Universidad Jos Carlos Maritegui Ingeniera Agroindustrial

PRACTICA N 02: DETERMINACION DE CAFEINA EN LIQUIDOS

I.

OBJETIVO 1.1 Cuantificar el contenido de cafena en alimentos lquidos.

II.

FUNDAMENTO TEORICO La cafena es un polvo inodoro, incoloro y amargo. Friedrich Ferdinand Runge la aisl del caf en 1819 y del t en 1827, pero su estructura qumica no se describi hasta 1875 por E. Fischer. La cafena (1, 3, 7-trimetilxantina) y otros alcaloides metilxantnicos, son derivados del grupo de las xantinas, que a su vez se derivan de las purinas. Tambin es conocida por el nombre tena, guaranna o matena. La cafena ha sido consumida durante siglos a pesar de los intentos repetidos de prohibir su uso por motivos morales, econmicos, mdicos o polticos. El descubrimiento del caf tuvo lugar en el siglo IX en Arabia y se cultiv por primera vez en Etiopa. En el siglo XV se desarroll la tcnica de tostar y moler los granos de caf y el consumo de los productos con cafena se expandi rpidamente por todo el mundo. La cafena es una sustancia que se encuentra en ciertas plantas naturales y puede producirse sintticamente en laboratorio. Se localiza en cantidades variables en las semillas, las hojas y los frutos de algunas plantas, donde acta como un pesticida natural que paraliza y mata ciertos insectos que se alimentan de las plantas. Se encuentra en el caf, t, chocolate, yoco, cacao y, en bebidas de cola y energticas. Tambin se encuentran en bebidas que contienen guaran y a menudo como ingrediente en los suplementos de prdida de peso y energizantes, las bebidas deportivas, preparaciones herbales y analgsicos. El caf es una de las fuentes de cafena consumidas con mayor frecuencia aunque los expertos recomiendan generalmente limitar la ingesta en torno a 300 mg al da. Poseen una estructura cristalina y su frmula molecular es C3H4N2. Es muy soluble en agua hirviendo en la que cristaliza como monohidrato, ya que va perdiendo progresivamente la molcula de agua, hasta que lo hace totalmente a los 100 C. Sin embargo tiene ms afinidad por algunos disolventes orgnicos, como el cloroformo (CHCl3) y el diclorometano (CH2Cl2), que a su vez son casi inmiscibles en agua.

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La cafena puede formar combinaciones estables con sales alcalinas de cidos dbiles, como el benzoato y silicato de sodio, pero su reaccin con cidos da lugar a compuestos muy inestables. Se descompone fcilmente por la accin de lcalis calientes y por cloro. Es interesante saber que la rapidez con la que el cuerpo absorbe la cafena es muy variable en funcin de la persona. De media, nuestro organismo absorbe la cafena en un plazo de 3 horas aproximadamente pero este margen puede variar en funcin del consumo de alcohol, la toma de anticonceptivos o el embarazo. Sin embargo, aconsejamos consultar con un especialista en caso de dudas. Mtodos para determinar el % de cafena o Mtodo A
( ) ( ( ) )

Donde:

Au= unidades de absorbancia (muestra problema) As= unidades de absorbancia del patrn C=concentracin de patrn V= volumen de la muestra Longitudes de onda= 252, 272 y 292 nm

o Mtodo B

Donde: R= 0,9996 Y= Absorbancias promedio a 271, 272 y 273 nm X= % de cafena (ppm) (mg/Lt)

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III.

MATERIALES Y EQUIPOS 3.1 MATERIALES 3.1.1 Termmetro 3.1.2 Pera de decantacin 3.1.3 Erlenmeyer 100 ml 3.1.4 Pipetas de 10 ml 3.1.5 Bagueta 3.1.6 Soporte universal 3.1.7 Pinzas 3.1.8 Nuez 3.1.9 Vaso de precipitado de 100 ml 3.1.10 Papel filtro EQUIPOS 3.2.1 Rotavapor: concentra o destila soluciones 3.2.2 Espectrofotometro UV visible 3.2.3 Bao de Arena MATERIAL BIOLOGICO 3.3.1 Gaseosa Coca Cola: muestra de 50 ml 3.3.2 Maltin Power: muestra de 50 ml REACTIVOS 3.4.1 Solucin de cafena (10 mg/Lt): muestra patrn 3.4.2 Cloroformo qumicamente puro (QP) 3.4.3 Agua destilada

3.2

3.3

3.4

IV.

METODO: Se realizo mediante el siguiente calculo:

V.

PROCEDIMIENTO: Para las muestras de Coca Cola y Maltin Power 5.1 Extraer 50ml de la muestras y depositarla en un matraz Erlenmeyer. 5.2 Retirar el CO2 (gas) de la muestra, sometindola a una temperatura de 40 C a 50 C, mediante un bao de arena, asimismo con la ayuda de una bagueta mover la muestra para lograr eliminar todo el gas. 5.3 Con una pipeta tomar 10ml de la muestra sin CO2 y lo depositamos en una pera de decantacin.

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5.4 Seguidamente con una pipeta extraer 10ml de cloroformo y lo depositamos en la misma pera de decantacin que ya contiene la muestra sin CO2. 5.5 Tapamos la pera de decantacin y agitamos ligeramente durante un tiempo de 5 minutos. Para tratar de mezclar el cloroformo con la muestra, as absorber la cafena. 5.6 Luego ponemos la pera de decantacin en el soporte universal, es decir en reposo, hasta que se separen en dos fases que sern la muestra (parte superior) y el cloroformo ms la cafena extrada en el fondo de la pera de decantacin. 5.7 Al tener las dos fases definidas abrimos la llave de la pera de decantacin y extraemos cuidadosamente solo la fase clara (cloroformo + cafena) a otra pera de decantacin. 5.8 Reservamos la pera de decantacin conteniendo la fase clara (cloroformo + cafena). 5.9 Repetimos la extraccin de cafena con la muestra que aun quedo en la pera de decantacin, volviendo a agregar 10 ml de cloroformo extrado con una pipeta. 5.10 Volvemos a realizar la misma operacin de agitacin y dejar reposar hasta la formacin de las dos fases. 5.11 Igualmente, extraer solo la fase clara (cloroformo+ cafena) y lo depositamos en la pera de decantacin que reservamos anteriormente que contiene la fase clara de la primera prueba. 5.12 Descartamos las fases oscuras que se formaron en las dos pruebas. 5.13 Filtramos todo el contenido claro (cloroformo + cafena) extrado, para eliminar slidos o residuos. 5.14 La muestra filtrada la depositamos en el baln del rotavapor y llevamos a dicho equipo a una temperatura de 79C a 80C; donde el cloroformo se evaporara y condensara mientras que la cafena se concentrara en seco en el baln. 5.15 Una vez terminado el proceso en el rotavapor, se agregara 10m1 de agua destilada al baln que contiene la cafena concentrada en seco. 5.16 Agitar el baln logrando que el agua destilada se mezcle y absorba toda la cafena concentrada que quedo en seco en el baln. 5.17 Depositar esta solucin en un vaso de precipitado. Y coger una muestra de esta solucin en la cubeta de cuarzo y llevarlo al espectrofotmetro para leer las absorbancias a las longitudes de onda de 252, 272, 292 (nm) para el primer mtodo y a 272, 273, 271 nm para el segundo metodo.

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VI.

CLCULOS 6.1 Determinacin de% de cafena por el segundo Mtodo para Coca Cola

Promedio de absorvancias = 1,7261 + 1,7417 + 1,7461 = Y 3 Y= 1,7380 Reemplazando Y:

( (

) )

Donde: X X Luego: 0,344556 %cafena cafena 10ml muestra 100ml muestra

1000ml H2O 10 ml H2O

% cafena de Coca Cola= 3,44

6.2

Determinacin de% de cafena por el segundo Mtodo para el Maltin Power

Promedio de absorvancias = 1,7489 + 1,8021 + 1,8521 = Y 3 Y= 1,8010 Reemplazando Y:

( (

) )

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Donde: X X Luego:

1000ml H2O 10 ml H2O = 0,357258 cafeina

0,357258 %cafena

cafena 10ml muestra 100ml muestra

% cafena de Maltin Power= 3,57

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VII.

RESULTADOS Cuadro N 01: Absorbancias resultantes de las muestras

Cuadro N 02: % de cafena de las muestras MUESTRAS Coca Cola Maltin Power % de cafena 3,44 3,57

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VIII.

OBSERVACIONES 8.1 Para realizar con mayor seguridad este laboratorio, reducir al mximo el contenido de CO2, pues puede ocasionar problemas cuando se someta a la muestra a agitacin en mezcla con el cloroformo. Utilizar un motor para succionar el gas originado durante el proceso en el rotavapor. Ninguna de las dos bebidas muestreadas indican en su etiqueta el contenido de cafena.

8.2 8.3

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IX.

CONCLUSIONES 9.1 Se logr cuantificar el contenido de cafena en las bebidas, resultando as la Maltin Power con un alto contenido de 3,57% de cafena respecto a la Coca Cola que obtuvo 3,44% de cafena.

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X.

BIBLIOGRAFIA
PRACTICA DE CAFEINA/ [Link] NINA. 2010. CAFEINA/ [Link] CARRAL. 2011. /Determinacin analtica de la cafena en diferentes productos comerciales/ [Link]

ZARAGOZA/EXTRACCION DETERMINACION DE

DE CAFEINA EN

CAFEINA/UNAM/ REFRESCO PEPSI/

[Link] [Link]

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