UNIVERSIDAD DE SANTIAGO DE CHILE

FACULTAD TECNOLGICA
DEPTO DE CIENCIA Y TECNOLOGA DE ALIMENTOS
MICROBIOLOGA DE LOS ALIMENTOS II
LABORATORIO DE MICROBIOLOGA DE LOS ALIMENTOS II

Recuento de
Mohos y
Levaduras.
Informe: Laboratorio N8

Nombre: Nicole Daz Rojas

Profesor Ctedra: Mg. Sc. Laura Almendrares Caldern
Profesor Laboratorio: Liliana Godoy
Encargada de Laboratorio: Sra. Carmen Castillo
Fecha de entrega: 16 de Diciembre del 2013

ndice

Introduccin2

Objetivos.....2
Revisin Bibliogrfica3
Materiales7

Diagramas de flujos
-

Recuento de mohos y levaduras...8

Tincin de mohos.9
Micro-cultivos.......9
Recuento de mohos en Cmara de Howard.....9

Resultados
-

Recuento de mohos y levaduras...10

Tincin de mohos.11
Micro-cultivos..11
Recuento de mohos en Cmara de Howard.....12

Discusin..13
Conclusin...15

Bibliografa.......16

Anexo........17

Introduccin
Los hongos son organismos eucariontes, por lo que poseen ncleos verdaderos, as como todas
las estructuras internas caractersticas de estas clulas. Poseen, adems una pared gruesa,
semejante en grosor y composicin qumica a la pared de las clulas vegetales. Sin embargo, no
son fotosintticos, no poseen hojas, tallos ni races. (Garca, 2004). Debido a sus caractersticas
morfolgicas, fisiolgicas, bioqumicas y ecolgicas, en la actualidad, los hongos se ubican en
su propio reino llamado reino funji, el cual est compuesto por organismos hetertrofos
quimiorganotrofos, es decir que requieren compuestos orgnicos para su nutricin. (Montoya,
2008). Como organismos hetertrofos pueden obtener su alimento de materia orgnica
(saprfitos), o a partir de otro ser vivo (organismo patgeno). Pueden reproducirse por medio
de procesos asexuales mediante divisin binaria o formando esporas asexuales- o a travs de
esporas sexuales.
Los hongos pueden ser unicelulares o pluricelulares. Los primeros estn formados por clulas
aisladas redondas u ovaladas, denominadas levaduras. Los pluricelulares estn constituidos por
clulas alargadas que crecen por extensin de sus extremos, tabicndose de un modo ms o
menos completo, formando largos filamentos denominados hifas que con frecuencia se
ramifican. Estos hongos, denominados mohos, al crecer forman matas de filamentos
entrelazados. (Prats, 2005).
De la amplia dispersin de los hongos en todos los estratos biticos e inertes se desprende su
fcil y frecuente aparicin como contaminantes en productos alimentarios, ya que stos,
constituyen excelentes medios para la sustentacin y reproduccin de gran nmeros de especies
fngicas. Adems, diversos factores (pH, potencial rdox, actividad de agua, humedad relativa,
temperatura, elementos nutritivos, etc.) influyen en la proliferacin fngica sobre los alimentos.
(Pascual, 2000). El significado de la contaminacin fngica de los alimentos, especialmente por
mohos, no viene slo del potencial de los hongos para deteriorarlos, (actuando como
bioconvesores que afectan tanto el aspecto, como tambin generan modificaciones qumicas
que alteran el valor nutricional, las caractersticas organolpticas y dificulta la conservacin
stos), sino tambin del potencial de muchos de ellos para producir enfermedades en humanos
y animales, como cuadros alrgicos, por la inhalacin de esporas (rinitis, asma, alveolitis,
neumonitis), intoxicaciones por la produccin de diversas sustancia nocivas, o infecciones dada
la capacidad que tienen algunas especies fngicas de colonizar, invadir y multiplicarse en
diferentes rganos causando micosis, ya sea en un husped previamente sano (hongos
patgenos primarios), o en el husped con diferentes grados de disminucin de los mecanismos
de defensa (hongos oportunistas). Pese a los peligros que representan los hongos, tambin se
obtienen numerosos beneficios, por ejemplo, en la industria de alimentos se utilizan para la
maduracin del queso roquefort y el queso azul, en las bebidas cola se utiliza la especie
Aspergillus para la fabricacin de cido ctrico, y las levaduras para producir vino y para que
leude el pan. (Campbell y Col, 2005).

Objetivos
Objetivo general:
- Determinar la presencia de Mohos y Levaduras en alimentos.
Objetivos Especficos:
- Observar las caractersticas morfolgicas de los mohos a travs de micro-cultivos y
de una tincin.
- Determinar la calidad de un producto mediante la Cmara de Howard.
2

Revisin Bibliogrfica
Las caractersticas morfolgicas de las colonias de levadura son similares a las de las bacterias,
es decir, cremosas, opacas, con un dimetro de 3 a 7mm, y en general de crecimiento
relativamente rpido (24-72 horas). Los mohos en cambio, dan lugar a colonias de mayor
tamao (10-30mm), que crecen radialmente de modo progresivo, de aspecto inconfundible,
vellosas, algodonosas o pulverulentas, de vistosos y variados colores, que deben ser observadas
en el anverso y reverso, donde puede verse si el pigmento difunde al medio. Suelen ser de
crecimiento lento (3-20 das), pero pueden llegar a invadir toda la superficie del medio de
cultivo. El color, la forma y el tamao pueden variar segn el medio de cultivo. (Prats, 2005).
Mohos:
La categora de los mohos comprende un grupo bastante heterogneo de hongos multicelulares
y con forma fibras (hifas). Superficialmente, se parecen mucho los unos a los otros, pero en
realidad hay grupos muy diferentes. Los hongos tienen una estructura muy ramificada llamada
micelio, que puede ser pequeo o lo suficientemente grande para ser observado a simple vista.
(Bylund, 2003).
Se consideran organismos que pueden alterar los alimentos, la alteracin se pone de manifiesto
con su crecimiento caracterstico, aunque a veces los degradan antes de crecer en forma visible,
algunos elaboran micotoxinas, que son sustancias txicas perjudiciales para la salud sobre todo
en aquellos alimentos de pH bajo, frutas, jugos, yogurt, etc. O los de presin atmosfrica
elevada, harinas, copos de avena, miel, leche concentrada y productos salados. En ocasiones
son tiles para la elaboracin de ciertos alimentos: por ej. Quesos, otros se usan como fuente de
vitaminas y protenas.
Por ser los mohos agentes contaminantes de productos cidos y de baja actividad de agua,
productores a veces de micotoxinas, su presencia en los alimentos deben alentar sobre la
posibilidad de presencia de micotoxinas en los mismos. (Ministerio de agricultura y ganadera,
Paraguay, 2001).
Levaduras:
Son organismos celulares de forma esfrica, elptica o cilndrica. El tamao de las clulas de
levadura vara considerablemente (2m-100m de dimetro). Se puede reproducir de manera
asexual por gemacin, como de manera sexual formando esporas, ascosporas y basidiosporas.
Dentro de los factores de crecimiento de las levaduras estn: nutrientes, humedad (pueden
crecer en medios con muy baja humedad, tales como la miel y la mermelada, puede soportar
una presin osmtica relativamente alta), acidez (pH entre 3-7,5; con un ptimo de 4,5-5,0),
temperatura (temperatura ptima 20-30C), oxgeno (anaerobias facultativas, puede crecer en
presencia o ausencia de oxgeno). (Bylund, G).
La identificacin de levaduras se sustenta inicialmente en la observacin de una serie de
caractersticas morfolgicas esenciales, sin embargo, la identificacin especifica de una cepa
precisa del concurso de pruebas fisiolgicas y bioqumicas. (Pascual, 2000).
3

Metodologa
I.

Medios de cultivos:
Agar Papa Dextrosa (PDA): Para el cultivo y recuento de hongos y levaduras en
productos lcteos, bebidas embotelladas y alimentos. Como medio preparado para la
cuenta de hongos y levaduras en lquidos. La infusin de papa como fuente de
almidones y dextrosa son la base para el crecimiento de hongos y levaduras. El bajo pH
(3,5) evita el crecimiento de las bacterias.
Agar Sabouraud Dextrosa: Es utilizado para el cultivo de mohos y levaduras patgenas
y no patgenas. pH final 5,6 0,2. El bajo pH del medio resulta favorable para el
crecimiento de los hongos y ligeramente inhibitorio para las bacterias. En caso de
requerirse un incremento en la inhibicin del crecimiento de bacterias, se recomienda
aadir agentes antimicrobianos como la gentamicina que inhibe el crecimiento de los
microorganismos Gram negativos o el cloramfenicol que tiene un amplio espectro de
accin.
Agar de Harina de Maz: Se utiliza en el cultivo y diferenciacin de las especies de
Candida basndose en las caractersticas miceliales. El Tween 80 se incorpora para
demostrar la formacin de clamidoconidias. Si se le aaden 10 gr. de glucosa puede
utilizarse en la diferenciacin de T. rubrum y T. mentagrophytes basndose en la
produccin de pigmento.

II.

Recuento de mohos y levaduras

Se entiende por recuento total de mohos y levaduras revivificables, el nmero de colonias que
se desarrollan a partir de 1 gramo o milmetro de alimento, sobre el medio de Sabouraud
dextrosa, durante 5 das a 22-25C. (Ministerio de agricultura y ganadera, Paraguay, 2001).
Los recuentos de mohos y levaduras sirven como criterio de re-contaminacin en alimentos que
han sufrido un tratamiento higienizante y que han sido sometidos a condiciones de
conservacin. (Moreno, 2000).
Calculo
El nmero de Mohos y Levaduras por gramo o mL de alimento se determina segn la siguiente
frmula:

[(

) (

)]

Ec. N1

donde:
N = nmero de colonias por ml o g de producto
= suma de todas las colonias contadas en todas las placas
= nmero de placas contadas de la menor dilucin
= nmero de placas contadas de la dilucin consecutiva.
d = dilucin de la cul fue obtenido el primer recuento.

Para todas las placas de diluciones que no presentan crecimiento o desarrollo, informar como
menor de uno por el valor recproco de la dilucin menor por g o mL.
Ec. N2
donde

, es menor dilucin.

Ec. N1 y N2 obtenidas Norma ISO 7954, PRT- 712.02-031.

III.

Tincin de Mohos

Este mtodo permite realizar la descripcin del hongo mediante la observacin de las
estructuras sin que pierda su disposicin natural y sin perturbar mucho su morfologa. Es
utilizado para el cultivo de hongos filamentosos.
Composicin Azul
Algodn
Fenol
cido lctico
Glicerina
Azul de anilina
Agua destilada

Cantidad
0,1 gr
8 ml
20 ml
0,5 gr
1 ml

Dentro de la composicin, el fenol destruye la flora acompaante y organismos; el cido lctico

conserva las estructuras fngicas y el azul algodn tie la quitina de las paredes fngicas.
IV.

Micro-cultivos

Esta tcnica permite realizar preparaciones de alta calidad en las que se conservan a la
perfeccin las estructuras y las disposiciones de las esporas. Y consiste en la siguiente:
1. Colocar un trozo redondo de papel filtro o de gasa en el fondo de una placa de Petri estril.
Colocar un par de varillas de vidrio delgadas o palillos de un aplicador cortados a la
longitud necesaria para poner encima del papel filtro y que sirva como apoyo del
portaobjeto. (Imagen 1-A).
2. Colocar un bloque o tampn de agar de harina de maz o agar dextrosa patata (Imagen 1-B)
en la superficie del portaobjetos. (Imagen 1-C).
3. Inocular los mrgenes del tapn de agar en tres o cuatro lugares con una porcin pequea
de la colonia por estudiar, usando un alambre de inoculacin recto o la punta de una aguja
de diseccin. (Imagen 1- D y E).
4. Calentar en forma suave un cubreobjetos pasndolo con rapidez a travs de la llama de un
mechero Bunsen y colocarlo de inmediato directamente en la superficie del bloque del agar
inoculado. Al calentar el cubreobjetos se produce un sellado firme entre su fondo y la
superficie de agar que se funde brevemente por el vidrio caliente.
5. Pipetear una cantidad pequea de agua en el fondo de la placa de Petri para saturar el papel
del filtro o la gasa. Colocar la tapa de la placa de Petri e incubar a temperatura ambiente (o
30C) durante 3 a 5 das.
5

6. Cuando el crecimiento parece estar maduro a simple vista (Imagen 1-F), el cubreobjetos
pueden levantarse con suavidad de la superficie del agar con un par de pinzas. Debe
tenerse cuidado para no romper el micelio que se adhiere al fondo del cubreobjetos ms de
lo necesario. (Imagen 1-G).
7. Colocar el cubreobjetos en una gota pequea del colorante azul de Lactofenol aplicada a la
superficie de un segundo portaobjeto. (Imagen 1-H). La preparacin puede conservarse
para el estudio sellando los bordes extremos del cubreobjetos con lquido de montar o
esmalte de uas claro. Esta actividad debe realizarse bajo una capucha de seguridad
biolgica.
8. Despus de retirar el cubreobjetos del bloque (o bloques) de agar, ste puede sacarse del
portaobjeto mediante el palillo de un aplicador. Esto se realiza sobre un recipiente que
contenga lquido de desinfeccin con fenol al 5% donde se dejan caer los bloques de agar.
El micelio que queda adherido a la superficie del portaobjeto original despus de haber
retirado el bloque tambin puede teirse con azul de Lactofenol y cubrirlo con un
cubreobjetos, lo cual sirve como segunda preparacin en fresco.
Imagen N1: Serie de fotografas que describen la preparacin de un micro-cultivo.

Fuente: Koneman, Diagnostico microbiolgico, 2006.

V.

Recuento de mohos en Cmara de Howard

El recuento de mohos de Howard-Stephenson se para determinar si un producto apertizado

tiene un alto nmero de hifas de mohos por campo microscpico. Si hay una cantidad excesiva
de mohos, indica pobre seleccin del producto crudo. (Carrillo, 2007). Por esto, es un buen
indicador de la calidad de productos terminados. El contenido de moho se obtiene con la
siguiente expresin:

( )

Ec. N3

Materiales
Tabla N1: Materiales utilizados en el prctico.

Material
Asa
Bistur
Cmara de Howard
Esptulas
Gradilla
Matraz Erlenmeyer
Pinza Metlica
Pipetas Graduadas
Placa de Petri
Portaobjeto
Scotch
Vasos Precipitados

Materiales
Reactivos y medio de cultivo
cido Tartrico al 10%
Agar Papa Dextrosa (PDA)
Agua Peptonada al 0,1%
Azul de Algodn con Lactofenol

Equipos
Bao de agua a 45 1 C
Contador de Colonias
Estufa de incubacin 251C
Microscopio
Refractmetro
Vortex

Fuente: Elaboracin propia, 2013.

Diagramas de Flujos
Recuento de mohos y levaduras.
Preparar diluciones
decimales de la muestra en
Agua Peptonada al 0,1%

Rotular placas

Fundir y temperar Agar

de Papa Dextrosa a
45 1C
Mezclar

Depositar 1ml. de cada

dilucin por duplicado en
placas

Homogeneizar y distribuir
en placas

Calcular la cantidad de
cido tartrico al 10%
Mezclar suavemente el
inoculo con el agar. (Evitar
mojar bordes de placa)

Incubar a 25 1C por 5
das

Esperar que solidifique

Sin invertir placa

Seleccionar las placas que

contengan entre 10 a 150
colonias.
Informar el recuento de
mohos y levaduras por
separado (gr o ml).

Contar y registrar mohos y

levaduras por separado y el
factor de dilucin propio.

 Tincin de Mohos

Colocar una gota

de Azul de Algodn
con Lactofenol en
un portaobjeto.

Tomar una
muestra con
Scotch de moho
del alimento.

Poner en
contacto la
muestra con el
portaobjeto.

Observar al
microscopio
con objetivos
10x y 40x.

Dibujar e
identificar
el moho.

Micro-cultivos

Extraer desde el
interior de la placa
el micro-cultivo de
un moho.

Observar al
microscopio con
objetivos 10x y 40x.

Dibujar e identificar
el moho.

Recuento de mohos en Cmara de Howard

Diluir un
concentrado de
tomate a
8,3 0,2% S.S.

Depositar muestra
en el centro de la
Cmara de
Howard.

Colocar el cubre
objeto eliminando
todas las burbujas
de aire.

Verificar con
Refractmetro.

Colocar en el
microscopio y
examinar cada uno
de los 25 campos.

Expresar el
resultado como
porcentaje de
campos positivos*.

*Considerando 1 campo positivo

cuando la longitud sumada hasta
3 filamentos es mayor o igual a
un sexto del dimetro del campo.

Resultados:
Recuento de mohos y levaduras
Tabla N2: Nmero de colonias presentes en los alimentos, en las diferentes diluciones.
Tipo de Hongo
Mohos
Levaduras
Dilucin
10-2
10-3
10-4
10-2
10-3
10-4
Muestra
Nmero de Colonias
T
3
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
Chuchoca
1
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
Salvado de Trigo
1
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
Harina
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
Harina integral
1
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
Fruta Confitada
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
Fuente: Elaboracin propia, 2013.

Tabla N3: Imgenes de las colonias de mohos en los distintos alimentos, dilucin 10 -2

Cultivos de mohos
Chuchoca
Salvado de Trigo

Harina Integral

Fuente: Elaboracin propia, 2013.

Tabla N4: Imgenes de morfologa de los mohos en los distintos alimentos, dilucin 10 -2.

Cultivos de mohos
Chuchoca
Salvado de Trigo

Fuente: Elaboracin propia, 2013.

10

Harina Integral

Recuento de Mohos
T
[

Chuchoca

Salvado de Trigo

Harina integral

Tincin de mohos
Tabla N5: Imgenes de estructura filamentosa de los hongos en los distintos alimentos.
Estructuras Filamentosas
Cereza
Frutilla
Limn
Betarraga

Fuente: Elaboracin propia, 2013.

Micro-cultivos
Tabla N6: Imgenes de estructura filamentosa de los mohos.

Asperguillus

Fusarium

Fuente: Elaboracin propia, 2013.

11

 Recuento de mohos en Cmara de Howard

12

Discusin
Recuento de mohos y levaduras
Como se visualiza en la tabla N2, slo hubo crecimiento de colonias de moho en dilucin 10-2,
en el t, chuchoca, salvado de trigo y harina integral. En el t se desarrollaron tres grandes
colonias de mohos contiguas de morfologa algodonada, donde el centro es de un color oscuro
ms intenso que los bordes, siendo estos difusos y las colonias abarcan ms de la mitad de la
placa. Aplicando la Ec. N2 se obtuvo 150 ufc por gramo de t. En el caso de la chuchoca, se
obtuvo solo una colonia pequea de apariencia algodonada, de color azul y con borde blanco
bien delimitado, dando 50 ufc por gramo de chuchoca. Para el salvado de trigo, se ve una
colonia pequea algodonada, de centro oscuro, tonos anaranjados, borde bien definido de color
amarillo y posee pequeos pliegues, con 50 ufc por gramo de salvado de trigo. Y finalmente
para la harina integral, se detect una colonia algodonada, de centro oscuro y bordes difusos de
color blanquecino, con 50 ufc por gramo de harina integral. (Tablas N3 y N4).
En el reglamento sanitario se indica solo la cantidad mxima de colonias de moho para harinas
y almidones, donde de un muestreo de 5 unidades, 2 de estas pueden contener una
concentracin de 103 ufc por gramo de alimento, ninguna puede superar 104 ufc por gramo de
alimento, de no ser as se debe rechazar el lote, segn esta regla nuestro alimento estara dentro
del rango aceptable.
Para cada alimento se tomaron muestras por duplicado para tener mayor certeza al calificar el
alimento como inocuo o como un posible riesgo a la salud, no obstante, segn la norma chilena
de muestreo (NCH 43.Of 61) esta debe ser representativa de todo el lote, y en el RSA se indica
que deben ser obtenidas de 5 muestras del mismo tipo de producto (con algn tipo de mtodo
de muestreo). En todos los casos anteriormente mencionados, solo una de las placas presento
crecimiento.
En el caso de las levaduras, no hubo desarrollo ni crecimiento de este tipo de hongo. Esto se
puede atribuir a 3 causas:
-

Mala manipulacin de la muestra, que se hayan eliminado por un mal

procedimiento.
Que las diluciones no fueron las indicadas.
O que las muestras realmente no estuvieran contaminadas.

Esto dado, que se dieron las condiciones ptimas para el crecimiento de este tipo de
microorganismos.
En general se puede decir, que el crecimiento fue pobre, lo que indica que los alimentos no
estaban muy contaminados, y los que presentaban mohos, era en muy bajas concentraciones, ya
que en las diluciones 10-3 y 10-4 no se desarrollaron.

13

 Tincin de mohos
Se analizaron 4 muestras, cereza, frutilla, limn y betarraga.
La cereza presentaba crecimiento de moho blanquecino algodonado. Con la tincin se logra
observar filamentos no septados y presencia de esporas. Como se observa en la Imagen N2 del
anexo, la estructura del moho encontrado en el fruto es muy similar al de rhizopus stolonifer.
En la frutilla se observan filamentos septados y presencia de esporas. Por su forma y el
deterioro superficial que presentaba el alimento (moho pulverulento) se atribuye a botrytis. En
el anexo Imagen N3 se observa una comparacin entre una parte de la imagen de la tabla N5
para la frutilla y la morfologa de botrytis.
En el limn, dado el tipo de podredumbre sufrido por el fruto (similar a imagen N4, en Anexo)
y la acidez del mismo, se puede decir que el moho presente es Penicillium digitatum, sin
embrago, no es posible apreciar su morfologa completa con esta tcnica, ya que, en la imagen
de la tabla N5, solo se visualizan las esporas, estructura superior del hongo y no as sus
micelios o algn tipo de filamento en comparacin con la imgen N5 del Anexo.
En la betarraga se observ un crecimiento cremoso, del color caracterstico del vegetal. Al
microscopio, solo se observan estructuras circulares, las que pueden ser calificadas como
esporas o levaduras, sin embargo al ser de un color tan intenso, la tincin no es representativa
por lo que, no se puede identificar como un microorganismo o tipo de hongo especfico.
Micro-cultivos
Se observ la estructura de dos mohos, Aspergillus y Fusarium. En el primero es posible
apreciar su estructura micelar, compuesta por hifas septadas, pero no su estructura caracterstica
(cabeza asperguillar), tampoco se reconoce presencia de esporas. En el caso de Fusarium se
observan su estructura micelar desordenada y conjunta, no se identifica presencia o ausencia de
septos y no se distinguen esporas.
Recuento de mohos en Cmara de Howard
Segn el artculo 946 del cdigo alimentario argentino, la dilucin en agua del concentrado de
tomate en forma de tener un extracto seco libre de cloruro de sodio de 8,37 a 9,37%, no deben
presentar ms que el 60% de campos positivos de mohos (mtodo de Howard- Stephenson). En
el reglamento sanitario de alimentos, solo se menciona la cantidad de mohos permitida en la
elaboracin de salsas de tomate pasteurizado y/o preservado, en la cual se seala que una
concentracin menor a 102 de mohos no representan un riesgo a la salud. Y segn la norma
chilena (NCH. 729-197), donde se mencionan los requisitos del concentrado de tomate, se
indica el mximo de campos positivos dependiendo de la calidad del fruto antes de ser
procesado dando 3 categoras:
- Grado 1 o extra: donde el mximo permitido es de 40% de campos positivos.
- Grado 2 o escogido: donde el mximo permitido es de 50% de campos positivos.
- Grado 3 o corriente: donde el mximo permitido es de 60% de campos positivos.

14

Considerando que las salsas no se realizan con los tomates de primera seleccin, y se obtuvo un
44% de campos positivos, se informa que la salsa de tomate analizada cumple con las
legislaciones anteriormente mencionadas.

Conclusin
Mediante este prctico fue posible realizar el recuento de mohos y levaduras en diferentes
alimentos, donde solo hubo desarrollo de colonias en cuatro de ellos, que fueron el t, la
chuchoca, la harina integral y el salvado de trigo, en la mayor dilucin (10-2), siendo el primero
el que presento mayor contaminacin. Sin embargo, la contaminacin de los alimentos era
bastante pobre, debido a que no hubo crecimiento en las diluciones menores 10 -3 y 10-4 y solo
creci en una placa y no en ambas (cultivos por duplicado). Tambin se observ las diferentes
estructuras macroscpicas desarrolladas en cada cultivo.
En el caso de la tincin se presume el tipo de moho presente dado sus caractersticas
morfolgicas observadas por microscopio y la forma de pudricin que presentaba el alimento,
al momento de tomar la muestra y adems se realiza una pequea comparacin con imgenes
expuestas en el anexo.
En los micro-cultivos solo se logra visualizar morfologa micelar, e hifas. No se distinguen
esporas ni caractersticas especficas de los mohos analizados.
Finalmente, en el caso de recuento de mohos en Cmara de Howard a la salsa de tomate, se
encontr 44% de los campos positivos, lo que indica que el alimento estaba en condiciones de
ser consumido, debido a que cumpla con todas las legislaciones anteriormente mencionadas.

15

Bibliografa
Bylund, Gsta. Manual de Industrias Lcteas. Mundi-Prensa. 1a Edicin.2003. Pg.
36-37.
Campbell, Neil y Col. Biologa. Editorial Mdica Panamericana. 7 a Edicin. 2005.
Espaa. Pg. 608-624.
Carrillo, Leonor. Manual de Microbiologa de los Alimentos. Editorial Jujuy. 1 a
Edicin. 2007. Argentina. Pg. 80-81.
Cdigo Alimentario Argentino. ANMAT. ltima actualizacin Junio 2013. Captulo
XI Alimentos Vegetales. Artculo 946. Pg. 63.
Garca, Vera. Introduccin a la Microbiologa. Editorial Universidad Estatal a
Distancia. 2a Edicin. 2004. Pg. 85-118.
Instituto de salud pblica, Gobierno de Chile. Procedimiento recuento de mohos y
levaduras en alimentos. Seccin microbiologa alimentos. NORMA ISO 7954. PRT712.02-031. 2008.Pg. 4-5.
Jimnez, Liliana. Tesis. Incremento del valor nutritivo de la pasta base para la
elaboracin de pizza, mediante la incorporacin de chocho. Universidad
tecnolgica equinoccial. Quito. 2008. Pg. 73-74.
Koneman, Elmer; et al. Diagnstico Microbiolgico. Texto y atlas en color. 6 a
Edicin. Editorial Mdica Panamericana.2006. Espaa. Pg. 1113-1115.
Ministerio de Agricultura y Ganadera. Manual de Procedimientos para el control
microbiolgico. 2001. Paraguay. Pg. 34-36.
Montoya, Hugo. Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines. Editorial
Universidad de Antioquia. 2a Edicin. 2008. Pg. 159-178.
Moreno, F. Mtodos generales de anlisis microbiolgico de los alimentos, Anlisis
de los microorganismos totales. Mxico. 2000. Pg. 2-4.
Pascual, Ma del Rosario; et al. Microbiologa Alimentaria. Metodologa analtica
para alimentos y bebidas. Editorial Daz Santos. 2 a Edicin. 2000. Espaa. Pg.
141-149.
Prats, Guillem. Microbiologa Clnica. Editorial Mdica Panamericana. 1 a Edicin.
Espaa. 2005. Pg. 83-107.
Reglamento Sanitario de los Alimentos. Ministerio de Salud. Gobierno de Chile.
ltima actualizacin Octubre 2011. Prrafo XI. Pg. 87.

16

Anexo:
Imagen N2: Estructura de Rhizopus Stolonifer.

Fuente: http://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S018533092009000200001

Imagen N3: Estructura de Botrytis.

Fuente:A)http://www.biodiversidadvirtual.org/micro/Botrytis.-img832.html, B)
Segmento de la imagen tabla N5.

Imagen N4: Podredumbre del limn.

Fuente: http://es.123rf.com/photo_9372320_limon-enmohecido-aislado-enblanco.html
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Imagen N5: Estructura de Penicillium digitatum.

Fuente: A) http://www.safeinfusiontherapy.com/cps/rde/xchg/hc-safeinfusionen-int/hs.xsl/7249.html, B)
http://www.micologia.net/gallery2/main.php?g2_itemId=60546

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