Marco terico La cromatografa es una tcnica que permite la separacin de los componentes de una mezcla debido a la influencia de dos

efectos contrapuestos. a) Retencin. Efecto producido sobre los componentes de la mezcla por una fase estacionaria, que puede ser un slido o un lquido anclado a un soporte slido. b) Desplazamiento. Efecto ejercido sobre los componentes de la mezcla por una fase mvil, que puede ser un lquido o un gas. El fenmeno de migracin de los componentes de una mezcla a lo largo de la fase estacionaria, impulsados por la fase mvil, recibe el nombre de elucin. La mezcla a separar se deposita sobre la fase estacionara, mientras que la mvil atraviesa el sistema desplazando a los componentes de la mezcla a distinta velocidad, dependiendo de la magnitud de sus interacciones relativas con ambas fases. Las dos fases se eligen de forma que los componentes de la muestra se distribuyan de modo distinto entre la fase mvil y la fase estacionaria. Aquellos componentes que son fuertemente retenidos por la fase estacionaria se mueven lentamente con el flujo de la fase mvil; por el contrario los componentes que se unen dbilmente a la fase estacionaria, se mueven con rapidez. Como consecuencia de la distinta movilidad, los componentes de la muestra se separan en bandas o zonas discretas que pueden analizarse cualitativa o cuantitativamente. La fase mvil est constituida por un disolvente en el que los componentes de la mezcla deben ser al menos parcialmente solubles. La velocidad de elucin de un compuesto se incrementa al aumentar la polaridad de la fase mvil y se puede utilizar un gradiente de polaridad aumentando con el tiempo la proporcin del disolvente ms polar. Los componentes de la mezcla a separar invierten un tiempo diferente en recorrer cada una de las fases, con lo que se produce la separacin. Si un componente est la mayor parte del tiempo en la fase mvil el producto se mueve rpidamente, mientras que si se encuentra la mayor parte en la fase estacionaria, el producto queda retenido y su salida es mucho ms lenta.

La cromatografa en capa fina se basa en la preparacin de una capa, uniforme de un absorbente mantenido sobre una placa, la cual puede ser de vidrio, aluminio u otro soporte. La fase mvil es lquida y la fase estacionaria consiste en un slido. La fase estacionaria ser un componente polar y el eluyente ser por lo general menos polar que la fase estacionaria, de forma que los componentes que se desplacen con mayor velocidad sern los menos polares. Este va ascendiendo por la parte seca de la placa en forma lenta, mientras que el absorbente acta como un secante. Cuando el disolvente a subido hasta cubrir casi la totalidad del absorbente se retira la placa, se pone a secar y finalmente se trata con un reactivo qumico apropiado con el fin de poder revelar las manchas y as poder observarlas. La placa ya revelada se llama cromatograma y muestra las manchas separadas que indican el nmero de componentes de las mezclas. Cada componente corresponde a una mancha. Al realizar la eleccin del adsorbente se debe tener en cuenta el tamao de las partculas del adsorbente, cuanto ms finamente dividido est mayor ser su adhesin al soporte, aunque tambin se le puede aadir un adherente. En la eleccin del eluyente influyen varios factores: Precio, Pureza, No utilizar mezclas de eluyentes (reproducibilidad).No utilizar compuestos muy voltiles, Evitar que contengan trazas de metales (catalizadores). La eleccin del eluyente se realiza de forma emprica. Hay que estudiar la polaridad del componente y probar con eluyentes cada vez menos polares. Luego para identificar los componentes se toma la distancia desde el origen de la placa a la mancha y se divide por la distancia del origen al frente del disolvente; este cociente se toma como base para la identificacin de los componentes por separado, comparando los valores encontrados con el cociente de muestras patrones

determinado en condiciones similares. La relacin entre la distancia recorrida por un compuesto y por el disolvente desde el origen se conoce como Rf (rate factor). Rf= Distancia recorrida por el compuesto Distancia recorrida por el disolvente

La Cromatografa en columna se emplea para la separacin de mezclas o purificacin de sustancias a escala preparativa. Como fase estacionaria se usa, generalmente, gel de slice dentro de una columna. La eleccin del disolvente es crucial para una buena separacin. Dicho disolvente pasa a travs de la columna por efecto de la gravedad o bien por aplicacin de presin (cromatografa flash). La columna se prepara mezclando el soporte con disolvente y se rellena la columna poniendo en el fondo de sta un poco de algodn, para evitar que la slice quede retenidas en la columna y que el disolvente se engrasada hasta el nivel del soporte. A continuacin se introduce la muestra por la parte superior de la columna y se eluye con el disolvente elegido, recogindose por lo general en tubos de ensayo. Una columna de cromatografa es un tubo de vidrio relleno con una sustancia slida de propiedades adsorbentes constituida por pequeas partculas: gel de slice y almina son las ms usadas. Este rellenoes lo que se conoce en cromatografa como laf ase estacionaria A travs de la columna se har pasar una corriente de un disolvente o mezcla de disolventes denominada eluyentey/o fase mvil. Intervienen los fenmenos de adsorcin y disolucin, por consiguiente es fundamental tener en cuenta la polaridad, tanto de las sustancias a arrastrar como del disolvente, si queremos tener una buena separacin. El disolvente al descender arrastra las sustancias a distinta velocidad segn la mayor o menor retencin que experimenten, y salen de la columna a distinto tiempo. La tcnica, en forma generalizada, comprende:

* Preparacin del disolvente * Preparacin de la columna * Desarrollo del cromatograma * Estudio del tiempo de retencin * Revelado de las sustancias separadas, si no son visibles La Cromatografa FLASH es un mtodo de purificacin de compuestos de sntesis que se basa en Cromatografa de Lquidos de Media Presin, a diferencia de los sistemas tradicionales por gravedad en columna que son mucho ms lentos e ineficientes. La Polaridad va de mayor o menor velocidad de desplazamiento a lo largo de la columna depende directamente de la estructurade cada molcula as como de los grupos funcionales que pueda poseer. El motivo principal es su diferentepolaridad. Molculas ms polares quedan ms retenidas en la fase estacionaria, es decir "corren menos",mientras que las molculas menos polares se ven menos retenidas y avanzan a mayor velocidad arrastradas por eluyente. Un pigmento es un material que cambia el color de la luz que refleja como resultado de la absorcin selectiva del color. Los materiales que los seres humanos han elegido y producidos para ser utiliza dos como pigmentos por lo general tienen propiedades especiales que los vuelven ideales para colorear otros materiales y estos tienen diversas aplicaciones tanto en la industria como en la vida cotidiana de los seres humanos, estos pueden ser obtenidos de vegetales, frutas, plantas, rocas, etc.(en este caso chile juaguillo) y una de la forma de obtencin de estos es la aplicacin de la cromatografa