Recibido el 07-09-09
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CUANTIFICACIN DE Y -CARRAGENANOS A PARTIR DE
LA MACROALGA Chondracanthus chamissoi
Salas de la Torre, Norma*1; Crdova Castaeda, Csar2; Lengua Calle, Rosa1; Anaya
Melndez, Fernando1
RESUMEN
La obtencin de -carragenano y -carragenano est en funcin de la seleccin adecuada de
algas, identificacin correcta de las fases de vida, control de parmetros como: temperatura,
pH, tiempo y concentracin de soluciones.
El proceso de extraccin se basa en la solubilidad en agua caliente e insolubilidad en solventes
orgnicos polares.
La fase gametofita es punto de partida para la produccin de -carragenano y la fase esporofita
se orienta a la produccin de -carragenano.
La capacidad gelificante (-carragenano) y el comportamiento viscosante (-carragenano)
son caractersticas que se aplican para gelificar o espesar sistemas acuosos.
La fraccin gelificante obtenida se emple en la formulacin de productos lcteos. El carragenano obtenido en laboratorio reemplaz a Lactogel FL610 y Lactogel PS451 en la
formulacin de flan y pudn obteniendo excelente consistencia, textura, sabor, color y bajo en
contenido de caloras. Puede emplearse como estabilizante en el procesamiento de nctares en
reemplazo de carboximetilcelulosa. La leche chocolatada elaborada con -carragenano
confirma que carragenanos provenientes de la fase de vida tetrasprica imparte mayor
viscosidad a las suspensiones.
Palabras clave: carragenanos, chondracanthus, polisacridos, fraccin gelificante
CUANTIFICATION OF AND -CARRAGEENAN FROM
Chondracanthus chamissoi MACROALGAE
ABSTRACT
Obtaining -carrageenan and -carrageenan is a function of the proper selection of algae,
correct identification of the stages of life, control of parameters such as temperature, pH, time,
concentration of solutions.
The extraction process is based on solubility in hot water and insolubility in polar
organicsolvents.
Gametophyte phase is a starting point for the production of -carrageenan and phase
sporophitic is geared to the production of -carrageenan.}
The gelling capability (-carrageenan) and viscosante behaviour (-carrageenan) are
characteristics that apply to gellify or thicken aqueous systems.
The gelling fraction obtained was used in the formulation of dairy products. The carrageenan obtained in the laboratory replaced Lactogel FL610 and Lactogel PS451 in the
formulation of custard pudding and excellent consistency, texture, flavor, color and low
calorie content. It can be used as a stabilizer in the processing of nectars replacing
*1
2
Facultad de Qumica e Ingeniera Qumica- UNMSM
2
Facultad de Ciencias Biolgicas- UNMSM .
Ciudad Universitaria, Av. Venezuela S/N, Lima- Per. nsalasd@[Link]
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Cuantificacion de y -carragenanos a partir de la macroalga Chondracanthus chamissoi
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carboxymethylcellulose. Chocolated milk produced with -carrageenan confirms that
carrageenan coming from the tetraspores stage of life imparts a higher viscosity to the
suspensions.
Key words: carrageenan, chondracanthus, polysaccharides, fraction gelling.
INTRODUCCIN
Las algas marinas se caracterizan por su riqueza en oligoelementos, protenas, vitaminas,
yodo, fsforo, potasio, que no son frecuentes en otros alimentos; pero su gran riqueza est en
los hidrocoloides que posee, considerados nutracuticos.
Las algas rojas contienen polisacridos complejos denominados ficocoloides1 (carragenanos)
cuyas propiedades dependen en gran medida de los cationes a los que se asocian; as pueden
formar geles firmes en presencia del catin potasio (-carragenano) o fracciones no
gelificantes (-carragenano) debido a su alto grado de sulfatacin.
Chondracanthus chamissoi, alga rodophyta que abunda en la costa sur del Pacfico de aguas
templadas (baha de San Nicols, laguna Grande, playa Mendieta, Pisco), de la que se extrae
-carragenano, -carragenano, -carragenano y -carragenano; poseen propiedades
antivirales, antilipognicas e hipolipemiantes1,2, segn diversos autores; as, Baba y
colaboradores1 lograron inhibir la replicacin de algunos virus en dextran sulfato;
posteriormente, Fuertes C.3 propone que todo polisacrido sulfatado tiene efectos similares o
superiores frente a diversos virus con una ventaja manifiesta para los polisacridos naturales.
Posteriormente se ensaya con la fraccin soluble -carragenano extrada de Chondracanthus
chamissoi en su fase femenina y tetrasprica, y se observa que posee gran actividad inhibitoria
de la replicacin viral del virus de inmunodeficiencia adquirida, VIH. La fraccin insoluble
gametofita -carragenano, muestra menos actividad inhibitoria viral2.
En el Per no existe industria procesadora de carragenanos siendo importada de Estados
Unidos de Norteamrica, Japn, Francia, Canad, Dinamarca y Chile. S existen tres empresas
que se dedican a la extraccin y comercializacin del alga fresca, refrigerada, congelada y
seca; stas son: Crosland Tcnica S.A., Peruvian Seaweeds S.R.L. y Vidal Vidal Elio.
Chondracanthus chamissoi es extrada del submareal y exportada principalmente a pases
asiticos (Japn) para su transformacin y consumo directo (Gil-Kodaka, 2002).
PARTE EXPERIMENTAL
El proceso de extraccin de carragenanos3 se basa en dos propiedades fundamentales de los
mismos:
-
Su solubilidad en agua caliente.
Su insolubilidad en solventes orgnicos polares.
Las algas Chondracanthus chamissoi con estructuras reproductivas maduras se recolectaron
del submareal en la baha de Paracas por los miembros del grupo de investigacin que
encabeza el profesor Csar Crdova, y trasladadas a planta piloto de la Facultad de Qumica e
Ingeniera Qumica para ser separadas en sus fases de vida: (tabla 1).
-
Fase gametofito femenino,
Fase gametofito masculino,
Fase tetrasprica,
Cuarto grupo (mezcla de las fases), 4to G
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Salas de la T., Norma; Crdova C., Csar; Lengua C., Rosa; Anaya M., Fernando
Etapa de preparacin de las algas.
Las algas clasificadas en sus fases de vida son lavadas para remover materia extraa, y
enjuagadas repetidamente con agua destilada. Posteriormente se somete a secado hasta peso
constante y por fases. Se procedi luego a molienda grosera.
Las algas molidas son sometidas a hidratacin con agua destilada y agitacin constante. Se
enjuag repetidamente para extraer pigmentos y sales, as tenemos las preparadas para la
extraccin.
Algas rojas (Chondracanthus chamissoi
Separacin de las algas de fase de vida
gametoftica de las esporofitas
Prueba con resorcinol-acetal
Alga de fase de vida gametofita
Secado del alga (5g aprox.)
T: 60C
Colocar algas en 400 mL de H 2O destilada
(1h)
Lavar las algas repetidamente
Alga preparada
Grfico 1. Preparacin de algas
Fuente: Elaboracin propia
Etapa de extraccin de -carragenano (Tratamiento alcalino en fro).
Para el proceso de extraccin se ha empleado el mtodo modificado de Craige y Leigh
(1978)4,5,6 siendo adaptado con algunas variantes por la responsable del proyecto.
Las algas preparadas son tratadas con hidrxido de potasio al 6% p/p con agitacin vigorosa
para promover la extraccin total de polisacrido. Debern permanecer en la solucin alcalina
durante 24 horas. Evacuar parte de la solucin alcalina dejando un remanente que cubra
solamente las algas por otro tiempo igual.
Se retiran las algas de la solucin alcalina y se observa el agua remanente, presenta un matiz
amarillo intenso.
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Seguidamente se colocan las algas en sacos de muselina o nylon de doble tramo y se sumergen
en agua destilada repetidamente y se deja por 12 horas.
Estirar las algas en forma uniforme en bandejas de acero inoxidable y llevar a congelacin por
12 horas y descongelarlas. Repetir este paso.
Colocar muestras de algas preparadas en 400 mL
de KOH al 6% p/p (24h)
Remover la solucin alcalina y colocar las algas
en sacos de muselina, enjuagar repetidamente.
Estirar las algas en bandejas uniformemente y
congelar.
Congelar y descongelar (2 veces)
Secar en estufa 42-45C, hasta peso constante
Pesar carragenano semirrefinado
Grfico 2. Tratamiento alcalino
7
Fuente: Adaptado de Cristian Bulboa Contador Universidad de Sao Paulo
Etapa de fraccionamiento .
El carragenano semirefinado es hidratado con agua destilada y dejado en reposo. Luego se
lleva a baomara a 80 C durante dos horas. Separar las fases por filtracin al vaco. La
fraccin gelificante es insoluble y es retenido en el filtro; esta fraccin es tratada con cloruro
de potasio al 0,20 % p/p y posteriormente se extiende en bandejas de acero inoxidable para
llevarla a congelacin. Congelar y descongelar (2 veces). Secar en estufa a 42 45 C por 24
horas, aproximadamente. El polvo obtenido de color blanco debe pesarse para calcular el
rendimiento de -carragenano.
Por otro lado, el filtrado (fraccin no gelificante), es tratada con 2-propanol, coagulando
completamente. Esta fraccin es extendida en bandejas de acero inoxidable y llevadas a
secado a 45 C hasta peso constante. Pesar el -carragenano para efectos de hallar el
rendimiento.
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Llevar solucin a baomara
T: 80C, t=2h
Carragenano semirefinado + 500 mL de
agua destilada, 1h
Separar la fraccin gelificante de la no
gelificante por filtracin al vaco
Carragenano insoluble
+
KCl al 0,2%
(Fraccin gelificante)
Filtrado (fraccin
gelificante)
+
2-propanol
Congelar y cortar en
tiras
Agua
Congelar y descongelar
(2 veces)
Agua
Secar en estufa a
42-45C
Gelificacin completa
Vaciado uniforme en
bandejas de acero
inoxidable
Secado a 42-45C
hasta peso constante
Pesado
Pesado
Molturado
Molturado
k-carragenano refinado
? -carragenano
refinado
Grfico 3. Fraccionamiento
7
Fuente: Adaptado de Cristian Bulboa Contador - Universidad de Sao Paulo.
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RESULTADOS
Tabla 1. Rendimiento de carragenano semi-refinado
Muestra
Peso de muestra
Peso carragenano
Rendimiento
(g)
semirrefinado(g)
(%)
1 -( )
5,000
2,6213
52,4
2 -( )
5,000
2,2923
45,8
3 -(
4,624
3,0383
65,7
5,000
1,9109
38,2
4 -(4to G)
Tabla 2. Peso de -carragenano y -carragenano
Peso (g)
carragenano
semirrefinado
2,6213
Peso (g)
k-carragenano
Peso(g)
-carragenano
1 -( )
Peso de
muestra
(g)
5,000
1,8138
0,8075
2 -( )
5,000
2,2923
1,7690
0,5233
3 -(
4,624
3,0383
0,9445
2,0938
5,000
1,9109
1,1475
0,7633
Muestra
4 -(4to G)
Tabla 3. Rendimiento de -carragenano
Peso muestra
Peso (g)
Rendimiento
(g)
k-carragenano
(%)
1 -( )
5,000
1,8138
36,2
2 -( )
5,000
1,7690
35,4
3 -(
4,624
0,9445
20,4
5,000
1,1475
23,0
Muestra
4 -(4to G)
Tabla 4. Rendimiento de -carragenano
Muestra
Peso muestra (g)
Peso (g)
Rendimiento
-carragenano
(%)
1 -( )
5,000
0,8075
16,15
2 -( )
5,000
0,5233
10,5
3 -(
4,624
2,0938
45,3
5,000
0,7633
15,2
4 -(4to G)
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Salas de la T., Norma; Crdova C., Csar; Lengua C., Rosa; Anaya M., Fernando
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DISCUSIN
Fraccin gelificante (k-carragenano) y fraccin no gelificante ( - carragenano).
La fraccin gelificante es capturada en el filtro y tratada con cloruro de potasio formndose el
gel consistente. El mecanismo de gelificacin se presenta porque las molculas de
carragenano desarrollan estructuras helicoidales que reaccionan entre s creando una red
tridimensional.
De la tabla 3 se observa que el mayor rendimiento en k-carragenano presenta la muestra que
corresponde a fase gametofito femenino (36,2 %) seguida de la muestra de fase gametofito
masculino (35,4 %).
La fraccin que pasa a travs del filtro, corresponde a la fraccin no gelificante, siendo tratada
con 2-propanol, coagulando completamente. De la tabla 4 se desprende que el mayor
rendimiento en -carragenano, corresponde a la fase esporofita (45,3% ).
La capacidad gelificante (k-carragenano) y el comportamiento viscosante (-carragenano)
son caractersticas que los hacen tiles como estabilizantes o gelificantes de sistemas acuosos.
Los carragenanos manifiestan un comportamiento reolgico ptimo y cualidades
organolpticas deseables.
Son muy amplias las aplicaciones de -carragenano como gelificante, en postres lcteos,
helados y otros:
-
Milkshake, flanes y pudines: kappa le imparte buena consistencia.
Crema de queso: kappa le da estabilidad y previene la sinresis.
Leche evaporada: Se emplea para evitar la separacin de fases.
Alimentos para infantes: kappa estabiliza la grasa y las protenas en formulaciones
que emplean leche y/o soya.
Yogurt: kappa acta como estabilizante y mejora la consistencia.
Las aplicaciones de -carragenano como viscosante, son mltiples, resaltando en la leche
chocolatada, a la que mejora su textura.
-
CONCLUSIONES
La identificacin de las fases se realiz visualmente y qumicamente mediante el mtodo
del resorcinol-acetal, que despus de baomara se observa la coloracin y se concluye:
- Matiz rojo oscuro, corresponde a alga en fase de vida gametofita.
- Matiz color rosado, se trata de alga en fase de vida esporofita.
Las unidades galactosa sulfatada en posicin C6 han sido convertidas en unidades 3,6
anhidrogalactosas mediante tratamiento alcalino.
De la tabla 1 se concluye que la fase tetrasprica presenta mayor proporcin de
carragenano semirrefinado y la mnima corresponde al 4to Grupo (mezcla de fases).
La fraccin gelificante se debe a las molculas de -carragenano que desarrollan
estructuras helicoidales que reaccionan entre s creando una red tridimensional. En la
tabla 3 observamos el rendimiento de -carragenano que alcanza al 36,2 % para la fase
gametofito femenino y 35,4 % para la fase gametofito masculino.
La fraccin no gelificante (-carragenano) alcanza el mayor rendimiento 45,3 % que
corresponde a la fase tetrasprica como se observa en la tabla 4.
La costa sur del Pacfico (Pisco) de aguas templadas posee condiciones climticas muy
especiales para el cultivo de estas algas (rodophitas) , materia prima para la produccin de
hidrocoloides de mltiples aplicaciones en la industria alimentaria, farmacutica,
odontolgica, textil, curtiembre .
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Baba y colaboradores lograron inhibir la replicacin de algunos virus en dextransulfato,
posteriormente Fuertes C.3 propone que todo polisacrido sulfatado tiene efectos
similares o superiores frente a diversos virus con una ventaja manifiesta para los
polisacridos naturales. Posteriormente se ensaya con la fraccin soluble lambda
carragenano extrada de Chondracanthus chamissoi en su fase esporoftica y se observa
que posee gran actividad inhibitoria en la replicacin viral del VIH.
AGRADECIMIENTO
Al Consejo Superior de Investigacin de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos, por
la financiacin otorgada.
1.
BIBLIOGRAFA
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Departamento de Biologia Marina. Facultad de Ciencias del Mar. Universidad Catlica
del Norte, Coquimbo, Chile.
Rev Soc Qum Per. 75 (4) 2009
