Mtodos coproparasitoscopicos
Los mtodos coproparasitoscopicos se dividen en:
- Cualitativos: Son aquellos que solo nos informan si hay o no formas
parasitarias en el producto estudiado.
- Cuantitativos: Nos dan a conocer numricamente cuantas formas
parasitarias estn presentes, las cuales se reportan
por gramo o mililitro de heces, segn la tcnica
que se utilice.
Los mtodos cuantitativos son de concentracin por centrifugacin, flotacin de
Ferreira, por dilucin de Stoll, tcnica de Beaver, mtodo modificado de Kato-Miura y
la tcnica de Kato-Katz.
Coproparasitoscpico cuantitativo por dilucin, mtodo de Stoll:
Se realiza utilizando probetas y pipetas calibradas y haciendo una suspensin de
material fecal con solucin de hidrxido de sodio 1:15. se toma el material para
observacin de la parte media de la probeta, se coloca en el portaobjetos se cubre, se
lee toda la preparacin, se encuentran todas las formas parasitarias y se obtiene el
factor de la tcnica, para luego
multiplicar el nmero de formas parasitarias por el factor y se reporta nmero de
huevos por mililitro de heces.
Coproparasitoscpico por frotis grueso de Kato-Miura:
La tcnica de frotis grueso de "Kato", fue desarrollada en Japn por Kato y Miura
(1954). Es adecuada para examen de heces en gran escala para todo tipo de huevos
de helmintos, pero no para larvas ni protozoarios.
Se realiza con cubreobjetos de celofn impregnado con solucin de verde de
malaquita se usa como contraste. El frotis de heces se lleva a caco con 50 mg de
materia fecal, previo filtrado a travs de una malla de alambre, para el reporte se hace
una regla de 3 para llevar a un gramo y se reporta el nmero de formas parasitarias
por gramo de heces.
A medida que se seca el frotis, se van aclarando las heces ms rpidamente que los
huevos, pero stos tambin se aclaran al final. As que hay que determinar el tiempo
ptimo de secado en diversas condiciones. En frotis excesivamente secos se forman
bolsas de gas y los huevos delicados (uncinarias) se vuelven invisibles.
Coproparasitoscpico DIRECTO
OBJETIVO
Conocer la importancia del diagnostico del laboratorio de las enfermedades
parasitarias de igual manera identificar las diferentes formas parasitarias mediante la
observacin microscpica.
FUNDAMENTO
El mtodo coproparasitscopico directo es el mas antiguo que se conoce y fue el
primero. Utilizado por Antonio Van Lewenhooke en el siglo XVIII observando
trofosoitos de Giardia Lamba.
Un examen coproparasitoscopico es el estudio de material fecal para la bsqueda e
identificacin de formas parasitarias. Puede ser cualitativa o cuantitativa.
En este estudio, el material fecal mas utilizado es el recin obtenido por expulsin
natural del paciente, ya sean bien formadas o ecuaciones diminutas en consistencia
con moco o sangre. Este mtodo es de gran utilidad para la deteccin en fresco de
trofozoitos de Entamoeba histolitica, Giardia lamblia y Balantidium coli. En la
suspensin teida con lugol se puede identificar con facilidad quistes de protozoos.
Este examen en fresco es sencillo, rpido y econmico, pues requiere poco material.
Es excelente para la bsqueda de trofozoitos y protozoos. Es eficaz para la bsqueda
e identificacin, de quistes, huevos y larvas.
Sin embargo la muestra utilizada es muy pequea y poco representativa.
Los montajes en solucin salina tienen la ventaja de que retienen la movilidad de los
trofozoitos sin embargo es difcil la observacin de las estructuras internas pues con
frecuencia son poco definidas. El yodo se emplea para detectar las estructuras
internas de los parsitos presentes, pero inmviles trofozoitos.
FROTIS FRESCO
Es un mtodo rpido pero poco seguro. Tiene posibilidad de falsos negativos, por lo
que es necesario repetir. Permite observar la motilidad de los microorganismos,
Amibas y otros flagelados. Detecta quistes y huevos de helmintos. Precisa una
concentracin.
MATERIAL
Portaobjetos
Cubreobjetos
Pipeta Pasteur
Vaso de precipitado
Microscpico
SUSTANCIAS
Sol. fisiolgica al 0.95
[Link] yodo.
MUESTRA BIOLOGICA
Heces fecales frescas.
PROCEDIMIENTO
1.- Sobre un portaobjetos se coloca una pequea porcin de material fecal.
2.- Se coloca un gota de solucin fisiolgica.
3.- Se coloca el cubreobjetos.
4.- Observamos sin teir.
5.- En otro portaobjetos limpio se repite el mismo procedimiento pero ahora se tien
con la tincin de yodo.
6.- La observacin se hace siempre con el objetivo seco dbil 10x y con poca luz, al
encontrarse con estructuras sospechosas, se observa con el objetivo seco fuerte 40x.
NOTA
Es importante que los frotis no sean densos, si no transparentes. Y que se haga la
observacin con diferentes muestras.
Tras la observacin de los trofozoitos se utiliza la tincin de yodo que tie quistes y
destaca sus de talles. Los trofozoitos mueren y se hacen identificables.
OBSERVACIONES
Con la solucin salina no era muy claro nuestro campo y no logrbamos tener un
diagnostico exacto.
Despus colocamos nuestro frotis teido totalmente cambio nuestro campo y pudimos
observar y dar los resultados correctos.
Restos de alimentos como grasa y cristales de cidos grasos.
MUESTRA METODO DIRECTO
Heces Efectivo para la bsqueda de trofozoitos mviles o larvas
SOLUCION FISIOLOGICA LUGOL
Mtodo Coproparasitoscpico - Tcnica de
flotacin
Esta tcnica tiene como fundamento utilizar soluciones con pesos especficos mayores
que el agua (1,200 -- 1,300) en donde los huevos de helmintos y huevos de algunos
artrpodos. Las soluciones utilizadas en esta tcnica pueden ser [Link].(solucin
saturada de cloruro de sodio), S.A.S. (solucin azucarada saturada), soluciones de
sulfato de zinc o magnesia entre otras, en esta prctica utilizaremos la S.A.S.
Procedimiento:
Se colocan en el mortero de 8 a 15 gramos de heces (tratar de no exceder en
cantidad), se agregan una gotas de solucin glucosada (S.A.S.) se mancera hasta
obtener una pasta.
Vaciamos en el embudo y con el colador al tubo de ensayo.
Dejamos en el tubo de ensayo una cpula de la muestra.
Aplicamos el cubre objetos sobre la boca del tubo de ensayo.
Esperamos de 10 a 15 min.
Retiramos el cubre objetos, observamos que se adhiri a l una capa de la muestra,
despus lo colocamos sobre un porta objetos y observamos al microscopio la muestra.
De aqu lo sake por si te lo pide:
Dr. Cabello Romero. Microbiologa y Parasitologa. Editorial mdica panamericana.
Primera edicin 1993.
