REGULACIN GENTICA EN EL OPERN lac
Daz Muiz Leonel, Monroy Reyes Berenice, Romn Macorra Ivania, Serrano vila Marahy
Palabras Clave: Regulacin gentica, Operon de la lactosa, represin catablica.
Resumen: Al haber ausencia de glucosa y presencia de otro carbohidrato la bacteria activa mecanismos si estn expresados
en sus genes que logran la utilizacin de estos, en este caso nuestra bacteria Escherichia coli tiene al opern lac que puede
hidrolizar la lactosa para poder obtener glucosa que le sirva al microorganismo como fuente de carbono, en este experimento
vimos como en presencia de lactosa el microorganismo sintetizo protenas que lograban la sntesis de esta siempre y cuando no
tuvieran glucosa de por medio. Esto se logr al incluir ONPG y este al ser un anlogo de la lactosa fue hidrolizado por la
galactosidasa.a ortonitrofenol provocando un
color
amarillo.
Todos
ellos
se transcriben en una sola molcula
Introduccin. La regulacin metablica es el
incremento o el decremento de una reaccin
enzimtica o de toda una secuencia de
reacciones
enzimticas
de
las
rutas
metablicas. La regulacin surge de la
necesidad de la clula de estar en equilibrio.
La clula logra el equilibrio entre sus
reacciones
enzimticas
a
travs,
principalmente, de la modificacin de la
actividad de las enzimas que contiene.
Uno de estos mecanismos globales de
regulacin involucra el aumento o disminucin
de la concentracin de enzima por medio de la
regulacin de la expresin gentica. El DNA de
una clula puede contener miles de genes
dependiendo de su complejidad. Sin embargo,
slo una parte de esta conformacin gentica
es requerida por la clula en todo momento
(expresin constitutiva).Existen genes con una
funcin ms especializada y cuya participacin
slo es requerida por la clula bajo ciertas
circunstancias. Por ello, todos los organismos
son capaces de regular la expresin de sus
genes. En el caso de las bacterias, la
regulacin de la expresin gentica les permite
responder metablicamente a los cambios en
su ambiente de manera rpida y precisa. 1.
Un opern se define como un conjunto de
genes que pueden regular su propia expresin
dependiendo de la presencia o ausencia de un
sustrato.
El opern de la lactosa se requiere para el
transporte y metabolismo del carbohidrato
lactosa en Escherichia coli. El opern est
formado por tres componentes: un gen
regulador, un centro de control (operador y
promotor) y los genes estructurales. El gen
regulador (el gen lacI) no se encuentra
adyacente al opern, y su producto proteico
tiene funcin de represor al unirse al operador,
localizado entre el promotor y lacZ. El operador
es una secuencia de DNA que de hecho, se
encuentra traslapada en la secuencia del
promotor. 2
Cuando el represor o protena represora est
unido al operador, la RNA polimerasa no puede
unirse al promotor y por lo tanto no hay
transcripcin de los genes estructurales.
Los genes estructurales son lacZ, lacY y lacA,
que codifican para las enzimas -galactosidasa,
permeasa y transcetilasa respectivamente.
de RNA mensajero (RNA policistrnico, es
decir, que contiene la informacin para
codificar varias protenas).3
Cuando hay lactosa presente, la bacteria toma
unas pocas molculas de sta y las convierte
en alolactosa que es capaz de unirse al
represor, impidiendo que ste se pegue al
operador. La subsecuente unin de la RNA
polimerasa
al
promotor
ocasiona
la
transcripcin de los genes
estructurales y la posterior traduccin en las
enzimas necesarias para la utilizacin de la
lactosa como fuente de carbono y energa.
Cuando se termina la lactosa, el represor se
vuelve a unir al operador bloqueando la
expresin de los genes estructurales.
La presencia o ausencia de la lactosa no es el
nico factor que influye sobre la expresin del
opern de la lactosa. Si la clula tiene una
fuente de glucosa suficiente para sus
requerimientos
energticos,
no
necesita
metabolizar lactosa an cuando est presente,
entonces lleva a cabo un proceso denominado
represin catablica, que involucra a una
segunda protena reguladora, CAP (protena
activadora de catabolito), y un segundo sitio
de unin, el sitio CAP, adyacente al promotor. 3
Fig
ura 1. Imagen de la coloracin de los
Eppendorf de microfuga con el Opern Lac, el
tubo E es el control del experimento (Sin
E.coli).
Tubo
Tono
coloracon
amarilla
de
++
++
+
+
+
+
+
Tabla 1. Intensidad de color amarillo
expresado en los tubos donde hay presencia
de la -galactosidasa.
Discusin.
Tubo A: contena solo Glucosa al 2%, al tener
solo glucosa como fuente de carbono, la
bacteria no requiere del uso de lactosa y no
debi activarse el opern lac,
sin embargo hubo coloracin amarilla lo que
Hiptesis:
Se observara una coloracin amarilla en los
tubos donde est activo el operon lac el cual al
expresar a la -galactosidasa reaccionara con
el ONPG dando como producto al ortonitrofenol
el cual es el responsable de esta coloracin la
cual depender de la cantidad de galactosidasa.
.
Objetivos.:
1)Comprender la importancia de la regulacin
gentica como mecanismo para controlar los
niveles de enzimas en la clula. 2) Conocer los
elementos que integran el opern de la
lactosa.3) Entender el funcionamiento
del
opern de la lactosa en presencia y ausencia
de este carbohidrato.
Resultados.
indica que se expres el gen z para la
expresin
de
-galactosidasa
que
metabolizo el ONPG aunque el color fue muy
tenue, esto podra deberse a que la solucin
de la glucosa estuviera contaminada con
lactosa.
El tubo B contena nicamente lactosa al
2%, al ser la nica fuente de carbono E.coli
activ el opern lac que provoco la
formacin de la -galactosidasa que
metabolizo al ONPG, por ello la coloracin
amarilla es la ms intensa de todos los
tubos. El tubo C contiene Glucosa y Lactosa,
ambas al 2%. Al haber presencia de glucosa,
este fue el primer carbohidrato que la
bacteria uso como fuente carbono, al
agotarse la glucosa, se activ el opern lac
que
provoco
la
expresin
de
galactosidasa y comenz a utilizar la
lactosa restante. Es por ello que se observa
una coloracin amarilla no mayor a la que
se tuvo en donde hubo solo lactosa (tubo B).
El Tubo D contena nicamente Glucosa al
2% por lo tanto fue el primer carbohidrato
en
metabolizarse
por
completo,
sin
embargo, se le agreg lactosa al 2% a los
7.5 minutos de incubacin, tiempo al cual la
bacteria ya haba utilizado la glucosa al
haberse agotado
y aadirle lactosa se
activ la expresin de la -galactosidasa y
se observa una coloracin amarilla menor a
las anteriores (Tubo B y C). El tubo E solo
carbohidratos y ONPG, al no haber bacteria
no habr expresin del operon lac y no se
expresara el gen Z que hidroliza al ONPG
por ende no habr coloracin en este tubo
el cual se utiliz como control.
Conclusin.
El opern lac es un gen inducible el cual se
activara nicamente si es necesario, la
glucosa es una fuente de carbono utilizada
por la mayora de las bacterias, al estar en
ausencia este carbohidrato y tener lactosa
en el medio si la bacteria tiene este opern
se inducir su activacin el cual expresara
genes (Z, Y y A) para la utilizacin de esta
fuente de carbono, se utiliza un anlogo de
la lactosa (ONPG) para evidenciar en este
caso la expresin del gen Z (
galactosidasa) la cual hidrolizara a este
anlogo a ortonitrofenol y se observara una
coloracin amarilla.
Bibliografa.
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