REPBLICA BOLIVARIANA DE VENEZUELA UNIVERSIDAD DEL ZULIA FACULTAD DE MEDICINA ESCUELA DE MEDICINA UNIDAD CURRICULAR: BACTERIOLOGA Y VIROLOGA

Tema 11:

Bacterias Anaerobias estrictas

Lic. Liliana Gmez Gamboa (M.Sc.)

MARACAIBO, JUNIO 2012.

BACTERIAS ANAEROBIAS DEFINICIN

Bacterias incapaces de desarrollarse en presencia de oxgeno Carecen de 2 enzimas, por lo cual el oxgeno es txico para ellas:
Catalasa: por lo tanto el perxido de hidrgeno (H2O2) ejerce un efecto txico sobre ellas Superxido dismutasa: por lo cual no se modifica la toxicidad del anin superxido

Anaerobios
ESPORULADOS
Gnero: Clostridium Bacilos Gram (+)

NO ESPORULADOS
Mltiples gneros y especies Variadas formas Gram (+) Gram (-)

Anaerobios No Esporulados
Gram (-) COCOS Gram (+) Peptococcus Peptostreptococcus Veillonella

Gram (-) BACILOS

Porphyromonas Prevotella Bacteroides Mitsoukella Leptotrichia Actinomyces Propionibacterium Bifidobacterium Eubacterium

Fusobacterium Selenomonas Centpeda Bilophila Mobiluncus

Gram (+)

Bacilos Gram (+) Gnero Clostridium

Anaerobios Esporulados

Clostridium tetani Clostridium botulinum

Clostridium difficile Clostridium sporogenes Clostridium tertium Clostridium histolyticum

Clostridium perfringens
Clostridium septicum Clostridium ramosum Clostridium bifermentans

Clostridium novyi
Clostridium cadaveris Otros

Roles e importancia de la Microbiota intestinal

Rol fisiolgico:
Estimula el peristaltismo intestinal

Rol nutricional:
Sntesis de vitaminas: vit K y vitaminas del complejo B

Mecanismos de defensa
Barrera inespecfica, al bloquear receptores
Estimulacin del peristaltismo intestinal

Estimulacin de inmunidad humoral y celular Elaboracin de sustancias bacteriostticas y bactericidas: Bacteriocinas

Patogenia

Patogenia
Las infecciones por microorganismos anaerobios no esporulados tienen origen endgeno y su principal causa desencadenante son factores que comprometen al husped como: traumatismos, quimioterapia antibitica, ruptura de barreras mucosas o enfermedades subyacentes El establecimiento de la infeccin se relaciona con:
virulencia del microorganismo. de la tensin de oxgeno del tejido. del potencial de xido reduccin del mismo.

Patogenia
Factores que potencial Eh
Prdida de irrigacin vascular por lesiones, cuerpos extraos, presin de yesos, etc. Infeccin por bacterias facultativas, las que producen cidos en proceso de fermentacin, pH del tejido Necrosis por traumatismos, infecciones, tumores o maniobras quirrgicas (destruccin celular y liberacin de enzimas) Hemorragias: destruccin de GR pH Inflamacin liberacin metabolitos cidos

Patogenia
ANAEROBIOS NO ESPORULADOS (Flora endgena)

INFECCIONES ENDOGENAS

MECANISMO DE PATOGENICIDAD: INVASIVIDAD

COLECCIONES SUPURADAS NECROSIS POLIMICROBIANAS

Localizaciones habituales de infecciones por Anaerobios

Grupo Bacteroides fragilis: B. fragilis Prevotella Porphyromonas Fusobacterium nucleatum Clostridium perfringens Clostridium ramosum

Signos Clnicos de Infeccin Anaerobia

Olor ftido del pus Localizacin de la infeccin cercana a una superficie mucosa Presencia de necrosis, gangrena, gas en los tejidos Infecciones consecutivas a mordeduras Cuadro clnico sugerente de infeccin anaerobia: aborto sptico, infeccin post ciruga abdominal, etc. Endocarditis con hemocultivos negativos Presencia de granos de azufre en una lesin Sintomatologa clnica de actinomicosis, mionecrosis por clostridios

Bacteroides fragilis Prevotella Porphyromonas Fusobacterium

Bacteroides fragilis
Bacilo Gram (-) no esporulado, pleomrfico pequeo Hbitat: microbiota intestino grueso hombre Factor de virulencia: cpsula polisacrida Antignica, promueve formacin de abscesos Resiste fagocitosis

Bacteroides fragilis
Produce:
superxido dismutasa aerotolerante catalasa aerotolerante lactamasas resistencia a penicilinas Enzimas lipo y proteolticas invasividad Importante patgeno humano Lder en infecciones intrabdominales

Bacteroides fragilis
ADHESINAS
Cpsula Fimbrias: adherencia e induccin de expresin de citocinas proinflamatorias

PROTECCIN FRENTE A LA FAGOCITOSIS

Polisacrido capsular cidos grasos de cadena corta (cido succnico) generado durante el metabolismo anaerobio. Proteasas de inmunoglobulinas.

PROTECCIN FRENTE A LA TOXICIDAD DEL OXGENO

DESTRUCCIN TISULAR PRODUCCIN DE TOXINAS

Toxina metaloproteasa termolbil de zinc induce cambios en el epitelio intestinal a travs de la organizacin de actina, estimulando secrecin de cloruro y prdida de lquidos

Tomado de: Microbiologa Mdica. Murray, Rosenthal y Pfauer, 2008.

Tomado de: Microbiologa Mdica. Murray, Rosenthal y Pfauer, 2008.

ENFERMEDADES CLNICAS
Gastroenteritis Infecciones del tracto respiratorio

Bacteremia

Absceso cerebral

Infecciones cutneas y de partes blandas

Infecciones ginecolgicas

Infecciones intraabdominales

Bacteroides fragilis Colonias en Agar Sangre

Crecimiento de B. fragilis en agar bilis-esculina. La mayora de las bacterias anaerobias y aerobias son inhibidas por la bilis y la gentamicina en este medio, mientras que los del grupo de B. fragilis se estimulan con la bilis, son resistentes a la gentamicina y son capaces de hidrolizar la esculina produciendo un precipitado negro.

Gnero Prevotella
Se definen como bacilos Gram negativos formadores de pigmento. Principales especies
Prevotella melaninogenicus Prevotella corporis
Prevotella denticolis

La mayora de las Prevotellas se aslan de la cavidad oral

 Polisacrido capsular: Inhibe la fagocitosis Promueve la formacin de abscesos Facilita adherencia clulas epiteliales Pilis Enzimas: Promueven la invasin y la propagacin Contribuyen al dao tisular

Prevotella melaninogenica Colonia en Agar Sangre

Fusobacterium nucleatum
Bacilos Gram negativos delgados y largos con extremos aguzados, a menudo dispuestos en pares unidos por sus puntas. Anaerobio oral importante Elabora endotoxina lipopolisacrida

Fusobacterium nucleatum

Fusobacterium nucleatum Colonia en Agar Sangre

Gnero Actinomyces
Especies:
A. israelii A. viscosus A. naeslundii A. meyeri A. odontolyticus A. pyogenes A. georgiae

Actinomyces israelii
Bacilos Gram (+) no esporulados Anaerobios Aislados o agrupados en empalizadas o letras chinas, ramificados, rectos o incurvados Hbitat: Cavidad oral Animales y ser humano

Actinomyces
Mecanismo de Patogenicidad: Invasividad
Capacidad de elaborar enzimas proteolticas Capacidad de formar filamentos y grnulos en tejido inflamado, secretando una sustancia polisacrida que une filamentos y forma una sustancia homognea macroscpica color amarillo, que dificulta la fagocitosis grnulo de azufre

 Cuadro Clnico: Actinomicosis

Infeccin crnica. Insidiosa y lentamente progresiva. Lesiones granulomatosas, con supuracin y fistulizacin Principal localizacin crvico - facial Puede localizarse en trax (por aspiracin) o intrabdominal (por perforacin intestinal) o en cualquier otro parnquima (< frecuencia)

Actinomicosis facial

Paciente aquejado de actinomicosis cervicofacial. Se observa la presencia de una fstula que drena.

Tomado de: Microbiologa Mdica. Murray, Rosenthal y Pfauer, 2008.

 Diagnstico
Las manifestaciones de la enfermedad son muchas, suele confundirse con un tumor Tomografa Biopsia e histologa En caso de supuracin por fstula: tomar muestra y realizar Tincin de Gram observacin bacilos Gram (+) filamentosos Cultivo en anaerobiosis, desarrollo lento hasta 4 semanas

Colonias macroscpicas y tincin de Gram de Actinomyces.

Grano de azufre
Tincin de Gram: Bacilos Gram (+)

Grano de azufre
Tincin de Gram: Bacilos Gram (+)

Actinomyces israelii Cultivo en Agar Sangre

 Tratamiento
En caso de colecciones supuradas o fstula el tratamiento es mdico quirrgico Penicilina en dosis altas por tiempo prolongado y luego seguir durante meses hasta 1 ao con Amoxicilina oral

Anaerobios Esporulados
Gnero Clostridium
Bacilos Gram (+) grandes, esporulados (espora terminal o subterminal) Anaerobios obligados, algunos aerotolerantes Mviles (excepto Clostridium perfringens) Algunos capsulados: Clostridium perfringens Familia Clostridiaceae (25 gneros). Dentro del gnero Clostridium existen 202 especies y 5 subespecies. Slo alrededor de 30 son patgenos humanos. Hbitat: suelo, intestino humano y animales, genitales femeninos, cavidad oral y piel del ser humano en porcentaje de portadores

Patogenia
ANAEROBIOS ESPORULADOS
Presentes en ambiente (Flora endgena, salvo Clostridium botulinum)

INFECCIONES ENDOGENAS Y EXOGENAS

MECANISMO DE DAO: TOXICIDAD PRINCIPALMENTE

PATOGENIA
La importante capacidad patgena de los clostridios se puede atribuir a las siguientes caractersticas: 1) Capacidad para sobrevivir en condiciones ambientales adversas mediante la formacin de esporas. 2) Rpido crecimiento en un ambiente enriquecido y privado de oxgeno, y 3) la sntesis de numerosas toxinas histolticas, enterotoxinas y neurotoxinas.

Clostridium: Patogenia
Neurotxicos:
C. tetani C. botulinum

Histotxicos:
C. perfringens C. septicum C. fallax C. bifermentans C. ramosum C. tertium C. novyi, etc.

Pigenos

Enterotxicos:
C. perfringens C. difficile

Clostridium tetani
Bacilo Gram (+), 0,5 a 1,7x 2,1 a 18,1 m. Mvil, en forma de palillo de tambor Espora terminal, longitud 3-6 m Hbitat: suelo, intestino hombres y animales Elemento infectante: espora, que es altamente resistente a antibiticos y desinfectantes Mecanismo de patogenicidad: toxicidad Carece poder invasivo, penetra a travs de heridas punzantes, quemaduras, lceras o infeccin cordn umbilical

Clostridium tetani
A diferencia de C. perfringens tiene dificultades para crecer debido a su sensibilidad a la toxicidad del oxgeno y cuando se detecta en medios de agar aparece generalmente formando una pelcula en lugar de colonias.
Actividad proteoltica. Incapaces de fermentar CHO.

Clostridium tetani

TOXINAS

Tetanolisina Tetanoespasmina

Tetanolisina
Hemolisina lbil al oxgeno.
Serolgicamente relacionada con la Estreptolisina O y las hemolisinas de C. perfringens y L. monocytogenes.

Tetanoespasmina
Neurotoxina termolbil codificada en un plsmido no conjugativo, por lo que una cepa no toxignica no puede transformarse en toxignica.

Tetanoespasmina
Se libera cuando la clula se lisa y es responsable de las manifestaciones clnicas del ttano.

Exotoxina tipo A-B.

Inhibe protenas que regulan la liberacin de neurotransmisores inhibidores (glicina y cido gammaaminobutrico GABA), lo que conlleva a una actividad sinptica excitatoria carente de regulacin en las neuronas motoras que provoca parlisis espstica.

La unin de la toxina es irreversible, por lo que la recuperacin depende de la formacin de nuevas terminales axonales.

Clostridium tetani
Mecanismo de Accin Neurotoxina
Asta anterior mdula espinal (neurona motora) bloquea sinapsis inhibidora impulso nervioso liberacin contraccin mantenida parlisis espstica

Un nio con ttanos y opisttonos, como resultado de los espasmos persistentes de los msculos de la espalda. (De Emond RT, Rowland HAK, Welsby P: Colur atlas of infectious diseases, ed3, London, 1995, Wolfe.)

Ttanos
Mayor frecuencia en pases pobres, con baja cobertura de vacunas, zonas rurales
Espasmo facial y risa sardnica en un paciente con ttanos. (Tomado de Cohn J, Powderly WG: Infectious diseases, ed 2, St Louis, 2004, Mosby.)

Trismus: contraccin de maseteros (risa sardnica) Rigidez de nuca Rigidez musculatura paravertebral: opisttonos Cuadro grave, alta mortalidad

Clostridium tetani Colonia en Agar Sangre

Ttanos
Prevencin
Vacuna
Toxoide tetnico Unido a toxoide diftrico y componente pertussis, se administra a los 2, 4, 6, 18 meses y 4 aos Revacunacin slo con toxoides tetnico y diftrico en 1 ao bsico Idealmente revacunar cada 10 aos

Clostridium perfringens

Bacilo Gram (+) de gran tamao: 0,6 a 2,4x1,3 a 19 m. Ancho, inmvil, capsulado Espora oval subterminal Hbitat: suelo, intestino de animales y ser humano, piel perianal, genitales femeninos y cavidad oral (en un porcentaje variable de la poblacin)

Clostridium perfringens:
Tincin de Gram: Bacilos Gram (+)

Clostridium perfringens
Mecanismos de Patogenicidad
Invasividad Toxicidad Cpsula Enzimas Varias toxinas histotxicas 1 enterotoxina

Origen de las Endgeno infecciones Exgeno

 Patogenia
Herida contaminada con tierra o contenido intestinal Condiciones que favorecen pot. Eh (necrosis, isquemia, cpos. extraos)

Espora revierte forma vegetativa

Liberacin toxinas dao tisular

Clostridium perfringens
Patogenia
De acuerdo a las toxinas producidas, las cepas de C. perfringens se clasifican en 5 tipos: A, B, C, D, E

Tomado de: Microbiologa Mdica. Murray, Rosenthal y Pfauer, 2008.

Clostridium perfringens
Patogenia
toxina: lecitinasa, producida por todos los tipos. Destruye membranas celulares de glbulos rojos, plaquetas, leucocitos, clulas endoteliales y msculo, dao vascular. Principal responsable de mionecrosis en la gangrena gaseosa.

Infecciones por Clostridium perfringens

De piel y tejidos blandos: generalmente polimicrobianas, supuradas Infeccin intrabdominal por perforacin de vscera hueca Infeccin pelviana en la mujer Celulitis y fascetis: supuracin y formacin de gas crepitacin subcutnea difusa. Cuadro grave asociado a shock e insuf. renal, alta letalidad

Infecciones por Clostridium perfringens

Gangrena Gaseosa o mionecrosis:
Destruccin rpida dolorosa del tejido muscular asociado a signos sistmicos de toxemia Generalmente por C. perfringens, pero puede ser producido por otros Clostridium histotxicos: C. septicum, C. novyi, C. ramosum, C. fallax, C. tertium, etc. Gangrena Uterina:
Generalmente post-aborto sptico toxina Sndrome hemorragparo, IR Alta mortalidad

Clostridium perfringens: Gangrena de pared abdominal

Clostridium perfringens tipo A

Enterotoxina termolbil (superantgeno)
Vehculo: carne insuficientemente cocida (contaminada en matadero 108 -109 mo/g)

Intoxicacin alimentaria
Perodo incubacin: 8-24 horas Sntomas: dolor abdominal, diarrea acuosa sin fiebre ni nuseas ni vmito. Evolucin clnica 24-48 h Cuadro autolimitado

Clostridium perfringens tipo A

Intoxicacin alimentaria
El mantenimiento de alimentos contaminados por debajo de 60C (46C) posibilita la germinacin de las esporas que han sobrevivido a la coccin y la posterior multiplicacin bacteriana. La refrigeracin de los alimentos despus de su preparacin evita la sntesis de la enterotoxina. El recalentamiento de los alimentos destruye la enterotoxina termolbil.

Clostridium perfringens tipo C

Enteritis necrosante
Destruccin necrosante aguda del yeyuno con dolor abdominal, vmitos, diarrea sanguinolenta y peritonitis. Mortalidad 50%.

Clostridium perfringens: Cultivo en Agar Sangre

Clostridium perfringens Colonia en Agar Sangre

Clostridium botulinum

Bacilo Gram (+) grande, 2-10 m Sin cpsula, espora oval subterminal Bajo crecimiento rpido libera potente neurotoxina, toxina botulnica, es la ms potente conocida 7 tipos toxignicos:
A, B, E y F causan botulismo humano

Hbitat:
Suelos, sedimentos marinos

Clostridium botulinum
Mecanismo de Patogenicidad
Toxicidad

Mecanismos de Transmisin
Conservas caseras Contaminacin heridas: inyecciones de herona en adictos Botulismo infantil: por ingestin de miel contaminada, principalmente en lactantes < 6 meses

 Patogenia
Principal mecanismo mediante el cual se contrae botulismo es ingestin de conservas caseras (verduras, pescados, frutas contaminadas con esporas, resistentes a ebullicin) Esporas germinan en la conserva bajo condiciones de anaerobiosis y elaboran toxina que no altera caractersticas del alimento, siendo absorbida en estmago e intestino delgado

Clostridium botulinum:
Mecanismo de Accin Toxina Botulnica

Bloquea liberacin de acetilcolina en placa motora

Parlisis flccida: parlisis descendente, visin borrosa, paresia pares craneanos, boca seca, disfona, diplopia, dificultad deglucin, disartria, hipotensin, hipotona, etc.

Clostridium botulinum
1-2 dasDebilidad, mareo, visin borrosa, pupilas fijas y dilatadas, xerostoma (sequedad en la boca), estreimiento, dolor abdominal sin fiebre, parlisis flaccida y muerte. Neurotoxina producida in vivo por clulas bacterianas que colonizan intestino del lactante. Estreimiento, llanto dbil, dificultad para moverse, parlisis flaccida, insuficiencia respiratoria.

Botulismo alimentario

Botulismo del lactante

Botulismo de las heridas

Produccin de toxina en heridas contaminadas. Sntomas idnticos al Botulismo alimentario. 4 das o ms. Sntomas digestivos prominentes

Clostridium botulinum

 Bacilo Gram (+) Hbitat:

Suelo, intestino ser humano Intestino recin nacidos, 50% colonizados

Principal reservorio: hospitales y jardines infantiles

Clostridium difficile
Agente de Infecciones Intrahospitalarias
Factores de riesgo para adquirir IIH:
exposicin al agente efecto de barrera de microbiota intestinal, que permite proliferacin del agente y elaboracin de toxina in vivo Hospitalizacin prolongada Compaero de habitacin colonizado Enemas repetidos Tratamiento AB de amplio espectro Uso prolongado sondas nasogstricas Operaciones tracto gastrointestinal

 Patogenia
Perodo de incubacin desconocido

Mecanismo patogenicidad
Toxicidad Toxinas: A y B (accin citotxica)

Espectro Clnico
Variable desde diarrea leve, hasta colitis pseudomembranosa con fiebre, dolor abdominal y signos sistmicos txicos con deposiciones sanguinolentas. Cuadro puede ser muy grave Generalmente aparece durante hospitalizacin y tratamiento antimicrobiano, pero puede ser al alta una vez suspendido tratamiento

 Diagnstico
Deteccin de toxinas en deposiciones mediante tcnicas inmunolgicas, ej.: enzimoinmunoensayo

Tratamiento
Suspensin de terapia antimicrobiana En casos graves se utiliza Metronidazol o Vancomicina

Clostridium difficile Colonias en Agar Sangre

Tratamiento Infecciones por Anaerobios

Drenaje de abscesos y colecciones supuradas Reseccin de tejido necrtico Tratamiento antimicrobiano:
Idealmente tratar con Penicilina salvo donde se sospeche participacin de Bacteroides fragilis Agentes antimicrobianos resistentes a lactamasas y activos frente a anaerobios: Metronidazol, Clindamicina, Cloranfenicol Nunca utilizar Aminoglucsidos, ya que las bacterias anaerobias son naturalmente resistentes a ellos.

Diagnstico Infecciones por Anaerobios

Toma de muestra evitando microbiota normal, aspirando mediante jeringa (pus) o tomando trozo de tejido para biopsia Transporte inmediato al laboratorio Aviso previo al laboratorio para que preparen medios de anaerobiosis Siembra en medio reductor lquido: thioglicolato Tincin de Gram de la muestra

Diagnstico Infecciones por Anaerobios

Procesamiento adecuado de la muestra Siembra inmediata en medios enriquecidos con hemina y vitamina K Incubacin en anaerobiosis por tiempo prolongado (mnimo 48 hrs) Identificacin:
Aspecto de la colonia Pruebas bioqumicas Morfologa a la Tincin de Gram