dobles enlaces son conjugados, aumenta la longitud
de onda, produciendose un desplazamiento hacia el rojo.
Hay otro tipo de grupos que sin ser responsables del color, refuerzan a los cromforos, son los
auxocromos.
Tabla 8.4 Compuestos derivados la mayora del benceno. Llevan pares de electrones no
enlazantes OH y NH2 la longitud de onda se desplaza algo, pero sobre todo se da un aumento del
coeficiente de absorcin molar.
Absorcin por iones inorgnicos.
Se lleva a cabo por transiciones n*. Un ejemplo es:
NO3
-
313 nm
CO3
-
417 nm
NO2
-
360 / 280 nm
Azida 230 nm
tritiocarbonato 500 nm
Absorcin que implican electrones d y f
Para las series de lantnidos y actnidos, los procesos de absorcin resultan de transiciones
electrnicas de electrones 4f y 5f, para los elementos de la primera y segunda serie de los metales de
transicin, los responsables son los electrones 3d y 4d.
# Absorcin por iones lantnidos y actnidos.
En contraste con el comportamiento de la mayora de los absorbentes inorgnicos y orgnicos,
sus espectros consisten en piscos de absorcin estrechos, bien definidos y caractersticos, que estn
poco afectados por el tipo de ligando asociado con el ion metlico. En la figura 8.4 se muestra una porcin
de un espectro tpico. Estos orbitales internos estn muy apantallados de las influencias externas por
orbitales ocupados por electrones con nmeros cunticos principales superiores. En consecuencia, las
bandas son estrechas y estn poco afectadas por la naturaleza del disolvente o por especies enlazadas
con los electrones externos.
# Absorcin por elementos de la primera y segunda serie de metales de transicin.
Los responsables de las transiciones son los 3d para la 1 serie y los 4d para la 2.
Fig 8.5 Espectros de absorcin de algunos iones de metales de transicin.
Estn fuertemente influidos por factores qumicos del entorno (disolventes o especies complejantes).
Los metales de transicin tienen cinco orbitales d parcialmente ocupados, cada uno de ellos
capaz de acomodar un par de electrones. Estos electrones no participan en los enlaces, no obstante,
est claro que las caractersticas espectrales de los metales de transicin implican transiciones
electrnicas entre los diversos niveles de energa de estos orbitales d. La absorcin se debe a
transiciones e- que se explican por la teora del campo de ligandos. Se basan en la premisa de que las
energas de los orbitales d de los iones en solucin no son idnticas y que la absorcin implica la
transicin de electrones desde un orbital d de baja energa a uno de energa superior.
Fig 8.6 Distribucin de densidad electrnica en varios orbitales d. Los ejes x, y, z son los ejes
enlazantes (continuo). Los discontinuos son los antienlazantes. Diferencia arriba-abajo: en los de arriba, la
distribucin de densidad electrnica est alrededor de la lnea punteada (discontinuo), o sea en ejes
antienlazantes. Abajo est alrededor de los ejes enlazantes.
La teora campo de los ligandos dice que en el momento en que se acerca un ligando (que
aporta electrones) al catin, se aproxima por los ejes enlazantes, y la interaccin entre l ligando y los
orbitales del catin metlico ser distinta. Ser mayor con los orbitales que tengan mxima densidad
electrnica en ejes enlazantes.
Fig 8.7 efecto del campo ligando en las energas de los orbitales d.
l ser mayor o menor segn sea l ligando y condiciona la longitud de onda a la que
encontraremos el mximo. Esta figura es cuando un catin metlico se rodea de seis ligandos: se produce
un desdoblamiento al aproximarse al ligando, y es posible que pueda pasar de un nivel a otro absorbiendo
la radiacin.
La depende de varios factores: fuerza de campo de ligando, una medida de la extensin con
que un grupo complejante desdoblar la energa de los electrones d, esto es, un agente complejante con
una fuerza de campo ligando alta provocara un grande.
Se puede ordenar los ligandos en orden creciente segn la fuerza del campo ligando. Podemos
establecer el orden:
I- < Br- < Cl- < F- < OH- < C2O4
-
< H2O < SCN- < NH3 <etilendiamina< o-fenantrolina <
NO2- <CN-
Este orden sirve para todos los metales de transicin, permitiendo una aproximacin cualitativa sobre la
posicin del pico en el espectro.
Absorcin por transferencia de carga.
Las especies que la presentan son especiales, sus absortividades molares son muy elevadas.
Son complejos metlicos que suministran unos medios de gran sensibilidad para la deteccin de especies
absorbentes. EJ: Fe con SCN-, Fe con o-fenentrolina y complejos ferrocianuro con colores intensos:
Fe(CN)63-. Se usan con frecuencia para determinar Fe, es muy sensible.
Para que un complejo presente un espectro de este tipo, es necesario que uno de sus componentes
tenga caractersticas de dador de electrones y el otro componente tenga propiedades de aceptor. La
absorcin de la radiacin implica entonces la transferencia de un electrn desde el dador hasta un orbital
que est muy asociado con el aceptor. En consecuencia, el estado excitado es el producto de un tipo de
proceso de oxidacin/reduccin interno.
2. Aplicacin de las medidas de absorcin
Dos tipos, cualitativo y cuantitativo.
Cualitativo.
La espectrofotometra uv-vis tiene una aplicacin algo limitada para el anlisis cualitativo. Las
consideracines que se tienen que hacer al elegir un disolvente no son slo respecto a su transparencia,
sino tambin respecto a sus posibles efectos sobre el sistema absorbente. Fig 8.8 vemmos el efecto del
disolvente sobre el acetaldehido, as que hay que tener en cuenta que con los disolventes polares
tenemos menos detalles que con los apolares. Los ms comunes para el uv son agua, etanol, ciclohexano
y dioxano. Par vis cualquier incoloro es til.
En muchos casos se usa para detectar grupos funcionales (ms que para determinar especies),
pero no es la tcnica ideal para hacerlo de forma completa, si tenemos una banda dbil a cercana 280
nm que se desplaza a ms cortas cuando cambiamos el disolvente por otro ms polar afirmamos que
tenemos un grupo carbonilo, una banda a 260 nm, muestra la presencia de un anillo aromtico y presenta
una estructura vibracional fina (muchos picos).
La confirmacin de la presencia de una amina aromtica o de una estructura fenlica puede obtenrse
comparando los efectos del pH en los espectros de disoluciones que contienen la muestra con los que se
indican en la tabla para el fenol y la anilina.
Cuantitativo
Aplicacin a la determinacin de grupos funcionales en compuestos orgnicos.
carbonilo, carboxilo, amida, dobles enlaces y conjugados.
Determinacin de metales por complejacin: los espectrofotmetros se usan hoy mucho para
esto. Se forma el complejo correspondiente y presentan bandas de absorcin. Esto va acompaado de
un proceso de extraccin. Tenemos una mezcla con tres o cuatro metales y le aadimos agentes
complejantes y para separarlos se usa la extraccin lquido-lquido. Tambin puedo aadir agentes
enmascarantes. Estas tcnicas de extraccin controlando el pH permiten una separacin y una
reconcentracin.
La espectrofotometra tambin puede aplicarse a especies no absorbentes (de forma indirecta):
la especie A reacciona con B (si es absorbente) y se determina la especie resultante.
Otra aplicacin es con aminas que no absorben, se hace la rextraccin (contrario a extraccin). Se hace
una reaccin de intercambio de ligando; se agita y viendo la preferencia de un ion u otro se forma un
complejo u otro, vindose el color.
Al hacer una determinacin cuantitativa hay que seleccionar y para ello se hace un barrido y se
elige un pico de absorcin (mximo); ser ms sensible. Otra razn es porque los monocromadores se
desajustan con cierta facilidad.
Otra variable que influye en absorcin es la naturaleza del disolvente, pH, presencia de
electrolitos, y presencia de sustancias interferentes.
Otro aspecto importante es la limpieza y manipulacin de las cubetas; han de ser transparentes y
limpias. Hay dos partes esmeriladas (se cogen por ah) y dos no esmeriladas, se limpian con disolventes
especficos.
Para pasar de absorbancia a concentracin, se hace mediante curva de calibrado hecha con una
serie de patrones que contengan el analito que yo quiero, y los patrones deben ser lo ms parecido
posible a la naturaleza de la muestra. Se tiende a utilizar como patrones agua destilada, a veces no sirve.
EJ: Cu en agua de mar, le echo un complejante, pero puede que no se vea por interferencia o
porque hay muy poco, lo que se hace es una extraccin lquido-lquido los patrones los hago con sales
como agua de mar, y les realizo tambin una extraccin (deben sufrir los mismos procesos que la
muestra).
Hay veces que conseguir una matriz igual es prcticamente imposible, por lo que se emplea el
mtodo de adicin estndar. Supone trabajar con cuatro patrones. De la muestra original (orina) cojo
cinco alcuotas exactamente iguales. Si quiero ver un compuesto orgnico en la orina, compro esa
sustancia pura.
1 Alicuota; nada
2 Alicuota; concentracin mnima
3 Alicuota; siguiente concentracin
4 Alicuota; siguiente concentracin
5 Alicuota; siguiente concentracin
Voy al aparato con las 5 muestras y mido la absorbancia.
Abs
Concentracion aadida

Se usa en espectrofotometra molecular y en espectroscopa atmica (aunque con algunas pegas).
Anlisis de mezclas de sustancias absorbentes
Espectro de absorcin de una mezcla de dos componentes.
Trazo punteado; suma de las dos sustancias que sera lo que yo obtendra. Trabajo con la curva
punteada; cojo los dos mximos y se ve la Abs a cada. Dos ecuaciones con dos incgnitas. Si tengo
mezcla de tres sustancias, cojo tres picos. Cuantas ms tenga, ms indeterminaciones voy a tener y ms
complejo ser (para ms de dos sustancias ya es complejo). Hay sistemas informticos preparados ya
que reducen las incgnitas.
Espectrofotrometra derivada y de dual
Fig 8.11 En cada monocromador, selecciono una diferente. Vamos a medir una sola especie,
pero con un aparato especial, lo irradiamos con dos diferentes. El cortador segn est, pasa a 1 o 2
alternativamente.
Fig 8.12 Se hace una tabla, hallando los incrementos de T y .
Valoraciones fotomtricas
La diferencia es que no utilizamos el ojo humano en la valoreacin, sino un espectrofotmetro.
La cubeta en un diseo especial, se puede ir haciendo la valoracin en ella, en vez de en un vaso de
precipitado, un mtodo es por fibra ptica que va una al vaso de valoracin y otra al detector.
Fig 8.14 Metal absorbe o la especie a valorar, o el valorante, o el producto de la reaccin, si
absorbe ms de uno es ms complicado.
1 curva. Ni absorbe A ni C, cuando aparece B sin reaccionar, porque se haya agotado A, empieza a
aumentar Abs.
2 curva. Es C lo que va a absorber. Se va formando C, va aumentando, y cuando llega al punto equilibrio
que ya se agota A y no aparece ms C se para.
3 curva. La sustancia problema es la que absorbe A, va desapareciendo hasta el punto de equilibrio.
3. ESPECTROSCOPA FOTOACSTICA
Surge en los aos setenta. Ponemos un micrfono muy sensible. Con ella es posible el anlisis
de slidos, semislidos y lquidos turbios. Se basa en el efecto fotoacsitco ([Link]). Si se llena una celda
cerrada con un gas y se irradia con un haz de radiacin intermitente a longitud de onda que es absorbida
por el gas, se dan pequeos calentamientos intermitentes que dan lugar a fluctuaciones regulares de
presin, que pueden ser detectados por un micrfono.
Especie ms , estado excitado.
Meto el slido que absorbe en una cmara, y lo rodeo de un gas que no absorbe. Emite en forma
de calor y la presin del gas, si es sensible a la diferencia de calor, esos pulsos de presin los detectos
con un micrfono especial.
Introduccin a la Espectroscopia
de Absorcin Molecular UV-Vis e IR Cercano
Contenido:
Introduccin
Transmitancia, absorbancia y absortividad
Ley de Beer: aplicaciones y limitaciones
Efecto del ruido Instrumental, de la anchura de rendija y de la radiacin dispersada
Instrumentos
1. Introduccin
En los aos sesenta y setenta proliferan esta tcnica que fue a continuacin de la colorimetria.
En esta dcada se hacan anlisis de sustancias inorgnicas. Fundamentalmente se determinaban
metales a nivel de traza. Combinado esta espectroscopia con la extraccin liquido-liquido se consegua
determinaciones. Tambin s amplio al anlisis de sustancias inorgnicas y orgnicas con preparacin de
la muestra, que es un mecanismo inverso.
En los aos ochenta aparece la absorcin atmica que permite limites de deteccin mas bajo, es
decir, es ms sensible que la molecular.
Actualmente ha habido un resurgir de la molecular para compuestos orgnicos. Se aplica para
temas de contaminacin y en la industria farmacutica. Va acompaado de la estadstica para los casos
complejos. Hoy en da tambin se emplean en compuestos orgnicos.
2. Trasmitancia, absorbancia y absortividad
Supongamos un haz de radiacin electromagntica de potencia P0 que lo hacemos incidir en una
especie absorbente, parte de la radiacin es absorbida el resto se trasmite con una potencia P.
Se define la trasmitancia(%):
Se define la absorbancia:
La absorbancia esta relacionada con el recorrido de la radiacin, con la concentracin de la especie y con
la naturaleza del absorbente. Por tanto se puede relacionar mediante la ley de Beer:
a Constante de proporcionalidad. Distinta para cada especie absorbente, depende de la
naturaleza del absorbente. A esta constante se le denomina Absortividad.
b Camino recorrido.
c Concentracin.
Cuando la concentracin se expresa en moles/l, la absortividad se expresa en lmol
-1
cm
-1
.
Generalmente se trabaja en disolucin y se necesita una cubeta que sea trasparente a la
radiacin incidente. Normalmente se pierde potencia por problemas de reflexin y dispersin. Se suele
hacer una medida que contiene solo el disolvente. Se hace el ajuste de la corriente oscura(0%T) y
despus la medida del blanco(100%T).
3. Ley de Beer: aplicaciones y limitaciones
La ley de Beer queda de esta manera:
La ley de Beer no se cumple para todas las concentraciones ya que la absortividad se determina
experimentalmente. El recorrido b suele ser de un centmetro.
La longitud de onda con la que se va a trabajar se fija en el espectrofotometro y con ella fija se
trabaja con la ley de Lambert-Beer. Esta ley tambin se puede aplicar a mezclas, con la diferencia que se
suman las absorbancias parciales de cada mezcla, trabajando cada una de ellas a una longitud de onda
determinada.
3.1 Limitaciones de la Aplicabilidad de le ley de Beer
Existen limitaciones entre la relacin lineal entre la absorbancia y la concentracin. Esta relacin
es lineal si se trabaja a concentraciones inferiores a 10
-2
M. Si aumentamos la concentracin se pone de
manifiesto las interacciones de atraccin y repulsin dentro del analito, modificando la capacidad de
absorber una longitud de onda. Tambin existen limitaciones cuando existe presencia de sales en la
disolucin(efecto salino).
Podemos hablar de dos tipos de desviaciones, las qumicas y las instrumentales.
Desviaciones qumicas. Se producen cuando el analito reacciona con el disolvente.
Ejercicio. La absortividad molar a 430 y 570 nm de un cido dbil HIn con Ka=142
10
-5
y de su base conjugada In
-
se determina midiendo disoluciones de indicador
fuertemente cido y bsico(todo el Indicador estar en la forma Hin e In
-
respectivamente). Los resultados fueron:
T
P
P
(%)
0
100
A T
P
P
log log
0
A abc
A bc
A A A A A
bc bc bc bc
total n
n n
+ + + +
+ + + +
1 2 3
1 1 2 2 3 3
..........
...........
430 570
Hin
63 10
2
712 10
3
In
-
206 10
4
961 10
2
Obtener los datos de absorbancia para concentraciones totales dentro del intervalo 2 10
-5
M a
16 10
-5
M.
Desviacin instrumental con radiaciones policromaticas. El cumplimiento estricto de la ley de
Beer solo se observa con radiaciones monocromticas. Existen una serie de problemas con la
instrumentacin, no es posible la obtencin de radiacin monocromtica pura. Suponemos un
haz formado por solo dos longitudes de ondas. y .
De forma anloga para se obtiene:
As se obtiene la absorbancia referida a las dos longitudes de ondas:
Si conseguimos que = la ecuacin anterior se nos simplificara hasta la ley de Beer(A=bc).
Es decir, es la condicin para que se cumpla dicha ley.
4. Efecto del ruido instrumental sobre el analito
La precisin y exactitud vienen controlado por la incertidumbre y ruido del aparato. Cada
etapa en el proceso de la medicin de la trasmitancia(que son tres) va aportar un nivel de ruido. El
ruido total es la suma de estos tres ruidos parciales.
Relacin entre ruido y la desviacin estndar.
Y para un conjunto de datos:
Efecto de la anchura de rendija. Va a depender del tipo de problema a resolver, si se trata de un
espectro complejo, con mltiples, longitudes de onda tendremos que trabajar con banda estrecha. Al
utilizar bandas anchas perdemos detalles. Existe una anchura mnima, determinada que se determina
experimentalmente.


' ' log
'
'
'
'
' '
' ' '


A
P
P
bc
P
P
P P
bc bc
0 0
0
10 10
P P
e bc
' ' ' '
''

0
10
A
P P
P P
P P
P P
bc bc

+
+

+
+

log
' ' '
' ' '
log
' ' '
' ' '
' ''
0 0 0 0
0 0
10 10

_
,

_
,

_
,

log
log
'
ln
'
'
ln ln
T bc
c
b
T c
b
T
c
T bT
c
T bT
c T T c T T
c T T
c T c T

1 0 434
0 434
0 434
2
2
2
2
2
2
2
2
S
c
S
T T
c T

ln
Efecto de la radiacin dispersada. No conviene nunca medir en los extremos de las escalas
de longitud de onda.
5. Instrumentos de medida
Los instrumentos tienen tres componentes bsicos: fuente, monocromador y detector. Los dos
ltimos ya han sido estudiados en temas anteriores, la fuente la trataremos aqu mas ampliamente.
Existen dos tipos de fuente, de espectro continuo y de lnea. Normalmente en espectrofotometria
se utilizan fuentes de espectro continuo.
Dentro de las fuentes en continuo se pueden utilizar los siguientes tipos de lampara:
Lamparas de Deuterio o Hidrogeno. Son utilizadas para el rango visible. El deuterio o l hidrogeno
a baja presin sufre una excitacin elctrica, al volver los electrones a su estado fundamental emiten
un espectro continuo. Su mecanismo de funcionamiento seria:
D2+EelectricaD2
*
D+D+h
Donde h es la radiacin. Al hacer el balance energtico del proceso obtenemos:
Eelectrica=E*=E+E+ h
Donde E y E pueden variar desde cero hasta el valor de la energa elctrica suministrada, el resto
de la energa es para la radiacin emitida, por eso es un espectro continuo.
Lampara de filamento de Wolframio. Se utiliza para trabajar en la regin visible. La distribucin de
energa se aproxima a la del cuerpo negro y la radiacin a emitir va a depender de la temperatura(se
calienta hasta 3000C). Su vida es corta ya que se sublima el filamento al pasar la corriente elctrica.
Actualmente existen las lamparas de wolframio-halogeno cuya duracin es mayor.
5.1 Tipos de instrumentos ms comunes para la espectrofotometria
de Absorcin Molecular UV-Vis e IR Cercano
Existen tres tipos de instrumentos:
De un solo haz. Es el ms comn y l mas barato.
De doble haz. La radiacin parte de la fuente, pasa por el selector de longitud de onda y llega a un
espejo sectorizado(es un espejo semitrasparente, deja pasar algunos rayos pero otros los refleja)
despus de este espejo el haz se divide en dos, uno es el haz de referencia y sirve para el calibrado
del aparato y el otro haz es el que atraviesa la muestra y llega al detector.
Multicanal. Pueden medir varias especies a la vez. El monocromador esta despus de la muestra y
tiene carcter dispersivo, dividindolo en muchos haces que van a ir a parar a distintos detectores.
La fuente en todos los casos mencionados es continua.
Tambin podemos clasificar los instrumentos en fotmetros y espectrofotometros.
5.1.1 Fotmetros
Son ms baratos. Sus componentes son muy sencillos, la principal caracterstica es que solo
tiene un filtro, no tiene elemento dispersante.
Estn los fotmetros de tipo sonda o de fibra ptica, que ya han sido vistos en temas anteriores.
En los fotmetros es importante la eleccin del filtro, para encontrar la longitud de onda a la que
es mxima la absorbancia. Por ejemplo, si tenemos una coloracin roja pondremos un filtro de color
complementario al rojo, en este caso el verde.
Hay que mencionar tambin los fotmetros de absorcin ultravioleta que son un importante
complemento en las tcnicas cromatograficas.
5.1.2 Espectrofotometros
Utiliza un sistema dispersivo como selector de longitud de onda, bien sea una red o un prisma.
Segn la radiacin existen dos tipos:
Solo para la regin visible
Para la regin ultravioleta-visible
Segn el haz:
Haz sencillo
Haz doble
Multicanal
Espectroscopia atmica con llama
y tcnicas relacionadas
Contenido:
Principios de la absorcin y emisin atmica
Fundamentos tericos
Instrumentacin
Interferencias
Aplicaciones
Espectroscopia atmica por calentamiento electrotrmico
Espectroscopia de fluorescencia atmica
Este tipo de tcnicas ocupan tres modalidades:
Absorcin atmica
Fluorescencia atmica
Emisin atmica
Esta dirigida a los anlisis de trazas de elementos metlicos. Las trazas pueden producir
importantes cambios en las propiedades de las muestras.
Estas tcnicas aparecieron en los aos 50. Se empieza a tomar conciencia que las tcnicas empleadas
hasta entonces no tenan limites de deteccin bajos. Son tcnicas destructivas.
Siglo 19. Fotometra de llama y espectroscopia de emisin con arco o chispa, que actualmente son
sustituidos por la espectroscopia de emisin de plasma(ICP)
Aos 50. Absorcin atmica. Walsh.
Aos 60. Fluorescencia atmica.
La ventaja de estas tcnicas sobre la espectrofotometria es que la especie a estudiar son tomos
libres.
La espectroscopia de emisin atmica es multielemental. Podemos analizar un grupo de
elementos. Necesitamos entre 4000-10000 C. La muestra ha de estar perfectamente disuelta.
1. Principios de la absorcin y emisin atmica
Sometemos el NaCl a altas temperaturas y la absorbemos por un capilar.
Na
0
y Cl
0
son sometidos a la radiacin y son excitados.
Los espectros son muy finos y de linea, hay pocas lneas por cada elemento y normalmente no
estn solapados.
En espectroscopia de absorcin atmica los atomos que estn en la llama absorben parte de la
radiacin, por lo tanto la seal disminuye y eso es lo que mide el detector y lo transforma en
concentracin. Se suele utilizar para la detecin de metales pesados.
En espectroscopia de emisin atmica no hay fuente. Lo que medimos es la radiacin
procedente de los mismos atomos al bajar al estado fundamental. Empleado para metales alcalinos y
algunos alcalinoterreos.
Cualquier atomo no absorbe cualquier cantidad de energa, y no lo hace de forma continua. Si se
suministra mucha energa no solo se promocionan el electrn a niveles de energa mayor sino que
podemos arrancarlo(potencial de ionizacin) acabando en ese punto la serie espectral.
La longitud de onda de resonancia es la que corresponde a la transicin del estado fundamental
al proximo nivel accesible. Vamos a ampliar este concepto a cualquier transicin siempre que este
implicado el estado fundamental. Tambien se le llama longitud de onda principal.
El hecho de que cada elemento tenga varias longitudes de onda nos puede dar cierto juego a la
hora de trabajar con ese elemento. Permite elegir la longitud de onda adecuada para que se cumpla la ley
de Lambert-Beer.
Si tenemos un metal y lo ponemos a 2000-3000C y le hacemos incidir una radiacin, ese metal pasara a
un estado excitado, para volver al estado fundamental de varias formas:
Emitiendo radiacin electromagntica de la misma longitud de onda que la absorbida(fluorescencia
de resonancia)
Perdiendo esa energa por colisin con otras partculas en la llama(perdida de calor)
En el caso que exista otro nivel permitido para ese elemento puede haber una emisin(fluorescencia
no resonante) de distinta longitud de onda y luego puede emitir a forma de calor.
2. Fundamentos tericos
La relacin entre los atomos en estado excitado y los atomos en estado fundamental depende de
la temperatura y de la naturaleza del atomo considerado. Existe una expresin matematica, la ecuacin
de Maxwell-Boltzman que los relaciona:
N
N
g
g
e
E E
kT
1
0
1
0
1 0

( )
Donde:
N1, tomo en estado excitado
N0, tomo en estado fundamental
g1 y g0, constantes estadsticas que se pueden obtener mecanocuanticamente
E0 y E1, Energas en el estado fundamental y excitado
k, constante de Boltzman
T, temperatura
Ejemplo. El cadmio experimenta una transicin en la llama de acetileno lo que le
corresponde una longitud de onda de 2288nm. Calcular la relacin N1/N0 en esta llama con
una temperatura de 2523K y sabiendo que g1/g0=3
En alcalinos la intensidad se puede amplificar casi indefinidamente porque hay una seal cero
frente a una seal muy pequea. El tope lo ponen las fluctuaciones de la llama y el ruido de disparo del
detector. Todo esto de aplica para emisin. En absorcin la radiacin llega de la fuente. Si amplificamos la
diferencia de seales permanece constante por tanto no se puede amplificar la seal.
La ventaja de emisin frente a absorcin es que se puede evitar la interferencia de la llama por
medio de un cortador.
Las lneas fundamentales para medir en absorcin son las que parten de tomos en estado
fundamental.
A medida que aumenta la temperatura la fraccin de tomos excitados se hace mayor. Este
aumento de temperatura tiene un efecto marcado en emisin y afecta menos en absorcin. Puede ocurrir
que por formar xidos refractarios en la llama. Estos son los casos en que al aumentar la temperatura
hace que tengamos un aumento de sensibilidad en absorcin atmica.
La sensibilidad varia mucho de un elemento a otro en emisin, siendo ms homognea en
absorcin.
2.1 Sensibilidad y limite de deteccin para espectroscopia de llama
Tenemos dos definiciones de sensibilidad:
Pendiente de la curva de calibrado. Es la definicin ms comn.
Concentracin que nos da una absorcin del 1%.
l limite de deteccin se define por la concentracin que nos da una absorbancia igual a la media
del blanco ms tres veces la sensibilidad del blanco:
Si reduzco el ruido, reduzco l limite de deteccin pero mantengo constante la sensibilidad.
2.2 Ensanchamiento de las lneas espectrales
Las lneas espectrales no son completamente monocromticas. La anchura de lnea se puede
definir como la media de anchura que se mide como el ancho en la mitad de la lnea espectral.
Existen tres factores que hacen que se ensanchen las lneas:
abs X S
bl bl
+3
Ensanchamiento natural. Depende del tiempo que los tomos estn excitados. Es para todos los
mtodos espectroscopicos.
Por efecto Doppler. Movimiento trmico de los tomos en la llama con respecto al
observador(detector). Solo para llama.
Por colisin. Colisin de los tomos del analito con los dems gases de la llama. Como es natural,
solo para llama.
El ensanchamiento normal de las lneas es de 10
-4
Amstrongs. Aplicando los tres factores
anteriores se nos queda en 002 Amstrongs. Podemos seguir diciendo que son de lnea.
En espectrofotometria de absorcin molecular se habla de espectro de banda.
3. Instrumentacin
Existen tres variedades de espectroscopia, en funcin de esto van a ser los aparatos empleados para la
deteccin:
Espectroscopia de emisin atmica.
Espectroscopia de absorcin atmica.
Espectroscopia de fluorescencia atmica. Igual que en el caso anterior salvo que fuente y
atomizar estn en 90. Perpendiculares. Esto se hace para que la fuente no vaya directamente al
detector. La fuente solo es empleada para excitar. El monocromador debe ser de rejilla.
En los tres casos anteriores el monocromador es una rejilla, el detector un fotomultiplicador y el
atomizador puede ser una llama o un horno de grafito.
En el mismo aparato podemos medir en absorcin o en emisin, encendiendo o no la fuente.
3.1 Fuentes de radiacin en absorcin atmica
Existen dos tipos de fuentes. En continuo, con amplio rango de longitudes de onda y en espectro
de lnea, donde la fuente no emite radiacin hasta una longitud de onda determinada. Los resultados son
mejores.
En absorcin se trabaja con la lampara de ctodo hueco(fuente de espectro de lnea)
Lampara de ctodo hueco. Es una fuente de continuo. Estn rellenos de un gas inerte o de baja
presin(Argn o Nen) Se establece una diferencia de potencial para producir una corriente de entre 1 y
50 Amstrongs. Entonces se ioniza el gas formndose un chisporroteo en el ctodo que a su vez pierde
iones metlicos, producindose una radiacin con una longitud de onda especifica que ser solamente
absorbida por el mismo elemento metlico que esta en la llama sin presentarse interacciones con otros
posibles metales que haya en la llama. La intensidad de la corriente aumenta hasta un valor mximo a
partir del cual aparece el fenmeno de autoabsorcin. Para conseguir un grado optimo de intensidad de
radiacin se aliena un monocromador ya que en la radiacin va tambin la emitida por el gas inerte y esta
Atomizador Monocromador Detector
Fuente Atomizador Monocromador Detector
no nos interesa. Podemos trabajar con una lampara de continuo tambin pero el monocromador hay que
colocarlo entre la fuente y la llama. Tiene la ventaja de que nos sirve para medir todos los metales, pero
con menos precisin.
La concentracin de los tomos esta en relacin con la seal que sale de la lampara y de la que
sale de la llama. Debe cumplir la ley de Beer.
La mnima anchura de un monocromador es de 01 Amstrongs en fuente de lnea y 004
Amstrongs en llama. Por eso se trabaja mejor con una fuente de lnea ya que solamente sobre el detector
incidir radiacin que nada tiene que ver con la concentracin del analito, porque el detector no entiende
de longitudes de onda.
3.2 Llama-Mechero nebulizador
Lo primero es disolver la muestra perfectamente, luego se absorbe por un capilar hasta la
cmara de nebulizacin convirtindolo all en spray, desde all atraviesa la llama y atomiza. El mechero
nebulizador tiene la ventaja de que mezcla los gases de la llama con la muestra evitando turbulencias
que otros mecheros ms antiguos producan sufriendo oscilaciones en las medidas.
Los tipos de llamas ms utilizados son:
Aire-propano. 1725C
Aire-acetileno. 2250C
Oxido nitroso-acetileno. 2955C
Argn-hidrogeno-aire. 1577C
La seleccin de la llama tiene mucho que ver con el metal a analizar y con la tcnica empleada.
Para metales alcalinos se trabaja con llamas de temperaturas bajas como las de aire-propano y los
aparatos(como el fotmetro de llamas) son sencillos.
En espectroscopia de absorcin atmica las dos llamas ms utilizadas son:
1. Aire-acetileno. Llama de color azulado, empleada para los metales de transicin. Si los resultados no
fueran buenos(por falta de sensibilidad o por la formacin de oxido-refractarios) emplearamos la
numero 2.
2. Oxido nitroso-acetileno. De llama espectacular y peligrosa. Tiene una zona de color rosado en la
base de la llama que es donde nos interesa medir ya que es la zona ms reductora.
Si cambiamos de la primera llama a la segunda se produce un cambio de temperatura, la
desventaja que tiene esto es que al variar la temperatura en vez de excitar los electrones puedo llegar a
ionizar la molcula. Esto se soluciona aadiendo a la muestra una especie fcilmente ionizable, para que
la capacidad de ionizacin de la llama acte sobre dicha especie.
En la llama de aire-hidrogeno-argn trabaja para longitudes de ondas bajas, se combina con
hidrogeno para la formacin del hidruro correspondiente.
Para el ajuste de las condiciones de la llama existen dos variables:
a) Relacin oxidante/combustible. Hay que optimizar esta relacin. Normalmente el flujo de
oxidante(que suele ser el aire) es constante, por lo que lo que hay que variar es el flujo de
combustible.
b) Zona de medida. Va a depender del tipo de matriz.
Estas dos variables se determinan experimentalmente.
3.3 Monocromadores y detectores
Se utilizan monocromadores de red de difraccin y detectores del tipo fotomultiplicadores.
En absorcin no necesitamos prcticamente monocromadores.
4. Interferencias
Es una tcnica con pocas interferencias, es una tcnica muy selectiva.
Existen cuatro tipos de interferencias:
Interferencias espectrales. Existen cuatro tipos:
Por solapamiento de lneas. En absorcin no existen. Una muestra con poco Mg(lnea principal a
28521nm) y mucho Na(lnea principal a589nm pero tiene una lnea secundaria a 28528nm). Se
produce entonces un solapamiento.
Por emisin de bandas por especies moleculares. Formacin de oxidos-refractarios que pueden
emitir cerca de las lneas de la muestra.
Por absorcin molecular. La radiacin va a ser absorbida por especies moleculares. Se da a
longitudes de onda inferiores a 300nm.
Por dispersin. La muestra no se puede disolver completamente. Los datos obtenidos no son
reproducibles. Parte de la radiacin emitida no llega por que es dispersada. El problema se soluciona
cambiando la longitud de onda para que el elemento que antes era dispersante ahora no lo sea.
Interferencias qumicas. Lo que sucede es la reaccin de la muestra con otra especie qumica.
Afecta igualmente a emisin y absorcin.
Donde el calcio es el elemento a medir. El pirofosfato no se puede medir.
Lo que hago es aadir una especie que reaccione con el fosfato(elemento liberador) y por tanto deja
el calcio libre. Otra solucin es cambiar la llama por una mas caliente y reductora.
Interferencia por ionizacin. El metal a analizar hay que pasarlo de la disolucin al estado
fundamental, luego hay que excitar los tomos de la ltima capa. Pero si sigo calentando lo que
consigo es ionizar las especies. Esto no nos interesa.
Una de las posibles soluciones es la adiccin de una sal fcilmente ionizable. En las curvas de
calibrado este tipo de interferencias es fcilmente detectable por la curva de calibrado. Al final se
curva pero de manera cncava +.
Interferencia fsica o de matriz. Cambios en algunas propiedades fisicas de la disolucin como la
viscosidad, tensin superficial, presin de vapor, temperatura de la disolucin. La velocidad de
aspiracin a travs del capilar es muy importante. Ha de ser la misma para los patrones y la muestra.
Para evitarlo se utiliza el mtodo de adiciones estndar.
Ca PO Pirofosfato
2
4
3 +
+
Me Me Me Me e
liq
+ +
+
0 2
2
*
5. Espectroscopia atmica por calentamiento electrotrmico
El problema de la llama es que destruye la muestra. Un 90% de la muestra se pierde antes de
poder s atomizada y por tanto no se puede analizar mas que un 10%. Es decir, tiene poca eficiencia.
Tenemos sensibilidad y limites de deteccin del orden de las partes por milln.
Existe una tcnica en la que se trabaja sin llama, se emplea en este caso el horno de grafito. En
este horno la muestra sigue el siguiente proceso:
1. Temperatura de secado. Se le extrae el agua a la muestra. Se necesitan unos 100C
aproximadamente.
2. Calcinacin de materia orgnica. Se destruye toda la posible materia orgnica que pueda tener la
muestra. Se necesitan unos 500C.
3. Atomizacin. Listo para el anlisis. Segn el tipo de muestra la temperatura va desde 2000C a
3000C.
El proceso es mas lento que el de llama. La ventaja es que se aprovecha totalmente la muestra.
Obtenemos sensibilidad y limites de deteccin de partes por billn.
El horno es utilizado en los casos en que la tcnica de llama no es valida.
Un caso particular es el de la deteccin de semimetales. El problema de los semimetales es la
poca sensibilidad en espectroscopia de llama. Las longitudes de onda de absorcin y emisin estn
prximas a los 200nm, en la zona de ultravioleta de vaco, zona del espectro que tambin es capaz de
absorber o emitir el aire o la propia llama. Esta es la dificultad que se tiene. La solucin est en hacerlo
reaccionar con el hidruro correspondiente. La condicin es que deben ser capaces de reaccionar con el
hidruro correspondiente: As,Sb,Bi,Ge,Pb,Se,Te,Sn.
El semimetal en cuestin se transforma mediante un reductor adecuado en su hidruro
correspondiente que es voltil. Una vez volatilizado de pasa a travs de la llama.
Un ejemplo de aplicacin: Deteccin de arsnico en aguas residuales.
6. Espectroscopia de fluorescencia atmica
La fluorescencia es una forma de emisin por excitacin por radiacin electromagntica.
Fuente es perpendicular al eje formado por atomizador, monocromador y detector. Lo que mido
es la radiacin emitida por los tomos el volver al estado fundamental.
6.1 Tipos de fluorescencia
Fluorescencia de resonancia. La longitud de onda emitida va a ser igual a la absorbida. Es la
tcnica de fluorescencia con la que ms se trabaja. El problema que tiene es que las radiaciones de
la fuente pueden dispersarse en el atomizador y llegar al detector.
Fluorescencia de lnea directa. Se produce la absorcin de la radiacin en una sola etapa, pero la
emisin se produce en dos. Una primera etapa normal y una segunda en forma de emisin no
radiante(la energa se emite como energa cintica)
Fluorescencia por etapas. La absorcin se produce en una sola etapa. La emisin es dos etapas.
La primera en forma de radiacin no radiante y la segunda en forma normal.
Fluorescencia activada trmicamente. La absorcin de la energa se produce en dos pasos. El
primer paso de la excitacin se hace a travs de calor o energa cintica, el segundo pasa mediante
la absorcin de radiacin. La emisin es normal
6.2 Instrumentacin de fluorescencia
Fuente. De mayor intensidad que en absorcin. Las lamparas de ctodo hueco son insuficientes por
lo que se utilizan las lamparas de descarga sin electrodo. Se fabrican es tubos de cuarzo que
contiene un compuesto. Este compuesto va a depender de la longitud de onda a la que queramos
emitir. Se hace el vaco en el tubo con un gas noble. Se somete al tubo a un campo de microondas, el
gas noble se ioniza y los electrones liberados excitan al compuesto y al volver este a su estado
fundamental va a emitir radiacin, cuya longitud de onda va a quedar determinada por el compuesto
que hallamos puesto.
Atomizadores. Pueden ser de llama o por calentamiento electrotrmico. En llama se utiliza un
mechero separador que quita el manto externo a la llama. Por calentamiento electrotermico se utiliza
una especie de horno de grafito con la diferencia que consigue que la fuente sea perpendicular al eje
del atomizador, monocromador y detector.
Monocromadores. Si se trabajo con fuentes de lnea no se requiere alto grado de monocromacin,
ya que la posicin del aparto(fuente perpendicular) ya hace las labores. Sin embargo si trabajamos
con fuente de continuo si necesitamos un monocromador.
7. Aplicaciones
Emisin Visible. Se aplica para la deteccin de alcalinos y alcalinoterreos.
Absorcin Ultravioleta. Para los metales de transicin.
Ultravioleta lejano. Semimetales. El problema es que el aire o la propia llama tambin absorben. Un
mtodo para su deteccin es la generacin de los hidruros correspondientes. Da sensibilidad de
partes por milln.
El resto de los elementos no pueden detectarse por aplicacin directa de las tcnicas
espectroscopicas. S mediante mtodos indirectos.
Uno de esos mtodos es precipitar el metal y per lo que queda:
Si quiero medir el cloro lo hago reaccionar con plata en exceso que precipitara. Midiendo el ion plata
que nos queda(mediante tcnica espectroscopicas) y como la reaccin es cuantitativa puedo ser capaz de
averiguar la cantidad de cloro que hay.
Para la medicin del sulfato o bien mido la cantidad de ion bario por espectroscopia o bien la
cantidad de precipitado por gravimetria.
La emisin y absorcin con llama nos dan una sensibilidad de partes por milln. La absorcin atmica por
calentamiento electrotrmico y el mtodo indirecto de generacin de hidruros correspondientes dan una
sensibilidad de partes por milln.
Otra de las aplicaciones es la deteccin de metales a nivel de traza. Estos metales se comportan
como catalizadores. Pb, Cd, As, a concentraciones bajas son contaminantes. Existen metales que a
niveles de concentracin baja son esenciales pero a mayores concentraciones son txicos.
Hay que comentar que la preparacin de la muestra es muy importante. Si no se prepara bien puede
dar errores muy importante. Necesitamos una perfecta disolucin de la muestra o por lo menos una
homogeneidad. Esto se consigue con tensioactivos.
Las tcnicas espectroscopicas se combinan con la extraccin liquido-liquido. Es una tcnica
destructiva. Las diferencias las he de hacer antes de realizar la medicin. Adems es una tcnica
monoelemental.
ESPECTROSCOPIA DE ABSORCION EN EL INFRARROJO
(Anlisis instrumental Skoog-Leary)
Contenido:
1. Fundamentos tericos
2. Instrumentacin
3. Aplicaciones cualitativas
4. Aplicaciones cuantitativas
1. Fundamentos tericos
Fundamentalmente se aplica a la determinacin cualitativa de especies moleculares. El infrarrojo
corresponde a una longitud de onda desde 10
-4
hasta 10
-2
cm. Se suele trabajar con l numero de ondas.
Cuando aumenta l numero de ondas vamos a zonas de mayor frecuencia y por tanto a zonas ms
energticas. El infrarrojo esta comprendido en 1300-33 cm
-1
y las mediciones se hacen en un margen
comprendido entre 4000-667 cm
-1
. Fundamentalmente se emplea para la determinacin de compuestos
orgnicos. Estos espectros dan gran cantidad de informacin. El espectro es nico para cada compuesto
orgnico excepto para ismeros pticos.
Solamente las molculas polares pueden experimentar las vibraciones y rotaciones que le permiten
absorber energas en el infrarrojo. Al vibrar se produce un campo electromagntico oscilante que hace
que pueda haber interaccin con la componente elctrica. Lo mismo ocurre con la rotacin. Las molculas
apolares no absorben en el infrarrojo.
Por cada transicin vibratoria hay varios estados rotatorios. Estos niveles estn cuantizados.
Las transiciones de energa son muy pequeas por lo que los espectros son de lnea(en IR lejano).
Los picos se deben a transiciones vibratorias y aparecen ensanchados por las rotaciones que
conllevan estos estados vibratorios.
Cuando la frecuencia de las vibraciones es igual a la radiacin electromagntica incidente entonces
es cuando se produce la absorcin de la radiacin.
Las vibraciones se pueden clasificar en dos grandes grupos:
De extensin. Supone un cambio continuo en la distancia de enlace a lo largo del eje de enlace.
De flexin. Pueden ser a su vez de cuatro tipos:
De torsin.
En forma de tijera.
De balanceo.
De aleteo.
La frecuencia de un grupo funcional se pude calcular por:
Donde m es la masa reducida que se define como:
Cl Ag exceso AgCl Ag
+ +
+ + ( )
SO Ba exceso BaSO Ba
4
2
4
2 + +
+ + ( )

1
2
k
m
1 1 1
1 2
m m m
+
Las vibraciones en las que intervienen tomos de hidrogeno tiene lugar a frecuencias ms altas, igual que
cuando intervienen dobles y triples enlaces.
2. Instrumentacin
FUENTEMUESTRAMONOCROMADORDETECTOR
Las fuentes ms comunes son slidos calentados entre 1500-2000K. Son fuentes de continuo y se
aproximan al cuerpo negro.
Los tipos de fuentes que ms se usan son:
Fuente de Nernst
Oxidos de tierras raras
Alambre de aleaciones que contienen cromo.
Los monocromadores son de rejilla o de prisma. Suelen ser de NaCl, KBr, CsBr. Son slidos cristalinos.
Estos tipos de sales son solubles en agua por lo que tiene que ir dotados de un medio que evite humedad
que disuelva estos slidos.
La medida de radiacin infrarroja es dificil debido a la baja intensidad de la fuente. Se utilizan detectores
trmicos o basados en la fotoconductividad. Son semiconductores que al incidir la radiacin experimentan
un aumento considerable de la conductividad.
La fuente se modula por lo que se evita cualquier seal extraa que llegue al detector.
Normalmente s emplea un doble haz. Se utiliza para eliminar el ruido procedente de la inestabilidad
de la fuente o el detector.
Se pueden medir muestras de gases, iones(es importante que el disolvente sea trasparente a la
radiacin y que sea apolar). Tambin se pueden medir lquidos puros y muestras slidas.
3. Aplicaciones cualitativas
Se puede dividir en regiones:
3700-2700cm
-1
Tensin del Hidrogeno Tensin entre un hidrogeno y algn otro tipo de
tomo. OH, NH, CH.
2700-1850cm
-1
Triple enlace -CN-, -CC-
1950-1550cm
-1
Doble enlace C=0, acetonas, aldehidos, [Link],
esteres...
Esta tambin la regin de la huella digital, Aqu los espectros suelen ser muy complejos(con gran
cantidad de picos). Esta complejidad se suele aprovechar para fines de identificacin.
Para el estudio de compuestos orgnicos hay que estudiar todas las zonas y hacer comparaciones.
El IR no suele ser suficiente para identificar sustancias. Se suele completar con RMN, anlisis elemental y
espectroscopia de masas.
En algunos casos los picos estn solapadas, no se obtiene linealidad por lo que no se puede
trabajar con la ley de Beer.
Los equipos vienen preparados para trabajar con IR de trasformada de Fourier basadas en el
interferometro de Michelson. Se hace incidir distintos tipo de seal y se obtiene mas informacin. Despus
toda la informacin se limpia matemticamente mediante la transformada de Fourier. Esto lleva una serie
de ventajas: Mayor exactitud y precisin, se obtiene espectros en breve espacio de tiempo y la calidad del
espectro es mayor.
Algunos espectros I.R., la mayora en fase gas.
Espectroscopa de Infrarojo.
Niveles vibracionales en el estado electrnico fundamental de la molcula de hidrgeno.
Hay una zona donde la molcula podra excitarse y disociarse. La vibracin puede extenderse
algo dentro de la regin prohibida clsicamente. Obviamente, el H
2
no tiene momento dipolar y
no se estudia con la espectroscopa infraroja.
Espectro I.R. de una molcula diatmica. Bandas origen del espectro de absorcin.
Espectro I.R. de una molcula diatmica. Bandas calientes.
Espectro I.R. del BrlH gaseoso, simplificado. No se incluye la distorsin centrfuga.
Espectro I.R. del ClH gaseoso, simplificado.
Espectro I.R. de vibracin-rotacin de una molcula diatmica gaseosa (como ClH o BrH).
Las lneas se indican dando los valores del nmero cuntico de rotacin J de partida (para el
nivel vibracional v=0) y llegada (para v=1). Se observan las ramas P y Q. El espaciado decrece
al al aumentar el nmero de onda (en la rama R, obviamente). Si los niveles estuvieran
suficientemente poblados se podra llegar a ver la cabeza de banda en la rama R. En un espectro
I.R la cabeza de banda siempre estara en la rama R pues en v=1 el valor del R
eq
siempre es
mayor que para v=0. Obviamente las oscilaciones no corresponden a un oscilador totalemnte
armnico.
Modos normales de vibracin del CO
2
. Se muestran todos aunque puedan no ser activos en el
I.R.
Modos normales de vibracin del H
2
O. Como el momento dipolar permanente no es nulo,
todos son activos.
Niveles de energa vibracional de una molcula poliatmica (el agua). No se incluye la
correcccin de anarmonicidad. Vers que la energa depende de los nmeros cunticos
vibracionales de cada modo normal.
Modos normales del BF
3
.
Algunos modos normales del eteno.
Espectro I.R. del CH
3
Br gaseoso. Se muestra la banda paralela con la estructura PQR. La
estructura rotacional no est resuelta totalmente.
Espectro I.R. en gase gas de una molcula lineal. Se muestran las bandas paralela (estructura
PQ) y perpendicular (PQR) con baja resolucin.
Tabla con algunas frecuencias de grupo para la absorcin I.R.. Permiten la identificacin de
la presencia de esos grupos en un compuesto a analizar.
Espectro I.R. del ClH gaseoso. Se muestran las Ramas P y Q. Este espectro lo obtuve yo
cuando era estudiante.
Espectro I.R. del BrH gaseoso. Es similar al anterior, y tambi lo obtuve antes de licenciarme.
A la izquierda vers las rayas de los restos del ClH que haba en la muestra.

Algunos espectros Atmicos en fase gas.
Espectroscopa Atmica.

Espectros de llama de diversos tomos. Observar muy bien el doblete amarillo del sodio.
Ms Espectros de llama de diversos tomos.
Algunos espectros Raman, la mayora en fase gas.
Espectroscopa Raman.
Espectro Raman de una molcula diatmica gaseosa. Se muestran las lneas Stokes, Rayleigh y Anti-
Stokes junto a sus transiciones energticas correspondientes. Las Anti-Stokes son muy poco intensas, ya
que es poco probable encontrar molculas excitadas vibracionalmente a temperatura ambiente en la
muestra.
Espectro Raman de un gas diatmico.
Espectro Raman rotacional del una molcula de cabeza simtrica. Observense las ramas R y S
superpuestas.
Espectro I.R. y Raman de AB3. Tabla de vibraciones activas. Si hay un centro de simetr&iecute;a en la
molcula las vibraciones activas en I.R. no lo son en Raman y viceversa. Pero pueden ser activas y tan
poco intensas que no se observen.
Comparacin del espectro I.R. y Raman de una molcula poliatmica, simplificado. Obviamente, la
estructura rotacional no es visible. Observa la similitud, pero observa tambin las diferencias !!
Algunos espectros de Fluorescencia.
Espectroscopa Molecular de Fluorescencia.
Curvas de Energa Potencial Molecular. Niveles de Energa. Molcula de Sodio.
Espectro de Fluorescencia de una molcula diatmica gaseosa (Na
2
) inducido por una luz
lser.

Algunos Espectros Electrnicos en fase gas de molculas diatmicas.
Espectroscopa Electrnica.
En la Espectroscopa Electrnica de Absorcin se producen cambios energticos entre distintos estados
electrnicos del sistema. Por simplicidad, en Tercero de Qumicas slo explicaremos los de las molculas
diatmicas en fase gas. Evidentemente, tambin pueden cambiar en la transicin los nmeros cunticos
vibracional v y rotacional j .
Y recuerda que una transicin (incluso las llamadas prohibidas) podran suceder por mecanismos "no
radiativos", p.e. una colisin entre molculas. Pero eso NO es interaccin de la luz con la materia, aunque
lo sucedido se refleje en algn espectro (ver fluorescencia y fosforescencia, por ejemplo).
Espectro Electrnico de absorcin del I
2
gaseoso.
Espectroscopa Electrnica. Principio de Franck-Condon. (I). La transicin electrnica es tan rpida
que los ncleos no se han movido apreciablemente. Por eso la transicin se representa en un diagrama
Energa-distancia internuclear como una lnea vertical.
El mximo solapamiento entre funciones de onda vibracionales permite conocer el nivel vibracional de
destino.
Espectroscopa Electrnica. Principio de Franck-Condon (II). Evidentemente la cosa vara si el
estado de destino tiene la curva de energa (y por tanto el mnimo y el radio de equilibrio) mas o menos
desplazada respecto a la curva del estado de partida (que es el fundamental en absorcin).
Espectroscopa Electrnica. Principio de Franck-Condon (III). As, es posible que el nivel
vibracional de destino sea el 0, pero tambi que sea un nivel vibracional excitado del estado superior (y
por ende, se ser el ms poblado) pudiendo no aparecer o ser muy debil la 0-0 o incluso que se llegue a
un nivel tal que se produzca una disociacin del sistema en el estado excitado, apareciendo un contnuo
en el espectro.
Espectro Electrnico fino de la lnea 0-0 del C
2
gaseoso. Cuando se observan en el espectro los
cambios de J, estamos observando la estructura fina de una lnea de una serie o progresin. Es posible
"ver" las transiciones entre distintos niveles rotacionales de cada estado vibracional en cada nivel
electrnico aunque la molcula tenga un momento dipolar nulo. Observa que las lneas "avanzan"
hasta un valor (la cabeza de banda). Pero como el espectro est EN ANGSTROM, a la derecha estn las
menores energas (o sea las mayores longitudes de onda). Este espectro desplaza al violeta. La cabeza de
banda est en la rama P y B'' < B' (o sea req'' > req'). Por '' se denota el estado de energa m:s baja, y por
' el superior.
Si la transicin tiene un J = -1, 0 o +1 las Ramas se llaman P, Q o R (respectivamente). Puede
expresarse cada lnea de la estructura fina de la lnea 0-0 como = o-o + (B''+B')m + (B'-B'')m
2
, siendo
m=-J en la Rama P y m=J+1 en la Rama R.
Espectro Electrnico. Banda 0-0. Parabola de Fortrat. Caso B''>B' (o sea req'' > req'), cabeza de
banda en rama R, degrada al rojo.
Espectro Electrnico. Banda 0-0. Ramas P, Q y R para el caso B''>B', con la cabeza de banda
en la rama R.
Estructura fina de la banda 0-0 (4280 Angstrom) de la transicin electrnica X
1
--> A
1
del CuH. La cabeza de
banda est en la rama R. Se muestran las intensidades de cada lnea. La Rama Q est prohibida.
R(20) = 23130 cm
-1

P(5) = 23215 cm
-1

R(15) = 23270 cm
-1

P(1) = 23300 cm
-1

R(0) = 23325 cm
-1

R(10) = 23340 cm
-1

R(CB) = 23360 cm
-1

Espectro Electrnico fino de la lnea del CuH gaseoso mostrada en la figura anterior, tal y
como se registra en una placa fotogrfica.
Espectro de Microondas del ClH. Rosa Mara Martnez
Fernndez. Mayo de 1997.
Estas son las figuras obtenidas por la alumna Rosa Mara Martnez Fernndez. para el espectro
rotacional del
35
Cl
1
H, supuesta al aproximacin del rotor rgido. Est hecho en el Banwell para el
FH.
La primera es una tabla con el nmero cuntico rotacional J, la energa del nivel J, la poblacion del
mismo (por la frmula de Boltzman, recordemos la degeneracin 2J+1) y la energa necesaria para
la transicin del nivel J al J+1 .
En las dems estan las intensidades de las lneas del espectro, las cuales estn separadas entre s 2B
cm
-1
.
Era necesario obtener de un libro de la bibliografa la distancia de enlace del HCl (1'274 Angstrom
en el Banwell) y las masas de los istopos
35
Cl (34'969) y
1
H (1'0079), y las constantes fsicas h, c, NA,
etc. Se halla el momento de inercia, se halla la constante B (10'60 cm
-1
) y se recuerda que la energa
de un nivel es B.J.(J+1) cm
-1
.
Es posible que en otros libros el alumno encuentre distintos valores para la distancia Cl-H .
Porqu?
INTRODUCCIN A LA ESPECTROSCOPIA RMN
A. Bases del desplazamiento qumico:
1. Tipos de movimientos electrnicos en la molcula que contribuyen a los
desplazamientos qumicos de los ncleos:
Hay tres tipos de movimientos electrnicos que contribuyen al
apantallamiento intra-molecular. Estos son:
a) La circulacin de los electrones por un orbital esfrico y simtrico
alrededor del ncleo. Esto produce que el apantallamiento diamagntico reduzca el
campo en el ncleo. Se debe aplicar un campo ms intenso para satisfacer la
condicin de resonancia, as que las seales se mueven hacia un campo ms
intenso o hacia la derecha.
Quitando un electrn se reduce el apantallamiento y aadiendo un electrn
se aumenta.
b) La circulacin antisimtrica de los electrones como en el caso de los
electrones compartidos produce en los orbitales momentos magnticos cuya
contribucin al campo del ncleo produce en este un apantallamiento
paramagntico.

c) Circulacin de electrones deslocalizados. Los electrones en el anillo del
benceno representan el mejor ejemplo de apantallamiento aparecido por la circulacin
de los electrones en la molcula. Debido a la dependencia de la corriente de
electrones sobre la orientacin de la molcula en el campo, estos efectos no salen en
promedio con las cadas fortuitas pero hacen que el anillo aromtico aparezca rodeado
por un campo magntico. Este campo se opone al campo aplicado en el anillo. La
siguiente grfica muestra la distribucin del campo alrededor del anillo bencnico,
basado en una circulacin terica.
El grfico situado a continuacin muestra todos los efectos de los tres tipos de
movimientos electrnicos.




2. Son los valores de los desplazamientos qumicos caractersticos para
cada grupo qumico funcional en particular?
Estudios de un gran nmero de componentes qumicos han demostrado que los
desplazamientos qumicos de cada tipo de grupo funcional estn dentro de un rango de
valores que puede ser un poco ms ancho o estrecho, dependiendo de cmo sean de fuertes
las interacciones entre el grupo funcional en cuestin y el resto de la molcula en el que est
localizado o las molculas que tenga al lado en la disolucin que se est estudiando.
La siguiente tabla muestra algunos valores tpicos de desplazamientos quimicos de
protn:


B. Acoplamiento espn-espn.
3. Forma de un espectro para un ncleo con vecinos:
Ser un multiplete con lneas solo cuando la constante de
acoplamiento de todos los vecinos es la misma, lo cual ocurre frecuentemente. Sin
embargo, la constante de acoplamiento espn-espn entre dos protones se
transmite de forma diferente a travs de enlaces qumicos diferentes y depende en
gran medida de la geometra de la molcula. Aunque no es raro encontrar
multipletes de un ncleo que est rodeado de vecinos diferentes. La siguiente
grfica muestra el caso de un acoplamiento desigual.




4. Que factores influyen en la magnitud de la constante de acoplamiento
Las constantes de acoplamiento se atenan al pasar a travs de los enlaces, as en
general:








Los dobles o triples enlaces atenan menos el acoplamiento que un enlace
simple.

Adems del nmero de enlaces que intervienen, hay otros factores que
influyen en las constantes de acoplamiento. Estos se exponen a continuacin.
FACTORES QUE AFECTAN A LAS CONSTANTES DE ACOPLAMIENTO.
PROTONES GEMINALES
Jgem: + 5 hasta - 30 cps.
a) Electronegatividad de los sustituyentes
b) Dependencia del ngulo.
c) Contribucin de los electrones.
PROTONES VECINALES

Jvec : 6 - 8 cps (rotacin libre)
0 - 14 cps (en posiciones fijas)

a) ngulo didrico.

b) Electronegatividad de los sustituyentes.

c) ngulo de enlace C-C-H.

d) Longitud de enlace.


La fig 16 ira a la izq de lo de arriba, pero iria mejor hecho en dibujo por [Link]
veras.

5. Valores de la constante de acoplamiento tpicos:

La Tabla mostrada a continuacin muestra una lista de constantes de
acoplamiento caractersticas. Estos valores son muy tiles para ver que posibles
estructuras alternativas estn siendo estudiadas. La curva terica que viene dada
por la dependencia de la constante de acoplamiento con el ngulo
viene dada perfectamente por las magnitudes, pero el signo est mal. La teora es
defectuosa, pero los datos son tiles.


Una relacin particular de valores se muestra en la Fig. 18 donde se ve la
dependencia del ngulo de la constante de acoplamiento de protones vecinales
para H-C-C-H. Las conformaciones, o forma geomtrica de la molcula completa
puede a veces ser determinadas por la medida de los valores de , los cuales
pueden ser sensibles a los cambios en los ngulos de . Se tiene
que tener cuidado con otros factores que tambin afectan a . como se ha visto
con anterioridad.




6. Acoplamientos de alto rango:

Algunos acoplamientos son llamados acoplamientos de alto rango y rara
vez exceden 2-3 Hz. La tabla muestra algunas constantes de acoplamiento de alto
rango tpicas.




7. Causas por las que se apartan de los valores predichos por la teora en
las intensidades de las lneas de algunos multipletes espn-espn:

Esta variacin se produce cuando el acoplamiento observado entre ncleos
cuya diferencia entre su desplazamiento qumico comparado con el acoplamiento
no es muy grande. Algunos ncleos no se comportan como ncleos aislados
estando separados de otros ncleos e influyen en los otros haciendo que la
longitud de algunas lneas espectrales crezca a expensas de otras. La intensidad
total del multiplete no vara, y solo es proporcional al nmero de ncleos
observados.

Adems de cambiar la intensidad relativa de las lneas, pueden aparecer
algunas lneas de ms en el multiplete. Sin embargo, como las diferencias de los
desplazamientos qumicos se aproximan a cero las intensidades de todas las
lneas menos una se aproximan a cero, y cuando el desplazamiento qumico entre
dos grupos de ncleos es cero, solo se puede observar una nica lnea muy
intensa.

Esta perturbacin en las intensidades y el aumento de la complejidad al
aumentar el nmero de lneas pueden hacer al espectro virtualmente irreconocible
y es por esta razn principalmente por lo que la espectroscopa de protn RMN se
beneficia tanto de un campo magntico muy intenso. Las siguientes
representaciones muestran cuanto mejora el espectro al aumentar la intensidad y
frecuencia del campo magntico.





C. ESTUDIOS CUANTITATIVOS POR RMN.

8. Cul es el significado del rea total encerrada bajo los picos de
absorcin?


Es fcil demostrar que una vez estimado el nivel de radiofrecuencia y
hecho el barrido con el espectrmetro, las reas que se encuentran encerradas
bajo los picos de absorcin de los ncleos estudiados son proporcionales
nicamente a la concentracin de dichos ncleos en disolucin. Esto tiene un
significado muy importante para la aplicacin de estudios estructurales y anlisis
cuantitativos. Eso significa que la intensidad relativa de los picos de absorcin en
el espectro de RMN refleja el nmero relativo de ncleos en una sustancia pura o
el nmero relativo de molculas de cada tipo en una muestra.

A diferencia de los espectros pticos en los cuales cada pico no solo es
proporcional a la concentracin sino tambin a un coeficiente de absorcin que
tiene que ser medido tomando una concentracin conocida de la sustancia que se
vaya a estudiar, el espectro de RMN puede ser interpretado cuantitativamente
incluso cuando ha sido obtenido de muestras en bruto, sin dividir ni separar nada.

A continuacin se muestra el espectro de un complejo alcaloide cuya
formula molecular es . Muchos de los picos debido a que la estructura
no tienen protones equivalentes, tienen las constantes de acoplamiento solapadas
en el espectro y, por lo tanto, no se pueden interpretar. La integral del espectro
tambin se muestra como una funcin ascendente escalonada, el tamao de cada
escaln es proporcional al nmero relativo de ncleos que ha contribuido a su
correspondiente pico de absorcin.


Una substancia pura debe tener un nmero integro de protones repartidos en
diferentes sitios estructurales. Por lo tanto, las razones de las reas deben de ser las razones
de las integrales. El paso ms pequeo no puede corresponder a menos de un protn; por lo
tanto, si el paso ms largo es expresado como la suma de todos los mltiples pasos ms
pequeos se obtendr el nmero total de protones de la frmula molecular. El total de la
suma de todos los pasos en este caso corresponde a 22 protones, lo cual est de acuerdo con
la frmula molecular.


9. Anlisis de un compuesto:

El espectro anterior corresponde a un compuesto comercial de aspirina,
cafena y fenacetina conocido como APC. El anlisis cuantitativo del compuesto es
fcilmente concluido por la integracin de la regin del espectro que contiene los
grupos N-metil de la cafena, N-acetil de la fenacetina y el acetato de metilo de la
aspirina. La concentracin molar se puede calcular por las concentraciones
relativas de las tres especies moleculares basadas en el nmero relativo de grupos
de metilo que sirven para calcularlos.



D. Desacoplamiento de espn.

10. Simplificacin las asignaciones de los espectros de RMN:

El metodo ms efectivo es recorrer el espectro con un campo de intensidad
lo suficientemente alta de forma que todos los grupos sean visibles separadamente
y las intensidades de los multipletes sean distinguibles. Sin embargo, en muchos
casos es posible que no exista un aparato que cree un campo lo suficientemente
intenso, o que no sea factible. Hay casos en los que una cantidad de ncleos estn
acoplados con una constante de acoplamiento muy parecida y no es posible
decidir que grupos estn acoplados, y consecuentemente, que grupos en la
molcula son vecinos.

Un mtodo muy poderoso para determinar la presencia de acoplamientos
entre dos grupos de ncleos, y para eliminar los efectos de los acoplamientos en
los casos favorables es la irradiacin doble. Por ejemplo, se irradia la muestra con
dos radiofrecuencias cualesquiera simultneamente o una radio-frecuencia
modulada por audio-modulacin para dar un portador y bandas laterales a ncleos
giromagnticos cuando la segunda radiofrecuencia es aplicada con el nivel ms
bajo de energa podra ser denominada como perturbacin de espn. Cuando se
aplica con el nivel ms alto de energa se la denomina desacoplamiento de espn.

El efecto del desacoplamiento de espn es colapsar el multiplete las lneas
de un grupo de ncleos, , los cuales estn acoplados a otro grupo de ncleos,
, con un singlete (bajo condiciones favorables). La segunda radiofrecuencia
irradia el grupo con su frecuencia de resonancia mientras se aplica la cantidad
normal de H
1
al grupo y se mide la absorcin de este grupo.

El diagrama de los niveles de energa es usado frecuentemente para explicar el
desacoplamiento de espn partiendo de la base de que la absorcin y la emisin son
igualmente probables. Una radiofrecuencia intensa en el campo de la resonancia har que
los ncleos cambien rpidamente sus orientaciones de paralelas a antiparalelas. Cuando la
razn de cambio de orientacin sea comparada con la separacin de las lneas en el
multiplete espn-espn, por ejemplo, 50 veces por segundo para un multiplete cuyo
espaciado es 5 Hz, los ncleos del grupo se parecern a los del grupo y no sern ni
paralelos ni antiparalelos, y no poseern un espn efectivo o momento magntico.

Una explicacin ms precisa debe tener en cuenta el concepto de que los
ncleos acoplan sus espines porque algn componente de sus momentos
magnticos apunta en la misma direccin o en la opuesta. En ausencia de un
campo de radiofrecuencia con la frecuencia de resonancia correcta para el grupo
; esto es cierto, pero cuando un campo de radiofrecuencia es aplicado, los
ncleos son perturbados de su direccin de equilibrio y puede ocurrir que su
momento magntico este en ngulo recto con la direccin del momento magntico
del grupo . El acoplamiento entonces sera cero.

Actualmente, el acoplamiento nunca va a colapsarse completamente por
dos grupos de protones, pero si los desplazamientos qumicos relativos de los
grupos, , es mayor de 10 , el colapso puede ser casi o estar muy cerca de
ser completo. Si < 10 , se puede producir un colapso parcial y el
acoplamiento entre los dos grupos lo puede verificar.

La aplicacin de un intenso campo de radiofrecuencias al grupo tambin
causa desplazamientos en el grupo , y todas las restantes resonancias del
espectro, denominados desplazamientos Bloch-Segert.

Los desplazamientos Bloch-Siegert vienen dados por




donde H
2
es el campo de radio-frecuencias aplicado al grupo , e f es la
separacin de la frecuencia del grupo con el punto desde el que es observado
el desplazamiento.

Hay que fijarse en que para un valor de f grande el desplazamiento Bloch-
Siegert es despreciable, pero puede llegar a ser bastante grande para valores de
pequeos, donde se aproxima a una dependencia lineal de . Esto produce
un efecto llamado emisin Bloch-Siegert, debido a la inhomogeneidad del intenso
campo de radiofrecuencia, . Si no es uniforme sobre toda la muestra, el
desplazamiento tambin variar sobre el volumen de la muestra y esto producir la
emisin. El espectrmetro de bobina cruzada tiene una ventaja sobre el de bobina
nica para el desacoplamiento de espn desde que el diseo de bobinas
receptoras ptimas excluyen la generacin de campos de radiofrecuencia
homogneas con la misma bobina.

Los siguientes espectros muestran la aplicacin del desacoplamiento de
espn a un problema qumico. Una molcula con estructura o viene dada por el
espectro de protn situado ms arriba, en cual tiene un triplete a la izquierda
debido a los protones del tipo . Esto podra aparecer para
cualquiera de las dos estructuras, pero en el es adyacente a , y en es
adyacente a un tomo de oxigeno. La complejidad del espectro impide asignar el
grupo a alguna regin del espectro. Cuando, sin embargo, el
desacoplamiento de espn est situado sobre los 24 ppm. del TMS y el triplete se
colapsa en un singlete como se muestra en el espectro situado ms abajo. Esto
prueba la localizacin del CH2 y demuestra que no es contiguo al oxigeno,
confirmando la estructura .







E. EFECTOS DINAMICOS EN LA ESPECTROSCOPIA RMN.

11. Efectos producidos en los espectros RMN de alta resolucin debido a
los cambios en el movimiento molecular:

Todas las disoluciones consisten en un conjunto de molculas movindose
violentamente. Estos movimientos son translacionales, vibracionales y
rotacionales. Los movimientos vibracionales son de tipo de altas frecuencias y las
molculas se comportan como si los ncleos estuvieran rgidamente localizados en
sus posiciones promedio. La sustitucin isotpica puede cambiar este promedio y
producir desplazamientos del istopo en los desplazamientos qumicos. Pero
generalmente los movimientos vibracionales pueden no tenerse en cuenta.

Los movimientos translacionales y rotacionales tienen un profundo efecto
en el espectro. Si no hubiera movimiento molecular, la espectroscopia RMN sera
imposible por las siguientes razones:

a) Las poblaciones en los estados ms y menos energticos podran
igualarse rpidamente, sin que se produjera un exceso de poblacin en el
estado ms bajo. En efecto, el sistema de espn nuclear podra calentarse
por la energa transmitida por radiofrecuencia y sin contacto con nada que
le rodee para disipar el calor, terminara por parar de absorber energa,
porque no podra absorber ms.

b) Cada ncleo podra experimentar el campo magntico dipolar
esttico de todos los ncleos de la muestra. Esto producira lneas de
campo muy anchas.

La componente del movimiento translacional y rotacional en el movimiento
de precesin, , es efectiva estableciendo el equilibrio trmico, o
restableciendolo cuando es perturbado por un campo de radiofrecuencia, .
Estos movimientos moleculares, por lo tanto, determinan . La Temperatura y
viscosidad afectan el movimiento translacional, mientras que el tamao molecular,
la forma y la viscosidad determinan el movimiento rotacional. Las molculas
pequeas reorientan su rotacin en tiempos del orden de 10
-11
segundos, un
tiempo 1.000 veces ms corto que el ciclo de precesin nuclear. La transferencia
de energa, por lo tanto, es bastante deficiente y es grande, varios segundos o
ms.

Los polmeros y las protenas se reorientan en tiempos comparables con los
de la precesin nuclear. Estos tiempos son un mecanismo de relajacin efectivo y
provocan que sea ms corto, mientras corresponda a lneas anchas. Estudios
sobre un rango de Temperatura pueden dar informacin acerca de los polmeros
moleculares, o cambios en la forma de las molculas.

Ya se ha visto que la seal de RMN surge del momento nuclear de
precesin macroscpico, . El voltaje inducido en la bobina surge de la
componente rotacional de en el plano

, bajo la influencia de un campo de
radiofrecuencia, . Si todos los ncleos tienen la misma intensidad de campo,
los momentos nucleares individuales continuaran su movimiento de precesin en
fase, y la componente rotacional desaparecer debido a , el cual tiende a
realinear a lo largo de eje del campo (eje ). Si los ncleos estn distribuidos
sobre un rango de intensidades de campo, los momentos de precesin individuales
irn estando gradualmente fuera de fase unos con otros.




El momento neto de rotacin llega a ser cero, incluso cuando la
repolarizacin no ha tenido lugar por el mecanismo . El tiempo que tarda en
ocurrir esto se llama o tiempo de relajacin espn-espn. puede ser ms
corto que , pero nunca ms largo.


12. Efectos que se producen en la muestra por cambios de Temperatura o
concentracin:

Los tomos de hidrgeno unidos a tomos de Oxgeno o Nitrgeno se
pueden implicar en procesos de asociacin (enlace de molculas) o de intercambio
entre molculas.

En el primer caso el tomo de Hidrgeno est unido a otro tomo, pero es
atrado por la parte negativa del dipolo de otra molcula (o la parte negativa de la
propia molcula a la que est unido) y en este proceso el desplazamiento qumico
cambia. Si el enlace dura mucho tiempo en comparacin con el tiempo que dura el
ciclo de precesin entre el estado energtico del tomo asociado y sin asociar, se
encontrar un desplazamiento en el pico de absorcin, pero pequeo y no muy
ancho. Por otra parte, si el enlace (puente de Hidrgeno) se forma y se rompe en
un tiempo comparable al ciclo o frecuencia, la frecuencia de precesin del protn
cambiara aleatoriamente de un valor a otro, y los ncleos podrn estar difcilmente
fuera de fase, provocando un ensanchamiento del pico de absorcin debido al
acortamiento de .

En el segundo caso, el de intercambio, el protn viene de romper su enlace
y unirse a otro tomo, siendo reemplazado a su vez por otro. De este modo, los
protones pueden ir aleatoriamente entre dos o ms sitios con valores de
desplazamiento qumico diferentes. Como este proceso, aumenta en velocidad al
aumentar la Temperatura, las lneas se ensanchan y se fusionan gradualmente en
una lnea ancha en el centro de gravedad de las resonancias entre las que est
ocurriendo. Finalmente el pico ser ms afilado cuanto ms rpido sea el
intercambio. Los siguientes espectros ilustran este proceso. El espectro situado
ms abajo es una vista ampliada de la regin del espectro en la que se encuentran
las resonancias del metilo del dimetil formamida. Debido al carcter intermedio
entre el enlace simple y doble del enlace , la energa rotacional del enlace
es de aproximadamente 20 Kilocaloras/mol. A bajas temperaturas, esta barrera
hace que el tiempo de intercambio de los metilos sea largo comparado con la
diferencia en los desplazamientos qumicos proveniente de su distinta relacin
espacial con el grupo carbonilo. Conforme aumenta la temperatura las lneas se
ensanchan y se unen.

El espectro situado ms arriba de los espectros mostrados a continuacin
ilustra un intercambio intermolecular y dos efectos que ello produce. Un examen
del espectro muestra que hay un 95% de alcohol y un 5% de agua a Temperatura
ambiente. El pico del metileno proveniente del etanol aparece en el pico nmero 8
del espectro debido al acoplamiento alrededor de 7 Hz con los protones del y
el desdoblamiento resultante del cuarteto con una constante de acoplamiento,
, de aproximadamente 5 Hz.


A una temperatura de 60 C, el motivo por el que se aumenta el intercambio
de grupos entre el y el es el punto donde:

a) El acoplamiento de 5 Hz ha sido obtenido haciendo un promedio
porque el protn va al grupo ,y cuando se produce el intercambio
dichos protones pueden tener la orientacin paralela o anti-paralela
indistintamente.

b) La resonancia que se obtiene del grupo tanto en como en
etanol es ms ancha.

A la temperatura ms alta, las resonancias del grupo se unen y se
hacen ms afiladas conforme se va haciendo ms completo el promedio.

Hay que tener en cuenta que el centro de gravedad de las resonancias se
mueven hacia la derecha conforme aumenta la Temperatura. Esto refleja la ruptura
gradual de los puentes de hidrgeno en la disolucin.

F) CONCLUSINES:

La informacin que se obtiene de los espectros de RMN de alta resolucin
depende de los siguientes parmetros, los cuales se pueden medir:

a) Desplazamientos qumicos . Indican el tipo o los tipos de grupos
funcionales presentes.

b) Constante de acoplamiento espn-espn . Indica que grupos funcionales
son contiguos, nmero de protones contiguos y ngulo de los enlaces.

c) Integracin de las intensidades (Curva de integracin ): Mide la
concentracin relativa de los protones en la muestra.

d) Anchura y cambios de la lnea : En funcin de parmetros como la
Temperatura y la Concentracin. Indica el proceso (reaccin) que ocurre en la
muestra y permite medir las constantes de equilibrio, las barreras de rotacin,
intercambios, etc.
CONCEPTOS BASICOS DE RMN.

1. Que les ocurre a los ncleos cuando un campo magntico atraviesa la
muestra?

En equilibrio, el momento magntico microscpico de la muestra es paralelo
al campo Ho .
En ausencia de un campo magntico externo, la magnetizacin global, como ya se ha dicho
vale cero. Sin embargo, al someter la muestra a un campo magntico H
1
, los dipolos nucleares
se orientan y producen una magnetizacin finita en el equilibrio, que apunta en direccin
paralela al campo magntico aplicado. Esta direccin define, por convencin, el eje z.
Los ncleos en rotacin se comportan de forma muy similar a pequeos
giroscopios. Si se inclina el eje de un giroscopio en rotacin alejndolo de la
vertical, el giroscopio girar alrededor de su anterior eje en un movimiento que
describe la pared de un cono. Este movimiento recibe el nombre de precesin.
Anlogamente, si la magnetizacin global Mo, correspondiente a una agrupacin de
ncleos en rotacin en un campo magntico, se aleja de la direccin z, Mo
efectuar un movimiento de precesin alrededor del eje z. Esta inclinacin se
consigue aplicando un campo magntico H
1
mucho menor que gire en el plano XY,
en ngulo recto con el campo esttico (sin rotacin). En la prctica, se aplica el
campo magntico H
1
en rotacin rodeando la muestra con una bobina de
[Link] velocidad angular de este movimiento es , y su
frecuencia es . Esto es la misma frecuencia que la que separa los
estados de energa paralelos y anti-parlelos.

Como H
1
oscila en un radio-frecuencia, su amplitud se invierte dos veces
por ciclo. Matemticamente, se puede considerar H
1
, como la suma de ondas
magnticas circulares y opuestas de frecuencia , y que la amplitud de cada una
de ellas es la mitad de la amplitud de H
1
.




Una componente rota en la misma direccin que el movimiento de
precesin del momento magntico nuclear. La otra componente rota en sentido
contrario y puede ser ignorada.

Para inclinar el vector del espn macroscpico alejndolo del eje , la
frecuencia de la radiacin electromagntica aplicada, H
1
, debe ser igual a la
frecuencia de precesin natural de la muestra, de ah la expresin Resonancia
Magntica Nuclear. El movimiento de precesin del momento nuclear, Mo , es en
forma de espiral alrededor de

Ho . El Mo entra en un estado de equilibrio dinmico
debido al tiempo de relajacin trmico, T
1
, el cual acta como una fuerza que
restaura la alineacin de Mo con

Ho . La intensidad de la seal est determinada
por la componente de Mo que rota en el plano XY y cuyo cambio recoge la bobina
receptora en el eje y , generando una radiofrecuencia. La magnitud de esta
radiofrecuencia est en funcin de la intensidad del campo que viene dada por la
expresin.






donde
u
es la componente del momento rotacional en el plano XY , el cual
est en fase con la radiofrecuencia recogida en el eje y , y
v
es la componente que
est 90 fuera de fase de dicha radiofrecuencia.

La componente u se denomina Modo de Dispersin y es una seal
asimtrica como la representada a continuacin



Para grandes valores de Ho - H la seal cae rpidamente conforme a la
inversa de la distancia con el centro de la resonancia. La componente se
denomina Modo de Absorcin y tiene la propiedad de que para grandes valores de
Ho - H esta cae rpidamente conforme a la inversa de la raz cuadrada de la
distancia con el centro de la resonancia, adems de ser simtrica respecto al
centro de la resonancia.




Un espectrmetro bsico solo puede detectar la seal de absorcin.

Desde el punto de vista mecanico-cuntico la desviacin del vector de magnetizacin global de
un grupo de ncleos, respecto a su posicin de equilibrio, equivale a la transicin desde un
estado de energa bajo hasta otro ms alto. Dicha transicin solo tiene lugar cuando la energa de
los cuantos del campo de radiofrecuencia equivale exactamente a la diferencia de energa
magntica entre los dos estados energticos.

2. ngulo de desplazamiento o precesin:

El ngulo de desplazamiento entre el vector de magnetizacin nuclear M0 y
la direccin del campo magntico esttico aumenta de forma continua durante todo
el tiempo en el que se aplica el campo de rotacin a la muestra, y la tasa de
incremento depende de la potencia del campo. Se llama pulso de 90 grados al que
es suficientemente largo y fuerte para inclinar M0 desde su posicin inicial hasta
que gire justamente en el plano XY.




El ngulo de precesin, , aumenta continuamente mientras se aplica el
campo magntico en rotacin, B1 (H1). Sin embargo, la frecuencia de precesin se
mantiene constante, pues depende de propiedades intrnsecas de los ncleos y de
la fuerza del campo esttico, B0 (H0). Al pulso de radiofrecuencia necesario para
desviar el vector del momento magntico neto M0 un ngulo de 15 grados se le
denomina pulso de 15 grados. Los pulsos de 90 y 180 grados provocan
incrementos correspondientes en el ngulo de precesin. Un observador
imaginario que girase con el vector en magnetizacin a la frecuencia de Largmor
vera el aumento del ngulo de precesin como una simple rotacin de M0
alrededor del campo aplicado, B1, que le parecera estacionario. Siempre que
existe un componente neto de M0 en el plano XY se genera una fuerza
electromotriz detectable en una bobina colocada alrededor de la muestra, que
puede ser la misma que emite la seal de radio. Esta fuerza electromotriz es origen
de la seal de RMN.

3. Comprobacin de que se ha producido la inclinacin:

Despus de aplicarse un pulso de 90 grados, el vector de magnetizacin
continua girando libremente en el plano XY de forma que genere una pequea
fuerza electromotriz, detectable por la misma bobina que trasmiti el impulso o por
otra bobina receptora. La seal emitida se denomina seal de induccin libre, o
amortiguacin de induccin libre. En trminos mecanocunticos la seal se
produce al caer los ncleos del nivel energtico excitado al estado fundamental o
nivel de menor energa.

Finalizado el pulso de excitacin, el vector de magnetizacin nuclear
termina por volver a su posicin original a lo largo del eje z. El retorno al equilibrio
se caracteriza por dos tiempos principales de relajacin: T1 y T2.




T2 recibe el nombre de tiempo de relajacin espin-espin o tiempo de
relajacin transversal. Los fenmenos de relajacin espin-espin afectan a la
duracin natural de la seal de induccin libre, durante la cual los diversos
componentes de magnetizacin en el plano XY se mantienen ms o menos en
fase. Cuando acaba el pulso de excitacin, los ncleos no slo perciben el campo
esttico externo sino tambin los campos locales asociados con las propiedades
magnticas de los ncleos vecinos, de forma que van adquiriendo un intervalo de
radiofrecuencias precesionales ligeramente diferentes, lo que provoca el desfase
de la seal de induccin libre. En un lquido, donde tomos y ncleos estn en
continuo movimiento, los campos magnticos internucleares responsables de la
relajacin de espin-espin tienden a cancelarse; La seal decae mucho ms
lentamente de lo que sucedera en un slido, en donde los ncleos se mantienen
esencialmente fijos en el espacio. En un lquido puro, T2 puede alcanzar una
magnitud de varios segundos. En un slido no suele durar ms de unos pocos
microsegundos; la propia rapidez con la que decae la seal, impide, por lo general,
que se la detecte.

Si el campo magntico esttico fuese perfectamente uniforme, bastara
medir la velocidad de amortiguacin en la seal de induccin libre para determinar
el valor de T2. No obstante, los campos generados por imanes reales casi nunca
son perfectos. Hasta las sutilsimas imperfeciones de los mejores imanes utilizados
para espectroscopa de RMN hacen que la seal de induccin libre decaiga con
mayor rapidez de lo que acontecera en presencia de un campo magntico
perfectamente homogneo. La constate de tiempo que define la velocidad real de
la amortiguacin de la seal de un campo imperfecto se designa por T*2 para
distinguirla del verdadero tiempo de relajacin T2.

A pesar de todo ello, podemos determinar el valor intrnseco de T
2
para una muestra aunque
est sometida a un campo
imperfecto, ya que las desigualdades del campo magntico son constantes, lo que permite
identificarlas y cancelarlas. Se
recoge la seal en forma de eco de espin o de una serie de ecos, aplicando un perfil especial
de pulso de
radiofrecuencias, conocido como la secuencia de pulsos Car-Purcell. En dicha secuencia, la
seal inicial de
amortiguacin de induccin libre y cada uno de los ecos de espin individual decaen con una
constante de tiempo T*
2
,
aunque las alturas del pico de los sucesivos ecos de espin decaen con una constante de tiempo
igual al valor intrnseco
de T
2
en la muestra.


4. Como se ajusta normalmente el aparato para conseguir alta resolucin en el
espectro de RMN?

La seal de absorcin es un pico mucho ms grande y afilado que la seal
de dispersin, e interfiere mucho menos con el resto de seales en un espectro
completo. Tambin se tiene que el rea integrable debajo de las seales de
absorcin es significativa, mientras que la de las seales de dispersin es cero.
Por estas razones, el control de fase del espectrmetro est siempre ajustado para
producir un espectro de absorcin con la mnima dispersin.

5. Por qu los espectrmetros de bobina nica tienen un nico control de fase?

Los espectrmetros empleados para trabajos analticos pueden realizar un
espectro muy rpidamente sin distorsin de las seales de RMN y sin perder
sensibilidad. Los barridos rpidos requieren un gran ancho de banda y permitir ms
ruido en el espectro. Los barridos lentos necesarios para una resolucin clara del
espectro se obtienen con componentes de baja frecuencia para producir las lneas
de absorcin de pasar a travs del detector de radio-frecuencias.

6. Dependencia de la seal de RMN de la amplitud de :

Se ha visto que






donde y son la relajacin trmica y la inversa (a veces llamada espn-
espn) del tiempo de relajacin y son propiedades de la muestra. La constante
se denomina Radio Magnetogrico y es para cuyo espn sea . es una
constante determinada por la concentracin de la muestra, a mayor concentracin
mayor momento magntico macroscpico. En el centro del pico de absorcin, la
expresin se reduce a





La dependencia de la seal de la intensidad de se muestra con la
siguiente grfica:



La seal aumenta linealmente conforme aumenta para niveles bajos de
energa. El mximo aparece de forma clara y se puede escoger para trabajar con
muestras de pequea concentracin el valor de correspondiente al mximo o
un prximo a l, y para muestras muy concentradas se escogen valores de
correspondientes a la parte lineal de la curva, ya que el ancho del pico de
absorcin en la mitad de mximo es





y aumenta del orden de para valores de

pequeos, los cuales hacen
que . Ms all de este punto continua incrementndose, incluso
llegando a ser directamente proporcional a

de una forma lineal.

El fenmeno de alcanzar el mximo se llama saturacin. El siguiente grfico
muestra como refleja esto un diagrama de energa. Las probabilidades de que un
ncleo absorba energa o sea estimulado para emitir la energa absorbida ser
proporcional al exceso de poblacin en el estado ms bajo. Como el valor de
aumenta, las poblaciones se igualan ya que los ncleos en el estado ms alto no
pueden volver al estado ms bajo por el proceso de relajacin trmica tan
rpidamente como se despuebla.




7. Intensidad de campo magntico o frecuencia:

Es algo ms simple generar un incremento lineal de la corriente que un
incremento lineal tanto positivo como negativo de la frecuencia. Adems, los
barridos de las frecuencias estn constantemente cambiando de fase en el
espectro, lo que produce ciertas dificultades. Por lo tanto, para la mayora de los
casos es preferible el campo magntico.

8. Efectos de un barrido en las lneas de absorcin:

El pico de las seales de absorcin viene dado por





el cual solo es vlido para barridos lentos, llamados de condiciones de transito
lento donde los ncleos permanecen en equilibrio. Normalmente es imposible
hacerlo tan lentamente; por lo tanto, la mayora de los espectros se realizan bajo
condiciones que no permiten a los ncleos estar en equilibrio con el campo
esttico Ho y el campo de radiofrecuencia H1 activado. En particular, despus de
atravesar la resonancia los ncleos continan su movimiento de precesin con una
frecuencia donde H es ahora mayor que Ho. La precesin termina en
un tiempo que es la constante de tiempo caracterstica del proceso natural de
relajacin de la muestra con el que se reestablece el equilibrio trmico, o es la
causa de que se produzca una perdida de coherencia en la fase de unos ncleos
con otros, es decir, T1 y T2. Durante este tiempo un decaimiento del voltaje de la
radiofrecuencia es inducido en la bobina receptora cuya frecuencia es .
Este tipo de frecuencia se denomina the wiggles (meneo) o ringing (zumbido), y
tiene la siguiente apariencia.




La lnea ancha se incrementa, despus cambia en la direccin del barrido y
sigue con un decaimiento de la oscilacin.

Estos efectos son inevitables con picos muy afilados pero se pueden
minimizar con escaneados muy lentos.


9. Importancia de la obtencin de un campo homogneo sobre toda la
muestra:

En 1951 Robert Gabillard, de la cole Normale Superiore de Pris, observ que la
seal de RMN se poda distorsionar en funcin de la forma y el tamao de muestra. El
fenmeno se atribuy, correctamente, a las desigualdades del campo magntico esttico. El
Grado de distorsion depende de la porcin de la muestra que esta sometida a las zonas no
uniformes del campo y de la magnitud de las desigualdades.

Si los ncleos en diferentes partes del volumen la muestra experimenta un campo
ligeramente diferente, la seal de estos ncleos sern distorsionados en una lnea ms ancha,
superponindose y unindose con otras lneas debido a los desplazamientos qumicos y al
acoplamiento espn-espn, con el resultado de la perdida de la informacin


Se ha realizado un gran esfuerzo en el campo de la espectroscopa RMN para
eliminar la influencia de la forma sobre la seal de RMN, fabricando para ello imanes con
campos cada vez ms estables y homogneos.

El motivo que ha impulsado el perfeccionamiento del campo esttico de los imanes
es el empeo de los espectroscopistas de RMN en medir el sutil desplazamiento qumico
de las muestras q contienen molculas de estructura compleja. Se supone que los ncleos de
una misma especie, sometidos a un campo magntico homogneo, dan una misma
frecuencia de resonancia, es decir, que aparece un pico nico y estrecho en el espectro de
frecuencias de RMN. Esto es cierto para los ncleos contenidos en molculas muy simples
(como los ncleos de hidrogeno en el agua pura). Sin embargo, para molculas mas
complejas, el campo magntico que rodea a algunos ncleos queda sutilmente alterado por
el apantallamiento de los electrones en los tomos adyacentes. Estas alteraciones provocan
ciertas alteraciones de la frecuencia que son caractersticas de ciertas conformaciones
moleculares, y que facilitan la determinacin directa de la estructura qumica.

Estos desplazamientos qumicos son muy pequeos, midindose en partes por
milln con respecto a la intensidad del campo magntico esttico; ello explica porque hay
tanto inters en la construccin de imanes con un campo altamente uniforme

El problema de especificar un campo magntico homogneo se simplifica
definiendo una serie de ejes cuyo centro est a medio camino entre las caras del dipolo y el
centro de un cilindro simtrico de aire hueco.




El eje paralelo al campo es el eje , mientras que el vertical es el eje y el
horizontal el eje .

La bobina de transmisin aplica un campo a lo largo del eje y la bobina receptora
est colocada en el eje

.

Los siguientes factores afectan a la homogeneidad:

a) Radio del cilindro hueco.
b) Perdida de carga en las caras del dipolo
c) Homogeneidad de los materiales magnticos en las caras de los polos.
d) Forma de las caras de los polos.
e) Susceptibilidad magntica de los materiales, incluida la celda de la muestra y la
propia muestra.
f) Diseo y ajuste de la corriente correctora usada para eliminar las
inhomogeneidades que permanecen despus de que los factores a-e estn optimizados.
g) Rotacin de la muestra.

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OTROS METODOS:

El anlisis radiactivo tiene su fundamento en la deteccin de las partculas
generadas en la descomposicin radiactiva de un istopo de un elemento. En general
todo proceso radiactivo produce electrones, positrones, partculas alfa, neutrones y
ocasionalmente fotones. La deteccin de estas radiaciones, que se lleva a cabo
mediante contadores de centelleo, ionizacin de un gas, desplazamiento de electrones
en un semiconductor o fotogrficamente, permite obtener resultados relacionables con
el tipo de istopo que se descompone.

La absorcin de partculas alfa se utiliza para el anlisis de mezclas
binarias de gases.

La absorcin de partculas beta por efecto de las colisiones
interelectrnicas se utiliza como detector de hidrgeno.

La espectroscopia Mssbauer o de resonancia gamma nuclear se basa
en el efecto Mssbauer. Los fotones gamma producidos por un ncleo son
extraordinariamente monocromticos y slo son absorbidos por un ncleo igual al
anterior. Pero como las diferencias energticas son muy pequeas, se puede lograr
absorcin dotando de movimiento al emisor o al receptor (efecto Doppler). Se ha
aplicado con xito a determinaciones de estructura trabajando siempre en estado
slido.

El anlisis por activacin radiactiva se emplea para la determinacin de
ncleos radiactivos procedentes de los de la muestra despus de que estos ltimos
han sido bombardeados con partculas alfa o con neutrones.

La dilucin isotpica se utiliza para el anlisis cuantitativo de un
constituyente en una mezcla cuando puede separarse en forma pura de la misma,
pero con rendimiento bajo. Se basa en aadir a la mezcla el mismo constituyente
radiactivo, proceder despus a la separacin y observar su actividad radiactiva.

El anlisis radiomtrico usado en la deteccin cuantitativa de trazas es una
valoracin simple entre el constituyente problema precipitado y una disolucin
radiactiva. La disminucin de la radiactividad una vez separadas las fases da como
resultado el anlisis cuantitativo de la traza.

La espectrometra de masas es un potente mtodo analtico que tiene su
principal aplicacin en anlisis orgnico cualitativo y cuantitativo. El principio de la
misma reside en el bombardeo de las sustancias bajo anlisis, en forma gaseosa, por
un haz de electrones rpidos que provocan la fragmentacin de sus molculas en
iones generalmente positivos. stos son acelerados antes de entrar en el
analizador propiamente dicho, consistente en un campo magntico que provoca la
reflexin de los fragmentos cargados proporcionalmente a la raz cuadrada de su relacin
masa/carga. Por la fragmentacin se puede deducir el tipo de compuesto bajo anlisis.
Actualmente es frecuente utilizar un espectrmetro de masas como detector de un cromatgrafo
de gases, lo que da al mtodo una aplicacin amplsima.

La resonancia magntica nuclear, utilizada ampliamente en el anlisis
estructural de qumica orgnica, se basa en la absorcin de radiacin
electromagntica en el campo de la radiofrecuencia por ciertos ncleos a los que se
han inducido niveles energticos por aplicacin de un fuerte campo magntico. Se
aplica a la mayora de compuestos orgnicos.

La resonancia paramagntica electrnica, o de espn electrnico,
tiene aplicacin como tcnica analtica en compuestos que presentan en su molcula
uno o varios electrones desapareados; por ello es especialmente adecuada en la
observacin de radicales libres. En principio del mtodo consiste en someter la
muestra a un campo magntico fuerte e inducir transiciones electrnicas entre los
niveles as generados, por absorcin de radiacin electromagntica.

La resonancia de cuadrupolo nuclear se basa en la absorcin de
radiofrecuencia por ciertos ncleos a los que se ha inducido, mediante un gradiente
elctrico, una distribucin en niveles energticos de su momento elctrico cuadrupolar.
Se emplea en slidos que contienen algunos istopos especficos, como son, por
ejemplo,
14
N,
35
A ,
37
Cl ,
79
Br,
81
Br y
127
I.

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ELECTROANALISIS: METODOS V0LTAMPER0METR1COS
1. OBJETIVOS:
a. Introducir mtodos de electroanlisis.
b. Comparar la sensibilidad de distintas tcnicas voltamperomtricas de anlisis.
c. Aplicar tcnicas voltamperomtricas a la determinacin simultnea cidos maleico y
fumrico (ismeros) en solucin acuosa. Analizar trazas de Ni(II) en la misma muestra.
2. INTRODUCCION:
Voltamperometra y polarografa
La voltamperometra es una tcnica electroqumica en la cual la corriente originada por una
reaccin de transferencia de electrones en la superficie de un electrodo se mide en funcin del
potencial aplicado al mismo. Para ello se aplica un programa de potencial (en funcin del
tiempo. [Link]. rampa lineal, onda cuadrada, etc.) y se observa el grfico resultante corriente m
potencial voltamperograma.
Las especies qumicas a analizar deben ser oxidables o reducibles sobre el electrodo
(electroactivas). El parmetro que controla este proceso (oxidacin o reduccin) es el potencial
del electrodo.
A la corriente que resulta de la reaccin electroqumica se la denomina corriente faradaica y se
buscan condiciones donde sta es proporcional a la concentracin. Adems, cuando se cambia el
potencial de electrodo aparece una corriente transitoria de carga o capacitiva que puede
enmascarar a la corriente faradaica. La corriente faradaica de reduccin (catdica) tiene, por
convencin en electroanlisis, signo positivo y la corriente de oxidacin (andica) signo
negativo.
Si la medicin voltamperomtrica se hace usando un electrodo gotero de mercurio, la tcnica se
denomina polarografia. Las gotas de mercurio exponen una superficie limpia, reproducible y de
rea definida a la solucin. La curva corriente - potencial deber reflejar cambios en la
concentracin de especies en solucin y no en la naturaleza de la superficie del electrodo para
que la tcnica sea til analticamente.
Celda y control del potencial
La celda de vidrio contiene la solucin a analizar y tres electrodos: electrodo de trabajo,
electrodo de referencia y contraelectrodo. En el electrodo de trabajo ocurre la reaccin de
inters y es el transductor de una informacin qumica en seal elctrica. El electrodo de
referencia tiene un potencial estable con respecto al cual se compara el potencial del electrodo
de trabajo. Los tipos ms comunes de electrodos de referencia son el electrodo de calomel
saturado y el electrodo de plata - cloruro de plata. El contraelectrodo o electrodo auxiliar es un
conductor qumicamente inerte tal como platino o grafito que permite la circulacin de corriente
entre el electrodo de trabajo y el contraelectrodo. No hay paso de corriente a travs del electrodo
de referencia.
Un potenciostato controla el potencial del electrodo de trabajo con respecto al electrodo de
referencia y mide la corriente en el electrodo de trabajo.
Adems de los electrodos, la celda deber poseer un sistema de purga de la solucin por
burbujeo de N
2
a travs de la misma. El oxgeno molecular es una especie reducible en el
intervalo de potenciales de trabajo y puede contribuir a la corriente medida. El N
2
deber
presaturarse con la solucin antes de burbujear en la celda para evitar prdidas por evaporacin
y se deber mantener una atmsfera saturada con N
2
sobre la solucin durante la medicin para
evitar el ingreso de oxgeno.
Consideraciones Generales
La muestra para el anlisis debe estar en solucin; algunas muestras pueden requerir
preparacin especial.
En general, se adiciona un electrolito soporte a la muestra antes de su anlisis para asegurar que
la corriente sea debida solamente a la difusin del analito y no a la migracin de los iones. El
electrolito soporte deber elegirse cuidadosamente para evitar interferencias y asegurar una
ventana adecuada de potencial. Deber, adems ser un reactivo de alta pureza y el volumen
adicionado depender del requerimiento analtico.
La respuesta en corriente (la forma del voltamperograma) depende del proceso de electrodo, de
las condiciones hidrodinmicas y del programa de potencial aplicado.
A los fines cuantitativos se compara, en las mismas condiciones experimentales, la respuesta de
la muestra con la respuesta de un patrn. La polarografia, en particular, tiene la ventaja de
trabajar muy bien con metales, iones, y sustancias orgnicas. Los potenciales de reduccin de
estas sustancias (potencial de media onda polarogrfico, E
1/2
) se encuentran tabulados en la
literatura y comnmente incluyen diferentes electrolitos para cada especie de inters.
Dependiendo (del programa de potencial empleado existen diferentes tcnicas
voltamperomtricas: tcnicas de corriente continua y tcnicas pulsadas.
Entre las primeras se encuentra la polarografa clsica (DC Polarography y Sampled DC
Polarography) y la voltamperometra de barrido lineal (Lineal sweep voltammetry, LSV).
Entre las tcnicas de pulso podemos citar: la polarografia o voltamperometra normal de pulso
(Normal Pulse Voltammetry, NPV), la polarografia o voltamperometra de pulso diferencial
(Differential Pulse Voltammetry, DPV) y la voltamperometra de onda cuadrada ( Square Wave
Voltammetry, SWV).
Describiremos brevemente aquellas que sern utilizadas en el trabajo prctico.
Voltamperometra de barrido lineal
Es una tcnica en la cual el potencial se vara linealmente con el tiempo en el intervalo de
inters. El barrido de potencial comienza a un potencial (E,) alejado del potencial formal (E
o
)
del analito para el que no se observa corriente faradaica. Cuando el potencial del electrodo
alcanza la cercana del potencial formal del analito en solucin, comienza la reduccin (o la
oxidacin) y se observa una seal de corriente faradaica. Cuando el potencial contina
creciendo (se vuelve ms reductor o ms oxidante segn el caso) el consumo del analito
aumenta y entonces el flujo a la superficie (y la corriente) aumentan. Cuando el potencial
excede al potencial formal, la concentracin superficial del analito finalmente cae a cero, el
transporte de masa del analito a la superficie alcanza su mxima velocidad (mxima corriente) y
luego declina por efecto del agotamiento de analito en la cercana del electrodo. Como resultado
se observa un pico de corriente (Fig.1).
La altura de pico es proporcional a la concentracin de analito. La corriente del pico-
voltamperomtrico es proporcional a la raz cuadrada de la velocidad de barrido del potencial.
La sensibilidad analtica de la tcnica es aproximadamente de 1 ppm. Es una tcnica muy til
para determinar potenciales redox y mecanismos de reaccin.
Voltamperometra de pulso diferencial
El programa de potencial combina una rampa lenta con una secuencia de pulsos de amplitud
fija. Los pulsos (AE), de 5 a 250 mV de amplitud, son repetidos durante el barrido de potencial
y duran alrededor de 50 ms. La corriente se mide dos veces: una vez justo antes de aplicar el
pulso (S
1
) y otra durante los milisegundos finales del mismo (S
2
) (Fig.2). La primera corriente
se resta instrumentalmente de la segunda por lo que el voltagrama de pulso es un grfico de
diferencias de corriente (i) en funcin del potencial antes de aplicar el pulso. El uso de pulsos
minimiza los efectos de la corriente de carga (capacitiva) y mejora la relacin seal - ruido con
lo cual mejora el lmite de deteccin. Cuando ambos potenciales, el potencial antes y el
potencial despus del pulso, estn lejos del potencial formal del analito en solucin no se
observar ningn cambio en la corriente faradaica. Sin embargo, cuando al menos uno de esos
potenciales se encuentra en la porcin de crecimiento de la corriente de la onda
voltamperomtrica, se medir una corriente faradaica significativa con esta tcnica. La
diferencia de corriente medida (i) proporciona al voltagrama diferencial una forma de pico
que. es anlogo a la derivada de la onda polarogrfica (ntese que el E es constante). La
corriente en el pico es una medida cuantitativa de la concentracin y el potencial en el pico
viene dado por la expresin:
E
mx.
= E
1/2
- E/2
Esta tcnica permite un incremento en el lmite de deteccin con respecto a la polarografia
clsica.
Voltamperometra de preconcentracin (Stripping voltammetry)
Esta tcnica voltamperomtrica es til para determinar especies inorgnicas u orgnicas a nivel
de trazas. Su rango de aplicacin se ubica entre las ppm y fracciones de ppb. Su aplicacin se
desarrolla en dos etapas. La primera etapa es la preconcentracin del analito en el electrodo de
trabajo, a potencial constante durante un cierto tiempo. En la segunda etapa se barre el
potencial de manera de reducir u oxidar la especie preconcentrada. Los voltagrama obtenidos
muestran corrientes de pico que se pueden correlacionar con la concentracin del analito en
solucin.
Teniendo en cuenta el tipo de preconcentracin a la que el analito es sometido, este tipo de
voltametra se clasifica en:
Voltametra de preconcentracin electroltica (VPE), y
Voltametra de preconcentracin no electroltica (VPNE).
Voltametra de preconcentracin electroltica: en este caso, cuando el analito es sometido al
potencial de preconcentracin se produce proceso faradaico (electrlisis). Si el analito es un ion
metlico, en esta etapa se lo reduce. En general se utiliza un electrodo formado por una gota
pendiente de mercurio (electrodo de gota pendiente de mercurio, EGPM, o Hanging Mercury
Drop Electrode, HMDE) y el metal reducido se incorpora al electrodo formando una amalgama:
Hg + M
n+
+ n e

M(Hg)
Tambin pueden utilizarse otro tipo de electrodos como el de pelcula delgada de mercurio
(Thin Film Mercury Electrode, TFME). Generalmente, esta etapa se realiza bajo agitacin
constante de la solucin.
En la segunda etapa (redisolucin) usa alguna tcnica voltamperomtrica, de ordinario
voltamperometra de barrido lineal, y en el sentido de potenciales positivos (andicos) para
redisolver l o los metales depositados.
Los aniones que forman sales insolubles con mercurio pueden ser analizados preconcentrando a
un potencial tal en que la reaccin sea:
Hg + X
-
Hg
2
X
2
+ n e

(X haluro, para sulfuro es similar).

La sal formada queda depositada sobre la superficie del electrodo, y es removida cuando el
potencial es barrido en sentido negativo (catdico) en la segunda etapa.
Voltametra de preconcentracin no electroltica: en este caso, al potencial de preconcentracin
no se produce proceso faradaico sino la adsorcin del analito sobre el electrodo de trabajo. En el
caso de iones inorgnicos lo que se adsorbe es un complejo del mismo. Este proceso se lo puede
indicar como:
[ML
n
]
z+
(solucin) [ML
n
]
z+
(adsorbido) (L: ligando).
En una segunda etapa se produce un barrido de potencial, en general en el sentido catdico, en
el que se produce un cambio en el estado de oxidacin del metal y/o el ligando.
Para el anlisis de compuestos orgnicos se procede en forma similar, pudiendo aplicarse esta
tcnica tanto en soluciones acuosas como no acuosas.
La mayor ventaja del mtodo, si se lo compara con el anlisis voltamperomtrico directo, es la
preconcentracin del material a analizar sobre el electrodo o en el electrodo, de manera que en
la etapa de redisolucin la concentracin superficial de analito es muy alta, mientras que en la
etapa de preconcentracin la concentracin de analito en la solucin es generalmente muy baja
y la velocidad del proceso queda limitado por el transporte de masa. Adems la corriente
durante la redisolucin est menos influenciada por la corriente de carga o por corrientes
residuales debidas a impurezas.
3. PARTE EXPERIMENTAL:
IMPORTANTE: Todo cl material a utilizar deber estar escrupulosamente limpio. Enjuagar
muy bien los electrodos con abundante agua Milli-Q, secar delicadamente los electrodos y el
soporte que los sostiene con papel tissue. La celda deber tambin enjuagarse con agua MilliQ y
dejar escurrir. Todo el material utilizado deber dejarse limpio y escurrido al finalizar el Trabajo
Prctico.
Cuando la celda sea vaciada para cambiar la solucin, el mercurio depositado en su fondo
deber descargarse en un frasco destinado a tal fin. No arrojar mercurio a la pileta.
La celda y los electrodos corresponden al modelo 303A Static Mercury Drop Electrode (EG&G
Princenton Applied Research). El instrumento a utilizar ser un potenciostato PAR 273A
(EG&G Princenton Applied Research). Consultar con el docente acerca del manejo del equipo y
el software de adquisicin.
Nota: existe software disponible para el tratamiento de los voltamperogramas adquiridos.
Consultar con el docente.
En todas las experiencias se utilizar el electrodo de mercurio de gota pendiente (HMDE) el
cual ser renovado automticamente para cada experimento. Consultar con el docente.
La ventana de potencial til para mercurio depende del electrlito soporte utilizado.
El lmite catdico (negativo) en solucin acuosa est determinado por la reduccin de H
3
O
+
mientras que el lmite andico (positivo) por la oxidacin del Hg (alrededor de 0.3V-0.6V
Ag/AgC1).
TRAER UN DISKETTE PARA
LLEVARSE LOS DATOS
ADQUIRIDOS
A- Determinacin simultnea de cido maleico y fumrico.
En presencia de iones amonio el anin
maleato es reducido a potenciales ms
positivos que el fumarato. Por esta razn
ambos cidos pueden ser determinados
simultneamente mediante PPD, o
voltametra de onda cuadrada (SWV).
Especificaciones:
Se cuantifica mediante agregado patrn.
Rango de concentraciones: cido maleico: 225 ppb-20ppm; cido fumrico: 500 ppb - 20pm.
Electrolito soporte: buffer fosfato 0.2 M + NH
4
Cl 1 M ajustado a pH 8.2.
Solucin patrn: mezcla de maleico y fumrico de 50 ppm en electrolito soporte.
Potencial de pico: cido maleico: -1.35 V vs SCE; cido fumrico: -1.6 V vs SCE.
Tcnica electroqumica: SWV. Se correlaciona la altura de pico con los agregados realizados.
Se usarn las siguientes condiciones instrumentales:
TABLA 1
CV o LSV
SWV
Tiempo de purga (PT) 40 s 40s
Velocidad de barrido (SR) 0.1 V/s y 1V/s -----
Altura de pulso (HP) ----- 25 mV
Frecuencia (FR) ----- 60 Hz
Incremento de potencial (SI) 1 o 2 mV 1 o 2 mV
Electrodo de trabajo (WE) Solid Solid
Potencial inicial (IP) -1 V -1 V
Potencial Final (FP) -1.7 V -1.7 V
Escala de corriente (CR) 1 - 10 A 10 A
Filtro (FL) LF LF
Procedimiento:
Proceder con la celda y electrodos como se indic anteriormente. Cargar en la celda 8,0 ml de
solucin buffer. Colocar la celda cuidadosamente en contacto con los electrodos y comenzar el
experimento. Purgar inicialmente durante 5 minutos.
Verificar que no se observen picos espurios aplicando un barrido de potencial (CV o LSV).
Registrar la lnea de base y verificar su reproducibilidad.
Realizar los agregados de solucin patrn y registrar por duplicado los correspondientes
voltagramas.
Para la lnea de base y los diferentes agregados se comparar la sensibilidad de la
voltamperometra de barrido lineal (LSV), o cclica (CV) y la voltamperometra de onda
cuadrada (SWV).
B- Determinacin de Ni(II) por voltametra de preconcentracin no electroltica.
Para determinar Ni(II) a nivel de trazas se utiliza la VPNE , siendo la especie que se adsorbe
sobre el electrodo el complejo de este metal con dimetiglioxima (DMG). Para ello se agrega el
volumen necesario de una solucin etanlica de DMG para lograr una concentracin 10
-4
M de
este compuesto en la solucin de trabajo. En estas condiciones se produce
Ni(II)+ 2 DMG

Ni(DMG)
2

En el potencial de preconcentracin (-0.6V vs Ag/AgCl) se produce la adsorcin del complejo
Ni(DMG)
2
. Finalizado el tiempo de adsorcin se produce un barrido de potencial en direccin
catdica (negativa) obtenindose un pico de corriente debido a la reduccin del complejo
adsorbido.
Procedimiento: Una vez finalizados los agregados patrn de maleico fumrico, se agregar
sobre la solucin 100l de solucin etanlica de DMG 10
-2
M. Luego de dejar homogeneizar,
con burbujeo de nitrgeno, se realizar la determinacin aplicando CV y SWV con las
condiciones indicadas en la tabla 2. Previo a realizar la adsorcin y posterior adquisicin de
datos se debe purgar manualmente; al detener la purga se debe generar la gota de mercurio en el
electrodo de trabajo y conectar al potenciostato a 1.2V durante 20s (consultar con el docente).
Con este procedimiento se limpia la superficie del electrodo de posibles especies adsorbidas que
pudieran interferir con la medida. Pasados lo 20s indicados se activa el programa de control y
adquisicin desde la computadora.
Se usarn las siguientes condiciones instrumentales:
TABLA 2
CV o LSV
SWV
Tiempo de purga (PT) ----- -----
Tiempo de adsorcin (CT) 60 s 60 s
Potencial de adsorcin (CP) -0.6 V -0.6 V
Velocidad de barrido (SR) 0.1 V/s y 1V/s -----
Altura de pulso (HP) ----- 25 mV
Frecuencia (FR) ----- 60 Hz
Incremento de potencial (SI) 1 o 2 mV 1 o 2 mV
Electrodo de trabajo (WE) Solid Solid
Potencial inicial (IP) -0.8 V -0.8 V
Potencial Final (FP) -1.3 V -1.3 V
Escala de corriente (CR) 1 - 10 A 10 A
Filtro (FL) LF LF
Para la cuantificacin de la cantidad de Ni(II) en la muestra deben realizarse agregados patrn
(solucin de Ni(II) de 10 ppm).
CUESTIONARIO
1. Explique por qu las tcnicas de pulso diferencial (DPP, DPV, SWV) son ms sensibles que
las que no utilizan pulsos.
2. Explique por qu los mtodos de preconcentracin son ms sensibles que otros mtodos
voltamperomtricos.
3. Qu limitaciones puede introducir el electrolito soporte en la aplicacin de estas tcnicas?
4. Cuando se determina simultneamente Cd
2+
y Pb
2+
se observa que si la concentracin de
ambos, en ppb es similar, la magnitud de la seal es muy diferente. Indique la causa de esta
observacin. Tenga en cuenta que los coeficientes de difusin de ambos iones son similares.
BIBLIOGRAFA
Libros de texto:
Douglas A. Skoog, James J. Leary, Anlisis Instrumental, cuarta edicin, Cap. 22. Mc. Graw-
Hill (1994)
Allen J. Bard, Larry R. Faulkner, Electrrochemical Methods, Fundaments and Applications.
Caps. 1, 5, 6, 10. Jhon Wiley & Sons, Inc. New York (1980).
Libros de consulta:
Peter T. Kissinger, William R. Heineman, Laboratory Thechniques in Electroanalytical
Chemistry. Marcel Dekker, Inc. (1996). (en biblioteca del INQUIMAE)
Figura 1
Figura 2
NDICE
ESPECTROMETRA DE ULTRAVIOLETA Y RADIACIN VISIBLE-INSTRUMENTACIN.. . .7
FUENTES DE RADIACIN .......................................................................................................................7
SELECCIN DE LA LONGITUD DE ONDA...........................................................................................10
CELDAS Y DISPOSITIVOS DE MUESTREO..........................................................................................27
DETECTORES............................................................................................................................................28
MDULOS DE LECTURA........................................................................................................................35
INSTRUMENTOS PARA LA FOTOMETRA DE ABSORCIN.............................................................36
3.2. REACTIVOS
3.2.1. ACIDEZ...............................................................................................................................................69
[Link]. TODOS LOS REACTIVOS DEBEN SER GRADOANALTICO.
3.2.1. SLIDOS TOTALES...........................................................................................................................74
Solucin estndar de EDTA 0.01 M Solucin estndar de calcio (1000 mg/L)
ESPECTROFOTMETRO DE INFRARROJO FT-IR...............................................74
CROMATGRAFO DE CAPA FINA CON DETECTOR DE IONIZACIN DE
LLAMA (TLC/FID)....................................................................................................75
CROMATGRAFO DE LQUIDOS (HPLC Y GPC)................................................75
La espectroscopia estudia la absorcin de radiacin electromagntica, como resultado de su
interaccin con la materia. Incluye tcnicas modernas como la de Rayos X, Ultravioleta (UV), Visible
(V), Infrarroja (IR), Resonancia Magntica Nuclear (RMN), Absorcin Atmica (AA), y Fluorescencia
Atmica.
Las investigaciones sobre la utilidad de la regin infrarroja del espectro electromagntico, fueron
iniciadas por el astrnomo Sir William Herschel, en 1800. Entre los aos 1930 y 40, H.W. Thompson y
G.B.B.M. Sutherland en Inglaterra, y J. Lecomte en Francia, aplicaron est tcnica a la elucidacin
de estructuras moleculares. Los avances instrumentales permitieron que en 1988 se introdujeran los
Espectrofotmetros con transformadas de Fourier, que vinieron a revolucionar la espectroscopia en
el infrarrojo.
Las aplicaciones de la espectroscopia incluyen una gran variedad de reas de inters para los
profesionales de la qumica. La enseanza, discusin y aplicacin de estos conocimientos, requiere de
la capacidad de integracin de diversos contenidos terico prcticos adquiridos. El contar con
materiales didcticos modernos como apoyo, que permitan al estudiante interactuar con estos
conocimientos y su aplicacin, que resulta de gran utilidad en el aprendizaje de las tcnicas de
espectroscopia y la interpretacin de sus resultados.
El presente programa interactivo en computadora, fortalece la descripcin de los eventos causados
por la absorcin de radiacin electromagntica en el infrarrojo, incorporando imgenes y
animaciones. Su objetivo es presentar la informacin de forma variada y atractiva, motivando al
estudiante a incursionar en el tema, convirtiendo el estudio de la espectroscopia, en un elemento
altamente favorable y en una actividad atractiva y verstDescripcin del Curso.................................77
Objetivos Generales:..............................................................................................................................77
Contenido Sinttico:...............................................................................................................................78
Contenido Detallado:.............................................................................................................................78
Mtodo de Enseanza.............................................................................................................................79
Cromatografa.........................................................................................................................................79
LA ESPECTROSCOPA...........................................................................................................................95
3.2. REACTIVOS. TODOS LOS REACTIVOS DEBEN SER GRADO ANALTICO. EL AGUA A UTILIZAR ES
DESTILADA..................................................................................................................................................137
ELECTROQUMICA................................................................................................................................142
HIDRLISIS Y LEYES DE FARADAY..................................................................................................143
IV. LA QUMICA HACIA LA CONQUISTA DEL SOL (ELECTROQUMICA Y
FOTOELECTROQUMICA)....................................................................................................................143
IV. LA CORROSIN INDUCIDA POR CONTAMINACIN DEL AGUA...........................................158
POTASIO MTODO POR FOTOMETRA DE FLAMA.....................................................................................170
.................................................................................................................................. 178
EXAMPLES..................................................................................................................................................184
BIBLIOGRAPHY...........................................................................................................................................185
CONTINUE EXPLORING................................................................................................................................185
MIRANDO HACIA EL FUTURO: EL ESPECTRMETRO RAMAN BUSCA MEJORAR LOS EXMENES DE TINTA. 187
AE = HV....................................................................................................................................................193
ESPECTROSCOPIA DE MASAS............................................................................................................193
ESPECTROSCOPIA DE INFRARROJO..................................................................................................194
ESPECTROSCOPIA ULTRAVIOLETA-VISIBLE (U.V.-VISIBLE).......................................................196
ESPECTROSCOPIA DE RESONANCIA MAGNETICO NUCLEAR DE PROTON (RMN 1H)..........197
ABSORCIN QUE IMPLICAN ELECTRONES D Y F.................................................................201
CUANTITATIVO............................................................................................................................................203
HIN............................................................................................................................................................206
[Link] DE LA ABSORCIN Y EMISIN ATMICA........................................................208
[Link] TERICOS...........................................................................................................208
ALGUNOS ESPECTROS I.R., LA MAYORA EN FASE GAS.........................................................216
Espectroscopa de Infrarojo..................................................................................................................216
ALGUNOS ESPECTROS ATMICOS EN FASE GAS......................................................................223
Espectroscopa Atmica........................................................................................................................223
ALGUNOS ESPECTROS RAMAN, LA MAYORA EN FASE GAS................................................225
Espectroscopa Raman..........................................................................................................................225
ALGUNOS ESPECTROS DE FLUORESCENCIA.............................................................................227
Espectroscopa Molecular de Fluorescencia........................................................................................227
ALGUNOS ESPECTROS ELECTRNICOS EN FASE GAS DE MOLCULAS DIATMICAS.
....................................................................................................................................................................229
Espectroscopa Electrnica..................................................................................................................229
ESPECTRO DE MICROONDAS DEL CLH. ROSA MARA MARTNEZ FERNNDEZ. MAYO
DE 1997.....................................................................................................................................................233
....................................................................................................................................................................239
....................................................................................................................................................................244
TRAER UN DISKETTE PARA LLEVARSE LOS DATOS ADQUIRIDOS......................................273
EN PRESENCIA DE IONES AMONIO EL ANIN MALEATO ES REDUCIDO A
POTENCIALES MS POSITIVOS QUE EL FUMARATO. POR ESTA RAZN AMBOS CIDOS
PUEDEN SER DETERMINADOS SIMULTNEAMENTE MEDIANTE PPD, O VOLTAMETRA
DE ONDA CUADRADA (SWV). ...........................................................................................................273
ESPECIFICACIONES: ..........................................................................................................................273
SE CUANTIFICA MEDIANTE AGREGADO PATRN....................................................................273
CV O LSV..................................................................................................................................................274
CV O LSV..................................................................................................................................................275
CUESTIONARIO....................................................................................................................................275
BIBLIOGRAFA......................................................................................................................................275
NDICE.....................................................................................................................................................276
SERIE 1
SOLUCIONES. PARMETROS ANALTICOS.................................................................................281
A)EXPRESIONES DE CONCENTRACIN. DILUCIONES...................................................................................281
B) BALANCE DE MASA. CONDICIN DE ELECTRONEUTRALIDAD................................................................282
SERIE 2
EQUILIBRIO CIDO BASE. SISTEMAS REGULADORES..........................................................284
A) EQUILIBRIO CIDO-BASE.......................................................................................................................284
B) SISTEMAS REGULADORES......................................................................................................................285
SERIE 3
ERRORES. TRATAMIENTO DE DATOS Y RESULTADOS............................................................287
A) PRECISIN Y EXACTITUD. ESTIMADORES..............................................................................................287
B) CIFRAS SIGNIFICATIVAS..........................................................................................................................288
C) TESTS ESTADSTICOS..............................................................................................................................289
i) Prueba de significancia....................................................................................................................289
ii) Prueba Q.........................................................................................................................................289
iii) Prueba F.........................................................................................................................................290
iv) Intervalo de confianza de la media.................................................................................................290
APNDICE 2. Valores F a un nivel de probabilidad de 95 %.............................................................291
APNDICE 3. Valores del coeficiente de descarte Q...........................................................................291
SERIE 4
SISTEMAS CIDO BASE. MEDICIONES CUANTITATIVAS.
CONCEPTO DE EQUIVALENTE QUMICO.....................................................................................292
A) CURVAS DE TITULACIN........................................................................................................................292
B) EQUIVALENTE CIDO-BASE...................................................................................................................293
C) INDICADORES CIDO-BASE.....................................................................................................................294
SERIE 5
EQUILIBRIO DE PRECIPITACIN...................................................................................................297
SERIE 6
SISTEMAS REDOX................................................................................................................................302
A). EQUILIBRIOS DE XIDO-REDUCCIN.....................................................................................................302
B) CURVAS DE TITULACION................................................................................................................303
C). VOLUMETRA REDOX.....................................................................................................................303
SERIE 7
COMPLEJOS...........................................................................................................................................306
A) COMPLEJOS.......................................................................................................................................306
B) COMPLEJOS -ACIDO BASE.............................................................................................................306
C ) COMPLEJOS-- PRECIPITACIN.....................................................................................................306
D) COMPLEJOS - PRECIPITACIN - ACIDO-BBASE........................................................................307
E) COMPLEJOS REDOX.........................................................................................................................307
F) CURVAS DE TITULACIN................................................................................................................308
G) VOLUMETRA POR FORMACIN DE COMPLEJOS.....................................................................................308
CROMATOGRAFA........................................................................................................................................315
Reparto..................................................................................................................................................316
Distribucin en contracorriente.................................................................................316
Adsorcin..............................................................................................................................................317
Identificacin .......................................................................................................................................321
Calibracin de la cantidad de muestra.......................................................................322
Visualizacin de la cromatografa........................................................................................................323
Identificacin........................................................................................................................................324
Eficacia de la columna.........................................................................................................................326
El cromatgrafo de gases.....................................................................................................................328
Resolucin del cromatograma...................................................................................330
Naturaleza de la fase lquida......................................................................................331
Introduccin de la muestra...................................................................................................................332
La matriz...............................................................................................................................................334
Naturaleza de las resinas......................................................................................................................334
Formacin de un intercambiador...............................................................................334
Resinas importantes...................................................................................................335
Caractersticas de las resinas.....................................................................................335
Reversibilidad y Selectividad................................................................................................................336
Formas de realizar cromatografas de cambio ionico..........................................................................336
BATCH..................................................................................................................... 336
COLUMNAS............................................................................................................337
Separacin de aminocidos..................................................................................................................339
Casos de incumplimiento..........................................................................................341
Separacin de pptidos y protenas......................................................................................................342
Lmite de exclusin de una columna.....................................................................................................343
Aplicaciones..........................................................................................................................................343
Formas de expresar el volumen de elucin................................................................344
Volumen relativo de elucin (VRE)...........................................................................344
Soportes y partculas............................................................................................................................344
Factores que condicionan la resolucin...............................................................................................345
Preparacin de la columna...................................................................................................................345
Muestra, tipos y volmenes...................................................................................................................345
Ventajas.................................................................................................................................................346
Caractersticas del ligando...................................................................................................................347
Matrices................................................................................................................................................347
Disociacin del complejo......................................................................................................................348
Ventajas.................................................................................................................................................348
El cromatgrafo....................................................................................................................................348
El soporte..............................................................................................................................................348
Posibilidades del HPLC........................................................................................................................349
1.1 Celda galvnica y electroltica.......................................................................................................352
NODO.....................................................................................................................................................355
CTODO..................................................................................................................................................355
4. POTENCIAL DE UNIN LIQUIDA..............................................................................................................355
ORGENES DE LA POLARIZACIN.................................................................................................358
Sobrepotencial...........................................................................................................358
A = COEFICIENTE DE ABSORTIVIDAD (CONSTANTE).....................................................................359
B = LONGITUD DEL CAMINO PTICO..........................................................................................................359
C = CONCENTRACIN .................................................................................................................................360
12.5 PROCEDIMEINTO PARA EL FUNCIONAMIENTO DEL PERKIN ELMER 2380.....................361
ESPECTROSCOPA...............................................................................................................................363
NUMERO DE CONTROL:.......................................................................................................................363
OCTUBRE 24 DEL 2001.........................................................................................................................364
Material y equipo..................................................................................................................................365
UTILIZACIN DE LOS DATOS..........................................................................................................370
PRCTICA N2.......................................................................................................375
* m:.......................................................................................................................... 377
PRACTICA N 3.......................................................................................................378
PRCTICA N 1....................................................................................................................................390
- MATERIAL: REACTIVOS:.....................................................................................................406
EL POTENCIAL DE LA CELDA ELECTROLTICA (POTENCIAL DE MEMBRANA), QUE ES EL QUE LEEMOS EN EL
POTENCIMETRO, VENDR DADO POR LA SIGUIENTE EXPRESIN:.............................................................410
PRCTICA N 5....................................................................................................................................429
SERIE 1
SOLUCIONES. PARMETROS
ANALTICOS
a)Expresiones de concentracin. Diluciones.
1.- Definir y escribir las unidades (cuando corresponda):
a) Unidad de masa.
b) Unidad de cantidad de materia.
c) Densidad.
d) Concentracin.
2.- Definir y escribir las unidades:
a) porcentaje en peso (%p/p)
b) porcentaje peso/volumen (% p/v)
c) "partes por milln" (ppm)
d) molaridad.
3.- Encontrar los factores para convertir:
a) % p/p en % p/v
b) % p/p en molaridad
c) molaridad en ppm
4.- Calcular las concentraciones finales si 10 mL de una solucin de HCl 5M se llevan a:
a) 20 mL. b) 50 mL. c) 100 mL. d) 1000 mL.
Qu dilucin se practic en cada caso?
5.- Se tiene una solucin 5
*
10
-3
M en NaOH. Calcule la concentracin final si se practican las
siguientes diluciones:
a)1:2 b) 1+1 c) 1:5 d) 1+9.
6.- Qu volumen de una solucin 0.600 M en HCl debe tomar para preparar 100 mL de una
solucin 0.150 M? Qu dilucin ha practicado?.
7.- Cul ser la concentracin de la solucin resultante de mezclar 3.60 mL de NaCl 0.100 M
con 5.50 mL de NaCl 0.160 M? (Admita que los volmenes son aditivos).
8.- Se disuelven 0.5 moles de CuSO
4
; 0.5 moles de Na
2
SO
4
y un mol de K
2
SO
4
en 2 L de agua.
Calcule la concentracin molar de cada uno de los iones en la solucin, suponiendo disociacin
completa.
9.- Cuntos mL de HCl (densidad 1.19 g/ml, y 38% p/p) se requieren para hacer 20 L de una
solucin 0.160 M?.
Dato: Mr HCl = 36,5.
10.- La densidad de una solucin 99.5 % p/p en cido actico es 1.057 g/ml. Cul es su
molaridad?.
Dato: Mr. HAcO = 60.
11.- a) A l8 C la concentracin de Pb
2+
de una solucin saturada en Pb(SCN)
2

es 0.0137 M.
Cuntos mg de sal hay en cada mL de esta solucin? Exprsela en ppm de SCN
-
.
Datos: Mr Pb(SCN)
2
= 323. Mr (SCN
-
) = 58.
b) La solubilidad del K
3
PO
4
en agua fra es 90 g/l00 mL. Exprsela en molaridad de K
+
y
de PO
4
3-
.
Dato: Mr K
3
PO
4
= 212
c) La solubilidad del K
3
Co(NO
2
)
6.
1 H
2
0 es 890 ppm. Exprsela en molaridad de la sal y
en mg/mL de Co(III).
Datos: Mr sal = 479. Mr Co = 59.
b) Balance de masa. Condicin de electroneutralidad.
12.- Exprese la condicin de electroneutralidad en cada una de las siguientes soluciones, en
trminos de las concentraciones molares de los iones, sin tener en cuenta las posibles hidrlisis.
a) 0.5 M en NaNO
3
. b) 0.35 M en BaCl
2
.
c) 0.01 M en Na
2
SO
4
. d) 0.05 M en NaOH.
e) 0.01 M en HNO
3
y 0.1 M en KNO
3
. f) 0.1 M en Al
2
(SO
4
)
3
g) 0.45 M en NaClO
4
y 0.3M en HClO
4
. h) 10
-3
M en H
3
PO
4
13.- a) Un litro de HCl 3.3 M se agita con cido benzoico, disolvindose 0.0152 moles del
cido. Exprese el balance de masa para la solucin.
b) 0.1 milimoles de KH
2
PO
4
se agregan a una cantidad de agua suficiente como para
obtener 4 mL de solucin. Exprese los balances de masa y la condicin de
electroneutralidad para la solucin.
c) Se prepara una solucin disolviendo 0.1 moles de H
2
SO
4
en una cantidad tal que se
obtienen 250 mL de solucin. Exprese el balance de masa y el balance de carga para la
solucin obtenida.
14.- Exprese el balance de masa y la condicin de electroneutralidad para una solucin que
resulta de mezclar 500 ml de AgNO
3
0.01 M con 500 mL de Na
2
S
2
0
3
0.02 M, admitiendo que no
aparece precipitado.
(Las especies presentes en solucin son: Ag
+
,Na
+
, S
2
O
3
2-
, Ag(S
2
O
3
)
2
3-
, H
+
, OH
-
, AgS
2
O
3
-
,
HS
2
O
3
-
y NO
3
-
)
15.- Exprese el balance de masa y la condicin de electroneutralidad para la solucin que resulta
de mezclar 250 mL de CuSO
4
0.01 M con 250 ml de NH
3
0.04 M, admitiendo que no aparece
precipitado. (Las especies presentes en solucin son Cu
++
, CuNH
3
2+
, Cu(NH
3
)
2
2+
, Cu(NH
3
)
3
2+
,
Cu(NH
3
)
4
2+
,CuOH
+
, NH
3
, SO
4
2-
, H
+
, OH
-
, Cu
2
(OH)
2
2+
, NH
4
+
)
16.- Se tiene una solucin de H
2
S0
4
65 % p/p y densidad 1.553 g/ml.
a) Qu volumen de sulfrico original debe tomarse para preparar 100 mL de solucin de
100 mg/ml en SO
4
2-
?
b) Cuntas diluciones 1:10 deben realizarse a partir de la solucin anterior para obtener la
primera reaccin negativa, si el L.C. del ensayo de identificacin usado es 10 ppm de
SO
4
2-
?
Dato: Mr H
2
SO
4
= 98
17.- El pLC para una reaccin de identificacin de cloruro es 7. Si. se tiene una solucin de HCl
de densidad = 1.11 g/ml y que es 22.33 % p/p, calcular cuntas diluciones 1:100 se debern
hacer para obtener la primera reaccin negativa para cloruro.
Datos: Mr Cl = 35.5. Mr H = 1.0
18.- Para la reaccin de identificacin de potasio con cobaltinitrito de sodio se encontr que el
L.I. es 2 microgramos en ensayo realizado a la gota (volumen 0.03 mL). Calcular el LC en ppm,
en g/mL y pLC.
19.- Para determinar la sensibilidad de la reaccin de identificacin Ag
+
con cromato se prepar
una solucin de Ag
+
al 0.1 % p/v. Se observ que la ltima reaccin positiva se obtiene
diluyendo (1+1) tres veces.. Calcular el L.C. en g/L y el L.I. en microgramos para una tcnica
que requiere 0.02 mL de solucin.
20. - De una solucin que contiene Cl
-
se toma una alcuota de 25.00 ml y se agregan 15 ml de
HNO
3
(dil) en un matraz de 100.0 ml con agua destilada. Se homogeneiza bien.
De esta segunda solucin se toma una alcuota de 25.00 ml y se la diluye con agua en un matraz
de 250.0 ml. Al determinar Cl
-
en una alcuota de 10.00 mL se encuentra una concentracin de
0.0202 g Cl % ml.
Calcular la concentracin de cloruro en la solucin original.
SERIE 2
EQUILIBRIO CIDO BASE.
SISTEMAS REGULADORES
a) Equilibrio cido-base.
1.- El producto inico del agua a 0
o
C es 1.1
*
10
-15
, a 25
o
C es 1.0
*
10
-14
y a 60
0
C es 9.6
*
10
-14
.
Calcule el pH del agua pura a las temperaturas mencionadas. Discuta, en funcin de estos
valores, la validez de la segunda cifra decimal en la medicin experimental del pH.
2.- Calcule la (OH
-
) y la (H
+
) de las siguientes soluciones acuosas de KOH:
a)5
*
10
-3
M. b) 9.9
*
10
-8
M. c) 10
-10
M.
Dato: Kw = 10
-14
.
3.- Calcule la (OH
-
)y la (H
+
) de las siguientes soluciones de HCl
a) 5.05
*
10
-8
M.b) 2.00
*
10
-9
M. c) 3.86
*
10
-3
M
4.- La constante de ionizacin del cido lctico es 1.4
*
10
-4
. Calcule el grado de ionizacin y la
concentracin de HL sin disociar en una solucin:
a) 1.00 M. b) 0.01 M.
5.- Cul es el pH de una solucin acuosa de H
2
SO
4
10
-2
M.
Dato: Ka
2
=2
*
10
-2
.
6.- Calcule el pH de una solucin 0.05 M de H
2
S.
Datos: Ka
1
= 10
-7
Ka
2
= 1.2
*
10
-15
.
7.- Calcule 1as concentraciones de todas las especies presentes en:
a) Una solucin 0.1 M en H
3
PO
4
Datos: Ka
1
= 7.1
*
10
-3
Ka
2
= 6.3
*
10
-8
Ka
3
= 4.4
*
10
-13
b) Una solucin 0.1 M en cido ctrico.
K
1
= 7.4
*
10
-4
K
2
= 1.7
*
10
-5
K
3
= 4.0
*
10
-7

8.- Calcular las concentraciones de todas las especies presentes en una solucin 10
-4
M en
Na
2
CO
3
.
Datos: Ka
1
H
2
CO
3
=4.10
-7
Ka
2
H
2
CO
3
=5.10
-11
9. - Se disuelven 1.20 g de HAcO en 200 mL de agua y 0.74 g de cido propinico en 50 mL. Al
mezclar ambas soluciones el volumen final es de 250 mL. Calcule el pH. Discuta la necesidad
de usar una ecuacin cbica para el clculo de la (H
+
), teniendo en cuenta la precisin del dato
obtenido.
Datos: Mr HAcO = 60. Ka HAcO = 1.8
*
10
-5

Mr HPr = 74. Ka HPr = 1.4
*
10
-5
.
10. - Se tiene una solucin de NH
3
28 % p/p y densidad 0.911 g/ml. Se toman 3 mL de las
misma y se llevan a 100 mL con agua. A esta solucin se agrega metilamina, y el pH final
resulta ser 11.7. Calcular el nmero de moles de metilamina agregados.
Datos: Kb NH
3
= 1.8
*
10
-5
. Kb CH
3
-NH
2
= 4.7
*
10
-4
. Mr C = 12. Mr N = 14. Mr H = 1.
11.- Calcular el pH de una solucin 10
-2
M en NH
4
CN.
Datos: pKa HCN = 9.31. Ka NH
4
+
=5,6.10
-10
12. - Calcular el pH y la (CO
3
2-
) de una solucin acuosa 10
-3
M en NaHCO
3
.
Datos:Ka
1
H
2
CO
3
= 4
*
10
-7
. Ka
2
H
2
CO
3
= 5
*
10
-11
13.- Calcule el pH de una solucin 0.1 M de (NH
4
)
2
S0
3
.
Datos: Ka
1
= 1.3.10
-2
. Ka
2
= 6.2.10
-6
b) Sistemas Reguladores.
14.- Calcule el pH de las siguientes soluciones acuosas:
a) 0.20 M en HAcO + 0.10 M en NaAcO. pKa= 4.75
b) 0.10 M en HF + 0.20 M en KF. pKa= 2.86
c) 0.10 M en NH
3
+ 0.05 M en NH
4
Cl pKa= 9.27
15.- Calcule el pH de las siguientes soluciones acuosas:
a) 0.05 M en HCl + 0.50 M en NH
3
. Kb = 2
*
10
-5

b)0.01 M en NaAcO + 0.01 M en NH
3
Ka = 2
*
10
-5
16.- Cmo preparara 200 mL de una solucin de pH =8 a partir de soluciones de NH
4
Cl y
NH
3
, ambas de concentracin 1.5 M? Suponga que los volmenes son aditivos.
Dato: Kb = 1.8.10
-5
17.- Calcule qu variacin de pH ocurre cuando a 1 L de solucin 0.5 M en NaAcO y 0.75 M en
HAcO se agrega 1 mL de NaOH 1 M.
Dato: pKa = 4.75
18.- Obtenga la expresin del poder regulador de una base fuerte. En qu se diferencia de la
correspondiente a un cido fuerte? A que pH es mnimo su valor? Cul es el poder regulador
del agua pura?
19.- Deduzca la expresin del poder regulador de una solucin 0.1 M de NH
4
AcO en funcin
del pH, y represntela grficamente. Comente.
20. - a) Calcular la variacin de pH que se producir al agregar 10 mL de HCl 0.1 M a 1 L de
una solucin que es 0.150 M en Na
2
SO
4
y 0.150 M en NaHSO
4
.
Datos Ka = 1.26
*
10
-2
.
b)Se disuelven 164 g de NaAcO y 120 g de HAcO glacial en 1 L de agua, y se homogeneiza. A
partir de esta solucin se preparan las siguientes soluciones diluidas:
Solucin A: por dilucin 1:2. Solucin B: por dilucin 1:20000.
Calcular el pH de las soluciones A y B y el que se obtendra si a fracciones de 10 mL de cada
una de stas se les agregan 10 mL de HCl 2
*
10
-2
M.
Datos: Ka = 2
*
10
-5
. Mr C = 12. Mr H = 1. Mr O = 16. Mr Na = 23.
21.- a) Calcular el pH de una solucin 2 M en NH
4
HS.
b) Qu valor tendr el poder regulador de esa solucin? Considera que es un buen
regulador a ese pH?
Datos: Ka
1
H
2
S = 10
-7
Ka

2
H
2
S = 10
-15
Kb NH
3
= 10
-5
22.- Una solucin es 1 M en cada una de las siguientes sustancias:HAcO, HF, NaF, y KAcO.
a) Cul es su pH?
b) Qu valor adquiere su poder regulador?
Datos: Ka HF = 10
-3
. Ka HAcO= 10
-5
.
23.- Se quieren preparar 500 mL de una solucin reguladora de pOH = 8.6
Se parten de 50 mL de una solucin 1 M en piridina. Qu volumen de HCl 1 M es necesario
agregar a esta solucin? Calcule, adems, el poder regulador.
Dato: pKb piridina = 8.8
24.- Se dispone de 1 L de NH
4
Cl y de 1 L de NH
3
ambos 1 M. Se necesita obtener una solucin
reguladora de pH = 9, y que no cambie en ms de 0.01 unidades de pH por agregado de 1 mL de
NaOH 1 M. Cmo la preparara? Suponga que los volmenes son aditivos.
Dato: pKb = 4.75
25.- Se desean preparar 100.0 ml de una solucin de pH=4.0 por adicin de una cantidad
adecuada de alguna de las siguientes sustancias a 10.0 ml de arseniato disdico 1.00 M.
i) NaOH 0.2 M; ii) HCl 0.1 M; iii) arseniato trisdico 1.00 M.
a) Indique cual de ellas seleccionara y qu volumen se requerir. Justifique su respuesta
b)Calcule la capacidad reguladora de la solucin resultante. Ser buena reguladora a
ese pH si se requiere una variacin no mayor de 0.01 unidades por adicin de 0.5 milimoles de
NaOH?
Datos: Cttes cidas del H
3
AsO
4
: Ka
1
=1,0
*
10
-2
Ka
2
=7,9
*
10
-5
Ka
3
=8,5
*
10
-10

26.- Se mezclan volmenes iguales de una solucin 0.100 M en HBO
2
y 0.0200 M en NH
3
.
Calcule el pH y el poder regulador de la solucin resultante.(Admita que los volmenes son
aditivos).
Datos: Ka HBO
2
=1.0
*
10
-10
Kb NH
3
=2.0
*
10
-5
SERIE 3
ERRORES. TRATAMIENTO DE
DATOS Y RESULTADOS
a) Precisin y exactitud. Estimadores
1.- Dados como datos las siguientes masas atmicas relativas:
Hidrgeno 1.00797
Cobalto56.94
Uranio 238.029
Suponga que la incertidumbre con la que se conoce cada dato en el ltimo dgito es de 1 .
a) Cul de los mismos se conoce con mayor precisin relativa?
b) Exprese la precisin de cada peso en partes por mil.
2.- Un analista A report los siguientes porcentajes de hierro en una muestra:
20.18, 20.25, 20.28, 20.30, 20.23 y 20.20.
Para esta serie de resultados calcule:
a) La media, la mediana, el rango, la desviacin promedio, la desviacin promedio
relativa (en partes por mil), la desviacin estndar y el coeficiente de variacin;
b) El intervalo de confianza de la media (para un nivel de significacin del 95 %),
primero a partir de la desviacin estndar, y despus a partir del rango.
3.- Un analista B report los siguientes porcentajes de hierro en la misma muestra del problema
2:
20.16, 20.30, 20.30, 20.42, 20.12 y 20.26
Para esta serie de resultados calcule:
a) La media, la mediana, el rango, la desviacin promedio, la desviacin promedio
relativa (en partes por mil), la desviacin estndar y el coeficiente de variacin;
b) El intervalo de confianza de la media (95 %), primero a partir de la desviacin
estndar, y despus a partir del rango -
4.- El valor de la National Bureau of Standards para el porcentaje de hierro en la misma muestra
de los problemas 2 y 3 es de 20.18.
a) Calcule los errores absolutos y relativos de los analistas A y B.
b) Qu puede decir sobre el trabajo de los dos analistas?
5.- La incertidumbre de cada lectura de una balanza semimicro es de 0.01 mg.
Al utilizar esta balanza: qu masa de muestra debe tomarse para que la mxima incertidumbre
relativa en el peso de sta sea de 2.0 partes por mil?
6.- Error constante En un cierto mtodo para determinar slice, SiO
8
, sta se precipita y se
pesa. Se encontr que la cantidad obtenida de SiO
8
siempre es de 0.4 mg en exceso, sin importar
el peso de la muestra tomada para el anlisis. Calcule el error relativo en partes por mil de una
muestra que contiene 10.0 % de SiO
8
, si la masa de la muestra analizada es de:
a) 0.100 g
b) 0.500 g
c) 1.000 g.
7.- Error proporcional. Se va a analizar el cloruro de una muestra por medio de una titulacin
con nitrato de plata. En realidad, la muestra contiene suficiente bromuro para ocasionar que la
cantidad de cloruro aparezca 0.10 % ms alta. Calcule el error que encontrara un analista en el
nmero de miligramos de cloruro de una muestra que contiene 20.0 % de cloruro, si la masa de
la muestra analizada es de:
a) 0.100 g
b) 0.900 g
c) 1.000 g.
Luego calcule el error relativo (partes por mil) ;en el nmero de miligramos de cloruro
encontrados.
b) Cifras significativas
8.- Especificar el nmero de cifras significativas y las indeterminaciones absolutas y relativas de
los siguientes nmeros:
NUMERO CIFRAS SIGNIF. IND. ABSOLUTA IND. RELATIVA
672.25 g
6.7225 g
0.0004 m
0.0004000 m
2.3*10
-4
0.23*10
-5

2.30*10
-5
9.- Calcular los pH correspondientes:
a) aH+ = 3.6
*
10
-3
pH =
b) (H+) = 7.862
*
10
-2
; f H
+
= 0.9 pH =
10.- A qu actividad de H
+
corresponden los siguientes pH?
a) pH = 7.5
b) pH = 7.50
c) pH = 1.50
11.- En una dada valoracin de cloruros por el mtodo de Charpentier -Volhard se llega a una
expresin del resultado final que es:
g Cl
-
% mL = (V
Ag
+
*
N
Ag
+
-V
SCN
-
*
N
SCN
-
)
*
Mr(Cl) 100
1000
*
Vm
Calcular el resultado, expresndolo con el nmero correcto de cifras significativas, para los
datos siguientes: VAg
+
= 15.26 mL;NAg
+
= 0,1002 eq/L
Vscn
-
= 4,27 mL; Nscn
-
= 0,1980 eq/L;Mr (Cl) = 35.453 g/mol;Vm=25.00 mL
12.- La valoracin de carbono en un acero dio los siguientes resultados :
0.0097, 0.0095, 0.0095, 0.0099, 0.0100, 0.0097 % C.
Cmo informara el resultado?
13.- Tres determinaciones de cobre en una muestra dan los siguientes resultados:
28.74; 26.76; 28.76 % Cu
Cmo debera informar el resultado?
C) Tests estadsticos.
i) Prueba de significancia.
14.- Utilizando dos mtodos de anlisis, se obtuvieron dos series de resultados para el
porcentaje de hierro contenido en un mineral . Los resultados son los siguientes:
Mtodo 1 Mtodo 2
X
1
= 15.34 % X
2
= 15.42%
S
1
= 0.10 S
2
= 0.12
N
1
= 11 N
2
= 11
(X = valor promedio)
a)Son significativamente diferentes las desviaciones estndar en el nivel de 95 %?
b)Son signifcativamente diferentes las dos medias:
i) en el nivel de 90 %
ii) en el nivel de 95 %
iii)en el nivel de 99%
Utilice 0.10 como valor de S al calcular t.
15.- Repita el problema 14 para el caso en el que la media del mtodo 2 es igual a 15.48 en
lugar de 15.42.
16.- Repita el problema 14 para S
1
= 0.05 y S2 = 0.06. Al calcular t utilice S = 0.05.
17.- Repita el problema 14 para S
1
= 5 y N
2
= 6.
ii) Prueba Q.
l8.- Un estudiante obtuvo los siguientes resultados para el porcentaje de hierro en un mineral:
15.44; 15.02; 15.60 y 15.42.
a) Puede descartarse alguno de estos resultados por medio de la prueba Q?
b) Qu valor debe reportarse como porcentaje de hierro en el mineral?
19.- Un estudiante obtuvo las siguientes resultados para la normalidad de una solucin:
0.1029; 0.1055; 0.1036; 0.1032 y 0.1024.
a) Puede descartarse alguno de estos resultados por medio de la prueba Q?
b) Qu valor debe reportarse para la normalidad?
20.- El estudiante del problema 19 realiza una estandarizacin adicional y obtiene una
normalidad de 0.1028. Se puede descartar ahora cualquiera de los resultados?
Explique por qu.
iii) Prueba F.
21.- A dos estudiantes se les da la misma muestra para que la analicen. El estudiante A realiza 11
determinaciones con una desviacin estndar de 0.04. El estudiante B lleva a cabo 7
determinaciones con una desviacin estndar de 0.09. La diferencia en las desviaciones estndar
implica una diferencia significativa en las tcnicas de los dos estudiantes?
22.- En el problema 21: qu desviacin estndar necesita ser la del estudiante B para que no
exista diferencia significativa en las tcnicas de los dos estudiantes?
iv) Intervalo de confianza de la media.
23.- Un qumico analiza el manganeso de un mineral y obtiene un valor de 7.54 % con una
desviacin estndar de 0.09. Calcule el intervalo de confianza de la media del anlisis ,para un
nivel 95 %, en base a:
a) cinco determinaciones.
b) diez determinaciones
24.- Suponga que el procedimiento utilizado para la valoracin de manganeso en el problema 23
se ha efectuado muchas veces, y que se conoce que la desviacin estndar del mtodo es de
0.09. Calcule el intervalo de confianza de la media si el resultado 7.54 se basa en:
a) cinco determinaciones.
b) diez determinaciones.
(Sugerencia: En la tabla del Apndice 1, utilice t para n = infinito)
25.- A partir de un gran nmero de determinaciones, se sabe que la desviacin estndar de un
mtodo para determinar la cantidad de hierro en el acero es de 0.10. Cuntas determinaciones
deben realizarse con este mtodo si:
a) El intervalo de confianza de la media (99 %) es 0.08?
b)El intervalo de confianza de la media (95 %) es 0,08?
APNDICE 1. Valores de la distribucin t de Student.
Nmero de
observaciones
Nmero de
grados de lib
Niveles de probabilidad
N n-1 50% 90% 95% 99%
2 1 1.000 6.314 12.706 63.66
3 2 0,816 2.929 4303 9,925
4 3 0,765 2.353 3.182 5.841
5 4 0.741 2.132 2.776 4.604
6 5 0.727 2.015 2.571 4.032
7 6 0.718 1.943 2.447 3.707
8 7 0.711 1.895 2.365 3.500
9 8 0.706 1.860 2.306 3.355
10 9 0.703 1.833 2.262 3.250
11 10 0.700 1.812 2.228 3.169
21 20 0.6687 1.725 2.086 2.845
0.674 1.645 1.960 2.576
APNDICE 2. Valores F a un nivel de probabilidad de 95 %.
n-1 para s
2
ms
pequeas
n-1 para s
2
ms grandes
3 4 5 6 10 20
3 9.28 9.12 9.01 8.94 8.79 8.66
4 6.59 6.39 6.26 6.16 5.96 5.80
5 5.41 5.19 5.05 4.95 4.74 4.56
6 4.76 4.53 4.39 4.28 4.06 3.87
10 3.71 3.48 3.33 3.22 2.98 2.77
20 3.10 2.87 2.71 2.60 2.35 2.12
APNDICE 3. Valores del coeficiente de descarte Q
Nm. de observ. Q (P=0,10)
3 0.94
4 0.76
5 0.64
6 0.56
7 0.51
8 0.47
9 0.44
10 0.41
SERIE 4
SISTEMAS CIDO BASE.
MEDICIONES CUANTITATIVAS.
CONCEPTO DE EQUIVALENTE
QUMICO
A) Curvas de titulacin.
1.- Calcule el pH resultante cuando a 25 mL de una solucin de HCl 0.1 M se le agregan:
a) 10 mL de NaOH 0.1 M
b) 15 mL de NaOH 0.1 M.
c) 25 mL de NaOH 0.1 M.
d) 30 mL de NaOH 0.1 M.
e) 39 mL de NaOH 0.1 M.
2.- Calcule el pH resultante cuando 100 mL de Ba(OH)
2
0.05 M son titulados con:
a) 50 mL de HCl 0.1 M
b) 100 mL de HCl 0.1 M
c)150 mL de HCl 0.1 M
3.- Calcule el pH resultante cuando a 10 mL de una solucin de HAcO 0.1M se le agregan:
a) 10 mL de NaOH 0.05 M.
b) 20 mL de NaOH 0.09 M.
c) 30 mL de NaOH 0.05 M.
Dato: Ka = 1.8
*
10
-5
4.- Calcule el pH resultante de aadir porciones sucesivas de 5 mL de
HCl 0.1 M a 25 mL de NH
3
0.1 M hasta un volumen total de 50 mL de cido.
Dato: Kb = 1.8
*
10
-5
5.- a) Dibuje la curva de titulacin pH vs grado de avance () (por qu?) en el mismo grfico,
para los sistemas considerados en los problemas 1 y 3, e indique qu forma tomara por:
i) diluir 10 veces el titulante
ii) diluir 10 veces el titulado
iii) diluir ambos.
b) Qu sucede en cada caso con el pH en el punto de equivalencia?
c) Cul ser el criterio de seleccin del indicador de punto final para todos los casos
contemplados en a)?
d) Seleccione un indicador de punto final para cada propuesta y calcule el error de
titulacin cometido, a partir de los correspondientes valores de pKa.
6.- Calcule el poder regulador del sistema del problema 3, para cada uno de los puntos, y
represente grficamente pH vs .
Compare el grfico, por superposicin, con la curva de titulacin.
7.- Se titulan 50 mL del cido dbil HA 0.1 M con una base fuerte de concentracin 0.1 M.
a) Calcule el valor mnimo de Ka para que, cuando se hayan adicionado 49.95 mL de
titulante, la reaccin entre HA y OH
-
sea esencialmente completa, (99.9 %) y que el
pH cambie en 2.00 unidades con la adicin de 2 gotas ms (0.10 mL) de titulante.
b) Repita el clculo para pH = 0.10 unidades.
c) Qu puede decir de la titulacin en el caso b) con un indicador visual?
8.- Se titulan 50 mL de HCl 0.10 M con NaOH 0.10 M. Calcule la fraccin de HCl neutralizado
a los siguientes valores de pH:
2.00; 3.00; 4.00; 5.00; 6.00; 7.00
Qu volumen de NaOH se requiere para cambiar el pH de 4.00 a 7.00?
9.- Se titula una muestra que contiene cido actico.
a) Cul es el pH de la solucin cuando el 99.9% del cido se ha convertido en acetato?
b) Suponga que se utiliza un indicador inadecuado y se detiene la titulacin cuando el
pH es 6.00. A este valor de pH, qu porcentaje de cido se ha convertido en acetato?
c)Si la muestra en realidad contiene 16.0 % de cido actico, qu valor se inform si se
cometi el error que se mencionado en b)
10.- Se titulan con NaOH 0.10 M, 2.5 mmol del cido dbil HAcO, Ka = 1
*
10
-5
. Calcule el pH
0.05 mL antes del punto de equivalencia, en el punto de equivalencia y 0.05 mL despus del
punto de equivalencia, para los casos en los que el cido se disuelve en un volumen de solucin
de:
a) 75 mL
b) 50 mL
c) 25 mL
11.- Repita el problema 10, pero comenzando con 5.0 mmol del mismo cido dbil.
12.- Una muestra de 1.600 g que contiene un cido dbil HAcO (Mr =62.0) se disuelve en 60
mL de agua y se titula con NaOH 0.250 M. Cuando la mitad del cido se ha neutralizado, el pH
es de 5.00 y en el punto de equivalencia es de 9.00. Calcule el porcentaje de HAcO en la
muestra.
B) Equivalente cido-base.
13.- Calcule el equivalente gramo de las siguientes sustancias, suponiendo neutralizacin
completa:
a) KHSO
4
b) As
2
O
5
c) CrO
3
d) ZnO e) NH
3
f) Tl
2
O
14.- Qu cantidad en gramos debe pesarse de cada una de las siguientes sustancias patrn, para
valorar una solucin 0.1 N de NaOH o HCl, y gastar 20.0 mL?
a)HgO b) Brax c)KIO
3
d)Na
2
CO
3
e)cido benzoico f)Biftalato de potasio
15.- Cul es la N como cido de una solucin 0.1 M de KHC
2
O
4
.H
2
C
2
O
4
.2H
2
O?
(Suponga neutralizacin completa)
16.- Una muestra de 0.3320 g de oxalato de sodio se descompuso en carbonato, y se necesitaron
24.76 mL de HCl para neutralizarla totalmente. Cul es la N del cido?
17- Una muestra de 2.020 g de ZnO impuro se pone en digestin con 100.0 mL de H
2
SO
4

0.5000 N, y el exceso de cido se neutraliza con 2.96 mL de NaOH 0.1372N. Calcular el % de
pureza de la muestra, suponiendo que slo contiene impurezas inertes.
Dato: Mr ZnO = 81,37.
18.- Una muestra de 0.077 g de una amina pura fue disuelta en cido actico y titulada con
cido perclrico en HAcO 0.1000 N (f = 0.818). Si se gastaron 10.10 mL para la neutralizacin,
calcular el peso equivalente de la amina.
c) Indicadores cido-base.
19.- Una muestra de 3.500 g que contiene NaOH y Na
2
CO
3
se disolvi en 250.0 mL. Una
alcuota de 50.00 mL requiere 41.70 mL de HCl 0.0860 N para virar la fenolftalena. Una
segunda alcuota de 50.00 mL se trat con BaCl
2
, para precipitar el carbonato. La solucin
necesit 7.60 mL de cido para virar la fenolftalena. Calcular el % de cada componente en la
muestra.
20.- Una muestra de 1.2000 g constituida por NaOH y Na
2
CO
3
que contiene impurezas inertes,
se disuelve y valora en fro con HCl 0.5000 N, empleando fenolftalena como indicador; la
solucin vira a incoloro despus de adicionar 30.00 mL de cido. Se agrega a continuacin
naranja de metilo, y se requieren 5.00 mL ms del cido para el viraje. Calcular el % de cada
componente.
21.- Una muestra de 1.2000 g de carbonato y bicarbonato de sodio (con impurezas inertes) se
disuelve y valora en fro con HCl 0.5000 N. Se requieren 15.00 mL del cido para virar la
fenolftalena. Se agrega naranja de metilo, y se requieren 22.00 mL ms. Calcular el % de cada
componente.
22.- Se entregan a un qumico para su anlisis diversas muestras, advirtindole que contienen
NaOH, Na
2
CO
3
, NaHCO
3
o mezclas compatibles de esas sustancias, junto con impurezas
inertes.
A partir de los datos que se indican a continuacin, identificar las sustancias y calcular el %
de cada una de ellas. En todos las casos se emplean muestras de 1.0000 g y HCl 0.2500 N.
Muestra 1: con fenolftalena se consumen 24.32 mL. Una segunda muestra requiri
48.64 mL con naranja de metilo.
Muestra 2: agregando fenolftalena no se produjo cambio de color, y con naranja de
metilo se consumen 36.47 mL.
Muestra 3: se consumieron 15.29 mL para que se produjera el viraje en fro de la
fenolftalena, y hubo que agregar 33.19 mL mas para la neutralizacin
completa.
Muestra 4: se valor con cido hasta desaparicin del color violeta de la fenolftalena,
consumindose 39.96 mL. Agregando un exceso de cido, hirviendo y valorando por
retorno con lcali, se comprob que el lcali era exactamente equivalente al exceso de
cido agregado.
23.- Una muestra que se sabe contiene Na
3
PO
4
, Na
2
HPO
4
,NaH
2
PO
4
, mezclas compatibles de
estas sustancias, junto con impurezas inertes, pesa 2.00 g. Al valorar esta muestra con HCl
0.500 N, en presencia de naranja de metilo, se consumen 32.0 mL. Valorando el mismo peso de
muestra con igual cido, en presencia de fenolftalena, se consumen 12.0 mL. Calcular la
composicin porcentual de la muestra.
24.- Una solucin contiene una mezcla compatible de dos de las siguientes sustancias: HCl,
Na
2
HPO
4
, H
3
PO
4
, NaOH. Al valorar con NaOH 0.5000 N, en presencia de fenolftalena, se
consumen 27.0 mL de base. Con naranja de metilo, el mismo peso de muestra consume 17.3 mL
del NaOH. Qu componentes y qu peso en gramos de los mismos, se encuentran en la
muestra?
25.- Se sabe que una solucin contiene: a)HCl y H
3
PO
4
; b)H
3
P0
4
y NaH
2
PO
4
, o los tres
componentes por separado. Una muestra valorada con NaOH consume A mL en presencia de
naranja de metilo, y el mismo peso de la muestra consume B mL del NaOH con fenolftalena.
Qu relacin matemtica debe existir entre A y B en el caso de tener la mezcla a), la b) o una
muestra c) con H
3
PO
4
puro?
26.- A una muestra de 3.000 g de carbonato de sodio impuro, que contiene KOH, se le agrega
fenolftalena; se requieren 38.66 mL de H
2
SO
4
0.5 N (f = 1.034) para hacerla virar. Se agrega
luego naranja de metilo y se completa la valoracin con 30.22 mL de cido. Calcular el % de
cada especie.
Datos: Mr KOH=56,00 Mr Na
2
CO
3
=106,00.
27.- 1.500 g de una muestra que contiene una mezcla de Na
2
CO
3
y NaHCO
3
ms impurezas
inertes, se lleva a 100.0 mL con agua destilada.
A una alcuota de 20.00 mL se agregan 20.00 mL de Ba(OH)
2
0,1500 M. Las reacciones son:
Ba(OH)
2
+ Na
2
CO
3
------2 NaOH + BaCO
3

Ba(OH)
2
+ NaHCO
3
----------NaOH + H
2
O +BaCO
3

Se separa el precipitado y el sobrenadante se titula con HCl 0.1200 M. Se requieren 33.34 mL
para virar la heliantina.
Otra alcuota de 25.00 ml de solucin original se titula con el mismo HCl e igual indicador
gastndose 41.70 mL.
a) Calcular la composicin porcentual de la muestra;
b) Cuntos mL de HCl se hubieran gastado en las dos titulaciones con fenolftalena
como indicador?
Datos: Mr NaHCO
3
=84.000 Mr Na
2
CO
3
= 106.000
pKa
1
y pKa
2
del cido carbnico: 6.70 y 11.0
IV heliantina = 3.5-4.5 IV fenolftalena =8.5-10.0
28.- Una muestra lquida contiene solamente HCl y Na
2
HPO
4
. Una alcuota de 25.00 mL
consume 28.00 mL, de NaOH 0.5002 N para alcanzar el punto final con heliantina como
indicador. Otra alcuota de 25.00 mL consume 36.00 mL del mismo NaOH hasta alcanzar el
punto final con fenolftalena.
a) Cul es la composicin de la muestra expresada en % p/v.
b) Cuntos mL de NaOH se consumiran hasta que vire la heliantina si la muestra fuera
equimolar en ambas especies. Justifique su respuesta.
Datos: [Link] H=1.000; Cl=35.500; Na=23.000; P=31.000; O= 16.000
pKas fosfrico = 2; 7; 12 IV heliantina:3.5- 4.5 IV fenolftalena :8.5-10
29.- Dibuje superpuestas las curvas de titulacin que se obtienen en los siguientes casos:
a) NaBO
2
0.1 M con HCl 0.1 M y b)HBO
2
0.1 M con NaOH 0.1 [Link] la forma
de las curvas obtenidas con un grfico vs PH.
b) Calcule el error de titulacin cometido si cada una de las titulaciones se detuvieran
una unidad de pH antes del punto equivalente. Comente los resultados obtenidos.
Dato: pKa HBO
2
= 9.5
30.- 25.00 mL de una solucin de HCl 0.5010 M requieren 15.25 mL de una solucin de NaOH
contaminada con Na
3
PO
4
para virar la fenolftalena. Otra alcuota de 50.00 mL de HCl
consumen 30.00 mL de la misma base para alcanzar el punto final con naranja de metilo.
Calcular la composicin molar del NaOH utilizado.
SERIE 5
EQUILIBRIO DE PRECIPITACIN
1.- Exprese el Kps en funcin de la solubilidad molar para los siguientes tipos de sales, sin tener
en cuenta los posibles procesos de hidrlisis:
a) MX b) MX
2
c) M
3
X
2.- Calcule la solubilidad del AgCl y del Ag
2
CrO
4
en NaNO
3
0.04 M (sin tener en cuenta
procesos de hidrlisis) si:
a) El factor de actividad es 0.70 para todos los iones.
b) El factor de actividad se considera igual a 1.0.
Datos: pKps AgCl = 9.70. pKps Ag
2
CrO
4
= 11.50.
3.- Si el Kps del PbSO
4
es 1.6
*
10
-8
y del PbI
2
es 1.1
*
10
-9
, calcular la solubilidad de estos
compuestos en moles/L y en g/100 mL.
Datos: Mr PbSO
4
= 303. Mr PBI
2
= 461.
4.- Una muestra de 0.500 g de AgCl se lava con 200 mL de agua destilada; qu fraccin de
muestra se ha perdido?
Datos: Kps AgCl = 10
-10
Mr AgCl = 143.5
5.- Se tienen dos porciones de 50 mL de solucin 0.02 M en Ag
2
SO
4
. A una de ellas se agregan
50 mL de K
2
SO
4
2 M, y a la otra, 50 mL de AgNO
3
2 M. En cul de ellas es ms pronunciado el
efecto de ion comn?. Considere que los volmenes son aditivos y que los procesos de
hidrlisis son despreciables.
Dato: Kps Ag
2
SO
4
. = 8
*
10
-3
6.- El pKps del MgF
2
es 8.18. Suponiendo despreciables los procesos de hidrlisis, calcule:
a) la solubilidad en agua pura.
b) la solubilidad en solucin de KF 0.10 M.
7.- Se agregan 25 mL de una solucin 0.5 M en KI a 25 mL de una solucin 0.25 M en AgNO
3
y
0.05 M en Pb(NO
3
)
2
. Cul es la concentracin de Pb y de Ag en el equilibrio?
Datos: Kps PbI
2
= 1.4
*
10
-8
Kps AgI = l.5
*
10
-16
8.- Los Kps del AgCl y del AgI son, respectivamente, 1.5
*
10
-10
y 1.5
*
10
-16
. Si se agrega
lentamente y agitando AgNO
3
slido a un litro de solucin 1 M en KCl y 0.1 M en KI, calcule:
a) La (Ag
+
) cuando comienza a precipitar AgI.
b) dem al comenzar a precipitar AgCl.
c) Cul precipita primero?
d) La (I
-
) cuando comienza a precipitar el AgCl.
e) El FS AgCl/AgI cuando precipit 1/10 del cloruro inicial.
f) El FR del AgI cuando comienza a precipitar el AgCl.
Considere que la disociacin es total y que no hay reacciones laterales.
9.- Se tienen 50 mL de una solucin que es 10
-2
M en I
-
y 2
*
10
-2
M en CrO
4
2-
a) Cuntos moles de nitrato de plata slido debern agregarse para que (Ag
+
) final sea
10
-4
M? (Admita que no hay procesos de hidrlisis).
b) Qu seal darn las reacciones de identificacin de I
-
y CrO
4
2-
si la concentracin

lmite propia de cada una de ellas es: para I
-
= 1 ug I
-
/mL; para CrO
4
2-
= 0.2 ppm de
Cr.
Datos: pKps AgI = 16. pKps Ag
2
CrO
4
= 12. Mr Cr = 92. Mr I = 127.
10.- Una solucin es 10
-2
M en BaCl
2
y 10
-2
M en SrCl
2
. Si se mezclan 100 mL de la misma con
200 mL de Na
2
SO
4
2
*
10
-2
M, qu fraccin de cada in precipita?
Datos: Kps SrSO
4
= 3.2
*
10
-7
Kps BaSO
4
= 1.1
*
10
-10
11.- Qu concentracin de Na
2
CO
3
sera necesaria como mnimo para transformar 10
-3
moles
de BaSO
4
en BaCO
3
si se usa un volumen de 100 mL? Despreciar hidrlisis del carbonato.
Datos: Kps BaCO
3
= 5.1
*
10
-9
. Kps BaSO
4
= 1.1
*
10
-10
12.- Se tienen 10 mL de una solucin 10
-2
M en FeC1
3
y 3
*
10
-2
en HCl. Se desea llevar esa
solucin a 100 mL agregando un volumen de NaOH 0.05 M (el mximo) como para que no
precipite xido frrico hidratado en la solucin final. Calcule el volumen de NaOH agregado.
Admita que no existen otras especies con Fe en solucin mas que Fe
3+
.
Dato: Kps Fe(OH)
3
= 10
-36
.
13.- 0.50 g de un sulfato soluble dieron 0.65 g de BaSO
4
. Cul es el % S en la muestra?
Datos: Mr S = 32. Mr O = 16. Mr Ba = 137.
14.- 500 mL de agua corriente dieron un residuo de 0.10 g de CaO. Calcular el contenido de
calcio en agua expresado en ppm de CaCO
3
.
Datos: Mr O = 16. Mr C = 12. Mr Ca = 40.
15.- 1.00 g de una muestra que contiene aluminio dieron 0.50 g de Al
2
O
3
. Calcular el porcentaje
de aluminio en la muestra.
Datos: Mr Al = 27. Mr O = 16.
16.- Indique los factores gravimtricos para convertir:
a) Mg
2
P
2
O
7
en MgO
b ) Fe
3
O
4
en Fe
2
O
3
c ) U
3
O
6
en U
d) B
2
O
3
en Na
2
B
4
O
7
. 10 H
2
O
e) (NH
4
)
2
PtCl
4
en NH
3
.
17.- Escribir los factores gravimtricos correspondientes a:
Pesado Buscado
a) Mn
2
P
2
O
7
Mn
2
O
3
b) CaCO
3
Ca(HCO
3
)
2
c) Pt KCl (KCl K
2
PtCl
6
Pt )
d) PbMoO
4
P
2
O
5
(P
2
O
5
(NH
4
)
3
PO
4
.12MoO
3
PbMoO
4
e) AgCl As (Ag
3
AsO
4
AgCl )
18.- Una muestra de 0.9172 g de oxalato de calcio anhidro se calent para descomponerla en
CaO y CO
2
. El residuo pes 0.4650 g. Se descompuso totalmente? Por qu?
19.- Se precipit una muestra de cido oxlico de 1.000 g con exceso de cloruro de calcio y se
calcin el precipitado lavado, hasta xido de calcio. El residuo pes 0.4402 g. Calcular el
porcentaje de H
2
C
2
O
4
en la muestra.
20.- Se precipita 1.000 g de Fe como Fe
2
O
3
hidratado. En la calcinacin se convierte el 90.00 %
del Fe en Fe
2
O
3
, pero el resto (impropiamente) se convierte en Fe
3
O
4
. Cuntos gramos pesa el
precipitado mal calcinado? Cunto pesara si todo el Fe estuviera como Fe
2
O
3
? Cul sera el
error porcentual de la determinacin?
Datos: Mr Fe
2
O
3
=159.70 Mr Fe
3
O
4
=231.55
21.- Un precipitado de 0.1500 g de SiO
2
impura contiene 1.8 mg de Fe y 0.2 mg de Ti
Si se parti de 0.5050 g de muestra:
a) Cul es el % de SiO
2
correcto?
b) Qu error se cometera si no se efecta la evaporacin fluorhdrica de la slice?
22.- A 50 mL de una solucin 0.10 M en NaCl se le agregan porciones de 5 mL de AgNO
3
0.10
M hasta un volumen de 100 mL de titulante. Calcule la concentracin de Ag
+
libre para cada
punto y haga un grfico pAg vs. mL de titulante agregado.
Dato: pKps = 10.
23.- a) dem al problema anterior partiendo de 50 mL de NaBr 0.10 M.
b) dem al punto a), diluyendo 10 veces titulante y titulado.
c) Compare las tres curvas de titulacin obtenidas.
Dato: pKps AgBr = 13.
24.- Un litro de solucin contiene 0.5 moles de Mn (II). Calcule la concentracin de protones
mnima necesaria para impedir la precipitacin del MnS cuando la solucin se satura con H
2
S.
Datos: Kps MnS = 10
-13
Pi H
2
S = 10
-23
25.- Se desean mezclar 100 mL de NH
4
OH 0.1 M con igual volumen de una solucin
0.02 M en MnCl
2
. Calcule el nmero mnimo de moles de NH
4
Cl que se deben agregar para
impedir la precipitacin del Mn(OH)
2
Datos: Kps Mn(OH)
2
= 4
*
10
-4
Kb NH
3
= 2
*
10
-5
.
26.- Se tiene una solucin con los iones A
+
y B
+
en concentracin 0.1 M para cada uno de ellos.
Se desea separar A
-
de B
+
que son precipitables con el reactivo HR. Este cido es gaseoso, y su
solubilidad en agua a temperatura ambiente es 10
-3
M. Con l se satura la solucin.
a) A qu pH debe regularse la solucin para que el FR de A sea 0,999?
b) Qu FS B/A se logra precipitando al pH fijado? (Calcule FS en la solucin).
Datos: pKa HR = 5 pKps AR = 10 pKps BR = 7.
27.- La sal BA tiene Kps = 10
-10
. Calcule el pH de mxima insolubilidad de la misma.
Datos: pKa HA = 5 pKb BOH= 6.
28.- Calcule el pH de una solucin saturada de SrCO
3
.
Datos: s SrCO
3
= 10
-3
g/100 mL MrSrCO
3
= 148
Kps SrCO
3
= 1
*
10
-9
Kps SrCO
3
=10
-9
Ka
1
H
2
CO
3
= 5
*
10
-7
Ka
2
H
2
CO
3
=6
*
10
-11
.
29.- Calcule la solubilidad molar del BaSO
4
en:
a) agua
b) solucin 10
-3
en H
2
SO
4
c) solucin 0.2 M en Na
2
SO
4
d)Solucin 10
-3
en Na
2
SO
4
Comente los resultados obtenidos.
Datos: Ka HSO
4
-
= 2
*
10
-2
Ka HAcO = 2
*
l0
-5
Kps BaSO
4
= 9
*
10
-11
.
30.- A que pH se igualan las solubilidades del AgCl y del AgCN? Admita que no se forman
otros compuestos cianurados de plata, y que siempre hay exceso de ambos precipitados.
Resuelva el problema grfica y analticamente.
Datos: pKps AgCl = 10 pKps AgCN = 16 pKa HCN = 9.
31.- Una muestra de 0.3000 g de una moneda de plata se disuelve en HNO
3
y se valora con
21.32 mL de KSCN 0.1013 N. Calcular el % de Ag.
Dato: Mr Ag = 107.900
32.- Una muestra de 100 mL de agua se valora segn Mohr y se gastan 17.66 mL de AgNO
3

0.0500 N. Calcular:
a) La normalidad en cloruro del agua.
b) El nmero de mg de NaCl por litro.
33.- En una titulacin de ioduros segn Volhard se agregaron 25.00 mL de una solucin de
AgNO
3
0.1 N (f = 1.012) y se titul por retorno con KSCN 0.05 N (f = 0.992) gastndose 3.25
mL. Calcular el resultado, expresado en ioduro de amonio.
34.- Para precipitar como BaCrO
4
0.5060 g de BaCl
2
.2H
2
O, se emplea una solucin de K
2
Cr
2
O
7

que es 0.1121 N como oxidante. Cul es la normalidad de la solucin de dicromato como
agente precipitante en esta reaccin? Cul es su normalidad como sal de potasio y qu volumen
se requiere?
35.- a) Cul es el nmero mnimo de moles de Ag
2
CrO
4
(s) que se deben agregar a 100.0 ml
de HNO
3
0.010 M para obtener una solucin saturada de dicha sal?
b) Cul es el PH de la solucin resultante?
(Admita que no hay variacin de volumen por la adicin de slido y que el H
2
Cr
2
O
7
se
comporta como fuerte en las dos disociaciones y el H
2
CrO
4
slo en la primera).
Datos: Ag
2
CrO
4
=8
*
10
-12
Ka HCrO
4
-
=7
*
10
-9
.
K (HCrO
4
-
)
2
/(Cr
2
O
7
2-
) = 2
*
10
-6
.
36.- a)Calcule el mnimo nmero de moles de AgAcO que habr que agregar a 100 ml de HCl
0.01 M para obtener una solucin saturada de dicha sal.
b) Cul es el pH de la solucin en equilibrio con el slido?
c) Datos: Kps AgAcO =10
-4
Kps AgCl = 10
-10
KaHAcO = 10
-5
.
Admita que la adicin de slido no produce variacin de volumen.
SERIE 6
SISTEMAS REDOX
a). Equilibrios de xido-reduccin
1.- Calcule el nmero de miliequivaentes de Fe
2+
que se oxidarn por:
a) 10 ml de H
2
O
2
0.9 M
b)100 ml de KMnO
4
0.04 M
c) 50 ml K
2
CrO
7
0.01 M
2.- Se tiene la siguiente pila:
(-)Co
0
/Co
2+
+(0,01M) // Cl
-
(1 M)/Cl
2
(1atm), Pt (+)
Cuando la pila comienza a funcionar se observa que el voltaje de la celda es 1.69 v y que el polo
(-) es el electrodo de cobalto.
a) Cul es la reaccin espontnea en la celda?
b) Cul es el potencial estndar de la cupla Co
2+
/Co
0
?
c) Cmo vara el potencial de la celda en funcin de la presin de Cl
2
?
d) Cmo hara para revertir el proceso?
Dato: E
0
Cl
2
/Cl
-
= 1.36 v
3.- Exprese el Kps del AgCl en funcin de los potenciales normales de los electrodos de
AgCl/Ag
0
y Ag
+
/Ag
0
Calcule el valor numrico.
Datos: E
0
AgCl/Ag
0
= 0.22 v. E
0
Ag
+
/Ag
0
= 0.80 v.
4.- Calcule:
a) El potencial normal de la reaccin:
Cu
2+
+ e
-
-----> Cu
+
b) El Kps del CuI.
Datos: E
0
Cu
2+
/Cu
0
= 0.337 v. E
0
Cu
+
/Cu
0
= 0,521 v. E
0
Cu
2+
/CuI = 0.86 v.
5.- Se tiene una solucin 10
-3
M de SbOCl en HCl 0.01 M. Se coloca un clavo de Fe y se espera
que se complete la reaccin.
a) Cul es la Keq. de la reaccin producida?
b) Cul es el pH final del sistema?
c) Precipitar Fe(OH)
2
en ese medio?
Datos: E
0
SbO
+
/Sb
0
= 0.212 v. E
0
Fe
2
+
/Fe
0
= -0.44 v. Kps Fe(OH)
2
= 10
-14
6.- Calcule la concentracin final de V
2+
,V
3+
y VO
2+
presentes en una solucin resultante de
disolver 7.85 g de VCl
3
en un litro de agua, si se lleva:
a) a pH = 1
b) a pH = 7.
Datos: E
0
V
3+
/V
2+
= -0.26 v E
0
VO
2+
/V
3+
= 0.36 v Mr VCl
3
= 157
7.- Para la pila:
Pt/H
2
(1 atm) / HA (0.1 M) // KCl (0.1 M)/AgCl, Ag
0
.
la diferencia de potencial es 0.46 volts. Calcular la constante de acidez de HA.
Dato: E
0
AgCl/Ag
0
= 0.22 v.
8.- a) Se tiene una solucin que es 0.001 M en Ce
4+
y 0.1 M en Ce
3+
. Analice analtica y
grficamente la dependencia del potencial de la solucin en funcin del pH.
b) Esta solucin se conecta por medio de electrodos de Pt y un puente salino a una
solucin que es 0.01 M en Mn
2+
, con MnO
2
precipitado.
Calcule analtica y grficamente el pH al cual el electrodo de la cupla Ce
4+
/Ce
3+
cambia de
polaridad, si se establece como condicin que el pH de ambas soluciones sea el mismo.
Datos: Kps Ce(OH)

4
= 10
-55
Kps Ce(OH)
3
= 10
-22
Kps Mn(OH)
2
= 10
-14
.
E
0
Ce
4+
/Ce
3+
=1,61 v E
0
MnO
2
/Mn
2+
= 1.23 v
B) CURVAS DE TITULACION
9. - a) Calcule la curva de potencial vs volumen agregado cuando a 50 mL de Fe(II) se los
titula con solucin de Ce(IV) 0.10 M en H
2
S0
4
1.0 M.
E
0
Fe
3+
/Fe
2+
=0,77 v E
0
Ce
4+
/Ce
3+
=1,44 v.
b) Calcule el potencial en el punto de equivalencia. Comprelo con los E
0
.
10. - a) Calcule la curva de potencial vs volumen agregado cuando a 50 mL de Fe(II) 0.10 M
se los titula con solucin de Cr
2
O
7
2-
0.10 M en H
2
SO
4
1.0 M
Dato: E
0
Cr
2
O
7

2-
//Cr
3+
= 1.33 v . E
0
Fe
3+
/Fe
2+
= 0.77 v. (Admita (H
+
)=1M=constante)
C). VOLUMETRA REDOX
12.- Calcule el peso equivalente de los siguientes reductores:
a) H
2
C
2
O
4
.2 H
2
O
b) FeSO
4
.7 H
2
O
c) H
2
d) H
2
S (oxidado a sulfato)
e) Na
2
S
2
O
3
(oxidado a S
4
O
6
=
)
f) K
4
Fe(CN)
6
(como reductor y como precipitante de Cd
2+
)
13.- Calcule el peso equivalente de los siguientes oxidantes:
a) KMnO
4
(a Mn
2+
y a MnO
2
)
b) K
2
Cr
2
O
7
c) KIO
3
d) As
2
O
5
(a As
3+
)
e) H
2
O
2
f) K BrO
3
(a Br
-
)
g) Na
2
S
2
0
8
(a sulfato)
14.- Una solucin ferrosa contiene 1.176 g del compuesto FeSO
4
.(NH
4
)
2
SO
4
.6H
2
0 en 30,00 mL.
Otra solucin contiene 0.2940 g de dicromato de potasio en 20.00 mL. Determinar:
a) La normalidad de la solucin ferrosa como reductor.
b) La normalidad del dicromato como oxidante.
c) El volumen de dicromato que equivale a 1.00 mL de la solucin ferrosa.
15.- Un acero que contiene 0.90 % de Mn se analiza por los tres mtodos que se citan a
continuacin. En todos los casos se parte de una muestra de 2.50 g y de solucin 0.0833 N de
permanganato de potasio (valorado en medio cido) y 0.100 N de FeSO
4
. Calcular en cada caso
el volumen de permanganato que se consume.
a) El Mn
2+
se oxida a MnO
4
-
con bismutato y despus de reducirlo con 25 mL de FeSO
4

patrn, se valora el exceso de Fe(II) con una solucin (patrn secundario) de
KMnO
4
.
b ) El Mn
2+
se oxida a MnO
2
con perclorlato de potasio, se filtra y disuelve en 25 mL de
FeSO
4
patrn. El exceso de Fe(II) se valora con KMnO
4
en medio cido.
c )El Mn
2+
se valora directamente con KMnO
4
en una solucin que se mantiene neutra
con ZnO.
Dato: Mr Mn=54.938
16.- Se toman 10.00 mL de una solucin de agua oxigenada y se llevan a 100.0 mL con agua
desti1ada. Una alcuota de 20.00 mL se trata con exceso de KI y H
2
SO
4
. El iodo liberado se
titula con 30.00 mL de tiosulfato de sodio 0.100 N. Calcular el % (p/v) de H
2
O
2
y los volmenes
de la misma en la solucin original .
Dato: Mr H
2
O
2
=34.000
17.- El azufre de una muestra de 4.00 g de acero se desprende como H
2
S y se valora con 1.60
mL de solucin de iodo 0.0500 N. a) Cul es el % de S en el acero? b) A cuntos gramos de
As
2
O
3
equivale 1.00 mL de la solucin de iodo? c) Cuntos mL de iodo reducirn a 40.00 mL
de una solucin de tiosulfato de sodio tal que, 1.00 mL equivale a 0.006354 g de Cu? d) Qu
volumen de solucin de iodato/ioduro, que contiene 10.0 milimoles de KIO
3
y 50.0 g de KI por
litro, ser necesario para valorar el H
2
S de 5.00 g del acero citado?
Las reacciones que ocurren son:
H
2
S + I
2
-----> S + I
-
+ 2 H
+
AsO
3
3-
+ 2 HCO
3
-
+ I
2
----> AsO
4
3-
+ 2 I
-
+ 2 CO
2
+ H
2
O
2 Cu
2+
+ 4 I
-
----> 2 CuI + I
2
IO
3
-
+ 5 I
-
+ 6 H
+
----> 3 I
2
+ 3 H
2
O
Datos: Mr S=32.000 Mr As
2
O
3
=197.84 Mr KI=166.00
18.- Una muestra de 1.0000 g de un polvo blanqueador, se disuelve en agua y se trasvasa a un
matraz de 100.0. ml. A 10.00 mL de suspensin se agrega un exceso de KI, se ajusta el medio
con sulfrico 4 N y se valora con una solucin de tiosulfato de sodio gastndose 33.81 mL.
La solucin de tiosulfato se valor con una masa de 49.03 mg de dicromato de potasio,
emplandose 20.00 ml en la titulacin. Calcular el % de cloro activo en la muestra.
Datos: Mr Cl
2
=70.91 Mr K
2
Cr
2
O
7
=294.20
19.- Se disuelven 2.300 g de sulfato de amonio impuro, y se llevan a 250.0 ml. A una alcuota
de 25.00 ml se agregan 50.00 ml de KBrO 0.1000 M en medio alcalino, que reaccionan segn:
2 NH
3
+ 3 BrO
-
-----> N
2
+ 3 Br
-
+ 3 H
2
O.
El exceso de BrO
-
se hace reaccionar con KI en medio cido:
BrO
-
+ 2 I
-
+ 2 H
+
-----> I
2
+ Br
-
+ H
2
O.
El iodo liberado consume 7.50 ml de tiosulfato de sodio 0.0600 M.
I
2
+ 2 S
2
O
3
2-
-----> 2 I
-
+ S
4
O
6
2-
.
Calcular el porcentaje de sulfato de amonio en la muestra original.
Datos: Mr (NH
4
)
2
SO
4
= 13200.
20.- A qu pH se debe regular una solucin 0.0020 M en K
2
Cr
2
O
7
para que el 80.0 % del
mismo se reduzca a Cr(III) cuando se mezclan 100.0 ml de esta solucin con igual volumen de
una solucin 0.00120 M en I
2
y 0.020 M en KI?
Datos: E
0
Cr (VI)/Cr (III) = 1.25 v. E
0
I
2
/I
-
= 0.58 V
SERIE 7
COMPLEJOS.
A) COMPLEJOS
1. - Calcular la concentracin de Ag
+
cuando una solucin 0.01 M en AgNO
3
es llevada a
0,1 M en NH
3
total.
Datos: Ki Ag(NH
3
)
2
+
=6
*
10
-8
KbNH
3
= 2
*
10
-5
.
2.- La Ki del complejo Ag(CN)
2
-
es 2
*
10
-19
. Calcule la concentracion de Ag
+
en una solucion:
a) 0.01 M en Ag(CN)
2
-
b) 0.01 M en Ag(CN)
2

-
y 0.001 M en CN
-.
Suponga despreciable la hidrlisis del CN
-.
3. - Calcule las concentraciones de todas las especies en solucin cuando se mezclan 500
mL de Me(NO
3
)
2

2.10
-3
M con 500 ml de solucin:
a) 2.10
-2
M en KI
b) 2.10
-3
M en KI
Datos: Ki MeI
4
2-
= 2.10
-30
B) COMPLEJOS -ACIDO BASE
4.- Se tiene una solucin 0.1 M en el complejo MX
2
cuya constante de inestabilidad
es 10
-21
. Calcule el pH necesario para que el 10 % del complejo se halle disociado.
Datos: Ka HX = 10
-9
5.- Se tiene una solucin que es 0.1 M en el complejo AX. Calcular cul es el % de complejo
que queda sin disociar si se regula la solucin a pH = 1.0.
Datos: Ki = 10
-44
Ka HX = 10
-10
C ) COMPLEJOS-- PRECIPITACIN
6.- A partir de 4*10
-4
mo1es de Ag X precipitado se quieren preparar 100 mL de una solucin de
Ag
+
. Determine el mnimo volumen de tiosulfato de sodio 0.1 M que ser necesario agregar
para disolver dicho precipitado y obtener la solucin.
Datos: pKi Ag(S
2
O
3
)
2
3-
= 13.4 pKps AgX = 12.1
7.- A una solucin 0.01 M en Cu
+
y 10
-4
M en Cd
2+
se le agrega KCN hasta tener un exceso de
cianuro de 0.02 moles/litro, sin producir variacin de volumen. Se pasa H
2
S (g) hasta que la
concentracin de sulfuro es 0.01 M. Cul de los dos iones precipitar como sulfuro? Considere
despreciables los procesos. de hidrlisis.
Datos: pKps Cu
2
S = 46 pKps CdS = 29
pKi Cu (CN )
4
3-
= 27 pKi Cd(CN)
4
2-
= 19
8.- Se tienen 10
-5
moles de Fe (OH)
3
precipitado. Calcule:
a) El pH necesario para disolverlos en 20 mL.
b) dem, si la solucin final fuese 0.1 M en F
-
libre.
(Considere despreciable los procesos de hidrlisis)
Datos: pKps Fe(OH)
3
= 38 pKi FeF
2+
= 5.5
D) COMPLEJOS - PRECIPITACIN - ACIDO-
BBASE.
9.- Si a 1 litro de una solucin 2 M en NH
4
Cl y 1 M en NH
3
se, le agregan 10
-3
moles de
Ni(NO
3
)
2
. Precipitar el Ni(OH)
2
?
Considere que el volumen, no vara por el agregado de slido.
Datos: pKps Ni(OH)
2
= 15 Ki Ni(NH
3
)
6
+2
= 2
*
10
-9
Kb NH
3
= 2
*
10
-5
10.- A 10 mL de una solucin 2 M en HAcO y 10
-3
M en Pb(NO
3
)
2
se le agregan 10 mL de
sulfato de sodio 0.01 M. Precipitar el PbSO
4
? Considere que los volmenes son aditivos. A
la solucin anterior se le agregan 0.02 moles de NH
3
. Precipitar el PbSO
4
? Considere que no
hay variacin de volumen por el agregado del NH
3
. Suponga despreciable la hidrlisis del
SO
4
2-
.
Datos: Kps PbSO
4
= 10
-8
Ki Pb(AcO)
4
2-
= 10
-3

Ka HAcO = 2
*
10
-5
Kb NH
3
= 2
*
10
-5
11.- Cul es el mximo pH al que se puede llevar una solucin 0.05 M en Mg
2+
y 0.01 M en
Na
2
H
2
Y para que no precipite Mg(OH)
2
?
(Admita que el nico complejo que se forma es MgY
=
)
Datos: pKas del H
4
Y
=
: 2; 3; 6; 10
Ki MgY
=
= 10
-8
pKps Mg(OH)
2
= 10
E) COMPLEJOS REDOX
12.- En un electrodo ocurre la siguiente reaccin:
ML
2
4+
+ e
-
--------> ML
2
3+
donde L es un in ligante. Escriba su potencial en funcin de las constantes de
inestabilidad de los dos iones complejos y del E
0
M
6+
/ M
5+
13.- Se tiene la siguiente pila:
Pt/Fe( III) (0.1M), Fe( II) (0.01M)// Cu( II) (0.001 M), H
+
(10
-5
M)/Cu
Se agrega NH
3
en el compartimiento de la izquierda hasta pH = 7. Qu concentracin de
NH
3
se deber agregar a la derecha para que no circule corriente?
Datos: Kps Fe(OH)
3
= 10
-38
Kps Fe(OH)
2
=10
-14
Kps Cu(OH)
2
= 2
*
10
-20
KbNH
3
=2
*
10
-5
Ki Cu(NH
3
)
4
2+
=10
-12
.
E
0
Fe
3+
/Fe
2+
=0.77 v E
0
Cu
2+
/Cu
0
=0.33v
F) CURVAS DE TITULACIN
14.- a) Calcule la curva de titulacin cuando a 50 mL de Mg
2+
10
-2
M regu1ados a pH = 10
se titulan con Na
2
H
2
Y 10
-2
M.
b) Qu forma adquiere por dilucin 1:10 de titulante y titulado?
Dato: Kf MgY
=
= 6.17*10
8

15.- a) Calcule los valores de pCu para los grados de avance 0 ;0.5; 1.0 y 1.5 cuando se
titulan 50.00 ml de Cu (II) 0.0200 M con EDTA de igual concentracin a pH regulado =
9.0. Dibuje la curva de titulacin obtenida.
b) Cmo vara cualitativamente la curva de titulacin si trabaja a pH regulado en 7.0?
Justifique. (Admita que los procesos de hidrlisis y/o complejacin del Cu
2+
con el
buffer son despreciables).
c) Si el control de pH=9 del punto a) se realiza con buffer NH
3
/NH
4
+
0.5 M; cmo se
modificara cualitativamente la curva de titulacin.
Justifique su respuesta.(Admita que solo se forma el complejo 1:4).
Datos: KiCuY
2-
= 10
-18
; pK's H
4
Y(EDTA) = 2; 4; 6 y 10.
pKi Cu(NH
3
)
4
2+
= 11.6; pKbNH
3
5.0; pKps Cu(OH)
2
=11.
pKi CuY
=
=18.0.
G) VOLUMETRA POR FORMACIN DE
COMPLEJOS
16.- Una muestra contiene, en solucin, KCl y CdCl
2
. Se titulan 25.00 ml con 28.9 mL de
solucin de Ag NO
3
0.1600 N. Otra alcuota de 50.00 ml se titula con 15.10 ml de solucin
0.1500 M de EDTA. Calcular la concentracin de ambas sales en solucin (g/100 ml)
Datos: Mr KCl =74.55 Mr CdCL
2
=183.31.
17.- Se disuelven 0.4644 a de carbonato de calcio en HCl y se diluye a 1 litro. Si una alcuota de
50.00 mL de esta solucin consume 31.40 ml de EDTA. Cul ser el contenido (en ppm) de
CaCl
2
de 50.00 ml de una muestra que requiere 19.20 mL de la misma solucin de EDTA?
Dato: Mr CaCO
3
= 100.09
18.- Una muestra de 0.5000 g de un mineral que contiene Ca y Mg se titula con EDTA 0.1000
N, gastndose 25.3 mL al emplear NET como indicador. Otros 0.5000 g de muestra se titulan
con la misma solucin de EDTA, pero empleando murexida como indicador y se consumen 18,3
ml. Calcular los % de Ca y Mg en la muestra, expresados como g CaCO
3
%.
19. - Calcular la concentracin de Ca y Mg (mM) a partir de los datos siguientes: se titulan
20.00 mL de solucin con EDTA 0.1120 N (indicador NET) gastndose 18.15 mL. Para
determinar Ca
2+
a 20.00 mL de solucin se agregan 19.00 mL de la solucin de EDTA; el exceso
se titula hasta viraje de la murexida a color anaranjado con CaCl
2
0.1021 N utilizndose 12.00
mL.
20.- Se pesan 5.000 g de un mineral que contiene CaSO
4
, Ni
3
(PO
4
)
2
y otras sustancias inertes, y
se disuelven apropiadamente llevndose a un volumen final de 100.0 ml.
Sobre una alcuota de 25.00 mL se ajusta el pH con un buffer NH
4
/NH
3
1M y se titula con
EDTA 0.1200 M consumindose 16.36 mL.
Sobre otra alcuota de 10.00 mL se ajusta el pH con el mismo buffer y se valora el Ni(II) con
una solucin de KCN 0.1000 M consumindose 19.67 mL. Sabiendo que la reaccin en esta
ultima valoracin es:
Ni
2+
+ 4 CN
-
-----> Ni(CN)
4
2-
Calcule el % de CaSO
4
y el % de Ni
3
(PO
4
)
2
en el mineral.
Datos: Mr CaSO
4
= 136.14; Mr Ni
3
(PO
4
)
2
= 366.10.
pKi EDTA-Ca= 10.7; pKi EDTA-Ni = 12.1; pKi Ni(CN)
4
2-
= 22.0; pKi Ni (NH
3
)
6
2+
= 7.0.


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PAGINA HOSPEDADA EN EL SERVICIO [Link] DE SERVITEC
Laboratorio de Qumica Analtica Instrumental I.
Rodrguez Fernndez Thalina A.
(Propuesta)
PRACTICA No 1
DETERMINACIN DEL CONTENIDO DE ACIDO ACETIL SALICILICO EN
ASPIRINA POR ESPECTROSCOPIA DE UV-VISIBLE UTILIZANDO EL MTODO DE
CURVA DE CALIBRACIN.
OBJETIVO:
1. 1. Determinar la cantidad real de ASS en aspirina por espectroscopia UV-
visible utilizando el mtodo de curva de calibracin.
2. Utilizar las propiedades de la molcula del ASS para su cuantificacin por
espectroscopa U.V-visible.
HIPTESIS:
1. 1. La presencia de dobles enlaces conjugados en el ASS permitir su
cuantificacin por espectroscopia UV-visible.
2. La curva de calibracin es mtodo analtico que nos ayuda a determinar, la
concentracin de una muestra desconocida a partir de la relacin directa entre
la concentracin de un analito y la respuesta obtenida de su medicin.
PROCEDIMIENTO:
1. 1. Preparar una solucin 0.01M estndar de cido acetilsaliclico
2. 2. Obtener el espectro de absorcin con la solucin estndar de cido
acetilsaliclico 0.01M (entre 200 y 400nm) para identificar la (longitud de
onda) de mxima absorcin a la cual se realizarn las lecturas.
3. 3. Preparar una curva de calibracin de cido acetilsalcilico con la solucin
estndar de la siguiente manera:
mL sol estndar ASS (0.01M) H
2
O c.b.p.
0 10 mL
1 10 mL
2 10 mL
3 10 mL
4 10 mL
*cbp = cuanto baste para.
1. 1. Leer las absorbancias de las soluciones de la curva de calibracin y trazar
la grafica de concentracin (mol/L) vs Absorbancia.
2. Pesar 10 pastillas de cido acetilsaliclico.
3. Triturar las 10 pastillas y pesar el equivalente de 1 tableta y anotar su peso
exacto.
4. Disolver en el disolvente ideal en un matraz de 50mL.
5. Leer la muestra a la misma que la curva patrn.
6. Utilizando la curva patrn, determinar la concentracin de ASS en la muestra.
7. Determinar el contenido de ASS en la muestra.
RESULTADOS:
1. Preparacin de solucin 0.01M de estndar de cido acetilsaliclico.
P.M ASS = 178g/mol

Para la solucin estndar se pesaron 0.089001g de estndar de cido acetilsaliclico y
se disolvieron en 50mL de agua destilada.
[Link] de la absorcin mxima.





*Espectro de absorcin UV-visible del cido acetilsaliclico
Se realiz el barrido del espectro con la muestra de estndar y se determin hacer
las lecturas a los 380nm por ser esta la longitud de onda de mxima absorcin.
[Link] y lecturas de curva de calibracin:

mL ASS
(0.01M)
H
2
O c.b.p. [ASS] M Abs
0 10 mL 0.000 0.00
1 10 mL 0.001 0.15
nm
Abs

max
2 10 mL 0.002 0.35
3 10 mL 0.003 0.56
4 10 mL 0.004 0.98
*Clculo de [ASS] de la curva calibracin

C
2
=0.002M
[ASS] = 0.002M


Podemos observar que en la curva de calibracin un punto sale del comportamiento
esperado por lo que se decide descartarlo y realizar el anlisis de regresin
nuevamente, por lo que la curva nos quedara:

Observamos que aqu la curva de calibracin mejora notablemente su coeficiente de
correlacin.

[Link] Problema:
Se pesaron las 10 tabletas de cido acetilsaliclico
Peso de 10 tabletas = 35.6g
Peso de 1 tableta = 3.56g
La muestra problema estaba muy concentrada por lo que se le realiz una dilucin de
1:20 para que tuviera una lectura ms confiable (o por lo menos su valor resultante
entrara en la curva patrn).
Muestra problema Absorbancia ya corregida
Tableta de Aspirina 0.211

*Clculo de la concentracin de la muestra problema


La concentracin de ASS en la muestra problema es:


El contenido de ASS en la muestra problema es 195.8mg.
ANLISIS DE RESULTADOS:
1. La curva de calibracin como se puede observar no se encuentra dentro de los
valores establecidos mnimos por la ley de Lambert &Beer, por lo que no
podemos decir que dichas concentraciones son las reales (0.2 a 0.8 de
absorbancia).
2. 2. Con respecto al valor de r
2
podemos observar que presenta un valor muy
cercano a uno por lo tanto se le puede utilizar como curva de calibracin.
3. 3. Podemos observar que la muestra problema fue ms concentrada de lo que
se esperaba por lo tanto se le hizo una dilucin 1:20, con la dilucin el valor
obtenido se encuentra dentro de los valores esperados.
4. 4. La incertidumbre sobre r
2
puede deberse a que la celda y su ubicacin
puede modificar la absorbancia.
5. 5. Para mejorar la tendencia esperada de los datos se elimin uno de los
puntos de la curva de calibracin, ya que este se encontraba muy desviado de
la linealidad; con la curva patrn arreglada se calcul la concentracin de ASS
en la tableta de Aspirina, obteniendo un valor de 195.8mg, lo cual es ms bajo
de lo que se esperaba.

CUESTIONARIO.
1. Cree que esta es la forma ms adecuada de cuantificar la cantidad de ASS en
una tableta de aspirina?
No, por que la tableta contiene excipientes que pueden interferir en mi medicin, por
lo que podra darme errores por defecto o por exceso.

[Link] son los aspectos que considera ms importantes para realizar una curva de
calibracin o curva patrn?
Que el estndar con el cual se prepar no presente degradacin (cambio de color,
humedad presente, etc..), que se realicen como mnimo 5 puntos en la curva obtener
una curva de calibracin estadsticamente confiable. Que los valores obtenidos
representen el comportamiento esperado y si se trata de la ley de Lambert & Beer
que los valores de absorbancia estn dentro del intervalo de 0.2 a 0.8 para minimizar
el error fotomtrico del equipo.

[Link] el resultado obtenido en mg/tableta, mol/L y en ppm?
195.8mg/tableta de aspirina
0.022mol/L
3916ppm de ASS

CONCLUSIONES:
1. 1. El mtodo de curva estndar es una de las formas ms confiables para
conocer la concentracin de un analito en una muestra problema.
2. Este mtodo tiene sus limitaciones, ya que si hay en la muestra otros
compuestos que absorban a la misma longitud de onda que el analito problema
vamos a obtener falsos positivos (concentraciones errneas).
3. Para que sea vlida una curva estndar debe de cumplir con la ley de
Lambert&Beer (cubrir un intervalo de 0.2 a 0.8 de absorbancia con un mnimo
de 5 puntos y presentar linealidad r
2
=0.999).
4. Se cumplieron los objetivos que se propusieron al inicio de la practica.
Cromatografa
La cromatografa se define como la distribucin de una sustancia o partcula en dos fases:
CRISTALIZACIN (Lquido-Slido)
DESTILACIN (Lquido-Vapor)
SUBLIMACIN (Slido-Vapor)
No se consideran cromatografas las distribuciones entre fases muy voluminosas. Se pueden
clasificar por varios principios.
1. Por principio F-Q.
De reparto.
De adsorcin.
De cambio inico.
2. Por la naturaleza de las fases.
Gas-Lquido.
Gas-Slido.
Lquido-lquido.
Lquido-Slido.
3. Por el equipo utilizado.
En columna.
En papel.
En capa fina

Principios de la cromatografa
Vamos ha hacer una descripcin de los diferentes tipos de cromatografas, detenindonos en los
principios en los que se basa y lo que se puede obtener de ellas.
Reparto
Si utilizamos diferentes concentraciones de X (X, X, X) y cuantificamos en cada una de las
pruebas el cociente de concentracin de X en cada uno de los lquidos, veramos que es
constante, y se llama K, constante de reparto.
nicamente, K no es
constante si variramos la
temperatura en cada una de
las pruebas. La
determinacin de esta
constante se denomina Ley
del reparto.
Distribucin en
contracorriente
No cumple estrictamente la definicin de cromatografa, sin embargo, se trata de un proceso de
reparto al 100%. Se trata de dos juegos de casillas que se pueden desplazar unas sobre otras.
stas se llenan de dos lquidos inmiscibles, de modo que si aadimos una sustancia con una
K=1, en una de las casillas y agitamos, sta se distribuira al 50% en cada uno de los lquidos. Si
ahora desplazamos la fila una casilla y volvemos a agitar, la sustancia volvera a distribuirse.
Despus de 5 pases obtendramos una distribucin como la que aparece en la figura. Si eso lo
extrapolamos para la variable n de pases tendiendo a , obtendramos una campana de
Gauss.
Eso sera para una valor de 1 para la constante de distribucin, si ste
valor fuera de 3, obtendramos algo como lo observado en
0 1 2 5
0,5 0,25 0,25 0,125 0,25 0,125 0,031 0,125 0,187 0,125 0,031
0,5 0,25 0,25 0,125 0,25 0,125 0,031 0,125 0,187 0,125 0,031
5
0.003 0,036 0,159 0,317 0,238
0,001 0,012 0,053 0,106 0,079
2
1
Sustancia X: miscible en 1 y 2
Dos lquidos inmiscibles entre
ellos
K

1
2
1
2
1
2
1
2
c
c
c
c
c
c
c
c
X X X X
n
C
Zona de Mayor purificacin de la sustancia
d i p o l o p e r m a n e n t e
d i p o l o p e r m a n e n t e
d i p o l o i n d u c i d o
d i p o l o p e r m a n e n t e
d i p o l o i n d u c i d o
d i p o l o i n d u c i d o
F u e r z a s d e
V a n d e r W a l l s
la figura a los 5 pases. Si representamos las grficas como la anterior para valores de K de 1, 3,
y 0,3 veramos que sustancias con diferente constante de distribucin se separaran, o mejor
dicho se encontraran en mayor concentracin en distintas casillas.
Como se ve en la grfica, la resolucin
no es extremadamente buena, para obtener
una mejor purificacin habra
que escoger bien los solventes. En general
funciona bastante bien con esteroides.
Lo ms importante de este proceso es el
recordar que se trata de una cromatografa
100% de reparto.
Adsorcin
Proceso de retencin de una molcula a travs de una interfase. En l intervienen gran cantidad
de fuerzas, principalmente de Vander Walls, que recordemos que
actan a distancias del orden de X
-7
, y que en compuestos biolgicos
son de tipo dipolar. Estas interacciones no se dan en
cualquier lugar, sino en los llamados centros activos
del soporte. Evidentemente, tambin hay procesos de
desorcin, lo que implica
un equilibrio, muy
dependiente de la
cantidad de centros activos, que a su vez es funcin del material, de
la temperatura.
Analicemos matemticamente las
variables implicadas en el
proceso:
a= n total de centros activos
a = n de centros ocupados
V
a
= velocidad de adsorcin
V
d
= velocidad de desorcin
K
a
= constante de adsorcin
K
d
= constante de desorcin
K
a
/K
d
= K
( )
cK
cK a
a
PK
PK a
a
PK
PK
a
a
+

1
lquidos en
1 1
Si representamos grficamente estas ecuaciones (para gases con la P
y para lquidos para c) obtendramos algo parecido a lo mostrado en
0,3 1 3
n
C
Obtencin de la sustancia
ms o menos pura
Pc
a
a
G
as
( )
d a
d d
a a
V V
K a V
K P a a V

equilibrio en
( ) ( )
d
a
d
d
d
a
a
a
a d a d a a d a
K
K
P
K
K
K
K
K
PK Kd
PK
a
a
PK K a PK a aK aPK PK a aK PK a a
+

+
la figura, donde a un determinado valor de la ordenada se saturan los centros activos y, por
tanto, nos da a el n total de centros.
Por lo general, la mayor parte de las cromatografas se basan en principios de adsorcin y
reparto mezclados aunque en distintos porcentajes.
Cromatografa en papel
Se ajusta perfectamente a la definicin de cromatografa, y se basa principalmente en el reparto.
Consiste en la distribucin de molculas en dos fases.
Segn el dibujo las dos fases seran:
Fase mvil: consistente en una capa de solvente orgnico que asciende por
capilaridad por el papel y sobre la capa hidratada, por supuesto sin mezclarse con
ella.
Fase estacionaria: que consiste, no en el papel, que es slo el soporte, sino en la
capa hidratada.
Ya que el movimiento se restringe al solvente orgnico, es el tiempo que permanezcan en esta
fase el que determinar la distancia recorrida; a ms tiempo, ms distancia. Esto suele significar
que el compuesto que ms distancia recorre es ms apolar ya que permanece ms tiempo en el
solvente afn.
Termodinamicamente la distribucin entre las dos fases cumple:

'

i
i
G G
K RT G ln
Siendo K la constante de reparto.
Ponemos un ejemplo con dos aminocidos, que se diferencian nicamente en un CH
2
:
B
A
B A
CH
NH COO
CH CH CH B
NH COO
CH CH CH A
K
K
RT G G
G
G G G G G G
G G G G G G
ln

2
2
2 3
2 3

+ + + +
+ + + +
+
+
CH
3
CH
2
CH
2
CH COO

A NH
3
+
CH
3
CH
2
CH COO

B NH
3
+
1
2
2
O H O H O H O H O H O H O H O H O H O H O H O H O H O H O H O H O H O H O H O H O H O H O H O H O H O H O H O H O H O H O H O H O H
W 3 M M s o p o r t e
m o n o c a p a d e
a g u a
s o l v e n t e o r g n i c o m v i l
Esto significa que en principio se pueden llegar a separar sustancias con diferente K, y como
hemos visto con diferentes grupos funcionales. Este principio es engaoso, ya que
experimentalmente se ve como en ocasiones no podemos separar compuestos con diferentes
grupos funcionales, mientras que podemos separar azcares con idnticos grupos, debido a la
distinta orientacin y distribucin de los mismos.
La cromatografa en papel se puede realizar de dos formas con igual resolucin.
Descendente: Ms cmoda. Se trata de una caja saturada de vapor de agua,
atravesada por una cajetn semicilndrico lleno con el solvente orgnico. En el se
deposita, como muestra la figura el papel con la banda de muestra justo al salir el
papel del cajetn. Para sujetar el papel introducimos una varilla a lo largo de la caja.
El solvente comenzar ascendiendo por el papel por capilaridad y continuar
bajando al salir de la cajetilla, pasando por la zona de muestra y arrastrndola,
consiguindose as la separacin.

Ascendente: Evidentemente con el mismo

principio, salvo que ahora el solvente se
encuentra en la parte inferior de la cubeta y
asciende por el papel haciendo que se separe la
muestra.
Bien, como nota personal he de decir que posiblemente la resolucin de la
cromatografa en papel descentente sea mayor ya que si recordamos las prcticas
de primero, al separar las clorofilas nos salieron cambiadas en el papel, ya que,
por lo menos segn nos dijeron, una de ellas tena el peso molecular mayor y por
tanto le costaba ms ascender que a la otra menos apolar pero de menor peso
molecular.
Cromatografa en capa fina
Igual que la realizada en papel, la cromatografa en capa fina se basa en la distribucin en dos
fases, la estacionaria, compuesta por una capa de hidratacin y la mvil, que se trata de un
solvente orgnico. La nica novedad radica en el soporte, ya que no es una hoja de papel, sino
una capa de 0,1 a 1 mm de xido de silcico o celulosa, apoyada en un subsoporte de cristal.
La capa se aplica manualmente mediante un aparato que deja una ranura regable por la que sale
la pasta denominada Silicagen, este aparato la vamos deslizando por la placa a velocidad
constante para conseguir la textura deseada, no hay que decir que a mayor velocidad menor
grosor de la capa. Siempre se realiza de forma ascendente, principalmente por que el soporte es
rgido.
Solvente
cajetilla
Varilla
Posicin inicial
de la muestra
Atmsfera saturada de
vapor de agua
Pap
el
O H O H O H O H O H O H O H O H O H O H O H O H O H O H O H O H O H O H O H O H O H O H O H O H O H O H O H O H O H O H O H O H O H
m o n o c a p a d e
a g u a
s o l v e n t e o r g n i c o m v i l
s o p o r t e
C r i s t a l
La cromatografa en capa fina es interesante ya que aguanta tratamientos de visualizacin
mucho ms potentes debido al subsoporte y que es ms rpida, pudiendo terminar la corrida en
una media hora.
Se considera cromatografa preparativa aquella con un grosor de capa del orden del milmetro y
analtica la que ronda el 0,1 mm.
Identificacin
Una vez realizada la cromatografa, tanto en papel como en capa fina, necesitamos encontrar el
parmetro clave que nos permita identificar el compuesto. Al igual que en la electroforesis
escogemos la distancia recorrida desde el origen, la cual denominamos X
A,
pero esta distancia
depende del tiempo, adems de otros factores y, por lo tanto est muy en funcin de las
condiciones experimentales. Si la relacionamos con otra, como la distancia recorrida por el
solvente X
S
, todas las variables se anularan, diferencindose slo en la en la distancia recorrida
en la cromatografa y, por tanto, en la diferente naturaleza de los componentes. Ese parmetro se
denomina
S
A
f
X
X
R
. El R
f
tambin se puede dar con relacin a otros componentes separados
de la muestra, y entonces sus valores pueden ser mayores y/o menores que 1.
Una vez caracterizado el parmetro, sin ms que medir con una regla y efectuar la relacin con
otro dato, hay que seguir unos pasos para poder identificar el componente separado:
1. Formar tablas: donde hay que tener en cuenta la naturaleza de las fases para una correcta
tabulacin.
2. Patrones conocidos: sin ms que comparando con otras muestras patrn ya conocidas, igual
que hacamos en electroforesis. Igual R
f
igual compuesto, si hemos conseguido separar bien.
3. Reacciones especficas o colorantes: Podemos identificar compuestos mediante reacciones
especficas de los mismos. Por ejemplo la tirosina.
El
papel, puede dar problemas de resolucin, debido a su propia naturaleza, de modo,
que hay que escoger estrategias alternativas.
A B C D
X
A
X
C
X
B
X
S
X
D
Frente del
solvente
1
1
1 a igual siempre referencia La 1
1

B
D
f
B
C
f
B
B
f
B
A
f
X
X
R
X
X
R
X
X
R
X
X
R

h
H O C H C H C O O
2
N H
3
+
S A L D E D I A Z O N I O
+
N
2
S O
3
S O
3
N = N
S O
3
N = N
H O
L u z
T y r
c i d o s u l f a n h d i c o
S a t u r a c i n e n e l
c a r b o n o d e T h y
Cambiar la fase mvil: no se trata ms que probar diferentes solventes para
comprobar cual resuelve mejor la cromatografa.
Cromatografas bidimensionales: igual que en electroforesis, slo que ahora no hace
falta cambiar de soporte, simplemente correr la cromatografa en un sentido y, una
vez terminado cambiar el solvente y realizar la cromatografa con el sentido girado
90. Es importante el cambio de solvente, ya que si no esteraramos realizando una
cromatografa diagonal.
En la cromatografa bidimensional tenemos dos tipos, sta donde nos encontramos un mismo
principio pero diferente condicin de realizacin. Pero adems podemos realizar cromatografas
bidimensionales con distinto principio sin ms que realizando una cromatografa primero y una
electroforesis como segunda dimensin. De este modo tendramos un principio de reparto y uno
de carga; aunque hay que recordar que en cromatografa en papel y en capa fina el reparto se
une a la adsorcin.
Calibracin de la cantidad de muestra
En cromatografa en capa fina y en papel nos podemos llegar a formular la pregunta de cuanta
muestra tenemos o que cantidades la componen. Para resolver esto se realizan curvas de
calibracin, consistentes en aplicar en una cromatografa una especie de recta patrn, aunque
en este caso ser ms bien una curva. En la lnea de muestra vamos aplicando muestra a
concentraciones crecientes conocidas, y posteriormente la muestra problema. Al resolverse la
cromatografa observaremos manchas de rea creciente correspondientes al patrn de cantidad
o concentracin. Con esos datos de rea representamos una grfica rea/mg y sobre sta
proyectaremos el rea del problema sobre el eje de mg para averiguar la cantidad de muestra en
nuestro problema. Hay que tener en cuenta que el patrn debe ser el mismo que el problema.
Evidentemente este mtodo no es precisamente el ms preciso, pero s puede llegar a ser til
como primera aproximacin
mg del
problema
rea
mg
rea del
problema
Patrn
Problema
1
1
2
Cambio de solvente
Giro del papel
1
1
2
+
_
Aplicamos los
electrodos
Visualizacin de la cromatografa
Incluyo aqu este apartado por estar relacionado directamente con estos dos tipos de
cromatografas y ya que las dems tendrn mtodos automticos, normalmente de tipo fsico.
Los mtodos utilizados no se diferencian mucho de los vistos en la electroforesis:
U.V.: Siempre y cuando los componentes sometidos a cromatografa emitan luz al
aplicarles ultravioletas, algo no demasiado extrao.
Radiactividad: Exactamente igual que en la electroforesis.
Revelado qumico: Parte importante de la identificacin, se pueden utilizar
reacciones especficas de grupos para revelado:
Azcares: Soluciones de plata amoniacal
Aminocidos: Ninhidrina
Lpidos: Vapores de Yodo
Tambin se pueden utilizar reacciones qumicas extremas, como pulverizar la
cromatografa con cido sulfrico, que carboniza la muestra, dejando manchas
marrones fcilmente visibles. Por supuesto este mtodo slo es aplicable a la capa
fina ya que el papel quedara totalmente corrodo por el cido.
Cromatografa de gases
O tambin llamada cromatografa gas lquido, en clara referencia a las dos fases que la
caracterizan:
Fase mvil: gas. ste debe presentar algunas caractersticas de las que hablaremos
posteriormente.
Fase estacionaria: lquido. Que al igual que el gas presenta algunas
peculiaridades.
En principio se trata de un gas que atraviesa una columna rellena de lquido. A la entrada de la
columna colocamos tres compuestos (en estado gaseoso), stos sern arrastrados por el gas, pero
dependiendo de su coeficiente de reparto irn quedando ms o menos tiempo en el lquido, lo
que provoca la separacin de los tres compuestos, saliendo antes aquel que halla permanecido
ms tiempo en la fase mvil. A la salida se coloca un aparato que detecta la salida de los
compuestos.
La velocidad de los componentes de la muestra depender entonces de la velocidad que demos
al gas, al que llamaremos gas portador y de su naturaleza, as como la de la fase estacionaria
(que hemos dicho que es un lquido, pero que tambin puede tratarse de un slido) y por
supuesto de la suya propia.
GAS
P
0
Y X Z
X, Y, Z
GAS
P
i
LQUIDO
Deteccin
El detector colocado al final de la columna enva una seal que se refleja en forma de picos,
cada uno correspondiente a un componente de la muestra. El primer pico que aparece se
denomina pico del aire y corresponde a la deteccin de una cantidad muy pequea de aire que
entra a la columna cuando se
introduce la muestra en el
cromatgrafo. En muchas
ocasiones se toma como punto de
referencia. La lnea base es la
parte del registro que corresponde
al gas portador puro, o sea, a la
seal de ausencia de componente.
Identificacin
Al igual que en las dems
cromatografas vistas hasta ahora
hay que definir cuanto hay y de
que compuesto se trata, lo que significa descomponer lo obtenido de dos formas:
Cuantitativo: para averiguar la cantidad de muestra hay un mtodo eficaz, no como
en el caso de las cromatografas en papel y en capa fina, y consiste en averiguar la
relacin entre el rea del pico y la masa del compuesto, relacin definida por la
ecuacin rea = Cte. [sustancia]. Todo eso est tabulado, y antiguamente se
proceda a recortar el pico y pesarlo, lo que implicaba tener un papel especial de
grosor constante adems de buen pulso. En la actualidad es el ordenador el que se
encarga de todo.
Cualitativo: cuyo parmetro clave es el tiempo que tarda en salir, pero como nos
ocurre siempre este depende de muchas ms cosas y, por tanto, puede no ser
especfico del
compuesto.
El tiempo de retencin bruto
t
dr
se define, como se ve en la
figura como el tiempo que
tarda en salir el compuesto.
r d dr
t t t +
En esta ecuacin t
d
se define
como el tiempo que
permanece en la fase mvil y
t
r
como el tiempo que
permanece en la estacionaria,
(por lo que es lgico que la
suma de ambos sea igual al
tiempo que tarda en salir). El
tiempo que se permanece en
la fase mvil es el mismo para
todos los compuestos, ya que todos tienen que salir de la columna y nicamente se desplazan
cuando estn en la fase mvil. Lo que si es caracterstico de cada sustancia es en t
r
, ya que es el
tiempo que quedan retenidos en la fase estacionaria el que hace aumentar el tiempo de retencin
bruto, y al ser, por tanto, ms especfico se le denomina tiempo de retencin corregido.
Pero no est tan corregido, an depende de muchas variables, por lo que, mejor que hablar de
tiempos de retencin hablaremos de volmenes de retencin V
dr
. Mediante estas ecuaciones se
define el volumen de retencin, que es igual al tiempo de retencin multiplicado por el flujo de
gas portador (F
c
) e igual al volumen intersticial ms el volumen de retencin corregido, que es
igual al tiempo de retencin corregido con el flujo de gas
portador.
Pico correspondiente a algn
compuesto arrastrado por el
gas portador
t
Seal
Y
X Lnea base
Z
t
dr
t
Seal

'

+ +
+
c r c d r d dr
c r c d c dr dr
F t F t V V V
F t F t F t V
Al igual que suceda con los tiempos V
d
es comn, mientras que V
r
es caracterstico de los
componentes y debe ser corregido por variables experimentales:
1. Presin: Si recordamos, el gas portador es inyectado a una presin P
i
, saliendo de la
columna con menor presin P
o
, esto se denomina cada de presin (P
i
- P
o
).
Cmo se ve, hay una proporcionalidad entre las cadas de presin y el flujo del gas portador, con
lo que llegamos a que
1
2
1 2
P
P
F F

, siendo esta relacin para lquidos por su condicin de

incompresibles, mientras que para gases, la relacin cambia, siendo
2
1
1 2
P
P
F F

.
Con todo esto llegamos a la conclusin que el volumen de retencin a presin constante es
directamente proporcional al tiempo de retencin, al flujo del gas portador y a f, siendo esta la
reunin de varios parmetros.
2. Temperatura: En el cromatgrafo, slo podemos medir la temperatura externa, pero es
suficiente para modificarnos el flujo del gas portador.
Con esto ya tenemos el volumen de retencin corregido por presin y
temperatura.
3. Cantidad absoluta de fase estacionaria (W
L
): Tambin influye la fase estacionaria en el
parmetro, de modo que hay que incluirla.
Es ahora cuando aprovecho a explicar la naturaleza de la fase estacionaria. sta puede ser un
slido que puede estar rellenando la columna, o bien dispuesto, en forma de recubrimiento,
sobre otro slido que har de soporte. Pero la que vamos a estudiar es la cromatografa gas
lquido, el cual se encuentra dispuesto sobre un slido portador. En este caso el slido portador
puede ser un relleno (columnas de relleno) o bien la propia pared, en su cara interna, de un tubo
ms o menos capilar (columnas capilares).
A la vista de la naturaleza del relleno, no podemos medir el volumen, nos permite corregir de
nuevo el volumen de retencin, que ahora ser el volumen de retencin
especfico (V
g
).
GAS
P
o
Y X Z
X, Y, Z
GAS
P
i
Deteccin
LQUIDO
Aumenta la
Presin
2
1
2
1
3 3
2 2
1 1
F
F
P
P
F P P P
F P P P
F P P P
o i
o i
o i

1
1
1
1
]
1

,
_

,
_

1
1
2
3
3
2
o
i
o
i
P
P
P
P
f
f F t V
c r
P
r

m
c
m r
T P
r
m
C
m C
T
T
F t V
T
T
F F


,
anterior ecuacin la en corregido flujo el s sustituimo
L q u i d o
S l i d o
s o p o r t e
L
T P
r
g
W
V
V
,

Fm = Flujo de la muestra
vaporizada.
Tm = Temperatura de la muestra
vaporizada
Tc = Temperatura del gas
portador
Este valor nos permite valorar las llamadas series homlogas, (series de molculas con grupos
funcionales idnticos y que se diferencian en el n de carbonos o, como con los cidos grasos en
el n de insaturaciones). La relacin es entre el log V
g
y el n de carbonos, lo que da como
resultado en grfica, algo como lo observado en la figura, con lneas paralelas crecientes que
indican que aumenta el logaritmo del volumen
de retencin especfico en relacin con el
tamao creciente de los cidos grasos, y que las
series homlogas con diferencias de
insaturaciones muestran patrones paralelos,
aunque las distancias entre las rectas no son
constantes.
El volumen de retencin especfico no es
mensurable, mientras que el tiempo de retencin
es el dato que nos da el cromatgrafo, de modo,
que podemos intentar desrelativizarlo igual
que hicimos con la cromatografa en papel y en
capa fina. De esta forma si dividimos el t
r
de un
pico por el de otro sera igual que dividir el volumen de retencin especfico, con lo que eso
conlleva:
De modo que no hay ms que dividir los tiempos de retencin para obtener un parmetro, que
aunque no caracterstico de la molcula si nos permite obtener buenos resultados en la
identificacin.
Eficacia de la columna
Evidentemente es importante calibrar los posibles errores de la columna para poder entender la
separacin de los componentes de una muestra y poder extrapolar algo significante del
resultado. Buscaremos el ajuste de la eficacia desde el punto de vista de la transferencia de
materia que se realiza entre la fase mvil y la estacionaria en los procesos sucesivos de
adsorcin y desadsorcin que tienen lugar en la columna.
La eficacia es funcin de un parmetro denominado plato terico, y que se define como el
segmento de columna que necesitamos para que se produzca un equilibrio de reparto entre las
dos fases del cromatgrafo. Se mide en unidades de longitud en forma de otro parmetro, altura
equivalente a un plato terico (HETP). Hemos dicho que la eficacia es funcin del n de platos
tericos, de modo, que un aumento de los mismos aumentara la eficacia de la columna, de
modo que hay que aumentar el nmero de platos tericos para obtener una mayor resolucin, y
Diinsaturados
Monoinsaturados
Saturados
N C
Log V
g
Eficacia tericos patos de n HETP
Plato terico
HETP
HETP
t
Seal
C
A
B
( )
( )
( )
( )
( )
( )
( )
( )
( )
( ) B t
A t
W
F f B t
W
F f A t
B A t
B V
A V
B t
A t
B A t
W
V
V
r
r
L
c r
L
c r
r
g
g
dr
dr
r
L
T P
r
g

/
/
/

/
/
/

,
,
,
la mejor manera de hacerlo es disminuir su altura, de modo que se une un parmetro a la
funcin:
La ecuacin de Van Demper relaciona la altura equivalente a un plato terico con variables
como el grado de empaquetamiento de la columna (A), la facilidad de difusin en el lquido (B),
la mayor o menor dificultad de entrar en el lquido (C), funcin a su vez de y del grosor de la
capa de lquido sobre el soporte), y la velocidad del gas portador ().
Esta ecuacin representada mediante una grfica HETP/ da
como resultado una parbola, donde, como hamos dicho antes el
punto de menor valor de altura ser el valor a escoger y su
proyeccin sobre el eje de ordenadas nos define la velocidad del gas
portador ptima. Esto no no implica ms que el llegar a un compromiso
en la ecuacin, ya que se encuentra en el divisor como en el sumando y,
por tanto, hay que encontrar el valor de la
velocidad para que HETP sea mnima.
La altura equivalente a un plato terico tambin
se puede valorar, una vez realizado un
cromatograma como directamente proporcional a
la anchura del pico a la mitad de su altura (b)
elevada alcuadrado multiplicada por la longitud
de la columna e inversamente proporcional al t
dr

elevado al cuadrado.
El cromatgrafo de gases
Un cromatgrafo de gases no es ms que la concatenacin funcional de una serie de elementos,
y en principio es un aparato sencillo. En esquema consiste en una bombona de gas, que
recordemos debe ser inerte, de modo, que se suele utilizar el Helio (He). La salida del gas a
unas 150-180 atm requiere de una serie de manoreductores, 2, 3, en todo caso suficientes para
que la presin no supere las 4 o 5 atm al llegar a la siguiente pieza, el inyector. ste como su
propio nombre indica es el encargado de introducir la muestra en la columna. Hay que resear
que el volumen muerto del inyector debe ser el menor posible, con el fin de compactar lo ms
posible la muestra gaseosa y hacer que entre en la columna lo mas junta posible, para as lograr
una separacin mucho ms exacta, al igual que suceda con la electroforesis.
La columna puede ser de vidrio, pero se confecciona ms habitualmente de otros materiales
(cobre, aluminio, acero inoxidable). Como ya he dicho las hay de muchos tipos, normalmente
especficas para un tipo especfico de muestra. sta se encuentra dentro de una cavidad
denominada horno, cuya funcin consiste en mantener la temperatura deseada, que dependiendo
del programa nos puede interesar que permanezca constante, o bien que vare de una forma u
otra con el tiempo.
u C
u
B
A HETP + +
A
Grosor de la fase
lquida
HETP

ptima
L
t
b
HETP
dr

,
_

2
2
1
180
Lnea base
b
A la salida de la columna se encuentra el detector, como ya haba mostrado en repetidas
ocasiones. Es el encargado de mostrarnos la salida de los componentes, normalmente en
grficas en forma de picos. A l se conectan dos bombonas de gas, una de H
2
y otra de aire.
Analicemos ms profundamente algunas de las partes:
Inyector: Es importante, como ya se ha dicho, que presente el menor volumen
muerto posible. Su misin es la de volatilizar la muestra e introducirla en la
columna lo ms empaquetada posible. La primera de la funciones la realiza
elevando la temperatura 100 C por encima de la de la de al columna, consiguiendo
as su volatilizacin. El proceso debe realizarse lo ms rpidamente posible para no
pirrolizar la muestra.
Columna: Hay dos tipos principales de columnas, aunque su heterogeneidad es
cada vez mayor. Estos dos grandes grupos
I
D
He
H
2
A
i
r
e
Columna
Manoreductores
Cromatograma
Horno
d e 1 a 2 m d e l o n g i t u d
d i a m e t r o c o m p r e n d i d o e n t r e 1 y 2 m m
R E L L E N O C O N S O P O R T E
C o n v e n c i o n a l e s
d e m s d e 1 0 0 m d e l a r g o
D i a m e t r o d e d c i m a s d e m i l i m e t r o
L A S P A R E D E S H A C E N D E S O P O R T E
C a p i l a r e s
C o l u m n a s
HETP
L
mm HETP
m Longitud 1000
) (
) (
tericos platos n
2
2
1
2
2
1
54 , 5
L 180
L 1000
tericos platos n

,
_

,
_

//

b
t
t
b
dr
dr
L
t
b
HETP
dr

,
_

2
2
1
180
HETP
L
mm HETP
m Longitud 1000
) (
) (
tericos platos n
Como ya hemos explicado la columna se compone de platos tericos, que de forma matemtica
se define como:
Sobre esta ecuacin vamos a sustituir la altura equivalente de un plato terico que obtuvimos
con anterioridad.
Detector: Los ms utilizados y precisos son los denominados detectores de
ionizacin de llama, y consisten, como su propio nombre indica en analizar los
cambios inicos producidos en la llama, los cuales sern debidos a la quema se uno
de los componentes de la muestra. La base consiste en la propia naturaleza de la
llama, la cual con el combustible de hidrgeno y aire que le aplicamos quema a un
gran nivel, produciendo iones y, por tanto, una V estando el mechero cargado
negativamente y el detector positivamente. Al introducirse en el detector un
compuesto salido de la columna, se quemar,
produciendo una alteracin en los iones, que
repercutir, como es lgico en la diferencia de
potencial, la cual se mantena estable formando lo
que conocemos como lnea base y que se ver
alterada, como hemos dicho al variar el combustible.
ste dura muy poco tiempo, volviendo a quemarse
entonces slo hidrgeno y aire, y volviendo, por
tanto, a la lnea base. El resultado es un pico en el
cromatograma, de modo que el punto ms elevado del
mismo nos indica el tiempo en el cual se quem ms
cantidad de componente, o lo que es lo mismo, el
tiempo que ha tardado en salir la mayor
concentracin de dicho componente.
Estos detectores son muy sensibles, pudiendo detectar materia con una
concentracin del orden de 310
-3
gramos/segundo, y, adems, son muy resistentes.
Una de las ventajas que presentan es la de no detectar compuestos inorgnicos, con
lo que eliminamos del cromatograma los posibles contaminantes de las fases como
de la muestra, adems de eliminar aquel primer pico que apareca en los
cromatogramas correspondiente al aire contenido y arrastrado por el gas portador.
Si detecta, sin embargo, la gran cantidad de solventes utilizados, siendo uno de los
ms comunes el hexano.
Resolucin del cromatograma
Puede pasar que un cromatograma no salga todo lo resuelto que nos gustara, o lo que es lo
mismo, que los picos salgan solapados. En estos casos hay una relacin de distancias que nos
permite calcular el n de platos tericos que haran falta para separar los dos picos.
En primer lugar hay de definir una serie de puntos, los que se muestran en la
figura. Estos puntos de corte son el resultado del trazado de una serie de
lneas, siguiendo estos pasos:
Lnea base
A
B
C
+
__
Columna
Aire
H
2
1. Trazar la lnea base.
2. Trazar una lnea recta que pase por los dos picos.
3. Trazar una lnea perpendicular a la lnea base que pase por el punto ms bajo entre los dos
picos.
Estos puntos de corte determinan una serie de segmentos, de modo, que definimos el trmino
resolucin (), en tanto por ciento, y definido por la siguiente ecuacin.
% 100 Resolucin
AC
AB

% 100 0 % 50 1 AC Si
AC
AB
Si
Sobre esto ya podemos configurar muestro objetivo, que no es otro que hallar el n de platos
tericos necesarios en la columna para separar eso dos picos. Antes tenemos hacer unos cuantos
cambios, como el transformar la ecuacin a tantos por una (algo ms matemtico) y definir
como la divisin del t
dr
del primer pico entre el del segundo, algo que ser til para simplificar
la ecuacin final.
( )
( )
( )
( )
( )
( )
AC
AB
t
t
t
t
n
AC
AB
n
t
t
dr
dr
dr
dr
dr
dr

,
_

,
_

,
_

,
_

1
2
ln
1 2
1
1 2
1
2 necesario platos de
1
2
ln
1
1
2 necesario platos de
2
1
2
2

Con esta ecuacin tan aparatosa, pero a la vez tan sencilla podramos mejorar la resolucin de la
columna sin ms que cambiar algn parmetro que haga variar el n de platos tericos, como
podra ser el caso de la longitud de la columna.
Naturaleza de la fase lquida
No hay que dudar a estas alturas que la fase lquida, bien sobre bolas o sobre las paredes de la
columna, juega un papel crucial en la cromatografa de gases. Por esto hay de intentar restringir
la gran cantidad de lquidos que podran entrar a formar parte de esta cromatografa. Esta
exclusin se realiza por las necesidades o requisitos que debe cumplir, estas son:
1. Viscosidad (): No deber ser muy alta a la temperatura de operacin, para facilitar
la velocidad de establecimiento de los equilibrios de reparto entre las fases.
2. Tensin superficial: La fase estacionaria lquida deber mojar bien el soporte, sea
relleno o sea pared interior de tubo, asegurndose en lo posible que la adherencia
soporte-lquido sea suficiente para evitar que la fase mvil arrastre a la estacionaria,
provocando una mala distribucin de la misma en la columna. Adems, debe formar
capas lo ms uniformes posible.
3. Tensin de vapor: Deber ser mnima, con el fin de que la evaporacin de la fase
estacionaria lquida no provoque el paso de la misma a la fase mvil, lo cual
provocara perturbaciones en la separacin y en el anlisis posterior.
4. Selectividad respecto a los componentes de la fase mvil
1
: Esta condicin es la
que define en s a la cromatografa de gases. Las constantes de reparto de los
componentes a separar entre la fase mvil y la estacionaria debern ser
suficientemente diferentes para que la fase estacionaria oponga resistencias distintas
al paso de cada componente a travs de la columna, proporcionando as una buena
separacin de los componentes a la salida de la misma.
5. Reversibilidad del reparto: El reparto de cada componente entre las fases deber
ser reversible, para favorecer que los procesos consecutivos de adsorcin y
desadsorcin, que se realizan a lo largo de la columna, sean rpidos y completos en
alcanzar el equilibrio. Esta condicin excluye implcitamente cualquier relacin
qumica entre los componentes a separar y la fase estacionaria.
6. Estabilidad trmica: Es de gran importancia que la fase estacionaria sea estable, en
s misma y respecto de los componentes de la mezcla a resolver, a la temperatura de
trabajo. Esta condicin limita algunas veces la aplicacin de un lquido dado como
fase estacionaria.
Recordemos, el lquido que va a formar parte de la fase estacionaria debe cumplir estor
requisitos, y al elegirla debemos estar seguros de lo que queremos conseguir, si separar
compuestos apolares o polares.
Como ya hemos dicho, las series homlogas de cidos grasos forman lneas paralelas crecientes
en diagramas log V
g
/n C, lo que significa que cada carbono aadido (aunque van de dos en dos)
aumenta el t
dr
, y al comparar con las rectas de las series insaturadas vemos que saldra antes un
cido graso insaturado que el saturado del mismo n de carbonos. Esto es algo muy a tener en
cuenta ya que nos puede ser til.
En caso de querer separar series homlogas de sustancias polares utilizando una fase
estacionaria polar hay que tener en cuenta la lgica, de modo, que aquellas molculas (de
cadena larga, como la mostrada en la figura) con ms insaturaciones incrementar su t
dr
, al
contrario que ocurra con una
fase estacionaria apolar.
Esto es debido a las nubes electrnicas de tipo que estn implicadas en el enlace doble, lo que
facilita la formacin de dipolos inducidos y, por tanto, favorece la aparicin de fuerzas
electrostticas entre las fases, que sern de atraccin (aumento de t
dr
) en l caso de tratarse de
una fase estacionaria polar y de repulsin (disminucin de t
dr
) en caso de tratarse de una fase
apolar.
En definitiva esto implica que al tener un cromatograma debemos saber, en primer lugar, cual es
la naturaleza de la fase estacionaria, para as poder interpretarlo correctamente. Casi a modo de
ancdota, comentar que en las series homlogas cada carbono de ms requiere una aumento de
temperatura de unos 20 C para poder volatilizarlo en el inyector, ya que presenta mayor
cantidad de interacciones de tipo dipolar, (fuerzas de Vander Walls).
Introduccin de la muestra
Aunque en un principio se pueda pensar que en un cromatgrafo de gases slo se pueden
separar gases, ya hemos visto que no es as, debido principalmente al inyector, capaz de
vaporizar la muestra para que pueda ser arrastrada por el gas portador, pero, como suele pasar
las cosas no son tan fciles, ya que los compuestos orgnicos, tal cual, no se suelen poder
gasificar, ya que por ejemplo los azcares se caramelizan a altas temperaturas.
1
A partir de esta caracterstica, son datos del libro, no mencionados por el profesor.
CH
3
CH
2
O
+
C CH
2
O
+
C CH
2
O
+
C
EGS (etilenglicol succinato) O
-
O
-
O
-

Adems, y como es lgico la muestra una vez en la columna ha de permanecer con las mismas
caractersticas fisico-qumicas ya que la constante de reparto, debe de permanecer constante,
valga la redundancia.
Ahora vamos a ver los procedimientos qumicos que se aplican a las distintas molculas
biolgicas para pasar por el cromatgrafo de gases con garantas:
Aminocidos
Si un aminocido presenta dos grupos activos (por lo menos en el esqueleto)
hay que anularlos. En primer lugar anulamos el grupo carbonilo metilndolo en
primer lugar y aadindole un cido butrico para que quede pegado butano. Al
compuesto resultante de esta reaccin se le aade un compuesto fluorado, de forma
que se elimina el grupo amino, quedando en la molcula un residuo de flor.
De esta forma conseguimos nuestro objetivo, y como se puede observar el
compuesto resultado tiene muy poco que ver con un aminocido, pero como todos
reciben el mismo tratamiento, slo se diferenciarn en el radical pudindose
separar unos de otros.
Azcares
Con los azcares se trata de bloquear los grupos alcohol con cloruro de
trimetil xilano.
cidos grasos
Se trata de formar steres metlicos (Met!OH) para anular el grupo
carbonilo.
Esteroides
En primer lugar hay que anular los grupos alcohol, normalmente por
metilacin o, al igual que con los azcares con cloruro de trimetil xilano. En
segundo lugar hay que esterificar los posibles grupos cidos por medio de la
esterificacin.
Con esto terminamos la cromatografa de gases, un mtodo muy prctico y relativamente
barato. Como se ha podido observar tiene una resolucin muy buena, aunque las molculas
introducidas en el cromatgrafo no tienen mucho que ver con la original.
N H C H C O O
3
+
N H C H C O O
3
+
C H
3
m e t i l a c i n
N H C H C O O
3
+
C H
4
9
b u t r i c o
( C F C H ) O
3 2

C F C H
3
C H C H C O O C H
4 9
R
R
R
R
C o m p u e s t o p r e p a r a d o
p a r a l a v o l a t i l i z a c i n
C F C H O
3
N H
3
+
A c H
R O H C l S i M e
M e
M e
R O S i M e
M e
M e
+
R C
O
O H C H
3
R C
O
O H
Cromatografa de cambio inico
Este nuevo tipo de cromatografa se ajusta tambin a la definicin, distribucin en dos fases. En
esta ocasin la fase estacionaria es una sustancia cambiadora de iones que, adems, debe ser
insoluble. Se forma de grupos funcionales potencialmente ionizables o ionizados, con su carga
neutralizada por un contrain. La fase estacionaria se compone de varias partes:
La matriz
Se trata de la red o compuesto que mantiene ligado los iones. Se encuentra cargada, bien de
forma positiva o negativa, dependiendo
de nuestro objetivo. Debido a esa carga
se encuentra recubierta de iones, en el
caso de la figura de iones A
+
. Se
introduce la matriz en un medio con
partculas de la misma naturaleza y, por
tanto, mismo signo que aquellos que
rodeaban la matriz (a estas partculas de
igual signo las llamaremos contraiones
B
+
). En ese momento se produce el
proceso denominado cambio inico,
consistente en el intercambio entre
iones A
+
y B
+
, que pasan a residir en la
matriz, mientras que los primeros pasan
a disolucin. Se trata de un proceso
reversible que tiende a formar
equilibrio, de modo que el n de iones
que salen de la matriz es igual al n
de contraiones que entra, o expresado
de otra manera uno entras a expensas de
que salga otro.
Hay varios tipos de matrices, como se observa en la figura.
Las de tipo inorgnico suelen ser tierras siliceas. Mientras que las
de tipo orgnico pueden ser polmeros o de sntesis, siendo estas
ltimas las ms utilizadas.
Naturaleza de las resinas
Formacin de un intercambiador
A los intercambiadores se les denomina resinas, y
por regla general se forman por polimerizacin, de
forma muy similar a lo que ocurra con la
acrilamida.
El compuesto base es el vinilbenceno, el cual es a
capaz de formar polmeros lineales, de modo, que
si aadimos para-divinilbenceno, obtenemos el
agente ramificante. Pero eso no es todo, ya que si
nos damos cuenta ese polmero no tiene carga, con
lo que no puede intercambiar iones. Para cargar
entonces la resina, procedemos a aadir a la
reaccin molculas de vinilbenceno que presentan
en posicin para un grupo HSO
3
, lo que implica
que queda fijo covalentemente el anin (SO
3
2)
mientras que el catin (H
+
) queda slo atrado por
S i l i c a t o s
I n o r g n i c a s
S n t e s i s P o l m e r o s
O r g n i c a s
M a t r i c e s
C H = C H
2
C H = C H
2
C H = C H
2
C H = C H
2
S O H
3

+
C H C H C H
2

2
C H C H
2
C H C H C H
2

C H C H
2

2
C H
S O H
3

+
C H C H
2

2
C H
R e s i n a p o l i m e r i z a d a
b a s e
a g e n t e
e n t r e c r u z a n t e
r e s i d u o c o n
c a r g a
v i n i l - b e n c e n o
p a r a - d i - v i n i l - b e n c e n o
p a r a - ( g r u p o c a r g a d o ) - b e n c e n o - v i n i l
carga a la resina. Hay que recordar que los iones a intercambiar pueden ser catinicos,
aninicos; fuertes o dbiles.
FUERTES DBILES
CATINICOS
SO
3
2 H
+
COO2 H
+
ANINICOS
+
NH
3
!(CH
3
) X2
NH
3
X2
Iones a intercambiar. Fijado covalentemente
Una vez con la matriz, no hay ms que aadirle el agente intercambiador para que los iones en
un principio adheridos a la resina pasen a la disolucin y aquellos contraiones de la disolucin
pasen a la resina.
Resinas importantes
Como en la mayora de las tcnicas de investigacin, hay algunas que sobresalen por sus
posibilidades de resolucin. En este caso hablamos de resinas que brillan en cada uno de los
grupos que hemos visto en la tabla.
Caractersticas de las resinas
Las resinas deben cumplir una serie de requisitos para que presenten una eficacia ptima. Estos
son:
1. Reticulacin: Una escasa reticulacin de la resina provocara una gran
hinchamiento al entrar en contacto con el medio intercambiador y, por tanto, una
resistencia muy escasa. Mientras que si es una resina muy reticulada disminuye el
posible hinchamiento y aumenta su resistencia.
2. Porosidad: Buscando una mayor superficie de intercambio.
C H H
2

+
C H C H S O
2 2 3

C H C O H
2

+
O
C H
2
C H N C H C H
2 2 3

+
C H C H ( O H )
2
C H
3
C H
2
C H
3
C H
2
C H N H
2

+
C H
2
C H
3
C H
2
C H
3
C A T I N I C A S
A N I N I C A S
F u e r t e s
D v i l e s
F u e r t e s
D v i l e s
S P
C M
c a r b o x i m e t i l o
Q A E
D E A E
d i e t i l e t i l e n
a resistenci to Hinchamien ticulacin Re
a resistenci to Hinchamien n Reticulaci


o intercambi de superficie Porosidad
o intercambi de superficie Porosidad


3. Tamao de la partcula: Implicado directamente en la velocidad de flujo, reflejo
del aumento de superficie
4. Capacidad: En la capacidad hay que distinguir dos tipos.
Total: que se entiende como el n total de grupos ionizables que presenta la
resina por unidad de peso.
Disponible: que se entiende como el n de grupos ionizados o potencialmente
ionizables capaces de intercambiarse. De este modo se entiende que puedan
existir grupos ionizados que por diversas cuestiones no puedan intercambiarse.
Este puede ser el caso de aquellas protenas que debido a su tamao no pueden
entrar en los poros de una partcula, no pudindose intercambiar con los iones
del interior, haciendo stos intiles. Ilustraremos esto con un ejemplo, el
divinil benceno.
% divinil benceno 1 2 3 4 8 16
Capacidad disponible 100 84 74 62 0.8 --
Reversibilidad y Selectividad
Sin lugar a dudas, el concepto de reversibilidad es imprescindible en una cromatografa de
cambio inico, ya que no queremos unir la molcula a la resina, sino simplemente retenerla en
condiciones de especificidad mxima.
R2A
+
+ B
+
R2 B
+
+ A
+
Sin embargo, la selectividad implica cuestiones que trataremos desde el punto de vista
matemtico, en esta ecuacin
B
A
K es la constante de selectividad, y es directamente
proporcional al producto de la concentracin de iones y la concentracin de contraiones unidos
a la resina ( ) B , e inversamente proporcional al producto de la concentracin de iones unidos a
la resina y la de contraiones libres ( ) A .
B
A
K no es una constante, sino un coeficiente y depende de la preferencia de la resina por uno u
otro ion. De modo, que como se observa en la ecuacin si hay una mayor preferencia por B
habr ms de este ion unido a la resina y por tanto en numerador ser mayor que el
denominador y
B
A
K ser mayor que 1, por el contrario si prefiere a A ser mayor el
denominador y el coeficiente de selectividad ser menor que 1, si no hay preferencias
B
A
K ser
igual a 0.
Formas de realizar cromatografas de
cambio ionico
BATCH
Velocidad Superficie Tamao
Velocidad Superficie Tamao


[ ] [ ]
[ ] [ ]
+ +
+ +

B A
A B
K
B
A

'

+
+
A K
K
B K
B
A
B
A
B
A
a prefiere que indica Nos 1 Si
as preferenci hay no que indica Nos 0 Si
a prefiere que indica Nos 1 Si

Las cromatografas de este tipos se pueden realizar en simples vasos de precipitados. En este
recipiente se aade la resina, dejndola sedimentar, y recordando siempre que no debe secarse.
Una vez preparada se aade la muestra, se agita para que la misma penetre bien en la resina y a
continuacin se vuelve a dejar sedimentar. En el sobrenadante tendremos el producto libre de
iones.
Es til si queremos eliminar los iones o molculas cargadas de una muestra, pero presenta el
problema de que pueda quedar retenido algo en la resina, lo que hara disminuir la eficacia, algo
que puede solucionarse con una segunda agitacin y recoleccin, en definitiva algo parecido al
lavado que se efectuaba en la centrifugacin.
Como ventaja presenta la posibilidad de aadir como resina no slo intercambiadores catinicos
o aninicos sino lo que se denomina un lecho mixto, o lo que es lo mismo una resina
intercambiadora de cationes y aniones a la vez, y por esto se pueden eliminar todas las cargas
de una muestra.
COLUMNAS
Sin duda alguna el ms utilizado de los dos, el mtodo en columna permite un gran anlisis. El
anlisis frontal es resultado de la posibilidad de visualizar
los que est ocurriendo en cada momento de la
cromatografa. Al anlisis por desarrollo est permitido
por la cantidad de informacin que se puede obtener de
una cromatografa en columna, como es la posible
retencin de especies cargadas (iones), el tiempo de
elucin o el pH al que ha eludo la muestra y el
desplazamiento de iones que se produce en la resina
durante el proceso. Pero profundicemos algo ms:
1. Anlisis frontal.

'

'

'

ento desplazami
elucin
Desarrollo
iones de Fijacin
desarrollo Por - 2.
terico interes de Frontal - 1.
Anlisis
Se agita
Se aade la muestra
Lecho mixto
Muestra recogida
sin iones
Iones + y

retenidos
Si como en el caso de la figura, tuviramos una resina intercambiadora de
cationes, y aadiramos dos sales de cloro (cloruro de sodio y cloruro de potasio), los
iones sodio y potasio se intercambiaran con los hidrgenos de la resina quedando, por
tanto, retenidos, mientras que el ion cloruro hara el equivalente a haber aadido cido
clorhdrico. Haciendo un anlisis de lo que eluye veramos algo como lo representado
en la grfica, una rpida salida de cido clorhdrico y la elucin despus de uno de los
cationes, de forma uniforme, sin embargo, esto no es as, ya que la resina suele tener
preferencia por uno de los dos cationes, dependiendo de la
B
A
K . Esto implica que
durante un tiempo determinado slo eluir uno de los dos cationes (mostrado en la
grfica), y al acabarse este eluir aquel que presentaba mayor afinidad por la resina.
2. Anlisis por desarrollo.
Si recordamos las dos partes en las que se basaba el anlisis por desarrollo
veremos que eran la elucin y el desplazamiento. El primero de estos dos trminos, la
elucin, consiste en en la
no retencin de un ion de
la misma naturaleza que
los retenidos, debido a
que la resina prefiere los
iones ya renenidos, como
se observa en la figura.
El segundo de los
trminos, el
desplazamiento, resulta
de la mayor preferencia
de la resina por el nuevo ion que por quellos que tena retenidos, saliendo stos de los
lugares de unin y eluyendo por la columna, como podemos ver en la figura.
Este anlisis nos permite encontrar el parmetro que requerimos en todos los casos, en ste,
empezamos por definir matemticamente la velocidad de elucin (V
e
), que como se observa en
la grfica consiste en hallar la velocidad que debe llevar para que eluya la mxima
concentracin del componente. Matemticamente se define cmo directamente proporcional al
volumen intersticial de la resina (v
i
) y al producto de la cantidad de resina (m
o
) y el coeficiente
de distribucin (P); ste a su vez consiste en el reparto del ion entre la forma retenida y la libre.
Si recordamos la ecuacin que nos defina el coeficiente de selectividad y le
aplicamos el de distribucin veremos que
B
A
K es el coeficiente de distribucin
de A dividido por el de B.
Pero an no es suficiente, si volvemos al tema de la cromatografa de gases recordarenos lo que
era un plato terico, que vuelve a sernos til, y en croamtografa de intercambio ionico se define
como el segmento a considerar para que se produzca un proceso de intercambio. Recuperamos
entonces la ecuacin quenos permita hallar el n de platos tericos.
Sin embargo esta ecuacin hay que inferirla para
lquidos, transformndola y sustituyendo algunos
trminos. El resultado es el siguiente:
Separacin de aminocidos
A
B
V
e
V e l o c i d a d d e e l u c i n
a c o n c e n t r a c i n m x i m a
v = v o l u m e n
i n t e r s t i c i a l
i
P m v V
o i e
+
[ ]
[ ]
[ ]
[ ]

'

+
+
+
+
B
B
P
A
A
P
P
B
A
[ ] [ ]
[ ] [ ]
B
A B
A
P
P
B A
A B
K

+ +
+ +
2
2
1
54 , 5 tericos platos de

,
_

b
t
n
dr
( )
2
lq
8 tericos platos de
,
_

v
V
n
e

0,37 = 1/e
v
Una de las mayores aplicaciones de esta tcnica es la posibilidad de separar selectivamente
tanto aminocidos como protenas enteras, sin ms que diferentes pK. stos pK estn presentes
en funcin de la cantidad de equilibrios de disociacin que puedan formarse; repasemos los de
los aminocidos.
Monoamino Monocarboxlico
Monoamino - Dicarboxlico
Diamino Monocarboxlico
Con esto como repaso, vemos que lo que necesitamos conocer de un aminocido es el pI para
as manejar el pH de la columna, dependiendo, claro, si queremos que eluya o quede retenido.
Algo importante que tenemos que averiguar es la ecuacin que nos mida la cantidad de
aminocido que se encuentra unido a la resina. Para ello utilizaremos como punto de partida tres
ecuaciones, algunas que ya conocemos y otras que se deducen muy fcilmente.
1. Comenzamos colocando como base la ecuacin de la concentracin total, y sobre
ella sustituimos el sumando correspondiente al aminocido protonado libre por lo
obtenido para ese parmetro en la ecuacin de P; y el sumando correspondiente al
+1 0 !1
pK
1
pK
2
[ ][ ]
[ ]
[ ][ ]
[ ]
[ ] [ ]
[ ][ ][ ][ ]
[ ][ ]
[ ]
( ) [ ]
2
2
log 2 log log
;
2 1
2 1
2 1
2
2 1
2 2 1
2
2
pKa pKa
pI
pI pKa pKa
H Ka Ka
H
H A H A
H A H H A
Ka Ka
A AH pI
AH
H A
Ka
AH
H AH
Ka
+

+
+

/ / / /
/ / /


+
+
+ +
+ +
+
+
+
+
+ +1 0 !1 !2
pK
1
pK
2
pK
3
Para aminocidos mono C
mono N el punto isoelctrico
es la suma aritmtica de los
dos pK
+2 +1 0 !1
pK
1
pK
2
pK
3
AH
+
AH
+

H
+
+ A
o
P

Ka
1

La ecuacin del equilibrio
del aminocido
El coeficiente de distribucin
del aminocido
La concentracin total de aminocido es
igual a la concentracin de lo unido a la
resina, ms la que se encuentra libre
[ ][ ]
[ ]

1 +
+

AH
H AH
Ka
[ ]

+
+
1
]
1

AH
AH
P
[ ] [ ] A + +
1
]
1

+
+
AH AH C
Total
[ ]
[ ]
[ ]
[ ]
[ ]
[ ]
[ ]
+
+
+
+
+
+
+ +
+
+ + + +
H
Ka
P
AH
P
AH
AH C AH
H
Ka AH
P
AH
AH C
Total Total
s sustituimo nuevo de
aminocido con carga 0 el valor obtenido de los despejado en la ecuacin del
equilibrio.
2. En esta ecuacin se saca factor comn [ ]
+
AH y se despeja.
3. Multiplicamos la fraccin arriba y abajo por P y observamos la aparicin de dos
constantes (C
Total
P) que llamamos J y (P +1) que llamamos K.
4. Se aplican logatitmos y los ponemos de exponente de 10. Esto ya nos indica
claramente que al aminocido protonado unido a la resina depende del pK y
del pH.
Con esta ecuacin final vemos que:
pKa exponentes cociente de la unin a la resina
Casos de incumplimiento
Hay ocasiones en los cuales un aminocido no eluye en su punto isoelctrico, ello es debido, en
principio a que no se trata de un proceso de distribucin puro, ya que aparecen fuerzas de
adsorcin.
La fenilalanina: Debido a ese anillo bencnico puede presentar problemas de
apilamiento si la resina se compone tambin de estos anillos. Si la
resina no es bencnica eluir en su punto isoelctrico.
La tirosina: Al igual que la fenilalanina puede presentar apilamientos con los
bencenos de la resina, pero el grupo carbonilo impide en buena
medida que se produzcan, de modo que eluira antes que la
fenilalanina.
La prolina: Debido en gran media a su anillo pirrlico presenta
tambin tiempos de retencin mayores que los que nos indican sus
pKa.
La serina: La polaridad del grupo alcohol hace que sea menor por
retencin.
[ ]
[ ]
[ ]
[ ]

1 1
1
despejamos
1 1
1

,
_

+ +

,
_

+ +
+
+
+
+
H
ka
P P
C
AH
H
ka
p P
AH C
Total
Total
[ ]
[ ]
[ ]
[ ]
[ ]
+
+
+
+
+
+

+ +

,
_

+ +

H
ka
K
J
AH
H
ka
P
P C
H
ka
P P
C
AH
Totol
Total

1
P
P
1 1
1
[ ]
[ ]
( ) [ ] ( )
( ) pKa pH
H Ka
H
Ka
K
J
K
J
K
J
AH

,
_

+
+

+
+
10
10
10
log log
log
-CH
2
OH
Con estas alteraciones de los tiempos elucin vemos en la siguiente tabla como sera la
cromatografa de 14 de los 20 aminocidos, que se dividen en dos grandes grupos; los que
eluyen a pH 3,25 y los que lo hacen a 4,25 unidades de pH.
pH 3,25 pH = 4,25
Asp Thr Ser Glu Pro Gly Ala Cys Val Met Ile Leu Tyr Phe
Elucin poco a poco, en forma de
picos separados.
A un pH ya ms elevado, de 4,25 eluira una
banda de gran intensidad, que correspondera a
estos aminocidos.
Ya a pH bsico eluiran los tres con un pKa cercano al 8 o 9.
pH bsico
Lys Hys Arg
De nuevo nos
encontraramos con
una distribucin en
forma de picos.
Separacin de pptidos y protenas
La base de la separacin de los polmeros de los aminocidos, es, sin lugar a dudas la misma,
pero, como en todos los casos, al tener stos una estructura ms complicada pueden dar lugar a
muchas interacciones y, por tanto, a un aumento de los incumplimientos.
En el caso de las protenas hay que tener en cuenta su elevado tamao, con lo que las matrices
deben ser de celulosa con un tamao de poro mayor. Esto implica el aumento del proceso de
adsorcin y, por tanto, la amplificacin de los errores.
El proceso de cuantificacin y determinacin de las protenas por cromatografa de intercambio
ionico est totalmente mecanizado. La preparacin comienza con la separacin de las protenas
en dos columnas, una mayor para las neutras y cidas y la otra para las bsicas. El modo de
deteccin de las protenas en cada una de las fracciones es variable. Para finalizar se realiza el
diagrama de picos, que en el caso de las protenas no son tan agudos.
Cromatografa de filtracin molecular
Tal vez es una de las cromatografas con base y funcin ms simple.
Separar basndose en su diferente tamao, no por distribucin en dos fases. La base
es la distinta probabilidad de atravesar los poros de un gel.
El soporte consiste en partculas esfricas de tamao homogneo. stas rellenan una
columna a la que aadimos la mezcla a separar.
El orden de elucin hemos dicho que es funcin de la probabilidad de penetrar en los poros de
las esferas que rellenan la columna. Una mayor probabilidad implica que el tamao de la
partcula debe ser pequeo para que pueda penetrar en los poros, quedando ms retenido por la
columna y, por tanto, presenta una elucin ms tarda que aquellas partculas que, no pudiendo
penetrar en los poros, pasan por el exterior de las esferas ms rpidamente que las otras.
Lmite de exclusin de una columna
Esta caracterstica se define como el tamao de la molcula ms pequea que no puede
atravesar los poros del gel, lo que implica que debe ser caracterstico de cada columna.
Hay que profundizar ms en la caracterizacin de la columna y del gel; para ello hay de definir
los siguientes trminos.
Volumen de exclusin (V
o
): Volumen que queda fuera de las partculas del gel.
Volumen de la matriz (V
m
): Volumen que ocuparan las partculas eliminando el
volumen de los poros.
Volumen intersticial (V
i
): Volumen de los poros de las esferas.
Volumen Total (V
t
): Se trata de la suma de todos estos volmenes:
i m o t
V V V V + +

Aplicaciones
Se trata de poder caracterizar las molculas en funcin de su volumen de elucin. ste se puede
expresar de distintas maneras.
Se define como el volumen de eluyente que hay
que dejar pasar para
obtener la mxima
concentracin del componente. K
d
es el coeficiente
de distribucin y es el que marca las diferencias.
Esto significa que si K
d
es igual a o el volumen
de elucin ser igual al
volumen de exclusin,
mientras que si es 1
habr que sumar al
volumen de exclusin
el intersticial.
1.
o e d
V V K 0
: En este caso la
molcula es excluida ya que el tamao es mayor que el lmite de exclusn. Es un
caso real.
2.
i o e d
V V V K + 1
: En este caso slo terico, ya que si nos fijamos esta
ecuacin nos est diciendo que la partcula debera viajar por todos los canales del
gel, y eso no es posible.
i d o e
V K V V +

'

+

i o e d
o e d
e
V V V K
V V K
V
1
0
V
o
V
o
V
i
Todo esto implica que el valor de K
d
estar comprendido entre estos dos valores, normalmente
K
d
0,7.
Siguiendo con el coeficiente de distribucin recordamos que para que se separen dos partculas
deben tenerlo diferente.
Formas de expresar el volumen de elucin
Una vez aclarado que son los diferentes valores del coeficiente lo que permite separar las
partculas en una cromatografa de filtracin molecular, vamos a ver otras formas de expresar el
volumen de elucin.
Aqu tenemos una nueva expresin para V
e
, le hemos
aadido a la ecuacin que ya conocamos el trmino V
x

como suma de volmenes y la constante K
av
, similar al
coeficiente de distribucin.
Hay que seguir simplificando:
Esta expresin derivada de las sustituciones en la
anterior, es ms til que la anterior ya que no
est presente el volumen de la matriz ni el intersticial,
casi puramente tericos y muy difciles de calcular. Si igualamos sta y la anterior del volumen
de elucin podemos ver una relacin con el Pm de la partcula.
As solamente, no se puede observar mucho, ya que si queremos relacionarlo con el Pm se
supone que debera aparecer por algn lado. Para ello introducimos, como hicimos en otras
ocasiones unos patrones de peso conocido que nos van a permitir encontrar la relacin, en este
caso entre en log Pm y la K
av
. Estos patrones suelen ser dos, y el proceso se denomina calibrado
de la columna; la razn es sencilla, si nos acordamos del mtodo para rellenar la columna visto
en prcticas, no es difcil entender que el grado de compactacin y homogeneizacin de la
columna es diferente en cada caso, de modo, que a cada columna hay que introducirle los dos
extremos de partculas que es capaz de separar la resina que estemos utilizando.
La forma de averiguar el Pm de la partcula problema es idntico al utilizado en otras ocasiones.
Se trata de representar grficamente los valores del patrn en el diagrama log Pm / K
av
. El
resultado es una lnea recta descendente. Conociendo el valor de K
av
de la partcula lo
extrapolamos sobre la recta, dndonos el valor del logaritmo del peso molecular, de modo, que
con el antilogaritmo conoceremos el valor de su Pm.

La cromatografa de filtracin molecular se realiza en condiciones nativas, el motivo no es otro
que el de observar las posibles relaciones multimricas que puedan presentar las protenas, el n
de unidades que lo compone es algo observable por otros mtodos.
Volumen relativo de elucin (VRE)
Se define como el volumen de elucin dividido por el volumen de exclusin. Y la constante de
retencin es su inversa.
Soportes y partculas
x av o e
i d o e
d av
i m x
V K V V
V K V V
K cte K
V V V
+

+

+

matriz y al interstici
volmenes de suma
( ) ( )
o t av o e m i av o e
V V K V V V V K V V + + + +
( )
o t
i
d
av
o t av o i dv o
V V
V
K
K
V V K V V K V

+ + / + /
e
o
o
e
V
V
V
V

VRE
1
retencin de cte VRE
Las partculas empleadas requieren:
Estabilidad qumica: Para que no varen las condiciones durante la cromatografa.
Bajo contenido en grupos inicos: Para que no entren en juego procesos de
intercambio.
Gran uniformidad de poro y tamao: No debe haber heterogeneidad para mantener
el principio de separacin.
Que podamos elegir una amplia galera de tamaos de esferas y poros.
Los geles o soportes ms utilizados son:
Columnas que derivan del dextrano SEPHADEX: Se trata de molculas de glucosa
unidas por epicloridrina. Presentan un rango de separacin que oscila entre los 700 y los
800.000, aunque este depende del tipo. Cada tipo de resina se nombra como G-X, siendo X
los mililitros de agua que es capaz de absorber 1 gr de resina seca. Las resinas Sephadex son
de gran resistencia y estabilidad, presentando flujos lentos.
Derivados de agarosa Shepharosas: En principio no se diferencia mucho de las
derivadas del dextrano, salvo en el rango de tamaos a separar, ahora superior a los
800.000, (mayor que los virus pequeos) y, por tanto, completa a las anteriores. El nico
problema es que son menos resistentes, ya que no soportan temperaturas superiores a los 30
C ni pH fuera del intervalo 4 10.
Poliacrilamidas Biogel P: Este soporte presenta como gran ventaja el ampliar muchsimo
el rango de pH, debido a la gran estabilidad de la acrilamida que ya comentamos en la
electroforesis, pudiendo soportar pH del orden de 1 o 10 unidades.
Vidrio: se trata de esferas de vidrio con poros. Su mayor ventaja es la mayor resistencia
mecnica, seguido de su evidente inercia qumica, la resistencia a altas temperaturas (100
C), que no presentan hinchamiento, y por ltimo que soporta tratamientos cidos.
Factores que condicionan la resolucin
1. Tamao de poro.
2. Tamao de partcula.
3. Flujo de elucin.
Pocos comentarios y explicaciones hay que hacer a algo tan contundente y claro.
Preparacin de la columna
1. Es necesario hidratar el soporte con agua o el buffer adecuado. Una vez bien agitado
se deja decantar, se retira el sobrenadante. Con este proceso se consigue eliminar
aquellas esferas que puedan estar rotas o que sean ms pequeas, por eso es
conveniente repetirlo dos o tres veces.
2. Degasifiar el material para asegurarse que no se formen burbujas en la columna.
3. La columna debe tener el menor espacio muerto posible, por lo de siempre,
conseguir que toda la muestra salga a la vez.
4. El empaquetamiento de la columna debe realizarse de una vez y controlando la
cada de presin (por indicador del fabricante). La cada de presin se define como
la altura desde el nivel superior de la columna al inferior.
Muestra, tipos y volmenes
El volumen de muestra nos condiciona el rango de resolucin, y depende del tipo de
cromatografa el rango en diferente:
Desalinizacin: Consiste en la eliminacin de la sal de una muestra. Para ello es
necesario que el volumen de muestra no supere el 25 o 30% del volumen total de la
columna.
Separacin de protenas: En este caso el volumen no puede superar el 5% del
volumen de la columna.
En todo caso es necesario que la viscosidad de la muestra no supere 2 veces la de la resina.
Ventajas
1. Se trata de la tcnica ms suave de separacin de compuestos.
2. La recuperacin es cuantitativa. Aquello que entra sale.
3. Reproducible.
4. Estable.
5. Rpida.
6. Acceso a informaciones adicionales. Como el Pm.
Cromatografa de afinidad
La base es simple, y se basa en la especificidad biolgica, algo que no es tan fcil de conseguir.
Si finalmente funciona es el mejor mtodo de separacin por ser altamente especfico.
Como sabemos hay muchas molculas con capacidad de unir a otras especficamente, como los
anticuerpos, o los receptores de membrana. En principio la cromatografa consta de una matriz
con unos brazos, a modo de separador que estn unidos a una molcula pequea con sta
capacidad especfica. El brazo acta a modo de separador para que la unin no tenga
impedimentos de tipo estrico. Al ir eluyendo por la columna la
muestra, aquellas partculas especficas para el ligando irn
quedando secuestradas del modo que se ve en la figura. Una vez
que eluye toda la muestra menos la molcula en cuestin se
efecta un lavado para asegurarnos de la especificidad y
posteriormente se procede a eliminar la unin molcula-
ligando.
Caractersticas del ligando
1. Debe ser inerte: con esto eliminamos la unin especfica en centros activos de
enzimas.
2. Debe unir el ligando manteniendo la especificidad: sino habra que estar
fabricando resinas con cada experimento.
3. Debe posibilitar una desunin sencilla: por medio de cambios en el pH o en la
fuerza ionica.
Matrices
Agarosas.
Sepharosas. La
formacin del brazo
se describe en la
figura. Su
configuracin,
distancia a la matriz
y algunas
caracterstica ms
son parte le la galera
comercial.
Vidrio
O H + B r C N
O C N
O C N H
O H
P o d u c t o c o m e r c i a l
+
H N ( C H ) N H
2 2 n 2

O C O ( C H ) N H
2 n 2

N H
B r a z o
+
C O O
O C O ( C H )
2 n
C O
N H
B r a z o
M a t r i z
Disociacin del complejo
Como ya he dicho, una de las condiciones que hay que cumplir es la de una disociacin rpida y
fcil. Para ello debemos conocer a la perfeccin el equilibrio que lo regula, para as poder
disociar el complejo sin peligro de daar la molcula a separar.
Ventajas
La gran especificidad que muestra esta cromatografa es su mayor ventaja. El resultado, por
tanto, es una molcula de gran pureza.
La segunda gran ventaja es la de conseguir formas activas de las molcula ya que lo mtodos no
son drsticos.
El mayor problema que presenta este tipo de cromatografa es la dificultad de encontrar el
ligando, es molcula pequea, inerte y reciclable especfica de una sola molcula.
Cromatografa lquida de alta presin. HPLC
Tambin conocida como cromatografa lquida de alta resolucin o de alto precio permite gran
cantidad de variables y muchas ventajas:
1. Altsima resolucin
2. Gran rapidez
3. Columnas reutilizables
4. Automatizacin total. Lo que implica que es reproducible.
El cromatgrafo
Una de las ventajas que presenta sobro otros cromatgrafos es la columna, que en ste es muy
corta, aprovechando la alta presin ( 300 atm), conseguida gracias a la bomba de inyeccin. A
la salida de la columna se encuentra un detector de U.V que nos da un cromatograma en forma
de picos. La columna es reutilizable y suele ese de acero, con el fin de aguantar la presin.
El soporte
Bomba de inyeccin
300 atm
U.V.
Columna
Cromatograma
vertical
Al igual que en otras ocasiones la columna se encuentra rellena de esferas para aumentar la
superficie, slo que en este caso son de slice para aguantar la presin.
Posibilidades del HPLC
Permite realizar cromatografas con todos los principios vistos:
1. Adsorcin: Con soportes de aluminio o slice. Se la denomina en Fase Normal ya
que la fase mvil es lquida apolar y la estacionaria es la polar.
2. Reparto: Cromatografa lquido lquido. Se denomina en Fase Inversa ya que las
fases estn cambiadas, siendo la mvil la polar y la estacionaria la apolar.
3. Cambio Ionico: Con el mismo principio que hemos vistos pero cambiando el
soporte.
4. Exclusin: Anlogo a la cromatografa de filtrado molecular, separando las
molculas por Pm.
SO
32
Si
Una vez terminada la descripcin de los mtodos cromatogrficos creo que es conveniente hacer
un repaso.
A d s o r c i n + R e p a r t o
R f
a
v
1 0 0 % r e p a r t o
K : c o n s t a n t e d e
r e p a r t o
E n c o n t r a c o r r i e n t e
D e s c e n d e n t e
A s c e n d e n t e
B i d i m e n s i o n a l
E n p a p e l
A s c e n d e n t e
E n c a p a f i n a
A d s o r c i n
H E T P , t r , V g
D e g a s e s
P r e f e r e n c i a p o r i o n e s
K
D e c a m b i o i o n i c o
P d e e n t r a r e n l o s p o r o s
V e
D e f i l t r a c i n m o l e c u l a r
U n i n e s p e c f i c a
D e A f i n i d a d
A d s o r c i n
R e p a r t o
C a m b i o I o n i c o
E x c l u s i n
H P L C
T i p o s d e C r o m a t o g r a f a
Tema 11. Introduccin a la qumica electroanalitica
( Anlisis instrumental
Skoog-Leary)
Contenido:
1) Que es una celda electroquimica
Celdas galvnicas y electrolticas
Ctodos y nodos
Celdas sin uniones lquidas
2) Potenciales de celda
3) Potenciales de electrodo
Naturaleza de los potenciales de electrodos
Definicin
Convenio de signos.
4) Potenciales de unin lquida
5) Corrientes en las celdas electroquimicas
Transporte de masas debido a la corriente
Corrientes faradaicas y no faradaicas
Efecto de la corriente en los potenciales de celda.
Origen de la polarizacin
Sobrepotencial
6) Tipos de mtodos electroanalticos
1. Que es una celda electroquimica
Una celda electroquimica consiste en dos conductores llamados
electrodos, cada uno sumergido en una disolucin adecuada de un
electrolito. Para que circules una corriente en una celda se tiene que cumplir
dos cosas:
1. Que los electrodos se conectan alternativamente mediante conductores
metlicos
2. Que las disoluciones de electrolito estn en contacto para permitir el
movimiento de los iones.
Las disoluciones no estn en contacto, porque reaccionara
directamente el Cu con el Zn, y se dara una reaccin redox y no
electroquimica.
El puente salino es un tubo relleno de una disolucin generalmente de
KCl. Su funcin es aislar los contenidos de las dos partes de la celda, pero
manteniendo el contacto elctrico entre ellas.
La corriente elctrica es conducida por tres procesos:
a) En los electrodos de Cu y Zn y en el conductor externo. Los electrones
son portadores, movindose desde el electrodo de Zn al de Cu.
b) En las disoluciones, donde el flujo de electricidad implica la migracin
tanto de aniones como de cationes. En la semicelda del Zn, los Zn
2+
viajan desde el electrodo al seno de la disolucin, y los aniones hacia el
electrodo del Zn. En la otra, el Cu
2+
viajan de la disolucin al Zn
electrodo, y los iones al revs. Dentro del puente salino, los K
+
viajan a la
semicelda de Cu y los Cl
-
a la de Zn. Todos los iones en las disoluciones
participan en el flujo de la electricidad.
c) En la superficie de los electrodos. Tiene lugar una reaccin de oxidacin
o de reduccin que proporciona el mecanismo por el cual la conduccin
ionica de las disoluciones s acopa con la conduccin electrnica de los
electrodos para dar un circuito completo. Los cationes tienden a ir al
electrodo que recibe electrones, y los aniones hacia el que los da. El Cu
2+
gana los electrones para dar Cu
o
reduccin. El Zn pierde dos electrones
para pasar a Zn
2+
oxidacin.
1.1 Celda galvnica y electroltica
Reaccin global:
Zn(s) + Cu
2+
(aq) Zn
2+
(aq) + Cu(s)
El potencial que se genera es una medida de la tendencia de esta
reaccin a evolucionar hacia el equilibrio.
S a
Cu
=1 y a
Zn
=1 E=1.1 V
Este valor de 1.1 V indica que la reaccin est lejos del equilibrio.
A medida que tiene lugar la reaccin, el potencial de celda se va
haciendo ms pequeo, alcanzando finalmente el valor de 0V. Cuando se
alcanza esto, el sistema se dice que ha llegado al equilibrio.
Las celdas como la anterior operan produciendo energa elctrica, y
se llaman celdas galvnicas.
Existen celdas que tienen la posibilidad de actuar como ambos tipos.
A estas se les llama celdas qumicamente reversibles.
Si colocamos una fuente de corriente continua a los dos electrodos,
invertimos el flujo de electrones y obtenemos una celda electroltica.
Cu(s) + Zn
2+
(aq) Cu
2+
(aq) + Zn (s)
En las que no se puede dar este tipo de reaccin son irreversibles.
1.2 Ctodos y Anodos
Ctodo es el electrodo donde tiene lugar la reduccin.
Anodo electrodo donde tiene lugar la oxidacin.
Estas definiciones son aplicables a ambos tipos de celdas (galvnicas y electroltica)
Celda galvnica Ctodo Cu y nodo Zn
Celda electroltica ctodo Zn y nodo Cu
Ejemplo de reacciones de reduccin:
Fe
3+
+ e
-
Fe
2+
2H
+
+ 2e
-
H
2

AgCl (s) + e
-
Ag + Cl
-
Los electrodos son inertes son de plata y oro. (cuando no hay slido
conductor, no intervienen en la reaccin)
Esta ltima reaccin se puede poner en dos etapas.
1. AgCl Ag
+
+Cl
-
2. Ag
+
+ 1e- Ag
Ejemplo de reaccin de oxidacin:
Fe
2+
- e
-
Fe
3+
2Cl
-
- 2e
-
Cl
2

2H
2
O - 4e
-
O
2
+ 4H
+
1.3 Celdas sin uniones lquidas
La interfase entre dos disoluciones que contienen electrolitos
distintos, o de distintas concentraciones del mismo electrolito, se llama
unin lquida. A menudo, las celdas electroquimicas contienen una o ms
uniones lquidas.
En la celda hay dos:
Puente salino con la primera disolucin
Puente salino con la segunda disolucin
Las uniones lquidas son a veces importantes en las medidas
electroquimicas, ya que en esta interfase se produce un pequeo potencial
de unin lquida, que va a influir en la magnitud de los potenciales de celda
totales. El problema es que no es tan fcil de medir, y la medida que
obtenemos no sabemos si se debe tambin a l.
Es posible preparar celdas electroquimicas que tienen un electrolito
comn. As se elimina el efecto de los potenciales de unin.
La reaccin que se producir en el nodo ser:
H
2
(g)H
2
(aq)
1/2H
2
-1e
-
H
+
En el ctodo se producir:
AgClAg
+
+Cl
-
Ag
+
+1e
-
Ag
La reaccin global es:
H
2
(g)+AgCl(s) H
+
+Cl
-
+Ag
Su representacin esquemtica ser:
Pt/H
2
(g),HCl(001M),Ag
+
(1810
-4
M)/Ag
Las barras representan los limites de fase. Y para la celda vista en el
apartado anterior.
Zn/ZnSO
4
//CuSO
4
/Cu
+m
Donde la doble barra representa el puente salino
2. Potencial de celda
Es la relacin entre el potencial de una celda electroquimica y las actividades de las
disoluciones que la constituyen. Hemos de recordar el concepto de actividad:
a
x
=f
x
[x]
Donde f
x
es el factor de actividad, si este es igual a uno la actividad
coincidir con la concentracin.
2AgCl(s)+H
2
(g) 2Ag+2Cl
-
+2H
+
Para esta reaccin su constante de equilibrio sera:
Donde la P es la presin parcial del hidrogeno. Teniendo en cuenta
que la actividad de un slido es igual a uno la ecuacin anterior se reduce a:
k
a a a
a P
Ag
H
Cl
AgCl H

+
2 2 2
2
Ahora vamos a definir el parmetro Q que es una variable y
representa la relacin entre las especies en un momento determinado. Se
hace constante cuando se llega al equilibrio.
En el equilibrio k y Q son iguales.
Sabemos por la termodinmica que la energa libre era:
G=RTlnQ-RTlnk
En el equilibrio hemos dicho que Q y k eran iguales, por lo que G
ser cero. Que es lo que se exige en el equilibrio termodinmico. Veamos
ahora como se deduce la ecuacin de Nerst que relaciona los potenciales de
una celda con los estndar.
En la ecuacin el primer termino es constante y se le llama potencial estndar de
electrodo. Operando adems con las constantes nos queda:
Si las actividades fuesen iguales a uno el potencial de celda coincidira con el estndar.
3. Potencial de electrodo
Dos semireacciones o semiceldas cada una de las cuales tiene un
potencial de electrodo. Estos potenciales miden la fuerza conductora para
las dos semireacciones cuando por convenio las dos semireacciones se
escriben como reducciones.
El potencial de celda ser la diferencia entre el potencial del ctodo y
el del nodo.
3.1 Naturaleza de los potenciales de electrodo
Debe resaltar que no existe ningn mtodo para determinar el valor
absoluto del potencial de un nico electrodo ya que todos los dispositivos
para medir potencial determinan solo diferencias de potencial. Uno de los
conductores de este dispositivo se conecta al electrodo en cuestin, sin
embargo con el objeto de medir una diferencia de potencial el segundo
conductor debe de tomar contacto con la disolucin de electrolito de la
semicelda. Este ultimo contacto implica una interfase solido-disolucin y por
tanto acta como una segunda semicelda en la que puede tener lugar una
reaccin qumica. A esta segunda reaccin le corresponde un potencial. Por
tanto no es posible obtener un valor absoluto para la semicelda deseada, lo
que se mide es la combinacin del potencial que nos interesa y la del
k
a a
P
H Cl
H

+
2 2
2
Q
a a
P
H
i
cl
i
H i

+
( ) ( )
( )
2 2
2

G nFE E
G
nF
E
RT
nF
k
RT
nF
Q
celda celda

ln ln
E E
n
Q
celda

'
ln
0 059
potencial de la semicelda para el contacto entre el de medida y el potencial
de la disolucin. La imposibilidad de medir potenciales absolutos no es un
problema. Es suficiente la existencia de semiceldas relativas medidas frente
a un electrodo de referencia comn. Estos electrodos pueden combinarse
para potenciales de celda electroquimicas.
Necesitamos por tanto, un electrodo de referencia cuidadosamente
definido. Este electrodo de referencia va a ser el electrodo normal de
hidrogeno. Este electrodo va a depender de la temperatura, la actividad y la
presin del hidrogeno en la superficie del electrodo.
3.2 Definicin de potenciales de electrodo
Se definen potenciales de celda para una celda que consiste en el electrodo en cuestin
que acta como ctodo y el normal de hidrogeno que acta como nodo.
La semicelda de la derecha consiste en un metal (M) en contacto con
la disolucin M
+n
. El potencial del electrodo observado es el potencial del
electrodo M
+2
/M. El potencial del puente salino se supone cero. Si la
actividad del metal en disolucin es igual a uno al potencial se le denomina
potencial estndar de electrodo E.
Los valores de los potenciales estndar de electrodo muestran las
fuerzas relativas de las especies ionicas como aceptoras de electrones.
3.3 Convenio de signos para potencial de electrodos.
1953. IUPAC Cualquier convenio se debe basar en procesos de
semiceldas escritas de forma nica. l termino de potencial de electrodo se
reserva para semireacciones escritas como reducciones.
El signo del potencial se fija por el signo real del electrodo de inters.
nodo
Potencial negativo Los electrones salen de el
Ctodo
Potencial positivo Los electrones fluyen hacia l
4. Potencial de unin liquida
Cuando dos disoluciones de electrolitos de distinta composicin se ponen en contacto se
desarrolla un potencial en la interfase. Este potencial de unin es debido a la desigualdad de
distribucin de cationes y aniones en la superficie de contacto debido a las diferencias de
velocidades a la que las especies migran.
Vamos a considerar una interfase con dos disoluciones de HCl a
distintas concentraciones. Los H
+
y Cl
-
tiende a difundirse a travs de la
superficie de contacto desde la mas concentrada a la menos concentrada.
La fuerza conductora para estas migraciones es proporcional a la diferencia
de concentraciones. La velocidad a la que distintos iones se mueven por la
Condiciones estndar para el electrodo de hidrogeno:
a
H
+
=1
P
H2
=1 atm
T=25C
E=000V
influencia de una fuerza determinada varia considerablemente. En este
ejemplo el protn es ms rpido que el cloro. El resultado neto es una
separacin de cargas a ambos lados de la superficie de contacto.
La variacin de potencial de unin que resulta de la separacin de
carga puede ser de 30mV. Las celdas de inters analtico no suelen tener
una composicin tan sencilla por, lo que no se puede medir de forma fiable
este potencial de unin. La solucin esta en introducir una disolucin
concentrada de un electrolito entre las dos disoluciones(puente salino). La
efectividad del puente salino no solo se mejora con la concentracin,
tambin cuando las movilidades de los iones de la sal son muy parecidos.
Si los Cl
-
interfieren se puede sustituir por NO
3
-
. Con estos puentes los
valores del ejemplo alcanzan normalmente valores de unos pocos de
milivoltios. Cantidad despreciable en muchas ocasiones, pero no en toda las
medidas analticas.
5. Corrientes en las celdas electroquimicas
La electricidad se transporta en el interior de la celda por migracin de iones a travs
del puente salino y externamente a travs del conductor.
Si las corrientes son pequeas se cumple la ley de Ohm (E=IR). R es la resistencia del
electrolito medida en ohmnios. Va a depender de los tipos y concentracin de los iones en la
disolucin.
5.1 Transporte de masa debido a las corrientes
Experimentalmente a un potencial determinado la velocidad a la que se mueven distintos iones
en disolucin varia considerablemente. H
+
es siete veces ms rpido que Na
+
. Aunque todas las
cargas de una disolucin participan en la conduccin elctrica la fraccin transportada por un
ion puede diferir de la transportada por otro. Esta fraccin depende de la concentracin relativa
de los iones, al igual que de sus movilidades. Si a la disolucin le adicionamos un exceso de una
sal que no interfiera prcticamente en el interior de la celda por los iones adicionados.
5.2. Corrientes faradaicas y no faradaicas
Dos procesos pueden dar lugar a corrientes a travs de la interfase electrodo-disolucin. Son los
procesos faradaicos y los no faradaicos.
Procesos faradaicos
Estn gobernados por las leyes de Faraday que predicen que la extensin de la reaccin
qumica en un electrodo es proporcional a la intensidad. Las corrientes resultantes se le llama
corrientes faradaicas.
En ciertas condiciones la celda presenta un intervalo de potenciales a los cuales los
procesos faradaicos estn excluidos de uno o ambos electrodos.
La conduccin de la corriente puede tener lugar como resultado de un
proceso no faradaico, as, que cuando un potencial continuo se aplica a una
celda electroltica se observa una corriente momentnea que decrece
rpidamente a cero. Esta corriente es corriente de carga que crea un exceso
o defecto de carga negativo en la superficie de los electrodos, como
consecuencia de la movilidad inica las capas de disolucin adyacentes
adquieren carga opuesta.
Como consecuencia de la aplicacin de un potencial positivo en la
capa disolucin cargada, pueden diferenciarse dos zonas, la primera zona,
capa inerte compacta en la que el potencial disminuye linealmente con la
distancia, y una segunda capa, ms difusa, en la cual el potencial disminuye
exponencialmente.
Esta disposicin de carga en la superficie electrodo y son adyacentes se le denomina doble capa
electrnica. Doble capa elctrica formada por potencial de corriente continua, implica una
corriente no faradaica momentnea, la cual decae a cero, es decir, el electrodo se polariza, a no
ser que tenga lugar un proceso faradaico que produzca la despolarizacin.
Proceso no faradaico
Un potencial continuo se aplica a una celda electrpoquimica se
observa una corriente momentanea que decrece rapidamente a cero. Esta
es una corriente de carga que crea un exceso o un defecto de carga
negativa en la superficie de los electrodos como consecuencia de la
movilidad ionica las capas de la disolucin adyacente adquieren carga
opuesta.
5.3 Efecto de la corriente de los potenciales de celda
Cuando se produce una corriente continua en una celda
electroquimica, el potencial de celda medido experimentalmente difiere del
potencial obtenido por clculos termodinmicos
Ecelda= Ecat Enodo
Se debe a dos fenmenos:
Resistencia ohmica
Efectos de polarizacin sobrepotencial de transferencia de carga
sobrepotencial de difusin, de cristalizacin, etc..
Generalmente estos fenmenos tienen el efecto de reducir el
potencial en una celda galvnica y aumentar el potencial necesario para
desarrollar una corriente en una celda electroltica.
Para que circule una corriente, tanto en celda galvnica como
electroltica se necesita una fuerza de conduccin en forma de potencial que venza la
resistencia de los iones al movimiento hacia el ctodo o el nodo, esta fuerza sigue la ley de
Ohm y se conoce como potencial ohmico o de cada P=IR el efecto neto es aumentar el
potencial necesario para operar en una celda electroquimica o disminuye l E medido en una
celda galvnica.
Ecelda=Ecat- Eanodo- I R
Esta ecuacin predice que a potenciales de electrodos constantes
existe una relacin lineal, entre el potencial de celda y la intensidad de
corriente
No obstante, a menudo, se encuentran desviaciones de la linealidad y en estas circunstancias, se
dice que la celda est polarizada. La polarizacin puede tener lugar en un o en ambos
electrodos.
Para estudiar la polarizacin, es til utilizar las curvas de intensidad potencial (i-E).
La polarizacin en un electrodo sencillo se puede estudiar por acoplamiento con un electrodo
que no sea polarizable. Un electrodo ideal polarizado es aquel cuya corriente permanece
contaste e independiente del potencial, en el intervalo considerado.
Orgenes de la polarizacin
En las transparencias se representan las tres regiones de una semicelda en la que puede tener
lugar la polarizacin, estas regiones incluyen electrodo, capa superficial y seno de la disolucin,
la reaccin global;
Ox + ne
-
Rd
Cualquiera de las etapas intermedias puede limitar la velocidad a la cual tiene lugar el
proceso global, y por tanto, la magnitud de la corriente, una de las etapas es la reaccin llamada
transferencia de masas implica movimiento de la especie oxidada desde el seno de la
disolucin a la superficie del electrodo. Cuando esta etapa limita la velocidad y por tanto i se
dice que hay polarizacin por concentracin.
Algunas reacciones de semicelda provienen de una reaccin qumica intermedia en la
que se forma especies oxidada o reducida. Este producto intermedio es el participante en el
proceso de transporte de masas. Si la velocidad de formacin o descomposicin de estos
productos limita la intensidad de corriente se dice que hay presente una reaccin de
polarizacin. Puede ser de adsorcin, desorcin o cristalizacin.
Finalmente se puede producir polarizacin por transferencia de carga
en la que la limitacin de corriente surge de la lenta velocidad de electrones
desde el electrodo hasta las especies o iones. O bien, desde especies
reducidas al electrodo. No es inusual encontrar semiceldas donde tenga
simultneamente lugar varios tipos de polarizacin.
Sobrepotencial
El grado de polarizacin de un electrodo se mide por el sobrepotencial o sobrevoltaje
que no es ms que la diferencia entre el potencial del electrodo real y potencial termodinmico.
= E E
eq
Donde va a ser va a ser siempre negativo.
6. Tipos de mtodos electroanaliticos
Ver trasparencias, Skoog o apuntes de Cristina
11. DETERMINACION DE CALCIO EN UNA MUESTRA DE AGUA
MEDIANTE ESPECTROFOTOMETRIA DE ABSORCION ATOMICA (EAA)
12.1 OBJETIVOS
Definir los conceptos sensibilidad y limite de deteccin en EAA.
Observar el EAA Perkin Elmer 2380 y describir la instrumentacin bsica del
equipo.
Explicar la incidencia y significacin del calcio en las muestras de agua.
Aplicar los principios fundamentales de la EAA en la determinacin del calcio en
una muestra de agua.
12.2 ASPECTOS TEORICOS
12.2.1 Calcio. El calcio es uno de los elementos que hace parte de la dureza del agua.
Existe principalmente en forma de bicarbonatos. Las aguas potables de buena calidad
contienen de 100 a 140mg/L del calcio. Las aguas que sobrepasan los 200mg de calcio
presentan inconvenientes para los usos domsticos e industriales.
12.2.2 Principios generales de la EAA. Los mtodos espectroscpios se basan en la
medida de la radiacin electromagntica emitida o absorbida por la materia; los mtodos
de emisin utilizan la radiacin emitida cuando un analito es excitado por energa
trmica, elctrica o radiante; los mtodos de absorcin estn basados en la disminucin
de la potencia de la radiacin electromagntica como consecuencia de la absorcin que
se produce en su interaccin con el analito.
La EAA se refiere a la absorcin de elementos. Si se aplica energa a un tomo, esta
puede ser absorbida y un electrn externo puede ser promovido a una configuracin
conocida como estado excitado; dado que ese estado es inestable, el tomo retornar
inmediatamente al estado fundamental, emitiendo energa.
La caracterstica de inters en las medidas de absorcin atmica, es la cantidad de luz
absorbida por un analito, a la longitud de onda resonante, cuando pasa a travs de una
nube atmica. Conforme al nmero de tomos se incrementa en el paso de la luz, la
cantidad de luz absorbida o aumentar.
La ley de Beer, muestra la relacin entre absorbancia y concentracin del analito,
mediante la ecuacin.
A = a.b.c Donde A = absorbancia
a = coeficiente de absortividad (constante)
b = Longitud del camino ptico
c = concentracin
12.2.3 Instrumentacin de absorcin atmica. Los instrumentos de absorcin
atmica tienen los siguientes aditamentos:
Fuente de luz. Una de las fuentes ms ampliamente empleada en EAA es la lmpara
de ctodo hueco. Estas lamparas son diseadas para emitir el espectro atmico de un
elemento; se utilizan lamparas especificas para el elemento que se va a determinar.
Celda de absorcin. Produce los tomos de la muestra. Se hace necesario generar un
vapor atmico en el paso del rayo de luz de la fuente. Este se obtiene generalmente
al introducir la muestra en un generador de tomos o alternativamente, en un horno
calentado mediante electricidad, que se encuentra alineado en el paso ptico del
espectrofotmetro.
Monocromador para la dispersin de la luz. La seleccin de una fuente especifica y
de una longitud de onda particular de la fuente, permite determinar la concentracin
del elemento seleccionado en presencia de otros. La longitud de onda aislada por el
monocromador incide directamente sobre el detector.
Detector. El detector mide la intensidad de la luz y amplifica la seal. El detector es
un fotomultiplicador que produce una corriente elctrica dependiente de la
intensidad de la luz incidente. La corriente elctrica del fotomultiplicador es
procesada por la electrnica del elemento; se produce una seal que es una medida
de la atenuacin de la luz en la celda de muestreo.
Pantalla. Muestra la lectura despus de que han sido procesadas por el instrumento
electrnico.
12.2.4 Control de interferencias en EAA. Las interferencias en absorcin atmica
estn bien definidas, como tambin los medios de tratarlas.
La interferencia est constituida por todo fenmeno cuyo resultado desvirta la
determinacin.
Las interferencias existentes en EAA se clasifican como:
Interferencias debidas a la llama
Interferencias de ionizacin.
Interferencias debidas a la matriz
Interferencias qumicas
Interferencias espectrales.
12.2 ASPECTOS TEORICOS POR CONSULTAR.
- Defina los trminos sensibilidad y limite de deteccin para la EAA.
- Describa en forma general los instrumentos colormetro, fotmetro y espectrofotmetro.
12.4 MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS.
12.4.1 Materiales. Pipetas de 10, 5,3,2,1 mL, balones aforados de 100mL, frasco
lavador.
12.4.2 Reactivos. HNO3 concentrado, HCl concentrado, aire purificado y secado,
acetileno puro, agua libre de metales, solucin de lantano 5% P/V, soluciones de calcio
de 1000, 50, 4, 2 mg/L.
12.4.3 Equipos. Espectrofotmetro de absorcin atmica, lampara de ctodo hueco de
calcio, balanza analtica.
12.5 PROCEDIMEINTO PARA EL FUNCIONAMIENTO
DEL PERKIN ELMER 2380
Consulte en el manual de instrucciones del equipo, las condiciones estndares para
el calcio.
Gire cada uno de los controles en sentido opuesto de las manecillas del reloj.
Coloque la cabeza del quemador para la llama aire-acetileno.
Encienda el equipo
Coloque la lmpara de ctodo hueco de calcio y aplique la corriente que recomienda
el fabricante. Deje que se estabilice la corriente, durante aproximadamente 10
minutos.
Optimice la longitud de onda.
Alinee la lmpara para conseguir la ganancia ptima del equipo.
Ajuste la posicin del quemador.
Conecte los gases aire y acetileno y ajuste el flujo de cada uno de ellos.
Prenda el quemador.
Aspire un blanco y ponga en cero el instrumento.
Aspire la solucin de sensibilidad para el calcio y ajuste la velocidad de aspiracin
de nebulizador para obtener la mxima ganancia. Ajuste los gases combustible y
oxidante para obtener tambin una mxima ganancia.
Aspire un blanco y ponga de nuevo en cero el instrumento.
Agregue 10ml de la solucin de xido de lantano al 5% P/V a 100ml de la muestra y
de los estndares; proceda al anlisis de la muestra.
12.6 PREGUNTAS Y CALCULOS
En qu consisten las interferencias qumicas, interferencias debidas a la llama,
interferencias de ionizacin, interferencias debidas a la matriz, interferencias
espectrales?
Haga un diagrama de lmpara de ctodo hueco y describa su funcionamiento.
Describa el quemador para un atomizador de llama convencional (sistema de
quemador de premezcla).
Determine la concentracin en mg/L de Ca de la muestra analizada y compare los
resultados con el contenido de calcio obtenido en la muestra de agua potable
mediante volumetra complejomtrica.
Con que fin se adiciona la solucin de lantano a la muestra y a los patrones cuando
se determina calcio?
12.7 BIBLIOGRAFIA CONSULTADA
APHA, AWWA, WPCF. Mtodos normalizados para el anlisis de aguas potables y residuales.
Ed. Daz de Santos, S.A. Madrid. 1992. Pag 3-1,3-27.
PERKIN-ELMER CORPORATION. Analytical Methodos for Atomic Absortion
Spectrophometry. USA 1987.
PERKIN-ELMER CORPORATION. Instructions Model 2380 Atomic Absorbtion
Spectrophometry. USA 1987.
SKOGG, D yWEST, D, HOLLER F. Qumica Analtica. 6Ed. Mc Graw-Hill. Mxico
1995. Pags 453-479.
12.8 Bibliografa para consultar
SKOGG, D y WEST, D, HOLLER F. Qumica Analtica. 6Ed. Mc Graw-Hill. Mxico.
1995.
CRISTIAN, D. Qumica Analtica. 2Ed. Limusa. Mxico 1981.
NOMBRE DE LA PRCTICA:
ESPECTROSCOPA
NUMERO DE CONTROL:
01020605
FECHA:
Octubre 24 del 2001
INTRODUCCIN
Desde el siglo XVII en que Newton demostr que la luz solar esta compuesta por varios
componentes coloridos que se pueden combinar para producir luz blanca. Los qumicos y los
fsicos han estudiado las caractersticas de los espectros de emisin de varias sustancias, estos
es, la radiacin emitida por las sustancias, ya sea continua o e forma de lneas.
Cada elemento tiene un espectro de emisin nico. Las caractersticas de los espectros
atmicos para identificar tomos desconocidos.
Existen dos clases de espectros, cuando se analiza la luz emitida por una fuente se
obtiene un espectro de emisin, sin embargo, el espectro que se obtiene despus que la luz
proveniente de alguna fuente pasa a travs de una sustancia es un espectro de absorcin.
El espectroscopio es el instrumento que se usa para el anlisis de la luz separando sus
diversas longitudes de onda.
Los espectros de emisin se observan en el espectroscopio como lneas de color
(frecuencia emitida) sobre un fondo negro. Los espectros de absorcin muestran todos los
colores entremezclados con lneas negras (frecuencias absorbidas).

Material y equipo
1.- Espectroscopio
2.- Lmparas de Sodio, Mercurio y tungsteno.
3.- Solucin de KmnO
4
y de HCl
4.- Carta de espectros
5.- Sales de Na, Sn, K
6.- Mechero de bunsen
7.- Asas de cremo niquel
8.-Gradilla
9.-Tubos de ensaye

Desarrollo experimental
El primer experimento que se realizo fue el de analizar la luz solar a travs del
espectroscopio. En el cual pudimos ver la descomposicin de la luz antes mencionada
en los siete colores primarios. El espectro es similar a la siguiente imagen que se
presenta.
Se hace pasar la luz de una lmpara a travs de la ranura del espectroscopio se
observa en la pantalla del espectroscopio las lneas de color caracterstico de las
sustancias y se lee en la escala correspondiente sus longitudes de onda, que
corresponden a las lneas espectrales emitidas. A continuacin se llevan estos colores
a la carta de espectros y se observa que coincidan exactamente con las lneas de
emisin de una sustancia conocida determinndose de esta manera la sustancia
desconocida.
Entre la luz de tungsteno y la ranura del espectroscopio se coloca la sustancia de KmnO
4
. Se
observa entonces un espectro continuo con rayas o bandas oscuras debido a que las sustancia
absorbe luz de ciertas longitudes de onda.
El espectro que provoc fue un espectro de absorcin el cual iba de 5300 a 5100
En vidrios de reloj se coloca sal de los diferentes elementos con los que se vaya a trabajar, se
deber tener en tubos de ensayo HCl y estos en una gradilla, para poder limpiar las asas de
nicromo cada vez que se haga un ensayo a la flama de las sales de prueba. Esto se hace con muy
poca sal para no contaminar el mechero. Se trata de analizar el espectroscopio
Entre los Algenos que analizamos estuvieron los siguientes:
Cloruro de Sodio
Sulfato de Cobre
Cloruro de estroncio
Los espectros que aparecen son:
En el Coluro de Sodio aparece oscuro en el que predomina el naranja, seguido del verde y
despus el morado. El cual tiene un espectro de absorcin hasta de 5900
En el Sulfato de Cobre aparecen los colores naranja, amarillo, verde y morado.
El Cloruro de Estroncio cuenta con los colores, rojo, naranja, amarillo, verde, morado.
Alcanzando 6800
PRACTICA N 1
DESTILACIN. CLCULO DE LA ALTURA EQUIVALENTE Y EFICACIA DE UN PLATO
TERICO.
INTRODUCCIN TERICA:
La destilacin es una operacin unitaria de transferencia de materia entre una fase
gaseosa y otra lquida, en la cual mediante sucesivas vaporizaciones y condensaciones, se
consigue la separacin de una mezcla lquida en sus componentes, siempre que stas tengan
volatilidad diferente.
En una mezcla lquida en ebullicin el vapor producido y el lquido estn en equilibrio.
Cuando esto ocurre, a una temperatura dada, la composicin de una fase gaseosa es ms rica
que la lquida en el componente ms voltil.
Aplicando las reglas de las fases: F + L = C + 2
Para una mezcla binaria, como en nuestro caso, tendremos 2 fases y 2 componentes por lo cual
nos quedan 2 grados de libertad o variables independientemente del sistema.
Las variables intensivas independientes del sistema son: Presin, temperatura,
composicin de la fase lquida y composicin de ola fase gaseosa. As si fijamos la presin y la
temperatura quedan automticamente establecidas las composiciones de ambas fases, referidas
generalmente al componente ms voltil.
En estas condiciones podremos construir un diagrama isobaro, temperatura-
composicin. Al variar la presin este diagrama apenas varia su forma, pero se desplaza
verticalmente. Esto nos permite el empleo de un nuevo diagrama, composicin del lquido-
composicin del gas, para cada sistema, muy poco sensible a las variaciones de presin.

CLCULO DEL NMERO DE PLATOS TERICOS: MTODO DE Mc CABE- THIELE.
y
D
y
T
T
2
T
1
Los datos conocidos en el diseo de una columna de rectificacin son,
normalmente, caudal y composicin de la alimentacin y composicin del destilado y residuo,
es decir, se conocen A, XA, XD y XR.
Si realizamos un balance de materia global del componente ms voltil, tendremos:
A = D + R
AXA = DXD + RXR
El mtodo de Mc Cabe- Thiele supone que los caudales molares de vapor y lquido son
constantes en las dos zonas de la columna (enriquecimiento y agotamiento) lo cual es una
aproximacin que se cumple en la mayora de los casos.
El balance de materia para el componente ms voltil en un piso cualquiera, n, en la zona
de enriquecimiento ser:
VYn = LXn+1
+ DXD
Yn =L/VXn+1
+ D/V XD
Se puede establecer un balance idntico para un piso m de la zona de agotamiento:
Y
m
=L/V Xm+1
R/V XR
Estas dos expresiones representan las rectas de operacin en un diagrama x-y y se
denominan recta de enriquecimiento y recta de agotamiento respectivamente. La recta de
enriquecimiento tiene una pendiente de valor L/V 1 y corta a la diagonal en el punto XD. A su
vez, la recta de agotamiento tiene una pendiente C/V 1 y corta a la diagonal en el punto X
D
.
El clculo de nmeros de platos tericos para llevar a cabo la separacin deseada se
calcula trazando el nmero de escalones entre la curva de equilibrio y la recta de operacin, en
el diagrama x-y. El nmero de pisos coincide con el nmero de escalones trazados.
Cuando todo el destilado se devuelve como reflujo (condiciones de reflujo total) el n de
pisos es mnimo, L/V=1 y la recta de operacin coincide con la diagonal del diagrama x-y.
Para pasar de n de platos tericos a platos reales, es necesario conocer la eficacia de los
platos. Definimos eficacia de un plato real como la relacin entre el n de platos ideales y los
reales necesarios para conseguir la separacin deseada.
Para medir la eficacia de una columna de relleno puede establecerse la comparacin con
una de platos, atendiendo a los resultados y no al funcionamiento. En trminos estrictos, la
comparacin es inadecuada, ya que se trata de esquemas totalmente diferentes, uno de contacto
continuo y otro de contacto en etapas. No obstante podemos dividir la columna en varias zonas
tales que el liquido y el vapor que salen de ellas estn en equilibrio. Cada una de estas zonas
reales platos n
teri platos n
Eficacia

cos

(I)
equivalen aun plato terico y su altura se denomina altura equivalente a un plato terico
(HETP).

PARTE EXPERIMENTAL
El objetivo de esta practica es el clculo del nmero de platos tericos necesarios y de la
eficacia o HETP segn se haya realizado la experiencia con una columna de platos de relleno.
Para la practica utilizaremos una mezcla de etanol-agua.
Se introduce en el matraz una cierta cantidad de la mezcla y se comienza a calentar
hasta alcanzar las condiciones de reflujo total. Puede considerarse que se ha alcanzado el
equilibrio cuando la temperatura del termmetro situado en la cabeza de destilacin permanecen
constantes y lo ms prximas posibles.
Una vez alcanzado el equilibrio se espera unos 10-15 minutos y se toma, lo ms
simultneamente posible, una muestra del destilado y una muestra del residuo del matraz.
Se dejan enfriar ambas muestras y se determina la composicin a partir de la medida del
ndice de refraccin.
UTILIZACIN DE LOS DATOS
1- Calibrado del refractmetro: Para poder calcular la composicin de las muestras a
partir de su ndice de refraccin es necesario realizar un calibrado previo del refractmetro. Para
ello se preparan una serie de muestras de etano-agua, de fracciones molares conocidas con
exactitud y se determina su ndice de refraccin.
Con estos datos se realiza una representacin grfica poniendo en las abscisas la
fraccin molar del etanol en la muestra y en las ordenadas el ndice de refraccin.
Con esta grfica podremos conocer la composicin del destilado y del residuo en la
experiencia.
2- Construccin del diagrama x-y: Los datos de equilibrio lquido-vapor para la
mezcla etanol-agua se tomarn de la bibliografa. Normalmente estos datos estn tabulados en la
forma temperatura-composicin, sin embargo, la conversin a la forma x-y puede realizarse
fcilmente sabiendo que x es la fraccin molar del componente ms voltil en la fase lquida e y
la fraccin molar del ms voltil, en el vapor.
3- Clculo del nmero de platos tericos: En las condiciones en las que se realiza la
experiencia, reflujo total, las rectas de operacin coinciden con la diagonal en el diagrama x-y.
Se marcan sobre la diagonal los valores XD (composicin del destilado) y XR
(composicin del residuo).
Partiendo al punto XD se harn escalones entre la diagonal y la curva de equilibrio, hasta
alcanzar el punto XR.
El nmero de platos tericos coincide con el nmero de escalones trazados.
4- Clculo de la eficacia o HETP: Segn se haya realizado la experiencia, en una
columna de platos o de relleno, se calcula la eficacia o la HETP segn las expresiones I y II
respectivamente.
Datos de equilibrio lquido-vapor: etanol-agua.
cos teri platos n
relleno del total Altura
HETP
(II)
LIQUIDO VAPOR TEMPERATURA
0 0 100
19 1700 955
721 3891 890
966 4374 867
1238 4704 85,3
1661 5089 841
2337 5445 827
2608 5580 823
3273 5826 815
3965 6122 807
5079 6564 798
5198 6599 797
5782 6841 793
6763 7385 7874
7472 7815 7841
8943 8943 7815
Datos obtenidos en la experiencia:
1- Calibrado del refractmetro: Preparamos disoluciones de etanol-agua de 20 gra-
mos, 40 g., 60 g., 80 g. y 100 g. de etanol.
- Preparacin de las disoluciones:
* 20 gramos de etanol:
g
X
etanol g
etanol g
2 96
100

etanol de g X 2
g. H2O = 10 g. 2 g. = 8 g. de H2O = 8 ml. de H
2
O.
V Etanol= m/d
ml g
g
etanol V
/ 816 ' 0
2

= 245 ml de etanol.

* 40 gramos de etanol:
X
disolucin g
etanol g
disoucin g 10
40
100

X= 4 g. de etanol.
X
disolucin g
etanol g
disolucin g 10
20
100

etanol de g X . 2
g
X
etanol g
comerc etanol g
4 . 96
. 100

etanol de g X 1 ' 4
g. H2O= 10 g. 41 g. = 59 g. de H2O = 59 ml de H2O.
V Etanol= 41/ 0816= 502 ml de etanol.
* 60 gramos de etanol:
X
disolucin g
etanol g
disolucin g . 10
. 60
. 100

X= 6 g. de etanol.
. 6 96
. 100
g
X
etanol g
etanol g

X= 62 g. de etanol.
g. H2O= 10 g.- 62 g. = 38 ml de H2O.
V Etanol= 62/ 0816= 759 ml de etanol.
* 80 gramos de etanol:
X
disolucin g
etanol g
disolucin g . 10
. 80
. 100

X= 8 g. de etanol.

g. H2O= 10 g. 83 g. = 17 ml de H2O.
V Etanol= 83/ 0816= 1017 ml de etanol.
* 100 gramos de etanol:
. 8 . 96
. 100
g
X
etanol g
etanol g

X=83 g. de etanol.
X
disolucin g
etanol g
disolucin g . 10
. 100
. 100

X= 10 g. de etanol.
0 ml de H2O.
V Etanol= 10/0816= 1225 ml de etanol.
g. ETANOL VOL H2O (ml) VOL ETANOL (ml) I.R
20 8 2,45 7
40 5,9 5,02 13
60 3,8 7,59 16
80 1,7 10,17 18
100 12,25 19
Recta de calibrado:
Indice de refraccin lquido = g. 20 g etanol
Indice de refraccin gas = 185 86 g etanol
Construccin del diagrama x-y y clculo del n de platos tericos:
0
5
10
15
20
0 20 40 60 80 100 120
g. ETANOL
I
.
R
n platos tericos = n escalones trazados.
n platos tericos = 8.
Calculo de HETP:

. / 10
8
80
cos
plato cm
cm
teri platos n
relleno del altrura
HETP
PRCTICA N2
INTERCAMBIADOR DE CALOR. TUBOS CONCNTRICOS
U = CTTE.
FUNDAMENTO TERICO:

Con esta prctica queremos determinar de forma experimental, el coeficiente de
transmisin: U.
Un intercambiador de calor es cualquier dispositivo en el que se verifica un intercambio
de calor entre dos fluidos, separados por una pared slida.
La intensidad de paso de calor a travs de un elemento diferencial de superficie se
expresa:
dQ= UdA T
Donde U es el coeficiente integral de transmisin de calor y se puede relacionar con la
resistencia calorfica por esta ecuacin:
UdA= 1/ R
En nuestro caso, la pared de tubo interno tiene un dimetro en su parte externa (Da) y
en su parte interna (Di) y una conductividad K, circulando por el tubo externo concntrico con
el tubo interior dos fluidos entre los cuales se realiza un intercambio de calor referido a la
superficie externa se tendr:
- Siendo hi el coeficiente de conveccin del fluido interno-pared.
- Siendo ha el coeficiente de conveccin del fluido externo-pared.
Vamos a operar con un valor medio de T que es la diferencia de temperaturas entre los
dos fluidos, esta diferencia varia continuamente de un extremo a otro del cambiador as
tendremos para corrientes paralelas con U constante:
ha Di
Da
Ln
K
Da
Da Di hi U
1

2
1
) / (
1 1
+

,
_

,
_

+
PARTE EXPERIMENTAL:
El agua fra de la red atraviesa el tubo central del cambiador y sale directamente a la
pileta de la mesa. La altura del agua en la superficie del depsito permanece constante. El
caudal de agua de la red permanece constante, pues la altura hidrosttica que lo provoca
tambin lo es.
El agua caliente proviene de un termostato que proporciona el fluido calefactor en
corriente. Sean:
Tf
1
: temperatura de entrada del agua fra.
Tf
2
: temperatura de salida del agua fra.
Tc
1
: temperatura de entrada del agua caliente.
Tc
2
: temperatura de salida del agua caliente.
Cuando ponemos en marcha la bomba peristltica, que impulsa el fluido caliente, se
ajusta el caudal de ambos fluidos en el entorno a 1-15 l/min. y esperamos a que las cuatro
temperaturas permanezcan constantes.
Se determinan los caudales de agua fra y caliente por medida directa. Anotamos los
caudales en m
3
/s.
Se determina la diferencia media logartmica de temperaturas.
2 1
1 2
2 1 1 2
) ( ) (
log
f c
f c
f c f c
T T
T T
Ln
T T T T
m T

As podemos determinar el coeficiente integral de transmisin U del calor para este
tipo de intercambiador de calor.
A Tm
Q
U
log

C m h
Julios

2
Nuestros datos son:
Tc
1
: 47 C Caudal = 100 ml/8s 1 litro/ 1000 ml 60 s/ 1 min= 075 l/min.
Tc
2
: 447 C
Tf
1
: 143 C Caudal = m Cp (Ts
f
- Te
f
)
Tf
2
: 183 C
* Tm log:
3 ' 18 47
3 ' 14 7 ' 44
) 3 ' 18 47 ( ) 3 ' 14 7 ' 44 (
log

Ln
m T
=296 C.
* A:
A= largo dimetro externo
A= 59 cm 27 cm = 50045 cm
2
= 5 10
-2
m
2
* m:
m= V/t = 075 l / 1 min 1 min / 60 s. = 00125 l/s.
* Densidad:
densidad = m/Vm= d V= 1 00125 Kg/s 3600s / 1 h = 45 Kg/h.
* Q:
Q = m Cp ( Ts- Te) = 45 Kg/h 1 Kcal/ C. Kg ( 183- 143) C= 180Kcal/h.
* U:
Determinacin del coeficiente de conveccin interno hi:
El coeficiente integral de transmisin referido a la superficie interna, viene dado por:
donde:
U= 12162 Kcal/ hm
2
C
ha = 15000 Kcal/hm
2
C
K = 094 Kcal/ h m C
Di =126 cm = 00126 m
Da = 27 cm = 0027 m
) / (
1

2
1 1 1
Da Di ha Da
Di
Ln
K
Di
hi U
+ +
C m h
Kcal
C m
h Kcal
A Tm
Q
U

62 ' 121
6 ' 29 10 5
/ 180
log
2 2 2

PRACTICA N 3
SIMULACIN DE REACCIONES COMPLEJAS: REACCIONES
REVERSIBLES.
INTRODUCCIN TERICA:
El objetivo de esta practica es la simulacin de una reaccin reversible y la obtencin de
sus datos cinticos, es decir, constantes de velocidad y orden de reaccin.
Supongamos la reaccin:
A B
Donde: K
1
: ctte de velocidad de la reaccin directa.
K
2
: ctte de velocidad de la reaccin inversa.
La velocidad de desaparicin del componente A viene dada por:
V1= - dCA/ dt = K
1

1 n
A
C
La velocidad de descomposicin del componente B vendr dada por:
V2= - dCB/ dt = K2
2 n
B
C
La velocidad de la reaccin total con respecto al componente A ser:
- dCA/ dt = K1
1 n
A
C + K2
2 n
B
C
n
1
y n
2
representan las rdenes de reaccin respecto a A y B respectivamente.
Si suponemos que el orden de la reaccin es vamos a relacionar las concentraciones de
A y B, ya que lo que aumente B ser lo mismo que disminuya A.
C
B
= -C
A

B
- C
Bo
= - ( C
A
- C
Ao
)
C
B
= C
Bo
+ C
Ao
- C
A
Sustituimos en la ecuacin de velocidad:
dC
A
/dt = K
2
(C
Bo
+ C
Ao
C
A
) K
1
C
A
dC
A
/dt = K
2
(C
Bo
+ C
Ao
) (K
1
+ K
2
)C
A
Sabemos que en el equilibrio dCA/ dt = 0, por tanto la velocidad ser cero, tendremos:
K
2
(C
Bo
+ C
Ao
) (K
1
+ K
2
)C
A
= 0
K
2
(C
Bo
+ C
Ao
) = (K
1
+ K
2
)C
A
Si ahora llamamos CA = CAeq , tendremos: K
2
(C
Bo
+ C
Ao
) = (K
1
+ K
2
) C
Aeq
Sustituyendo de nuevo en la ecuacin de velocidad tendremos:
dC
A
/dt = (K
1
+ K
2
) C
Aeq
- (K
1
+ K
2
)C
A
Sacamos factor comn y separamos variables, llegamos a:
A Aeq
A
C C
dC

=(K
1
+ K
2
) dt Integramos:

+

t C
C
A Aeq
A
dt K K
C C
dC A
Ao
0
2 1
) (

t K K
C C
C C
Ln
Ao Aeq
A Aeq
) (
2 1
+

Si representamos
Ao Aeq
A Aeq
C C
C C
Ln

frente a t, obtenemos una recta de pendiente

negativa cuyo valor es K
1
+K
2
.
Despejamos ahora CA: C
Aeq
C
A
= (C
Aeq
C
o
) e
-(K1 + K2) t
Si hacemos la representacin de CA frente a t, obtendremos una grfica experimentalmente
como se trata de una reaccin reversible lo ms que avanzar ser hasta el valor del equilibrio
que ser el lmite de la exponencial.
C
A
t
Esto es si el orden de la reaccin es 1. Vamos a tratar de determinarlo.
Sabemos que la velocidad de la reaccin se puede expresar de la forma:
Debido a que la concentracin de B puede considerarse como nula en el inicio de la
reaccin.
Representamos los valores de la velocidad inicial a la concentracin inicial de A y se
obtienen los valores de K1 y n1.

Aplicando de nuevo el mtodo diferencial obtendremos los valores de K2 y n
2
.
PARTE EXPERIMENTAL:
La instalacin en la que llevaremos a cabo la prctica, es la que se muestra en la figura.
1
1

n
A
A
C K
dt
dC

1
]
1

Ao Aeq
A Aeq
C C
C C
Ln

2
2
1
1

n
B
n
A
A
C K C K
dt
dC

2
2
1
1

n
B
n
A
A
C K C K
dt
dC
+
t
pte=K
1
+K
2
La ecuacin
se puede escribir de la forma:
El procedimiento a seguir es el siguiente:
- Se llena la bureta correspondiente al compuesto A. Se abren las llaves de paso de agua
y se comienza a medir las alturas de lquido en ambas buretas para distintos
tiempos.
- Se repite el proceso para diferentes alturas iniciales en la bureta A ( 50, 35, 20 ml)
- Representar en papel milimetrado las alturas de A y B frente al tiempo para los 3
experimentos realizados con las distintas alturas iniciales.
50 ml 35 ml 20 ml
t (s) CA CB CA CB CA CB
0 50 0 35 0 20 0
10 44,2 5,8 30 5 15,4 3,6
20 39,3 10,7 25,8 9,2 13,6 6,4
30 34'6 15,4 22,6 12,4 12 8
40 31,2 18,8 20,4 14,6 10,5 9,5
50 28,5 21,5 18,5 16,5 9,8 10,2
60 26,6 23,4 17,7 17,3 9,4 10,6
70 25,4 24,6 17,2 17,8 9,2 10,8
80 24,6 25,4 16,8 18,2 - -
90 24,2 25,8 - - - -
100 23,8 26,2 - - - -
0
10
20
30
40
50
60
0 25 50 75 100 125
t (s)
C
a
,

C
b

(
m
l
)
Representar en una tabla y grficamente los logaritmos de las pendientes en el origen
cambiadas de signo en la curva correspondiente de A, frente a logaritmo de la concentracin de
CA.
( -dCA/dt) CAo
0,8333 50
0,5714 35
0,4 20
0
10
20
30
40
0 25 50 75 100 125
t (s)
C
a
,
C
b

(
m
l
)
0
5
10
15
20
25
0 25 50 75 100 125
t (s)
C
a
,
C
b

(
m
l
)
log (-dCA/dt)o log CAo
-0,0792 1,6989
-0,243 1,544
-0,398 1,301
La pendiente y la ordenada en el origen nos proporcionan los valores de n
1
y K
1
.
Haciendo el ajuste por el mtodo de mnimos cuadrados obtenemos que la recta
y=A+Bx.
A= -1845 y= -1845+ 0758x
B= 0758
Por tanto la pendiente ser: n = 0758.
La ordenada en el origen ser: A: -1845 = log K K
1
= 0014
RESULTADOS Y DISCUSIN:
Los resultados obtenidos son:
Tiempo
(min)
h (cm)
1 32
2 31,2
3 30,4
4 29,4
5 28,5
6 27,7
7 26,5
8 25,5
9 24,6
10 23,9
11 22,5
12 21,4
13 20,8
14 19,9
15 19
16 18
17 16,9
18 16
19 15,2
20 14,2
21 13,4
22 12,4
-0,5
-0,4
-0,3
-0,2
-0,1
0
0 0,5 1 1,5 2
log Ca
l
o
g

(
-
d
C
a
/
d
t
)
23 11,6
24 10,7
25 10,2
26 9,8
27 9,4
28 9,1
29 8,8
30 8,5
31 8,3
32 8,1
33 7,8
34 7,7
35 7,4
36 7,2
37 7,1
38 6,8
39 6,7
40 6,5
41 6,3
42 6,3
43 6,1
44 6
45 5,9
46 5,8
47 5,7
48 5,5
49 5,4
50 5,2
51 5,1
52 5
53 4,8
54 4,7
55 4,6
56 4,5
57 4,4
Construimos la siguiente tabla y conocemos los valores de VL = VL (CL) y CL = CL (t) necesarios para
el diseo del sedimentador continuo:
Tiempo (min) h (cm) Pendiente: VL (cm/min) Ordenada: C0h0/CL (cm) CL (g/cm
3
)
6 27,7 1,05 34,1 0,141
12 21,4 0,9 32,4 0,147
24 10,7 0,7 29 0,165
30 8,5 0,25 15,7 0,306
36 7,2 0,2 14,8 0,323
44 6 0,15 13,6 0,353
50 5,2 0,1 10,3 0,465
A partir de los datos obtenidos en la tabla anterior, se hace una representacin grfica de VL
frente a CL:
GRFICA 2
0
5
10
15
20
25
30
35
0 2 4 6 8 101214161820222426283032343638404244464850525456
t (min)
h

(
c
m
)
Ahora hay que calcular el valor de GL, que es una magnitud que define la adhesin de slidos
para cada nivel, y se llama capacidad de sedimentacin, y que se define como la mxima cantidad
de slidos que el nivel admite por unidad de tiempo, y superficie, en funcin de la concentracin y
velocidad.
donde Cu es la concentracin del aparato y vale:
Cu = 150 g / 250 cm
3
de CaCO3
Sabemos que m es la fraccin entre la masa de sal que contiene la probeta, y el volumen que
esta masa ocupa cuando est totalmente sedimentada.
0
0,1
0,2
0,3
0,4
0,5
0,6
0,7
0,8
0,9
1
1,1
1,2
0 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,35 0,4 0,45 0,5
CL (g/cm3)
V
L

(
c
m
/
m
i
n
)
Para cada uno de los valores de CL y VL podemos hallar el valor de GL, los valores obtenidos
son:
VL (cm/min) CL (g/cm
3
) GL (g / cm
2
min)
1,05 0,141 0,193
0,9 0,147 0,174
0,7 0,165 0,158
0,25 0,306 0,155
0,2 0,323 0,139
0,15 0,353 0,129
0,1 0,465 0,207
Representacin grfica de GL frente a CL.
GRFICA 3
Tiempo
(min)
Y ext X ext Y int X int
0 0,9906 0,025 1,028 0
5 0,9343 0,03578 1,028 0
10 0,8218 0,04656 1,028 0
15 0,725 0,05734 1,025 0
20 0,6593 0,06812 1,0218 0
25 0,6093 0,0789 1,0156 0
30 0,5625 0,08968 1 0
35 0,5312 0,1 0,9812 0,025
0
0,05
0,1
0,15
0,2
0,25
0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5
CL (g/cm3)
G
L

(
g
/
c
m
2
.
m
i
n
)
40 0,5 0,111 0,9593 0,0265
45 0,475 0,122 0,931 0,028
50 0,4531 0,132 0,9 0,0295
55 0,4343 0,134 0,8687 0,031
60 0,4156 0,154 0,8343 0,0325
Dibujamos una grfica en los valores de X frente a los de tiempo, y para ello hacemos dos rectas por
el mtodo de mnimos cuadrados, y de ellos la pendiente es la conductividad.
- Recta para tiempo y X exterior:
y = 0.026 + 0.00208x ; m = 0.002
- Recta para tiempo y X interior:
y = -0.0075 + 0.00069x ; m = 0.00069
Hallamos la media de las pendientes y tenemos la conductividad:
0.00208 + 0.00069 = 0.001385 conductividad
2

0
0,05
0,1
0,15
0,2
0 20 40 60 80
tiempo (min)
X

e
x
t
,

X

i
n
t
Esquemas o dibujos
Espectrmetro es el nombre que se da al aparato que permite separar la radiacin en sus componentes,
como en un arco iris.
|
Tambin otro de los
instrumentos que
utilizamos fue el
espectrgrafo, del cual
tambin menciono su
funcionamiento e
imagen.
la lnea amarilla
marca el recorrido
del rayo de luz que
proviene del
telescopio
llegando a la
cmara CCD de 2
chips. Luego de
pasar por un lente
que dispersa parte
del la onda, el
resto viaja a un
espejo cncavo
que dirige el haz al
prisma. Este
descompone la luz
y la enva a otro
espejo cncavo
que dirije el
espectro al foco de
la CCD.
La otra parte del
rayo desviado por
el primer lente
pasa por dos
espejos y una
lente para enfocar
y mandar la
imgen del campo
visual a la CCD.
Esta fabrica la
imgen mostrando
el lugar exacto
dentro de la
imgen en donde
se est apuntando
y a a su vez
descomponiendo
el espectro.

PRCTICA N 1
Determinacin de Cobre por espectrofotometra de
absorcin atmica
- FUNDAMENTO:
La espectrofotometra de absorcin atmica se basa en la absorcin de radiacin electromagntica por
las partculas atmicas; ya que parte de la luz que pasa a travs de esas partculas atmicas es
absorbida por los tomos, y es utilizada para pasar a su nivel excitado, disminuyendo as la
intensidad de la misma. Como la energa de una radiacin electromagntica viene dada por:
E = h y = c/ Cada tomo absorbe a una longitud de onda determinada porque cada uno
tiene una diferencia de energa distinta entre sus niveles normal y excitados por ello este mtodo es
caracterstico para cada tomo.
Debido a su alta sensibilidad ( porque el espectro de absorcin de un elemento atomizado est
constituido por una cantidad limitada de lneas discretas o longitudes de onda caractersticas para cada
elemento) y la facilidad con la que se pueden analizar muchas muestras se trata de una de las
principales herramientas de la qumica analtica.
Los mtodos atmicos estn entre los procedimientos analticos ms selectivos y
presentan tambin las ventajas de la rapidez y comodidad.
La sensibilidad de mtodo se define como la concentracin necesaria de un
elemento para producir el 99% de transmitancia ,lo que se corresponde con el 0,0044
de absorbancia.
Directamente relacionado con la sensibilidad se encuentra el lmite de
deteccin ,que corresponde a la concentracin necesaria de un elemento para producir
una seal con una intensidad triple del ruido de fondo. Por ruido de fondo se entiende
toda seal observable cuando el elemento a analizar se encuentra ausente de la llama y
es debido a la absorcin molecular y a la dispersin de las partculas en llama.
En cuanto a la exactitud en condiciones normales ,el error relativo asociado con
el anlisis en absorcin con llama es del orden de un 1 a un 2%. Tomando precauciones
puede reducirse esta cifra mnimamente.
La tcnica de espectrofotometra de absorcin atmica puede utilizarse adems de para llevar a cabo
anlisis cualitativo, para el anlisis cuantitativo ya que la medida de absorcin de energa radiante por
tomos libres en su estado fundamental de energa y estando en fase gaseosa permite obtener una
seal analtica que puede relacionarse, mediante la Ley de Beer, con la concentracin del elemento en
la muestra analizada.
Siendo la Ley de Beer:

ABSORBANCIA = b c
-la constante de proporcionalidad llamada coeficiente
de absorcin molar.
b-es el paso ptico.
c-es la concentracin de la especie de la cual estamos
midiendo la absorbancia.
En esta prctica tenemos como objetivo la determinacin de Cu
2+
en una muestra de concentracin
desconocida utilizando la espectrofotometra de absorcin atmica,al ser este un mtodo de anlisis
instrumental,es un mtodo que requiere un calibrado previo para luego,con una extrapolacin poder
hallar la concentracin que se nos pide,ya que la Ley de Beer establece un relacin lineal entre la
absorbancia y la concentracin del elemento por lo que manteniendo el resto de los parmetros
constantes podemos encontrar la concentracin de Cu
2+
pedida.
Para llevar a cabo la espectrofotometra de absorcin atmica , es necesario
atomizar la materia , es decir,convertir las molculas de la muestra a analizar en
partculas gaseosas elementales,para conseguirlo se vaporizan a temperaturas muy
elevadas y la concentracin de los tomos del elemento de inters se determina
midiendo la absorbancia a sus longitudes de onda caractersticas.
La conversin de la mezcla disuelta en tomos libres se lleva a cabo aspirando la disolucin que
mediante un nebulizador se transforma en un fino spray (este proceso es el mayor inconveniente que
tiene actualmente la absorcin atmica, porque a la llama solo llegan un 7 u 8% de los tomos
aspirados por el nebulizador. Es decir, se produce una muy importante prdida de muestra) y se
introduce luego en el interior de la llama producida por un mechero que le aporta la energa necesaria
para atomizar dicha muestra y una vez atomizada, si hacemos pasar un haz de radiacin
electromagntica sobre ella este haz ve disminuida su energa en una determinada longitud de onda,
que ser la lnea de resonancia del elemento que queremos analizar.
Procesos que se producen en la atomizacin:

nebulizacin desolvatacin
DISOLUCIN DEL ANALITO AEROSOL AEROSOL
(slido/gas)


(volatilizacin)
ionizacin disociacin
(reversible) (reversible) MOLCULAS
IONES ATMICOS TOMOS GASEOSAS

h h h

IONES TOMOS MOLCULAS
EXCITADOS EXCITADOS EXCITADAS
- INSTRUMENTACIN:
Espectrmetro de absorcin atmica UNICAM [Link] espectrmetro de absorcin se compone
fundamentalmente de cinco partes:

Fuente de radiacin,es por lo general una lmpara de ctodo hueco,que emite las
lneas atmicas caractersticas del elemento a analizar,este tipo de lmpara consiste en
un nodo de tungsteno y en un ctodo cilndrico,cerrados hermticamente en un tubo
lleno de Nen o Argn a una presin de 1 a 5 [Link] ctodo est constituido con el
metal cuyo espectro queremos [Link] aplicar un potencial lo suficientemente
grande,los cationes gaseosos adquieren una energa cintica suficiente para arrancar
algunos tomos metlicos de la superficie del ctodo y producir una nube atmica,a este
fenmeno se le llama [Link] parte de los tomos metlicos desprendidos se
encuentran excitados,con lo que al volver a su estado fundamental emiten una radiacin
[Link] eficacia de la lmpara depende de su geometra y del potencial
aplicado a la [Link] lmparas para realizar anlisis multielemental cuyo ctodo
est recubierto de diferentes metales, pudiendo emitir as,sus espectros
caractersticos.
Se requiere que la radiacin de la fuente est modulada para eliminar las
posibles interferencias producidas por la llama y amplificar selectivamente la luz de la
[Link] eliminar la seal no modulada se puede utilizar un filtro RC de paso alto.
El funcionamiento de la lmpara de ctodo hueco consiste en que al someterla a
una descarga se produce la ionizacin del gas y los iones de Ar
+
chocan contra el interior
del ctodo hueco arrancndole los tomos de la superficie del ctodo y produciendo una
nube atmica.
Una parte de los tomos metlicos desprendidos se encuentran en estados
excitados y al volver a su estado elemental emiten radiacin de su longitud de onda
caracterstica (la misma que el elemento a determinar). Al final los tomos metlicos
vuelven a depositarse difundiendo de nuevo hacia la superficie del ctodo o hacia las
paredes de vidrio del tubo.



Sistema para vaporizar y atomizar la muestra,partimos de la muestra en disolucin y mediante
un sistema de nebulizacin conseguimos formar un fino aerosol (de rendimiento 10%). En este caso
el sistema de nebulizacin es un tubo concntrico que por el efecto Venturi absorbe la disolucin
transformndola en un fino aerosol dentro de la cmara de mezcla. En la cmara de mezcla se junta
con el aire, que es el oxidante, y con el acetileno, que es el gas de combustin , y se conducen al
cabezal del mechero donde ocurre la combustin (2400-2700 K) que proporciona la temperatura
adecuada para la atomizacin de la muestra. Para que se produzca correctamente la combustin ha de
llegar una relacin adecuada de gases al quemador; ya que si la relacin no es buena se puede
producir el retroceso de la llama y podra llegarse a producir la combustin en la cmara de mezcla.


La llama se divide en tres regiones de tamao y aspecto variable segn la
reaccin deflujos existente entre los gases combustible y [Link] zonas son:

- Zona de combustin primaria: se reconoco por su luminiscencia azul,aqu no
se alcanza el equilibrio trmico,no se produce la espectroscopa de llama.
- Zona interconal: regin rica en tomos [Link] la zona ms utilizada en
espectroscopa.
- Cono exterior: zona de reacciones secundarias donde los productos
formados en la regin interior se convierten en xidos moleculares
estables.
Monocromador que dispersa las distintas longitudes de onda de la radiacin emitida
por la fuente y separa la lnea particular que se desea medir,en el caso de Cu es =324.8
nm.
Detector de radiacin y amplificador de la seal casi siempre se utiliza un
fotomultiplicador que transforma la intensidad de radiacin en una corriente elctrica
fcilmente amplificable y medible. Consiste en una clula fotoelctrica; es decir la
transduccin de la intensidad luminosa en intensidad fotoelctrica se consigue mediante
el efecto fotoelctrico
Registrador de la seal analtica,es un dispositivo que procesa la corriente resultante
proporcionndonos la seal analtica que se relaciona con la intensidad de la radiacin
absorbida digitalmente. Como la intensidad absorbida depende linealmente del nmero de
tomos de la especie absorbente presentes en la llama, se puede relacionar con la
concentracin de la muestra.
Segn el esquema bsico que presentaremos ms adelante,la radiacin que proviene de la
lmpara se hace pasar por la llama del mechero y se mide su [Link] vaporiza el elemento en la
llama,el vapor atmico del elemento absorbe gran parte de la radiacin con lo que medimos la
reduccin de la intensidad de la radiacin producida por dicho vapor de esta forma conseguimos
medir la reduccin de la intensidad de la radiacin producida por la lmpara, al atravesar el vapor
atmico del Cu. Esta reduccin es la absorbancia del elemento atomizado:

A = Log I
0
/I = - Log T T = I/I
0


Donde A es la absorbancia,I
0
es la intensidad de la radiacin cuando sale de la
lmpara, I la intensidad de la radiacin tras atravesar la muestra y T es la transmitancia
que expresa el porcentaje de radiacin que atraviesa la muestra.
Esta reduccin de la intensidad de la radiacin se ve afectada por:
-La temperatura
-Caudal del gas de combustin y del gas oxidante. Que para que la
llama no sufra un retroceso la velocidad de combustin debe ser
inferior al caudal.
-Estructura de la llama.

La absorbancia medida presenta una dependencia lineal con el nmero de tomos de la
especia absorbente que hay en el seno de la llama,as como con la concentracin de dicha
especie en la disolucin aspirada.
ESQUEMA DEL ESPECTROFOTMETRO DE ABSORCIN ATMICA :
FUENTE DE RADIACIN LLAMA MONOCROMADOR

SISTEMA DE FOTOMULTIPLICADOR
NEBULIZACIN
AMPLIFICADOR

SEAL ANALTICA

Normas de operacin del espectrofotmetro de absorcin atmica UNICAM 929
1. Introducir el capilar en un vaso con agua destilada limpia.
2. Comprobar que la cmara de nebulizacin contiene la cantidad mnima de agua.
Para ello, aspirar agua abriendo el manorreductor del aire a y comprobar que
drena(tenemos que ver como caen las gotas). Cerrar el aire.
3. Poner en marcha el instrumento, POWER ON y esperar a que el
espectrofotmetro complete sus tesis de inicializacin.
4. Presionar HOME para acceder al Men Principal.
5. Presionar SISTEMA (1). Comprobar que estamos en modo de AA (absorcin
atmica).
6. Presionar SIGUIENTE o ir a LAMPARA (2) en Men Principal (IHOME) y fijar la
intensidad de la lmpara en 7,5 mA . Encender la lmpara (posicin ON).
7. Presionar SIGUIENTE o ir a SET-UP PTICO (3) en Men Principal (HOME) y
seleccionar el elemento a analizar (Zinc).
8. Presionar SET-UP para que fije la longitud de onda y esperar a que en la parte
superior izquierda del panel de control aparezca el valor seleccionado = 213.9 nm
9. Ajustar la lmpara moviendo los tornillos posteriores de la misma hasta obtener
la mxima intensidad (indicada por una barra rayada en el panel de control). Si la
absorbancia baja de cero presionar AUTO CERO.
10. Ajustar el mechero buscando obtener siempre mxima intensidad:
-Posicin O de la escala amarilla.
-Altura (tornillo inferior derecho) con ayuda de un papel.
-Profundidad (tornillo parte superior derecha).
11. Colocar las tapas protectoras del nebulizador y del mechero.
12. Presionar SIGUIENTE o ir a LLAMA (4) en Men Principal (HOME) y seleccionar
el tipo de llama (Aire-Acetileno)
13. Comprobar que el capilar de aspiracin est sumergido en el vaso con agua.
14. Abrir el manorreductor del aire y ajustar la presin a 2 bar para obtener una
presin de 35-40 mm en el medidor de flujo del instrumento.
15. Abrir el manorreductor del acetileno hasta obtener una presin de salida de 0.6
bar, lo que supone una presin de 20 mm en el rotmetro del equipo. Mantener
presionado el botn 0FF de la llama durante unos 10 s. hasta or un clic y
comprobar que el medidor de flujo del instrumento est en 20 mm. Si no es as
ajustar la presin con el mando de control de flujo del aparato.
16. Mantener presionado el botn de encendido IGNITE hasta que se encienda a
llama. Comprobar que la llama presenta un perfil horizontal y estable.
17. Aspirando una disolucin del analito verificar la posicin del mechero,
seleccionando aquella que proporcione la mxima absorbancia.
18. Presionar SIGUIENTE o ir a ANLISIS (5) en Men Principal (HQME) para
seleccionar el nmero de muestras a analizar que son cinco, el nmero de
rplicas (3) y el tiempo de medida cuatro segundos.
19. Presionar SIGUIENTE o ir a CALIBRACIN (6) en Men Principal (HOME) para
seleccionar el nmero de disoluciones patrn (mximo 5), modo de calibracin
(lineal), unidades de concentracin (mg/L) y concentraciones de las disoluciones
patrn.
20. Presionar ANALIZAR y seguir las instrucciones de la pantalla. Anotar los
resultados e introducir el capilar en la disolucin blanco (HN0
3
0.5M) entre
disolucin y disolucin para limpieza del instrumento.
21. Una vez finalizado el anlisis aspirar agua.
22. APAGADO. Presionar el botn OFF de la llama. Mantener el flujo de aire durante
aproximadamente treinta segundos, para purgar el sistema de gases inflamables.
Cerrar el manorreductor del acetileno. Mantener presionado el botn OFF de la
llama hasta que despus de unos segundos suene un clic y baje el regulador de
flujo de acetileno hasta cero. Soltar el botn de OFF de la llama y cerrar el
manorreductor aire.
23. Seleccionar lmpara en el Men Principal y poner en OFF la misma.
24. Apagar el instrumento: POWER OFF
- MATERIAL Y REACTIVOS:

- Material:
6 matraces aforados de 100 ml.
1 matraz aforado de 1000 ml.
1 vaso de 100 ml.
1 vaso de 400 ml.
Pipeta
Frasco lavador.

- Reactivos:
Disolucin patrn de Cu de 1000 mg/L.
cido ntrico concentrado
- PROCEDIMIENTO OPERATORIO:
Lnea de calibrado :
A partir de la disolucin de Cu de 1000 ppm se preparan en matraces de 100
ml,por dilucin con HNO
3
0.5 M

las siguientes disoluciones diluidas

de 5,10,15,20 y 25
ppm.

patrn dln la de ml 5 . 0
patrn l 1
patrn ml 10
Cu mg 1000
patrn l 1
dln l 1
Cu mg 5
dln ml 10
dln l 1
dln ml 100
3

5 ppm = 5 mg/L 0.5 ml de la dln patrn
10 ppm = 10 mg/L 1
15 ppm = 15 mg/L 1.5
20 ppm = 20 mg/L 2
25 ppm = 25 mg/L 2.5
Preparacin de HNO
3
0.5 M a partir de HNO
3
concentrado de riqueza 60 % y
cuya densidad es de 1.37 g/L :

dln ml 5 . 52
HNO g 60
dln ml 100
HNO mol 1
HNO g 01 . 63
dln l 1
HNO moles 5 . 0
dln l 1
3 3
3 3

Una vez preparadas todas las disoluciones se procede al encendido del
aparato,siguiendo las indicaciones que se presentaron anteriormente y se comienzan a
medir las absorbancias de los diferentes patrones para poder obtener la recta de
calibrado.
El proceso es el siguiente estas disoluciones se aspiran sucesivamente en la
llama,previo ajuste del cero de absorbancia que se obtiene volatilizando una disolucin
blanco,y teniendo cuidado de volver a meter el blanco entre muestra y muestra para
[Link] registran por triplicado las absorbancias producidas por cada patrn, y con
ellas se construye la lnea de calibrado representando los valores medidos frente a las
concentraciones.
Calibrado a = 324.8 nm.

MEDIDA mg Cu/L ABSORBANCIA (u.a)
1 0 0.000
2 5 0.093
3 10 0.178
4 15 0.261
5 20 0.339
6 25 0.414

Recta de calibrado
y = 0,0165x + 0,0077
R
2
= 0,9986
0
0,1
0,2
0,3
0,4
0,5
0 10 20 30
mg/L de Cu
A
b
s
o
r
b
a
n
c
i
a

Realizamos un ajuste por mnimos cuadrados:

a = 0.01652 t0.00031
Y = aX + b b = 7.6666 10
-3
t4.6910
-3

r = 0.999

Anlisis de la muestra: la disolucin de la muestra preparada en las mismas
condiciones que los patrones (HNO
3
0.5 M) se aspira en la llama y se registra por
triplicado la absorbancia,realizando el proceso cinco veces.
N de la medida Absorbancia (u.a) mg/L de Cobre
1 0.237 13.88
2 0.238 13.94
3 0.238 13.94
4 0.244 14.30
5 0.246 14.42
Calculamos ahora la media de las concentraciones obtenidas as como tambin la
de las absorbancias,para poder dar la concentracin de la disolucin problema,es decir
de la muestra.
(13.88+13.94+13.94+14.30+14.42)/5 = 14.096 mg/L de Cobre
Podemos tambin calcular la absorbancia del problema,sustituyendo la
concentracin de Cobre calculada en la recta de regresin,o tambin calculando la media
de las absorbancias.
Absorbancia de la disolucin problema : 0.241 u.a.
Clculo de lmite de deteccin: realizamos 10 lecturas sucesivas de la
absorbancia del blanco.

Medida 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Abs. 0.002 0.000 0.001 0.001 0.000 0.000 0.000 0.002 0.001 0.000
3 [d.e. blanco] / pendiente = LMITE DE DETECCIN
L.D =
a
3
1 n

= 0.1495

El lmite de deteccin se define como la mnima cantidad de analito que ha de
estar presente en la muestra para poder determinarlo con un cierto grado de
credibilidad en los resultados
- RESULTADOS:
Hemos obtenido una disolucin de 14.096 ppm,siendo el valor verdadero
de la concentracin de la misma de 15 [Link] recta de calibrado obtenida es
buena,como demuestra el coeficiente de [Link] error cometido puede ser debido
a imprecisiones en la utilizacin del material volumtrico o a la actuacin de posibles
agentes interferentes.

Determinacin espectrofotomtrica de Hierro mediante extraccin con oxina
- FUNDAMENTO :
La espectroscopa es la rama de la ciencia que estudia cualquier tipo de radiacin electromagntica y
su interaccin con la materia. Y es una herramienta muy potente de anlisis tanto cuantitativo como cualitativo.
En esta prctica la usamos como una tcnica de anlisis cuantitativo; ya que nos servimos de ella para
medir la absorcin del oxinato de hierro, que absorbe dentro de la zona del espectro del visible-ultravioleta, y
ser por tanto una espectroscopia de absorcin VIS-UV.
La absorcin se debe a que las molculas presentan tres niveles energticos, principalmente, el
electrnico, el vibracional y el rotacional. Para cada estado de energa electrnica le corresponden varios
estados de energa vibracional, y estos a su vez tienen varios estados de energa rotacional. Y hay molculas
como las del oxinato de hierro que absorben a cierta frecuencia (en este caso en el VIS-UV) cuando se las
expone a determinadas radiaciones; y esa energa absorbida les permite excitar los electrones de valencia
desde el estado fundamental hasta cualquier otro nivel vibracional de excitacin
Para llevar a cabo la medida de espectroscpica debemos obtener, previamente, el oxinato de hierro,
ya que partimos de hierro en medio acuoso. Para ello contamos con la tcnica de separacin denominada
extraccin lquido-lquido.
Uno de los principales campos de aplicacin de la extraccin lquido-lquido es el de la separacin de
iones metlicos mediante la formacin de quelatos neutros, insolubles en disolucin acuosa pero solubles en
disolucin orgnica donde quedan los iones. Esto se puede utilizar tanto para eliminar interferencias, ya que en
medio acuoso otras sustancias pueden interferir en la seal del analito, como para preconcentrar , porque hay
tcnicas que no son muy sensibles y necesitan un paso previo de preconcentracin, que se consigue pasando
el analito a una disolucin orgnica de menor volumen.
En esta prctica deseamos separar un catin metlico, el hierro (III), para preconcentrarlo y para ello lo
transformamos en una especie neutra formando un quelato ser extrado en una fase orgnica donde es
soluble.
El quelato neutro se formar cuando un ligando cargado negativamente compense la carga del catin
metlico (Fe). En nuestro caso utilizaremos como ligando la oxina (8-hidtoxiquinolena= HR ) que es anftero
(soluble tanto en medio cido como en bsico).
H2R
+
HR

R
-
pK1=4.91 pK2 =9.81



El pH de la disolucin acuosa tiene por tanto una importancia decisiva en el comportamiento de la oxina como
ligando de extraccin, ya que afecta al propio ligando y a la formacin del quelato. Por esto la extraccin del
complejo depender de la concentracin de oxina. el coeficiente de distribucin y el pH del medio. El oxinato se
extrae cuantitativamente a pH 2.8 (en ms de un 99.9%) por lo que ajustaremos el pH cercano a ese punto y de
este modo conseguimos extracciones selectivas ya que controlando el pH y utilizando agentes enmascarantes
impedimos que la oxina reaccione con iones distintos al analito.
El esquema de extraccin del hierro sera:
FASE ACUOSA H2R
+
HR R
-
Fe
3+
+ 3R
-
FeR3


FASE ORGNICA (HR)0 (FeR3)0
El coeficiente de distribucin vendr dado por:

[ ]
[ ]
AC
3
O 3
D
Fe
FeR
K
+

Como lo utilizamos como reactivo fotomtrico para llevar a cabo la reaccin de complejacin tenemos
que tener en cuenta una serie de variables:
a. Cuantitatividad : la reaccin formara oximato de hierro (III) en un 99.9%. La constante de
formacin es normalmente muy alta debido a la gran estabilidad de los quelatos.
b. Selectividad : debido al ndice de coordinacin (nmero de enlaces que forma un tomo
central) los compuestos son estequiomtricos y poseen grupos atmicos especficos.
- INSTRUMENTACIN :
Para esta prctica necesitamos un espectroscopio, que identifica visualmente lneas que proviene de la
radiacin electromagntica. Adems como tiene un monocromador con una rendija fina se denomina
espectrmetro y como el detector es un detector fotoelctrico se trata de un espectrofotmetro.
Fuente de luz: un filamento de volframio que funciona mediante una fuente de alimentacin estabilizada
proporcionando una radiacin de intensidad constante el tiempo suficiente para asegurar una buena
reproducibilidad de las lecturas de absorbancia.
Selector de longitud de onda: se trata de una sencilla red de difraccin, que permite separar la longitud de
onda que queramos en este caso = 490nm. Que es la longitud de onda a la que vamos a medir la absorbancia
del compuesto.
Tras seleccionar la longitud de onda la radiacin pasa a travs de un controlador de luz. Que se trata
de una abertura en forma de V que se introduce o saca del haz para controlar la intensidad de luz que incide en
la fotoclula.
Antes de llegar al detector la radiacin pasa a travs de la rendija del obturador, que impide el paso de
la luz siempre que la cubeta se saca del portamuestras (para permitir el ajuste del 0% de transmitancia). Y tras
esto ya llega a la muestra.
Detector: a este llega la radiacin tras pasar por la muestra y por un filtro. Se trata de un fototubo de medida.
Se basa en el efecto fotoelctrico de los metales que al irradiarlos generan electrones.
Escala de medida: La seal elctrica del detector una vez amplificada (con un fotomultiplicador que consta
de varios ctodos que atraen los electrones producidos en un electrodo de metal, produciendo ms al chocar
esos electrones con los ctodos, aumentando as la cantidad de electrones producidas por la intensidad de la
radiacin) acciona el medidor, provisto de una escala de unos 14 cm, que es lineal en porcentajes de
transmitancia y logartmicas en absorbancia.
Por esto cuando la radiacin monocromtica atraviesa una muestra que contiene una especie
absorbente, como en nuestro caso el hierro, la intensidad de la energa radiante disminuye progresivamente a
medida que las partculas de esas especies absorben esa energa.
Fuente de selector de escala de
radiacin longitudes de onda MUESTRA detector medida
La TRANSMITANCIA de la muestra se define como la fraccin de la radiacin incidente transmitida por
la misma ( T=P/P0 ).La disminucin de la potencia de la radiacin de pende de la concentracin del absorbente y
de la longitud del camino recorrido por el [Link] relaciones se recogen en la Ley de Beer:

A = log ( P/P0 )= bc
Donde es una constante ,denominada absortividad molar o coeficiente de absorcin molar de
unidades L mol
-1
cm
-1
,caracterstica de la especie absorbente a una longitud de onda determinada,b es la
anchura de la celda que contiene la muestra en cm,A es la absorbancia,magnitud relacionada con la
transmitancia a travs de la siguiente expresin : A = -log T y c es la concentracin de la especie absorbente en
moles L
-1
.
- MATERIAL Y REACTIVOS :
- Material: Reactivos:
6 embudos de separacin disolucin patrn de Fe de 1000mg/L
1 matraz aforado de 100 ml disolucin indicadora de oxina al 6% p/v en HAc al 0.2%
1 matraz aforado de 25 ml disolucin reguladora de Hac/NaAC 0.1M de pH = 3
1 vaso de precipitados de 100 ml disolucin de oxina en cloroformo al 0.4% en p/v
1 vaso de precipitados de 400 ml
1 pipeta graduada de 5 ml
1 pipeta graduada de 1 ml
1 pesasustancias
3 tubos de ensayo
1 frasco lavador
- PROCEDIMIENTO OPERATORIO :
Lnea de calibrado :
Preparamos una disolucin de oxina en cloroformo al 0.4% en p/v:
% 4 . 0 100
dln ml 1000
oxina g 4
para 100 ml 0.4 gramos de oxina
Adems preparamos a partir de la disolucin patrn de Fe de 1000 mg/L, 100 ml de disolucin de Fe
de 100 mg/L:

VM = VM V1000mg/l = 100ml100mg/L V = 10ml
Tambin tenemos que preparar una disolucin reguladora de Hac/NaAc 0.1 M de pH 3.00:
ml 100
mol 1
g 03 . 82
ml 1000
moles 1 . 0
= 0.82 g de NaAc
Esos 0.82g de NaAc los llevamos a un volumen de 80 ml con agua destilada y despus para ajustar el
pH utilizamos el pH-metro, previamente calibrado, y vamos aadiendo HAc concentrado hasta obtener el pH
deseado. Y por ltimo ya podemos terminar de enrasar, con agua destilada, los 100ml.
En cinco embudos de separacin se depositan los ml necesarios de la disolucin patrn de Fe de
100ml/l para obtener unas concentraciones, en la fase orgnica (cuyo volumen es de 10ml), de:
0mg V = 0 ml de disolucin de Fe es el blanco
2mg/l V = 0.2ml de disolucin de Fe
4mg/l V = 0.4ml de disolucin de Fe
6mg/l V = 0.6ml de disolucin de Fe
8mg/l V = 0.8ml de disolucin de Fe
10mg/l V = 1.0ml de disolucin de Fe
Sobre estas cantidades de disolucin de Fe aadimos la cantidad necesaria de agua destilada para
completar un volumen de 4ml ms 1ml de disolucin indicadora de oxina (ya nos la dieron preparada) y 5 ml de
la disolucin reguladora agitando posteriormente estas disoluciones con suavidad.
Adems tenemos que aadir 10 ml de la disolucin de oxina en cloroformo. Tras esto se tapan los
embudos y se agitan durante dos o tres minutos. Se dejan reposar hasta que se separen las fases y se filtra la
fase orgnica, poniendo un papel de filtro en el vstago del [Link] absorbancia de dicha fase se mide a 470
nm en el Spectronic 20.
Ajustamos el 0 de absorbancia en el aparato mediante el control derecho con el blanco situado en su
[Link] procedemos a la realizacin de las sucesivas medidas para obtener la recta de calibrado.
mg/L de Fe % T Tanto por 1 A = - logT
0 100 1 0
2 58.5 0.585 0.2328
4 32 0.32 0.4949
6 19 0.19 0.7212
8 12.5 0.125 0.9031
10 7 0.07 1.1549
Realizamos un ajuste por mnimos cuadrados:

a = 0.1145
t
0.0026
Y = aX + b b = 0.0122
t
0.0159
r = 0.99
Anlisi
s de la
muestra
Repetimos los pasos del apartado anterior con 1 ml de la disolucin problema pero hacindola por
triplicado. Es decir le aadimos 3ml de agua, 1ml de disolucin indicadora, 5ml de disolucin reguladora y 10ml
de dsn de oxina en cloroformo. Medimos su absorbancia, una vez se hayan separado las fases, y metiendo los
datos en la recta de calibrado obtenemos su concentracin.
% T Tanto por 1 Absorbancia (u.a)
MUESTRA 1 27 0.27 0.5686
MUESTRA 2 26 0.26 0.5850
MUESTRA 3 29 0.29 0.5376
Sustituyendo en la lnea de regresin los valores de la absorbancia de las tres muestras obtenemos:
Recta de calibrado
y = 0,1145x + 0,0122
R
2
= 0,9979
0
0,5
1
1,5
0 5 10 15
mg/L de Fe
A
b
s
o
r
b
a
n
c
i
a
MUESTRA 1 4.84 mg/L de Fe
MUESTRA 2 4.99 mg/L de Fe
MUESTRA 3 4.57 mg/L de Fe
Promedio = 4.81 mg/L de Fe
Desviacin estndar = 0.21
RSD = 4.38
Lo que es la prctica en si ya est lista,puesto que lo que se peda era calcular la concentracin de una muestra
que se nos daba,pero...nosotras vamos a comparar el error instrumental con el error que hemos podido realizar
al llevar a cabo el anlisis,esto es:
Realizamos tres medidas de la absorbancia de una cualquiera de las tres preparadas con la disolucin
problema,nosotras escogimos la nmero 2,y los datos que obtuvimos fueron los siguientes:
1 medida de la absorbancia de la muestra 2 28 u.a.
2 medida de la absorbancia de la muestra 2 27 u.a.
3 medida de la absorbancia de la muestra 2 28 u.a.
Con lo cual tenemos :
Promedio = 27.667 u.a.
Desviacin estndar = 0.577
RSD = 1.087
- RESULTADOS :
Hemos obtenido un recta de regresin lo suficientemente buena como para considerar los resultados
como satisfactorios,lo que queda comprobado al saber la concentracin real de la disolucin problema : 5 mg/L
de Fe y la concentracin que nosotras dimos fue de 4.81
t
0.21.
Para comparar el error instrumental con el error que conlleva cualquier anlisis se han de comparar los
valores de las RSD,en este caso RSD (instrumental) = 1.087 y la RSD (prctica) = 4.38 ,por lo tanto el error que
cometimos al llevar a cabo la prctica es mayor que el error propio del mtodo en [Link] resultado puede ser
debido a distintos factores,ya que son muchas las fuentes de error que pudimos haber cometido, una mala
limpieza de los instrumentos de anlisis,errores en las medidas...etc.
Electrodos selectivo de iones : aplicacin a la determinacin potenciomtrica de
fluoruros en aguas
- FUNDAMENTO :
La potenciometra es una tcnica que se sita dentro de la qumica analtica, en la electroanaltica, ya
que se basa en la medida de potenciales de celdas electroqumicas. Dentro de sta en los procesos de interfase
solo se intercambian iones en la interfase; que es en la superficie del electrodo, no en toda la disolucin y este
equilibrio es esttico, que quiere decir que se lleva a cabo con intensidad de corriente despreciable y potencial
constante (no dinmico donde la intensidad de corriente no es despreciable)
La medida de esos potenciales es en realidad la diferencia de potencial entre las dos partes de la
celda:
Semicelda indicadora: cuyo potencial vara con la concentracin del analito.
Semicelda de referencia : que presenta un potencial constante y estable frente al ENH
(electrodo normal de hidrgeno, que tiene un potencial de valor cero de referencia
Los mtodos potenciomtricos estticos tienen dos aplicaciones fundamentales segn sean:
1. Valoraciones potenciomtricas : cuya aplicacin es la deteccin del punto final en anlisis
volumtrico.
2. Potenciometras directas : en las que las medidas de los potenciales se pueden relacionar con
las concentraciones del analito en una muestra patrn y servir de base para determinacin cuantitativa de
dicho analito en la muestra.
Para la determinacin de potenciales necesitamos que nuestro electrodo nos d una respuesta que
sea:
Rpida
Selectiva: solo debe responder al in que queremos analizar
Reproducible: la misma medida realizada varias veces debe ofrecer un mismo
resultado
Esta prctica tiene como objetivo determinar la concentracin de iones fluoruro en una muestra de
agua mineral. El equipo necesario para llevar a cabo esta determinacin es una celda electroqumica que consta
de las siguientes partes:
[Link] indicador o de trabajo: Para esta prctica se utiliza un electrodo selectivo de iones o
electrodo de membrana. En la tiene lugar la interfase.
Estos electrodos son semiceldas cuya respuesta se debe a que la membrana que separa las dos
disoluciones del mismo in con distintas concentraciones(la de dentro del electrodo y la que queremos medir, la
concentracin del in) presenta una afinidad selectiva por dicho in. Y una vez se alcanza el equilibrio, se
genera una diferencia de potencial (potencial de membrana) constante entre las dos caras de la membrana q
depende de la relacin de actividades del in a las dos disoluciones.
En nuestro caso la membrana que separa ambas disoluciones es un cristal de LaF3 dopado con euf2.
De esta forma conseguimos aumentar la conductividad; ya que el europio y el lantano tienen un radio atmico
similar, pero el europio sustituye a tomos de lantano contribuyendo tan solo con dos iones fluoruro y dejando
por tanto huecos en la membrana. Esto huecos permiten la movilidad de los iones fluoruro al haber distintas
concentraciones de estos iones a ambos lados de la membrana (favorece el paso de los iones fluoruro, es un
electrodo selectivo de iones). Y por ello los iones fluoruro difunden del interior al exterior. Al alcanzar el equilibrio
es cuando aparece el potencial de membrana que recoge el potencimetro.
[Link] de referencia: en esta practica utilizamos un electrodo de Ag/AgCl es decir, un hilo de plata
dentro de una disolucin de cloruro de plata y esto en el interior del electrodo. Su potencial, al ser el de
referencia se mantiene constante y es conocido E=20V a temperatura de 20C. Para hallarlo se utiliza en otra
celda como electrodo de trabajo utilizando como electrodo de referencia el ENH, cuyo potencial se toma como
0V por convenio.
Este electrodo contiene iones Cl
-
que presentan diferente naturaleza, concentracin y movilidad que los
iones F
-
de la disolucin que rodea dicho electrodo. Esto hace que se produzca en la membrana un potencial
elctrico de magnitud variable, ya que depende de la movilidad de los iones presentes en ambas disoluciones y
de las concentraciones de las mismas. Este potencial es el potencial de unin liquida (Ej).Aunque los iones no
llegan a difundir, el contacto genera ese potencial de unin liquida.
El potencial de la celda electroltica (potencial de membrana), que es el que leemos en el
potencimetro, vendr dado por la siguiente expresin:

E
m
= E
ind
- E
ref
+ E
j
Diagrama del dispositivo instrumental
Ese potencial de unin lquida no es controlable y constituye un inconveniente para el clculo de
potenciales. Por ello es necesario hacerlo despreciable y constante.
Esto se consigue ajustando la fuerza inica de todas las disoluciones sobre las que se realicen
medidas usando, para ello, una disolucin de un electrolito inerte en alta concentracin, que tambin contiene
una reguladora, es el TISAB (Total Ionic Strength Adjusting Buffer).Cuya composicin es:
Cloruro sdico (NaCl) es el electrolito inerte mencionado que al estar en alta concentracin respecto al
analito nos permite controlar la fuerza inica de la disolucin.
cido actico / acetato sdico es la disolucin reguladora de pH. Esta mantiene el pH entre cinco y cinco
con cinco. Es preciso regular el pH porque la membrana de LaF3 que estamos utilizando es sensible a los iones
fluoruro, pero tambin responde a la presencia de otros grupos similares como los grupos OH
-
, cuya presencia
empieza a ser significativa a partir de pH=8.Y si el pH es demasiado cido (pH<4) la reaccin entre H
-
y F
+
se ve
desplazada hacia la formacin de HF, disminuyendo la concentracin real de iones fluoruro. De esta forma
eliminamos las interferencias de los grupos OH
-.
.
Todo lo dicho en este apartado sera lo que deberamos de haber hecho,sin embargo,como en el
laboratorio no haba,en el momento en el que hicimos el anlisis,acetado sdico usamos entonces acetato de
amonio,con lo cual no necesitamos aadir el actico ya que el pH ya estaba en 5.3 .
Citrato sdico Para eliminar las posibles interferencias que podran producir los iones Fe3+ y Al3+, si
estn presentes en la muestra (debido a contaminaciones al introducir una esptula en los reactivos u otros
motivos) ya que tienen gran avidez por los iones fluoruro, produciendo tambin en este caso prdidas de
nuestro analito al no estar como iones.
Con el citrato eliminamos estas posibles interferencias ya que se trata de un agente complejante tanto del
hierro como del aluminio.
- INSTRUMENTACIN :
Se utilizar un potencimetro digital CRISON modelo 2002, dotado de un electrodo de membrana slida ORION
selectivo para el in fluoruro y un electrodo de referencia de Ag/AgCI.
Para ajustar el pH de la disolucin TISAB se utilizar un potencimetro CRISON modelo 2000 provisto de un
electrodo combinado de membrana de vidrio y un electrodo de referencia de Ag/AgCI previamente a la
realizacin de las medidas se calibrar la respuesta del electrodo de vidrio con disolucin reguladores de pH 7 y
4.
- MATERIAL Y REACTIVOS :
- Material necesario:
1 Micropipeta de 1000 l (compartida)
1 Micropipeta de 200 l (compartida)
7 Matraces aforados de 100 ml
2 Vasos de l00ml
1 Vaso de 400 ml
1 Pipeta aforada de 20 ml
1 Pipeta aforada de 10 ml
1 Probeta de 30 ml
3 Pipetas Pasteur
1 Frasco lavador con agua destilada
- Reactivos:
cido actico concentrado
Disolucin acuosa patrn de NaF 0,0 100 M
Acetato de amonio
Cloruro sdico
Citrato de sodio trihidratado
- PROCEDIMIENTO OPERATORIO :
Preparacin de TISAB
Primero, debemos preparar la disolucin de TISAB, la cual est compuesta, como ya explique antes por
HAc/NaAc, NaCl y citrato sdico. Como esta disolucin es muy importante es necesario que este bien
preparada. Para prepararlo echamos en un vaso de precipitados 50 mL de agua destilada, 5.800 g de NaCl,
6.200 g de NaAc y 3.000 g de citrato de sodio trihidratado. Todos estos reactivos los pesamos en el granatario,
ya que no es bueno pesar las sales en la balanza porque suelen tener humedad. En ese volumen de agua
disolvemos las sales y si no se disuelven bien ( porque el citrato de sodio no se disuelve bien lo llevamos al
ultrasonido, en el que se disolveran por vibracin; pero en nuestro caso no hizo falta).
Tras esto, llevamos la disolucin a un electrodo de pH (sumergimos el electrodo de membrana de vidrio
previamente calibrado mediante los patrones de pH de 7 y de 4) donde aadiendo cido actico concentrado
gota agota mediante una pipeta Pasteur, debemos obtener un valor de pH entre 5.00 y 5.5, en nuestro caso, el
pH obtenido fue el requerido para esta prctica, de no haber ocurrido esto, tendramos que aadir HCl 6M
lentamente hasta alcanzar el pH necesario.
Para finalizar, pasamos la mezcla a un matraz aforado de 100 ml, diluimos hasta enrasar, utilizando para ello el
agua de los sucesivos lavados del vaso de precipitados (para recoger lo que haya podido quedar), y agitamos
para mezclar los componentes.
Lnea de calibrado
Para realizar los clculos de la lnea de calibrado, debemos preparar previamente 5 disoluciones con valores de
pF (pF = -log [F
-
]) comprendidos entre 5.00 y 4.00. Para ello, debemos agregar a los distintos matraces
determinadas cantidades de la disolucin patrn de NaF 0.0100 M (Para ello tenemos que preparar esa
disolucin de NaF con 0.01049g de NaF pesados en la balanza analtica ). Para calcular esas cantidades que
tenemos que aadir sabemos que:
pF = -log [F
-
] [F
-
] = 10
pF

ml 1
l 1
ml 10
NaF mol 01 . 0
patrn dln l 1
F mol 1
NaF mol 1
dln l 1
F moles 10
dln ml 10
dln l 1
dln ml 100
3 4
3

pF = 4.00 [F
-
] = 1.00 10
- 4
M 1 ml de dln
pF = 4.25 [F
-
] = 5.62 10
- 5
M 0.562 ml de dln
pF = 4.50 [F
-
] = 3.16 10
- 5
M 0.361 ml de dln
pF = 4.75 [F
-
] = 1.77 10
- 5
M 0.177 ml de dln
pF = 5.00 [F
-
] = 1.00 10
- 5
M 0.1 ml de dln
Para facilitar el proceso vamos a llevar a cabo una pequea correccin de los datos,esto es,multiplicar
por 10 todos los volmenes,para que as nos salgan cantidades ms fcilmente medibles,con lo cual
minimizaremos el error,es decir:
pF = 4.00 10 ml de dln
pF = 4.25 5.62 ml de dln
pF = 4.50 3.61 ml de dln
pF = 4.75 1.77 ml de dln
pF = 5.00 1 ml de dln
Estos volmenes los aadimos utilizando las micropipetas, y posteriormente adicionamos a cada uno
de los matraces (previamente marcados), 10 mL de la disolucin TISAB, y los enrasamos con agua destilada,
los tapamos y homogeneizamos. Ahora bien, con el electrodo de fluoruro medimos el potencial para cada una
de las disoluciones preparadas desde la ms diluida a las ms concentrada (para evitar la contaminacin)
homogeneizando el vaso y los electrodos con los electrodos con una porcin de las disoluciones que se
desechar, obteniendo (tras dejar q se alcance el equilibrio) los siguientes resultados:
PF = 5.00 PF = 4.75 PF = 4.50 PF = 4.25 PF = 4.00
E = 174.3 mV E = 153.4 mV E = 135.1 mV E = 118.8 mV E = 100.8 mV
Recta de calibrado
y = 72,64x - 190,4
R
2
= 0,9981
0
50
100
150
200
0 2 4 6
pF
E

(
m
V
)
Esto es : E (mV) = 72.64 pF 190.4
Anlisis de una muestra de agua mineral
Ahora tomamos una alcuota de 20 ml de agua de Fuensanta en un matraz aforado de 100
ml,aadimos a este 10 ml de TISAB y enrasamos con agua destilada y [Link] 40 ml de
esta disolucin a un vaso de precipitados y medimos su potencial,esto es:
MUESTRA 135.3 mV pF = 4.48 [F
-
] = 3.28 10
- 5
M 1.56 ppm
Para comprobar la validez del resultado obtenido con la calibracin convencional se realiza una nueva
calibracin por el mtodo de las ADICIONES [Link] llevarla a cabo aadimos 100 l de disolucin
patrn de NaF 0.01 M a los 40 ml de la disolucin de agua mineral y medimos el potencial.
E 1 = k m log [F
-
] m = 135.3 mV = 0.1353 V

[ ] [ ]
1
1
]
1

+
+


a m
a a m m
2
V V
V F V F
log m k E = 132 mV = 0.132 V
= E 2 E 1 = - m log
[ ] [ ]
1
1
]
1

+
+

a m
a a m m
V V
V F V F
+ m log [F
-
] m
Con estas dos ecuaciones resolvemos :
V m = 40 ml ; V a = 100 l ; [F
-
] m = ? ; [F
-
] a = 0.01 M
m (prctica) = 0.07264 V ; m (terica) = 0.05916 V
PENDIENTE PRCTICA :
0.132 - 0.1353 = - 0.07264 log
[ ]

,
_

+
+

40 1 . 0
1 . 0 01 . 0 F 40
m
+ 0.07264 log [F
-
] m
[ ]
[ ]
m
3
m
3
F log
1 . 40
10 F 40
log
07264 . 0
10 3 . 3

,
_

[F
-
] m = 4.06

10
5
M
PENDIENTE TERICA :
Es la misma ecuacin que en el caso anterior,pero en lugar de poner la pendiente obtenida en la
regresin lineal,ponemos m = 0.05916
[F
-
] m =3.6510
5
M
Ahora,a partir de las concentraciones (terica y prctica) de fluoruros en la muestra,obtenemos las
distintas concentraciones de fluoruros en el botelln de agua y luego las compararemos.
Usando m terica
M 10 125 . 9
ml 40
ml 100
l 1
moles 10 65 . 3
5
5

Usando m prctica
M 10 015 . 1
ml 40
ml 100
l 1
moles 10 06 . 4
4
5

1.93 ppm
Hay que calcular ahora la concentracin en mg/L,esto es:
ppm 73 . 1
g 1
mg 1000
F de mol 1
F g 19
l 1
F de moles 10 125 . 9
5

( m terica)
ppm 93 . 1
g 1
mg 1000
F de mol 1
F g 19
l 1
F de moles 10 015 . 1
4

( m prctica)
- RESULTADOS :
El objetivo de esta prctica era calcular la concentracin en partes por milln
de fluoruros en un botelln de agua mineral,en nuestro caso agua Fuensanta,el anlisis
lo llevamos a la prctica de distintas maneras.
[Link] realiza un calibrado y directamente sobre la recta de regresin se
obtiene la concentracin.
[Link] el mtodo de las adiciones estndar teniendo en cuenta que en esta
parte hay que hacerla por duplicado,es decir,primero con la pendiente obtenida en la
recta de calibrado y seguidamente con la pendiente terica,la diferencia que existe
entre las dos pendientes se debe entre otros factores a la temperatura.
PRACTICA N 4
Determinacin de Zn , Cd , Pb y Cu en aguas por
voltamperometra de redisolucin andica
- FUNDAMENTO :
La voltamperometra es una tcnica electroqumica de anlisis, que consiste en la
medida de la relacin intensidad-potencial en una celda electroqumica, es decir, se basa
en aplicar un potencial a una celda y medir la corriente que se genera.
La voltamperometra de redisolucin es una tcnica polarogrfica. En estas tcnicas la corriente que
circula por la celda electroqumica es funcin del potencial aplicado al electrodo de trabajo. Esta
intensidad es proporcional a la concentracin de analito, es decir, la intensidad ser seal analtica.
En voltamperometra la aplicacin de un potencial constante provoca una reaccin
electroqumica que conlleva una intensidad de corriente asociada, por esta razn se
denomina a la voltamperometra como tcnica activa, en contraposicin con las tcnicas
potenciomtricas, que se las denominan tcnicas pasivas ya que el potencial medido
responde simplemente a la actividad de una especie en disolucin y no a la reaccin
qumica.
La reaccin electroqumica tiene lugar en la interfase electrodo-disolucin, por lo
que es una reaccin heterognea, y como consecuencia de esta reaccin se desarrolla un
potencial.
Una reaccin electroqumica es una reaccin de transferencia de electrones que
tiene lugar en la interfase entre un electrodo de trabajo y una especie electroactiva en
disolucin. Para que tenga lugar una reaccin electroqumica es necesario disponer de
una celda electroltica, un potenciostato y las conexiones necesarias.
Para evitar que el voltmetro permita el paso de corriente, ya que aunque tenga
una gran resistencia puede ocurrir, y que por ello se viera afectada la medida del
potencial se utiliza el montaje potenciosttico de tres electrodos.
El electrodo de referencia, en nuestro caso Ag/AgCl, que tiene un potencial
constante (E =0.197 V) y frente a l se miden los potenciales aplicados (ya que el
potencial siempre hay que medirlo respecto a otro potencial de referencia).
El electrodo auxiliar: Conduce la corriente desde la fuente a travs de la
disolucin hasta el electrodo. Utilizamos como electrodo auxiliar un electrodo de
platino.
El electrodo de trabajo o indicador: Electrodo de gotas de mercurio. Sobre su
superficie va a tener lugar la reaccin electroqumica mediante la aplicacin de un
potencial a este electrodo.
Un electrodo de gotas de mercurio consiste en un tubo capilar fino de
aproximadamente 10 cm y con un dimetro de unos 0.05 mm a travs del cual se fuerza
a salir al mercurio mediante una columna de mercurio de unos 50 cm. El dimetro de la
gota es de 0.5 a 1 mm y es muy reducible.
La utilizacin de este electrodo corno electrodo de trabajo se debe a que
presenta una serie de ventajas:
a. Mejor reproducibilidad en las medidas ya que se emplea una gota nueva
para cada barrido por lo que se renueva continuamente la superficie del
electrodo evitando as posibles contaminaciones debidas a procesos
anteriores.
b. Metales que no podan reducirse por culpa del sobrepotencial de
reduccin del hidrgeno, al emplear este otro tipo de electrodo de
trabajo podrn reducirse. Adems la formacin de amalgamas entre el
analito y el mercurio facilita la reduccin de ese metal.

Etapas de la voltamperometra de redisolucin andica:
PRECONCENTRACIN - Mediante la aplicacin de un potencial constante lo
suficientemente negativo el metal se reduce sobre la gota de mercurio formando una
amalgama que hace que los cationes se depositen en el electrodo.
M
2+
+2e
-
M(Hg)

Se deposita una cantidad despreciable en comparacin con la cantidad de analito
en la disolucin. Los resultados cuantitativos dependen, por lo tanto, en gran medida del
control del potencial, del tamao de la gota de mercurio, del tiempo de
preconcentracin, y de la velocidad de agitacin.,ya que durante esta etapa se mantiene
agitacin constante para favorecer el flujo de analito hacia el electrodo. Todo esto esta
expresado en la siguiente frmula que da la concentracin del metal reducido en el
amalgama :
C
M (Hg) = K

1/2
t d

C
M
2+
r
es la velocidad de agitacin magntica
td

es el tiempo de preconcentracin
r es el radio de la gota de mercurio
es un coeficiente de transferencia de materia que depende de la geometra
de la gota de mercurio
C
M
2+


es la concentracin de
M
2+

en la disolucin

Una vez finalizada esta etapa se pasa a otra de reposo para estabilizar el electrodo.
REDISOLUCIN - En esta parte se lleva a cabo la redisolucin de los analitos
concentrados en la gota de mercurio mediante la aplicacin de un barrido de potencial
positivo que oxida al metal.
M(Hg) M
2+
+ 2e
-

La intensidad que se genera en este proceso es directamente proporcional a la concentracin
de metal en la amalgama y por tanto tambin ser proporcional a la concentracin de metal en a
disolucin.
Segn el tipo de potencial aplicado distinguimos diferentes subtipos de tcnicas
dentro de sta:
1. Potencial constante: en nuestra prctica se utiliza en la etapa de
preconcentracin.
2. Potencial lineal: Se escoge un intervalo de potencial y se realiza un barrido
lineal a lo largo del tiempo que dura el proceso.
3. Impulsos de potencial con amplitud creciente: Se elimina la componente
capacitiva de la intensidad (corriente necesaria para cargar el condensador
formado en la cercana del electrodo de Hg) porque son instantneas y
medimos un tiempo despus de aplicar el pulso.
4. Impulsos de potencial con amplitud constante y barrido: Al aplicar pulsos con
amplitud constante y sobre un barrido lineal se optimiza la intensidad
requerida. Esta va a ser la tcnica que usemos nosotros. Este tipo de barrido
mejora los limites de deteccin, se incrementa la componente faradaica y se
disminuye la componente capacitiva de la intensidad disminuyendo as la
corriente residual.
El voltamperograma es la representacin intensidad potencial y del pico obtenido en l para
cada una de las especies podemos obtener informacin cualitativa ya que el potencial del pico que se
registra es caractersticos de cada especie, e informacin cuantitativa puesto que la altura(intensidad)
es proporcional a la concentracin del analito segn la ecuacin:
i
p
= k n
2/3
D
2/3
M(Hg)
r
1/2
t
d
v
1/2
C
M
2+

n es el n de electrones transferidos por tomo
D
2/3
M(Hg)
es el coeficiente de difusin del metal en la amalgama
v es la velocidad de barrido de potencial.
Para un conjunto prefijado de parmetros instrumentales, la intensidad del pico
de redisolucin es proporcional a la concentracin del analito en la disolucin, C
M
2+
.
En esta prctica vamos a realizar un anlisis rnultielemental de un agua, en
concreto vamos a determinar los siguientes elementos: cinc, cadmio, plomo y cobre, que
son sustancias contaminantes y no pueden degradarse ni biolgica ni qumicamente. Para
realizar dicha determinacin vamos a utilizar la voltamperometra de redisolucin
andica sobre un electrodo de gota estacionaria de mercurio.
La determinacin de metales en agua es importante porque muchos elementos
metlicos terminan por alcanzar las aguas naturales debido a que estos metales son muy
estables y la mayora son importantes contaminantes
El Zn y el Cu, por ejemplo, son elementos esenciales para el organismo y su nivel
de concentracin mxima tolerable en aguas de consumo humano es de 5.0 y 1.5 mgL
-1
,
respectivamente. El Cd y el Pb son reconocidos como txicos acumulativos, y su
concentracin no puede ser superior a 5 y 50 g/L, respectivamente.
- INSTRUMENTACIN , MATERIALES Y REACTIVOS :
Como instrumentos de trabajo utilizamos:
Sistema potencistatico Metrohm 626 con registrador incorporado
Electrodo de trabajo de gota estacionaria de mercurio Metrohm EA 290
Electrodo de referencia de Ag/AgCl
Electrodo auxiliar de alambre de Pt
Celda, agitador magntico y suministro de gas inerte.
- Materiales :

1 pipeta aforada de 10 mL
2 matraces aforados de 50 mL
4 matraces aforados de 10 mL
1 vaso de 100 mL
1 vaso de 400 mL
1 gradilla
10 tubos de ensayo de plstico con tapn
4 pipetas Pasteur
1 imn
1 frasco lavador con agua Mili-Q
- Reactivos :

Disolucin patrn de Zn, Cu, Cd y Pb de 1000 ppm
Disolucin de HNO
3

- PROCEDIMIENTO OPERATORIO :
Preparacin de las disoluciones
Primero a partir de las disoluciones patrn de Zn y Cu de 1000 ppm, preparamos 10 mL de disolucin
de 100 ppm de Zn y otros 10 mL de 100 ppm de Cu respectivamente, en matraces aforados. Para ello
hay q tomar 1 mL de la disolucin patrn dada y enrasar con agua hasta 10 ml.
patrn l 1000 patrn dln de ml 1
metal mg 10
patrn dln ml 10
dln ml 10
metal mg 100
dln ml 10
3
3
3

Con las disoluciones patrn de Cd y Pb de 1000 ppm, preparamos 50 ml de
disolucin de 20 ppm de cada metal,y a partir de estas,otras de 2 ppm en matraces
aforados de 10 [Link] ello hay que tomar 1 ml de la disolucin patrn y enrasar con
agua hasta los 50 ml.a continuacin de estas disoluciones tomar 1 ml y echarlo en un
matraz aforado de 10 ml,el cual tambin hay que enrasar.
1 dln (20 ppm)
patrn ml 1
metal mg 10
patrn dln ml 10
dln ml 10
metal mg 20
dln ml 50
3
3
3

2 dln (2 ppm)
patrn ml 1
metal mg 10
patrn dln ml 10
ml 10
metal mg 2
dln ml 10
3
3
3

Tambin tenemos que preparar la disolucin de HNO
3
5 M a partir de HNO
3
concentrado de riqueza 60 % y cuya densidad es de 1.37 g/L :

dln ml 525
HNO g 60
dln ml 100
HNO mol 1
HNO g 01 . 63
dln l 1
HNO moles 5
dln l 1
3 3
3 3

- TOMA Y PREPARACIN DE LA MUESTRA :
El primer paso es lavar con cuidado los electrodos con agua MILI-Q, que es un
agua ms pura que la destilada,la cual no es suficiente al aplicar este mtodo,que es muy
sensible.
A continuacin debemos de introducir un pequeo imn en la celda de medida
para seguidamente aadir 40 mL de agua del grifo en dicha celda.
El siguiente paso es aadir sobre dicha celda 80 l (0.08 ml) de la disolucin que
acabamos de prepara de HNO
3
5 M.
3
3
3
3
3
3
HNO dln ml 08 . 0
HNO de moles 5
HNO de dln ml 10
dln ml 10
HNO de moles 01 . 0
dln ml 40
NOTA : despreciamos los 0.08 ml de la disolucin de HNO
3
frente a los 40 ml de
agua a la hora de hacer los clculos
Purgar con N
2
(gas inerte) durante 10 minutos para eliminar el oxgeno disuelto,
al mismo tiempo que se agita uniformemente. Se observa burbujeo en el tubo y en la
celdilla.
Mantener la atmsfera inerte girando la llave 90 grados. Solo debe observarse
burbujeo en el tubo y no en la celda.
- DETERMINACIN DE LOS METALES EN LA MUESTRA :
Girar el cabezal del electrodo de Hg 2 rayas (segn el electrodo, ya que tambin
podramos girar 3) para colocar la gota de Hg, que debe mantenerse ah a pesar de la
agitacin y que debe ser de tamao constante cada vez q se saque. Sobre ella se
depositarn los metales amalgamados o reducidos, que volvern a ser oxidados.

Debe sacarse una nueva gota para cada barrido.
Tenemos que expresar las alturas de los picos en intensidad de corriente y
representar la intensidad de corriente frente las concentraciones aadidas. La altura
de los picos en mm multiplicada por 0.05 para el Zn y Cu y por 1 para el Cd y Pb nos dan
la intensidad de corriente en A y nA respectivamente
Determinacin de Zn y Cu :
Lo primero es fijar las condiciones de trabajo,que sern las mismas para ambos metales.
Potencial inicial: -1.10 V
Potencial final: 0.20 V
Sensibilidad: 0.05 A/mm
Damping: 0
Preconcentracin: Mantener el mando en la posicin hold durante 40 seg: 30
seg con agitacin y 10 seg sin agitacin.
Barrido de potencial: Se pone el mando en sweep a la vez que se presiona
Measure Record, para tener la impresin de la grfica. Se observan dos picos a distinto
potencial, que corresponden a la presencia de Zn y Cu, uno para cada elemento.
Identificacin de los picos: Como no sabemos cul corresponde a cada metal,
aadimos primero 40 L de Cu de 100 ppm y observamos qu pico crece (el segundo). Al
aadir posteriormente otros 40 L de Zn de 100 ppm, crecer por tanto el pico que no
lo haba hecho antes (el primero). As sabemos el potencial al que se reduce cada metal.
Como tenemos que abrir la celda para introducir el volumen de patrn se pierde la
atmsfera inerte, por lo que, tras cada adicin, debemos burbujear N
2
durante unos
momentos (aproximadamente 10 seg o un poco ms, son suficientes).
Aplicacin del mtodo a las adiciones estndar: Adicin de volmenes crecientes
de los patrones: 40 L de Cu + 40 L de Zn cuatro veces. Los picos deben ir
aumentando, porque cada vez tenemos ms concentracin de metales en el agua. Para
calcular los ppm aadidos se considera que el volumen total se mantiene constante a
pesar de las adiciones, porque estas son despreciables.
Adiciones estndar de Zn:
MEDIDA mg/L de Zn hp (mm) ip (A)
1 0.00 17.0 0.34
2 0.10 34.0 0.68
3 0.20 53.0 1.06
4 0.30 62.0 1.24
5 0.40 76.0 1.52
Realizando ahora con estos datos un ajuste por mnimos cuadrados,se obtiene:
a = 2.92 t0.20
Y = aX + b b = 0.348 t0.049
r = 0.9
d.e.y/x = 0.0628

Determinacin de Zn
y = 2,92x + 0,384
R
2
= 0,9863
0
0,5
1
1,5
2
0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5
mg/L de Zn
I
n
t
e
n
s
i
d
a
d

Adiciones estndar de Cu:
MEDIDA mg/L de Cu hp (mm) ip (A)
1 0.00 29.0 0.58
2 0.10 46.0 0.92
3 0.20 66.5 1.33
4 0.30 80.0 1.60
5 0.40 103.5 2.07
Realizando ajuste por mnimos cuadrados,se obtiene:
a = 3.66 t0.16
Y = aX + b b = 0.68 t0.04
r = 0.99
d.e.y/x = 0.0375
Determinacin de Cu
y = 3,66x + 0,568
R
2
= 0,9948
0
1
2
3
0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5
mg/L de Cu
I
n
t
e
n
s
i
d
a
d

Determinacin de Pb y Cd :
Hay que fijar unas nuevas condiciones de trabajo:
Potencial inicial: -0.80 V
Potencial final: -0.20 V
Sensibilidad: 0.5 A/mm
Damping: 1
Preconcentracin: Mantener en hold durante 3 min. con agitacin y 10 seg de
espera sin agitacin.
A continuacin solamente se observa un pico,el cual debemos de tratar de
identificar,para ello se aaden 20 l de la disolucin de Cd de 2 ppm y al hacer el
barrido aparece un nuevo pico donde antes no lo haba,lo que significa que no hay Cd en
la muestra,aplicamos entonces el mtodo de las adiciones estndar solo con el Pb.
Adiciones estndar de Pb :
MEDIDA mg/L de Zn hp (mm) ip (A)
1 0.00 19.5 9.75
2 2.00 38.0 19.0
3 4.00 53.5 26.75
4 6.00 71.0 35.5
5 8.00 92.0 46.0
Realizando ajuste por mnimos cuadrados,se obtiene:
a = 4.45 t0.13
Y = aX + b b = 9.6 t0.63
r = 0.99
d.e.y/x = 0.8113
Determinacin de Pb
y = 4,45x + 9,6
R
2
= 0,9975
0
20
40
60
0 2 4 6 8 10
mg/L de Pb
I
n
t
e
n
s
i
d
a
d

- CLCULOS :
Para finalmente obtener la concentracin de Zn, Cu y Pb de la muestra de agua
del grifo ,basta con determinar el punto de corte de las rectas de regresin antes
calculadas con el eje de abcisas.
Numricamente esto equivale a despejar la concentracin para que la intensidad
sea cero,este valor,con signo positivo,ser la concentracin buscada.
Para el Zn [Zn] = |(0-0.348) / 2.92| = 0.1315 ppm
Determinacin de Cu
y = 2,92x + 0,384
R
2
= 0,9863
-2
-1
0
1
2
-0,5 -0,3 -0,1 0,1 0,3 0,5
mg/L de Cu
I
n
t
e
n
s
i
d
a
d

Para el Cu [Cu] = |(0-0.1858) / 3.66| = 0.1858 ppm
Determinacin de Cu
y = 3,54x + 0,58
R
2
= 0,9969
-2
-1
0
1
2
3
-0,5 -0,3 -0,1 0,1 0,3 0,5
mg/L de Cu
I
n
t
e
n
s
i
d
a
d

Para el Pb [Pb] = |(0-9.6) / 4.45| = 2.15 ppm
Determinacin de Pb
y = 4,45x + 9,6
R
2
= 0,9975
-20
0
20
40
60
-3,5 1,5 6,5 11,5
mg/L de Pb
I
n
t
e
n
s
i
d
a
d

NOTA : todos los resultados de esta prctica estn copiados de los de grupo n 7

PRCTICA N 5
Separacin de alcoholes por cromatografa de gases con
columnas empaquetadas
- FUNDAMENTO :
La cromatografa de gases es una tcnica de separacin dinmica que se basa en
la interaccin de distintos analitos con 2 medios: la fase estacionaria y la fase mvil y
en la diferencia de velocidades de los mismos al ser arrastrados por la fase gaseosa
mvil a travs de un lecho estacionario mantenido en la columna.
En funcin de estas interacciones los distintos analitos migrarn a distintas
velocidades a travs de la fase estacionaria, la cual consiste en pequeas partculas
slidas esfricas microporosas que se encuentran empaquetadas en una columna. Esta
fase estacionaria puede estar modificada mediante la adicin de un reactivo qumico
inerte que cambie las propiedades de interaccin con los analitos. La fase mvil es un
gas que sirve para transportar las molculas de los analitos a travs del sistema
cromatogrfico. Durante el proceso cromatogrfico las molculas del analito en la fase
mvil entran en contacto con la fase estacionaria. Se produce, por tanto, una
competicin entre las dos fases por las molculas del analito que depender de sus
propiedades fsicas y de la afinidad del analito por la fase estacionaria. Este proceso se
denomina reparto.
En cualquier punto del sistema cromatogrfico se establecer un equilibrio entre
la concentracin del analito en la fase estacionaria [As] y en la fase mvil [Am]
respectivamente:
Am As
Siendo el coeficiente de reparto del analito D
A
= [As] / [Am]. Cuanto mayor sea
D
A
mayor ser la afinidad del analito por la fase estacionaria. La composicin de la fase
mvil segn sale de la columna cromatogrfica se mide continuamente mediante un
detector y la concentracin de los distintos analitos segn salen de la columna se
representa en funcin del tiempo para construir el llamado cromatograma. Dado que los
componentes difunden durante la separacin, la anchura de los picos aumenta al
aumentar el tiempo de retencin, para evitar esto se puede disminuir continuamente el
valor del coeficiente de reparto aumentando la afinidad de los componente ms
retenidos por la fase mvil. En cromatografa de gases esto se consigue variando la
temperatura de la columna.
La cromatografa de gases puede ser utilizada para realizar anlisis cuantitativos, esto
requiere el calibrado del detector para el compuesto de inters respecto a un componente de
referencia llamado patrn interno.
Este tiene que tener una estructura similar al compuesto que queremos
determinar, no puede estar presente en la muestra ya que tenemos que controlarlo y su
seal cromatogrfica no puede solaparse con la del compuesto de inters. De este modo
permite compensar pequeas diferencias en los volmenes inyectados y derivas en la
respuesta del detector. Este estndar interno debe aadirse tanto a patrones como a
muestras a concentracin conocida Cs.
El factor de respuesta, F, se evala midiendo la relacin de reas de pico del
analito, a
A
respecto al patrn interno, a
S
, para distintas cantidades del analito Ca:

A
Pt
Pt
A
C
C
a
a
F
La representacin de ( a
A
/ a
S
) ( Cs ) respecto a Ca dar una lnea recta de pendiente
F que pase por el origen. La concentracin en la muestra desconocida, Cm, se evala
segn: Cm = ( a
A
/ a
S
) ( Cs / F ) para los valores encontrados en la muestra.
Nosotros vamos a llevar a cabo la separacin de alcoholes. Por lo que la interaccin de los distintos
analitos con la fase estacionaria ser muy parecida, ya que tienen todos una estructura similar. Por
esto el factor fundamental que nos marcar la separacin de los alcoholes va a ser las temperaturas de
ebullicin de los distintos compuestos. Cuanto mayor sea la temperatura mayor tiempo estar el
analito en la columna como vapor y no como lquido, lo que le permite ser arrastrado ms fcilmente
por la fase mvil, siendo por tanto menor el tiempo de retencin.
COMPUESTO PUNTO DE EBULLICIN ( C )
metanol 64.7
etanol 78.5
n-propanol 97.2
isobutanol 108
n-butanol 117
Por tanto, por lo que acabamos de decir, el orden en el que irn saliendo ser ese.
Y en eso consiste la primera parte de la prctica, tras pinchar la mezcla de todos los
alcoholes a distintas temperaturas (para ver cual es la mejor temperatura de
separacin) procederemos a pincharlos puros para identificarlos.
Aunque adems del anlisis cualitativo, con esta tcnica tambin se puede hacer
un anlisis cuantitativo, ya que la concentracin de los compuestos es proporcional a su
rea. Por lo que haciendo un calibrado previo (parte segunda de la prctica) podemos
medir la concentracin de una muestra problema (parte tercera de la prctica).
- INSTRUMENTACIN :
Para esta prctica, se utilizar un cromatgrafo de gases modelo HP6890 provisto de
columna empaquetada de 2 m de longitud y detector de ionizacin de llama (FID).
Tambin se utilizaron un integrador de picos cromatogrficos HP, un jeringa Hamilton 0
10 L y bombonas de N
2
(gas portador), H
2
y aire
Los componentes principales de un cromatgrafo son:

1. Suministro del gas portador.
El gas portador, que debe ser qumicamente inerte, puede ser helio, argn,
nitrgeno o hidrgeno, si bien el ms utilizado es el helio.
Los caudales se controlan con un regulador de presin; normalmente las
presiones de entrada al cromatgrafo son aproximadamente de 1 a 4 atm por encima
de la presin atmosfrica, que proporcionan caudales de 25 a 150 mL/mm. La mejor
forma de medir caudales es con un medidor de pompas de jabn colocado al final de
la columna.
2. Sistema de inyeccin de muestra.
Para evitar ensanchamientos de banda y tener buena resolucin la muestra
debe ser pequea y debe introducirse rpidamente como un bolo de vapor.
Normalmente las muestras lquidas se inyectan mediante una microjeringa calibrada,
pinchando a travs del septo o diafragma de goma o silicona del bloque de inyeccin
que se encuentra a la cabeza de la columna.
El bloque de inyeccin de ordinario est a 50
0
C por encima del punto de
ebullicin del componente menos voltil de la muestra para que tenga lugar una
rpida vaporizacin. EI volumen de la muestra que se inyecta oscila entre algunas
dcimas de microlitro hasta 20 L en columnas empaquetadas.
3. Columna:
Existen dos tipos de columnas: empaquetadas o de relleno y capilares,
actualmente las ms utilizadas son las de capilares.
Las columnas empaquetadas tienen de 2 a 3 m de longitud y estn fabricadas
con tubos de vidrio, de metal o de tefln, los dimetros oscilan entre los 2 y los 4
mm.
Estos tubos se rellenan con un material slido que forma una fina capa que
sirve para mantener inmvil la fase lquida estacionada y para que haya mayor
superficie de contacto. Actualmente el soporte ms utilizado se prepara a partir
de tierra de diatomeas dc origen natural.
Las fases estacionarias ms utilizadas son los polidimetilsiloxanos dada su
baja volatilidad.
4. Sistema de deteccin:
Los dispositivos de deteccin en cromatografa de gases deben responder
rpida y reproduciblemente a pequeas concentraciones de solutos a medida que
salen de la columna. Deben presentar respuesta lineal, buena estabilidad en
periodos prolongados y respuesta uniforme a una variedad de compuestos.
En esta prctica usamos un detector de ionizacin de llama (FID). Los
compuestos orgnicos en la llama de hidrgeno y aire producen iones y electrones.
El electrodo colector se somete a una diferencia de potencial de unos cientos de
voltios respecto al quemador de la llama y se mide la corriente con un amplificador
de seal.
El cromatograma que obtenemos es la representacin de la respuesta o seal,
que es proporcional a la concentracin de analitos separados en un sistema
cromatogrfico, en funcin del tiempo, volumen del eluyente o distancia en el lecho
cromatogrfico. En nuestro caso es de tipo diferencial, ya que la seal slo se
origina al pasar el analito por el detector.
- MATERIALES Y REACTIVOS :
- Materiales :

4 Viales de 5 mL
8 Matraces aforados de 10 mL
1 Micropipeta de 100 1000 L
1 Pipeta graduada de 5 mL
2 Vasos de precipitados de 100 mL
1 Frasco lavador con agua destilada
- Reactivos :

metanol
etanol
n-propanol
n-butanol
isobutanol
- PROCEDIMIENTO OPERATORIO :
Familiarizacin con el manejo del cormatgrafo de gases
Leerse detenidamente las instrucciones de operacin tanto del cromatgrafo de
gases como del integrador.
Ajustar el flujo de gas portador entre 10 y 20 mL por minuto con el medidor de
burbuja suministrado.
Abrir las vlvulas de hidrgeno y aire y encender la llama del FID. Dejar
estabilizar el equipo durante 15 20 minutos.
Determinacin de parmetros cromatogrficos y relacin de datos de retencin
estructura molecular
Echamos en los cinco viales 1 mL de cada uno de los alcoholes puros, y en otro vial
se mezclan 0.5 mL de cada alcohol de los viales anteriores.
Esta mezcla de alcoholes se inyecta en el cromatgrafo (1 L) secuencialmente
para distintas temperaturas del horno: 70, 90, 110 y 130 C. Las grficas que obtuvimos
estan al final de la prctica
Vemos que para los 2 primeros alcoholes la T ptima es la de 70C ya que los
picos salen bien definidos sin interferirse. Para el 3 y el 4 la mejor T de trabajo es
de 90C y para el 5 la de 110C esto se debe a las distintas volatilidades de los
alcoholes que ahora pasamos a identificar introducindolos en el cromatgrafo por
separado.
A continuacin introducimos 1 L de metanol puro y obtenemos el cromatograma
a 90C. Hacemos lo mismo con el etanol, n-propanol, Isobutanol y n-butanol y obtenemos
de esta manera las distintas grficas. Una vez hallados todos los cromatogramas ya
podemos identificar los distintos alcoholes segn su tiempo de retencin (el orden de
elucin no cambia con la temperatura).
Podemos deducir as que el primer pico corresponde al metanol , el siguiente al
etanol, el siguiente al n-propanol, el siguiente al isobutanol y el ltimo al n-butanol.
Como cuanto ms voltiles son menos tardan en salir, podemos deducir que la
volatilidad depende del nmero de carbono ya que como observamos la volatilidad va
disminuyendo a medida que aumentan el nmero de carbonos. De ah que el ms voltil
sea el metanol.
Ahora que ya sabemos a que compuesto corresponde cada pico y que tal como
suponamos el tiempo de retencin ( que es el tiempo que transcurre a partir de la
inyeccin de la muestra hasta que el pico del soluto aparece en el extremo de una
columna cromatogrfica) disminuye cuando aumenta la temperatura. El problema que se
nos plantea ahora es el de optimizar la temperaturas para conseguir la mejor separacin
posible y que los compuestos salgan con una anchura de pico lo menor posible.
Si nos fijamos en los cromatogramas a temperaturas bajas observamos que los
compuestos con bajos puntos de ebullicin salen muy bien, pero los menos voltiles
tardan mucho en salir (el tiempo tambin es un factor muy importante en el anlisis) y la
anchura de pico es grande. Por el contrario en los cromatogramas a temperaturas altas
tanto el isobutanol como el butanol salen muy bien, pero los picos del metanol y del
etanol se solapan. Por tanto lo mejor sera que la temperatura al principio fuese baja
para obtener una buena separacin de los alcoholes menos voltiles, y que fuese
subiendo progresivamente para que los alcoholes ms voltiles saliese bien pero que no
tardasen tanto en salir y que su anchura de pico fuese pequea. Todo esto se consigue
mediante la utilizacin de un programa de temperaturas
Programacin de temperaturas
Como pudimos comprobar con los cromatogramas realizados a distintas
temperaturas, a menor temperatura habr mejor separacin de picos, pero la anchura
de stos, sobretodo los que tienen mayor punto de ebullicin, ser mucho mayor, y
nosotros buscamos picos estrechos y altos, adems los tiempos de retencin disminuyen
al aumentar la temperatura. Para solucionar estos problemas realizamos un gradiente de
temperatura, el cual hace que a medida que pase el tiempo la temperatura vaya
aumentando.
El programa que nosotros realizamos es:

- Temperatura inicial: 70C
- Tiempo inicial: 2 min
- Rampa: 10C/min
- Temperatura final: 130C
- Tiempo final: 2 min

Con este programa inyectamos 1 L de la mezcla de alcoholes y obtenemos su
cromatograma obteniendo la grfica llamada Rampa cuya resolucin de los picos es
mucho mejor, ya que no se interfieren entre ellos. Y adems hemos optimizado el
tiempo de separacin.
Anlisis cuantitativo : determinacin del contenido en etanol de un vino
La temperatura de la columna: En funcin de los resultados de los apartados
anteriores, vemos que la temperatura mas adecuada para la separacin de etanol y
propanol es de 90C, por tanto ser esta la T con la que trabajaremos
En matraces aforados de 10 mL preparamos disoluciones de etanol conteniendo
0, 2.5, 5, 0.75 y 10 % de etanol (V/V):
% 5 . 2 EtOH ml 25 . 0
dln ml 100
ol tan e de ml 5 . 2
dln ml 10
Y se procede de la misma manera para todas las concentraciones de EtOH.
0.0 % de EtOH 0.00 ml de EtOH
2.5 % de EtOH 0.25 ml de EtOH
5.0 % de EtOH 0.50 ml de EtOH
7.5 % de EtOH 0.75 ml de EtOH
10 % de EtOH 1.00 ml de EtOH
Posteriormente, a estos volmenes aadimos 0.5 mL de n-propanol como patrn
interno, y enrasamos a 10 mL con agua destilada.
Preparacin de la muestra: Se realizan tres rplicas en matraces de 10 mL en los
que mezclamos 5 mL de vino, 0.5 mL de n-propanol y enrasamos a 10 mL con agua
destilada. Inyectamos 1L de cada uno de los patrones y las muestras y usando el
programa de temperaturas que hicimos antes, obtenemos los cromatogramas
correspondientes llamados vino1, vino 2 y vino3.
- CLCULOS :
A) Primero representaremos el tiempo de retencin de cada alcohol en funcin
de la temperatura.
T ( C ) t
R
metanol t
R
etanol t
R
propanol t
R
isobutanol t
R
butanol
70 2.667 3.530 6.771 9.609 13.996
90 1.635 2.026 3.468 4.666 6.455
110 1.132 1.339 2.060 2.636 3.465
130 0.858 0.974 1.366 1.670 2.087
150 0.735 0.803 1.035 1.206 1.434
0,000
2,000
4,000
6,000
8,000
10,000
12,000
14,000
16,000
60 80 100 120 140 160
Temperatura ( C )
T
i
e
m
p
o

d
e

r
e
t
e
n
c
i

n
metanol
etanol
propanol
isobutanol
butanol
Observando la grfica podemos asegurar que el tiempo de retencin disminuye
con la temperatura de forma exponencial. Cosa que caba esperar ya que al aumentar la
temperatura los alcoholes, como los dems compuestos, se volatilizan mejor.
Tambin tenemos que destacar que el tiempo de retencin disminuye tanto ms rpido cuanto ms
pequeo sea el compuesto, lo cual tambin es lgico. Ya que cuanto menor sea la masa ms fcil ser
volatilizarlo aumentando la temperatura.
B) Ahora representaremos el logaritmo del tiempo de retencin frente al inverso
de la temperatura para deducir el tiempo muerto que es el tiempo requerido para que un
analito o disolvente pase a travs de todo el sistema cromatogrfico si no
interaccionase con la fase estacionaria
1/T logt
R
MetOH logt
R
EtOH logt
R
proOH Logt
R
isoOH Logt
R
ButOH
0.014285714 0.427648 0.547775 0.830653 0.982678 1.146004
0.011111111 0.213518 0.306639 0.540079 0.668945 0.809896
0.00909090 0.053846 0.126781 0.313867 0.420945 0.539703
0.00769230 -0.066510 -0.011440 0.135451 0.222716 0.319522
0.00666666 -0.133710 -0.095280 0.01494 0 0.081347
El tiempo muerto vendr dado por la interseccin con el eje de las rectas que
salen al hacer la regresin con los datos de 1 /T-log Tr. Seria como calcular
temperatura infinita que se dara cuando ningn analito interaccionase con la fase
estacionaria.
y = 124,12x - 0,6051
y = 118,45x - 0,6819
y = 107,53x - 0,6835
y = 85,215x - 0,6576
y = 74,713x - 0,6309
-1
-0,5
0
0,5
1
1,5
0 0,002 0,004 0,006 0,008 0,01 0,012 0,014 0,016
1/T
l
o
g
(
t
R
)
metanol
etanol
propanol
isobutanol
butanol
Li neal (butanol)
Li neal (isobutanol)
Li neal (propanol)
Li neal (etanol)
Li neal (metanol)
Para calcular el tiempo muerto haremos una media de las medidas:
COMPUESTO TIEMPO MUERTO
metanol -0.63093
etanol -0.65760
propanol -0.68352
Isobutanol -0.68185
butanol -0.60505
C) Ahora vamos a ver el tiempo de retencin, a una temperatura dada (90C) y como vara con los
tomos de carbono de cada alcohol:
COMPUESTO n de tomos de C log (tR t0) log (tR t0)
metanol 1 0,14985
etanol 2 0,256
propanol 3 0,51122
isobutanol 4 0,64768
butanol 4 0,79463
y = 0,2693x - 0,2873
R
2
= 0,9991
-0,2
0
0,2
0,4
0,6
0,8
1
0 2 4 6
n de tomos de carbono
l
o
g

(
t
R

-

t
0
)
Serie1
Serie2
Lineal (Serie1)
Se observan solo aquellos alcoholes lineales de ms de dos carbonos presentan la linealidad
propia de un recta de calibrado. Esto se debe a que pertenecen a una serie homologa ala que no
pertenecen ni el metanol, por ser demasiado pequeo, ni el Isobutanol ya que no es un hidrocarburo
de cadena lineal.
D) Calculamos el nmero de platos tericos, que viene dados por la frmula
N=(16t
r
2
)/
2
. Que estn relacionados con la eficacia del aparato.
COMPUESTO
tr w N
metanol 70 2,677 0,160 4478,956
etanol 70 3,530 0,184 5888,894
propanol 70 6,771 0,337 6459,008
isobutanol 70 9,609 0,468 6745,042
propanol 90 3,468 0,169 6737,593
isobutanol 90 4,666 0,222 7068,113
butanol 90 6,455 0,292 7818,92
propanol 110 2,060 0,108 5821,125
isobutanol 110 2,636 0,135 6100,189
butanol 110 3,465 0,164 7142,311
N medio = 6642.35
E ) Determinacin de la concentracin de etanol en vino: para lo que pinchamos las tres muestras
patrn en cromatgrafo. En esos patrones utilizamos el propanol como patrn interno y las medidas
las hacemos usando el programa de temperaturas que describimos antes para optimizar tanto la
separacin como el tiempo. Como podemos observar el volumen de propanol es siempre el mismo,
por lo que el rea de cada pico ser muy parecida, mientras que la del etanol ira aumentando a medida
que aumentemos su concentracin. Los tiempos de retencin tambin son constantes.
% etOH rea etOH rea propOH A etOH/A propOH
0 0 1785703 0
2,5 1159221 2429850 0,477075128
5 2215240 2988690 0,741207686
7,5 2332941 2256653 1,033805818
10 4041154 3186517 1,268204124
vino1 1050507 1369707 0,766957459
vino2 1511220 1849085 0,817279898
vino3 1663728 2051575 0,810951586
Si representamos el rea de etanol partido del rea de propanol frente al % de
etanol,tenemos:
y = 0,1237x + 0,0854
R2 = 0,9807
0
0,5
1
1,5
0 5 10 15
% de etanol

r
e
a

d
e

e
t

/

r
e
a

d
e

p
r
o
p
Y si representamos el % de etanol frente al rea de etanol
y = 0,1237x + 0,0854
R2 = 0,9807
0
1000000
2000000
3000000
4000000
5000000
0 5 10 15
% de etanol

r
e
a

d
e

e
t
a
n
o
l
- RESULTADOS :
Los resultados obtenidos del % de etanol en el vino Via Lanzar son :
MUESTRA % de etanol
Vino 1 11.01675
Vino 2 11.83020
Vino 3 11.72791
Al hacer la media tengo : 11.5 t0.4 % de etanol RSD = 3.8
BIBLIOGRAFA
Principios de Qumica